CN106074763A - 一种大枣电磁裂解液大枣电磁裂解粉及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种大枣电磁裂解液大枣电磁裂解粉及其制备方法与应用，将大枣洗净且于清水中浸泡1小时后甩干水分，去掉核保留栆肉；将栆肉放于电磁裂解装置内进行电磁裂解处理，温度为107～109℃，收集得到的液体I和固体物料I；将固体物料I再次放于电磁裂解装置内进行二次电磁裂解处理，温度为107～109℃收集得到的液体II和固体物料II；将液体I和液体II合并、过滤、灭菌、灌装后即得大枣液，固体物料II破碎100目后得大枣粉。本发明的制备方法，可以使大枣内的cAMP、山楂酸、维生素和多糖充分的溢出，从而使制备的大枣磁裂解液/电磁裂解粉含有丰富的cAMP、山楂酸、维生素和多糖，不但具有营养保健功效，并且具有抗癌作用，充分提高了大枣的利用率。
Description
技术领域
本发明涉及一种大枣电磁裂解液大枣电磁裂解粉及其制备方法与应用，尤其是在抗癌方面的应用。
背景技术
日本学者杉木公人在日本第十五届和汉药学术交流会上指出：肿瘤细胞中cAMP含量甚低，当向培养的肿瘤细胞中掺入cAMP时，则肿瘤细胞可以转化为正常细胞。并且，cAMP的分子量为329，属于小分子物质，服用后就能全部被人体吸收，癌细胞能转化成正常细胞，又没有毒副作用，具有治癌的作用。此外，cAMP被服用后，参与人体内的细胞分裂与分解、糖原和脂肪分解、类固醇生成等多种生理进化进程，还参与基因的转录和蛋白质组成等生理活动。更重要的是，cAMP对医治各种肿瘤有显著效果，能阻止人体中亚硝酸物质的生成，还具有抑制癌细胞的生长和增殖的作用，甚至具有将癌细胞转化成正常细胞的作用；因此，cAMP是一种优异的抗肿瘤物质。
而大枣中富含三萜类化合物也具有按捺癌细胞的成效，尤其是山楂酸的能力最强，甚至超过了常用的抗癌药物氟尿嘧啶；山楂酸的分子量为473，也是一种小分子物质，人体服用后能全部被人体吸收，从而达到防治癌症的功效。
大枣，作为人类喜食的一种食物，除了含有丰富的维生素C和多糖等物质外，还含有丰富的cAMP和山楂酸，这些物质均对癌细胞具有一定程度的抑制作用。然而，目前，大枣的食用形式一般是制备成干栆、蜜饯或者添加米里做米饭米粥添加面里做枣糕等，这种传统加工方法和食用，大枣内的多种功能物质仍以大分子状态存在，不易被人体吸收，因此，大枣类食品的营养保健功能显效不大。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术中存在的不足，而提供一种大枣电磁裂解液的制备方法，新鲜的栆肉进行电磁裂解时，加热至107～109℃，栆肉内的水分变成水蒸汽往外扩散，栆肉内的大分子电磁裂解成小分子，小分子物质山楂酸、cAMP、维生素C、葡萄糖随着水蒸汽被带出，经冷凝得到液体；而放出的干栆(即下述的固体物料I)此时还含有一定的水分，再次行电磁裂解时继续加热至107～109℃，干栆内的水分变成水蒸汽往外扩散，干栆内的小分子物质山楂酸、cAMP、维生素C、葡萄糖随着水蒸汽被带出，经冷凝得到液体；两次电磁裂解得到的液体合并即为大枣电磁裂解液。制备的大枣电磁裂解液含有丰富的cAMP、山楂酸、维生素和多糖，该大枣电磁裂解液具有抗癌作用，可用于制备预防或治疗癌症方面的药物或用于制备预防癌症方面的保健食品。
本发明还提供一种大枣电磁裂解粉的制备方法，上述的大枣经过两次电磁裂解处理后的固体产物粉碎成100目的粉体，即得大枣电磁裂解粉；制备的大枣电磁裂解粉含有cAMP、山楂酸、维生素和多糖，该大枣电磁裂解粉具有抗癌或预防癌症发生作用，可用于制备预防癌症方面的保健食品。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种大枣电磁裂解液的制备方法，包括以下步骤：
