CN106011062A - 一种提高dc-cik细胞制剂活率的方法 - Google Patents

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赵依妮
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Abstract

本发明公开了一种提高DC‑CIK细胞制剂活率的方法，包括如下步骤：将培养扩增后的T细胞进行第一次离心，得到一次离心细胞；将一次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第二次离心，得到二次离心细胞；将二次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第三次离心，得到DC‑CIK细胞制剂。本发明可有效去除死细胞，增加收获细胞制剂的细胞活率，获得的细胞活率能大于90％，有利于临床回输。

Description

一种提高DC-CIK细胞制剂活率的方法
技术领域
本发明涉及DC-CIK细胞制剂活率技术领域，尤其涉及一种提高DC-CIK细胞制剂活率的方法。
背景技术
自体免疫T细胞技术，是从患者患者的外周血中分离出T细胞，通过体外培养、扩增、制剂，回输患者体内，诱导人体自身产生免疫应答。目前，DC-CIK技术的整个培养周期大约为14天左右，随着培养时间的增加和个体差异，后期的培养后细胞活率会下降，有可能会低于标准(大于80％)，细胞数大量回输时，死细胞的增加，在临床上会增加其他的一些风险。前人在制剂时使用的是500g的离心力，如此之高的离心力即可分离活细胞与死细胞，也可造成活细胞裂解，进而降低活细胞的获取率，影响制剂质量。如何提高DC-CIK细胞制剂中细胞的活率，成为目前需要解决的技术问题。
发明内容
本发明提出了一种提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，本发明可有效去除死细胞，增加收获细胞制剂的细胞活率，获得的细胞活率能大于90％，有利于临床回输。
本发明提出的一种提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，包括如下步骤：
S1、将培养扩增后的T细胞进行第一次离心，得到一次离心细胞；
S2、将一次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第二次离心，得到二次离心细胞；
S3、将二次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第三次离心，得到DC-CIK细胞制剂。
优选地，在S1中，离心力为300-500g，离心时间为5-15min。
优选地，在S1中，离心力为400g，离心时间为10min。
优选地，在S2中，离心力为300-500g，离心时间为2-10min。
优选地，在S2中，离心力为400g，离心时间为5min。
优选地，在S3中，离心力为300-500g，离心时间为2-10min。
优选地，在S3中，离心力为400g，离心时间为5min。
本发明通过改变收获细胞时的离心力，去除死细胞，增加收获细胞的细胞活率。通过本发明获得的细胞活率能大于90％，有效的去除死细胞，有利于临床回输。
具体实施方式
下面，通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
实施例1
一种提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，包括如下步骤：
S1、将培养扩增后的T细胞进行第一次离心，得到一次离心细胞；
S2、将一次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第二次离心，得到二次离心细胞；
S3、将二次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第三次离心，得到DC-CIK细胞制剂。
实施例2
一种提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，包括如下步骤：
S1、将培养扩增后的T细胞进行第一次离心，得到一次离心细胞，离心力为300g，离心时间为15min；
S2、将一次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第二次离心，得到二次离心细胞，离心力为300g，离心时间为10min；
S3、将二次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第三次离心，得到DC-CIK细胞制剂，离心力为300g，离心时间为10min。
实施例3
一种提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，包括如下步骤：
S1、将培养扩增后的T细胞进行第一次离心，得到一次离心细胞，离心力为500g，离心时间为5min；
S2、将一次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第二次离心，得到二次离心细胞，离心力为500g，离心时间为2min；
S3、将二次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第三次离心，得到DC-CIK细胞制剂，离心力为500g，离心时间为2min。
实施例4
一种提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，包括如下步骤：
S1、将培养扩增后的T细胞进行第一次离心，得到一次离心细胞，离心力为400g，离心时间为10min；
S2、将一次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第二次离心，得到二次离心细胞，离心力为400g，离心时间为5min；
S3、将二次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第三次离心，得到DC-CIK细胞制剂，离心力为400g，离心时间为5min。
将实施例4、5中，步骤S1、S2、S3获得的细胞活率如下表1所示：
表1不同离心力下获得的细胞活率对比
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、将培养扩增后的T细胞进行第一次离心，得到一次离心细胞；
S2、将一次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第二次离心，得到二次离心细胞；
S3、将二次离心细胞用生理盐水清洗后，进行第三次离心，得到DC-CIK细胞制剂。
2.根据权利要求1所述的提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，其特征在于，在S1中，离心力为300-500g，离心时间为5-15min。
3.根据权利要求2所述的提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，其特征在于，在S1中，离心力为400g，离心时间为10min。
4.根据权利要求1所述的提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，其特征在于，在S2中，离心力为300-500g，离心时间为2-10min。
5.根据权利要求4所述的提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，其特征在于，在S2中，离心力为400g，离心时间为5min。
6.根据权利要求1所述的提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，其特征在于，在S3中，离心力为300-500g，离心时间为2-10min。
7.根据权利要求6所述的提高DC-CIK细胞制剂活率的方法，其特征在于，在S3中，离心力为400g，离心时间为5min。
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