CN106119122A - 一种基于发芽绿豆胚的姬松茸培养基以及姬松茸液体菌种制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种基于发芽绿豆胚的姬松茸培养基，包括以下重量份组分：麦芽浸提液140‑145、发芽绿豆胚180‑182、富硒酵母8‑9、小分子鱿鱼活性肽25‑30、五碳糖29‑30、儿茶素4‑5、谷氨酸钠3‑4、纳米级电气石粉5.6‑6、细菌纳米纤维素6.2‑6.5等。本发明采用麦芽浸提液、发芽绿豆胚、小分子鱿鱼活性肽、五碳糖等作为培养基制备姬松茸液体菌种，培养基的营养丰富，经过浸提、堆置发酵等一系列处理，培养基营养成分小分子化，能够有效被姬松茸液体菌种菌丝球吸收和利用；采用的纳米细菌纤维素提高了培养基的稳定性和均匀性，为姬松茸液体菌种提供了良好的生长发育空间以及原料成分。

Description

一种基于发芽绿豆胚的姬松茸培养基以及姬松茸液体菌种制 备方法

技术领域

本发明涉及液体菌种技术领域，尤其涉及一种基于发芽绿豆胚的姬松茸培养基以及姬松茸液体菌种制备方法。

背景技术

姬松茸生产过程中，液体菌种具有固体菌种所不可比拟的优势，液体菌种具有生产周期短，菌龄短而一致，纯度高、活力强，接种简便快捷，易实行工厂化、规模化、标准化生产等优点。现在，越来越多的人都在研究和使用液体菌种，而液体菌种的推广和使用也是实现食用菌工厂化、规模化、标准化的必然趋势。但是液体菌种也存在着自身的缺陷和不足：1、液体菌种萌发点多生长速度快，但是穿透力不强，培养料过粗菌丝不易吃透培养料，菌丝将沿着培养料表面快速生长，培养料内部菌丝量很少，严重影响了菌种产量和质量的问题；2、常规的液体菌种虽然解决了固体菌种存在的一些问题，能明显缩短栽培周期、增强菌种活力和抗逆性、降低菌种污染率、使得菌种质量整齐度提高，但仍存在例如发酵得到的液体菌种中菌球的密度、大小、均匀度等物理特性不是很理想等不足，如果用搅拌剪切的方法将菌球打碎，得到的菌种均匀度会更理想，但是，高速搅拌粉碎和打浆的剪切力对菌种伤害极大，对菌种整体的质量影响较为严重。开发分布均匀且具有更小粒径菌丝球的高质量的液体菌种具有重要意义。公开号CN105309194A《食用菌微粒液体菌种生产新技术》提供了一种菌丝球粒径在0.5㎜的食用菌微粒液体菌种，采用的增加食用菌液体菌种培养液通气量，使通气量在1:0.6—0.9V/V•min为适宜，同时在通气发酵罐内装置搅拌器使培养液涡流运动延长气泡的运动路线的技术操作方法，该生产微粒液体菌种的方法是从生产工艺上进行改进，并没有液体菌种培养基方面进行改进，实施起来技术难度要求高；公开号CN105130516A《分子级生物培养基制作方法》提到了分子级生物培养基营养成分可以快速全面的被吸收，促进液体菌种的生长，但是并没有提到分子级生物培养基对液体菌种菌丝球直径大小的影响。发展一种基于液体菌种培养基原材料成分改进液体菌种菌丝球直径改善食用菌菌种产量和质量的技术，具有重要的意义。

细菌纳米纤维素是自然界的丰富的可再生产物之一，细菌纳米纤维素是纤维素的物理最小结构单元，是指直径1-100nm之间的纤维，细菌纳米纤维素质轻，生物相容性好，可降解、可再生，反应活性高，且具有杨氏模量高，聚合度高，洁净度高，强度高，比表面积大等优势。将细菌纳米纤维素作作为食用菌液体菌种培养基原材料，对食用菌液体菌种的菌丝球分布以及直径具有一定的影响，进而起到改善食用菌菌种质量的作用。