(1)预处理：将秋后新鲜的、无虫眼、无腐败的大枣用清水清洗干净后，放入清水中浸泡1小时后，甩干水分，然后去掉核保留栆肉；
(2)第一次电磁裂解：将步骤(1)得到的栆肉放于电磁裂解装置内，加热栆肉至107～109℃，栆肉进行电磁裂解处理得到的液体I和固体物料I；所述栆肉在电磁裂解装置内进行电磁裂解时不进行搅拌，所述栆肉以分散的块粒进行电磁裂解；
(3)第二次电磁裂解：将步骤(2)得到的固体物料I放于电磁裂解装置内，加热固体物料I至107～109℃，固体物料I进行二次电磁裂解处理得到的液体II和固体物料II；固体物料I在电磁裂解装置内进行电磁裂解时不进行搅拌，固体物料I以分散的块粒进行电磁裂解；
(4)后处理：将步骤(2)和步骤(3)得到的液体I和液体II合并，然后经过滤、灭菌、灌装后即得大枣电磁裂解液。
上述技术方案中，步骤(2)、(3)中所述的第一次电磁裂解和/或第二次电磁裂解是在真空状态下进行，这样可以使栆肉中的液体提取的更彻底。
上述技术方案中，所述电磁裂解装置中的交变电磁场输出频率为200KHZ～2000MHZ，输出功率为100W～100KW。
上述技术方案中，步骤(2)、(3)中，所述的电磁裂解装置为市售电磁裂解的装置。
本发明还提供一种大枣电磁裂解液，是通过上述方法制备而成的；该大枣电磁裂解液在制备预防或治疗癌症方面的药物或制备预防癌症方面的保健食品中的应用；所述的癌症为卵巢癌、结肠癌、肝癌、胃癌、乳腺癌、食管癌、表皮样瘤、膀胱癌、脑胶质瘤、前列腺癌或口腔癌。
一种大枣电磁裂解粉的制备方法，将上述步骤(3)得到的固体物料II经破碎后制成100目的栆粉，即得大枣电磁裂解粉；如果固体物料II含有水分，则将物料进行烘干后再破碎成100目的栆粉。
本发明还提供一种大枣电磁裂解粉，是通过上述方法制备而成的；该大枣电磁裂解粉在制备预防癌症方面的保健食品中的应用，所述的癌症主要指人卵巢癌、人结肠癌、人肝癌、人胃癌、人乳腺癌、人食管癌、人表皮样瘤、人膀胱癌、人脑胶质瘤、人前列腺癌、人口腔癌。
本发明的制备方法，可以使大枣内的cAMP、山楂酸、维生素和多糖充分的溢出，从而使制备的大枣磁裂解液/电磁裂解粉含有丰富的cAMP、山楂酸、维生素和多糖，不但具有营养保健功效，并且具有抗癌作用。
具体实施方式
以下对本发明技术方案的具体实施方式详细描述，但本发明并不限于以下描述内容：
实施例1：
一种大枣电磁裂解液的制备方法，包括以下步骤：
(1)预处理：将秋后新鲜的、无虫眼、无腐败的大枣用清水清洗干净后，放入清水中浸泡1小时后，甩干水分，然后去掉核保留栆肉。
(2)第一次电磁裂解：将步骤(1)得到的栆肉放于电磁裂解装置内，加热栆肉至107～109℃，栆肉进行电磁裂解处理得到的液体I和固体物料I；所述的栆肉在电磁裂解装置内进行电磁裂解时不进行搅拌，所述的栆肉以分散的块粒进行电磁裂解；由于枣肉搅拌后会抱团不利于电磁裂解，因此不对栆肉进行搅拌，而是栆肉以分散的块粒进行电磁裂解处理。
(3)第二次电磁裂解：将步骤(2)得到的固体物料I放于电磁裂解装置内，加热固体物料I至107～109℃，固体物料I进行二次电磁裂解处理得到的液体II和固体物料II；同样不对固体物料I进行搅拌，而是固体物料I以分散块粒进行电磁裂解处理；
(4)后处理：将步骤(2)和步骤(3)得到的液体I和液体II合并，然后经过滤、灭菌、灌装后即得大枣电磁裂解液。
本实施例中，电磁裂解装置为市售产品，也可以选用ZL200420059838实用新型专利的电磁裂解装置。
