CN115227592A - 抑菌剂组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种抑菌剂组合物，包括桃金娘酮化合物、厚朴酚、柠檬酸和柠檬酸钠。本发明还涉及所述抑菌剂组合物在抑菌或防腐中的应用。

Description

抑菌剂组合物及其应用
技术领域
本发明涉及杀菌防腐领域，特别是涉及一种抑菌剂组合物及其应用。
背景技术
桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)是桃金娘科桃金娘属植物，又称捻子、山捻、岗捻等，主要分布于中国的南部和东南部，尤其盛产于岭南地区，为酸性土指示植物。桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)的根、茎、叶、果均可入药或食用，具有清热、解毒、活血、消炎、止痛、消食、健胃等作用。桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)的根、茎、叶的提取物中均含有桃金娘酮化合物及其衍生物。桃金娘酮化合物及其衍生物具有良好的抗菌和抑菌性能属于现有的知识，例如，在中国专利CN 104761565 A中公开了桃金娘酮化合物及其在制备抗菌药物中的应用，在中国专利CN108752305 A中公开了闭环桃金娘酮化合物类似物及在抗菌药物中的应用，在中国专利CN 105859537 A中公开了开环桃金娘酮化合物类似物及其制备方法和在抗菌药物中的应用。
桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)根、茎、叶提取物，尤其是叶的提取物富含桃金娘酮化合物及其衍生物因此有很高的抗菌抗炎活性。桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶的提取物对多种常见细菌具有很强的抑制活性，具有广谱、高效、低耐药的突出效果。
桃金娘酮化合物作为抑菌剂应用于食品、化妆品、皮肤护理、口腔护理等诸多领域。将桃金娘酮化合物应用于日化及食品等领域时存在的问题包括：1.有抗菌性能的桃金娘酮化合物需要预先充分溶解于适当的表面活性物质中组合成均一组合物再添加入产品体系中，因此出于产品体系的分散稳定性考虑，产品体系中桃金娘酮化合物的含量偏低，因此对于抑菌效果会产生负面影响；2.为了延长产品体系的存储稳定性，往往还需要添加防腐剂来是抑制微生物滋生、繁殖，但这些防腐剂存在一定的安全或者刺激性问题。
术语说明
需要说明的是，本发明中所记载的“桃金娘酮化合物”来源于桃金娘科桃金娘属植物桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶的提取物。
需要说明的是，本发明中所记载的“桃金娘酮化合物”包括多种酰基间苯三酚化合物中的一种或几种，多种酰基间苯三酚化合物包括Rhodomyrtone A(C26H34O6)、TomentosoneA(C41H52O9)、Tomentosone B(C41H52O9)、Tomentosone C(C38H48O8)、Tomentodione S(C28H32O5)、Tomentodione T(C28H32O5)、Rhodomyrtosone A(C26H32O7)、Rhodomyrtosone B(C26H34O6)、Rhodomyrtosone C(C41H54O8)、Rhodomyrtosone E(C30H34O6)、Rhodomyrtosone F(C27H36O6)、Rhodomyrtosone G(C26H32O7)、Rhodomyrtosone H(C26H34O6)、Rhodomyrtosone I(C28H30O6)和Rhodomyrtosone C(C41H54O8)。
需要说明的是，本发明中记载的“防腐剂”指应用于食品、化妆品、护理产品中以抵御对抗潜在危害的微生物生长的组分，现有的防腐剂可举例对羟基苯甲酸的烷基酯、乙内酰脲衍生物、丙酸盐及各种季铵盐化合物；特别的，应用于化妆品中的防腐剂可举例苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、咪唑烷基脲、脱氢乙酸钠和苯甲醇。
