CN1060217C - 三孢布拉氏霉菌中胡萝卜素的提取方法 - Google Patents
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Abstract
一种从三孢布拉氏霉菌中提取胡萝卜素的方法。所述方法是用极性有机溶剂与三孢布拉氏霉菌体积比为1～10∶1混合，去除菌丝中非胡萝卜素的杂色素和其它胶质。采用低沸点的石油系有机溶剂萃取菌中的胡萝卜素。萃取溶剂与菌体积比为1～10∶1，温度为40～70℃，每次为0.5～1小时，萃取二次，然后过滤分离萃取液再经长管蒸发器蒸去大部分溶剂，所得混合油溶液加1/5～1/2体积的无水乙醇，在0～10℃结晶，用少量无水乙醇对晶体洗涤，收得85～95%的胡萝卜素晶体。结晶母液经脱胶和脱溶可收到0.1%～1%的油溶胡萝卜素产品，经配制可生产10～30%的胡萝卜素悬液，可供药物及保健品用。
Description
本发明是已知菌株三孢布拉氏霉菌中胡萝卜素的提取方法，属生化工程领域。
本发明以前，从三孢布拉氏霉菌中提取胡萝卜素的方法，均局限于少量的实验室手工操作阶段，用干燥的菌丝或菌丝体粉末，采用植物油或有机溶剂萃取。干燥过程对胡萝卜素的稳定性及产量有影响，同时菌丝体粉末增加固液分离的难度，无法工业化生产，有机溶剂的残留无法达到国家食品添加剂的卫生要求，更不适宜做药品和营养保健品。
本发明为克服上述缺点。本发明的目的是提供了一种三孢布拉氏霉菌中胡萝卜素的提取方法，利用极性有机溶剂进行预处理，用低沸点有机溶剂从三孢布拉氏霉菌中提取胡萝卜素，适合于工业化生产，可生产出大量的胡萝卜素。
本发明的技术方案将未干燥的菌丝体用极性有机溶剂混合处理后，用低沸点石油系有机溶剂萃取，萃取液经浓缩、结晶、脱胶、脱溶得到胡萝卜素结晶和油溶品。其所述的方法优选方案包括下列步骤：A、将未干燥的菌丝体用极性有机溶剂混合处理；B、过滤收集菌丝体，用低沸点石油系有机溶剂在40-70℃萃取30-60分钟，反复进行两次，萃取液加热、浓缩；C、将B中得到的浓缩萃取液，加入1／5-1／2体积的无水乙醇，在0-10℃结晶，分离结晶，母液加热浓缩；D、将上述经结晶分离得到的结晶母液，加入盐溶液，加热搅拌，静置脱胶，上层油在120-140℃和-650--750mmHg真空条件下通入120-140℃直接蒸汽进行脱溶。按照本发明，其步骤为：首先将未干燥的菌丝体用极性有机溶剂处理(甲醇、乙醇、丙酮)，按1∶1-10的重量体积比混合处理；可以溶解非胡萝卜素色素和其它油性杂质，增加有机溶剂的渗透性，加快提取速度，还可以起到脱水作用。第二步是经上述处理过滤收集菌丝体，用低沸点石油系有机溶剂(戊烷、己烷)以1∶1-10的重量体积比在浸提罐中40℃-70℃萃取30-60分钟，反复进行二次，所收到的萃取液在长管蒸发器中的间接蒸汽加热到80℃-100℃，浓缩至终体积与菌丝体含量为1∶1；第三步是将浓缩后的提取液泵入结晶罐中，加入1／5-1／2体积的无水乙醇，在0-10℃条件下结晶，搅拌速度为30-60rpm，时间为10-120小时，晶体经抽滤收集，母液进入第二长管蒸发器，加热温度为90℃-110℃，进一步浓缩；第四步将进一步浓缩的母液泵入水化锅，加入1／10体积3％的盐溶液，加热搅拌至70-90℃，持续10-30分钟，静置冷却4-24小时，撇出上层油，将油泵入脱溶锅中，直接通入120-140℃蒸汽，间接蒸汽盘管温度为120-140℃，真空度-650 750mmHg，得终产品油，油中残溶≤50ppm。所得晶体用少量无水乙醇洗涤，干燥得到85-95％的胡萝卜素晶体。
实施例：
20kg含水60％的菌丝体，用100升95％乙醇浸泡2小时后滤去乙醇，分两次各加入60升正己烷，在50℃浸提1小时，收集萃取液，萃取液在长管蒸发器中，间接蒸汽加热浓缩至20升，在上述浓缩液中加入5升无水乙醇，在4℃、搅拌30rpm条件下结晶96小时，抽滤所得晶体用无水乙醇洗涤，干燥后可得400g以上85％的胡萝卜素晶体，结晶母液进入第二长管蒸发器，间接蒸汽浓缩至9升以下，泵入水化锅加热至70℃，加入0．9升3％NaCl溶液，搅拌20分钟，冷却静置24小时，撇出上层油，泵入脱溶锅，真空度-750mmHg，通以130℃直接蒸汽，最后可得残留溶剂为50ppm以下的油溶品8．5升。
Claims (4)
1、一种三孢布拉氏霉菌中胡萝卜素的提取方法，其特征是：将未干燥的菌丝体用极性有机溶剂混合处理后，用低沸点石油系有机溶剂萃取，萃取液经浓缩、结晶、脱胶，脱溶。
2、根据权利要求1所述的一种三孢布拉氏霉菌中胡萝卜素的提取方法，其特征在于，其步骤是：
A、将未干燥的菌丝体用极性有机溶剂混合处理；
B、过滤收集菌丝体，用低沸点石油系有机溶剂在40-70℃萃取30-60分钟，反复进行两次，萃取液加热、浓缩；
C、将B中得到的浓缩萃取液，加入1／5-1／2体积的无水乙醇，在0-10℃结晶，分离结晶，母液加热浓缩。
3、根据权利要求2所述的一种三孢布拉氏霉菌中胡萝卜素的提取方法，其特征是上述经结晶分离得到的结晶母液，加入盐溶液，加热搅拌，静置脱胶，上层油在120-140℃和-650-750mmHg真空条件下通入120-140℃直接蒸汽进行脱溶。
4、根据权利要求1所述的一种三孢布拉氏霉菌中胡萝卜素的提取方法，其特征是用于处理未干燥菌丝体的极性有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮或其混合物，用量为霉菌体的1-10倍。
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