CN106137937A - 一种用于皮肤美白的药物组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种具有美白皮肤作用的药物组合物及其制备方法。本发明的药物组合物由红葡萄酒2-50份、熊果苷0.01-0.5份、人参茎叶总皂苷0.01-0.5份、维他命C 0.01-0.5份、维他命E 0.01-0.5份、白茯苓1-20份、白芨1-20份、桑叶1-20份、当归1-20份、川芎1-20份、金银花1-20份。重量百分比的药物组成。药效学研究结果表明,该药物组合物能够显著抑制络氨酸酶的活性,降低络氨酸酶的含量,能够显著增加小鼠耳廓毛细血管交点数,促进毛细血管开放。表明该药能显著的抑制黑色素的形成,促进皮肤微循环,具有皮肤美白作用。
Description
技术领域
本发明属于医药及日用化学品技术领域,具体涉及一种用于皮肤美白的药物组合物及其制备方法。
背景技术
皮肤是人体健康的第一道防线,也是容颜靓丽的第一体现者,拥有健康、白皙、富有弹性的皮肤是所有人追求的目标。东方女性对白暂美丽的皮肤尊爱有加,我国女性历来崇尚“肤如雪、凝如脂”,白净细嫩的肌肤一直是东方人来衡量女性的重要标准,在我国民间就有“一白遮九丑”的说法。近年来,美白类化妆品市场日趋活跃,产品销售与日俱增,已成为护肤化妆品的主流品种之一。
人类因为皮肤内黑素的数量及分布情况不同导致不同的颜色。人体皮肽的颜色主要决定于表皮内黑色素含量的多少。黑色素是一种蛋白质衍生物,里褐色或黑色,是由黑素细胞产生的。由于黑素的数量、大小、类型及分布情况不同,从而决定了不同的肤色。黄种人皮肤内的黑素主要分布在表基底层,棘层内较少;黑种人则在基底层、棘层及颗粒层都有大量黑素存在;白种人皮肤内黑素分布情况与黄种人相同,只是黑素的数量比黄种人少。
黑素细胞是皮肤的重要组成细胞之一,呈树状突起,细胞内形成的黑色素通过树状突起运输到角质层细胞内。皮肤颜色的深浅是由黑素细胞合成黑素数量的多少决定。皮肤黑素的形成过程包括黑素细胞的迁移、黑素细胞的分裂成熟、黑素小体的形成、黑素颗粒的转运以及黑素的排泄等一系列复杂的生理生化过程,从生物化学反应的角度 来看,黑素的形成必须有三种基本物质:酪氨酸为制造黑素的主要原料;酪氨酸酶是酪氨酸转变为黑素的主要限速酶,为铜及蛋白质的组合物;酪氨酸在酪氨酸酶的作用下产生黑素。
目前公认的黑素形成途径为:酪氨酸-多巴-多巴醌-多巴色素-二羟基吲哚-酮式吲哚-黑素。影响黑素形成的因素很多,大体上可以分为细胞外、细胞内以及外源性因素(如紫外线)的影响等几个方面。
细胞外的影响因素:近年来,有关黑素形成的分子生物学研究证明,黑素细胞生成黑素的活性受到网络控制。皮肤内黑素细胞、角质形成细胞、成纤细胞、血管内皮细胞、神经细胞等组成“电讯”交互网络(即胞质网络)。在这一网络中,许多细胞因子对黑素细胞的繁殖分化、树突形成和黑素合成都有影响。能够促进黑素细胞生长、存活的因子有;碱性成纤细胞生长因子、内皮素、神经细胞生长因子等;抑制黑素细胞增殖,使酪氨酸酶活性降低的有:白细胞介素-1、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子能促进黑素细胞分化及黑素合成;干扰素在一定条件下,能使黑素细胞形态改变,生长抑制;炎症介质是人黑素细胞的促分裂源,能引起黑素细胞快速增生,并对黑素细胞有趋化作用。
