CN106074449A - 一种藏红花素的酵母微胶囊及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种藏红花素的酵母微胶囊及其制备方法,以水栀子果实经提取、纯化、冷冻干燥制备的冻干粉为芯材,酵母细胞为包埋壁材,经水浴恒温振荡、离心、冷冻干燥制备得到酵母微胶囊产品,不仅保留了藏红花素的抗心肌缺血缺氧、改善行为认知、抗脂质过氧化、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤等特性,而且为藏红花素吸收率较低的问题提供了解决方案,增加了藏红花素的稳定性;干燥粉末状的微胶囊更易于保存应用。酵母微胶囊安全、无毒、营养丰富等特点也使其在食品药品制备应用上具有优势。

Description

一种藏红花素的酵母微胶囊及其制备方法
技术领域
本发明属于医药领域,具体涉及一种藏红花素的酵母微胶囊及其制备方法。
背景技术
鸢尾科植物番红花(Crocus sativus L)和茜草科植物栀子(Gardeniajasminoides Ellis)中含有藏红花素以及藏红花酸,其中藏红花素是西红花和栀子的水溶性类胡萝卜素的天然活性成分。藏红花素多用于医药、保健、食品添加及工业染料方面,在药理方面藏红花素及其代谢产物藏花酸具有抗氧化、抗肿瘤、降血脂、增加胆汁分泌量、增强免疫力等功能,但由于通过血液循环吸收多存在吸收率不高的问题,其吸收利用率较低。藏红花素的微胶囊技术可为该问题提供新的解决思路。
微胶囊是一种聚合物壁壳的微型容器或包装物,包括壁材和芯材两部分,是具有半透性或密封性的微小粒子。微胶囊应用广泛于食品、医药、纺织、涂料、农业、化妆品工业。它具有改善物料状态、体积的性能,能够去除杂质、提高芯材稳定性、隔离组分、掩盖不良味道、降低挥发性、控制芯材释放等。现今,微胶囊的制备材料大部分是水溶性的,其中包含了合成的材料。而且目前常用的微胶囊方法多为复凝聚法和喷雾干燥法等物理化学方法,但均有化学试剂残留、设备昂贵等问题。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处,提供了一种藏红花素的酵母微胶囊及其制备方法,通过对水栀子果实中藏红花素进行提取、分离、纯化、冷冻干燥制得冻干粉,另以酵母细胞为壁材,使藏红花素与酵母细胞高频度接触进入酵母细胞,再经离心、水洗除杂制得。本方法具有制备设备简单、药物活性稳定、酵母微胶囊操作条件温和、能控制药物缓慢释放的特点,适合工业化生产。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是:
一种藏红花素的酵母微胶囊的制备方法,所述酵母微胶囊中,酵母细胞为包埋壁材,藏红花素为芯材,该制备方法包括:
a)取粒径为30~70目的水栀子果实粉末,加入10~35倍量(质量-体积比)的10~90%(质量浓度)乙醇,常温下用频率30~50kHz,功率150~600W超声提取1~4次,每次10~150min,过滤,合并滤液;
期间采用HPLC法测定藏红花素含量。滤液减压浓缩蒸干,乙醇溶解,定容为10mL,用微孔滤膜过滤器过滤,取0.2mL用乙醇稀释至10mL,得样品制备液,用于HPLC检测,条件:Dikma kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,甲醇-水洗脱(50:50),流速为1.0mL/min,柱温25℃,检测波长为440nm,进样量10μL,后绘制标准曲线。
b)步骤a)的合并后的滤液用ADS-5、ADS-8、ADS-7、ADX-17、D-101等大孔树脂处理精制,吸附流速1~3BV/h,吸附饱和后用含有0.05~0.2mol/L HCl的40~90%乙醇为洗脱剂,在45~55℃、解吸流速1~3BV/h下洗脱3~5BV;洗脱液浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉;
c)取干酵母,加入18~22倍量的4~6%(质量浓度)NaCl溶液,52~56℃水浴振荡4~10h后,离心,洗涤,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比(即藏红花素冻干粉与预处理后的酵母细胞的质量比)为1:0.2~5的比例混合,加入18~22倍量的水,20~80℃下,恒温水浴振荡包埋1~12h后,离心,洗涤,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为80~90%。
上述步骤涉及的计算公式:
吸附量=【(上样液中藏红花素质量浓度-吸附平衡后上清液中藏红花素质量浓度)×溶液体积】/树脂质量
解吸率=(提取液中藏红花素质量浓度×提取液体积)/(吸附量×树脂质量)×100%
纯度=上柱后所得藏红花素质量/干燥后所得水栀子果质量×100%
收率=上柱后所得藏红花素质量/上样液相当的水栀子干果质量×100%
酵母微胶囊包埋率的计算:
测定方法通过酵母细胞包埋前后干燥后的质量差来计算包埋率:W%=(ma-mb)/ma*100%;式中:W(%)为包埋率,mb为包埋前冻干酵母细胞的质量,ma为包埋后获得的酵母细胞总质量。
一实施例中:所述步骤a)中,加入11~13倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取2~4次,每次25~35min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,65~75℃下,恒温水浴振荡包埋9~11h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为87~88%。
一实施例中:所述步骤a)中,加入11~13倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取2~4次,每次25~35min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的45~55%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡7.5~8.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,65~75℃下,恒温水浴振荡包埋9~11h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为85~86%。
一实施例中:所述步骤a)中,加入19~21倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取2~4次,每次25~35min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的45~55%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,65~75℃下,恒温水浴振荡包埋9~11h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为86~87%。
一实施例中:所述步骤a)中,加入11~13倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取2~4次,每次55~65min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,45~55℃下,恒温水浴振荡包埋9~11h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为85~86%。
一实施例中:所述步骤a)中,加入11~13倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取1~3次,每次25~35min;所述步骤b)中,用ADS-5大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,65~75℃下,恒温水浴振荡包埋7~9h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为88~89%。
一实施例中:所述步骤a)中,加入11~13倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取2~4次,每次85~95min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:2~4的比例混合,加入19~21倍量的水,45~55℃下,恒温水浴振荡包埋9~11h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为83~84%。
一实施例中:所述步骤a)中,加入24~26倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取1~3次,每次25~35min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,55~65℃下,恒温水浴振荡包埋7~9h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为86~87%。
一实施例中:所述步骤a)中,加入29~31倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取1~2次,提取25~35min;所述步骤b)中,用ADX-17大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,25~35℃下,恒温水浴振荡包埋4~6h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为85~86%。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案之二是:
一种根据上述制备方法所制备的藏红花素的酵母微胶囊,所述酵母微胶囊中,酵母细胞为包埋壁材,藏红花素为芯材,其包埋率为80~90%。
本技术方案与背景技术相比,它具有如下优点:
本发明利用不同的渗透压,使藏红花素渗透过酵母细胞壁进入细胞内,形成以酵母细胞为包埋壁材、藏红花素为芯材的微胶囊,酵母本身作为天然材料,相比传统合成的水溶性材料,柔韧度,韧性与稳定性更强,能够保证细胞的完整性和存活率,制成的酵母微胶囊既保留了藏红花素的抗心肌缺血缺氧、改善行为认知、抗脂质过氧化、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤等特性,也具有酵母本身的丰富营养物质。且该藏红花素的酵母微胶囊无毒性,生物相容性高,在水中分散性优良,能够实现药物缓慢释放,药物生物活性稳定;微胶囊的大小均在几十微米级,冻干后成粉末状,方便应用,易保存;制取条件温和、制取设备简单、操作方便,基本不需要引入有毒有害化学试剂,没有溶剂残留的危险,非常适合药物和食品添加剂的包埋;同时酵母可以使发酵工厂回收的废酵母,来源广泛、价格低廉,易生物降解,适合工业化大生产。
附图说明
图1为本发明的工艺流程示意图。
具体实施方式
下面通过实施例具体说明本发明的内容:
实施例1
a)取水栀子果2000g,中药粉碎机粉碎,过40目筛,加入12倍量的50%乙醇,常温下用频率40kHz,功率300W超声提取3次,每次30min,过滤,合并滤液;
b)步骤a)的合并后的滤液用D-101大孔树脂纯化,大孔树脂预处理后,装柱,吸附流速2BV/h,吸附饱和后用含有0.1mol/L HCl的80%乙醇为洗脱剂,在50℃、解吸流速2BV/h下洗脱4BV;洗脱液抽滤,旋转蒸发去除乙醇,浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉,藏红花素的产率为1.38%,纯度为85.34%;
c)取一定量的安琪干酵母,加入20倍量的5%NaCl溶液,54℃水浴振荡5h后,5000rpm离心10min,水洗2次,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为1:4的比例混合,加入20倍量的蒸馏水,70℃下,恒温水浴振荡包埋10h后,5000rpm离心10min,蒸馏水水洗3次,多次离心后,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为87.24%。
实施例2
a)取水栀子果2000g,中药粉碎机粉碎,过40目筛,加入12倍量的50%乙醇,常温下用频率40kHz,功率300W超声提取3次,每次30min,过滤,合并滤液;
b)步骤a)的合并后的滤液用D-101大孔树脂纯化,大孔树脂预处理后,装柱,吸附流速2BV/h,吸附饱和后用含有0.1mol/L HCl的50%乙醇为洗脱剂,在50℃、解吸流速2BV/h下洗脱4BV;洗脱液抽滤,旋转蒸发去除乙醇,浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉,藏红花素的产率为1.21%,纯度为85.34%;
c)取一定量的安琪干酵母,加入20倍量的5%NaCl溶液,54℃水浴振荡8h后,5000rpm离心10min,水洗2次,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为1:4的比例混合,加入20倍量的蒸馏水,70℃下,恒温水浴振荡包埋10h后,5000rpm离心10min,蒸馏水水洗3次,多次离心后,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为85.5%。
实施例3
a)取水栀子果2000g,中药粉碎机粉碎,过40目筛,加入20倍量的50%乙醇,常温下用频率40kHz,功率300W超声提取3次,每次30min,过滤,合并滤液;
b)步骤a)的合并后的滤液用D-101大孔树脂纯化,大孔树脂预处理后,装柱,吸附流速2BV/h,吸附饱和后用含有0.1mol/L HCl的50%乙醇为洗脱剂,在50℃、解吸流速2BV/h下洗脱4BV;洗脱液抽滤,旋转蒸发去除乙醇,浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉,藏红花素的产率为1.83%,纯度为83.21%;
c)取一定量的安琪干酵母,加入20倍量的5%NaCl溶液,54℃水浴振荡5h后,5000rpm离心10min,水洗2次,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为1:4的比例混合,加入20倍量的蒸馏水,70℃下,恒温水浴振荡包埋10h后,5000rpm离心10min,蒸馏水水洗3次,多次离心后,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为86.35%。
实施例4
a)取水栀子果2000g,中药粉碎机粉碎,过40目筛,加入12倍量的50%乙醇,常温下用频率40kHz,功率400W超声提取3次,每次30min,过滤,合并滤液;
b)步骤a)的合并后的滤液用D-101大孔树脂纯化,大孔树脂预处理后,装柱,吸附流速2BV/h,吸附饱和后用含有0.1mol/L HCl的80%乙醇为洗脱剂,在50℃、解吸流速2BV/h下洗脱4BV;洗脱液抽滤,旋转蒸发去除乙醇,浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉,藏红花素的产率为1.78%,纯度为86.37%;
c)取一定量的安琪干酵母,加入20倍量的5%NaCl溶液,54℃水浴振荡5h后,5000rpm离心10min,水洗2次,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为1:4的比例混合,加入20倍量的蒸馏水,70℃下,恒温水浴振荡包埋10h后,5000rpm离心10min,蒸馏水水洗3次,多次离心后,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为83.42%。
实施例5
a)取水栀子果1000g,中药粉碎机粉碎,过40目筛,加入12倍量的50%乙醇,常温下用频率40kHz,功率300W超声提取3次,每次60min,过滤,合并滤液;
b)步骤a)的合并后的滤液用D-101大孔树脂纯化,大孔树脂预处理后,装柱,吸附流速2BV/h,吸附饱和后用含有0.1mol/L HCl的80%乙醇为洗脱剂,在50℃、解吸流速2BV/h下洗脱4BV;洗脱液抽滤,旋转蒸发去除乙醇,浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉,藏红花素的产率为1.25%,纯度为83.15%;
c)取一定量的安琪干酵母,加入20倍量的5%NaCl溶液,54℃水浴振荡5h后,5000rpm离心10min,水洗2次,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为1:3的比例混合,加入20倍量的蒸馏水,50℃下,恒温水浴振荡包埋10h后,5000rpm离心10min,蒸馏水水洗3次,多次离心后,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为85.14%。
实施例6
a)取水栀子果2000g,中药粉碎机粉碎,过40目筛,加入12倍量的50%乙醇,常温下用频率40kHz,功率200W超声提取2次,每次30min,过滤,合并滤液;
b)步骤a)的合并后的滤液用ADS-5大孔树脂纯化,大孔树脂预处理后,装柱,吸附流速2BV/h,吸附饱和后用含有0.1mol/L HCl的80%乙醇为洗脱剂,在50℃、解吸流速2BV/h下洗脱4BV;洗脱液抽滤,旋转蒸发去除乙醇,浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉,藏红花素的产率为1.22%,纯度为83.24%;
c)取一定量的安琪干酵母,加入20倍量的5%NaCl溶液,54℃水浴振荡5h后,5000rpm离心10min,水洗2次,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为1:4的比例混合,加入20倍量的蒸馏水,70℃下,恒温水浴振荡包埋8h后,5000rpm离心10min,蒸馏水水洗3次,多次离心后,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为88.75%。
实施例7
a)取水栀子果2000g,中药粉碎机粉碎,过50目筛,加入12倍量的40%乙醇,常温下用频率40kHz,功率300W超声提取3次,每次90min,过滤,合并滤液;
b)步骤a)的合并后的滤液用D-101大孔树脂纯化,大孔树脂预处理后,装柱,吸附流速2BV/h,吸附饱和后用含有0.1mol/L HCl的80%乙醇为洗脱剂,在50℃、解吸流速2BV/h下洗脱4BV;洗脱液抽滤,旋转蒸发去除乙醇,浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉,藏红花素的产率为1.18%,纯度为83.18%;
