CN106119377A - 一种鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的引物、试剂盒及鉴别方法 - Google Patents
一种鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的引物、试剂盒及鉴别方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106119377A CN106119377A CN201610529613.3A CN201610529613A CN106119377A CN 106119377 A CN106119377 A CN 106119377A CN 201610529613 A CN201610529613 A CN 201610529613A CN 106119377 A CN106119377 A CN 106119377A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- snapper
- black porgy
- filial generation
- primer
- test kit
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
- C12Q1/686—Polymerase chain reaction [PCR]
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公布了一种鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的引物、试剂盒及鉴别方法，其中试剂盒包括引物、缓冲液、酶等，鉴别方法首先采集待鉴别的鲷鱼样品，提取基因组DNA；然后以该基因组DNA为模板，进行PCR扩增；最后对扩增产物进行酶切、电泳并根据特征条带进行鉴定。本发明有助于快速、准确鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代，在鲷鱼种质鉴定、保种和选育中有极大的应用价值。
Description
技术领域
本发明属于鱼类分子标记技术领域，涉及一种鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的引物、试剂盒及鉴别方法。
背景技术
真鲷Pagrosomus major属鲈形目、鲷科、真鲷属，黑鲷Spraus macrocephalus属鲈形目、 鲷科、黑鲷属，它们都是我国重要的海水养殖经济鱼类。真鲷具有个体大、生长快、肉质好、色泽美、抗病能力强等特点，但对盐度、温度变化敏感，抗逆性较差；黑鲷对温度、盐度适应范围较广，但生长慢，养成周期长。通过真鲷和黑鲷杂交育种，可以获得具有双亲优良性状的杂交子代，从而提高鲷鱼养殖经济效益，推动鲷鱼养殖业的发展。但杂交种形态又与亲本很相似，因此，生产上很容易造成鲷鱼种质混杂，导致种质混杂退化。运用分子生物技术在DNA水平上寻找不同鲷鱼的差异，可以快速、准确鉴别不同鲷鱼，为鲷鱼的品种鉴定、种质资源保护和育种等提供重要依据。
发明内容
本发明的目的是提供一种鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的引物、试剂盒及鉴别方法，有助于快速、准确鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代，在鲷鱼种质鉴定、保种和选育中有极大的应用价值。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种用于鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的扩增引物，该引物的正义引物序列为：5′GACGATTATGATGATGGCCACTGAAC 3′，反义引物为：5′ CTCCCCATCCACCTGGACGAC 3′。
一种用于鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的试剂盒，该试剂盒含A试剂和B试剂，其中
A试剂的组成如下：
2×反应缓冲液；
Mg2+ 4 mmol/L；
Taq酶 0.05U/μL
dNTP 400μmol/L；
正义、反义扩增引物各0.4μmol/L；
扩增引物：该引物的正义引物序列为：5′GACGATTATGATGATGGCCACTGAAC 3′，反义引物为：5′ CTCCCCATCCACCTGGACGAC 3′；
B试剂的组成如下：
TaaI内切酶 1U/μL；
2×buffer Tango 。
所述的试剂盒鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的方法，包括以下步骤：
步骤一，采集待鉴别的鲷鱼样品，提取基因组DNA；
步骤二，以步骤一得到的DNA为模板进行PCR扩增；
步骤三，对步骤二的扩增产物进行酶切与电泳检测；
步骤四，通过步骤三的电泳结果鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代，其中真鲷有3条条带，分别为147bp，133 bp和71 bp；黑鲷有2条条带，分别为231 bp和153 bp；杂交鲷有4条条带，分别为231 bp，153 bp，133 bp和71 bp。