细胞内的影响因素:黑素细胞中决定黑素合成速率的是细胞内的多种酶。酪氨酸酶是黑素生物合成过程中所需的酶,随着黑素合成研究的不断进展,人们发现黑素细胞中还存在其他与黑素合成相关的物质。与酪氨酸酶相关的两种蛋白TPRl(DHICA氧化酶)和TRP2(多巴色素互变酶)在黑素的合成过程中发挥着重要的作用。它们除了对酪 氨酸酶合成黑素具有协助作用以外,还具有合成其他不同类型色素的重要作用。细胞内许多细胞因子,如碱性成纤细胞生长因子、肝细胞生长因子/扩散因子、内皮素等都能促进体外黑素细胞增殖,有些因子还能刺激酪氨酸酶活性,使黑素细胞高度色素化。
外源性因素的影响:紫外线是人体长期接触的一个外界刺激因素,是人类黑素细胞增殖和皮肤色素沉着增多的主要生理性刺激。皮肤变黑主要是由中长波紫外线(UVB和INA)引起,紫外线能引起黑素细胞的增殖及促进黑素产生,出现皮肤色素沉着。
关于黑色素的生成抑制机理,归纳起来可分为细胞内抑制、细胞外抑制以及外援因素控制等几方面。
(一)黑色素细胞的胞内抑制
黑色素的形成的生物化学过程现已研究比较清楚了,认为它是由酪氨酸在含高价铜离子(Cu2+)的酪氨酸酶作用下,氧化生成3,4-二羟基苯丙氨酸(多巴),再由酪氨酸酶氧化为多巴醌,进一步氧化为5,6-二羟基吲哚,聚合后生成黑色素。
从上面可以看出,在黑色素细胞内抑制黑色素生成可以通过以下几个途径。
酪氨酸酶的抑制:
a、酪氨酸酶的破坏性抑制就是可以直接对酪氨酸酶进行修饰、改性的物质,使酪氨酸酶失去对黑色素前体---酪氨酸的作用,从而达到抑制黑色素形成的目的。
b、酪氨酸酶的非破坏型抑制。所谓酪氨酸酶的非破坏性抑制,即 不对酪氨酸酶本身进行修饰、改性,而是通过抑制酪氨酸酶的生物合成或取代酪氨酸酶的作用底物,从而达到抑制黑色素形成的目的。
多巴色素互变酶的抑制:多巴色素互变酶是一种与酪氨酸酶有关的蛋白质,其作用机理是促使所作用的底物发生重排,生成底物的某一同分异构体,最终生成另一黑色素。即在由多巴色素自发脱羧、重排生成5,6-二羟基吲哚(DHI)的同时,黑色素细胞内部分多巴色素正是由于多巴色素互变酶的存在而发生重排生成5,6-二羟基吲哚-2-羧酸(DHICA)。因此该酶主要调节5,6-二羟基吲哚-2羧酸的生成速率,从而影响所生成的黑色素分子的大小、结构和种类。
(二)黑色素细胞的胞外抑制
黑色素的形成不仅是黑色素细胞的胞内行为,同时也是胞外物质作用的结果。内皮素是黑色素形成信号传导途径中重要的信号分子,抑制内皮素可抑制黑色素的形成。内皮素是一类由21个氨基酸组成的多肽物质,其中内皮素-1(ET-1)、内皮素-2(ET-2)和内皮素-3(ET-3)均已被分离。
(三)环境因素的影响
1、干扰、控制黑色素的代谢途径
美白活性物质通过抑制黑色素颗粒转移至角质形成细胞或加速角质形成细胞中黑色素向角质层转移,软化角质层和加速角质层脱落等方式达到美白的效果。
2、防御紫外线、抵抗自由基
皮肤之所以会变黑,外源性原因是主要的。紫外线的刺激会使黑 色素细胞增殖、分化,激活酪氨酸酶的活性,氧化自由基,尤其以UVB紫外线作用更为强烈。
随着人们对于美的追求,对于皮肤美白的研究日益升温,从中医药中发掘皮肤美白的物质,实现健康、快速的皮肤美白效果,为美白产品的研究开发提供了参考。
发明内容
针对上述目的,本发明的技术方案如下:
本发明提供一种用于皮肤美白的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物由以下重量份数的各原料提取混合制得:红葡萄酒2-50份、熊果苷0.01-0.5份、人参茎叶总皂苷0.01-0.5份、维他命C0.01-0.5份、维他命E 0.01-0.5份、白茯苓1-20份、白芨1-20份、桑叶1-20份、当归1-20份、川芎1-20份、金银花1-20份。