发明内容
针对现有技术中存在的技术问题，本发明提供一种包含桃金娘酮化合物的抑菌剂组合物，该抑菌剂组合物可应用于食品、化妆品、皮肤护理、口腔护理等诸多领域。该抑菌剂组合物具有良好的抗菌活性，特别是对大肠杆菌(Escherichia coli ATCC 8739)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ATCC 6538)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosaATCC 9027)、痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes ATCC 6919)、白假丝酵母(Candidaalbicans ATCC 10231)和黑曲霉(Aspergillus brasilienes ATCC 16404)具有较强的抑制活性，并且该抑菌剂组合物能完全代替或部分代替防腐剂在化妆品或食品中使用。
本发明的第一个目的是提供一种抑菌剂组合物，其包括桃金娘酮化合物、厚朴酚、柠檬酸和柠檬酸钠。
其中柠檬酸为pH调节剂，柠檬酸钠为缓冲剂，该抑菌剂组合物应用于产品体系中时，需要通过柠檬酸和柠檬酸钠将产品体系的pH调整至5.5-7.0，优选的，将体系的pH调整至6.2-6.8。产品体系的pH处于5.5-7.0的范围内时，桃金娘酮化合物和厚朴酚表现出较好的协同抗菌活性以及广谱抑菌的有益效果；当产品体系的pH低于5.5时，桃金娘酮化合物和厚朴酚的组合对于细菌(例如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等)的抑制活性呈现减弱的趋势；当产品体系的pH大于7.0时，桃金娘酮化合物和厚朴酚的组合对于霉菌和酵母菌的抑制活性呈现减弱的趋势。柠檬酸和柠檬酸钠的组合在日用品、化妆品、食品上的适用性广，并且柠檬酸和柠檬酸钠的组合对于桃金娘酮化合物和厚朴酚的组合的有益效果不会产生影响，发明人意外发现，桃金娘酮化合物、厚朴酚、柠檬酸和柠檬酸钠的组合具有更强的抑菌能力的同时具有更好的抑制皮肤色素形成与沉着的效果。因此所述抑菌剂组合物应用于化妆品时可同时作为皮肤调理剂(或美白剂)、抑菌剂和防腐剂。
在一实施例中，所述桃金娘酮化合物的制备方法包括：将干燥的桃金娘科桃金娘属植物桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶粉碎后，用体积分数95％乙醇水溶液提取，再减压下旋蒸得到乙醇提取物，按质量比1:1将乙醇提取物悬浮于水中，用有机溶剂(例如氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、丙酮、正己烷、二氯甲烷等)萃取，萃取部分经溶剂旋干得到所述桃金娘酮化合物。
在一实施例中，所述桃金娘酮化合物的制备方法包括：将干燥的桃金娘科桃金娘属植物桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶粉碎后，加入至体积分数90％乙醇水溶液中浸泡，然后55℃回流提取，趁热过滤，过滤后减压浓缩得浸膏，将浸膏用乙酸乙酯萃取，萃取部分经溶剂旋干得到所述桃金娘酮化合物。
在一实施例中，所述所述桃金娘酮化合物的制备方法包括：将干燥的桃金娘科桃金娘属植物桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶粉碎后，用体积分数92％乙醇水溶液浸提3次，每次5天，将提取液合并后减压浓缩得浸膏，浸膏依次用正己烷，乙酸乙酯萃取三次，减压浓缩得正己烷部分、乙酸乙酯部分和水部分，将正己烷部分和乙酸乙酯部分合并后经溶剂旋干得到所述桃金娘酮化合物。
在一实施例中，抑菌剂组合物中的桃金娘酮化合物和厚朴酚的质量比为1：1-100、优选的质量比为1：1-10，进一步优选的质量比为1:1-5。