发明内容

本发明目的就是为了弥补已有技术的缺陷，提供一种基于发芽绿豆胚的姬松茸培养基以及姬松茸液体菌种制备方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种基于发芽绿豆胚的姬松茸培养基，包括以下重量份组分：麦芽浸提液140-145、发芽绿豆胚180-182、富硒酵母8-9、小分子鱿鱼活性肽25-30、五碳糖29-30、儿茶素4-5、谷氨酸钠3-4、复合维生素1-1.2、麦芽糊精1-1.1、聚乙二醇1-1.1、石膏0.6-0.7、硫酸镁0.7-0.8、磷酸二氢钾0.5-0.6、过磷酸钙0.7-0.8、纳米级电气石粉5.6-6、细菌纳米纤维素6.2-6.5、适量的水。

一种采用上述的培养基制备姬松茸液体菌种的方法，包括以下步骤：

（1）、将纳米级电气石粉和水按照0.1g/L混合，通电激发制备无菌水备用；将麦芽糊精、聚乙二醇、石膏、硫酸镁、磷酸二氢钾、过磷酸钙的总量和无菌水按1g/L混合搅拌溶解得溶液一；将五碳糖、儿茶素、谷氨酸钠、复合维生素的总量和无菌水按100g/L混合在30℃搅拌溶解得溶液二；将麦芽浸提液、发芽绿豆胚、富硒酵母混合并加入总重量3-5倍的水，低温35℃小火文煮2h至发芽绿豆胚软化，过滤得滤渣和滤液，将滤液、小分子鱿鱼活性肽的总量与无菌水按350g/L混合搅拌均匀，并在进行98℃进行巴氏灭菌灭酶10min，得溶液三备用；将滤渣和一半的纳米细菌纤维素混合均匀堆置发酵4d，之后放入超微纳米粉碎机中进行粉碎处理20min，之后采用高温膨化机处理15min得富硒失活绿豆胚芽超微粉备用；

（2）、将溶液三保持20℃、溶液二保持25℃、溶液一保持30℃，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用；

（3）、将姬松茸母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为pH5-5.5、接种量11%、温度28-30℃、摇床转速100r/min、培养12-14h，得姬松茸液体菌种一；

（4）、将剩余一半的液体培养基、剩余一半的细菌纳米纤维素无菌混合均匀，之后加入富硒失活绿豆胚芽超微粉以及总重量2倍的无菌水，高压均质之后，通电激化配合高温再次灭菌，并放置到无菌培养瓶中，得复合培养基，将步骤（3）得到的姬松茸液体菌种一按58%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度24-25℃，摇床转速100r/min、并鼓入无菌氧气，培养39-40h即得。

本发明的优点是：

本发明采用麦芽浸提液、发芽绿豆胚、小分子鱿鱼活性肽、五碳糖配合营养物质谷氨酸钠、复合维生素、硫酸镁、磷酸二氢钾、过磷酸钙、细菌纳米纤维素等作为培养基制备姬松茸液体菌种，培养基的营养丰富，经过浸提、堆置发酵等一系列处理，培养基营养成分小分子化，能够有效被姬松茸液体菌种菌丝球吸收和利用；富硒酵母最终被纳米化之后直接作为培养基的有效成分，提高了姬松茸液体菌种的富硒效果，可以显著提高其有机硒含量；采用的纳米细菌纤维素提高了培养基的稳定性和均匀性，为姬松茸液体菌种提供了良好的生长发育空间以及原料成分，本发明制备的制备液体菌种过程简单，安全性好，且制备的液体菌种菌丝球大小合适，分布均匀，移栽后抗逆性好，成活率好。

具体实施方式

一种基于发芽绿豆胚的姬松茸培养基，包括以下重量份组分：麦芽浸提液140、发芽绿豆胚180、富硒酵母8、小分子鱿鱼活性肽25、五碳糖29、儿茶素4、谷氨酸钠3、复合维生素1、麦芽糊精1、聚乙二醇1、石膏0.6、硫酸镁0.7、磷酸二氢钾0.5、过磷酸钙0.7、纳米级电气石粉5.6、细菌纳米纤维素6.2、适量的水。