优选的,所述各原料的重量份数配比如下:红葡萄酒5-25份、熊果苷0.02-0.25份、人参茎叶总皂苷0.02-0.25份、维他命C 0.02-0.25份、维他命E 0.02-0.25份、白茯苓2-10份、白芨2-10份、桑叶2-10份、当归2-10份、川芎2-10份、金银花2-10份。
本发明还提供这种药物组合物的制备方法,方法选自:
A:处方中白茯苓、白芨、桑叶、当归、川芎、金银花加水煎煮,滤过,滤液浓缩,干燥成粉。临用时将上述粉末与红葡萄酒、熊果苷、人参茎叶总皂苷合并;
B:处方中白茯苓、白芨、桑叶、当归、川芎、金银花加乙醇回流提取,滤过,滤液浓缩,干燥成粉。临用时将上述粉末与红葡萄酒、熊果苷、人参茎叶总皂苷合并。
制备方法A所述水煎煮的操作中加水提取2次,每次用水量为药材重量6-8倍,每次煎煮1小时。
浓缩操作为50℃-70℃减压浓缩,干燥方式为40℃-60℃真空干燥或喷雾干燥。
制备方法B所述的乙醇水溶液回流提取操作中乙醇水溶液回流提取2次,每次乙醇水溶液的用量为药材重量6-8倍,每次提取1小时;所述的乙醇水溶液浓度为10%-70%。
浓缩操作为同样是50℃-70℃减压浓缩,干燥方式为40℃-60℃真空干燥或喷雾干燥。
干燥后物料粉碎保存,临用时与红葡萄酒、熊果苷、人参茎叶总皂苷合并,作为药物组合物。
本发明还提供了该药物组合物的用途,给用途是加入制剂学上可接受的载体和/或赋形剂,用于制备美白皮肤的药物、保健品、化妆品,如面膜、化妆水、霜、乳液、凝胶等。
制剂学上可接受的载体和/或赋形剂选自羧甲基纤维素钠、卡波姆、聚丙烯酸钠、甘油、丙二醇、山梨醇、羟丙基-β-环糊精、聚氧乙烯氢化蓖麻油RH40、聚氧乙烯氢化蓖麻油HS15中的一种或多种。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述,给出的实施例仅为了阐明本发明,而不是为了限制本发明的范围。
实施例
1
分别称取白茯苓10g、白芨200g、桑叶100g、当归50g、川芎50g、金银花10g加3360ml水煎煮1小时,120目不锈钢网自然滤过,药渣加水2520ml煎煮1小时,120目不锈钢网自然滤过,滤液合并,60℃减压(-0.09MPa)成浸膏,浸膏60℃真空干燥,粉碎,得细粉58g,加入红葡萄酒20g、熊果苷0.5g、人参茎叶提取物0.2g、维他命E 1g、维他命C 0.1g,混合均匀。
实施例
2
分别称取白茯苓150g、白芨50g、桑叶10g、当归150g、川芎200g、金银花100g加5280ml水煎煮1小时,120目不锈钢网自然滤过,药渣加水3960ml煎煮1小时,120目不锈钢网自然滤过,滤液合并,50℃减压(-0.09MPa)成浸膏,浸膏40℃真空干燥,粉碎,得细粉81g,加入红葡萄酒300g、熊果苷1g、人参茎叶提取物0.4g、维他命E 0.2g、维他命C 1g,混合均匀。
实施例
3
分别称取白茯苓200g、白芨150g、桑叶50g、当归10g、川芎100g、金银花200g加5680ml 10%乙醇水溶液回流提取1小时,120目不锈钢网自然滤过,药渣加4260ml 10%乙醇水溶液回流提取1小时,120目不锈钢网自然滤过,滤液合并,70℃减压(-0.09MPa)成浸膏,浸膏50℃真空干燥,粉碎,得细粉95g,加入红葡萄酒500g、熊果苷0.4g、人参茎叶提取物0.1g、维他命E 0.1g、维他命C 0.5g, 混合均匀。
实施例
4
分别称取白茯苓50g、白芨100g、桑叶200g、当归200g、川芎10g、金银花150g加5680ml 30%乙醇水溶液回流提取1小时,120目不锈钢网自然滤过,药渣加4260ml 30%乙醇水溶液回流提取1小时,120目不锈钢网自然滤过,滤液合并,60℃减压(-0.09MPa)成浸膏,浸膏60℃真空干燥,粉碎,得细粉86g,加入红葡萄酒200g、熊果苷0.1g、人参茎叶提取物0.5g、维他命E 0.5g、维他命C 0.2g,混合均匀。