本发明的第二个目的是提供上述抑菌剂组合物在抑菌和防腐中的应用，如在化妆品和食品中应用。
本发明提供的抑菌剂组合物中桃金娘酮化合物和厚朴酚具有协同抑菌作用，使得产品体系中尽管桃金娘酮化合物的含量和厚朴酚的含量均偏低但依然具有优异的抗菌活性，这从产品的成本角度考虑也是有益的。本发明提供的抑菌剂组合物中通过柠檬酸和柠檬酸钠的组合将产品体系的pH调整至5.5-7.0，不仅能进一步提升抑菌剂组合物的抑菌作用，并且有利于提升桃金娘酮化合物和厚朴酚产品在产品体系中的稳定性。抑菌剂组合物添加入产品体系中后，基于产品的总重量，当桃金娘酮化合物的含量和厚朴酚的含量均不小于0.001％时，产品可以优异的通过防腐挑战实验，桃金娘酮化合物和厚朴酚的组合表现出的防腐能力基本与现有的防腐剂相当。
下面结合具体实施例进行说明。
具体实施方式
应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的药材原料、试剂材料等，如无特殊说明，均为市售购买产品。
下述实施例中，所述桃金娘酮化合物从桃金娘科桃金娘属植物桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶的提取物中分离获得，所述桃金娘科桃金娘属植物桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶采自于我国的岭南地区。
桃金娘酮化合物的制备方法包括：
S1、对干燥后的桃金娘科桃金娘属植物桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶进行充分粉粹得到粉碎材料，再将粉碎材料置于体积分数95％乙醇水溶液中提取3次(每1kg的粉碎材料对应2L的乙醇水溶液)，合并的提取溶液在减压下旋蒸，得到乙醇提取物；
S2、将乙醇提取物悬浮于水中(乙醇提取物和水的质量比为1：1)，依次用正己烷、乙酸乙酯萃取三次，减压浓缩得正己烷部分、乙酸乙酯部分和水部分；
S3、乙酸乙酯部分经正相硅胶柱层析(200-300目)，以正己烷-乙酸乙酯为洗脱剂，从体积比10:1-0:1梯度洗脱，经TLC薄层层析检测合并主点相同的流分，再经过MCI柱层析脱去色素即可得到所述桃金娘酮化合物。
实施例1
一种抑菌剂组合物，其包括桃金娘酮化合物、厚朴酚、柠檬酸和柠檬酸钠。所述桃金娘酮化合物和厚朴酚的质量比为1:1。
实施例2
一种抑菌剂组合物，其包括桃金娘酮化合物、厚朴酚、柠檬酸和柠檬酸钠。所述桃金娘酮化合物和厚朴酚的质量比为1:10。
实施例3
一种抑菌剂组合物，其包括桃金娘酮化合物、厚朴酚、柠檬酸和柠檬酸钠。所述桃金娘酮化合物和厚朴酚的质量比为1:5
实施例4
一种口腔护理液，包含实施例1提供的抑菌剂组合物。制备所述口腔护理液的过程中，需要预先使用聚乙二醇400作为表面活性剂将所述抑菌剂组合物中的桃金娘酮化合物和厚朴酚溶解成均一的溶液状态，从而具有良好的水溶性(水分散性)。使用抑菌剂组合物中的柠檬酸和柠檬酸钠将所述口腔护理液的pH调整至6.5。基于所述口腔护理液的重量，所述口腔护理液含有0.1wt％的桃金娘酮化合物和0.1wt％的厚朴酚，所述口腔护理液具有抑菌、抗炎、减轻口臭的有益效果，并且所述口腔护理液中不需要添加额外的防腐剂依然可以优异的通过防腐挑战。
实施例5
一种洗发剂，包含实施例2提供的抑菌剂组合物。制备所述洗发剂的过程中，需要预先使用聚氧乙烯(20)山梨醇酐单月桂酸酯作为表面活性剂将所述抑菌剂组合物中的桃金娘酮化合物和厚朴酚溶解成均一的溶液状态。使用抑菌剂组合物中的柠檬酸和柠檬酸钠将所述洗发剂的pH调整至6.8。基于所述洗发剂的重量，所述洗发剂含有0.02wt％的桃金娘酮化合物和0.2wt％的厚朴酚，所述洗发剂具有优异的清洁能力和抑菌能力，无需添加其它成分即可用作具有抑菌去头屑功效的洗发剂，并且所述洗发剂能够大大延长头发的清洁时长。所述洗发剂中不需要添加额外的防腐剂依然可以优异的通过防腐挑战。
实施例6
一种乳液型的化妆品，包含实施例3提供的抑菌剂组合物。更具体的，基于所述化妆品的重量，所述化妆品包含：