本实施例中，电磁裂解装置中的交变电磁场的输出频率为200KHZ～2000MHZ，输出功率在100W～100KW范围。
本实施例中，所述的第一次电磁裂解和/或第二次电磁裂解也可以在真空状态下进行，这样可以使大枣中的液体提取的更彻底。
对实施例1得到的大枣电磁裂解液中含有的成分进行检测，其中：山楂酸是由国家生物医学分析中心对大枣电磁裂解液进行检测分析而得到的结果，而cAMP、多糖是由军事医学科学院生物医学分析中心对大枣电磁裂解液进行检测分析而得到的结果，检测结果如表1所示：
表1：实施例1得到的大枣电磁裂解液的检测报告
由表1可知，本发明的大枣电磁裂解液含有丰富的cAMP、山楂酸和多糖等物质。
实施例2：
一种大枣电磁裂解粉的制备方法，将实施例1步骤(3)得到的固体物料II进行破碎，制成100目的粉体即为大枣电磁裂解粉。
对实施例2得到的大枣电磁裂解粉中的有效成分进行检测，其中：山楂酸是由国家生物医学分析中心对大枣电磁裂解粉进行检测分析而得到的结果，而cAMP、维生素C、多糖是由军事医学科学院生物医学分析中心对大枣电磁裂解粉进行检测分析而得到的结果，检测结果如表2所示：
表2：实施例2得到的大枣粉的检测报告
由表10可知，本发明的大枣电磁裂解粉含有丰富的cAMP、维生素C、山楂酸和多糖等物质。
对实施例1得到的大枣电磁裂解液进行以下动物实验：
动物实验一：MTT法进行大枣电磁裂解液对人类肿瘤细胞株杀伤实验(中国医学科学院药物研究所)
1、药剂：
实验药：本发明实施例1制备的大枣电磁裂解液(棕红色)，以原液作为实验药剂，使用前采用微孔滤膜进行过滤杀菌。
阳性对照药：氟尿嘧啶注射液，上海旭东海铺药业有限公司批号00612。
其他试剂：RPMI1640为GIB30产品；小牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公；MTT为Bebco产品。
2、细胞株：
人卵巢癌细胞(A2780)、人结肠癌细胞(HCT-8)、人肝癌细胞(Bel 7402)、人胃癌细胞(BGC803)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人食管癌细胞(CaEs-17)、人表皮样瘤细胞(431)、人膀胱癌细胞(EJ)、人脑胶质瘤细胞(U251)、人前列腺癌细胞(PC-3M)、人口腔癌细胞(KB)。
3、仪器：
BIORAD 550酶标仪。
4、实验方法：
3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazoliumbromide，MTT法即四氮唑盐还原法：收集生长良好的人卵巢癌细胞，用含10％小牛血清的RPMI1640培养基配制成1×104/ml的细胞悬浮液，于96孔培养板内接种，毎孔接种100μl(含有1000个肿瘤细胞)。将接种后的培养板置于37℃、5％CO2培养箱内培养，培养24小时后加药，空白对照组不加药，阳性对照药和实验药分别设立4个浓度(每ml培养基加的药剂体积不同即为浓度不同)，每个浓度设立3各平行孔。加药后，置于37℃、5％CO2培养箱内培养4天。培养结束后，弃去上清液，毎孔加入MTT溶液(0.4mg/ml，RPMI1640配制)100μl，37℃孵育4小时后弃去上清液，毎孔加入DMSO 150μl，溶液Fomazan颗粒，轻度震荡后，用550酶标仪在检测波长540nm、参考波长450nm下测定OD值。以药物的不同浓度计对细胞的抑制率作图得到剂量反应曲线，从中求出半数抑制浓度IC50。
人结肠癌细胞、人肝癌细胞、人胃癌细胞、人乳腺癌细胞、人食管癌细胞、人表皮样瘤细胞、人膀胱癌细胞、人脑胶质瘤细胞、人前列腺癌细胞、人口腔癌细胞的实验方法均与所述的人卵巢癌细胞的实验方法相同。