所述的鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的方法，其步骤二中PCR扩增体系为：PCR体系总体积20 µL，其中含权利要求2所述的试剂盒A试剂10µL ，DNA模板 100 ng～200 ng，用灭菌双蒸馏水补足体积，最终PCR体系各组份的含量为：1×反应缓冲液，Mg2+ 2 mmol/L，dNTP200μmol/L，上下游引物各0.2μmol/L，Taq酶0.025U/μL，DNA模板 5～10ng/μL。
所述的鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的方法，步骤二中PCR扩增条件为：94℃2min；94℃ 40s，60℃退火 40s，72℃ 40min，30个循环；72℃ 延伸5 min，4℃保存。
所述的鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的方法，步骤三中酶切体系为：酶切体系总体积20 µL，其中含权利要求2所述的试剂盒B试剂10µL，步骤二中PCR反应产物10μL，最终酶切体系各组份的含量为：PCR反应产物0.5μL/μL ，1×buffer Tango，TaaI内切酶0.5U/μL；65℃酶切2～16 h。
所述的鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的方法，其特征在于，步骤三中电泳为琼脂糖凝胶电泳。
本发明的有益效果：运用本发明所述的方法，可以在分子水平快速准确地同时将真鲷、黑鲷及其杂交后代区别开来，可以检测真鲷或黑鲷是否存在种质混杂。
附图说明
图1为本发明实施例1中真鲷、黑鲷及其杂交后代PCR产物酶切电泳结果，
其中M：分子量标准DL1000 DNA Marker
1-8：真鲷和黑鲷杂交后代
9-16：真鲷
16-24：黑鲷
图2为本发明实施例2中待检真鲷PCR产物酶切电泳检测结果，
其中M：分子量标准DL1000 DNA Marker
1-12：待检真鲷
13-18：真鲷和黑鲷杂交后代；
图3为本发明实施例3中待检真鲷，黑鲷PCR产物酶切电泳检测结果，
其中M：分子量标准DL1000 DNA Marker
1-6：真鲷和黑鲷杂交后代
7-13：真鲷
14-21：黑鲷。
具体实施方式
下列实施例中基因组DNA参照文献提取（萨姆布鲁克J，拉塞尔D W著. 分子克隆试验指南 [M]. 3版.黄培堂，王嘉玺，朱厚础，等，译.北京：科学出版社，2002：463-471）。
实施例1
种类确定的真鲷、黑鲷及其杂交后代各8尾共24个样品，从江苏省海洋水产研究所吕四基地采得。每尾鱼取30μL血细胞抽提基因组DNA，分别以提取得到的基因组DNA为模板，进行PCR扩增，正义引物为：5′GACGATTATGATGATGGCCACTGAAC 3′（SEQ ID NO.1），反义引物为：5′CTCCCCATCCACCTGGACGAC 3′（SEQ ID NO.2），PCR体系总体积20 µL，其中含1×反应缓冲液，Mg2+ 2 mmol/L，dNTP 200μmol/L，上下游引物各0.2μmol/L，Taq酶0.5U，DNA模板 100 ng～200 ng，用灭菌双蒸馏水补足体积。PCR反应条件为：94℃ 2min；94℃ 40s，60℃退火 40s，72℃ 40min，30个循环；72℃ 延伸5 min，4℃保存。PCR反应结束后，每个样取PCR反应产物7μL用1.5％的琼脂糖进行电泳检测，结果都扩出1条380bp左右的目的条带。在剩余的PCR反应产物中，每个样品配制总体积20μL酶切体系，含PCR反应产物10μL，1×buffer Tango，TaaI内切酶10U，灭菌双蒸馏水补足体积， 65℃酶切12 h后，酶切产物用3%的琼脂糖电泳拍照记录电泳结果。如图1所示电泳检测发现，真鲷都有3条条带，大小分别为147bp，133 bp和71 bp；黑鲷都有2条条带，分别为231 bp和153 bp；杂交鲷都有4条条带，分别为231 bp，153bp，133 bp和71 bp。由电泳图谱可将真鲷、黑鲷及其杂交后代区别开来。
实施例2
待检真鲷12尾，以真鲷和黑鲷杂交鲷鱼6尾做对照，剪取每尾鱼尾鳍并抽提基因组DNA，采用如实施例1所述的方法进行PCR扩增、检测、再酶切，酶切产物用3%的琼脂糖电泳拍照记录电泳结果。如图2所示电泳检测发现，待检12尾真鲷都有3条条带，大小分别为147bp，133bp和71 bp；6尾真鲷和黑鲷杂交鲷鱼都有4条条带，分别为231 bp，153 bp，133 bp和71 bp。由电泳图谱可判定：所检测的12尾鲷鱼均为真鲷。
实施例3
待检真鲷7尾，黑鲷8尾，以真鲷和黑鲷杂交鲷6尾做对照。每尾鱼取30μL血细胞并抽提基因组DNA。采用如实施例1所述的方法进行PCR扩增、检测、再酶切，酶切产物用3%的琼脂糖电泳拍照记录电泳结果。如图3所示电泳检测发现，6尾真鲷和黑鲷杂交鲷鱼都有4条条带，分别为231 bp，153 bp，133 bp和71 bp；待检7尾真鲷都有3条条带，大小分别为147bp，133bp和71 bp；待检8尾黑鲷都有2条条带，分别为231 bp和153 bp由电泳图谱可判定：所检测的7尾真鲷，8尾黑鲷都为纯种，没有种质混杂。
实施例4
按照本发明的方法设计一种试剂盒，该试剂盒用来鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代，该试剂盒含A试剂和B试剂。
A试剂的组成如下：
2×反应缓冲液；
Mg2+ 4 mmol/L；
Taq酶 0.05U/μL
dNTP 400μmol/L；
正义、反义扩增引物各0.4μmol/L；
扩增引物：该引物的正义引物序列为：5′GACGATTATGATGATGGCCACTGAAC 3′，反义引物为：5′ CTCCCCATCCACCTGGACGAC 3′；
B试剂的组成如下：
TaaI内切酶 1U/μL；
2×buffer Tango 。
使用以上试剂盒鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的方法如下：
步骤一，采集待鉴别的鲷鱼样品，提取基因组DNA；
步骤二，以步骤一得到的DNA为模板进行PCR扩增。PCR扩增体系为：PCR体系总体积20 µL， PCR体系总体积20 µL，取步骤一得到的DNA为模板2μL，A试剂10μL，灭菌双蒸馏水补足体积，最终PCR体系各组份的含量为：1×反应缓冲液，Mg2+ 2 mmol/L，dNTP 200μmol/L，上下游引物各0.2μmol/L，Taq酶0.025U/μL，DNA模板 5～10ng/μL。然后进行PCR扩增。扩增结束后，每个样取PCR反应产物7μL用1.5％的琼脂糖进行电泳检测。
步骤三，对步骤二的扩增产物进行酶切与电泳检测。其中酶切体系总体积20 µL，其中含B试剂10µL，步骤二中PCR反应产物10μL，最终酶切体系各组份的含量为：PCR反应产物0.5μL/μL ，1×buffer Tango，TaaI内切酶0.5U/μL；65℃酶切2～16 h。
步骤四，通过步骤三的电泳结果鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代，其中真鲷有3条条带，分别为147bp，133 bp和71 bp；黑鲷有2条条带，分别为231 bp和153 bp；杂交鲷有4条条带，分别为231 bp，153 bp，133 bp和71 bp。
序列表
<110> 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心，江苏省海洋水产研究所
<120> 一种鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的引物、试剂盒及鉴别方法
<130> 1
<160> 2
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
gacgattatg atgatggcca ctgaac 26
<210> 2
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
ctccccatcc acctggacga c 21
Claims (7)
1.一种用于鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的扩增引物，其特征在于，该引物的正义引物序列为：5′GACGATTATGATGATGGCCACTGAAC 3′，反义引物为：5′ CTCCCCATCCACCTGGACGAC3′。
2.一种用于鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的试剂盒，其特征在于，该试剂盒含A试剂和B试剂，其中
A试剂的组成如下：
2×反应缓冲液；
Mg2+ 4 mmol/L；
Taq酶 0.05U/μL
dNTP 400μmol/L；
正义、反义扩增引物各0.4μmol/L；
扩增引物：该引物的正义引物序列为：5′GACGATTATGATGATGGCCACTGAAC 3′，反义引物为：5′ CTCCCCATCCACCTGGACGAC 3′；
B试剂的组成如下：
TaaI内切酶 1U/μL；
2×buffer Tango 。
3.权利要求2所述的试剂盒鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一，采集待鉴别的鲷鱼样品，提取基因组DNA；
步骤二，以步骤一得到的DNA为模板进行PCR扩增；
步骤三，对步骤二的扩增产物进行酶切与电泳检测；
步骤四，通过步骤三的电泳结果鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代，其中真鲷有3条条带，分别为147bp，133 bp和71 bp；黑鲷有2条条带，分别为231 bp和153 bp；杂交鲷有4条条带，分别为231 bp，153 bp，133 bp和71 bp。
4.根据权利要求3所述的鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的方法，其特征在于，步骤二中PCR扩增体系为：PCR体系总体积20 µL，其中含权利要求2所述的试剂盒A试剂10µL ，DNA模板 100 ng～200 ng，用灭菌双蒸馏水补足体积，最终PCR体系各组份的含量为：1×反应缓冲液，Mg2+ 2 mmol/L，dNTP 200μmol/L，上下游引物各0.2μmol/L，Taq酶0.025U/μL，DNA模板5～10ng/μL。
5.根据权利要求3所述的鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的方法，其特征在于，步骤二中PCR扩增条件为：94℃ 2min；94℃ 40s，60℃退火 40s，72℃ 40min，30个循环；72℃ 延伸5min，4℃保存。
6.根据权利要求3所述的鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的方法，其特征在于，步骤三中酶切体系为：酶切体系总体积20 µL，其中含权利要求2所述的试剂盒B试剂10µL，步骤二中PCR反应产物10μL，最终酶切体系各组份的含量为：PCR反应产物0.5μL/μL ，1×bufferTango，TaaI内切酶0.5U/μL；65℃酶切2～16 h。
7.根据权利要求3所述的鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的方法，其特征在于，步骤三中电泳为琼脂糖凝胶电泳。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610529613.3A CN106119377B (zh) | 2016-07-06 | 2016-07-06 | 一种鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的引物、试剂盒及鉴别方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610529613.3A CN106119377B (zh) | 2016-07-06 | 2016-07-06 | 一种鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的引物、试剂盒及鉴别方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106119377A true CN106119377A (zh) | 2016-11-16 |
| CN106119377B CN106119377B (zh) | 2019-11-29 |
Family
ID=57282872
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610529613.3A Expired - Fee Related CN106119377B (zh) | 2016-07-06 | 2016-07-06 | 一种鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的引物、试剂盒及鉴别方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106119377B (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106119389A (zh) * | 2016-08-23 | 2016-11-16 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种鉴别黑鲷及黑鲷真鲷反交子代的方法 |
| CN110607375A (zh) * | 2019-10-11 | 2019-12-24 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种快速鉴定斑石鲷和金钱鱼的方法 |
| CN114350815A (zh) * | 2021-12-30 | 2022-04-15 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种利用issr引物鉴别黑鲷真鲷杂交子代的分子标记方法 |
| CN114480666A (zh) * | 2021-12-30 | 2022-05-13 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种利用issr分子标记区分黑鲷鱼及其两种杂交子代的方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104145861A (zh) * | 2014-08-04 | 2014-11-19 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种黑鲷与真鲷杂交授精的方法 |
| CN105638529A (zh) * | 2016-02-04 | 2016-06-08 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种基于形态参数鉴别黑鲷真鲷及其杂交子代的方法 |
-
2016
- 2016-07-06 CN CN201610529613.3A patent/CN106119377B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104145861A (zh) * | 2014-08-04 | 2014-11-19 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种黑鲷与真鲷杂交授精的方法 |
| CN105638529A (zh) * | 2016-02-04 | 2016-06-08 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种基于形态参数鉴别黑鲷真鲷及其杂交子代的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 杨慧荣等: "《用RAPD技术探讨5种鲷科鱼类的亲缘关系》", 《用RAPD技术探讨5种鲷科鱼类的亲缘关系》 * |
| 林勉等: "《真鲷、黑鲷及其杂交子代的染色体构成与AFLP分析》", 《海洋学报》 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106119389A (zh) * | 2016-08-23 | 2016-11-16 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种鉴别黑鲷及黑鲷真鲷反交子代的方法 |
