CN106119123A - 一种基于豆腐黄浆水的白玉菇液体菌种培养基以及白玉菇液体菌种制备方法 - Google Patents

一种基于豆腐黄浆水的白玉菇液体菌种培养基以及白玉菇液体菌种制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种基于豆腐黄浆水的白玉菇液体菌种培养基，包括以下重量份组分：豆腐黄浆水、西瓜汁、酵母浸粉、蜂蜜、纳米级电气石粉、细菌纳米纤维素、双氧水等。本发明豆腐黄浆水、西瓜汁、酵母浸粉、蜂蜜为碳源氮源配合其它营养物质制备白玉菇液体菌种，原来来源丰富，价格低廉；在培养基的制备过程中，先采用热变性以及细菌纳米纤维对豆腐黄浆水进行空间结构的改性，相对直接酶解豆腐黄浆水，改性后的豆腐黄浆水具有更加丰富的微细空间结构，能够为白玉菇液体菌种的栽培提供良好的空间，采用的细菌纳米纤维素对改善液体培养基的性质起到了举足轻重的作用；采用本发明制备的白玉菇液体菌种的菌丝球分布均匀，大小合适，成活率高。

Description

一种基于豆腐黄浆水的白玉菇液体菌种培养基以及白玉菇液 体菌种制备方法
技术领域
本发明涉及液体菌种技术领域，尤其涉及一种基于豆腐黄浆水的白玉菇液体菌种培养基以及白玉菇液体菌种制备方法。
背景技术
白玉菇生产过程中，液体菌种具有固体菌种所不可比拟的优势，液体菌种具有生产周期短，菌龄短而一致，纯度高、活力强，接种简便快捷，易实行工厂化、规模化、标准化生产等优点。现在，越来越多的人都在研究和使用液体菌种，而液体菌种的推广和使用也是实现食用菌工厂化、规模化、标准化的必然趋势。但是液体菌种也存在着自身的缺陷和不足：1、液体菌种萌发点多生长速度快，但是穿透力不强，培养料过粗菌丝不易吃透培养料，菌丝将沿着培养料表面快速生长，培养料内部菌丝量很少，严重影响了菌种产量和质量的问题；2、常规的液体菌种虽然解决了固体菌种存在的一些问题，能明显缩短栽培周期、增强菌种活力和抗逆性、降低菌种污染率、使得菌种质量整齐度提高，但仍存在例如发酵得到的液体菌种中菌球的密度、大小、均匀度等物理特性不是很理想等不足，如果用搅拌剪切的方法将菌球打碎，得到的菌种均匀度会更理想，但是，高速搅拌粉碎和打浆的剪切力对菌种伤害极大，对菌种整体的质量影响较为严重。开发分布均匀且具有更小粒径菌丝球的高质量的液体菌种具有重要意义。公开号CN105309194A《食用菌微粒液体菌种生产新技术》提供了一种菌丝球粒径在0.5㎜的食用菌微粒液体菌种，采用的增加食用菌液体菌种培养液通气量，使通气量在1:0.6—0.9V/V•min为适宜，同时在通气发酵罐内装置搅拌器使培养液涡流运动延长气泡的运动路线的技术操作方法，该生产微粒液体菌种的方法是从生产工艺上进行改进，并没有液体菌种培养基方面进行改进，实施起来技术难度要求高；公开号CN105130516A《分子级生物培养基制作方法》提到了分子级生物培养基营养成分可以快速全面的被吸收，促进液体菌种的生长，但是并没有提到分子级生物培养基对液体菌种菌丝球直径大小的影响。发展一种基于液体菌种培养基原材料成分改进液体菌种菌丝球直径改善食用菌菌种产量和质量的技术，具有重要的意义。
细菌纳米纤维素是自然界的丰富的可再生产物之一，细菌纳米纤维素是纤维素的物理最小结构单元，是指直径1-100nm之间的纤维，细菌纳米纤维素质轻，生物相容性好，可降解、可再生，反应活性高，且具有杨氏模量高，聚合度高，洁净度高，强度高，比表面积大等优势。将细菌纳米纤维素作作为食用菌液体菌种培养基原材料，对食用菌液体菌种的菌丝球分布以及直径具有一定的影响，进而起到改善食用菌菌种质量的作用。
发明内容
本发明目的就是为了弥补已有技术的缺陷，提供一种基于豆腐黄浆水的白玉菇液体菌种培养基以及白玉菇液体菌种制备方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种基于豆腐黄浆水的白玉菇液体菌种培养基，包括以下重量份组分：豆腐黄浆水100-102、西瓜汁78-80、酵母浸粉35-40、蜂蜜5-6、半胱氨酸盐酸盐1.2-1.3、酒石酸铵0.9-1、柠檬酸钠1.2-1.3、石膏0.7-0.8、磷酸二氢钾0.8-0.9、硫酸镁0.9-1、过磷酸钙0.8-0.9、纳米级电气石粉5-6、细菌纳米纤维素7-8、双氧水3-5、糖化酶1.5-1.8、蛋白酶2.1-2.2、适量的水。
一种采用上述的培养基制备玉菇液体菌种的方法，包括以下步骤：