3wt％的玉米谷蛋白氨基酸类；
0.5wt％的吐温20；
10wt％的双丙甘醇；
10wt％的甘油三(乙基己酸)酯；
0.5wt％的桃金娘酮化合物；
2.5wt％的厚朴酚；
0.05wt％的柠檬酸0.05
3.45wt％的柠檬酸钠；
0.4wt％的丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物；
0.4wt％的异十六烷；
0.2wt％的聚山梨醇酯-80；
0.25wt％的1，2-己二醇；
0.15wt％的1，3-丙二醇；
余量为去离子水。
使用抑菌剂组合物中的柠檬酸和柠檬酸钠将所述化妆品的pH调整至6.2。制备所述化妆品的过程中，需要预先使用甘油三(乙基己酸)酯作为表面活性剂将所述抑菌剂组合物中的桃金娘酮化合物和厚朴酚溶解成均一的溶液状态。所述化妆品中的双丙甘醇、1，2-己二醇和1，3-丙二醇的组合同时作为保湿剂和助溶剂，双丙甘醇、1，2-己二醇和1，3-丙二醇的组合能使得添加了抑菌剂组合物的所述化妆品具备热力学稳定性。所述化妆品具有抑菌、美白的有益效果，所述化妆品中不需要添加额外的防腐剂(例如辛酰羟肟酸、对羟基苯乙酮等)依然可以优异的通过防腐挑战。
为进一步研究本发明提供的抑菌剂组合物的有益效果，进行如下检测。
[抑菌活性检测]
受试物：
a)桃金娘酮化合物和厚朴酚按质量比1:1组成的受试物a；
b)受试物b为桃金娘酮化合物(与受试物a中的桃金娘酮化合物的具体组成相同)；
c)受试物c为厚朴酚；
d)受试物d为万古霉素(vancomycin)，白色固体，为广谱抗菌素。
本发明选取灵敏度较高可定量地检测药物体外抑菌活性的微量稀释法，即用最小抑菌浓度(MIC)评价受试物的抑菌活性。采用刃天青显色法来测定受试物的最低抑菌浓度(MIC)。刃天青是一种蓝色非荧光染料，活细胞中的多种还原酶可将其还原成粉红色的荧光染料，而无活性的细胞不具代谢能力无法将其还原。该方法通过菌液颜色的改变反映提取物抑菌的能力——将指示剂、受试物与菌液共培养一定时间后，若菌液变为红色则表明化合物没有抑菌活性，维持蓝色则具有抑菌活性。本实验将使用96孔板稀释梯度法，同时测定多种受试物的最低抑菌浓度(MIC)。
首先将7.5mL的指示剂溶液(100μg/mL的刃天青水溶液)与5mL的待测菌溶液(108CFU/mL)混匀，并向第1至第8列的所有测试孔中各加入100μL混合菌液。然后将100μL待测的受试物的DMSO溶液(16-500μg/mL)依次加入到第一列的各个板孔中，均匀混合后取出100μL的溶液转移到第二列相应的板孔中，并用同样的方法倍增稀释到第8列。最后，将加好样品的孔板放入到恒温培养箱，37℃培养10-12h。菌液变红色为无抑菌活性，蓝色为有抑菌活性，菌液维持蓝色的最低稀释浓度被认为是待测受试物的最低抑菌浓度(MIC)，每个受试物做2组并重复测定3次。
本次检测对应的细菌包括金黄色葡萄球菌(ATCC 29213)、铜绿假单胞菌(ATCC9027)、大肠杆菌(ATCC 8739)、痤疮丙酸杆菌(ATCC 6919)、白假丝酵母(ATCC 10231)和黑曲霉(ATCC 16404)。将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌和痤疮丙酸杆菌这些细菌分别接种在MH肉汤培养基，在37℃下培养12h；将白假丝酵母和黑曲霉接种在马丁培养基，在30℃下培养3d。用MH肉汤培养基将以上微生物培养物分别稀释成浓度为108CFU/mL的所述待测菌溶液。
检测结果如表1所示。根据表1检测结果显示，受试物a对以大肠杆菌、铜绿假单胞菌为代表的革兰氏阴性菌、金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌为代表的革兰氏阳性菌、以白假丝酵母和黑曲霉为代表的真菌都有一定的抑菌效果，特别是对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑菌效果显著。受试物a相对于受试物b和受试物c来说抑菌活性提高显著。