一种采用上述的培养基制备姬松茸液体菌种的方法，包括以下步骤：

（1）、将纳米级电气石粉和水按照0.1g/L混合，通电激发制备无菌水备用；将麦芽糊精、聚乙二醇、石膏、硫酸镁、磷酸二氢钾、过磷酸钙的总量和无菌水按1g/L混合搅拌溶解得溶液一；将五碳糖、儿茶素、谷氨酸钠、复合维生素的总量和无菌水按100g/L混合在30℃搅拌溶解得溶液二；将麦芽浸提液、发芽绿豆胚、富硒酵母混合并加入总重量3倍的水，低温35℃小火文煮2h至发芽绿豆胚软化，过滤得滤渣和滤液，将滤液、小分子鱿鱼活性肽的总量与无菌水按350g/L混合搅拌均匀，并在进行98℃进行巴氏灭菌灭酶10min，得溶液三备用；将滤渣和一半的纳米细菌纤维素混合均匀堆置发酵4d，之后放入超微纳米粉碎机中进行粉碎处理20min，之后采用高温膨化机处理15min得富硒失活绿豆胚芽超微粉备用；

（2）、将溶液三保持20℃、溶液二保持25℃、溶液一保持30℃，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用；

（3）、将姬松茸母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为pH5、接种量11%、温度28℃、摇床转速100r/min、培养12h，得姬松茸液体菌种一；

（4）、将剩余一半的液体培养基、剩余一半的细菌纳米纤维素无菌混合均匀，之后加入富硒失活绿豆胚芽超微粉以及总重量2倍的无菌水，高压均质之后，通电激化配合高温再次灭菌，并放置到无菌培养瓶中，得复合培养基，将步骤（3）得到的姬松茸液体菌种一按58%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度24℃，摇床转速100r/min、并鼓入无菌氧气，培养39h即得。

Claims (2)

1.一种基于发芽绿豆胚的姬松茸培养基，其特征在于，包括以下重量份组分：麦芽浸提液140-145、发芽绿豆胚180-182、富硒酵母8-9、小分子鱿鱼活性肽25-30、五碳糖29-30、儿茶素4-5、谷氨酸钠3-4、复合维生素1-1.2、麦芽糊精1-1.1、聚乙二醇1-1.1、石膏0.6-0.7、硫酸镁0.7-0.8、磷酸二氢钾0.5-0.6、过磷酸钙0.7-0.8、纳米级电气石粉5.6-6、细菌纳米纤维素6.2-6.5、适量的水。

2.一种采用权利要求1所述的培养基制备姬松茸液体菌种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）、将纳米级电气石粉和水按照0.1g/L混合，通电激发制备无菌水备用；将麦芽糊精、聚乙二醇、石膏、硫酸镁、磷酸二氢钾、过磷酸钙的总量和无菌水按1g/L混合搅拌溶解得溶液一；将五碳糖、儿茶素、谷氨酸钠、复合维生素的总量和无菌水按100g/L混合在30℃搅拌溶解得溶液二；将麦芽浸提液、发芽绿豆胚、富硒酵母混合并加入总重量3-5倍的水，低温35℃小火文煮2h至发芽绿豆胚软化，过滤得滤渣和滤液，将滤液、小分子鱿鱼活性肽的总量与无菌水按350g/L混合搅拌均匀，并在进行98℃进行巴氏灭菌灭酶10min，得溶液三备用；将滤渣和一半的纳米细菌纤维素混合均匀堆置发酵4d，之后放入超微纳米粉碎机中进行粉碎处理20min，之后采用高温膨化机处理15min得富硒失活绿豆胚芽超微粉备用；

（2）、将溶液三保持20℃、溶液二保持25℃、溶液一保持30℃，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用；

（3）、将姬松茸母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为pH5-5.5、接种量11%、温度28-30℃、摇床转速100r/min、培养12-14h，得姬松茸液体菌种一；

（4）、将剩余一半的液体培养基、剩余一半的细菌纳米纤维素无菌混合均匀，之后加入富硒失活绿豆胚芽超微粉以及总重量2倍的无菌水，高压均质之后，通电激化配合高温再次灭菌，并放置到无菌培养瓶中，得复合培养基，将步骤（3）得到的姬松茸液体菌种一按58%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度24-25℃，摇床转速100r/min、并鼓入无菌氧气，培养39-40h即得。