CN105941233B - 一种有效避免砗磲贝自体受精的化学方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种有效避免砗磲贝自体受精的化学方法。所有催产的砗磲分配ID号，分别将它们置于精子收集桶中，从开始大量排精起计时，排放2‑3分钟后获得精子，用500目筛绢网过滤，滤液即为精子液体，标明♂+ID 

Description

一种有效避免砗磲贝自体受精的化学方法
技术领域
本发明属于海洋水产行业中砗磲贝类繁育、生态资源恢复领域，具体涉及一种有效避免砗磲贝自体受精的化学方法。
背景技术：
砗磲贝，是一种重要海洋经济贝类，其肉鲜甜脆爽、有报道具备滋阴补阳功效，同时，其贝壳可雕刻加工成极具价值的工艺品。我国南海曾经有大量分布，有数据表明，我国南海主要分布有长砗磲、番红砗磲、鳞砗磲、砗蚝等种类。目前库式砗磲在我国已近绝迹，其它砗磲种类也面临盗采盗挖以及生态环境变化等不利局面，当前国际(美国华盛顿公约)规定了系列砗磲种类野生个体为禁止采卖种类，我国将库式砗磲列为国家一级保护动物，磷砗磲列为二级保护动物。因此开展砗磲贝类的人工繁育技术对于恢复我国南海资源，保护南海生态环境具有十分重要的意义。
砗磲是种雌雄同体贝类，通常雄性先熟，精卵排放时首先释放精子，最后释放卵子，中间往往还夹杂精卵混合物释放。人工繁育时如何有效避免大量自交后代的出现，对于砗磲人工繁育产业化发展和种质资源的保护具有十分重要的意义。
大蒜素和苦参碱都是广谱性杀菌的天然植物源药物，具有对机体无危害对环境友好的显著特点，此前有报道大蒜素对人和鼠的精子具有极强的杀灭作用(钱耀贤1986)，但对于存在巨大差异水产无脊椎动物相关研究实践完全空白。苦参碱体外杀精有诸多报道(周忠光1987)，但主要针对人类高等动物的精子。相比高动动物，贝类的精子无论从结构还是生化成分上都存在巨大差异，目前苦参碱在水产方面的应用主要用于杀菌进行病害防治。
发明内容：
本发明的目的是提供一种有效避免砗磲贝自体受精的化学方法。
本发明的有效避免砗磲贝自体受精的化学方法，其特征在于，包括以下步骤：
以海水作为溶剂，配成含100ppm大蒜素和10ppm苦参碱的药浴液；
将所有催产的砗磲分配ID号，分别将它们置于精子收集桶中，从开始大量排精起计时，排放2-3分钟后获得精子，用500目筛绢网过滤，滤液即为精子液体，标明♂+ID号；再将砗磲从精子收集桶移出置于盛有药浴液的卵子收集桶中，药浴液的液面高于砗磲最高处，待砗磲排放卵子15-20分钟后，将砗磲取出，得到卵细胞液体，卵细胞液体用300目筛绢网过滤，卵细胞位于筛绢网上，用海水清洗筛绢网上卵细胞，去除被杀死或受抑制的精子和洗去残留药浴液，并标明♀+ID号，检查精卵配子质量后弃用劣质配子，根据不同ID号将来源不同的精子与卵子按需要进行人工受精处理。
优选，所述的海水都为砂滤干净海水，所述的将砗磲取出是将砗磲取出并用砂滤干净海水反复清洗，然后置于恢复培养池中。
本发明研究实践表明大蒜素和苦参碱混合配比的药浴液对于砗磲贝类精子具有极强的杀灭或抑制作用，可有效用于砗磲贝防控自体受精。因此，利用本发明的方法能够有效的防控砗磲贝自体受精。
具体实施方式：
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1长砗磲Tridacna maxima自体受精的避免与防范：
2016年初，我们于中国科学院海南三亚综合试验站开展了长砗磲(Tridacnamaxima)全人工育苗技术研究，人工催产方法催产种贝4个，为避免自体受精，提高苗种繁育效率具体操作如下：
1、利用沙滤海水事先配成10mg/ml的大蒜素母液，使用时将新配制的苦参碱与大蒜素按有效含量1:10混匀，制成含100ppm大蒜素和含10ppm苦参碱的药浴液共30L，沙滤海水作为溶剂。
2、将所有催产的长砗磲分配ID号，分别将它们置于精子收集桶(与ID号对应)，从开始大量排精起计时，排放2-3分钟后获得一定浓度的高质量精子，并用500目筛绢网过滤，除去带入的杂质、原生动物或可能的少量卵细胞，滤液即为精子液体，必须标明“♂+ID号”。另外将长砗磲从精子收集桶移出置于盛有以上药浴液的容器中(ID号对应的卵子收集桶)，药浴液的量根据个体大小相应调整(液面高于砗磲最高处3cm即可)。
3、在卵子收集桶内待长砗磲排放性腺产物(卵子)15-20分钟后，得到卵细胞液体，将长砗磲种贝拿出并用砂滤干净海水反复清洗，然后置于恢复培养池。卵细胞液体用300目筛绢网过滤，卵细胞位于筛绢网上，用海水清洗筛绢网上卵细胞3遍，去除被杀死或受抑制的精子和洗去残留药浴液，并标明♀+ID号。
4、显微镜检查精卵配子质量后弃用劣质配子，根据不同ID号将来源不同的精子与卵子按实验或生产需要进行人工受精处理，有效防控自体受精发生。
本实施例通过完全可控的方式，异源授精获得长砗磲受精率达到95％、孵化率98％以上的理想结果。
实施例2：砗蚝Hippopus hippopus的自体受精的避免与防范：
2016年初，200L容量塑料桶4个，开展了砗蚝(Hippopus hippopus)的人工繁育工作。为避免自体受精，提高苗种繁育效率具体操作如下：
1、利用沙滤海水事先配成10mg/ml的大蒜素母液，使用时将新配制的苦参碱与大蒜素按有效含量1:10混匀,制成含100ppm大蒜素、含10ppm苦参碱的药浴液共30L，药浴液以沙滤海水作为溶剂。
2、将所有催产的砗蚝分配ID号，分别将它们置于精子收集桶(与ID号对应)，从开始大量排精起计时，排放2-3分钟后获得一定浓度的高质量精子，并用500目筛绢网过滤除去带入的杂质、原生动物或可能的少量卵细胞，滤液即为精子液体，必须标明“♂+ID号”。另外将砗蚝从精子收集桶移出置于盛有以上药浴液的容器中(ID号对应的卵子收集桶)，药浴液的量根据个体大小相应调整(液面高于砗蚝最高处3cm即可)。
3、在卵子收集桶内待砗蚝排放性腺产物(卵子)15-20分钟后，得到卵细胞液体，将砗蚝种贝拿出，并用砂滤干净海水反复清洗，然后置于恢复培养池。卵细胞液体用300目筛绢网过滤，卵细胞位于筛绢网上，用海水清洗筛绢网上卵细胞3遍，去除被杀死或受抑制的精子和洗去残留药浴液，并标明♀+ID号。
4、显微镜检查精卵配子质量后弃用劣质配子，根据不同ID号将来源不同的精子与卵子按实验或生产需要进行人工受精处理，有效防控自体受精发生。
本实施例通过完全可控的方式，异源授精获得砗蚝受精率达到92％、孵化率95％以上的理想预期结果。

Claims (2)

1.一种有效避免砗磲贝自体受精的化学方法，其特征在于，包括以下步骤：
以海水作为溶剂，配成含100ppm大蒜素和10ppm苦参碱的药浴液；
将所有催产的砗磲分配ID号，分别将它们置于精子收集桶中，从开始大量排精起计时，排放2-3分钟后获得精子，用500目筛绢网过滤，滤液即为精子液体，标明♂+ID号；再将砗磲从精子收集桶移出置于盛有药浴液的卵子收集桶中，药浴液的液面至少高于砗磲最高处，待砗磲排放卵子15-20分钟后，将砗磲取出，得到卵细胞液体，卵细胞液体用300目筛绢网过滤，卵细胞位于筛绢网上，用海水清洗筛绢网上卵细胞后，标明♀+ID号，检查精卵配子质量后弃用劣质配子，根据不同ID号将来源不同的精子与卵子按需要进行人工受精处理。
2.根据权利要求1所述的有效避免砗磲贝自体受精的化学方法，其特征在于，所述的海水都为砂滤干净海水，所述的将砗磲取出是将砗磲取出并用砂滤干净海水反复清洗，然后置于恢复培养池中。
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砗磲研究现状及在我国南海开展养殖的前景;周勤 等;《热带海洋学报》;20140430;第33卷(第2期);第87-93页 *

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