c)取一定量的安琪干酵母,加入20倍量的5%NaCl溶液,54℃水浴振荡5h后,5000rpm离心10min,水洗2次,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为1:3的比例混合,加入20倍量的蒸馏水,50℃下,恒温水浴振荡包埋10h后,5000rpm离心10min,蒸馏水水洗3次,多次离心后,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为83.63%。
实施例8
a)取水栀子果1000g,中药粉碎机粉碎,过40目筛,加入25倍量的50%乙醇,常温下用频率40kHz,功率300W超声提取2次,每次30min,过滤,合并滤液;
b)步骤a)的合并后的滤液用D-101大孔树脂纯化,大孔树脂预处理后,装柱,吸附流速2BV/h,吸附饱和后用含有0.1mol/L HCl的80%乙醇为洗脱剂,在50℃、解吸流速2BV/h下洗脱4BV;洗脱液抽滤,旋转蒸发去除乙醇,浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉,藏红花素的产率为1.19%,纯度为82.54%;
c)取一定量的安琪干酵母,加入20倍量的5%NaCl溶液,54℃水浴振荡5h后,5000rpm离心10min,水洗2次,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为1:4的比例混合,加入20倍量的蒸馏水,60℃下,恒温水浴振荡包埋8h后,5000rpm离心10min,蒸馏水水洗3次,多次离心后,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为86.31%。
实施例9
a)取水栀子果2000g,中药粉碎机粉碎,过40目筛,加入30倍量的50%乙醇,常温下用频率40kHz,功率300W超声提取1次,提取30min,过滤,得滤液;
b)步骤a)的滤液用ADX-17大孔树脂纯化,大孔树脂预处理后,装柱,吸附流速2BV/h,吸附饱和后用含有0.1mol/L HCl的80%乙醇为洗脱剂,在50℃、解吸流速2BV/h下洗脱4BV;洗脱液抽滤,旋转蒸发去除乙醇,浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉,藏红花素的产率为1.47%,纯度为83.23%;
c)取一定量的安琪干酵母,加入20倍量的5%NaCl溶液,54℃水浴振荡5h后,5000rpm离心10min,水洗2次,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为1:4的比例混合,加入20倍量的蒸馏水,30℃下,恒温水浴振荡包埋5h后,5000rpm离心10min,蒸馏水水洗3次,多次离心后,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为85.96%。
实施例10
a)取水栀子果2000g,中药粉碎机粉碎,过40目筛,加入15倍量的50%乙醇,常温下用频率40kHz,功率500W超声提取3次,每次30min,过滤,合并滤液;
b)步骤a)的合并后的滤液用ADS-7大孔树脂纯化,大孔树脂预处理后,装柱,吸附流速2BV/h,吸附饱和后用含有0.1mol/L HCl的80%乙醇为洗脱剂,在50℃、解吸流速2BV/h下洗脱4BV;洗脱液抽滤,旋转蒸发去除乙醇,浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉,藏红花素的产率为1.48%,纯度为86.55%;
c)取一定量的安琪干酵母,加入20倍量的5%NaCl溶液,54℃水浴振荡5h后,5000rpm离心10min,水洗2次,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为4:1的比例混合,加入20倍量的蒸馏水,40℃下,恒温水浴振荡包埋2h后,5000rpm离心10min,蒸馏水水洗3次,多次离心后,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为81.36%。
本领域技术人员可知,当本发明的技术参数在如下范围内变化时,可以预期得到与上述实施例相同或相近的技术效果:
a)取粒径为40~60目的水栀子果实粉末,加入12~30倍量的20~80%乙醇,常温下用频率30~50kHz,功率200~500W超声提取1~3次,每次20~120min,过滤,合并滤液;
b)步骤a)的合并后的滤液用大孔树脂处理,吸附流速1~3BV/h,吸附饱和后用含有0.05~0.2mol/L HCl的50~80%乙醇为洗脱剂,在45~55℃、解吸流速1~3BV/h下洗脱3~5BV;洗脱液浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉;
c)取干酵母,加入18~22倍量的4~6%NaCl溶液,52~56℃水浴振荡5~8h后,离心,洗涤,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为1:0.2~5的比例混合,加入18~22倍量的水,30~70℃下,恒温水浴振荡包埋2~10h后,离心,洗涤,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为80~90%。
以上所述,仅为本发明较佳实施例而已,故不能依此限定本发明实施的范围,即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰,皆应仍属本发明涵盖的范围内。

Claims (10)

1.一种藏红花素的酵母微胶囊的制备方法,其特征在于:所述酵母微胶囊中,酵母细胞为包埋壁材,藏红花素为芯材,该制备方法包括:
a)取粒径为30~70目的水栀子果实粉末,加入10~35倍量的10~90%乙醇,常温下用频率30~50kHz,功率150~600W超声提取1~4次,每次10~150min,过滤,合并滤液;
b)步骤a)的合并后的滤液用大孔树脂处理,吸附流速1~3BV/h,吸附饱和后用含有0.05~0.2mol/L HCl的40~90%乙醇为洗脱剂,在45~55℃、解吸流速1~3BV/h下洗脱3~5BV;洗脱液浓缩得到浸膏,冷冻干燥,制得藏红花素冻干粉;
c)取干酵母,加入18~22倍量的4~6%NaCl溶液,52~56℃水浴振荡4~10h后,离心,洗涤,冷冻干燥,完成酵母细胞预处理;