表1不同受试物的抑菌活性(单位：μg/mL)
菌株 受试物a 受试物b 受试物c 受试物d
金黄色葡萄球菌 0.5 0.6 1 0.5
铜绿假单胞菌 0.6 1 10 1
大肠杆菌 5 40 20 0.6
痤疮丙酸杆菌 2 20 15 1.2
白假丝酵母 1.8 40 9 1.5
黑曲霉 4 30 20 1.5
[协同抑菌作用研究]
受试物：
a)桃金娘酮化合物和厚朴酚按质量比1:1组成的受试物a。
使用Bliss独立模型体外研究受试物a对大肠杆菌(ATCC 8739)、金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、铜绿假单胞菌(ATCC 9027)、痤疮丙酸杆菌(ATCC 6919)、白假丝酵母(ATCC10231)和黑曲霉(ATCC 16404)的协同作用。以受试物a中的桃金娘酮化合物和厚朴酚协同作用抗大肠杆菌为例：将大肠杆菌接种在MH肉汤培养基，在37℃下培养12h。用MH肉汤培养基将以上大肠杆菌培养物稀释成浓度为108CFU/mL的菌悬液；在96孔板中每孔加入100μL上述菌悬液，每孔分别添加亚抑制浓度的桃金娘酮化合物(0.5MIC＝20μg/mL)、亚抑制浓度的厚朴酚(0.5MIC＝10μg/mL)、同时添加亚抑制浓度的桃金娘酮化合物和厚朴酚过夜培养12h，检测OD值。
协同作用(S)使用下式计算：S＝(OD1/OD0)(OD2/OD0)-(OD12/OD0)。参数OD12指同时存在桃金娘酮化合物和厚朴酚的情况下细菌的光密度值；参数OD1指仅存在桃金娘酮化合物的情况下细菌的光密度值；参数OD2指仅存在厚朴酚的情况下细菌的光密度值；参数OD0是指在不存在药物的情况下的细菌的光密度值。协同度(S)值对应于以下截止值：零表示中性，高于零(正值)表示协同作用，低于零(负值)表示拮抗作用。具有较高正值的组合代表高度的协同作用。检测结果如表2所示。
表2桃金娘酮化合物和厚朴酚的协同度
菌株 协同度(S)
金黄色葡萄球菌 0.01
铜绿假单胞菌 0.02
大肠杆菌 0.09
痤疮丙酸杆菌 0.06
白假丝酵母 0.07
黑曲霉 0.07
根据表2结果显示，桃金娘酮化合物和厚朴酚之间具有一定的协同抑菌作用，特别是对大肠杆菌、、痤疮丙酸杆菌、白假丝酵母和黑曲霉的协同作用S值处于0.06-0.09，表明协同抑菌效果优。
[代替防腐剂的应用检测]
受试物：
a)受试物a为实施例4提供的口腔护理液；
b)受试物b为实施例5提供的洗发剂；
c)受试物c为实施例6提供的化妆品。
参考公知的化妆品、盥洗用品与香料协会(CTFA)及美国药典的微生物挑战性实验方法进行防腐挑战性实验。
首先，取一定量的受试物，再分别加入混合细菌(对数生长期的大肠杆菌菌液、金黄色葡萄球菌菌液、铜绿假单胞菌菌液和痤疮丙酸杆菌菌液按体积比1：1：1：1混合)和真菌(白假丝酵母和黑曲霉)菌悬液使得每个受试物最终含菌量分别为1-5×107CFU/g细菌和1-5×105CFU/g真菌。然后充分混匀，置于28℃下培养。在接菌的0、7天、14天和28天按照化妆品和香料香精协会(CTFA)推荐的实验方法测定细菌总数和真菌总数，以判断受试物的防腐效能。其判断标准为：当每个受试物接种一次接菌后，在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0.1％，之后逐渐减少，在28天无菌生长。则防腐剂有效，通过检测；否则，防腐剂无效，通不过检测。
检测结果如表3所示。根据表3数据，表明将本发明提供的抑菌剂组合物应用于日用品和化妆品中时，日用品和化妆品可以在不需要额外添加防腐剂的情况下优异的通过防腐挑战，本发明提供的抑菌剂组合物的防腐能力基本与现有的防腐剂相当，本发明提供的抑菌剂组合物能同时作为抑菌剂和防腐剂以及皮肤调理剂，这从日用品或化妆品的成本角度考虑也是有益的。
表3.防腐挑战性实验结果
Figure BDA0003632745010000131
[pH对防腐效果的影响]
受试物：
a)受试物a为实施例6提供的化妆品，pH为6.2；