检测结果如表3和表4所示：
表3：本发明的大枣电磁裂解液对11种人类癌细胞的杀伤作用
表4：本发明大枣电磁裂解液对人类癌细胞杀伤作用
由表3和表4可知，本发明的大枣电磁裂解液对11种肿瘤株体外生长均具有一定的杀伤作用，具有体外抗肿瘤活性的作用，其IC50＜10μl/ml。
动物实验二：大枣电磁裂解液对人早幼粒白血病细胞HL-60分化诱导实验(中国医学科学院药物研究所)
1、药剂：
实验药：本发明实施例1制备的大枣电磁裂解液(棕红色)，以原液作为实验药剂，使用前采用微孔滤膜进行过滤杀菌。
阳性对照药：全反式维甲酸(ATRA)为上海第六制药厂产品。
其他试剂：硝基蓝四氮唑(NBT)、氟波酯(TPA)均为Sigma公司产品。RPNI 1640为GIBCO公司产品。小牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司。
2、细胞株：
人急性早幼粒白血病NB4细胞，由美国S.Waxman教授惠赠。用含10％小牛血清的RPNI1640培养液在37℃、5％CO2培养箱内培养传代。
3、实验方法：
(1)NBT还原能力测定：将药物作用6天的细胞和对照组细胞在4℃下、1000rpm下离心5min，弃上清，每管加入0.1％NBT溶液0.5ml，含TPA100ng，置于37℃培养箱内保温3小时。1000rpm离心5min，弃上清，取细胞沉淀图片，Wright-Giemsa染色10min。油镜下每玻片观察200个细胞，胞浆内有蓝色甲颗粒者为NBT阳性细胞，计算阳性百分率。
(2)细胞形态学观察：将药物作用6天的细胞和对照组在4℃下、1000rpm下离心5min，弃上清，取细胞沉淀图片，Wright-Giemsa染色，油镜下观察细胞形态变化。每玻片观察200个细胞。按照细胞酚类法计数细胞，计算分化细胞的百分率。
检测结果如表5和表6所示：
表5：本发明的大枣电磁裂解液对NB4细胞NBT还原能力的影响
表6：本发明的大枣电磁裂解液对NB4细胞NBT形态的影响
由表5和表6可知，本发明的大枣电磁裂解液对NB4细胞无明显分化诱导作用。
动物实验三：大枣电磁裂解液对动物移植性肿瘤生长实验(中国医学科学院药物研究所)
1、药剂：
实验药：本发明实施例1制备的大枣电磁裂解液(棕红色)，以原液作为实验药剂，使用前采用微孔滤膜进行过滤杀菌。
阳性对照药：环磷酰胺注射液，上海华联产品。
2、细胞及动物：
瘤株：小鼠肝癌H22，小鼠宫颈癌U14，小鼠Lewis肺癌，小鼠肉瘤S180，在本实验室自行传代培养。
动物：昆明小鼠、C57小鼠、18-22g，雌雄兼用，由中国医学科学院试验动物所提供。
3、实验方法：
取生长状态良好的荷瘤小鼠，取腹水或肿瘤匀浆，用无菌生理盐水1:5稀释，每只鼠0.2ml分别接种于腋下。次日，将接种后的动物随机分组，每组10只，将电磁裂解液按原液、3倍稀释、9倍稀释液剂量以0.4ml/20g体积每日1次灌胃，连用10或14天。至实验结束。环磷酰胺对照组以100mg/kg剂量腹腔注射给药1次。阴性对照组自然生长。
待肿瘤生长至一定体积，将小鼠颈椎脱臼处死，称体重。剥离肿瘤，称重。计算各组肿瘤平均值，t检验比较统计学差异，并计算肿瘤抑制率，公式为
检测结果如表7、8、9、10所示：
表7：大枣电磁裂解液对小鼠肝癌H22肿瘤生长的影响
表8：大枣电磁裂解液对小鼠宫颈癌U14肿瘤生长的影响
表9：大枣电磁裂解液对小鼠肉瘤S180肿瘤生长的影响
表10：大枣电磁裂解液对小鼠Lewis肿瘤生长的影响
由表6-10可知，本发明的大枣电磁裂解液对H22移植瘤、宫颈癌U14、肉瘤S180和Lewis肺癌的生长具有一定的抑制作用。
综上所述，本发明方法制备的大枣磁裂解液/电磁裂解粉含有丰富的cAMP、山楂酸、维生素和多糖，不但具有营养保健功效，并且具有抗癌作用。
上述实例只是为说明本发明的技术构思以及技术特点，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明的实质所做的等效变换或修饰，都应该涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种大枣电磁裂解液的制备方法，包括以下步骤：
(1)预处理：将秋后新鲜的、无虫眼、无腐败的大枣用清水清洗干净后，放入清水中浸泡1小时后，甩干水分，然后去掉核保留栆肉；
(2)第一次电磁裂解：将步骤(1)得到的栆肉放于电磁裂解装置内，加热栆肉至107～109℃，栆肉进行电磁裂解处理得到的液体I和固体物料I；所述的栆肉在电磁裂解装置内进行电磁裂解时不进行搅拌，所述的栆肉以分散的块粒进行电磁裂解；
(3)第二次电磁裂解：将步骤(2)得到的固体物料I放于电磁裂解装置内，加热固体物料I至107～109℃，固体物料I进行二次电磁裂解处理得到的液体II和固体物料II；所述的固体物料I在电磁裂解装置内进行电磁裂解时不进行搅拌，所述的固体物料I以分散的块粒进行电磁裂解；
(4)后处理：将步骤(2)和步骤(3)得到的液体I和液体II合并，然后经过滤、灭菌、灌装后即得大枣电磁裂解液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)、(3)中所述的第一次电磁裂解和/或第二次电磁裂解是在真空状态下进行。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述电磁裂解装置中的交变电磁场的输出频率为200KHZ～2000MHZ，输出功率为100W～100KW。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的电磁裂解装置为市售的电磁裂解的装置。
5.一种根据权利要求1-4任一项所述方法制备得到的大枣电磁裂解液在制备预防或治疗癌症方面的药物或预防癌症方面的保健食品中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的癌症为卵巢癌、结肠癌、肝癌、胃癌、乳腺癌、食管癌、表皮样瘤、膀胱癌、脑胶质瘤、前列腺癌或口腔癌。
7.一种大枣电磁裂解粉的制备方法，其特征在于，将权利要求1的步骤(3)得到的固体物料II进行破碎，制成100目的粉体即为大枣电磁裂解粉。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的固体物料II含有水分时，将固体物料II烘干后再破碎成100目的粉体，即得大枣电磁裂解粉。
9.一种根据权利要求7-8任一项所述方法制备得到的大枣电磁裂解粉在制备预防癌症方面的保健食品中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的癌症为卵巢癌、结肠癌、肝癌、胃癌、乳腺癌、食管癌、表皮样瘤、膀胱癌、脑胶质瘤、前列腺癌、口腔癌。
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|---|---|---|---|---|
| CN113501858A (zh) * | 2021-07-09 | 2021-10-15 | 吉林省金鹿药业有限公司 | 电磁裂解技术提取荞麦小分子肽液和肽粉的方法 |
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