CN106138563A - 一种治疗膀胱癌的药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种治疗膀胱癌的药物组合物及其制备方法，本发明药物组合物是以省沽油、鹅蛋壳、环木菠萝烷醇、藤黄双黄酮为原料药，配比而成，可按常规制剂工艺制成各种剂型，治疗膀胱癌疗效显著。

Description

一种治疗膀胱癌的药物组合物
技术领域
本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种治疗膀胱癌的药物组合物及其制备方法。
背景技术
膀胱癌是泌尿外科最为常见的肿瘤之一，占全身癌症发病率5﹪，恶性程度较高预后较差。多中心性发生和高发病率是该疾病的主要病程特征，治疗后如果复发则呈逐级升高态势。其病因尚不明确，与多种因素有关并且呈多阶段性的发病。因此，探讨膀胱癌的病因、发生、发展、治疗是我们临床工作者的重要任务，而各种肿瘤的发生发展都和免疫系统功能有关，现在治疗理念基本是研发的合成西药或者干扰素等。本研究侧重于从免疫学方面深入研究，目的是能够发现机体的免疫功能及状态与肿瘤的发生、发展及预后密切相关性。目前针对恶性肿瘤治疗，由于化疗后出现毒副作用，致使肿瘤治疗失败。因此，研究中药对巨噬细胞的激活作用，提高机体免疫力，以整合医学为指导，配合化疗药物治疗膀胱癌有望为恶性肿瘤的治疗提供一条新的有效方法，为解决临床实际问题提供理论依据，推动祖国传统中医药理论以及应用技术的发展，并为调控肿瘤免疫提供新的思路，具有潜在的应用前景。
省沽油：本品为棕榈科黄藤属植物黄藤Daemonorops margaritae（Hance）Becc.[Calamus margaritae Hance］的茎。全年均可采，切段，晒干。【性味】味苦；性平。【功能主治】驱虫；通淋；驱风止痛。主蛔虫；蛲虫；绦虫病；小便淋痛；齿痛。【原植物形态】黄藤，有刺大藤本。茎初时直立，后攀援状。叶羽状全裂，全长2-3m，叶轴顶端延伸成具爪状刺的纤鞭；裂片近对生，50-75对，条状披针形，长25-45cm，宽l-2cm，先端渐尖，叶轴背面有大小不等下弯或劲直的刺；叶鞘无纤鞭但有扁平的刺。肉穗花序开花前为佛焰苞包着，呈纺锤形，长25-30cm，朱端尾状渐尖，外面1枚密被褐色、扁平的直刺，里面的佛焰苞少刺或无刺，开花结果后佛焰苞脱落。雄花序上的小穗轴密集，长约3cm，花密集，雄花长圆状卵形，长5mm；花萼杯状，浅3齿；花冠3裂，约2倍长于花萼；雄蕊6，长约3.5mm，总苞浅杯状。雌花：花萼短筒形，先端3齿裂；花瓣披针形，长约为花萼的2倍；子房卵形，柱头3枚。果实球形，直径1.8-2cm，有18-20行纵列的鳞片，鳞片在每1列上有10-20个，黄色而光亮，有槽纹。种子肾状球形。花期5月，果期6-10月。收载于中药大辞典。
鹅蛋壳：本品为为鸭科雁属动物家鹅Anser cygnoides domestica Brisson.的卵壳。食用鹅蛋时，收集蛋壳，洗净，晒干或烘干。【性味】甘；淡；平。【归经】肺经。【功能主治】拔毒排脓；理气止痛。主痈疽脓成难溃；疝气；难产。【性状】多呈现碎片状，外表面白色稍粗糙，易破裂；内表面光滑，质脆易碎。气微，味淡。收载于中药大辞典。
藤黄双黄酮（Morelloflavone）：CAS号16851-21-1，分子式C30H20O11，分子量556.48。【药理作用】抗肿瘤。【成分来源】山竹子 Garcinia multiflora，藤黄 Garciniamorella。
环木菠萝烷醇（Cycloartanol）：CAS号4657-58-3，分子式C30H52O，分子量428.75。【药理作用】具有抗炎作用 。【成分来源】豆油，枸杞子，火秧簕，水龙骨。
2个原料药化学结构：
藤黄双黄酮（Morelloflavone） 环木菠萝烷醇（Cycloartanol）。
发明内容
本发明的目的是克服背景技术的不足，提供一种有效治疗膀胱癌的药物组合物及其制备方法。
本发明是采用如下技术方案实现的：
制成该治疗膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：
省沽油562-568重量份 鹅蛋壳436-440重量份 环木菠萝烷醇42-48重量份 藤黄双黄酮32-38重量份。
优选的用于治疗膀胱癌的药物组合物，是由如下重量份的原料药组成：
省沽油565重量份 鹅蛋壳438重量份 环木菠萝烷醇46重量份 藤黄双黄酮35重量份。
一种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
一种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成的治疗膀胱癌药物。
一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：省沽油562-568重量份 鹅蛋壳436-440重量份 环木菠萝烷醇42-48重量份 藤黄双黄酮32-38重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取省沽油、鹅蛋壳、环木菠萝烷醇、藤黄双黄酮，混匀，用重量百分比浓度17%乙醇作为溶剂，在29℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为原料药总重量的31倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过FU-08大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度44%乙醇溶液洗脱FU-08大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度44%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度69%乙醇作为溶剂，加热回流提取24次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.12，滤过，药液通过DM134大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度79%乙醇溶液洗脱DM134大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度79%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
