CN106132433B - 以il-17a作为靶标的疫苗 - Google Patents

Abstract

本发明提供将包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、或与SEQ ID NO:1对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列的多肽用作免疫原的针对IL‑17A的疫苗，以及包含该疫苗的IL‑17A作为恶化因子参与的疾病的预防或治疗剂等。

Description

以IL-17A作为靶标的疫苗

技术领域

本发明涉及以IL-17A的表位作为靶标的疫苗等。

背景技术

系统性红斑狼疮(SLE)是从头皮至脚趾全身皆会被侵袭的自身免疫疾病，是出现各种症状和多脏器受到损伤的慢性炎症性疾病。关于SLE的病理学有如下推测:自身抗原与抗体的免疫复合体沉着于各脏器在局部引发炎症、其又引起组织损伤导致进一步的自身免疫反应这样的恶性循环，或者1型干扰素等细胞因子参与该过程；但详情不明。

此外，由于许多SLE患者是可妊娠年龄的女性，因而怀疑女性激素与病因相关。另一方面，在北美，黑人女性的患病率高于白人女性，因而怀疑遗传因素的存在，但病因依然不明。

SLE的治疗中使用肾上腺皮质类固醇、免疫抑制剂、作为抗癌剂的环磷酰胺等，能够通过非特异性免疫抑制作用抑制SLE的病情，但存在因非特异性免疫抑制作用而容易罹患感染症等的问题。而且，肾上腺皮质类固醇具有高血压症、糖尿病、脂质异常症、抑郁等副作用，环磷酰胺具有骨髄抑制、致癌性、不孕症这样的强副作用。因为许多SLE患者都是可妊娠年龄的女性，所以不孕症的问题特别值得注意。

在诸如这样的现状下，希望有病理学的详细阐明、以及基于其病因开发副作用少的分子特异疗法。

近年来，在针对SLE患者的临床研究中报告，SLE患者的血中IL-17浓度与对照组相比显著高(非专利文献1)。此外有报告称，在肾脏确认存在SLE类似病变的PP2A转基因小鼠中，IL-17的血中浓度提高，若对该小鼠施用IL-17的中和抗体，则其肾病变得到改善(非专利文献2)。基于此认识，作为一种可能性，提出了在SLE的病理学中1型干扰素与IL-17形成恶性循环，在该病变的进展中担负重要作用的假说(非专利文献3)。

IL-17是作为免疫活性细胞的Th17细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞等分泌的细胞因子，正在逐步明确，其在类风湿性关节炎、炎症性肠病(克罗恩病、溃疡性结肠炎)、多发性硬化症、银屑病等多种自身免疫疾病中，对病理学恶化起着重要作用。

最近，有报告称，抗IL-17抗体药物对银屑病患者显示出治疗效果(非专利文献4)。但是，抗体药物非常昂贵，还已知存在会在持续使用的过程中产生针对抗体药物自身的自身抗体，有效性丧失(二次无效)等问题。由此可以认为，以IL-17为靶标的疫苗能够成为对这些疾病有效、廉价、其长期有效的治疗剂。

作为针对IL-17的疫苗，已经有以IL-17全长作为免疫原的肽疫苗的研究报告(非专利文献5)。但是，如果免疫全长，则也会激起针对IL-17的细胞性免疫，通过细胞毒性T细胞攻击表达IL-17的细胞，存在表现出强烈的有害副作用的危险性。此外，存在也产生对与IL-17类似的其他细胞因子显示交叉反应的抗体的危险性。因此可以认为，仅将与其他蛋白质无同源性的IL-17的一部分的表位作为免疫原的疫苗从安全层面是优选的。而且有报告称，制作了2种IL-17的表位疫苗并施用于炎症性肠病模型小鼠(非专利文献6)。然而，该报告中，疫苗施用组的病理学不但没有改善，反而有所恶化，确认了结肠炎症、胶原沉着增加。

这样，虽然存在关于针对IL-17的表位疫苗的报告，但是据申请人所知，尚不存在该疫苗显示任何疾病治疗效果的报告。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1:Nature Immunology，2009，10(7):778-785

非专利文献2:J Immunology，2012，188(8):3567-3571

非专利文献3:Eur J Immunology 2012，42(9):2274-2284

非专利文献4:J Dermatol 2014；41:1039-1046

非专利文献5:Eur J Immunology 2006，36(11):2857-2867

非专利文献6:Immunotherapy，2012，4(12):1799-1807

发明内容

发明所要解决的问题

本发明的目的是提供针对IL-17A的疫苗，以及包含该疫苗的、诸如SLE这样的IL-17A参与病理学恶化的疾病的治疗和/或预防剂等。

解决问题的方法

本发明人进行了深入研究，结果从IL-17A的结构中确定了对结合IL-17A受体而言重要的氨基酸位点。于是，将该氨基酸位点的一部分作为抗原，将编码它的多核苷酸插入编码乙型肝炎病毒核心抗原多肽的载体，制作了DNA疫苗。在将该DNA疫苗施用于作为SLE模型小鼠的NZBWF1小鼠时，确认了抗体效价的大幅提高，通过该抗体与重组IL-17A的结合实验，确认产生了正确识别IL-17A的抗体。此外，分别确认了施用了该DNA疫苗的、作为另一SLE模型小鼠的MRL/lpr小鼠的血中TNF-α、NZBWF1小鼠的血中IL-1β的降低。进一步，NZBWF1小鼠的该DNA疫苗施用组的长期观察结果确认，该DNA疫苗施用组的生存期显著延长。此外，确认了

NZBWF1小鼠肾脏的病理所见改善、F4/80表达降低、MRL/lpr小鼠脾脏重量减少，确认了基于该DNA疫苗的SLE病理学改善效果。

此外，本发明人在结肠炎模型小鼠、关节炎模型小鼠、结肠癌移植小鼠、肺癌移植小鼠中也确认了通过施用该DNA疫苗、该DNA编码的肽疫苗能够改善病理学。

而且，令人惊奇的是，本发明人确认:本发明发现的疫苗施用组中，未见以往报告的在IL-17的表位疫苗中观察到的那样的病理学恶化。

本发明人基于上述认识完成了本发明。即，本发明提供:

[1]IL-17A作为恶化因子参与的疾病的预防或治疗用疫苗，其包含选自以下(1)～(3)中的任意物质:

(1)包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列、与SEQID NO:1对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列、或与SEQ ID NO:8对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列的多肽；

(2)包含在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列、与SEQ ID NO:1对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列、或与SEQ ID NO:8对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列中，取代、缺失、插入或添加一个或数个氨基酸残基而成的氨基酸序列的多肽；以及

(3)能够表达上述(1)或(2)的多肽的表达载体。

[2][1]的疫苗，其包含以下(1)～(3)中任意一者:

(1)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、或SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列构成的多肽；

(2)由SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列、或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽；以及

(3)能够表达上述(1)或(2)的多肽的表达载体。

[3][1]或[2]的疫苗，其中，表达载体包含编码乙型肝炎病毒核心(HBc)的核苷酸序列。

[4][1]或[2]的疫苗，其中，表达载体包含编码所述(1)或(2)的多肽的核苷酸序列被插入SEQ ID NO:17所示的核苷酸序列的核苷酸编号:246与核苷酸编号:247之间而成的核苷酸序列。

[5][1]-[4]的疫苗，其包含载体蛋白和/或佐剂。

[5-1]包含[1]-[5]中任一项所述的疫苗的组合物。

[6][1]-[5]的疫苗，其中，IL-17A作为恶化因子参与的疾病选自SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、肿瘤、银屑病、以及多发性硬化症。

[7][1]-[6]的疫苗，其包含以下(1)或(2)，且IL-17A作为恶化因子参与的疾病选自SLE、炎症性肠病(inflammatory bowel disease)、类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis)、结肠癌(colon cancer)、以及肺癌(lung cancer):

(1)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽，以及

(2)能够表达上述(1)的多肽的表达载体。

[8][1]-[6]的疫苗，其包含以下(1)～(3)中任意一者，且IL-17A作为恶化因子参与的疾病是类风湿性关节炎:

(1)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽；

(2)由SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽；以及

(3)能够表达上述(1)或(2)的多肽的表达载体。

[9]包含识别以下(1)或(2)的多肽、抑制IL-17A的功能的抗体的IL-17A作为恶化因子参与的疾病的预防或治疗剂:

(1)包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列、与SEQID NO:1对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列、或与SEQ ID NO:8对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列的多肽；

(2)包含在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列、与SEQ ID NO:1对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列、或与SEQ ID NO:8对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列中，取代、缺失、插入或添加一个或数个氨基酸残基而成的氨基酸序列的多肽。

[10][9]的预防或治疗剂，其包含识别以下(1)或(2)的多肽、抑制IL-17A的功能的抗体:

(1)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、或SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列构成的多肽；

(2)由SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列、或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽。