实施例
5
分别称取白茯苓100g、白芨10g、桑叶150g、当归100g、川芎150g、金银花50g加4480ml 50%乙醇水溶液回流提取1小时,120目不锈钢网自然滤过,药渣加3360ml 50%乙醇水溶液回流提取1小时,120目不锈钢网自然滤过,滤液合并,50℃减压(-0.09MPa)成浸膏,浸膏50℃真空干燥,粉碎,得细粉67g,加入红葡萄酒400g、熊果苷0.3g、人参茎叶提取物1g、维他命E 0.3g、维他命C 0.4g,混合均匀。
实施例
6
分别称取白茯苓100g、白芨100g、桑叶100g、当归100g、川 芎100g、金银花100g加4800ml 70%乙醇水溶液回流提取1小时,120目不锈钢网自然滤过,药渣加3600ml 70%乙醇水溶液回流提取1小时,120目不锈钢网自然滤过,滤液合并,60℃减压(-0.09MPa)成浸膏,浸膏60℃真空干燥,粉碎,得细粉75g,加入红葡萄酒100g、熊果苷3g、人参茎叶提取物3g、维他命E 2g、维他命C 2g,混合均匀。
实施例
7
分别称取白茯苓100g、白芨100g、桑叶100g、当归50g、川芎50g、金银花50g加3600ml水煎煮1小时,120目不锈钢网自然滤过,药渣加水2700ml煎煮1小时,120目不锈钢网自然滤过,滤液合并,70℃减压(-0.09MPa)成浸膏,浸膏50℃真空干燥,粉碎,得细粉55g,加入红葡萄酒100g、熊果苷5g、人参茎叶提取物5g、维他命E 4g、维他命C 4g,混合均匀。
实施例
8
分别称取白茯苓200g、白芨100g、桑叶100g、当归10g、川芎10g、金银花100g加4160ml水煎煮1小时,120目不锈钢网自然滤过,药渣加水3120ml煎煮1小时,120目不锈钢网自然滤过,滤液合并,50℃减压(-0.09MPa)成浸膏,浸膏40℃真空干燥,粉碎,得细粉76g,加入红葡萄酒300g、熊果苷2g、人参茎叶提取物2g、维他命E 5g、维他命C 5g,混合均匀。
实施例
9
取实施例1制备的药物混合物10g,加甘油10g,卡波姆0.1g,水80g,混合均匀,200转/分离心5分钟,等分为5份,分别加入到面膜纸内,装袋密封,得美白面膜。
实施例
10
取实施例2制备的药物混合物40g,加水40g,混合均匀,200转/分离心5分钟,再加入丙二醇20g,卡波姆1g,混合均匀,得美白凝胶。
实施例
11
取实施例3制备的药物混合物60g,50℃减压(-0.09MPa)浓缩至30g,加山梨醇10g,水100g混合均匀,加热至70℃;另取聚氧乙烯氢化蓖麻油HS152g,羊毛脂50g,凡士林10g加入至融化,继续加热至70℃;将水相缓缓倒入油相中,边加边搅拌,至乳化完全,放冷,得美白软膏。
实施例
12
取实施例4制备的药物混合物30g,加甘油10g,水100g混合均匀,加热至70℃;另取聚氧乙烯氢化蓖麻油RH402g,羊毛脂50g,凡士林10g加入至融化,继续加热至70℃;将水相缓缓倒入油相中,边加边搅拌,至乳化完全,放冷,得美白软膏。
实施例
13
取实施例5制备的药物混合物50g,加水200g,混合均匀,200转/分离心5分钟,再加入山梨醇20g,卡波姆1g,混合均匀,得美白凝胶。
实施例
14
取实施例6制备的药物混合物10g,加丙二醇20g,卡波姆0.2g,水170g,混合均匀,200转/分离心5分钟,等分为5份,分别加入到面膜纸内,装袋密封,得美白面膜。