d)将步骤b)得到的藏红花素冻干粉与步骤c)得到的预处理后的酵母细胞按照芯壁比为1:0.2~5的比例混合,加入18~22倍量的水,20~80℃下,恒温水浴振荡包埋1~12h后,离心,洗涤,冷冻干燥,即得所述之藏红花素的酵母微胶囊,其包埋率为80~90%。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述步骤a)中,加入11~13倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取2~4次,每次25~35min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,65~75℃下,恒温水浴振荡包埋9~11h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为87~88%。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述步骤a)中,加入11~13倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取2~4次,每次25~35min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的45~55%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡7.5~8.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,65~75℃下,恒温水浴振荡包埋9~11h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为85~86%。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述步骤a)中,加入19~21倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取2~4次,每次25~35min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的45~55%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,65~75℃下,恒温水浴振荡包埋9~11h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为86~87%。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述步骤a)中,加入11~13倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取2~4次,每次55~65min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,45~55℃下,恒温水浴振荡包埋9~11h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为85~86%。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述步骤a)中,加入11~13倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取1~3次,每次25~35min;所述步骤b)中,用ADS-5大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,65~75℃下,恒温水浴振荡包埋7~9h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为88~89%。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述步骤a)中,加入11~13倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取2~4次,每次85~95min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:2~4的比例混合,加入19~21倍量的水,45~55℃下,恒温水浴振荡包埋9~11h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为83~84%。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述步骤a)中,加入24~26倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取1~3次,每次25~35min;所述步骤b)中,用D-101大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,55~65℃下,恒温水浴振荡包埋7~9h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为86~87%。
9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述步骤a)中,加入29~31倍量的45~55%乙醇,常温下用频率38~42kHz,功率250~350W超声提取1~2次,提取25~35min;所述步骤b)中,用ADX-17大孔树脂处理,吸附流速1.5~2.5BV/h,吸附饱和后用含有0.08~0.15mol/L HCl的75~85%乙醇为洗脱剂,在48~52℃、解吸流速1.5~2.5BV/h下洗脱3.5~4.5BV;所述步骤c)中,加入19~21倍量的4.5~5.5%NaCl溶液,53~55℃水浴振荡4.5~5.5h;所述步骤d)中,芯壁比为1:3~5的比例混合,加入19~21倍量的水,25~35℃下,恒温水浴振荡包埋4~6h后,得到的藏红花素的酵母微胶囊包埋率为85~86%。
10.一种根据权利要求1至9中任一项所述的制备方法所制备的藏红花素的酵母微胶囊,其特征在于:所述酵母微胶囊中,酵母细胞为包埋壁材,藏红花素为芯材,其包埋率为80~90%。
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