CN106008982B - 一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法 - Google Patents
一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106008982B CN106008982B CN201610461770.5A CN201610461770A CN106008982B CN 106008982 B CN106008982 B CN 106008982B CN 201610461770 A CN201610461770 A CN 201610461770A CN 106008982 B CN106008982 B CN 106008982B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- silica gel
- boric acid
- treatment material
- preparation
- gel pre
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G77/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a linkage containing silicon with or without sulfur, nitrogen, oxygen or carbon in the main chain of the macromolecule
- C08G77/04—Polysiloxanes
- C08G77/38—Polysiloxanes modified by chemical after-treatment
- C08G77/382—Polysiloxanes modified by chemical after-treatment containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen or silicon
- C08G77/398—Polysiloxanes modified by chemical after-treatment containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen or silicon containing boron or metal atoms
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Catalysts (AREA)
Abstract
本发明属于分析化学领域,更具体地涉及一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法。具体步骤如下:(1)在氮气保护中,将功能单体4‑巯基苯硼酸与适量催化剂溶于溶剂中,磁力搅拌混合均匀;(2)加入炔基修饰的硅胶并在65℃温度下,恒温反应10‑70小时。反应结束以后,将产物采用砂芯漏斗抽滤,并分别用甲醇,水,甲醇三种溶剂进行冲洗。洗涤后产物干燥,即得本发明的硼酸硅胶前处理材料。
Description
技术领域
本发明属于分析化学领域,具体地涉及一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法。
背景技术
糖蛋白作为一类重要的翻译后修饰蛋白,在信号转导、免疫及肿瘤发生等生物学过程中发挥着重要的作用。因此,糖蛋白和糖肽的发现与鉴定在疾病的诊断和蛋白质组学领域意义重大。目前,用于N 连接糖肽富集的主要方法有凝集素、酰肼、亲水作用色谱、硼酸亲和色谱等。对于具有1,2- 顺式二醇化学结构的糖型,苯硼酸可以与其形成可逆的五元或者六元环的酯,同时苯硼酸具有亲水性,能够与糖肽选择性结合。硼酸材料对糖肽的富集选择性集亲和和亲水作用力为一体,不仅能够避免糖链结构遭到破坏,而且所富集的产物与质谱兼容,对于研究糖蛋白糖基化位点信息及糖型结构归属较为方便。因此,硼酸在糖肽的选择性富集领域受到了人们的关注。而由硼酸为键合相开发的亲和材料也在糖蛋白或糖肽选择性富集中起到了越来越重要的作用。
点击化学指的是一类转化率高,产率高,操作简便,绿色环保的化学反应,广泛的应用在生物,药物等领域。我们课题组曾经将点击化学(Click Chemistry)用于合成硅胶基质的色谱固定相,相应的文章发表在国际知名期刊上(Journal of Chromatography A2009, 1216: 257-263;Chemical Communications 2007, 2491-2493;ChemicalCommunications 2006, 4512-4514;Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2011,399,3359-3365; Talanta, 78 (2009) 916-921; Journal of separation science, 33:9 (2010) 1224-1230; Analytical Method, 2012,4, 1244-1251)。这些方法采用的均是铜催化的点击化学反应,虽然得到较高的反应效率,但是反应过程中引入铜这个重金属,会给色谱分离带来影响,因此有必要加以改进。无铜催化的点击化学以其高转化率,高产率,以及避免铜的引入,引起了研究人员的重视。以2,2’-偶氮二异丁腈催化的炔基和巯基反应的点击化学方法就是一种无铜催化的点击化学反应(J. AM. CHEM. SOC. 2009, 131,14673–14675),相比较而言,合成转化率高,且没有铜离子的引入,是一种理想的化学反应。然而这种方法目前没有引入到色谱填料制备中,而且用于硼酸硅胶前处理材料的制备也未见报道。
发明内容
本发明的一个目的在于提供一种基于无铜催化的硼酸硅胶前处理材料制备方法,具体步骤如下:
(1)氮气保护下,将2,2’-偶氮二异丁腈加入功能单体4-巯基苯硼酸的甲醇溶液中磁力搅拌混合均匀;
(2)在搅拌的溶液中加入炔基修饰的硅胶,并在65℃条件下将样品反应10-70小时;
(3)反应结束以后,将产物采用砂芯漏斗抽滤,并分别用甲醇,水,甲醇等溶剂进行冲洗。洗涤后产物干燥,即得本发明的硼酸硅胶前处理材料。
在本发明的一个实施方案中,步骤2中所述的材料为炔基硅胶材料,为实验室自制,制备和表征方法均参照文献(Chem. Commun. 2007, 2491-2493);溶剂为甲醇。
在本发明的另一个实施方案中,炔基硅胶材料、4-巯基苯硼酸与溶剂的重量比为1:0.2~5:5~100,优选为1:0.8:20。