实施例
15
取实施例7制备的药物混合物20g,加甘油10g,水100g混合均匀,加热至70℃;另取聚氧乙烯氢化蓖麻油RH405g,单硬脂酸甘油酯50g,羊毛脂50g,凡士林10g加入至融化,继续加热至70℃;将水相缓缓倒入油相中,边加边搅拌,至乳化完全,放冷,得美白霜。
实施例
16
取实施例8制备的药物混合物20g,加丙二醇50g,水200g混合均匀,加热至70℃;另取聚氧乙烯氢化蓖麻油RH4010g,羊毛脂50g,凡士林20g加入至融化,继续加热至70℃;将水相缓缓倒入油相中,边加边搅拌,至乳化完全,放冷,得美白乳。
本发明采用以下试验证明药物组合物的美白作用,说明该药物组合物用于皮肤美白的依据。
试剂:0.5%脱氧胆酸钠溶液(质量分数),蒸馏水配制;0.1%L-DOPA溶液(质量分数),每次用0.1mol/L磷酸缓冲液新鲜配制;0.25%胰酶溶液(质量分数);l mol/L氢氧化钠溶液;RPMI 1640培养液;0.1mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)。
仪器:普通离心机(转速为1000r/min-10000r/min);7230G分光光度计(上海分析仪器广);电热恒温水浴锅。
细胞培养:B-16黑色素瘤细胞株(上海市中科院细胞所),待细胞生长至亚融合状态,经0.25%胰蛋白酶消化,用含有10%牛血清的RPMI l 640培养液传代,置于CO2培养箱37℃、5%CO2饱和湿度环境进行培养。每一次实验取自同一传代细胞,初始接种浓度为5000个/cm2左右。细胞接种24小时后,用添加药物组合物(药物组合物浓度为100ug/ml)的新鲜培养液换液一次。继续孵育72小时后收获细胞。将培养到期的各组细胞经0.25%胰蛋白酶消化离心后,用PBS缓冲液清洗2次,再用PBS缓冲液将沉淀细胞吹打成悬液计数后备用。
实施例
17
药物组合物对
B-16
细胞酪氨酸酶活性的影响
酪氨酸酶活性是根据多巴向多巴醌氧化的速度确定的。取备用细胞悬液加PBS缓冲液调节细胞密度在105/ml左右,各吸取1ml细胞悬液分别置于5个平行试管中,离心后弃去上清液,加人1ml质量 分数为0.5%脱氧胆酸钠溶液,并充分振摇使细胞溶解,制成含有活性酪氨酸酶的细胞裂解物。将试管置于0℃15分钟,再置于37℃10分钟,加入0.1%L-DOPA溶液,振摇后在分光光度计475nm处,分别于0分钟和10分钟时读取吸光度值,计算两个时段的吸光度值的差值,用各给药组吸光度值与空白组的对比,作为评价酪氨酸酶活性高低的指标。
表1药物组合物对B-16细胞酪氨酸酶活性的影响(%)
与对照组相比,*(P<0.05),**(P<0.01),***(P<0.001)
实施例
18
药物组合物对
B-16
细胞黑色素合成的影响
取备用细胞悬液加PBS缓冲液调节细胞密度在105/ml左右,各吸取1ml细胞悬液分别置于5个平行试管中,离心后弃去上清液,
先加入200ul蒸馏水使细胞重新悬浮,然后加入1ml l:1乙醇:乙醚 液以溶解非黑色素的不透明颗粒,在室温下放置15min,离心并弃去上清液,加入l ml质量分数由1O%二甲基亚砜、lmol/L NaOH溶液.置于80℃水浴30min,使细胞团块完全溶解,于470nm处测定吸光度值,各药物组合物组与对照组吸光度比值,作为评价黑色素含量大小的指标。
表2药物组合物对B-16细胞黑色素含量的影响(%)
与对照组相比,*(P<0.05),**(P<0.01),***(P<0.001)
实施例
19
药物组合物对小鼠耳廓微循环的影响