优选的一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：省沽油565重量份 鹅蛋壳438重量份 环木菠萝烷醇46重量份 藤黄双黄酮35重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取省沽油、鹅蛋壳、环木菠萝烷醇、藤黄双黄酮，混匀，用重量百分比浓度17%乙醇作为溶剂，在29℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为原料药总重量的31倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过FU-08大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度44%乙醇溶液洗脱FU-08大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度44%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度69%乙醇作为溶剂，加热回流提取24次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.12，滤过，药液通过DM134大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度79%乙醇溶液洗脱DM134大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度79%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成治疗膀胱癌药物。
药物组合物治疗膀胱癌疗效显著。
具体实施方式
实施例1：治疗膀胱癌的药物组合物及其制备方法
治疗膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：省沽油565g 鹅蛋壳438g 环木菠萝烷醇46g 藤黄双黄酮35g；
制备方法：
（1）按原料药配比取省沽油、鹅蛋壳、环木菠萝烷醇、藤黄双黄酮，混匀，用重量百分比浓度17%乙醇作为溶剂，在29℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为原料药总重量的31倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过FU-08大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度44%乙醇溶液洗脱FU-08大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度44%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度69%乙醇作为溶剂，加热回流提取24次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.12，滤过，药液通过DM134大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度79%乙醇溶液洗脱DM134大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度79%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例2：治疗膀胱癌的药物组合物及其制备方法
治疗膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：省沽油562g 鹅蛋壳440g 环木菠萝烷醇42g 藤黄双黄酮38g；
制备方法：
（1）按原料药配比取省沽油、鹅蛋壳、环木菠萝烷醇、藤黄双黄酮，混匀，用重量百分比浓度17%乙醇作为溶剂，在29℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为原料药总重量的31倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过FU-08大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度44%乙醇溶液洗脱FU-08大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度44%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度69%乙醇作为溶剂，加热回流提取24次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.12，滤过，药液通过DM134大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度79%乙醇溶液洗脱DM134大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度79%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例3：治疗膀胱癌的药物组合物及其制备方法
治疗膀胱癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：省沽油568g 鹅蛋壳436g 环木菠萝烷醇48g 藤黄双黄酮32g；
制备方法：
（1）按原料药配比取省沽油、鹅蛋壳、环木菠萝烷醇、藤黄双黄酮，混匀，用重量百分比浓度17%乙醇作为溶剂，在29℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为原料药总重量的31倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过FU-08大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度44%乙醇溶液洗脱FU-08大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度44%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度69%乙醇作为溶剂，加热回流提取24次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.12，滤过，药液通过DM134大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度79%乙醇溶液洗脱DM134大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度79%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例4：片剂的制备
取实施例1药物组合物220g，加入淀粉285g，混匀，制粒，干燥，加微晶纤维素76g，硬脂酸镁9g，混匀，压制成1600片， 即得药物组合物片剂。
实施例5：胶囊的制备
取实施例2药物组合物274g，加入淀粉293g，混匀，制粒，干燥，整粒，加入适量硬脂酸镁，混匀，装胶囊1200粒，即得药物组合物胶囊。
实施例6：滴丸的制备
称取聚乙二醇 6000 256g水浴(80℃)加热煮熔，加入实施例3药物组合物13g，充分搅拌均匀，以液体石蜡为冷却剂，置玻璃管（4*80cm）中，冷却温度为3℃，滴口内外径为7.0/1.5(mm/mm)，滴口距液面为1.9cm，滴速以每分53滴为最佳条件，用棉布吸干滴丸表面的冷凝剂，即得药物组合物滴丸。
实验例1：治疗膀胱癌作用试验研究
1 资料与方法
1.1 实验动物及分组
清洁级雌性 Fisher344大鼠30只，雌雄各半，由山东中医药大学实验动物研究中心提供。实验分为3组，每组10只，即空白对照组、药物组合物组、猪苓多糖组。
1.2 主要试剂