在本发明再一个实施方案中,步骤(2)中所述催化剂为2,2’-偶氮二异丁腈,4-巯基苯硼酸与催化剂的重量比为24:1,反应温度优选为65℃,反应时间为48小时。
具体实施方式
下面将进一步的来举例说明本发明。需要指出的是,以下说明仅仅是对本发明要求保护的技术方案的举例说明,并非对这些技术方案的任何限制。本发明的保护范围以所附权利要求书记载的内容为准。
实施例1
(1)氮气保护下,将2,2’-偶氮二异丁腈(160 mg)加入功能单体4-巯基苯硼酸(3.8g)的甲醇溶液(50 mL)中磁力搅拌混合均匀;
(2)在搅拌的溶液中加入炔基修饰的硅胶,并在65℃条件下将样品反应24小时;
(3)反应结束以后,将产物采用砂芯漏斗抽滤,并分别用甲醇(500mL),水(500mL),甲醇(200mL)进行顺序冲洗。洗涤后产物干燥,即得本发明的硼酸硅胶前处理材料。
另外,本发明还设定了以下对比例,具体如下:
对比例1:不采用氮气保护,其他同实施例1;
对比例2:炔基硅胶材料、4-巯基苯硼酸与溶剂甲醇的重量比为1:0.2:20,其他同实施例1;
对比例3:炔基硅胶材料、4-巯基苯硼酸与溶剂的重量比为1:5:50,其他同实施例1;
对比例4:催化剂为光催化,紫外可见光波长为254-470 nm,其他同实施例1;
实施例2
将实施例1制备的硼酸硅胶前处理材料1.5mg和50%乙腈/0.1%甲酸水溶液以一定比例(1:1.5,v:v)混合后超声分散5 min,装填于GE Loader小柱中,并用50%乙腈/0.1%甲酸水溶液(50 uL)清洗。备用。
实施例3
进行糖肽选择性富集实验,采用基质辅助激光解吸(MALDI)质谱以辣根过氧化物酶(HRP)酶解物作为分离对象,进行糖肽选择性富集,富集条件为:将实施例2中所制备的装有填料的GE Loader小柱,先用80%ACN(乙腈)/ 0.1%甲酸溶液(50 uL)清洗,弃除流出液。采用糖蛋白酶解物HRP作为对象进行亲水富集:取HRP酶解液(1mg/mL)(2 μL)旋干后,加入80%ACN(乙腈)/0.1%甲酸溶液(20uL)重溶解,上样GE Loader小柱。分别用上样缓冲液80%ACN(乙腈)/0.1%甲酸水溶液(40 μL)清洗,淋洗缓冲液50%ACN(乙腈)/ 0.1%甲酸溶液(20 μL)洗脱。所得的样品冷冻浓缩干燥以后,用70% ACN/0.5%TFA(20 μL)重溶,用MALDI质谱进行分析,采用DHB作为基质。并归纳实施例和对比例从HRP中富集出的糖肽数目,考察材料的糖肽富集选择性。
具体结果如下表显示
表1 实施例和对比例的糖肽选择性富集结果
本发明内容仅仅举例说明了要求保护的一些具体实施方案,其中一个或更多个技术方案中所记载的技术特征可以与任意的一个或多个技术方案相组合,这些经组合而得到的技术方案也在本申请保护范围内,就像这些经组合而得到的技术方案已经在本发明公开内容中具体记载一样。
Claims (5)
1.一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法,具体步骤如下:
(1)氮气保护下,将2,2’-偶氮二异丁腈加入功能单体4-巯基苯硼酸的甲醇溶液中磁力搅拌混合均匀;
(2)在搅拌的溶液中加入炔基修饰的硅胶,并在65℃条件下将样品反应10-70小时;
(3)反应结束以后,将产物采用砂芯漏斗抽滤,并分别用甲醇,水,甲醇进行顺序冲洗;洗涤后产物干燥,即得本发明的硼酸硅胶前处理材料。
2.根据权利要求1所述的一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法,其特征在于,步骤1中2,2’-偶氮二异丁腈与功能单体4-巯基苯硼酸的摩尔比为1:5~50。
3.根据权利要求1所述的一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法,其特征在于,步骤2中炔基修饰的硅胶、4-巯基苯硼酸与甲醇的重量比为1:0.2~5:5~100。
4.根据权利要求3所述的一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法,其特征在于,步骤2中炔基修饰的硅胶、4-巯基苯硼酸与甲醇的重量比为1:0.8:20。
5.根据权利要求1所述的一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法,其特征在于4-巯基苯硼酸与2,2’-偶氮二异丁腈的重量比为24:1,反应时间为48小时。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610461770.5A CN106008982B (zh) | 2016-06-23 | 2016-06-23 | 一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610461770.5A CN106008982B (zh) | 2016-06-23 | 2016-06-23 | 一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106008982A CN106008982A (zh) | 2016-10-12 |
CN106008982B true CN106008982B (zh) | 2019-07-16 |
Family
ID=57085984
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610461770.5A Active CN106008982B (zh) | 2016-06-23 | 2016-06-23 | 一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106008982B (zh) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108341974A (zh) * | 2017-01-25 | 2018-07-31 | 翁秋梅 | 一种具有杂化交联结构的动态聚合物及其应用 |
CN110215740B (zh) * | 2019-07-15 | 2021-05-04 | 大连医科大学 | 一种两性离子亲水前处理硅胶材料的制备方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104418990A (zh) * | 2013-08-21 | 2015-03-18 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种有机无机杂化微球颗粒及其制备和应用 |