[10-1][9]或[10]的预防或治疗剂，其中，IL-17A作为恶化因子参与的疾病选自SLE、炎症性肠病、银屑病、类风湿性关节炎、多发性硬化症、脑脊髓炎、肿瘤(包括非小细胞性肺癌、结肠癌、血细胞肿瘤等的IL-17A参与其恶化的各种肿瘤性疾病)、动脉硬化症、慢性炎症性疾病、以及变态反应性疾病(迟发型超敏反应、接触型超敏反应)。

[11][9]或[10]的预防或治疗剂，其中，IL-17A作为恶化因子参与的疾病选自SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、肿瘤(tumor)、银屑病(psoriasis)、以及多发性硬化症(multiple sclerosis)。

[11-1][9]或[10]的预防或治疗剂，其中，IL-17A作为恶化因子参与的疾病是SLE。

[12][9]-[11]的预防或治疗剂，其包含识别SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽、抑制IL-17A的功能的抗体，其中，IL-17A作为恶化因子参与的疾病选自SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、结肠癌、以及肺癌。

[13][9]-[11]的预防或治疗剂，其包含由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、SEQ IDNO:11所示的氨基酸序列或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽，其中，IL-17A作为恶化因子参与的疾病是类风湿性关节炎。

[14]由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽。

[14-1]编码[14]的多核苷酸。

发明效果

本发明的疫苗可用于像SLE那样IL-17A作为病理学的恶化因子参与的疾病的治疗等。

附图说明

[图1]示出了包含IL-17A表位的表达载体的结构。A)pcDNA3.1+HBc载体的结构、B)在Hbc的240位与241位的核苷酸之间插入编码间隔序列以及IL-17A的部分序列的序列而成的载体的结构、C)在所述B的载体中插入

IL-17A的表位的示意图。

[图2]显示了重组IL-17A蛋白质与用IL-17A1DNA疫苗(表位序列:RPSDYLNR)或IL-17A2DNA疫苗免疫的Balb/c小鼠的血清来源的抗体结合。A)作为第一抗体使用了通过施用IL-17A1DNA疫苗而得到的抗血清。B)作为第一抗体使用了抗IL-17A抗体。C)作为第一抗体使用了抗BSA抗体。

[图3]显示了用IL-17A1DNA疫苗免疫的Balb/c小鼠的第6周中的抗体效价提升。将No1～No4的第一抗体(小鼠抗血清)进行10倍稀释，再进行10倍梯度稀释来使用。No1:IL-17A1No1抗血清，No2:IL-17A1No2抗血清，No3:IL-17A1No3抗血清，No4:IL-17A1No4抗血清

[图4]A)显示了对NZBWF1小鼠的IL-17A1DNA疫苗施用计划。B)显示了IL-17A1DNA疫苗施用组的抗体效价的提升。

[图5]显示了从用IL-17A1DNA疫苗免疫的小鼠得到的抗血清与BSA-IL-17A1(RPSDYLNR)缀合物(No5BSA conjugate)或小鼠重组IL-17A(No5rIL-17)的结合。第一抗体(小鼠抗血清)进行100倍稀释，再进行5倍梯度稀释来使用。

[图6]显示了施用了IL-17A1DNA疫苗的NZBWF1小鼠或MRL/lpr小鼠的、A)尿蛋白质(NZBWF1小鼠)、B)尿中MCP-1浓度(pg/ml)(NZBWF1小鼠)、C)血中IL-17A浓度(pg/ml)(NZBWF1小鼠)、D)血中TNF-α浓度(pg/ml)(MRL/lpr小鼠)、E)血中IL-1β浓度(pg/ml)(NZBWF1小鼠)、F)血中TNF-α浓度(pg/ml)(NZBWF1小鼠)。

[图7]A)显示了施用了IL-17A1DNA疫苗的NZBWF1小鼠的存活率(图中箭头表示施用疫苗)、B)抗IL-17A1抗体效价。

[图8]显示了施用了IL-17A1DNA疫苗的MRL/lpr小鼠的、A)血中TNF-α浓度(pg/ml)、B)存活率(图中箭头表示施用疫苗)。

[图9]显示了施用了IL-17A1DNA疫苗的MRL/lpr小鼠的、A)体重(g)、B)相对于总体重的心脏重量的比例、C)脾脏重量(mg)、D)相对于总体重的脾脏重量的比例。

[图10]显示了病理组织的解剖计划。A)对NZBWF1小鼠的IL-17A1DNA疫苗、盐水施用计划、B)对MRL/lpr小鼠的IL-17A1DNA疫苗、盐水施用计划。

[图11]显示了对NZBWF1小鼠或MRL/lpr小鼠施用IL-17A1DNA疫苗或盐水后，肾脏的A)PAS染色照片(弱放大)、B)PAS染色照片(强放大)、C)F4/80免疫染色照片(NZBWF1小鼠)、D)F4/80免疫染色照片(MRL/lpr小鼠)。

[图12]显示了对NZBWF1小鼠施用IL-17A1DNA疫苗或盐水后的下颌下腺HE染色照片。

[图13]显示了对NZBWF1小鼠或MRL/lpr小鼠施用IL-17A1DNA疫苗或盐水后的肝脏HE染色照片。

[图14]显示了A)对Balb/c小鼠施用TNBS以及施用IL-17A1DNA疫苗的计划。此外，显示了施用TNBS以及IL-17A1DNA疫苗或盐水后的Balb/c小鼠的、B)体重增加比例(％)、C)结肠长度(mm)、D)结肠HE染色照片、E)结肠HE评分。

[图15]A)显示了对DBA/1小鼠施用IL-17A1DNA疫苗以及施用Type II胶原的计划。此外，显示了施用了IL-17A1DNA疫苗或盐水以及Type II胶原后的DBA/1小鼠的、B)关节炎临床评分、C)关节照片。

[图16]A)显示了对Balb/c小鼠施用IL-17A1肽疫苗以及接种CT26细胞的计划。此外，显示了施用IL-17A1肽疫苗或盐水、接种CT26细胞后的Balb/c小鼠的、B)肿瘤体积(mm³)、C)存活率。

[图17]A)显示了对C57BL/6小鼠施用IL-17A1DNA疫苗以及接种LLC细胞的计划。此外，显示了施用IL-17A1DNA疫苗或盐水、接种LLC细胞后的C57BL/6小鼠的、B)体重(g)、C)肿瘤体积(mm³)、D)LLC细胞接种28日后的肿瘤重量(mg)、E)肺转移的照片图像、F)癌的肺转移数(个)、G)癌的肝转移数(个)。

[图18]显示了从用包含由人IL-17A1表位(SEQ ID NO:1)组成的多肽的疫苗免疫的小鼠得到的抗血清(IL-17Human)或疫苗施用前的血清(Preimmune)与BSA-人IL-17A1缀合物的结合。将第一抗体(小鼠抗血清)进行10倍稀释，再进行5倍梯度稀释来使用。

[图19]A)显示了从用包含由人IL-17A1表位(SEQ ID NO:1)组成的多肽的疫苗免疫的小鼠得到的抗血清与BSA-人IL-17A1缀合物(No Y11-5weeks Human)、或BSA-小鼠IL-17A1缀合物(No Y11-5weeks Mouse)的结合。此外，显示了疫苗施用前的血清与BSA-人IL-17A1缀合物(No Y11Pre Human)、或BSA-小鼠IL-17A1缀合物(No Y11Pre Mouse)的结合。将第一抗体(小鼠抗血清)进行10倍稀释，再进行5倍梯度稀释来使用。B)显示了从用包含由小鼠IL-17A1表位(SEQ ID NO:5)组成的多肽的疫苗免疫的小鼠得到的抗血清与BSA-小鼠IL-17A1缀合物(No G8-5weeks Mouse)、或BSA-人IL-17A1缀合物(No G8-5weeks Human)的结合。此外，显示了疫苗施用前的血清与BSA-小鼠IL-17A1缀合物(No G8Pre Mouse)、或BSA-人IL-17A1缀合物(No G8Pre Human)的结合。第一抗体(小鼠抗血清)进行10倍稀释，再进行5倍梯度稀释来使用。

[图20]显示了从用包含由人IL-17A2表位(SEQ ID NO:8)组成的多肽的疫苗免疫的小鼠得到的抗血清与BSA-人IL-17A2缀合物(No AF975)的结合、或从用包含由人IL-17A3表位(SEQ ID NO:9)组成的多肽的疫苗免疫的小鼠得到的抗血清与BSA-人IL-17A3缀合物(No AF976)的结合。第一抗体(小鼠抗血清)进行10倍稀释，再进行5倍梯度稀释来使用。

[图21]显示了用包含由人IL-17A4表位(SEQ ID NO:11)组成的多肽的疫苗、包含编码人IL-17A5表位(SEQ ID NO:12)的DNA的疫苗、包含编码人IL-17A6表位(SDY)的DNA的疫苗或包含编码人IL-17A7表位(DYY)的DNA的疫苗免疫的Balb/c小鼠在第6周的抗体效价提升。各第一抗体(小鼠抗血清)进行10倍稀释，再进行5倍梯度稀释来使用。

[图22]A)显示了对DBA/1小鼠施用各种IL-17A肽疫苗以及Type II胶原的计划。B)显示了施用各种IL-17A肽疫苗、施用Type II胶原的DBA/1小鼠的关节炎的临床评分。H17:人IL-17A1表位，AF4:人IL-17A4表位，AF5:人IL-17A2表位，对照(KLH):KLH，胶原(-):未施用Type II胶原

[图23]显示了通过ELISA测定培养基中的正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)分泌的IL-6浓度的结果。IL-17(-)对照:未添加IL-17，仅IL-17:添加重组人IL-17A，IL-17+抗血清:重组人IL-17A和抗人IL-17A1小鼠抗体，IL-17+抗血清:重组人IL-17A和非免疫小鼠抗体

发明的具体实施方式

本发明提供针对IL-17A的疫苗、以及包含该疫苗的、诸如SLE那样IL-17A作为病理学的恶化因子参与的疾病的治疗和/或预防剂等。

疫苗

本发明的针对IL-17A的疫苗(也称表位疫苗)选自以下(1)～(3)。

(1)包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列、与SEQID NO:1对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列、或与SEQ ID NO:8对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列的多肽、

(2)包含在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列、与SEQ ID NO:1对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列、或与SEQ ID NO:8对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列中，取代、缺失、插入或添加一个或数个氨基酸残基而成的氨基酸序列的多肽、

(3)能够表达上述(1)或(2)的多肽的表达载体。

这其中，本发明的针对IL-17A的疫苗优选选自以下(1’)～(3’)。

(1’)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、或SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列构成的多肽、

(2’)由SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列、或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽、

(3’)能够表达上述(1’)或(2’)的多肽的表达载体。

最优选的本发明的针对IL-17A的疫苗选自以下(1”)或(2”)。

(1”)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列、或SEQID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽、

(2”)能够表达上述(1”)的多肽的表达载体。

对于IL-17A作为恶化因子参与的疾病没有特殊限定，只要因IL-17A而病理学恶化即可。可以列举出例如:SLE、炎症性肠病(溃疡性结肠炎、克罗恩病)、银屑病、类风湿性关节炎、多发性硬化症、脑脊髓炎、肿瘤(包括肺癌(其中特别优选非小细胞性肺癌)、结肠癌、血细胞肿瘤等的IL-17A参与恶化的各种肿瘤性疾病)、动脉硬化症、慢性炎症性疾病、以及变态反应性疾病(迟发型超敏反应、接触型超敏反应等)等，优选可以列举出SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、肺癌、结肠癌、银屑病、多发性硬化症，最优选SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、肺癌、结肠癌。如后述的实施例所述，由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽或编码该多肽的DNA对SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、肺癌、结肠癌显示出治疗效果。此外，除了由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽以外，由SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列、或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽或编码该多肽的DNA也对类风湿性关节炎显示出治疗效果。恶化是指病理学进一步加重，而不论加重的程度。

本发明的疫苗的施用对象可以是任意哺乳动物，是IL-17A参与病理学恶化的疾病正在发病的哺乳动物或有该疾病的发病隐患的哺乳动物。作为哺乳动物，可以列举出例如:小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠等啮齿类以及兔等实验动物、犬和猫等宠物、牛、猪、山羊、马和绵羊等家畜、人、猴、猩猩和黑猩猩等灵长类等，优选人。施用对象可以正接受治疗，也可以未接受治疗。

在施用本发明的疫苗的情况下，优选该疫苗中所含的物质是来源于施用对象的物质(即，在施用于人的情况下，该疫苗是人来源的物质，施用于小鼠的情况下，该疫苗是小鼠来源的物质)。

本发明的疫苗中所含的上述(1)(或者(1’)、(1”)，下同)的多肽、上述(2)(或者(2’)，下同)的多肽(也称本发明的多肽)均是IL-17A的部分氨基酸序列。

本发明中，将人IL-17A的62～69位的氨基酸序列作为SEQ ID NO:1，将与之对应的小鼠IL-17A的65～72位的氨基酸序列作为SEQ ID NO:5。它们分别由例如SEQ ID NO:2、SEQID NO:6所示的核苷酸序列编码。此外，将人IL-17A的102～118位的氨基酸序列作为SEQ IDNO:8，将与之对应的小鼠IL-17A的105～121位的氨基酸序列作为SEQ ID NO:10。它们分别由例如SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14所示的核苷酸序列编码。

作为与SEQ ID NO:1(SEQ ID NO:8)对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列，可以利用本说明书中的SEQ ID NO:1(SEQ ID NO:8)中公开的序列信息、公知的序列数据库等，设计合适的引物、探针，采用RT-PCR或斑点杂交等常规的基因工程方法，容易地获得。

本发明的疫苗所含的上述(2)的多肽是在IL-17A氨基酸序列的部分序列中缺失、取代、插入或添加一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸而得到的氨基酸序列。作为诸如这样的多肽，对于人的情况，还包含在SEQ ID NO:1(SEQ ID NO:8)所示的氨基酸序列中缺失、取代、插入或添加一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸而得到的氨基酸序列。作为该氨基酸序列，包括例如:(1)SEQ ID NO:1(SEQ ID NO:8)所示的氨基酸序列中的一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸发生缺失而得到的氨基酸序列、(2)在SEQ ID NO:1(SEQ IDNO:8)所示的氨基酸序列中添加一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸而得到的氨基酸序列、(3)在SEQ ID NO:1(SEQ ID NO:8)所示的氨基酸序列中插入一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸而得到的氨基酸序列、(4)SEQ ID NO:1(SEQ ID NO:8)所示的氨基酸序列中的一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸被其他氨基酸取代而得到的氨基酸序列、或(5)组合上述(1)～(4)的突变而得到的氨基酸序列(该情况下，突变的氨基酸的总数为一个或数个(优选1～数(2～5)个))。

此外，作为上述(2)的多肽所含的氨基酸序列，也优选可以列举出:在与SEQ IDNO:1(SEQ ID NO:8)对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列中缺失、取代、插入或添加一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸而得到的氨基酸序列。作为诸如这样的多肽，对于小鼠的情况，还包括在SEQ ID NO:5(SEQ ID NO:10)所示的氨基酸序列中缺失、取代、插入或添加一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸而得到的氨基酸序列。作为该氨基酸序列，包括例如:(1)SEQ ID NO:5(SEQ ID NO:10)所示的氨基酸序列中的一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸发生缺失而得到的氨基酸序列、(2)在SEQ ID NO:5(SEQ ID NO:10)所示的氨基酸序列中添加一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸而得到的氨基酸序列、(3)在SEQID NO:5(SEQ ID NO:10)所示的氨基酸序列中插入一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸而得到的氨基酸序列、(4)SEQ ID NO:5(SEQ ID NO:10)所示的氨基酸序列中的一个或数个(优选1～数(2～5)个)氨基酸被其他氨基酸取代而得到的氨基酸序列、或(5)组合上述(1)～(4)的突变而得到的氨基酸序列(该情况下，突变的氨基酸总数为一个或数个(优选1～数(2～5)个))。

作为“氨基酸残基的取代”，可以列举出例如保守氨基酸取代。保守氨基酸取代是指:将特定的氨基酸用具有与该氨基酸的侧链相似性质的侧链的氨基酸进行取代。具体地，在保守氨基酸取代中，将特定的氨基酸用与该氨基酸属于同组的其他氨基酸进行取代。具有相似性质的侧链的氨基酸的组是本技术领域公知的。例如，作为诸如这样的氨基酸的组，可以列举出:具有碱性侧链的氨基酸(例如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、具有酸性侧链的氨基酸(例如天冬氨酸、谷氨酸)、具有中性侧链的氨基酸(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸)。此外，具有中性侧链的氨基酸还可进一步分为:具有极性侧链的氨基酸(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、以及具有非极性侧链的氨基酸(例如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸)。此外，作为其他组，还可以列举出例如:具有芳香族侧链的氨基酸(例如苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸)、具有含羟基(醇羟基、酚羟基)侧链的氨基酸(例如丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸)等。

作为“氨基酸残基的缺失”，可以列举出例如在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中选择任意的氨基酸残基使之缺失。作为诸如这样的氨基酸序列，可以列举出例如SEQ IDNO:11、SEQ ID NO:12、SDY或DYY，优选可以列举出SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12。它们分别由例如SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16所示的核苷酸序列编码。

作为“氨基酸残基的插入”或“氨基酸残基的添加”，可以列举出例如在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的内部、N末端侧或C末端侧插入或添加氨基酸残基。为了增强肽的水溶解性，可以在氨基酸序列的N末端侧或C末端侧添加1～2个残基的作为碱性氨基酸的精氨酸(Arg)或赖氨酸(Lys)。

本发明的多肽可以包含添加的氨基酸。诸如这样的氨基酸添加只要该多肽能够诱导针对IL-17A的特异性免疫反应，则是被允许的。对于所添加的氨基酸序列没有特殊限制，可以列举出例如用于使多肽的检测、纯化等变得容易的标签。作为标签，可以示例出Flag标签、组氨酸标签、c-Myc标签、HA标签、AU1标签、GST标签、MBP标签、荧光蛋白标签(例如GFP、YFP、RFP、CFP、BFP等)、免疫球蛋白Fc标签等。氨基酸序列的添加位置是本发明的多肽的N末端和/或C末端。

可用于本发明的多肽的氨基酸包括L体、D体以及DL体，但通常优选L体。这些多肽可采用常规的多肽合成方法合成、并用于本发明，在本发明中，对制造方法、合成方法、供给方法等没有特殊限制。

在上述(3)(或者(3’)、(2”)，下同)的表达载体中，编码上述(1)或(2)的多肽的多核苷酸(DNA或RNA、优选DNA)可操作连接于能够在作为施用对象的哺乳动物的细胞内发挥启动子活性的启动子的下游。即，(3)的表达载体在启动子的控制下能够表达(1)或(2)的多肽作为转录产物。将(3)的表达载体施用于哺乳动物，在该哺乳动物的体内产生(1)或(2)的多肽，在该哺乳动物中诱导针对(1)或(2)的多肽的特异性免疫反应。

所使用的启动子能够在作为施用对象的哺乳动物的细胞内发挥功能即可，可以使用polI系启动子、polII系启动子、polIII系启动子等。具体地，可以使用SV40来源早期启动子、巨细胞病毒(CMV)等病毒启动子、β-肌动蛋白基因启动子等哺乳动物的结构蛋白质基因启动子等。

编码上述(1)或(2)的多肽的多核苷酸的下游含有转录终止信号，即终止子区域。而且，还可以含有用于转化细胞选择的选择标记基因(赋予对四环素、氨苄西林、卡那霉素等药剂的抗性的基因、与营养依赖性突变互补的基因等)。

在本发明中，对于用于表达载体的载体的种类没有特殊限制，作为适合施用于人等哺乳动物的载体，可以列举出病毒载体、质粒载体等。作为病毒载体，可以列举出逆转录病毒、腺病毒、伴腺病毒等。若考虑到制造以及操作的容易性、经济性，则优选使用质粒载体。这其中，特别优选包含编码乙型肝炎病毒核心(以下也称为HBc)的多核苷酸的表达载体。这可以参照国际公开第2012/141280号等。

HBc具有自组装成球状的性质，在该自组装形成的核心粒子的外侧，IL-17A表位能够在保持其结构的同时，稳定地呈递。HBc以及IL-17A表位可以直接通过共价键连接，也可以通过间隔序列连接。间隔序列可以列举出例如IT、GAT、CGG等，但不限于此，只要在HBc自组装形成的核心粒子的外侧，IL-17A表位能够在保持其结构的同时、稳定地呈递即可。作为包含该序列的质粒载体，可以列举出pCAGGS、pCR-X8、pcDNA3.1、pZeoSV、pBK-CMV等，但不限于此。更优选，可以列举出pcDNA3.1-HBc载体。该载体中，在相当于HBc的80位和81位的氨基酸的编码HBc的多核苷酸的240位和241位的核苷酸之间插入了间隔序列。因此，上述(3)的表达载体优选是包含将编码上述(1)或(2)的多肽的核苷酸序列插入到SEQ ID NO:17所示的核苷酸序列的核苷酸编号:246与核苷酸编号:247之间而得到的核苷酸序列的表达载体。

本发明的疫苗可以以除了包含上述(1)或者(2)的多肽或(3)的表达载体以外、还包含任意载体、例如医药可接受的载体的医药组合物的形式来提供。

作为医药可接受的载体，可以列举出例如蔗糖、淀粉等赋形剂，纤维素、甲基纤维素等黏结剂，淀粉、羧甲基纤维素等崩解剂，硬脂酸镁、AEROSIL等润滑剂，柠檬酸、薄荷醇等芳香剂，苯甲酸钠、亚硫酸氢钠等防腐剂，柠檬酸、柠檬酸钠等稳定剂，甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮等混悬剂，表面活性剂等分散剂，水、生理盐水等稀释剂，底蜡等，但不限于此。

而且，在本发明的疫苗为上述(3)的表达载体的情况下，为了促进该表达载体向细胞内导入，本发明的疫苗还可以包含核酸导入用试剂。在使用病毒载体作为表达载体的情况下，作为基因导入试剂，可以使用RetroNectin、纤维连接蛋白、聚凝胺等。此外，在使用质粒载体作为表达载体的情况下，可以使用脂质体、Lipofectamine、DOGS(Transfectam)、DOPE、DOTAP、DDAB、DHDEAB、HDEAB、聚凝胺、或者聚乙烯亚胺(PEI)等阳离子性脂质。

本发明的疫苗中，为了提高上述(1)或者(2)的多肽或(3)的表达载体编码的多肽的免疫原性，还可以包含载体蛋白。载体蛋白一般是结合于因分子量小而不具有免疫原性的分子、赋予其免疫原性的物质，在本技术领域是公知的。作为载体蛋白的例子，可以列举出牛血清白蛋白(BSA)、兔血清白蛋白(RSA)、卵清白蛋白(OVA)、钥孔戚血蓝蛋白(KLH)、甲状腺球蛋白(TG)、免疫球蛋白等。对于上述(3)的表达载体，可以在编码上述(1)或(2)的多肽的多核苷酸上连接编码该载体蛋白的多核苷酸。

此外，本发明的疫苗还可以包含制药上可接受的、且活性成分相容性的佐剂。佐剂一般是非特异性增强宿主的免疫应答的物质，许多种类的佐剂是本技术领域公知的。作为佐剂的例子，可以列举如下，但不限于此:完全弗氏佐剂、不完全弗氏佐剂、氢氧化铝、N-乙酰基-胞壁酰-L-苏氨酰-D-异谷氨酰胺(thr-MDP)、N-乙酰基-正胞壁酰-L-丙氨酰-D-异谷氨酰胺(nor-MDP)、N-乙酰基胞壁酰-L-丙氨酰-D-异谷氨酰胺酰-L-丙氨酸-2-(1’-2’-二棕榈酰-sn-甘油基-3-羟基磷酰氧基)-乙胺(MTP-PE)、Quill A(注册商标)、溶血卵磷脂、皂苷衍生物、Pluronic polyols、Montanide ISA-50(Seppic，Paris，France)、Bayol(注册商标)以及Markol(注册商标)。

本发明的疫苗可口服或非口服施用于哺乳动物。多肽、表达载体在胃中分解，因而优选非口服施用。作为适于口服施用的制剂，可以列举出液剂、胶囊剂、香囊剂剂、片剂、混悬液剂、乳剂等。作为适于非口服施用(例如皮下注射、肌肉注射、局部注入、腹腔内施用等)的制剂，有水性和非水性的等渗无菌注射液剂，这其中还可以包含抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂、等渗化剂等。此外，可以列举出水性以及非水性的无菌混悬液剂，其中还可以包含混悬剂、增溶剂、增粘剂、稳定化剂、防腐剂等。该制剂可以按单位施用量或者多次施用量封入容器，像安瓿、小药瓶那样。此外，也可以将有效成分以及医药可接受的载体冻干，以将要使用时溶解或混悬于适当的无菌媒介物即可的状态保存。

医药组合物中的有效成分的含量通常为医药组合物总体的约0.1～100重量％、优选约1～99重量％、更优选约10～90重量％左右。

本发明的疫苗的施用量因施用对象、施用方法、施用方式等而异，在有效成分为上述(1)或(2)的多肽的情况下，通常对于1个成人，将多肽在每一次1μg～1000μg的范围、优选20μg～100μg的范围，通常4周～12周施用2次～3次，在抗体效价降低时，每次追加施用1次。在有效成分为上述(3)的表达载体的情况下，通常对于1个成人，将表达载体在每一次1μg～1000μg的范围、优选20μg～100μg的范围，通常4周～12周施用2次～3次，在抗体效价降低时，每次追加施用1次。

通过将本发明的疫苗施用于哺乳动物，诱导针对IL-17A的特异性免疫应答(产生特异性抗体、特异性T细胞增殖等)，使该哺乳动物获得针对IL-17A的中和抗体，抑制IL-17A的功能，从而发挥针对IL-17A作为恶化因子参与的疾病的预防或治疗效果。

本发明提供包含本发明的疫苗的1或2种以上成分的、由1或2个以上的容器构成的试剂盒。使用本发明的试剂盒，也能够预防IL-17作为恶化因子参与的疾病、或者治疗或减轻其症状。

IL-17A作为恶化因子参与的疾病的预防或治疗用IL-17A中和抗体

本发明提供包含识别以下(1)或(2)的多肽、抑制IL-17A的功能的抗体的IL-17A作为恶化因子参与的疾病的预防或治疗剂(本发明的预防或治疗剂)。

(1)包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列、与SEQID NO:1对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列、或与SEQ ID NO:8对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列的多肽；

(2)包含在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列、与SEQ ID NO:1对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列、或与SEQ ID NO:8对应的非人哺乳动物来源的氨基酸序列中，取代、缺失、插入或添加一个或数个氨基酸残基而成的氨基酸序列的多肽。

此外，本发明的预防或治疗剂优选包含识别以下(1’)或(2’)的多肽、抑制IL-17A的功能的抗体。

(1’)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、或SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列构成的多肽；

(2’)由SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列、或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽。

最优选的本发明的预防或治疗剂包含识别(1”)SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽、抑制IL-17A的功能的抗体。

识别所述(1)或(2)(或者(1’)、(2’)或(1”)，下同)的多肽的抗体通过结合

IL-17A、抑制其功能，能够成为针对上述的IL-17A作为恶化因子参与的疾病的有效的预防和/或治疗手段。即，通过施用该抗体，可以期待对于发生了IL-17A作为恶化因子参与的疾病的患者的治疗效果、以及对于有发病隐患的对象的预防效果。

上述的IL-17A作为恶化因子参与的疾病中，对于SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、肺癌、结肠癌、银屑病、多发性硬化症、特别是SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、肺癌、结肠癌的预防和/或治疗可以使用本发明的IL-17A中和抗体。

作为本发明的抗体，包括:多克隆抗体、单克隆抗体等天然型抗体、使用转基因小鼠、基因重组技术制造的嵌合抗体、人化抗体以及单链抗体、通过导入了人抗体产生基因的小鼠、噬菌体展示等制作的人抗体、以及它们的片段等。对于本发明的抗体没有特殊限制，只要分别是识别本发明的多肽、抑制IL-17A的功能的抗体即可，从对IL-17A的特异性的点来看，优选单克隆抗体。或者，从面向人的临床应用的点来看，本发明的抗体优选人化抗体或人抗体。

上述抗体片段是指前述抗体的一部分区域，具体地可以列举出例如:包含F(ab’)₂、Fab’、Fab、Fc区域的抗体片段、Fv(variable fragment of antibody)、sFv、dsFv(disulphide stabilised Fv)、dAb(single domain antibody)等(Exp.Opin.Ther.Patents，Vol.6，No.5，p.441-456，1996)。

上述人化抗体是指:仅是抗原识别位点来源于人以外的基因、且其余部位来源于人基因，采用基因重组技术制造的抗体。此外，上述人抗体是指:导入了人抗体产生基因的转基因小鼠(例如TransChromo Mouse(商标))所产生的人抗体、基于从将人的B淋巴细胞的mRNA、基因组来源的VH基因与VL基因随机组合构建的文库中利用噬菌体展示法等展示技术表达抗体可变区域而得到的人抗体文库制作的抗体。

此外，对于抗体的类别没有特殊限制，本发明的抗体还包含具有IgG、IgM、IgA、IgD或IgE等任何同种型的抗体。优选IgG或IgM，从抗体纯化的容易性等考虑，更优选IgG。

抗体的制造方法

多克隆抗体或单克隆抗体可以采用本身公知的方法来制造。即，用免疫原(本发明的多肽)与视需要的弗氏佐剂(Freund’s Adjuvant)一起对哺乳动物(例如对于多克隆抗体而言是小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠、兔、猫、犬、猪、山羊、马或牛等，优选小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠、山羊、马或兔)进行免疫。对于单克隆抗体而言，采用相同的方法对小鼠、大鼠、仓鼠等进行免疫。

本发明的多肽可以直接用作免疫原，也可以以与分子量1万以上的高分子化合物(例如载体蛋白等)的复合体的形式进行免疫。例如，可以按上述记载的方法合成SEQ IDNO:1所示的氨基酸序列构成的多肽，形成与牛血清白蛋白(BSA)、兔血清白蛋白(RSA)、卵清白蛋白(OVA)、钥孔戚血蓝蛋白(KLH)、甲状腺球蛋白(TG)、免疫球蛋白等载体蛋白的复合体，用作免疫原。

处于形成所述多肽与载体蛋白的复合体等目的，本发明的多肽中可以添加1～2个、优选1个氨基酸。添加的氨基酸的位置可以是多肽的任何位置，对此没特殊限定，但优选多肽的N末端或C末端。

在复合体的形成中，可以适用本身公知的方法，只要能够保持本发明的多肽的抗原性即可。例如，也可以在本发明的多肽中导入半胱氨酸残基，通过该半胱氨酸的侧链SH基与所述高分子化合物(载体蛋白)的氨基结合(MBS法)。此外，也可以使蛋白质的赖氨酸残基的ε氨基、α氨基等氨基之间结合(戊二醛法)。

多克隆抗体具体地可以如下述地制造。即，通过将免疫原1～数次注射于小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠、山羊、马或兔、优选山羊、马或兔、更优选兔的皮下内、肌肉内、静脉内、胡德垫内或者腹腔内进行免疫致敏。通常，从初次免疫其每隔约1～14日进行1～5次免疫，最终免疫约1～5日后从免疫致敏的该哺乳动物获取血清。

血清本身也可以用作多克隆抗体，但也可以通过超滤、硫酸铵分级、优球蛋白沉淀法、己酸法、辛酸法、离子交换色谱(DEAE或DE52等)、使用抗免疫球蛋白柱或者蛋白A/G柱、免疫原交联柱等的亲和柱色谱将该抗体进行分离和/或纯化，并使用所得的纯化抗体。

作为单克隆抗体的制造方法，可以列举出例如下述方法。首先，从上述免疫致敏动物得到的该抗体产生细胞与不具有自身抗体产生能力的骨髓瘤系细胞(骨髓瘤细胞)制备杂交瘤，并将该杂交瘤克隆化。即，以杂交瘤的培养上清作为检测物，采用免疫学方法，选择产生对于用于哺乳动物的免疫的本发明的肽显示特异亲和性、其与载体蛋白不显示交叉反应性的单克隆抗体的克隆。然后，从该杂交瘤的培养上清等采用本身公知方法制造抗体。

具体地，可以如下述地制造单克隆抗体。即，将免疫原在小鼠、大鼠或仓鼠(包含诸如人抗体产生转基因小鼠这样的制作成产生其他动物来源的抗体的转基因动物)的皮下内、肌肉内、静脉内、胡德垫内或者腹腔内注射或移植1～数次，从而实施免疫致敏。通常，从初次免疫起每约1～14日免疫1～4次，最终免疫约1～5日后从免疫致敏的该哺乳动物的脾脏等获取抗体产生细胞。

分泌单克隆抗体的杂交瘤(融合细胞)的制备可以按照Kohler和Milstein等的方法(Nature，Vol.256，p.495-497，1975)以及基于这些方法的改进方法来进行。即，如前述地，通过从免疫致敏的哺乳动物获取的脾脏、淋巴结、骨髄或扁桃体等、优选脾脏所含的抗体产生细胞与优选小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔或人等哺乳动物、更优选小鼠、大鼠或人来源的不具备自身抗体产生能力的骨髓瘤细胞的细胞融合得到杂交瘤。

作为用于细胞融合的骨髓瘤细胞，可以列举出例如:小鼠来源骨髓瘤P3/X63-AG8.653(653；ATCC No.CRL1580)、P3/NSI/1-Ag4-1(NS-1)、P3/X63-Ag8.U1(P3U1)、SP2/0-Ag14(Sp2/0、Sp2)、PAI、F0或BW5147、大鼠来源骨髓瘤210RCY3-Ag.2.3.、人来源骨髓瘤U-266AR1、GM1500-6TG-A1-2、UC729-6、CEM-AGR、D1R11或CEM-T15。

产生单克隆抗体的杂交瘤的筛选可以如下进行:采用例如ELISA等免疫测定法测定将所得杂交瘤在例如微量滴定平板内进行培养、观察到增殖的孔的培养上清对前述的免疫致敏使用的本发明的多肽的反应性以及所述上清对载体蛋白的反应性，并进行比较。

通过筛选而克隆化的杂交瘤用培养基(例如含10％胎牛血清的DMEM)进行培养。进而，可将该培养液的离心上清作为单克隆抗体溶液。此外，通过将该杂交瘤注入该杂交瘤所来源的动物的腹腔，在动物中产生腹水，可将从该动物得到的腹水作为单克隆抗体溶液。单克隆抗体优选按照像上述的多克隆抗体那样的方法进行分离和/或纯化。

此外，嵌合抗体可以参考例如日本特公平3-73280号公报等，人化抗体可以参考例如日本特表平4-506458号公报、特开昭62-296890号公报等，人抗体可以参考例如NatureGenetics，Vol.15，p.146-156，1997、Nature Genetics，Vol.7，p.13-21，1994、日本特表平4-504365号公报、国际公开第94/25585号、Nature，Vol.368，p.856-859，1994、特表平6-500233号公报等，分别进行制造。

基于噬菌体展示的抗体制作，可以通过例如从制作成用于人抗体筛选的噬菌体文库，通过生物淘洗回收、浓缩对抗原具有亲和性的噬菌体来进行，由此能够容易地得到Fab等抗体等。该情况下，优选使用本发明的多肽作为抗原，筛选抗体文库。关于优选的抗体文库以及抗体的筛选方法，可以参考Science，228:4075，p.1315-1317，1985、Nature，348，p.552-554，1990、Curr.Protein Pept.Sci.；1(2)，p.155-169，2000、国际公开第01/062907号等。可以使用由此得到的抗体片段，或者可以利用噬菌体所具有的DNA来制备抗体。

对本发明的预防或治疗剂中所含的所述抗体的配合量没有特殊限制，能够实现上述效果即可，通常为本发明的预防或治疗剂整体的0.001～90重量％，优选0.005～50重量％，更优选0.01～10重量％。

本发明的预防或治疗剂中除了作为有效成分的所述抗体以外，还可以含有医药可接受的载体。作为该载体，可以使用在制剂领域通常使用的载体，可以列举出例如:蔗糖、淀粉、甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、磷酸钙、碳酸钙等赋形剂、苯甲酸钠、亚硫酸氢钠、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯等防腐剂、柠檬酸、柠檬酸钠、乙酸等稳定剂、甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮、硬脂酸铝等混悬剂、表面活性剂等分散剂、水、生理盐水等稀释剂、甘油、聚乙二醇等底蜡等，但不限于此。

作为本发明的预防或治疗剂的施用剂型，可以列举出例如液剂、注射制剂等，但不限于此。此外，本发明的预防或治疗剂的剂型可以是速释制剂或缓释制剂等控释制剂。抗体一般可溶于水性溶剂，采用上述的任何剂型均容易被吸收。而且，还可以采用本身公知的方法来提高抗体的溶解性。

可用于IL-17A作为恶化因子参与的疾病的预防、治疗或减轻的本发明的预防或治疗剂，可以采用作为制剂制法本身公知的手段，使用上述抗体作为有效成分来制造。

例如，适合于全身施用的本发明的预防或治疗剂，可以通过在水性或非水性的等渗无菌注射液中溶解有效量的本发明的抗体来制造(例如注射制剂)。也可以通过将本发明的抗体冻干(例如冻干制剂)，将其溶解于水性或非水性的等渗无菌稀释液来制造。此外，适用于局部施用的本发明的预防或治疗剂，可以通过在诸如水或生理盐水的稀释液中溶解本发明的抗体来制造(例如液剂)。液剂可以通过使用了喷雾器的支气管、肺等的吸入疗法来使用。而且，这些剂中还可以包含抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂、等渗化剂等。这些本发明的预防或治疗剂可以按单位施用量或者多次施用量封入容器中，像安瓿以及小药瓶那样。

本发明的预防或治疗剂的施用量可根据作为有效成分含有的抗体的活性、种类或者配合量、施用对象、施用规程、施用对象的年龄以及体重等适宜设定，例如，作为成人(体重60kg)1日的施用量(有效量)，以抗体量计为0.1mg～1000mg、优选0.1mg～500mg、更优选0.1mg～300mg。本发明的预防或治疗剂可以在1日中视需要一次或分数次施用，也可以分数日施用。

本发明的预防或治疗剂可以与对上述的IL-17A作为恶化因子参与的疾病有效的公知预防、治疗剂组合使用。它们可以仅使用1种，或者可以多种组合使用。本说明书中，“组合使用”是指:将本发明的预防或治疗剂与IL-17A作为恶化因子参与的疾病的已知的预防、治疗剂组合起来使用，对其使用形式没有特殊限制。包括例如下述的任何情形:以含有本发明的预防或治疗剂和IL-17A作为恶化因子参与的疾病的已知的预防、治疗剂的医药组合物的形式施用，或者不经混合而分别制剂、同时或隔开时间间隔施用。

实施例

以下，列举出实施例，对本发明进行更具体的说明，但本发明不限于此。[实验例1]

DNA疫苗的制作

DNA疫苗载体

为了分离乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)，从BCCM/LMBP Plasmid Collection购买了plasmid pPLc3(登录号LMBP 2470)。设计、合成了以下引物(国际公开第2012/141280号)。

HBcF 5’-gcc atg gat atc gat cct tat aaa gaa ttc gga gc-3’(SEQ ID NO:3)

HBcR 5’-ggc ctc tca cta aca ttg aga ttc ccg aga ttg aga-3’(SEQ ID NO:4)

使用上述引物组，通过PCR扩增了HBc。

在pcDNA 3.1/V5-His TOPO TA Expression Kit(Invitrogen)中克隆了上述得到的HBc。通过诱变，在pcDNA3.1-HBc载体中分别插入了编码小鼠IL-17A的以下2种表位A1或表位A2的核酸序列。在以下的实施例中，如无特殊说明，将包含插入了编码小鼠IL-17A1表位的核酸序列的pcDNA3.1-HBc载体的疫苗表述为IL-17A1DNA疫苗，将包含插入了编码小鼠IL-17A2表位的核酸序列的pcDNA3.1-HBc载体的疫苗表述为IL-17A2DNA疫苗。载体的结构如图1所示。

小鼠IL-17A1表位RPSDYLNR(SEQ ID NO:5)

小鼠IL-17A2表位DHHMNSV(SEQ ID NO:7)

[实验例2]

对小鼠施用DNA疫苗

对于6周龄的下述各雄性小鼠的大腿肌肉，用注射器注射DNA疫苗，通过对该部位进行电穿孔来进行了施用。每2周施用了3次(120μg/60μl×1部位/次)。

实验1:抗体效价测定、血中、尿中各种细胞因子测定、存活率解析

NZBWF1小鼠(SLE疾病模型)

HBc-IL-17A1(IL-17A1DNA疫苗)组:6只

HBc(pcDNA3.1-HBc载体)组:6只

盐水组:10只

每周测定体重，每4周采血清。

施用计划如图4A所示。

MRL/lpr小鼠(SLE疾病模型)

HBc-IL-17A1(IL-17A1DNA疫苗)组:9只

盐水组:9只

每周测定体重，每4周采血清。

实验2:抗体效价测定、各脏器解析

MRL/lpr小鼠

HBc-IL-17A1(IL-17A1DNA疫苗)组:6只

盐水组:6只

每周测定体重，每4周采血清。

实施例1小鼠IL-17A肽的抗原性

利用ELISA进行抗IL-17A抗体效价测定

平板的制作:将小鼠IL-17A1表位+BSA缀合物、小鼠IL-17A2表位+BSA缀合物以10μg/ml的浓度分注于96孔平板，4℃静置过夜。将重组小鼠IL-17A以0.25μg/ml的浓度分注于96孔平板，4℃静置过夜。

将所述平板用PBS 200μl洗涤1次后，用含5％脱脂牛奶的PBS封闭2小时。将第一抗体(小鼠抗血清)用含5％脱脂牛奶的PBS进行梯度稀释，每50μl地加载于96孔平板，4℃温育过夜。

将所述平板用PBS-T(0.05％吐温)200μl洗涤7次，将第二抗体(抗小鼠IgG Ab-HRP标记)进行1/1000稀释(5％脱脂牛奶)，各添加50μl，常温温育3小时。将该平板用PBS-T(0.05％吐温)200μl洗涤3次，添加TMB溶液50μl，遮光常温温育30分钟。添加0.5N H₂SO₄ 50μl终止反应，测定了450nm的吸光度。

在将Balb/c小鼠用IL-17A1DNA疫苗或IL-17A2DNA疫苗进行免疫的预备实验中，确认了施用了IL-17A1DNA疫苗的Balb/c小鼠的抗体效价提升(图3)。而且，在图4A所示的施用计划中，对NZBWF1小鼠施用IL-17A1DNA疫苗的结果，在第6周确认了抗体效价的提升(图4B)，确认产生了正确识别重组小鼠IL-17A的抗体(图5)。而且，确认抗IL-17A1抗体效价长时间保持(图7B)。

利用Western印迹确认抗小鼠IL-17A抗体对重组小鼠IL-17A的反应性

按常规方法，将蛋白质上样于各泳道，进行了电泳。电泳后，转印于膜上，封闭后添加各第一抗体，4℃温育过夜。然后，与第二抗体反应，通过生色反应检测抗体的结合。结果如图2所示。

泳道1:重组小鼠IL-17A

泳道2:小鼠IL-17A1表位+BSA缀合物

泳道3:小鼠IL-17A2表位+BSA缀合物

第一抗体

A:施用了IL-17A1DNA疫苗的Balb/c小鼠的抗血清

B:市售的抗小鼠IL-17A抗体

C:市售的抗BSA抗体

像市售的抗小鼠IL-17A抗体那样，施用了IL-17A1DNA疫苗的小鼠的抗血清也与重组小鼠IL-17A结合。

施用了IL-17A1DNA疫苗的小鼠的抗血清特异性识别小鼠IL-17A1表位+BSA缀合物，但不与小鼠IL-17A2表位+BSA缀合物反应。

而且，重组小鼠IL-17A中出于稳定化的目的添加了大量的BSA，市售的抗BSA抗体在识别小鼠IL-17A1表位+BSA缀合物、小鼠IL-17A2表位+BSA缀合物的同时，也识别这个。

实施例2SLE模型小鼠中的IL-17A疫苗的效果

血中IL-1β、TNF-α以及IL-17A浓度、尿中MCP-1浓度的测定

使用Quantikine ELISA试剂盒，按照厂商指定的规程，进行了IL-1β、TNF-α、IL-17A以及MCP-1的浓度测定。血清使用各25μl。尿使用各50μl。使用试剂盒附带的标准品制作了标准曲线，对各细胞因子浓度进行了定量。在NZBWF1小鼠的IL-17A1DNA疫苗施用组中，确认了血中IL-1β的显著减少(图6E)。还确认到了血中IL-17A浓度、尿中MCP-1浓度、血中TNF-α浓度的减少倾向(图6C、B、F)。此外，在实验1所记载的MRL/lpr小鼠的IL-17A1DNA疫苗施用组中，也确认了TNF-α的显著减少(图6D、8A)。

尿定性检查

从麻醉的小鼠取随机尿。使用尿Multistix试纸，测定了尿蛋白、尿肌酐、尿白蛋白、尿潜血、尿比重等。在NZBWF1小鼠的IL-17A1DNA疫苗施用组中，确认了尿蛋白质的减少倾向(图6A)。

存活率

对作为SLE的模型小鼠的NZBWF1小鼠施用IL-17A1DNA疫苗后，每日进行观察，记录小鼠死亡日。每1周统计死亡的小鼠的数量，制作了存活率曲线。IL-17A1DNA疫苗施用组的长期观察结果确认了该疫苗施用组的生存期显著延长(图7A)。此外，在实验1记载的MRL/lpr小鼠的DNA疫苗施用组中，也确认到寿命延长倾向(图8B)。

脏器重量解析

对实验2记载的MRL/lpr小鼠施用IL-17A1DNA疫苗后，考察了脏器的重量变化。在HBc-IL-17A1组以及盐水组这2组间体重无显著差异(图9A)。作为对照，测定了相对于总体重的心脏重量，无显著差异(图9B)。另一方面，确认了IL-17A1DNA疫苗施用后，脾脏重量显著减少(图9C)。而且，确认到相对于总体重的脾脏重量的比例也显著减少(图9D)。SLE患者中可见脾肿，这些模型小鼠中相对于总体重的脾脏重量增加反映了SLE的恶化。因此，本结果可以证明IL-17A1DNA疫苗具有SLE治疗效果。

统计方法

存活率采用Kaplan-Meier法进行统计处理。

病理组织的解剖计划如图10所示。

实验3

NZBWF1小鼠

HBc-IL-17A1(IL-17A1DNA疫苗)组:9只

盐水组:9只

每周测定体重，每4周采血清。

MRL/lpr小鼠

HBc-IL-17A1(IL-17A1DNA疫苗)组:9只

盐水组:9只

每周测定体重，每4周采血清。

组织染色

在免疫组织染色解析中，将摘除的各脏器在4％多聚甲醛中固定24小时，包埋于石蜡中，切成4μm的切片。使切片与第一抗体(抗F4/80抗体)和第二抗体(HRP标记抗大鼠IgG抗体)反应。将载玻片用苏木精进行对比染色，用于显微镜观察。在组织检查测定中，解剖肾脏、下颌下腺以及肝脏，在4％多聚甲醛中固定过夜，包埋于石蜡中。将肾脏的4μm切片用PAS染色进行染色。将下颌下腺和肝脏的4μm切片用HE染色进行染色。

肾脏

PAS染色中，确认了NZBWF1小鼠、或MRL/lpr小鼠的肾病变程度。结果如图11A、B所示。疫苗施用组中，小球、间质的破坏得到抑制。F4/80的免疫染色中，确认了巨噬细胞的浸润程度。结果如图11C、D所示。疫苗施用组中，确认了对小球周围、间质的巨噬细胞浸润得到抑制。

下颌下腺

HE染色中，确认了NZBWF1小鼠的下颌下腺炎的程度。结果如图12所示。确认了疫苗施用组的下颌下腺炎的抑制。

肝脏

为了确认疫苗的安全性，对肝脏的组织切片进行了HE染色，并进行观察。结果如图13所示。在NZBWF1小鼠(图13A)以及MRL/lpr小鼠(图13B)的任何小鼠中，在疫苗施用组以及盐水施用组均确认到无病理所见。

实施例3结肠炎模型小鼠中IL-17A疫苗的效果

对于6周龄的下述各雄性小鼠，每周用TNBS溶液(2mg/100μl/次)灌肠，对大腿肌肉采用电穿孔每2周施用3次IL-17A1DNA疫苗(120μg/60μl×1部位/次)。第8周处死小鼠。施用计划如图14(A)所示。

实验4

Balb/c小鼠

正常组(TNBS(-)):1只

疫苗组(HBc-IL-17A1组；TNBS(+)):3只

盐水组(TNBS(+)):3只

体重

考察了对实验4中记载的Balb/c小鼠施用TNBS的8周后，小鼠的体重变化。小鼠的体重增加量随着TNBS诱导的结肠炎而减少(盐水组)，但在疫苗组中未见该减少效果(图14(B))。

结肠长度

考察了对实验4中记载的Balb/c小鼠施用TNBS的8周后，小鼠的结肠长度。结肠长度随着TNBS诱导的结肠炎而变短(盐水组)，但该效果在疫苗组中得到了抑制(图14(C))。

结肠

将处死的小鼠的结肠解剖，于4％多聚甲醛中固定过夜，包埋于石蜡中。将结肠的4μm切片用HE染色进行染色，进行了组织学研究。盐水组中确认了炎症细胞的浸润等病理所见(图14(D))。此外，对HE染色切片的病理学所见进行了评分。在疫苗组中，确认了H&E评分的降低(图14(E))。

以上的结果显示，IL-17A疫苗在TNBS诱导结肠炎模型小鼠中具有结肠炎抑制效果。

实施例4关节炎模型小鼠中IL-17A疫苗的效果

对于6周龄的下述各雄性小鼠的大腿肌肉，采用电穿孔每2周施用3次小鼠IL-17A1DNA疫苗(120μg/60μl×1部位/次)。疫苗初次施用的28日后通过施用Type II胶原和CFA(完全弗氏佐剂)，疫苗初次施用的42日后通过施用Type II胶原和IFA(不完全弗氏佐剂)，诱导关节炎，以后每周进行3次关节炎程度的观察，并进行评分。施用计划如图15(A)所示。

实验5

DBA/1小鼠

疫苗组(HBc-IL-17A1组):6只

盐水组(生理盐水组):6只

临床评分

考察了实验5中记载的DBA/1小鼠的关节炎的临床评分和临床所见。可以确认，疫苗组具有对关节炎的发病与进展的抑制效果(图15(B)、(C))。

以上结果显示，IL-17A疫苗在基于Type II胶原的关节炎模型小鼠中，具有关节炎的抑制效果。

实施例5结肠癌模型小鼠中IL-17A疫苗的效果

对于6周龄的下述各雄性小鼠的大腿肌肉，每2周施用3次包含由小鼠IL-17A1表位组成的肽的疫苗(缀合KLH)(25μg/25μl+佐剂25μl/次(佐剂在初次施用时为CFA，第2、3次为IFA))。疫苗初次施用5周后，接种小鼠结肠癌细胞株CT26细胞(5×10⁵细胞/只)，以后每周测量肿瘤体积(0.5×长径×短径×短径)。此外，观察持续至全部小鼠死亡，确认了生存期。施用计划如图16(A)所示。

实验6

Balb/c小鼠

疫苗组(IL-17A1-KLH组):6只

盐水组(生理盐水组):6只

肿瘤体积

考察了对实验6记载的Balb/c小鼠接种CT26细胞8日和15日后，小鼠的肿瘤体积。可以确认，疫苗组具有肿瘤体积的增大抑制效果(图16(B))。

存活率

对施用了疫苗的Balb/c小鼠接种CT26细胞后，每日观察，记录小鼠死亡的日期。疫苗施用组的长期观察结果可以确认，生存期显著延长(图16(C))。

以上结果显示，IL-17A疫苗在基于CT26细胞接种的结肠癌模型小鼠中，具有肿瘤增大抑制效果和生存期延长效果。

实施例6肺癌模型小鼠中IL-17A疫苗的效果

对于6周龄的下述各雄性小鼠的大腿肌肉，采用电穿孔每2周施用3次小鼠IL-17A1DNA疫苗(120μg/60μl×1部位/次)。疫苗初次施用的5周后，接种小鼠肺癌细胞株LLC细胞(5×10⁵细胞/只)，以后每周测量肿瘤体积(0.5×长径×短径×短径)。第9周处死小鼠后，确认了肿瘤的重量、肺转移、肝转移的有无。施用计划如图17(A)所示。