药物组合物为实施例1药物组合物（批号20150405）、BBN试剂由山东中医药大学购进。IL-2、VEGF、AQP1、AQP3、β-actin测定试剂盒(哈尔滨海霞试剂有限公司)。
1.3 主要仪器
电子天平；电热恒温水浴锅(华夏仪器制造厂)；微量移液器(上海易友仪器有限公司)；TD5M-WS型台式低速离心机；全自动酶标仪-WD-2102A酶标仪；PCR扩增仪(PTC-100TM MJResearch公司)；数码凝胶成像分析系统等。
1.4 造模及给药方法
实验动物随机分为3组，每组10只，即空白对照组、猪苓多糖100mg/kg组、药物组合物100mg/kg 组，大鼠饮用含有0.05%BBN，持续8周，第9周给予含 5％糖精的饮用水和相应实验组注射干预药物均为至第20周截止。大鼠采血后，把大鼠麻醉于手术台上分离膀胱组织。
1.5 指标测定
ELISA法测血清中VEGF、IL-2含量；RT-PCR法测AQP1和AQP3表达情况。
1.6 数据处理
所得数据采用方差分析两均数间t检验，SPSS18.0 软件分析，各组数据由x±s表示，P<0.05为具有统计学意义。
2 结果
药物组合物对膀胱癌大鼠肿瘤抑制效果显著，其可以提高血清中IL-2含量，减少VEGF含量水平，同时下调AQP1 和 AQP3基因表达，具体结果见表1，表2。
表1 药物组合物对大鼠外周血清中IL-2、VEGF(x±s)
组别 例数 剂量/(mg/kg.d) IL-2/(μg/mL) VEGF/(μg/mL)
空白对照组 10 9.55±0.23 4.73±0.24
猪苓多糖组 10 100 11.78±0.43 2.70±0.51
药物组合物组 10 100 12.65±0.52* 2.87±0.54*
注：*与猪苓多糖组比P<0.01。
表2 药物组合物对大鼠膀胱组织中AQP1和AQP3表达的影响(x±s)
组别 例数 剂量/(mg/kg.d) AQP1/β-actin AQP3/β-actin
空白对照组 10 5.33±0.16 8.66±0.56
猪苓多糖组 10 100 4.34±0.17 6.53±0.32
药物组合物组 10 100 3.89±0.15* 5.11±0.14*
注：*与空白对照组比P<0.01。

Claims (8)

1.一种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于制成该药物组合物的原料药的组成和重量份为：
省沽油562-568重量份 鹅蛋壳436-440重量份 环木菠萝烷醇42-48重量份 藤黄双黄酮32-38重量份。
2.根据权利要求1所述一种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于制成该药物组合物的原料药的组成和重量份为：
省沽油565重量份 鹅蛋壳438重量份 环木菠萝烷醇46重量份 藤黄双黄酮35重量份。
3.根据权利要求1所述一种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
4.根据权利要求1所述一种治疗膀胱癌的药物组合物，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成的治疗膀胱癌药物。
5.一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：省沽油562-568重量份 鹅蛋壳436-440重量份 环木菠萝烷醇42-48重量份 藤黄双黄酮32-38重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取省沽油、鹅蛋壳、环木菠萝烷醇、藤黄双黄酮，混匀，用重量百分比浓度17%乙醇作为溶剂，在29℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为原料药总重量的31倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过FU-08大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度44%乙醇溶液洗脱FU-08大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度44%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度69%乙醇作为溶剂，加热回流提取24次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.12，滤过，药液通过DM134大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度79%乙醇溶液洗脱DM134大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度79%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
6.根据权利要求5所述一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：省沽油565重量份 鹅蛋壳438重量份 环木菠萝烷醇46重量份 藤黄双黄酮35重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取省沽油、鹅蛋壳、环木菠萝烷醇、藤黄双黄酮，混匀，用重量百分比浓度17%乙醇作为溶剂，在29℃温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为原料药总重量的31倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过FU-08大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度44%乙醇溶液洗脱FU-08大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度44%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度69%乙醇作为溶剂，加热回流提取24次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.12，滤过，药液通过DM134大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度79%乙醇溶液洗脱DM134大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度79%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
7.根据权利要求5所述一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
8.根据权利要求5所述一种治疗膀胱癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成治疗膀胱癌药物。
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