| CN106119389B (zh) * | 2016-08-23 | 2019-07-05 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种鉴别黑鲷及黑鲷真鲷反交子代的方法 |
| CN110607375A (zh) * | 2019-10-11 | 2019-12-24 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种快速鉴定斑石鲷和金钱鱼的方法 |
| CN110607375B (zh) * | 2019-10-11 | 2022-12-23 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种快速鉴定斑石鲷和金钱鱼的方法 |
| CN114350815A (zh) * | 2021-12-30 | 2022-04-15 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种利用issr引物鉴别黑鲷真鲷杂交子代的分子标记方法 |
| CN114480666A (zh) * | 2021-12-30 | 2022-05-13 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种利用issr分子标记区分黑鲷鱼及其两种杂交子代的方法 |
| CN114480666B (zh) * | 2021-12-30 | 2024-03-22 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种利用issr分子标记区分黑鲷鱼及其两种杂交子代的方法 |
| CN114350815B (zh) * | 2021-12-30 | 2024-03-26 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种利用issr引物鉴别黑鲷真鲷杂交子代的分子标记方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN106119377B (zh) | 2019-11-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106119377A (zh) | 一种鉴别真鲷、黑鲷及其杂交后代的引物、试剂盒及鉴别方法 | |
| CN107326077A (zh) | 一种鉴别黄姑鱼遗传性别的分子标记及其应用 | |
| CN104946788A (zh) | 一种鉴别8种动物源性成分的pcr引物及试剂盒 | |
| CN114908176B (zh) | 一种与鸡屠体和生长性状相关的分子标记及其应用 | |
| CN106520939B (zh) | 一种鲷鱼种质鉴定的方法及其应用 | |
| CN110607359B (zh) | 一种虾夷扇贝雌性特异性标记组合及应用 | |
| CN104073486A (zh) | 一种与大口黑鲈快速生长相关的snp位点及其鉴定方法和应用 | |
| CN101974649A (zh) | 一种鉴别建鲤的分子标记方法 | |
| CN105648046A (zh) | 一次性鉴别绵羊、山羊、水貂、海狸鼠和鸭肉的方法 | |
| CN110358816B (zh) | 一种用于鸡来源细胞pcr检测的引物组、试剂盒及应用 | |
| CN101962677A (zh) | 一种鉴定禽类性别的方法 | |
| CN101348830B (zh) | 一种杂交鹅掌楸快速分子检测特异性引物及其用法 | |
| CN110607376B (zh) | 一种基于dna分子标记的虾夷扇贝活体性别鉴定方法 | |
| CN102041310B (zh) | 一种检测鸡玫瑰冠性状的方法 | |
| CN103215365A (zh) | 一种陆川猪及其肉制品的dna分子鉴定方法 | |
| Mishra et al. | Analysis of genetic diversity in Berari goat population of Maharashtra state | |
| CN105755116B (zh) | 与中华绒螯蟹性早熟与否相连锁的微卫星标记的引物及其应用 | |
| CN102586451B (zh) | 一种建鲤配组繁殖的方法 | |
| CN103911444A (zh) | 一种鉴别花鳗鲡和太平洋双色鳗鲡苗种的引物和方法 | |
| CN112239779A (zh) | 一种卵形鲳鲹性别快速鉴定引物、试剂盒及其应用 | |
| CN104962660B (zh) | 一种杂色蛤物种实时荧光pcr特异性检测体系及应用 | |
| CN101792816B (zh) | 扩增貂属物种细胞色素b基因的引物及鉴别紫貂、松貂的方法 | |
| CN110241226A (zh) | 太湖流域地方品种猪各个品种及生肉制品的snp标记组合和鉴定方法 | |
| CN110106263A (zh) | 浦东白猪及生肉制品的snp标记组合和鉴定方法 | |
| CN109439764B (zh) | 一种鉴定仿土鸡蛋和土鸡蛋的分子标记及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20191129 Termination date: 20200706 |