实验7

C57BL/6小鼠

疫苗组(HBc-IL-17A1组):5只

盐水组(生理盐水组):5只

体重

考察了实验7中记载的处死后的小鼠的体重。小鼠的体重在两组间未确认显著差异(图17(B))。

肿瘤体积

对实验7记载的C57BL/6小鼠接种LLC细胞后，每周考察肿瘤体积。可以确认，疫苗组具有抑制肿瘤增大的效果(图17(C))。

肿瘤重量

考察了实验7中记载的处死后的小鼠的肿瘤重量。可以确认，疫苗组具有抑制肿瘤重量增大的效果(图17(D))。

转移的有无

在疫苗组中，未确认有肺转移、肝转移。在疫苗未施用组中，确认了肺转移(图17(E)、(F)、(G))。

以上结果显示，IL-17A疫苗在基于LLC细胞接种的肺癌模型小鼠中，具有肿瘤增大抑制效果和转移抑制效果。

实施例7人IL-17A肽的抗原性

基于ELISA的抗IL-17A抗体效价测定

制作了包含由与小鼠IL-17A1表位(RPSDYLNR(SEQ ID NO:5))对应的以下的人IL-17A1表位组成的肽的疫苗(KLH缀合)，对Balb/c小鼠每间隔2周皮内施用3次，初次施用的6周后，按照实施例1所述的方法测定了血清抗体效价。

人IL-17A1表位RSSDYYNR(SEQ ID NO:1)

结果确认，施用了疫苗的Balb/c小鼠的抗体效价提高(图18)。此外，所述血清对小鼠IL-17A1表位也显示交叉反应性(图19(A))。而且，通过施用包含由小鼠IL-17A1表位组成的肽的疫苗而得到的血清，对于人IL-17A1表位显示交叉反应性(图19(B))。

此外，制作了包含由以下的人IL-17A的2种表位(人IL-17A2表位、人IL-17A3表位)组成的肽的疫苗(KLH缀合)，对Balb/c小鼠每间隔2周皮内施用3次，初次施用的6周后，按照实施例1所述的方法测定了血清抗体效价。

人IL-17A2表位ADGNVDYHMNSVPIQQE(SEQ ID NO:8)

人IL-17A3表位LRREPPHCPNSFRL(SEQ ID NO:9)

结果确认，施用了包含由人IL-17A2表位组成的肽的疫苗的Balb/c小鼠的抗体效价提高(图20)。

而且，制作了包含以下的由作为人IL-17A1表位的部分序列的人IL-17A4组成的肽的疫苗(KLH缀合)。此外，按照实验例1制作了包含编码作为人IL-17A1表位的部分序列的人IL-17A5、人IL-17A6、或人IL-17A7的DNA的疫苗。对于Balb/c小鼠，每间隔2周皮内施用3次，初次施用的6周后，按照实施例1所述的方法测定了血清抗体效价。

人IL-17A4表位SDYYN(SEQ ID NO:11)

人IL-17A5表位SDYY(SEQ ID NO:12)

人IL-17A6表位SDY

人IL-17A7表位DYY

结果显示，施用了包含由人IL-17A4表位组成的肽的疫苗、包含编码人IL-17A5表位、人IL-17A6表位或人IL-17A7表位的DNA的疫苗的Balb/c小鼠的抗体效价提高(图21)。

实施例8关节炎模型小鼠中人IL-17A疫苗的效果

对于6周龄的下述各雄性小鼠的大腿肌肉，每2周施用3次包含由人IL-17A1表位、人IL-17A2表位或人IL-17A4表位组成的肽的疫苗(KLH缀合)(120μg/60μl×1部位/次)。疫苗初次施用的28日后通过施用Type II胶原和CFA(完全弗氏佐剂)，疫苗初次施用的42日后通过施用II型胶原和IFA(不完全弗氏佐剂)，诱导关节炎，以后每周3次观察关节炎的程度，并评分。施用计划如图22(A)所示。

实验8

DBA/1小鼠

H17(人IL-17A1表位)组:3只

AF4(人IL-17A4表位)组:3只

AF5(人IL-17A2表位)组:3只

对照(KLH)组:4只

胶原(-)组:3只

临床评分

考察了实验8中记载的DBA/1小鼠的关节炎的临床评分。可以确认，由人IL-17A1表位、人IL-17A2表位或人IL-17A4表位组成的疫苗组对关节炎的发病和进展具有抑制效果(图22(B))。

以上结果显示，人IL-17A疫苗在基于Type II胶原的关节炎模型小鼠中，具有关节炎抑制效果。

实施例9对IL-17A的体外(invitro)中和活性

对培养基中的正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)添加了重组人IL-17A，采用ELISA测定了此时IL-6的分泌量，结果是通过IL-17A的添加，IL-16的分泌被促进(仅IL-17)。但是，在将从用包含由人IL-17A1表位组成的肽的疫苗免疫的小鼠的抗血清纯化得到的IgG与IL-17A同时添加的情况下，IL-6的分泌被抑制(IL-17+抗血清)。此外，在将从非免疫小鼠的抗血清纯化得到的IgG与IL-17A同时添加的情况下，IL-6的分泌基本未被抑制(IL-17+对照血清)。这些结果如图23所示。

以上结果显示，在包含由人IL-17A1表位组成的肽的疫苗的免疫中得到的抗体，在体外抑制培养细胞的IL-6分泌。因此，提示该抗体具有IL-17A活性的中和作用，提示对IL-17A参与恶化的疾病的治疗效果是有效的。

通过着重描述优选实施方式对本发明进行了说明，对本领域技术人员而言，优选实施方式可变更是显而易见的。

这里所述的包括专利以及专利申请说明书在内的出版物中记载的内容，在此通过引用全部并入本说明书，相当于其全部已经明确记载。

工业实用性

如以上详细描述的，本发明的疫苗能够提高针对IL-17A的抗体效价，不仅是SLE，还可终于类风湿性关节炎、炎症性肠病、癌、银屑病、多发性硬化症、动脉硬化症等IL-17A参与病理学恶化的其它疾病，能够对这些疾病的治疗等做出巨大贡献。

本申请要求在日本提出申请的特愿2013-273133(申请日:2013年12月27日)的优先权，其内容全部并入本说明书中。

Claims (11)

1.以下(1)～(3)中的任意物质在制备IL-17A作为恶化因子参与的疾病的预防或治疗用疫苗中的用途:

(1)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽；

(2)由SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列、或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽；以及

(3)能够表达上述(1)或(2)的多肽的表达载体。

2.权利要求1所述的用途，其中，表达载体包含编码乙型肝炎病毒核心(HBc)的核苷酸序列。

3.权利要求1所述的用途，其中，表达载体包含在SEQ ID NO:17所示的核苷酸序列的核苷酸编号:246与核苷酸编号:247之间插入编码所述(1)或(2)的多肽的核苷酸序列而成的核苷酸序列。

4.权利要求1-3中任一项所述的用途，其包含载体蛋白和/或佐剂。

5.权利要求1-3中任一项所述的用途，其中IL-17A作为恶化因子参与的疾病选自下组:SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、肿瘤、银屑病、以及多发性硬化症。

6.权利要求1-3中任一项所述的用途，其中，所述用途是以下(1)或(2)的用途:

(1)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽；以及

(2)能够表达上述(1)的多肽的表达载体；

且IL-17A作为恶化因子参与的疾病选自下组:SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、结肠癌、以及肺癌。

7.权利要求1-3中任一项所述的用途，其中，所述用途是以下(1)～(3)中的任意物质的用途:

(1)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽；

(2)由SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽；以及

(3)能够表达上述(1)或(2)的多肽的表达载体；

且IL-17A作为恶化因子参与的疾病是类风湿性关节炎。

8.识别以下(1)或(2)的多肽且抑制IL-17A的功能的抗体在制备IL-17A作为恶化因子参与的疾病的预防或治疗剂中的用途:

(1)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽；

(2)由SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列、或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽。

9.权利要求8所述的用途，其中，IL-17A作为恶化因子参与的疾病选自下组:SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、肿瘤、银屑病、以及多发性硬化症。

10.权利要求8或9所述的用途，其中，所述用途是识别由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成的多肽且抑制IL-17A的功能的抗体的用途，其中，IL-17A作为恶化因子参与的疾病选自下组:SLE、炎症性肠病、类风湿性关节炎、结肠癌、以及肺癌。

11.权利要求8或9所述的用途，其中，所述用途是识别由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列构成的多肽且抑制IL-17A的功能的抗体的用途，其中，IL-17A作为恶化因子参与的疾病是类风湿性关节炎。

Images