CN106035165B - 一种促进虫黄藻有效植入砗磲贝人工繁育苗种的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种促进虫黄藻有效植入砗磲贝人工繁育苗种的方法。本发明将虫黄藻与饵料一起投喂，时间上从开始摄食之日起到完全变态并成功形成共生关系止，避免了传统方法采用高浓度虫黄藻抽提液形成的对幼体高强度胁迫产生剧烈应急反应；同时，通过与饵料一起投喂(自3日龄后)，极大增加了幼虫接触并获得虫黄藻的机会，部分还原了自然海区砗磲幼虫捕获虫黄藻并成功与之共生的生境条件，大大提高砗磲幼虫到稚贝的变态效率。

Description

一种促进虫黄藻有效植入砗磲贝人工繁育苗种的方法
技术领域
本发明属于海洋水产行业中砗磲贝类繁育、生态资源恢复领域，具体涉及一种促进虫黄藻有效植入砗磲贝人工繁育苗种的方法。
背景技术：
砗磲贝，是一种重要海洋经济贝类，其肉鲜甜脆爽、有报道具备滋阴催阳功效，同时，其贝壳可雕刻加工成极具价值的工艺品。我国南海曾经有大量分布，有数据表明，我国南海主要分布有长砗磲、番红砗磲、鳞砗磲、砗蚝等种类。目前库式砗磲在我国已近绝迹，其它砗磲种类也面临盗采盗挖以及生态环境变化等不利局面，当前国际(美国华盛顿公约)规定了系列砗磲种类野生个体为禁止采卖种类，我国将库式砗磲列为国家一级保护动物，无磷砗磲列为二级保护动物。因此开展砗磲贝类的人工繁育技术对于恢复我国南海资源，保护南海生态环境具有十分重要的意义，而虫黄藻与砗磲苗成功形成共生关系，构成了砗磲苗种繁育成败的关键因素。
砗磲的人工繁育在新加坡、澳大利亚以及菲律宾等国家早在20世纪80年代就做了大量工作，并就某些种类成功培育出了砗磲稚贝，但人工繁育技术依然不成熟，表现在繁育成功率低，繁育效率不高，无法形成稳定的繁育技术体系，严重制约了砗磲产业化苗种生产和人工协助砗磲资源恢复的进程。其中重要原因之一是砗磲人工繁育幼体与虫黄藻形成共生的效率较低，致使砗磲人工繁育的稚贝变态率太低。因此需要对传统上采用虫黄藻溶液浸泡幼虫的方法重新审视。
发明内容：
本发明的目的是提供是提供一种大大提高砗磲幼虫到稚贝的变态效率的促进虫黄藻有效植入砗磲贝人工繁育苗种的方法。
本发明方法是与植入虫黄藻的传统方法完全不同，最大区别是本方法将虫黄藻与重要饵料一起投喂，时间上从开始摄食之日起到完全变态并成功形成共生关系止，避免了传统方法采用高浓度虫黄藻抽提液形成的对幼体高强度胁迫产生剧烈应急反应；同时，通过与饵料一起投喂(自3日龄后)，极大增加了幼虫接触并获得虫黄藻的机会，部分还原了自然海区砗磲幼虫捕获虫黄藻并成功与之共生的生境条件，大大提高砗磲幼虫到稚贝的变态效率，实现了本发明的目的。
本发明的促进虫黄藻有效植入砗磲贝人工繁育苗种的方法，其特征在于，包括以下步骤：
收集虫黄藻，将虫黄藻与金藻混匀一起投喂，投放于≥3日龄的、在苗种培养池中的砗磲贝幼虫，虫黄藻浓度控制在0.5-1.5ppm，投喂频率1次/天，直到完全变态为稚贝，停止投喂；
自砗磲贝幼虫发育到第三天后，往苗种培养池的水体中添加0.4ppm氯化铵和0.5ppm硝酸钠，自8日龄后，往苗种培养池的水体中添加1ppm氯化铵和1ppm硝酸钠。
所述的收集虫黄藻是从砗磲贝外套膜上剥离下来虫黄藻溶液，通过10微米过滤网过滤，然后再对滤液离心，去除上清液，收集沉降下来的高纯度虫黄藻。
所述的收集虫黄藻优选步骤为：将砗磲外套膜从活体砗磲新鲜剪下，制成3-5mm宽，10-20mm长的外套膜条；将外套膜条与粒径0.5-1.0mm的海砂混合，连同适量海水装入匀浆机匀浆，匀浆后倒出，先用100目过滤网滤出较大组织块，再用10微米过滤网滤出小的组织块，滤液经3000rpm离心，获得沉降下来的正常、健康的虫黄藻藻体。