（1）、将一半纳米级电气石粉和水按照0.1g/L混合，通电激发制备无菌水备用；将石膏、磷酸二氢钾、硫酸镁、过磷酸钙的总量和无菌水按1g/L混合在30℃搅拌溶解得溶液一；将蜂蜜、半胱氨酸盐酸盐、柠檬酸钠、酒石酸铵的总量和无菌水按10g/L混合搅拌溶解得溶液二；将西瓜汁、糖化酶混合并加入总重量2倍的无菌水混合在40℃搅拌酶解25min，过滤，得精细化西瓜汁备用；将豆腐黄浆水、一半的细菌纳米纤维素以及双氧水混合，之后小火文煮35min，之后在加入蛋白酶，45℃搅拌酶解处理40min，得改性豆腐黄浆水备用；将精细化西瓜汁、改性豆腐黄浆水、、酵母浸粉的总量和无菌水按400g/L混合搅拌，并在进行98℃进行巴氏灭菌灭酶10min，得溶液三；将另一半纳米电气石粉和剩余一半细菌纳米纤维素以及总重量3-4倍的水混合搅拌均匀并采用高温蒸汽灭菌，得溶液四备用；
（2）、将溶液三保持20℃、溶液二保持25℃、溶液一保持30℃，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用；
（3）、将白玉菇母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为pH4.8-5、接种量12%、温度21-22℃、摇床转速100r/min、培养24-25h，得白玉菇液体菌种一；
（4）、将剩余一半的液体培养基以及溶液四无菌混合，高压均质之后，放置到无菌培养瓶中，并通电激化配合高温再次灭菌，得复合培养基，将步骤（3）得到的白玉菇液体菌种一按50%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度19-20℃，培养36-38h即得。
本发明的优点是：
本发明豆腐黄浆水、西瓜汁、酵母浸粉、蜂蜜为碳源氮源配合其它营养物质制备白玉菇液体菌种，原来来源丰富，价格低廉；在培养基的制备过程中，先采用热变性以及细菌纳米纤维对豆腐黄浆水进行空间结构的改性，相对直接酶解豆腐黄浆水，改性后的豆腐黄浆水具有更加丰富的微细空间结构，能够为白玉菇液体菌种的栽培提供良好的空间，加入的纳米级电气石粉，一方面起到了辅助灭菌的功效；另一方面可以作为液体菌种发育载体，使其分布更加均匀稳定；采用的细菌纳米纤维素对改善液体培养基的性质起到了举足轻重的作用；采用本发明制备的白玉菇液体菌种的菌丝球分布均匀，大小合适，成活率高。
具体实施方式
一种基于豆腐黄浆水的白玉菇液体菌种培养基，包括以下重量份组分：豆腐黄浆水100、西瓜汁78、酵母浸粉35、蜂蜜5、半胱氨酸盐酸盐1.2、酒石酸铵0.9、柠檬酸钠1.2、石膏0.7、磷酸二氢钾0.8、硫酸镁0.9、过磷酸钙0.8、纳米级电气石粉5、细菌纳米纤维素7、双氧水3、糖化酶1.5、蛋白酶2.1、适量的水。
一种采用上述的培养基制备玉菇液体菌种的方法，包括以下步骤：
（1）、将一半纳米级电气石粉和水按照0.1g/L混合，通电激发制备无菌水备用；将石膏、磷酸二氢钾、硫酸镁、过磷酸钙的总量和无菌水按1g/L混合在30℃搅拌溶解得溶液一；将蜂蜜、半胱氨酸盐酸盐、柠檬酸钠、酒石酸铵的总量和无菌水按10g/L混合搅拌溶解得溶液二；将西瓜汁、糖化酶混合并加入总重量2倍的无菌水混合在40℃搅拌酶解25min，过滤，得精细化西瓜汁备用；将豆腐黄浆水、一半的细菌纳米纤维素以及双氧水混合，之后小火文煮35min，之后在加入蛋白酶，45℃搅拌酶解处理40min，得改性豆腐黄浆水备用；将精细化西瓜汁、改性豆腐黄浆水、、酵母浸粉的总量和无菌水按400g/L混合搅拌，并在进行98℃进行巴氏灭菌灭酶10min，得溶液三；将另一半纳米电气石粉和剩余一半细菌纳米纤维素以及总重量3倍的水混合搅拌均匀并采用高温蒸汽灭菌，得溶液四备用；
（2）、将溶液三保持20℃、溶液二保持25℃、溶液一保持30℃，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用；
（3）、将白玉菇母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为pH4.8、接种量12%、温度21℃、摇床转速100r/min、培养24h，得白玉菇液体菌种一；
（4）、将剩余一半的液体培养基以及溶液四无菌混合，高压均质之后，放置到无菌培养瓶中，并通电激化配合高温再次灭菌，得复合培养基，将步骤（3）得到的白玉菇液体菌种一按50%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度19℃，培养36h即得。

Claims (2)

1.一种基于豆腐黄浆水的白玉菇液体菌种培养基，其特征在于，包括以下重量份组分：豆腐黄浆水100-102、西瓜汁78-80、酵母浸粉35-40、蜂蜜5-6、半胱氨酸盐酸盐1.2-1.3、酒石酸铵0.9-1、柠檬酸钠1.2-1.3、石膏0.7-0.8、磷酸二氢钾0.8-0.9、硫酸镁0.9-1、过磷酸钙0.8-0.9、纳米级电气石粉5-6、细菌纳米纤维素7-8、双氧水3-5、糖化酶1.5-1.8、蛋白酶2.1-2.2、适量的水。
2.一种采用权利要求1所述的培养基制备玉菇液体菌种的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）、将一半纳米级电气石粉和水按照0.1g/L混合，通电激发制备无菌水备用；将石膏、磷酸二氢钾、硫酸镁、过磷酸钙的总量和无菌水按1g/L混合在30℃搅拌溶解得溶液一；将蜂蜜、半胱氨酸盐酸盐、柠檬酸钠、酒石酸铵的总量和无菌水按10g/L混合搅拌溶解得溶液二；将西瓜汁、糖化酶混合并加入总重量2倍的无菌水混合在40℃搅拌酶解25min，过滤，得精细化西瓜汁备用；将豆腐黄浆水、一半的细菌纳米纤维素以及双氧水混合，之后小火文煮35min，之后在加入蛋白酶，45℃搅拌酶解处理40min，得改性豆腐黄浆水备用；将精细化西瓜汁、改性豆腐黄浆水、、酵母浸粉的总量和无菌水按400g/L混合搅拌，并在进行98℃进行巴氏灭菌灭酶10min，得溶液三；将另一半纳米电气石粉和剩余一半细菌纳米纤维素以及总重量3-4倍的水混合搅拌均匀并采用高温蒸汽灭菌，得溶液四备用；
（2）、将溶液三保持20℃、溶液二保持25℃、溶液一保持30℃，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用；
（3）、将白玉菇母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为pH4.8-5、接种量12%、温度21-22℃、摇床转速100r/min、培养24-25h，得白玉菇液体菌种一；
（4）、将剩余一半的液体培养基以及溶液四无菌混合，高压均质之后，放置到无菌培养瓶中，并通电激化配合高温再次灭菌，得复合培养基，将步骤（3）得到的白玉菇液体菌种一按50%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度19-20℃，培养36-38h即得。
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