b)受试物b为化妆品，受试物b和受试物a的区别仅仅在于：调整抑菌剂组合物中柠檬酸和柠檬酸钠的含量使得化妆品的pH为5.5；
c)受试物c为化妆品，受试物c和受试物a的区别仅仅在于：调整抑菌剂组合物中柠檬酸和柠檬酸钠的含量使得化妆品的pH为6.8；
d)受试物d为化妆品，受试物d和受试物a的区别仅仅在于：调整抑菌剂组合物中柠檬酸和柠檬酸钠的含量使得化妆品的pH为7.0。
首先，取一定量的受试物，再分别加入混合细菌(对数生长期的大肠杆菌菌液、金黄色葡萄球菌菌液、铜绿假单胞菌菌液和痤疮丙酸杆菌菌液按体积比1：1：1：1混合)和真菌(白假丝酵母和黑曲霉)菌悬液使得每个受试物最终含菌量分别为1-5×107CFU/g细菌和1-5×105CFU/g真菌。然后充分混匀，置于28℃下培养。在接菌的0、7天、14天和28天按照化妆品和香料香精协会(CTFA)推荐的实验方法测定细菌总数和真菌总数，以判断受试物的防腐效能。其判断标准为：当每个受试物接种一次接菌后，在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0.1％，之后逐渐减少，在28天无菌生长。则防腐剂有效，通过检测；否则，防腐剂无效，通不过检测。
检测结果如表4所示。根据表4数据，本发明提供的抑菌剂组合物在产品体系的pH处于5.5-7.0的范围内时，所述抑菌剂组合物的防腐能力基本与现有的防腐剂相当，含有抑菌剂组合物的化妆品在不需要额外添加防腐剂的情况下优异的通过防腐挑战。
表4pH对防腐效果的影响检测
Figure BDA0003632745010000141
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种抑菌剂组合物，其特征在于，包括桃金娘酮化合物、厚朴酚、柠檬酸和柠檬酸钠。
2.根据权利要求1所述的抑菌剂组合物，其特征在于，所述桃金娘酮化合物和所述厚朴酚的质量比为1：1-100。
3.根据权利要求2所述的抑菌剂组合物，其特征在于，所述桃金娘酮化合物和所述厚朴酚的质量比为1：1-10。
4.根据权利要求3所述的抑菌剂组合物，其特征在于，所述桃金娘酮化合物的制备方法包括：将干燥的桃金娘科桃金娘属植物桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶粉碎后，用体积分数95％乙醇水溶液提取，再减压下旋蒸得到乙醇提取物，按质量比1:1将乙醇提取物悬浮于水中，用有机溶剂萃取，萃取部分经溶剂旋干得到所述桃金娘酮化合物。
5.根据权利要求3所述的抑菌剂组合物，其特征在于，所述桃金娘酮化合物的制备方法包括：将干燥的桃金娘科桃金娘属植物桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶粉碎后，加入至体积分数90％乙醇水溶液中浸泡，然后55℃回流提取，趁热过滤，过滤后减压浓缩得浸膏，将浸膏用乙酸乙酯萃取，萃取部分经溶剂旋干得到所述桃金娘酮化合物。
6.根据权利要求3所述的抑菌剂组合物，其特征在于，所述桃金娘酮化合物的制备方法包括：将干燥的桃金娘科桃金娘属植物桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶粉碎后，用体积分数92％乙醇水溶液浸提3次，每次5天，将提取液合并后减压浓缩得浸膏，浸膏依次用正己烷，乙酸乙酯萃取三次，减压浓缩得正己烷部分、乙酸乙酯部分和水部分，将正己烷部分、乙酸乙酯部分合并后经溶剂旋干得到所述桃金娘酮化合物。
7.根据权利要求3所述的抑菌剂组合物，其特征在于，所述桃金娘酮化合物的制备方法包括：对干燥后的桃金娘科桃金娘属植物桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)叶进行充分粉粹得到粉碎材料，再将粉碎材料置于体积分数95％乙醇水溶液中提取3次，合并的提取溶液在减压下旋蒸，得到乙醇提取物；将乙醇提取物悬浮于水中，依次用正己烷、乙酸乙酯萃取三次，减压浓缩得正己烷部分、乙酸乙酯部分和水部分；乙酸乙酯部分经正相硅胶柱层析，以正己烷-乙酸乙酯为洗脱剂，从体积比10:1-0:1梯度洗脱，经TLC薄层层析检测合并主点相同的流分，再经过MCI柱层析脱去色素即可得到所述桃金娘酮化合物。