所述将虫黄藻与金藻混匀一起投喂，其投喂方式为：3-5日龄，投喂虫黄藻0.5ppm+金藻2000cell/ml；6-9日龄投喂虫黄藻1ppm+金藻5000cell/ml；10-15日龄(变成稚贝)投喂虫黄藻1.5ppm+金藻8000cell/ml，以上投喂频次1次/天。
所述的自砗磲贝幼虫发育到第三天后，往苗种培养池的水体中添加0.4ppm氯化铵和0.5ppm硝酸钠，其频率为1次/两天，培养池每天换水1/2，自然光照，上午9点前打开培养池上方的遮光网，其余时间需要遮光网遮光至光照强度300lux左右，8日龄后往苗种培养池的水体中添加1ppm氯化铵+1ppm硝酸钠，其频率为1次/两天，培养池每天换水1/2，光照增加到1000-3000lux，稚贝规格1-2mm时，增加光照3000lux以上，但依然避免正午阳光直射。
本发明将虫黄藻与饵料一起投喂，时间上从开始摄食之日起到完全变态并成功形成共生关系止，避免了传统方法采用高浓度虫黄藻抽提液形成的对幼体高强度胁迫产生剧烈应急反应；同时，通过与饵料一起投喂(自3日龄后)，极大增加了幼虫接触并获得虫黄藻的机会，部分还原了自然海区砗磲幼虫捕获虫黄藻并成功与之共生的生境条件，大大提高砗磲幼虫到稚贝的变态效率。
具体实施方式：
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1：长砗磲幼虫与虫黄藻共生：
2016年初，我们于中国科学院海南三亚综合试验站开展了长砗磲(Tridacnamaxima)全人工育苗技术研究，人工催产方法催产砗磲贝4个，分别获得精卵后，交叉受精受精率达到95％，人工孵化48小时后，开始投喂金藻和虫黄藻混合液。所有培养过程均在1.5m3的玻璃钢池，共4个玻璃钢池，具体操作如下：
1)将长砗磲外套膜组织从活体长砗磲剪下，获得长约10-20mm，宽2-4mm的外套膜条，与事先准备好的干净海砂(粒径：0.5-1.0mm)混合，连同适量海水装入简易匀浆机匀浆约1分钟，然后倒出，先100目(150微米)过滤网滤出较大组织块，再用10微米过滤网滤出小的组织块，最后将滤液装上离心机，3000rpm离心1分钟，去除上清液，获得与组织液分离的虫黄藻藻体(沉淀)。
2)虫黄藻与湛江等鞭金藻的混合投喂：在养殖长砗磲幼虫的苗种培养池进入投喂，长砗磲幼虫3-5日龄，投喂0.5ppm(虫黄藻)+2000cell/ml(金藻)；长砗磲幼虫6-9日龄投喂1ppm(虫黄藻)+5000cell/ml(金藻)；长砗磲幼虫10-15日龄(变成稚贝)投喂1.5ppm(虫黄藻)+8000cell/ml(金藻)，以上投喂频次1次/天；
3)自幼虫发育到第三天后，往苗种培养池的水体中添加0.4ppm氯化铵(终浓度)和0.5ppm硝酸钠(终浓度)：培养池每天换水1/2，自然光照，上午9点前打开培养池或缸上方的遮光网，其余时间用致密遮光网遮光使其光强为300lux左右；8日龄后往苗种培养池的水体中添加1ppm氯化铵(终浓度)和1ppm硝酸钠(终浓度)，其频率为1次/两天，培养池每天换水1/2，光照增加到1000-3000lux；稚贝规格1-2mm时，增加光照3000lux以上，但依然避免正午阳光直射。
试验结果如表1所示：
表1
最后获得了最后2.5万个变态成功的稚贝。
实施例2鳞砗磲幼虫与虫黄藻共生：
2016年初，开展了鳞砗磲(Tridacna squamosa)的人工繁育工作。人工催产方法催产鳞砗磲贝4个，分别获得精卵后，交叉受精受精率达到95％，人工孵化48小时后，开始投喂金藻和虫黄藻混合液。所有培养过程均在1.5m3的玻璃钢池，共4个玻璃钢池，具体操作如下：