试验选用60只小鼠,体重18-22g,按体重随机分为6组,每组10只,雌雄各半。按表11所示剂量每日皮肤给药1次,连续给药7天,对照组皮肤涂抹同体积的空白溶剂。于末次给药后1h,腹腔注射40mg/kg戊巴比妥钠麻醉后,在SZ-ST实体显微镜下计数小鼠右耳廓同一部位与1mm直线交点的毛细血管数。
表3药物组合物对小鼠耳廓微循环的影响
与对照组相比,*(P<0.05),**(P<0.01),***(P<0.001)
Claims (9)
1.一种用于皮肤美白的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物由以下重量份数的各原料提取混合制得:红葡萄酒2-50份、熊果苷0.01-0.5份、人参茎叶总皂苷0.01-0.5份、维他命C 0.01-0.5份、维他命E 0.01-0.5份、白茯苓1-20份、白芨1-20份、桑叶1-20份、当归1-20份、川芎1-20份、金银花1-20份。
2.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,所述各原料的重量份数配比如下:红葡萄酒5-25份、熊果苷0.02-0.25份、人参茎叶总皂苷0.02-0.25份、维他命C 0.02-0.25份、维他命E 0.02-0.25份、白茯苓2-10份、白芨2-10份、桑叶2-10份、当归2-10份、川芎2-10份、金银花2-10份。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物的制备方法,选自:
A:处方中白茯苓、白芨、桑叶、当归、川芎、金银花加水煎煮,滤过,滤液浓缩,干燥成粉。临用时将上述粉末与红葡萄酒、熊果苷、人参茎叶总皂苷合并;
B:处方中白茯苓、白芨、桑叶、当归、川芎、金银花加乙醇回流提取,滤过,滤液浓缩,干燥成粉。临用时将上述粉末与红葡萄酒、熊果苷、人参茎叶总皂苷合并。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,制备方法A所述水煎煮的操作中加水提取2次,每次用水量为药材重量6-8倍,每次煎煮1小时。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,制备方法A所述的浓缩操作为60℃减压浓缩或喷雾干燥。
6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,制备方法B所述的乙醇水溶液回流提取操作中乙醇水溶液回流提取2次,每次乙醇水溶液的用量为药材重量6-8倍,每次提取1小时;所述的乙醇水溶液浓度为10%-70%。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的药物组合物,其特征在于,所述组合物还包含制剂学上可接受的载体和/或赋形剂,用于制备美白皮肤的药物、保健品、化妆品,如面膜、化妆水、霜、乳液、凝胶。
8.根据权利要求7所述的药物组合物,其特征在于,所述制剂学上可接受的载体和/或赋形剂选自羧甲基纤维素钠、卡波姆、聚丙烯酸钠、甘油、丙二醇、山梨醇、羟丙基-β-环糊精、聚氧乙烯氢化蓖麻油RH40、聚氧乙烯氢化蓖麻油HS15中的一种或多种。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的药物组合物,其特征在于,所述组合物的应用为用于制备美白皮肤的药物、保健品、化妆品,如面膜、化妆水、霜、乳液、凝胶。
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