8.权利要求1-7任一项权利要求所述的抑菌剂组合物在抑菌或防腐中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，是在化妆品中应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述化妆品包含：
3wt％的玉米谷蛋白氨基酸类；
0.5wt％的吐温20；
10wt％的双丙甘醇；
10wt％的甘油三(乙基己酸)酯；
0.5wt％的桃金娘酮化合物；
2.5wt％的厚朴酚；
0.05wt％的柠檬酸0.05
3.45wt％的柠檬酸钠；
0.4wt％的丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物；
0.4wt％的异十六烷；
0.2wt％的聚山梨醇酯-80；
0.25wt％的1，2-己二醇；
0.15wt％的1，3-丙二醇；
余量为去离子水。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115626906A (zh) * 2022-10-25 2023-01-20 中国科学院华南植物园 一种高纯度桃金娘酮的工业化提取方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014131191A1 (en) * 2013-03-01 2014-09-04 Johnson & Johnson Consumer Companies, Inc. A composition containing honokiol and/or magnolol and uses thereof
CN104761565A (zh) * 2015-04-16 2015-07-08 中国科学院华南植物园 桃金娘酮化合物及其在制备抗菌药物中的应用
US20190201311A1 (en) * 2016-08-19 2019-07-04 Conopco, Inc., D/B/A Unilever An antimicrobial composition
CN112933001A (zh) * 2019-12-10 2021-06-11 妙弋(广州)贸易有限公司 桃金娘提取物与表面活性物质的组合物

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014131191A1 (en) * 2013-03-01 2014-09-04 Johnson & Johnson Consumer Companies, Inc. A composition containing honokiol and/or magnolol and uses thereof
CN104761565A (zh) * 2015-04-16 2015-07-08 中国科学院华南植物园 桃金娘酮化合物及其在制备抗菌药物中的应用
US20190201311A1 (en) * 2016-08-19 2019-07-04 Conopco, Inc., D/B/A Unilever An antimicrobial composition
CN112933001A (zh) * 2019-12-10 2021-06-11 妙弋(广州)贸易有限公司 桃金娘提取物与表面活性物质的组合物

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115626906A (zh) * 2022-10-25 2023-01-20 中国科学院华南植物园 一种高纯度桃金娘酮的工业化提取方法
CN115626906B (zh) * 2022-10-25 2023-08-22 中国科学院华南植物园 一种高纯度桃金娘酮的工业化提取方法

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