1)剪取鳞砗磲外套膜组织，获得长约10-20mm，宽2-4mm的外套膜条，将外套膜条与事先准备好的干净海砂(粒径：0.5-1.0mm)混合，连同适量海水装入简易匀浆机匀浆约1分钟，然后倒出，先100目(150微米)过滤网滤出较大组织块，再用10微米过滤网滤出小的组织块；最后将虫黄藻溶液(滤液)装上离心机，3000rpm离心1分钟，去除上清液，获得与组织液分离的虫黄藻藻体。
2)虫黄藻与湛江等鞭金藻的混合投喂：在养殖鳞砗磲幼虫的苗种培养池进入投喂，鳞砗磲3-5日龄，投喂0.5ppm(虫黄藻)+2000cell/ml(金藻)；鳞砗磲6-9日龄投喂1ppm(虫黄藻)+5000cell/ml(金藻)；鳞砗磲10-15日龄(变成稚贝)投喂1.5ppm(虫黄藻)+8000cell/ml(金藻)，以上投喂频次1次/天；
3)自鳞砗磲幼虫发育到第三天后，往玻璃钢苗种培养池添加0.4ppm氯化铵(终浓度)+0.5ppm硝酸钠(终浓度)，苗种培养池每天换水1/2，上午9点前打开培养池遮光网，其余时间用致密遮光网遮光使其光强为300lux左右；8日龄后往玻璃钢苗种培养池添加1ppm氯化铵(终浓度)+1ppm硝酸钠(终浓度)，其频率为1次/两天，培养池每天换水1/2，光照增加到1000-3000lux；稚贝规格1-2mm时，增加光照3000lux以上，但依然避免正午阳光直射。
试验结果如表2所示：
表2
获得了最后2.5万个变态成功的稚贝。

Claims (4)

1.一种促进虫黄藻有效植入砗磲贝人工繁育苗种的方法，其特征在于，包括以下步骤：
收集虫黄藻，将虫黄藻与金藻混匀一起投喂，投放于≥3日龄的、在苗种培养池中的砗磲贝幼虫，虫黄藻浓度控制在0.5-1.5ppm，投喂频率1次/天，直到完全变态为稚贝，停止投喂；
自砗磲贝幼虫发育到第三天后，往苗种培养池的水体中添加0.4ppm氯化铵和0.5ppm硝酸钠，自8日龄后，往苗种培养池的水体中添加1ppm氯化铵和1ppm硝酸钠；
所述将虫黄藻与金藻混匀一起投喂，其投喂方式为：3-5日龄，投喂虫黄藻0.5ppm+金藻2000cell/ml；6-9日龄投喂虫黄藻1ppm+金藻5000cell/ml；10-15日龄投喂虫黄藻1.5ppm+金藻8000cell/ml，以上投喂频次1次/天。
2.根据权利要求1所述的促进虫黄藻有效植入砗磲贝人工繁育苗种的方法，其特征在于，所述的收集虫黄藻是从砗磲贝外套膜上剥离下来虫黄藻溶液，通过10微米过滤网过滤，然后再对滤液离心，去除上清液，收集沉降下来的虫黄藻。
3.根据权利要求2所述的促进虫黄藻有效植入砗磲贝人工繁育苗种的方法，其特征在于，所述的收集虫黄藻为：将砗磲外套膜从活体砗磲新鲜剪下，制成3-5mm宽，10-20mm长的外套膜条；将外套膜条与粒径0.5-1.0mm的海砂混合，连同适量海水装入匀浆机匀浆，匀浆后倒出，先用100目过滤网滤出较大组织块，再用10微米过滤网滤出小的组织块，滤液经3000rpm离心，获得沉降下来的正常、健康的虫黄藻。
4.根据权利要求1所述的促进虫黄藻有效植入砗磲贝人工繁育苗种的方法，其特征在于，所述的自砗磲贝幼虫发育到第三天后，往苗种培养池的水体中添加0.4ppm氯化铵和0.5ppm硝酸钠，其频率为1次/两天，培养池每天换水1/2，自然光照，上午9点前打开培养池上方的遮光网，其余时间需要遮光网遮光至光照强度300lux，8日龄后往苗种培养池的水体中添加1ppm氯化铵+1ppm硝酸钠，其频率为1次/两天，培养池每天换水1/2，光照增加到1000-3000lux，稚贝规格1-2mm时，增加光照3000lux以上，但依然避免正午阳光直射。
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