WO2015118294A1 (en) * | 2014-02-04 | 2015-08-13 | The University Of Birmingham | Molecular sensor preparations and uses thereof |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TW201028692A (en) * | 2009-01-23 | 2010-08-01 | Nat Univ Tsing Hua | Method for immobilizing protein |
-
2016
- 2016-06-23 CN CN201610461770.5A patent/CN106008982B/zh active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104418990A (zh) * | 2013-08-21 | 2015-03-18 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种有机无机杂化微球颗粒及其制备和应用 |
WO2015118294A1 (en) * | 2014-02-04 | 2015-08-13 | The University Of Birmingham | Molecular sensor preparations and uses thereof |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
基于巯基-炔的"点击"化学研究进展;蔡雷等;《化工进展》;20110905;第30卷(第9期);第1982-1983页 |
基于巯基-烯点击反应制备有机-无机杂化硼酸亲和整体柱用于糖蛋白的选择性富集;杨帆等;《色谱》;20130628;第31卷(第6期);第1.2.3,2.3节 |
巯基-烯/炔点击化学研究进展;刘清等;《有机化学》;20121015(第10期);第1节 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN106008982A (zh) | 2016-10-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Ji et al. | Efficient enrichment of glycopeptides using metal–organic frameworks by hydrophilic interaction chromatography | |
CN104374848B (zh) | 一种苯硼酸材料富集糖肽的方法 | |
Li et al. | Facile synthesis of boronate-decorated polyethyleneimine-grafted hybrid magnetic nanoparticles for the highly selective enrichment of modified nucleosides and ribosylated metabolites | |
Yeh et al. | Magnetic bead-based hydrophilic interaction liquid chromatography for glycopeptide enrichments | |
CN102225249B (zh) | 一种有机-无机杂化毛细管整体柱的制备方法 | |
Yang et al. | Preparation of a boronate-functionalized affinity hybrid monolith for specific capture of glycoproteins | |
Zou et al. | Synthesis and evaluation of superparamagnetic silica particles for extraction of glycopeptides in the microtiter plate format | |
CN101684005A (zh) | 表面修饰硼酸基团的纳米磁性材料及其制备方法和应用 | |
CN104418990B (zh) | 一种有机无机杂化微球颗粒及其制备和应用 | |
CN103506093B (zh) | 一种磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子及其制备方法 | |
CN106140094A (zh) | 金属有机骨架修饰的磁性石墨烯复合材料的合成方法和应用 | |
CN105254707B (zh) | 基于二肽的聚合物材料及其在糖分离和糖肽富集中的应用 | |
Sun et al. | Facile preparation of polysaccharide functionalized macroporous adsorption resin for highly selective enrichment of glycopeptides | |
CN101274272A (zh) | 一种寡聚乙二醇键合硅胶固定相及其制备方法 | |
CN109225084B (zh) | 能大量富集糖蛋白的核壳式硼基化磁性微球的制备方法 | |
CN106008982B (zh) | 一种硼酸硅胶前处理材料的制备方法 | |
CN105111265B (zh) | 一种使用“一锅法”标记修饰生物大分子的方法 | |
CN107607640A (zh) | 一种硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法 | |
CN102658098A (zh) | 一种以邻羟甲基苯硼酸为功能单体的硼亲和功能化材料及其制备和应用 | |
CN104289209B (zh) | 一种用于蛋白质分离的wcx/hic双功能混合模式聚合物基质色谱固定相及其制备方法 | |
CN106432644A (zh) | 一种亲水型聚合物功能化磁性纳米微球及其制备方法和应用 | |
CN105289558B (zh) | 多组分嵌段亲水共聚物‑硅胶杂化色谱填料的制备及应用 | |
CN106000363B (zh) | 一种苯硼酸亲水硅胶材料的制备方法 | |
CN106622182A (zh) | 基于巯基迈克尔加成反应的硅胶基质色谱分离材料及其制备 | |
CN109400823B (zh) | 八乙烯基-poss和二甲基丙烯酸乙二醇酯共交联的硼亲和整体柱及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |