CN105859634B - 5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型 - Google Patents
5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105859634B CN105859634B CN201610087179.8A CN201610087179A CN105859634B CN 105859634 B CN105859634 B CN 105859634B CN 201610087179 A CN201610087179 A CN 201610087179A CN 105859634 B CN105859634 B CN 105859634B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- crystal form
- disease
- kenel
- dihydro
- benzodiazine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
- C07D237/26—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D237/30—Phthalazines
- C07D237/32—Phthalazines with oxygen atoms directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
- A61K31/502—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. cinnoline, phthalazine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
- A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/18—Drugs for disorders of the endocrine system of the parathyroid hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
- C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Virology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Hematology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
Abstract
本发明涉及一种5‑氨基‑2,3‑二氢‑(2,3‑二氮杂萘)‑1,4‑二酮钠盐的晶型、含有它们的药物制剂以及所述晶型的生产方法。本发明涉及提供5‑氨基‑2,3‑二氢‑(2,3‑二氮杂萘)‑1,4‑二酮钠盐的2种新颖晶型I和II。令人惊奇地发现,型态I和型态II具有不同的免疫学效应。该有利的性质可用于免疫特异性的应用。另外,两种晶型具有有利的物理化学性质,所述性质可用于型态I或型态II或二者的混合物的药物制剂的生产、进一步加工和/或应用。
Description
本申请是申请号为201180011760.7,申请日为2011年3月1日,发明名称为“5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型、含有它们的药物制剂以及所述晶型的生产方法”的发明专利申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及提供具有有利性质的5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的至少2种新颖晶型、含有它们的药物制剂以及生产它们的方法。
本发明尤其涉及提供用于医学目的的、具有免疫刺激和免疫抑制性质的5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的2种新颖晶型。
背景技术
长期以来,具有免疫调节作用的化学化合物是现有技术已知的。本发明的化合物(即5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐)也属于这些化合物,其例如从EP 1203 587 A中已知,且具有下述基本结构(Na+未显示):
上述基本结构也称作鲁米诺。从现有技术已知,5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮碱金属盐结晶为不同水合物形态的固体物质。在现有技术中,尤其描述了钠盐的二水合物(RU 2113222 C1)和钾盐的三水合物以及它们的混合形态(RU2211036 C2)。
本领域已知,物质的晶型可以在它们的物理性质(诸如溶解性、溶解速率、稳定性等)方面存在差异(Haleblian和McCrone(1969): Journal of Pharmaceutical Sciences,58:911-929)。
这些性质可以影响活性成分的制药加工以及它的生物利用度,并从而影响生物效能(参见Griesser(2006)见:Polymorphisms in the Pharmaceutical Industry.Hilfiker(编)211-234)。
对于药物生产重要的是,在整个生产过程中,原料是稳定的、不吸水的,且它的固体性能是可控制的。此外,具有活性成分长期储存性的化学稳定性和固相稳定性是非常重要的(参见Miller等人(2006)见:Polymorphisms in the Pharmaceutical Industry.Hilfiker(编)385-403)。希望甚至在更长的储存时间中维持活性成分的物理性质。所述物理性质涉及例如活性成分的吸湿性、溶解性溶解性或初始溶解速率。
US 6,489,326 B1描述了一种生产用于医药目的的5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的方法,所述方法产生二水合物形态。该方法的缺点是,使用重金属催化剂,所述催化剂可能在产品中剩下残余物。具有残余物的产品具有致敏可能性,且通常被EMEA认为对于制药用途而言是危险的(参见Guideline EMEA/CHMP/SWP/4446/2000)。
就制药加工和医药用途而言,非常重要的是生产方法,所述方法可靠地且可再现地能够生产所希望的晶型。当生产晶型时,应当考虑到,工艺参数的微小偏差已将造成产物的晶体结构的变化,并会因此最终导致不同的晶型或混合形态。由此改变的性质(例如由于不同溶解性改变的生物效能)可能导致整个批次的报废,经常根本不可能生产出希望的形态(参见Ulrich和Jones(2005): Nachrichten aus der Chemie 53:19-23)。除了活性成分的纯度和得到的可能的效能变化以外,由于晶型的可自由流动性或流速的减退可以以不利的方式影响制药加工的其它重要性质,例如压成片剂的能力。5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮碱金属盐属于氨基邻苯二甲酰肼类,且在现有技术中被描述为具有特殊的抗炎、抗氧化和解毒性能的免疫调节剂(参见US 6,489,326 B1; EP 0617024, US 5,512,573, US 5,543,410 A, US 7,326,690 B2)。
通常根据其作用,将免疫调节物质分成免疫抑制剂和免疫刺激剂(参见RoteListe Service GmbH(2011): www.rote-liste.de)。
正因为它们的非常特异性的作用机理,仅具有免疫抑制作用或仅具有免疫刺激作用的对应制剂(例如免疫抑制性的TNF α-受体阻滞剂或免疫刺激性的干扰素β-制剂)经常在生物体中造成显著的不希望的副作用。一些已知的免疫抑制物质(例如TNFα-受体阻滞剂阿达木单抗)特异性地抑制某些炎症介质。已知这样的疗法具有严重的副作用(参见Descotes(2008): Expert Opin. Drug Metab. Toxicol., 4: 12: 1537-1549),因为个体的炎症介质的阻滞,是对复杂的免疫系统的严重干预。结果,生物体不再能够实现它的功能,以自动地且生理上适当地对外源的或内源的炎症性刺激(例如细菌感染)做出反应。因此,例如,在严重感染的情况下,禁止使用TNFα-受体阻滞剂,这特别适用于脓毒症和肺结核。在施用相应的药物之前,例如为了治疗类风湿性关节炎,强烈推荐TBC筛选(参见Diel等人(2009): Z Rheumatol 5:411-416)。此外,Hoffmann(2005: Intensivmed 42:371-377)能够清楚地证实,在脓毒症的情况下,TNFα-受体阻滞剂不适用于临床用途,而是相反地甚至可以导致死亡率的增加。
然而,5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮碱金属盐的具体免疫调节性质显然可用于预防由于过度免疫应答造成的所谓的细胞因子风暴(参见Suntharalingam等人(2006): N Engl J Med 355;1018-28)。不同于所谓的细胞因子阻滞剂,这些盐大部分不具有副作用,因为不会发生个体的细胞因子的抑制,但是它们被调节至生理水平,并从而进一步确保生物体对传染性病菌的足够反应。但是,现有技术没有分配(allocate)给5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮碱金属盐的各个晶型任何不同的免疫特异性效应。尤其在现有技术中未能找到关于下述内容的描述:各个晶型是否可以特异性地并根据指征(例如根据它们的基础的、特异性的免疫调节的主效应)优选地用作免疫抑制剂,或优选地用作免疫刺激剂。
在标题为“Correction of the immune system”的US 2003/0195183 A1中描述了5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的一种特殊医药用途,其中在不同的实验运行中使用不同剂量(0.2 μg -1000 mg)的5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮碱金属盐。在该范围内的有效剂量随检查的疾病和个体参数(例如物种、年龄、性别和体重)而变化。例如,2-200 μg 之间的5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的不同剂量的应用将导致通过皮下注射红细胞诱导的小鼠的细胞免疫应答的不同后果(迟发型超敏反应应答- DHR)。使用的剂量越低,DHR指数越高。在使用的2种小鼠品系中的更敏感的一种中,最高剂量将导致DHR的抑制。该实施例和在US 2003/0195183 A1中的其它的体内、体外以及临床实施例表明,低剂量的5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮碱金属盐主要以免疫刺激方式起作用,而较高剂量的5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮碱金属盐主要以免疫抑制方式起作用。由于对不同的小鼠品系,从免疫刺激剂量向免疫抑制剂量的转换位于不同高度,不同的物种以及人类医学和兽医学中的个体的治疗也将造成群体-遗传效应,由此将产生该剂量依赖性的应用的特殊危险。
因此,就临床实践而言,尤其对于具有先天性或获得性免疫缺陷或具有过度免疫应答的严重疾病的预防而言,通过简单地提供物质的不同多晶型物来特异性地控制免疫调节的方法是有利的。
优选刺激性的免疫调节剂的性质例如对于治疗性地处理具有弱免疫防御诸如在HIV感染以后或化学疗法治疗以后的患者是有利的。
优选地抑制性的免疫调节剂的性质例如对于诸如在外科手术、自身免疫疾病和变态反应的情况下使炎症过程最小化是有利的。
在临床实践中,就一些适应症(尤其是复发性炎性疾病)而言,免疫刺激剂以及免疫抑制剂经常在治疗上同时地或交替地使用(参见DMSG 2006: Aktuelle Therapieempfehlungen 2006年9月; Rote Liste Service GmbH(2011): www.rote-liste.de)。这将导致增加的相互作用的风险。因此,能够产生相反效应的物质类别的化学上类似的物质会为临床实践提供优点,因为可以预期,在同时给药或错时给药的情况下,它们将在生物体中造成更少的在药理学上引起的相互作用(与用于相同目的的不同物质类别的活性成分相比)。
现有技术的一个缺点还是,免疫调节剂的剂量依赖性应用要求给药的医务人员或患者自身的更高注意力,因而增加了应用错误的风险。
因此,不仅5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮碱金属盐的剂量依赖性的、免疫特异性的应用对于实用的且低风险的治疗用途而言是有利的,而且其利用了该物质类别的医学优点。
需要指出的是,免疫系统的复杂规则的干预,可能对涉及的生物体具有严重后果。因此,就医药用途而言更重要的是,具有尽可能少的副作用和具有免疫学上明确的效应的免疫调节剂,所述效应使得特异性地预防或治疗免疫造成的疾病成为可能。这样的免疫调节剂具有巨大的医学重要性。
发明内容
本发明已经在上述现有技术背景上完成,本发明的目的是,提供5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的新颖形态,所述形态具有特异性的、独立的免疫学效应,因而可以特异性地用于主要免疫抑制性的或主要免疫刺激性的目的。作为一种特别希望的性质,预期这些新颖形态分别不取决于于剂量具有主要免疫刺激性的或主要免疫抑制性的效应。此外,提供的形态将具有这样的物理化学性质:所述性质对于药物单独地或组合地生产、储存和/或施用而言是有利的。
如下实现了该目的:通过提供5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的2种新颖的脱水物(anhydrate)(脱水物形态I和II),基于物理化学性质和独立的免疫调节性质中的实验数据,它们令人惊讶地且可证实地不同于现有技术,即尤其不同于已知的5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐。然而,根据本发明的脱水物形态I(→晶型I)具有免疫调节性质,尤其是主要免疫刺激性的性质,根据本发明的新颖的脱水物形态II(→晶型II)具有免疫调节性质,尤其是主要免疫抑制性的性质。
通过晶面间距和2-θ角的各10个特征值来定义晶型I和II,表示在各自的x-射线粉末衍射图中(图2和3)。
发明人已经发现,晶型I和II具有对制药加工和应用有利的物理性质,包括稳定性、可储存性、不吸湿性和溶解性性。与可能发生含水量的变化并因而可能发生配制问题(例如通过在片剂压制、包囊或灭菌过程中活性成分的重量变化)的例如二水合物相比,这些就药物生产和进一步加工而言是有利的。在根据本发明的晶型和现有技术的晶型之间存在物理性质(例如溶解性)的差异(参见表6)。
此外,发明人已经自己完成了下述任务,即提供方法,所述方法以可行的且可再现的方式使得根据本发明的5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的新颖脱水物形态成为可能。所述方法意在不使用重金属催化剂进行,并允许甚至以任意批次大小可再现地生产新颖晶型II。此外,发明人已经自己完成了下述任务,即提供用于生产晶型I和II的方法,所述晶型I和II在制药加工和不同应用类型的应用方面具有有利性质。
通过至少一种用于任选地生产晶型I或II的方法实现了该目的,其中将氢氧化钠和鲁米诺溶解于水中。通过加入低分子的醇,优选乙醇或2-丙醇,结晶的鲁米诺钠盐沉淀出来。在分离和重复的洗涤步骤并保持一定的搅拌时间以后,得到希望的晶型I或II。根据本发明的方法可以用于任意批次大小。
用于生产两种晶型的初产物是尽可能最纯的鲁米诺,或通过在碱性介质中用合适的还原剂还原3-硝基邻苯二甲酸(经由3-硝基邻苯二甲酸酐)来生产它们的方法。此后进行任选的通过重结晶的纯化步骤。
本发明最后包括晶型I或II或其组合的药物制剂,所述晶型分别是单独的,或与药学上合适的辅助物质在一起。
附图说明
图1显示了晶型I(上图)和II(下图)的扫描电子显微镜图像。
图2描述了晶型I的粉末衍射图。
图3描述了晶型II的粉末衍射图。
图4描述了作为时间(20 min)函数的晶型I和II在水中的溶解速率。
晶型I由2条线中下面的一条线来显示,晶型II由在上面的一条线来显示。
具体实施方式
除非另外显示,在本发明中使用的技术和科学术语具有相关技术领域的技术人员所理解的它们的含义。
“生物体”是具有自动调节的免疫系统的生物实体,尤其是人或动物。
术语“活性成分”包括晶型I或晶型II或二者的混合物。
术语“药物制剂”包含,具有任何药理学上合适的确定的剂量和给药形式(例如粉末、混悬液、乳剂和/或其混合物)的活性成分。它包括药学上合适的辅料和所有物质(它们直接地或间接地制备,作为内容物的组合、聚集、复合物形成,或作为其它反应或相互作用的后果)以及单独的或组合的另外的其它活性成分。
根据本发明,可以将根据本发明的活性成分(单独地或与其它佐剂和标准疗法组合地)的药物制剂配制成液体和固体形式,并以任何医学可接受的方式(主要地,但非排它地,静脉内给药地、肌肉内给药地、局部给药地(例如滴眼剂)、皮下给药地、经皮给药地、阴道给药地、直肠给药地或口服给药地,包括舌下给药地和口腔地)施用,以及以物质洗脱植入物的形式施用。液体形式可以是:例如溶液(例如用于注射和输注)、混悬液、乳剂、喷雾剂、洗剂和软膏剂。固体形式可以是:片剂、糖衣丸、胶囊剂、粉剂或本领域技术人员熟悉的且认为合适的其它形式(例如栓剂)。
术语“辅料”在本文中用于描述,除了活性成分自身以外,药物制剂的每种成分。合适辅料的选择,取决于诸如下述因素:应用的类型和剂量以及辅料自身对制剂的溶解性和稳定性的影响。
药用“辅料”是本领域技术人员已知的或可以在标准的药学教科书或官方药典(例如欧洲药典)中找到的物质。这样的物质例如可能影响活性成分在不同的组织和器官中的分布,或改变药剂形式的效力的持续时间或作用速度,例如通过加速吸收(例如通过二甲基亚砜、烟酸、透明质酸酶),或通过用合适的延迟制剂来延迟它们的效力起始时间。
用于希望的应用形式的药用辅料可以是例如:柠檬酸钠、磷酸钙、碳酸钙与合适的片剂崩解剂一起,例如用于口服应用。这些可以是例如:因为吸水而溶胀的物质(淀粉、纤维素衍生物、海藻酸盐、多糖、葡聚糖、交联的聚乙烯吡咯烷酮),通过与水的化学反应而生成气体的物质(碳酸氢钠、柠檬酸和酒石酸),或作为亲水化试剂(hydrophilization agent)提高微晶的润湿性并从而介导它们在水中的溶解的物质(例如聚乙二醇脱水山梨糖醇脂肪酸酯)。
辅料也是可以用作粘合剂(例如淀粉、明胶、糖物质、纤维素衍生物)或稀释剂(例如糖物质)的物质。此外,本领域技术人员可以找到合适的表面活性物质(例如月桂基硫酸钠或聚山梨酯80)或润滑剂(例如硬脂酸镁、硬脂酸钠)和其它调味剂、抗氧化剂、染料和防腐剂。
术语“基本上纯的”是指,至少95%、优选98%、最优选99%的5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的活性成分纯度。
术语“免疫特异性的”是指,晶型I和/或晶型II用于治疗具有免疫缺陷背景或过度免疫系统的疾病的具体用途。
术语“效应”描述了具有主要免疫刺激性的或主要免疫抑制性的效应的用于本发明目的的活性成分的特异性的(在这里,免疫特异性的)作用机理。
5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的新颖晶型I和II。
本发明包括5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的新的结晶脱水物形态I,其特征在于,配备以波长λ= 1.54187Å和X'Celerator Scientific RTMS检测器的Bragg-Brentano衍射仪(Panalytical X'Pert Pro)的x-射线粉末衍射图,且使用镍过滤的铜辐射Cu K(α1),用D或2-θ值来表示,“D”是晶面间距(表1),和“2-θ”是以度为单位的2-θ角。I(相对)代表反射的相对强度(表2):
表1:脱水物形态I的D值:
表2: 脱水物形态I的2-θ值和相对强度I(相对):
_______________________________________________________________________
2Θ 6.5 12.7 16.9 19.3 22.8 25.8 26.6 27.2 28.7 30.3
I/Io(相对) vst st m w w m st st m m
_______________________________________________________________________
其中:w = 弱,m = 中等,st = 强,vst = 非常强。
本发明另外包括5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的新颖的结晶性脱水物形态II,其特征在于,具有波长λ= 1.54187Å和X'Celerator Scientific RTMS检测器的Bragg-Brentano衍射仪(Panalytical X'Pert Pro)的x-射线粉末衍射图,其中使用镍过滤的铜辐射Cu K(α1),并用D或2-θ值来表示,“D”是晶面间距(表3),“2-θ”是以度为单位的2-θ角。I(相对)代表反射的相对强度(表4):
表3:脱水物形态II的D值:
表4: 脱水物形态II的2-θ值和相对强度I(相对):
______________________________________________________________________
2Θ 6.8 11.2 12.5 13.7 16.7 22.4 24.3 24.9 27.2 27.8
I/Io(相对) vst w m st m w w w m st
______________________________________________________________________
其中:w = 弱,m = 中等,st = 强,vst = 非常强。
有利的物理性质:
通过扫描电子显微镜,可以区分根据本发明的两种晶型:晶型II主要具有几微米长度的由多层组成的针形微晶八面体结构,而在晶型I的SEM中,主要显示出形态学上不一致的具有倒圆边缘的微晶,它们以粉末样方式团聚(图1)。从它们的晶型,根据本发明的晶型产生对于制药加工而言有利的性质:与晶型I相比,晶型II由于它的晶体颗粒形态而具有更高的可自由流动性,并因而具有提高的过滤性,而晶型I更适用于片剂压制(特别因为其更高的容积密度),通过它的团聚趋势进一步促进所述压制,这可能是因为它的层状子结构的粘合。
两种晶型在室温(25℃)和40℃可稳定至少2个月的时间,且分别仅在335℃±10℃(晶型I)或385℃±10℃(晶型II)分解,而在二水合物中,根据US 6,489,326 B1,在85℃已经可以观察到吸热的固相转化(表5)。根据US 6,489,326 B1,如此测量二水合物的固相转化:借助于在耦联以具有Netzsch STA 449 C热天平的质谱法的Linseis L81-077上的同时的热重法-差热分析,耦联其中MS和FTIR在氦下在30 - 300℃耦联。使用相同的装置,在30- 500℃,在合成的空气(4 N2: 1 O2)中,测定晶型I - II的分解温度。使用工厂设置好的软件Proteus来分析数据。
表5:晶型I-II的分解温度和根据US 6,489,326 B1测定二水合物的固相转化
热分析数据证实了发明人的假定,即两种晶型具有在稳定性和可储存性方面的有利性质。与US 6,489,326 B1的二水合物相比,这些性质通过使它们对高能量输入步骤(例如灭菌或研磨)不敏感而进一步促进了根据本发明的晶型I和II的制药加工性。
此外,两种晶型I和II在含水量变化方面基本上是稳定的,从而减少由进一步制药加工(例如压片、包封等)过程中活性成分重量的变化导致的配制问题。
此外,测定了所述晶型在饱和溶液中的溶解度。据此,晶型II比晶型I更易溶;两种晶型又明显比根据US 6,489,326 B1的二水合物更易溶。所述新颖的晶型表现出相对于现有技术的优点,因为注射液更高且良好的最大溶解度允许更小的注射体积,并为局部制剂(诸如具有低含水量的乳膏剂)提供明显更好的可加工性。
表6:与二水合物-US 6,489,326 B1(根据US 6,489,326 B1可生产)相比,晶型I和晶型II在水中在室温的溶解度一览
初始溶解速率的数据,也支持了晶型II的相对更好的溶解度。这些数据源自原位ATR-IR测量(每次测量间隔15 s),在开始记录以后5 min,加入晶型I和II。在搅拌(500rpm)下在25℃分别实现0.25 g晶型I或晶型II在10 mL H2O VE中的完全溶解。已发现,在加入水溶液以后,晶型II在加入水溶液后的最初的几分钟的溶解速率高于晶型I的溶解速率,所述晶型I仅仅延迟达到它的完全平衡浓度。晶型I和II的不同的溶解度和初始溶解速率(图4)可能由它们的不同的表面结构造成(图1)。晶型I的形态学上不一致的倒圆微晶表现出倾向于比晶型II的八面体晶体更紧凑的表面结构,这是由于晶型II的形状会给溶剂提供更大的可接近的表面。晶型I和II之间的初始溶解速率的差异对于生产口服制剂而言是特别重要的,因为在希望延迟释放活性成分的情况(延迟制剂)下,如晶型I的更慢的溶解速率提供了优点。在希望尽可能快和尽可能高的生物利用度的情况下,如晶型II的更快的溶解速率对于口服速效药物制剂而言是有利的。
晶型I和II的不同的热稳定性由钠阳离子和鲁米诺化物(luminolate)分子的不同的化学计量配位作用造成。而在晶型I中,钠阳离子通过分子间氢键与总共6个鲁米诺化物分子配位成三棱柱,在晶型II中仅存在4个鲁米诺化物分子,它们通过分子间氢键排列成四面体。因而,晶型II产生在热趋势上比晶型I更好且更稳定的配位。
医药用途:
令人惊奇地,发明人在体外和体内实验研究中发现了晶型I和II之间显著不同的免疫学效应。
此外,已经发现,由于它们的不同的免疫调节效应,可以以比现有技术更特异性的方式使用晶型I和II:晶型II对某些细胞因子具有在免疫调节方面主要抑制性的效应,晶型I显示出对某些细胞因子的主要免疫刺激性的效应。因此,晶型II特别适用于在具有过度免疫应答条件下的治疗用途,晶型I特别适用于在具有免疫缺陷背景指征下的治疗用途。
尤其对于慢性疾病(例如多发性硬化、丙型肝炎、慢性肠炎和结肠炎)而言,患者的免疫状态总会如此变化,使得从免疫刺激疗法向免疫抑制疗法的变化、或从免疫抑制疗法向免疫刺激疗法的变化、或两种方案的组合施用或错时施用显得合理的(参见DMSG 2006:Aktuelle Therapieempfehlungen 2006年9月)。因此,下面的列举仅仅是示例性的,将疾病归入具有过度免疫应答的病症,不排除用晶型II或用晶型I和晶型II的组合来治疗所述疾病,将疾病归入具有免疫缺陷背景的病症,不排除用晶型I或用晶型I和晶型II的组合来治疗所述疾病。
具有过度免疫应答的病症是例如:移植以后的排斥应答、活动性自身免疫疾病(尤其是活动性类风湿性关节炎、复发性多发性硬化、类狼疮性肝炎、结节性多动脉炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、皮肌炎、贝赫切特氏病、葡萄膜炎、血小板减少性紫癜、重症肌无力、多肌炎、银屑病、银屑病关节炎、别赫捷列夫病、阵发性夜间血红蛋白尿症、强直性脊柱炎、自身免疫性甲状腺炎等)、再生障碍性贫血、天疱疮、类天疱疮、外源性葡萄膜炎、肾病综合征和特应性皮炎,和特别优选由革兰氏阴性或革兰氏阳性病原体(例如MRSA(甲氧西林抗性的金黄色葡萄球菌))的细菌感染诱发的脓毒病症和由其它(例如免疫学或化学)因素诱发的全身性炎症反应综合征(SIRS)。
具有免疫缺陷背景的病症是例如:频繁的流感、复发性呼吸道感染、复发性输出泌尿道感染、疲劳、虚弱、不明原因的心神不定、重新康复、慢性病毒感染(尤其是HIV、乙型肝炎、丙型肝炎、脑炎、带状疱疹、单纯疱疹、内耳感染、水痘、麻疹、巨大细胞病毒病、EB病毒Epstein-Barr)、不同的肿瘤疾病(尤其是多毛细胞白血病、髓样白血病、多发性骨髓瘤、滤泡性淋巴瘤、卡波西肉瘤、皮肤T-细胞淋巴瘤、鼻咽癌、类癌瘤、肾细胞癌、膀胱癌、基底细胞癌、转移癌,特别优选恶性黑素瘤)、脓毒性肉芽肿病、中性白细胞减少症、生殖器疣、角化病、自身免疫疾病(尤其是非活动阶段,例如在恶化之间的复发性多发性硬化)、辐射所致的结肠炎、憩室炎、变态反应(尤其是花粉热、多形日光疹、湿疹、神经性皮炎)、肠炎、结肠炎,以及特别优选地伴随在化学治疗和辐射治疗之前、过程中和之后。
令人惊奇地,通过简单地提供5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的特定晶型,优选脱水物的多晶型物的特定晶型,特别优选型态I和型态II的特定晶型,发明人能够表明不同的效应。这些不同的效应允许用于主要免疫刺激性的(型态I)或主要免疫抑制性的(型态II)目的的特异性的免疫调节用途,两种型态通常以调节方式作用于免疫系统。因而,发明人能够证明型态I在体外和在体内的令人惊奇的免疫刺激效应。
相反地,型态II具有有利于活化的巨噬细胞的免疫调节性质。具体地,发明人能够基于使用LPS刺激的巨噬细胞的体外实验,证实型态II的主要免疫抑制性的性质。据此,实现了IL-6值的明显降低。通过小鼠的体内实验(使用酿脓链球菌(S. pyogenes)的脓毒症模型),也可以证实型态II的显著的治疗效果。
此外,发明人能够通过健康小鼠的体重增长和肝酶值表明,新颖的型态I和II不具有任何毒性,或仅具有低毒性。两种晶型以免疫调节方式(不是排它地免疫刺激性的或排它地免疫抑制性的)起作用。型态I以及型态II在脓毒症模型中导致更高的存活率。
发明人假定,型态I和型态II的组合的、优选地错时的应用,也可能是成功的,并且对于某些适应症(尤其是但非排它地是自身免疫疾病),组合应用比单一应用更有利。
实施例1 - 型态I对LPS刺激的鼠巨噬细胞的体外效应。
在使用分离的小鼠巨噬细胞的实验中,基于在上清液中测得的TNF-α或IL-6的浓度,意在表明在体外型态I的免疫调节效应。为此目的,首先用型态I(20或200 μg/mL)处理巨噬细胞。在1小时以后,用LPS(10、100或1000 ng/mL)刺激处理过的巨噬细胞。在24 h以后,收集上清液,并测量TNF-α和IL-6的浓度。使用未刺激的巨噬细胞、用200 μg/mL 型态I处理过的未刺激的巨噬细胞和经LPS刺激的巨噬细胞(10、100或1000 ng/mL LPS)作为对照。测得的值列出在表7中。
在仅施用LPS(浓度为1 μg/mL、100 ng/mL和10 ng/mL)时,表7的TNF-α测量结果表明LPS的剂量依赖性的刺激。
表7:
在使用LPS和经型态I处理的巨噬细胞的联合组中、在所有LPS组中,可以看到型态I的剂量依赖性的、免疫抑制效应。在用100 ng/5 mL LPS刺激并结合以用200 μg/mL型态I处理的巨噬细胞中,该效应是最显著的,随后是在1 μg/mL LPS和200 μg/mL型态I的组合中,TNF-α值显著降低。
另外,如通过测量的TNF-α值所证实的,在用200 μg/mL经型态I处理的未刺激的巨噬细胞的对照组中可以看到显著的免疫调节,在这里是免疫刺激效应。
实施例2 - 型态II对LPS刺激的鼠巨噬细胞的体外效应。
在骨髓巨噬细胞的另一个体外模型(小鼠)中,能够证实型态II的免疫调节性的(主要免疫抑制性的)治疗效应。为此目的,首先用浓度为2、20或200 μg/mL的型态II处理分离的小鼠骨髓巨噬细胞,并在处理后1 h,用100 ng/mL或10 ng/mL LPS进行刺激。在24 h以后,收集上清液,并测量TNF-α和IL-6的浓度。使用未刺激的巨噬细胞、用200 μg/mL型态II处理过的未刺激的巨噬细胞和LPS刺激的巨噬细胞(10或100 ng/mL LPS)作为对照。测得的值列出在表8中。
表8:
在用100 ng/mL LPS刺激的在所有活性成分浓度中的巨噬细胞组中,可以测量到TNF-α浓度的显著降低。在用10 ng/mL LPS刺激的巨噬细胞组中,可以看到在最高活性成分浓度(200 μg/mL)中TNF-α的显著减少。
此外,基于IL-6值的显著降低,可以观察到型态II对LPS刺激的巨噬细胞的免疫抑制效应。在2 μg/mL活性成分与用100 ng/mL LPS刺激的巨噬细胞的组合中,以及在20 μg/mL活性成分浓度下用10 ng/mL LPS刺激的巨噬细胞的组中进行了测量。这些结果与来自使用巨噬细胞的早期体外初步试验(其中使用不同的LPS和活性成分组合(1 μg/mL LPS与100μg/mL))的IL-6值一致,这也表明了型态II对经刺激的鼠巨噬细胞的免疫抑制效应。没能表明对未经LPS诱导的巨噬细胞的免疫刺激效应。
实施例3 - 健康小鼠的体重增长
在革兰氏阳性脓毒症(酿脓链球菌感染)的小鼠模型中,测试了5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型I和II的治疗可用性。在感染发生以后6小时,肠胃外施用活性成分。在第一次施用以后24小时,进行活性成分的第二次施用。在感染以后48小时,结束实验。对于两种型态(物质组),使用了3种不同的剂量。小鼠各获得每次每只小鼠2、20或200 μg型态I或型态II。
除了物质组(型态I和型态II)以外,一个组接受食盐溶液(NaCl)来替代溶解的活性物质,一个组不接受任何治疗。平行于受感染的动物,形成没有受感染动物的比较组。
各个治疗组各自包含5只动物,且对于未感染的对照,形成2个重复,对于受感染的对照和含有型态II的组,形成4个重复,所以在实验中共有180只动物。
已知,在使用生长中的小鼠或大鼠的动物实验中物质的毒性会影响体重增长。在表9中,总结了未感染的对照动物在2天时间内的体重增长(g)。
表9:
在未感染的动物中,没有死亡。没能发现组之间的体重增长的相关差异。因此可以假定,型态I以及型态II不具有任何毒性,或最多具有非常小的毒性。
实施例4 - 受感染的小鼠的体重增长
在实施例3描述的脓毒症模型中,测试了5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型I和II对酿脓链球菌感染的小鼠的体重增长的影响。在急性感染阶段,体重的增长可能提供重要的预示信息。一些动物没有活过第2天至实验结束。根据趋势,个体在感染以后的第一个24小时期间的体重增长,会提示活到48小时以后至实验结束的可能性,但是不存在显著的关联。由于不存在关于在第2天中死亡的动物在整个实验时间内的体重增长的数据,在下面的表10中除了显示整个实验时间的体重增长以外,还显示了实验第1天的体重增长。
表10:
根据趋势,与在对照组中的动物相比,在感染以后的第一个24小时内,接受5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的型态I的小鼠表现出更低的体重减轻。对于20和200 μg型态I的剂量而言,该优点特别显著。该对于物质组中趋势更高的存活率的间接提示在活过第2天的动物中不再能发现。
实施例5 - 在酿脓链球菌感染以后的存活概率
在实施例3所述的脓毒症模型中,测试了5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型II和I对被酿脓链球菌感染的小鼠的存活概率的影响。各个组表现出感染以后至少48小时的不同的存活概率。在表11中,总结了存活动物的比例。
表11:
与对照相比,型态I和型态II都导致存活动物比例的增加。因而,可以假定型态I以及型态II对脓毒症的积极影响,也独立于其各自的特异性效应。
实施例6 - 在血液和肝脏中的病菌负载
在实施例3中所述的脓毒症模型中,测试了5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型II和I对受酿脓链球菌感染的小鼠的血液和肝脏中的病菌负载的影响。
在感染以后48小时,结束实验,并测定此时在血液和肝脏中存在的病菌负载(CFU)(参见表)。
表12:
与对照相比,型态II以及型态I在最高剂量中表现出在血液中的病菌计数的趋势性减小。发明人将这视作通过施用5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐(尤其是型态2)对感染的更好可控性的证据。但是,应当指出,对于在实验结束以前已经死亡的动物,没有进行病菌计数测定。发明人认为,对于病菌计数测定而言,在早期的的病菌负载将特别高于更晚死亡的动物,且因此由型态I和II诱导的效应将甚至更明显。
实施例7 - 在健康的实验动物中的细胞因子
在实施例3所述的动物模型中研究了,如果将型态I和型态II施用给健康的小鼠,则所述施用对小鼠中的某些细胞因子(尤其是IL-6和TNF-α)是否产生影响和产生怎样的影响。在48小时后,在第2个施用天结束时,采集血液。就IL-6而言,在物质组中和在对照组中都未能发现增加。在表13中,总结了TNF-α的结果。
表13:
尽管型态II和对照没有造成TNF-α的相关增加,但在施用型态I以后,出现了与其它组相比显著的增加。对于20 μg剂量,该效应是最显著的,该组明显不同(p < 0.001)于对照组以及接受型态II的组。在这里,在型态I的情况中产生特异性的免疫刺激效应,该效应在型态II中不可检测到。
实施例8–在脓毒症模型中的细胞因子
在实施例3所述的脓毒症模型中,还研究了型态I和型态II的施用对被酿脓链球菌感染的小鼠中的某些细胞因子(尤其是IL-6和TNF-α)具有何种影响。在感染后48小时,在实验结束时,采集血液。
由于可以表明,在有些情况下,甚至在对照组(阴性对照和NaCl)内的重复之间,由感染造成的细胞因子增加是显著不同的,所以不能将来自重复组的数据合并。
另外应当指出,这些值仅从也第2实验日直到结束时仍存活的那些动物得到。此外,发明人假定,先死亡的动物具有非常高的预示不利的IL-6值。
尽管如此,在型态II的情况中部分存在明显的IL-6减少的趋势,但是不幸的是,不能在所有重复中证实。发明人正在研究其它动物模型,所述模型更好地适用于绝对地证实型态II对细胞因子(甚至在体内)的抑制效应。
实施例9 -健康的实验动物的肝酶/转氨酶
研究了如果将型态I和型态II施用给健康的小鼠,所述施用对某些肝酶(尤其是转氨酶GOT(AST)和GPT(ALT))是否产生影响,和产生怎样的影响。在第2个施用日结束时,采集血液。在这里未能发现组之间的明显差异。这证实了实施例3所示的良好相容性。
实施例10–在脓毒症模型中的肝酶/转氨酶
在实施例3所述的脓毒症模型中,还研究了型态I和型态II的施用对被酿脓链球菌感染的小鼠中的某些肝酶(尤其是转氨酶GOT(AST)和GPT(ALT))产生何种影响。
在感染以后48小时,采集血液。对于具有脓毒性进程的感染,在某些情况下,可能发生肝酶值的急剧增加。以与受感染的小鼠的细胞因子值类似的方式,这里在相同组内的各个重复之间也出现显著差异,所以不能对数据进行总体分析。型态II在一些重复中表现出肝酶值降低的趋势。但是,不能在所有重复中看到这些提示。
但是,未能发现组之间的实质性差异。以与实施例6中的病菌计数和实施例8中的细胞因子值类似的方式,存在丢失过早死亡的动物的数据的偏倚。发明人认为,对于用5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐(尤其是型态II)治疗的小鼠而言,在24小时以后测定转氨酶是一个显著的优点。
根据本发明的结晶性脱水物形态I和II的生产
在下面,例证地描述了晶型I和II的生产。
所有生产实施例的合成起点是从现有技术已知的鲁米诺,其可以例如根据下述反应方案来生产:
在这里显示了通过3-硝基邻苯二甲酸(i)的反应来合成鲁米诺(iii),所述3-硝基邻苯二甲酸(i)可以在碱性介质中被肼或它的盐之一或其它合适的还原剂(例如亚硫酸铵或三乙二醇)经由3-硝基邻苯二甲酸酐(ii)还原成鲁米诺。鲁米诺的合适的生产方法可以参见:Williamson, K.L.见:Macroscale and Microscale Organic Experiments;第2版;D.C. Heath: Lexington, MA, 1994。适用于生产鲁米诺的另一种方法例如发现于US 6,489,326 B1中,该方法利用阮内镍催化剂。
在一种更具体的方法中,还可以如下生产起始产物鲁米诺,并使用规定的当量,可以生产任意量的鲁米诺:
生产实施例鲁米诺。
第1步:3-硝基邻苯二甲酸——3-硝基邻苯二甲酰肼
批次大小:
在第一步中,提供3-硝基邻苯二甲酸(200 g, 0.95 mol)和水合肼(51 g, 1.02mol),并在2 l反应烧瓶中与乙二醇(300 mL)混合,所述反应烧瓶配有回流冷凝器(T = 110℃)和李比希冷凝器的组合。使温度升高至110℃,通过蒸馏去除水。继续加热反应混合物,最高到大约200℃回流乙二醇。1小时以后,不再形成水。将混合物冷却至大约100℃,并加入水(1200 mL)。产生淡褐色沉淀物。通过加入冰水,将混合物冷却至室温(25℃±5℃),并搅拌过夜。过滤沉淀物,并用水(3 x 300 mL)洗涤。在90℃/20±10毫巴,在旋转蒸发仪中干燥潮湿的产物,直到得到恒重。
该方法的优点是,通过使用水合肼来替代硫酸肼,在以后的步骤中不会形成任何干扰的无机材料,且通过使用沸点在大约196℃的乙二醇,可以比具有更高沸点的其它溶剂(它们的使用会导致产物中的污染物)更好地操作回流煮沸的过程控制。
第2步:3-硝基邻苯二甲酰肼——5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮
批次大小:
在第2步中,使3-硝基邻苯二甲酰肼与5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮反应,其中将3-硝基邻苯二甲酰肼(100 g, 0.48 mol) 48.3 mmol)溶解在3摩尔氢氧化钠溶液(1700 mL)中,同时加热至大约50 - 60℃。向该溶液中,分数份加入连二亚硫酸钠(300 g, 1.73 mol)。由此,反应混合物的温度升高至大约80℃。在完全加入连二亚硫酸钠以后,将反应混合物回流加热大约4 h。加入醋酸(200 mL, 1.73 mol),并冷却反应混合物过夜。分离得到的沉淀物,并用水(3x170 mL)洗涤。在大约80℃/20±10毫巴,在旋转蒸发仪中干燥产物。
脱水物形态I。
I. 生产实施例I - 晶型I。
本发明的主题是,一种生产脱水物形态I的方法,其中通过在氢氧化钠溶液中混合5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮(鲁米诺),并将该溶液逐滴加入低分子液体醇(优选乙醇)中,所述醇会降低产生的鲁米诺钠盐的溶度积,使得所述盐开始沉淀出来。所述醇应当具有优选≥95%、特别优选≥98%的纯度。根据本发明,在50至最高90℃之间的温度下干燥产生的沉淀物。
生产实施例I - 晶型I -实施方案I。
在生产实施例I的一个优选的实施方案中,可以如下沉淀出晶型I:通过将500 -750 mL 的0.8 - 1.2摩尔鲁米诺悬浮液与500 - 750 mL 的1.0 - 1.3摩尔碳酸钠溶液相混合,在搅拌下,将所述混合物逐滴加入在20 - 50℃的10 - 15 l低分子醇(优选乙醇)中,所述醇优选具有≥95%、特别优选≥98%的纯度,然后将所述悬浮液在10 - 40℃下搅拌15 -25 h。在分离以后,然后优选风干产生的沉淀物。在50℃- 80℃进一步干燥以后,将所述沉淀物溶解在10 - 20倍量的低分子醇(优选乙醇)中,所述醇具有≥95%、特别优选地≥98%的纯度,将所述悬浮液在10 - 40℃搅拌15 - 25 h,并过滤。然后风干滤饼,在50℃- 90℃(优选50℃)重新干燥,粉末化,并干燥,直到达到≤0.4%、优选≤0.3%、最优选≤0.2%的结晶水含量。
生产实施例I - 晶型I -实施方案II。
a)在生产实施例I的一个特别优选的实施方案中,可以如下生产晶型I:
b)在2 l烧杯中准备190 - 220 g鲁米诺,并在搅拌下在至少20℃,将其溶解在1.25 L 1.0 - 1.1摩尔的NaOH溶液中。
c)通过具有滤纸Ø70 mm的瓷漏斗(例如Schleicher & Schuell Type 1575),过滤该批溶液,不重新洗涤。
d)在3-颈圆底烧瓶中,准备12 - 14 l乙醇(优选地,具有≥98%的纯度)。在搅拌下,在25℃±10℃,在25 min±10 min内,逐滴加入该批溶液。在20℃±10℃下搅拌该悬浮液16±5 h。
e)通过具有滤纸的瓷漏斗,过滤沉淀物,并用大约400 - 500 mL的低分子醇(优选具有≥98%的纯度的乙醇)重新洗涤。
f)将滤饼精细地分散在玻璃碗上,并在排气罩下干燥过夜。然后,在50℃- 90℃,优选地50℃- 70℃,特别优选地50℃,在干燥箱中重新干燥,直到得到恒重。
g)粉末化,并称量沉淀物。
h)在4 l的 3-颈圆底烧瓶中,准备在g)中得到的沉淀物的12 - 15倍量(12 - 15mL/g)的低分子醇(例如甲醇、乙醇、2-丙醇,优选具有≥98%的纯度)。在搅拌下,在其中悬浮所述沉淀物。在20℃±10℃下,将所述悬浮液搅拌16 h±5 h。通过具有滤纸的瓷漏斗,过滤悬浮液,并用大约500 mL低分子醇重新洗涤。
i)将滤饼精细地分散在玻璃碗上,并在排气罩下干燥过夜。然后,在50℃- 70℃,优选地50℃,在干燥箱中干燥2 - 6 h,直到得到恒重。使用研钵研磨所述物质,并称重它。根据例如Karl-Fischer滴定法测得的结晶水含量应当≤0.4%。如果结晶水含量>0.4%,则重复步骤h)- i)。
j)称重该物质,并确定产率。
生产实施例I - 晶型I -实施方案III。
在一个最优选的实施方案中,可以如下生产晶型I:
a)在2 l烧杯中,准备200 g鲁米诺,并在搅拌下,在30℃±10℃下溶解在1.25升1摩尔NaOH溶液中。
b)通过具有滤纸Ø70 mm的瓷漏斗(例如Schleicher & Schuell Type 1575),过滤该批溶液,不重新洗涤。
c)在20 l 的3-颈圆底烧瓶中,准备12.5 l乙醇(优选地,具有≥99%的纯度)。在搅拌下,在25℃±5℃,在30 min±5 min内,逐滴加入该批溶液。在25℃±5℃搅拌该悬浮液20h±1 h。
d)通过具有滤纸Ø185 mm的瓷漏斗(例如Schleicher & Schuell Type 1575),过滤该悬浮液,并用大约500 mL乙醇(优选具有≥99%的纯度)重新洗涤。将滤饼精细地分散在玻璃碗上,并在排气罩下干燥过夜。然后,在50℃- 70℃,优选地50℃,在干燥箱中干燥,直到得到恒重。
e)粉末化该沉淀物,并称量它。
f)在3-颈圆底烧瓶中,准备所得到的沉淀物的12倍量(12 mL/g)的乙醇(优选地具有≥99%的纯度)。在搅拌下,在其中悬浮所述物质。在25℃±5℃,将所述悬浮液搅拌20 h±1 h。通过具有滤纸Ø185 mm的瓷漏斗(例如Schleicher & Schuell Type 1575),过滤该悬浮液,并用大约500 mL乙醇(具有≥95%、优选地≥98%的纯度)重新洗涤。将滤饼精细地分散在玻璃碗上,并在排气罩下干燥它。然后,在50℃- 70℃,优选地50℃,在干燥箱中干燥,直到得到恒重。使用研钵研磨所述产物,并称重它。
g)通过例如Karl-Fischer滴定测得的结晶水含量应当≤0.4%。如果结晶水含量>0.4%,则重复步骤f)- g)。
h)称重该物质,并确定产率。
生产实施例II - 晶型I。
在水性条件下,从鲁米诺开始,可以由此生产晶型I,其中制备氢氧化钠溶液,向其中加入鲁米诺。通过搅拌,溶解鲁米诺。然后,在10 - 40 min内,加入乙醇,鲁米诺作为盐沉淀出来。在完全加入并搅拌数小时以后,过滤悬浮液,洗涤滤饼,并干燥。
生产实施例II - 型态I -实施方案II。
在一个优选的实施方案中,使用下述当量的反应物,生产晶型I:在4 - 7 vol/m的水中制备1.0 - 1.4当量的氢氧化钠的溶液,向其中加入1当量的鲁米诺。搅拌反应混合物,直到实现完全溶解。然后,在大约10 - 40 min内,在室温(25℃±5℃)逐滴加入乙醇(50 -70 vol/m)。鲁米诺钠盐作为沉淀物沉淀出来。
在完全加入后,在室温(25℃±5℃)重新搅拌反应混合物数小时,过滤悬浮液;用乙醇(大约10 - 15 vol/m)洗涤滤饼,并任选地在真空干燥箱中或旋转蒸发仪中干燥。
生产实施例II - 型态I -实施方案III。
在一个特别优选的实施方案中,使用下述当量的反应物,生产晶型I:
生产1.0 - 1.4当量的氢氧化钠(优选1.2当量的氢氧化钠(22 g, 0.55 mol))在水(6 vol/m)中的溶液(10 l反应器)。
将1当量的鲁米诺加入该氢氧化钠溶液中。搅拌该反应混合物,直到实现完全溶解。得到褐色澄清溶液。
然后,在大约20 min内,在室温(25℃±5℃)下,逐滴加入乙醇(60 vol/m)。鲁米诺钠盐作为沉淀物沉淀出来。
在完全加入后,在室温(25℃±5℃)下重新搅拌反应混合物最多20 h,优选2 - 8h,特别优选8 h,并过滤悬浮液;用乙醇(大约13 vol/m)洗涤滤饼,并任选地在真空干燥箱中(在50 - 90℃/1 - 3毫巴,优选50 - 70℃,特别优选50℃)干燥,或在旋转蒸发仪中(在20±10毫巴和50℃- 90℃,优选50°- 70℃,特别优选50℃)干燥。
生产实施例III - 型态I - 可放大的批次大小。
发明人已经发现,这些发现的当量关系适用于任意批次大小的鲁米诺,并允许以可再现的方式生产希望的型态I。
脱水物形态II:
晶型II的生产实施例I。
发明人已经发现了一种用于生产晶型II的方法,其中在水性条件下,将鲁米诺与氢氧化钠溶液相混合,并通过加入2-丙醇,降低鲁米诺钠盐的溶度积,使得后者开始沉淀出来。用2-丙醇洗涤沉淀的鲁米诺钠盐,并干燥,直到得到恒重。
生产实施例I - 晶型II -实施方案II。
在一个优选的实施方案中,使用下述当量的反应物,生产晶型II。在6 - 7.5 vol/m水中加入0.5 - 1当量的鲁米诺生产1.0 - 2.0当量的氢氧化钠(优选1.1 - 1.4当量氢氧化钠,特别优选地1.2当量氢氧化钠)的溶液。搅拌该反应混合物,直到实现完全溶解。然后,在大约10 - 40 min内,在室温(25℃±5℃)下逐滴加入2-丙醇(60 - 120 vol/m)。鲁米诺钠盐作为沉淀物沉淀出来。在完全加入后,在室温(25℃±5℃)下搅拌反应混合物。过滤所述产物,用低分子醇、优选2-丙醇(大约13 - 16 vol/m)洗涤,并任选地在真空干燥箱中(在85℃- 120℃/1 - 3毫巴,优选地90℃/1 - 3毫巴)干燥,或在旋转蒸发仪中(在85℃- 120℃/20±10毫巴)干燥。
生产实施例I - 晶型II -实施方案III。
在一个特别优选的实施方案中,提供了用于生产晶型II的当量和批次大小,并且这适用于任意批次大小的鲁米诺,并在下面示例性地显示10 g鲁米诺的批次大小:
将1.2当量的氢氧化钠和1当量的鲁米诺溶解在水(6 vol/m)中。形成澄清溶液。应当立即处理该溶液,因为它将颜色变深。然后,在大约20 min内在室温(25℃±5℃)下加入2-丙醇(60 vol/m),并形成鲁米诺钠盐的沉淀物。在室温搅拌该悬浮液1 - 5 h,优选2 h,特别优选3 h。过滤该产物,用2-丙醇(大约15 vol/m)洗涤,并任选地在真空干燥箱中(在85℃- 120℃/1 - 3毫巴,优选地90℃/1 - 3毫巴)干燥或在旋转蒸发仪中(在85℃- 120℃/20±10毫巴,优选90℃/20±10毫巴)干燥,直到得到恒重。
生产实施例I - 晶型II -实施方案IV。
发明人进一步证实了适合至少300 g、优选400 g、特别优选≥500 g鲁米诺的批次大小的方法,并示例性地描述了785 g的批次大小:
在4700 mL水中生产212 g(5.32 mol,1.2当量)氢氧化钠的溶液(80 l反应器)。将鲁米诺(785 g, 4.43 mol)加入该氢氧化钠溶液中,并搅拌,直到实现其溶解。产生澄清的褐色溶液,经20 - 30 min、优选30 min的时间,向其中加入2-丙醇(60 vol/m)。鲁米诺钠盐作为沉淀物沉淀出来。在完全加入后,在室温(25℃±5℃)下将该混合物重新搅拌至少10h,优选12 h。过滤所述混合物,用2-丙醇(13 vol/m)洗涤滤饼,并任选地在真空干燥箱中(在85℃- 120℃/1 - 3毫巴,优选地90℃/1 - 3毫巴)干燥,或在旋转蒸发仪中(在85℃-120℃/20±10毫巴,优选90℃/20±10毫巴)干燥,直到得到恒重。
生产实施例I - 晶型II - 可放大的批次大小。
发明人已经发现,这些发现的当量关系适用于任意批次大小的鲁米诺,并允许以可再现的方式生产希望的型态II。如果使用更高量的鲁米诺(≥500 g)和体积时,应当注意,选择相应更长的搅拌时间,以得到尽可能最高的终产物的产率。
晶型II的生产实施例II(重结晶)。
发明人已经发现,使用下述当量,可以通过晶型I的重结晶来生产晶型II:将2-丙醇(10 vol/m)(其具有70 - 90%、优选80 - 90%、特别优选90%的纯度)加入1当量的型态I的溶液中,并在室温(25℃±5℃)下搅拌至少10 - 14 h,优选10 - 12 h。过滤所述混合物,用2-丙醇(大约20 vol/m)洗涤滤饼,并任选地在真空干燥箱中(在85℃- 120℃/1 - 3毫巴,优选地90℃/1 - 3毫巴)干燥,或在旋转蒸发仪(在85℃- 120℃/20±10毫巴)中干燥,直到得到恒重。
晶型II的生产实施例II - 晶型I的重结晶- 可放大的批次大小。
发明人发现的重结晶方法可以以下述当量用于任意批次大小,示例性地描述了1g型态I的批次大小:
将晶型I(1 g)悬浮于2-丙醇水溶液(10 - 20% 水)中,并在室温(25℃±5℃)下搅拌至少10 h,优选10 - 14 h,特别优选10 - 12 h。在过滤剩余的溶剂以后,用2-丙醇(2x10mL)洗涤滤饼,并在旋转蒸发仪(在90℃/20毫巴)中干燥,直到达到恒重。
缩写列表:
μg 微克
ALT 丙氨酸氨基转移酶
approx. 大约
AST 天冬氨酸氨基转移酶
CFU 菌落形成单位
DMSG 德国多发性硬化协会
例如 例如
EMEA 欧洲药品管理局
g 克
GOT 谷草转氨酶
GPT 谷丙转氨酶
IL 白介素
l 升
loc.cit. 在引用的位置
LPS 脂多糖
mL 毫升
MW 平均值
ng 纳克
pg 皮克
SEM 扫描电子显微镜
STD 标准偏差
TNF 肿瘤坏死因子
U 国际单位
vol/m 体积单位/质量单位
Claims (23)
1.5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型II,其特征在于,借助于x-射线粉末图测得的晶体学值:
d值:12.9;7.9;7.1;6.5;5.3;4.0;3.7;3.6;3.3;3.2,和/或
2-θ值:6.8;11.2;12.5;13.7;16.7;22.4;24.3;24.9;27.2;27.8;
其特征还在于:形态II的分解温度为385℃±10℃并且结晶水含量≤0.4%。
2.生产根据权利要求1所述的晶型II的方法,其特征在于,将5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮与氢氧化钠溶液混合,并加入2-丙醇,从而降低生成的5- 氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的溶度积,使得所述盐沉淀出来,其中分离并干燥沉淀的结晶产物。
3.根据权利要求2所述的生产晶型II的方法,其特征在于,在室温下,在10 - 40 min内,加入具有≥98%纯度的2-丙醇。
4.根据权利要求2或3所述的生产晶型II的方法,所述方法包括下述步骤:
a)生产1.0 - 2.0当量的氢氧化钠与6 - 7.5当量vol/m的水的混合物;
b)加入0.5 - 1当量的鲁米诺,并搅拌该混合物,直到达到完全溶解;
c)在20±10 min内,在25℃±5℃的室温下,加入60当量vol/m的2-丙醇,所述2-丙醇具有≥98%的纯度;
d)在25℃±5℃的室温下搅拌所述悬浮液至少1 h;
e)过滤,并用13 - 15当量vol/m的2-丙醇洗涤滤饼,所述2-丙醇具有≥98%的纯度;
f)在真空干燥箱中,在85℃- 120℃/1 - 3毫巴,或在旋转蒸发仪中,在20±10毫巴和85℃- 120℃,干燥所述产物,直到得到恒重。
5.药物制剂,其特征在于,它们含有根据权利要求1所述的晶型II。
6.根据权利要求5所述的药物制剂,其特征在于,与其它活性成分和/或佐剂组合。
7.根据权利要求5或6所述的药物制剂,其特征在于,包括药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求1所述的晶型II和/或根据权利要求5-7中任一项所述的药物制剂在制造用于调节免疫系统的药剂中的用途。
9.根据权利要求8所述的晶型II和/或其药物制剂在制造用于调节免疫系统的药剂中的用途,其特征在于,所述免疫系统的调节导致免疫抑制和/或免疫刺激。
10.根据权利要求9所述的用途,其特征在于,所述药剂用于治疗具有过度免疫应答的病症。
11.根据权利要求10所述的用途,其特征在于,所述过度免疫应答是移植以后的排斥应答、活动性自身免疫疾病、再生障碍性贫血、天疱疮、类天疱疮、肾病综合征、特应性皮炎或由革兰氏阴性或革兰氏阳性病原体的细菌感染诱发的脓毒病症。
12.根据权利要求11所述的用途,其特征在于,所述活动性自身免疫疾病选自活动性类风湿性关节炎、复发性多发性硬化、类狼疮性肝炎、结节性多动脉炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、皮肌炎、贝赫切特氏病、葡萄膜炎、血小板减少性紫癜、重症肌无力、多肌炎、银屑病、银屑病关节炎、别赫捷列夫病、阵发性夜间血红蛋白尿症、强直性脊柱炎和自身免疫性甲状腺炎。
13.根据权利要求11所述的用途,其特征在于,所述脓毒病症是由革兰氏阴性和/或革兰氏阳性病原体的细菌感染或者是由免疫学或化学因素诱发的全身性炎症反应综合征诱发的。
14.根据权利要求13所述的用途,其特征在于,所述脓毒病症是由甲氧西林抗性的金黄色葡萄球菌的细菌感染诱发的。
15.根据权利要求9所述的用途,其特征在于,所述药剂用于治疗具有免疫缺陷背景的病症。
16.根据权利要求15所述的用途,其特征在于,所述具有免疫缺陷背景的病症选自频繁的流感、复发性呼吸道感染、复发性输出泌尿道感染、疲劳、虚弱、不明原因的心神不定、重新康复、慢性病毒感染、肿瘤疾病、脓毒性肉芽肿病、中性白细胞减少症、生殖器疣、角化病、自身免疫疾病、辐射所致的结肠炎、憩室炎、变态反应、肠炎或结肠炎。
17.根据权利要求16所述的用途,其特征在于,所述慢性病毒感染选自HIV、乙型肝炎、丙型肝炎、脑炎、带状疱疹、单纯疱疹、内耳感染、水痘、麻疹、巨大细胞病毒病或Epstein-Barr感染。
18.根据权利要求16所述的用途,其特征在于,所述肿瘤疾病选自多毛细胞白血病、髓样白血病、多发性骨髓瘤、滤泡性淋巴瘤、卡波西肉瘤、皮肤T-细胞淋巴瘤、鼻咽癌、类癌瘤、肾细胞癌、膀胱癌、基底细胞癌、转移癌或恶性黑素瘤。
19.根据权利要求16所述的用途,其特征在于,所述自身免疫疾病是在恶化之间的复发性多发性硬化。
20.根据权利要求16所述的用途,其特征在于,所述变态反应选自花粉热、多形日光疹、湿疹或神经性皮炎。
21.根据权利要求15所述的用途,其特征在于,所述病症伴随在化学治疗和辐射治疗之前、过程中和之后。
22.根据权利要求8所述的晶型II和/或其药物制剂在制造用于调节免疫系统的药剂中的用途,其用于治疗具有变化的免疫状态的慢性疾病。
23.根据权利要求22所述的用途,其特征在于,所述慢性疾病选自多发性硬化、丙型肝炎、慢性肠炎或结肠炎。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP10002067 | 2010-03-01 | ||
EP10002067.6 | 2010-03-01 | ||
EP10075744 | 2010-11-25 | ||
EP10075744.2 | 2010-11-25 | ||
CN201180011760.7A CN102971300B (zh) | 2010-03-01 | 2011-03-01 | 5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型、含有它们的药物制剂以及所述晶型的生产方法 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201180011760.7A Division CN102971300B (zh) | 2010-03-01 | 2011-03-01 | 5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型、含有它们的药物制剂以及所述晶型的生产方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN105859634A CN105859634A (zh) | 2016-08-17 |
CN105859634B true CN105859634B (zh) | 2019-06-28 |
Family
ID=43828190
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201180011760.7A Active CN102971300B (zh) | 2010-03-01 | 2011-03-01 | 5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型、含有它们的药物制剂以及所述晶型的生产方法 |
CN201610087179.8A Active CN105859634B (zh) | 2010-03-01 | 2011-03-01 | 5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型 |
CN201610087203.8A Pending CN105726541A (zh) | 2010-03-01 | 2011-03-01 | 5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型i |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201180011760.7A Active CN102971300B (zh) | 2010-03-01 | 2011-03-01 | 5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型、含有它们的药物制剂以及所述晶型的生产方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610087203.8A Pending CN105726541A (zh) | 2010-03-01 | 2011-03-01 | 5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型i |
Country Status (23)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US8772294B2 (zh) |
EP (2) | EP2774920A1 (zh) |
JP (2) | JP6061081B2 (zh) |
KR (1) | KR101770011B1 (zh) |
CN (3) | CN102971300B (zh) |
AU (1) | AU2011223226B2 (zh) |
BR (1) | BR112012021857B1 (zh) |
CA (1) | CA2791327C (zh) |
CH (1) | CH704794B1 (zh) |
CY (1) | CY1115585T1 (zh) |
DK (1) | DK2542535T3 (zh) |
ES (1) | ES2487221T3 (zh) |
HK (2) | HK1223836A1 (zh) |
HR (1) | HRP20140752T1 (zh) |
IL (1) | IL221680A (zh) |
NZ (1) | NZ601689A (zh) |
PL (1) | PL2542535T3 (zh) |
PT (1) | PT2542535E (zh) |
RS (1) | RS53492B1 (zh) |
RU (1) | RU2585677C2 (zh) |
SI (1) | SI2542535T1 (zh) |
WO (1) | WO2011107295A1 (zh) |
ZA (1) | ZA201206264B (zh) |
Families Citing this family (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6061081B2 (ja) * | 2010-03-01 | 2017-01-18 | メトリオファーム アーゲー | 5−アミノ−2,3−ジヒドロフタラジン−1,4−ジオンナトリウム塩の結晶形iまたはii、それを含有する医薬品調製物、5−アミノ−2,3−ジヒドロフタラジン−1,4−ジオンナトリウム塩の結晶形iの製造方法、および5−アミノ−2,3−ジヒドロフタラジン−1,4−ジオンナトリウム塩の結晶形iiの製造方法 |
WO2016096143A1 (de) | 2014-12-18 | 2016-06-23 | Metriopharm Ag | Kristalline form von 5-amino-2,3-dihydrophthalazin-1,4-dion natriumsalz, diese enthaltende pharmazeutische zubereitungen und verfahren zu ihrer herstellung |
EP3416951B1 (en) * | 2016-02-16 | 2020-04-08 | MetrioPharm AG | Crystalline form of 5-amino-2,3-dihydrophthalazine-1,4-dione |
ES2796476T3 (es) * | 2016-02-16 | 2020-11-27 | Metriopharm Ag | Procedimiento para la producción de una forma cristalina de 5-amino-2,3-dihidroftalazina-1,4-diona |
EP3248602A1 (en) | 2016-05-26 | 2017-11-29 | MetrioPharm AG | Use of 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione in the treatment of inflammatory and/or degenerative disorders of the tendons, ligaments of the joints, articular capsules and bursae |
RU2625267C1 (ru) * | 2016-09-22 | 2017-07-12 | Общество с ограниченной ответственностью "АБИДАФАРМА" | Способ производства нестерильных субстанций безводного "тамерита" и/или двухводного "галавита" - натриевых солей 5-амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-диона (варианты) и способы дальнейшей их переработки в стерильные лекарственные препараты |
DK3534904T3 (da) | 2016-11-07 | 2022-04-11 | Metriopharm Ag | Anvendelse af 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazindion i behandlingen af kronisk progressiv multipel sklerose |
CN106810501B (zh) * | 2017-01-23 | 2019-09-10 | 湖北新德晟材料科技有限公司 | 一种利用一锅法合成鲁米诺或异鲁米诺的方法 |
RU2635769C1 (ru) * | 2017-02-08 | 2017-11-15 | Адмир Мусаевич Абидов | Лекарственный препарат на основе 5-амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-диона в виде быстрорастворимой пленки для трансбуккального введения |
RU2673452C1 (ru) * | 2017-08-15 | 2018-11-27 | Межрегиональное общественное учреждение "Институт инженерной физики" | Способ получения активной фармацевтической субстанции, представляющей собой аминодигидрофталазиндион натрия |
EP3511325A1 (en) | 2018-01-11 | 2019-07-17 | MetrioPharm AG | Method for solubilizing 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione |
EP3870175B1 (en) * | 2018-10-26 | 2024-08-28 | Immunopharma Plus D.O.O. | Oral aminodihydrophthalazinedione compositions and their use the treatment of non-viral hepatitis |
EP3858358A1 (en) | 2020-01-31 | 2021-08-04 | MetrioPharm AG | Use of 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione in the treatment of rare chronic inflammatory pulmonary diseases |
EP3858328A1 (en) | 2020-01-31 | 2021-08-04 | MetrioPharm AG | Use of 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione in the inhalatory treatment of inflammatory pulmonary diseases |
US20230113516A1 (en) | 2020-03-25 | 2023-04-13 | Metriopharm Ag | 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione for treatment of acute lung injury |
EP3981405A1 (en) | 2020-10-08 | 2022-04-13 | MetrioPharm AG | Compound for the treatment of coronaviral infections |
WO2021249667A1 (en) | 2020-06-10 | 2021-12-16 | Metriopharm Ag | Compound for the treatment of coronaviral infections |
WO2022008093A1 (en) | 2020-07-09 | 2022-01-13 | Metriopharm Ag | Glucocorticoid-sparing agent |
US20240075029A1 (en) | 2020-12-02 | 2024-03-07 | Metriopharm Ag | Luminol for the prophylaxis and the treatment of sequelae of a sars-cov-2 infection |
RU2756568C1 (ru) * | 2021-03-24 | 2021-10-01 | Акционерное общество "Щелково Агрохим" | Способ получения натриевой соли 5-амино-2,3-дигидро-1,4-фталазиндиона в гидратированной или безводной форме |
EP4193994A1 (en) | 2021-12-08 | 2023-06-14 | MetrioPharm AG | Combination of 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phtalazinedione and a 6'-methoxycinchonan-9-ol for use in the treatment of coronaviral infections |
EP4209219A1 (en) | 2022-01-07 | 2023-07-12 | MetrioPharm AG | Combination of budesonide and 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phtalazinedione |
EP4248963A1 (en) | 2022-03-25 | 2023-09-27 | MetrioPharm AG | Combination of 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phtalazinedione and a fumaric acid ester |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5543410A (en) * | 1993-02-19 | 1996-08-06 | L.I.M.A.D. Limited | Pharmacological use of phthaloylhydrazide derivatives; combination and application thereof |
US6489326B1 (en) * | 2000-03-28 | 2002-12-03 | Anatoliy Ivanovich Pavlov | Medicinal preparation and process for manufacturing thereof |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1089086C (zh) * | 1988-03-31 | 2002-08-14 | 兰德尔·L·米尔斯 | 鲁米纳得类药物 |
CH683966A5 (it) | 1993-02-19 | 1994-06-30 | Limad Marketing Exp & Imp | Composti della classe dei ftalidrazidici come sostanze attive in agenti anti-ipossici e di difesa. |
RU2113222C1 (ru) | 1997-09-30 | 1998-06-20 | Закрытое акционерное общество "Центр современной медицины "Медикор" | Иммуномодулирующее средство |
RU2138264C1 (ru) | 1999-05-06 | 1999-09-27 | Абидов Муса Тажудинович | Способ получения лекарственного препарата галавит |
RU2169139C1 (ru) | 2000-08-02 | 2001-06-20 | Закрытое акционерное общество "Центр современной медицины "Медикор" | Способ получения щелочных и щелочноземельных солей 5-амино-2,3-дигидро-1,4-фталазиндиона |
RU2167659C1 (ru) | 2000-08-02 | 2001-05-27 | Закрытое акционерное общество "Центр современной медицины "Медикор" | Способ коррекции иммунной системы живого организма |
RU2211036C2 (ru) | 2001-11-20 | 2003-08-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Абидофарма" | Лекарственный препарат (варианты) и способ его производства |
RU2222327C2 (ru) | 2002-03-22 | 2004-01-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Абидофарма" | Способ получения лекарственного препарата |
US7326690B2 (en) | 2002-10-30 | 2008-02-05 | Bach Pharma, Inc. | Modulation of cell fates and activities by phthalazinediones |
RU2238730C1 (ru) | 2003-02-17 | 2004-10-27 | Абидов Муса Тажудинович | Лекарственный препарат |
RU2302863C2 (ru) | 2003-04-18 | 2007-07-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Абидофарма" | Лекарственный препарат (варианты) |
CN1217193C (zh) * | 2003-07-30 | 2005-08-31 | 中国药科大学 | 心肌肌钙蛋白鲁米诺化学发光免疫分析检测方法 |
US8592421B2 (en) | 2003-08-04 | 2013-11-26 | Valery Khazhmuratovich Zhilov | Cyclic bioisosters of purine system derivatives and a pharmaceutical composition based thereon |
PL231885B1 (pl) * | 2009-01-16 | 2019-04-30 | Abidopharma Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia | Sposób wytwarzania soli 5-amino-2,3-dihydroftalazyno-1,4-di onu z metalami alkalicznymi, ich kompozycje farmaceutyczne i ich zastosowanie |
CA2751270C (en) | 2009-02-06 | 2018-01-09 | Bach Pharma, Inc. | Pharmaceutical grade phthalazinediones, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
JP6061081B2 (ja) * | 2010-03-01 | 2017-01-18 | メトリオファーム アーゲー | 5−アミノ−2,3−ジヒドロフタラジン−1,4−ジオンナトリウム塩の結晶形iまたはii、それを含有する医薬品調製物、5−アミノ−2,3−ジヒドロフタラジン−1,4−ジオンナトリウム塩の結晶形iの製造方法、および5−アミノ−2,3−ジヒドロフタラジン−1,4−ジオンナトリウム塩の結晶形iiの製造方法 |
-
2011
- 2011-03-01 JP JP2012555335A patent/JP6061081B2/ja active Active
- 2011-03-01 DK DK11710423.2T patent/DK2542535T3/da active
- 2011-03-01 EP EP14001134.7A patent/EP2774920A1/de not_active Withdrawn
- 2011-03-01 CN CN201180011760.7A patent/CN102971300B/zh active Active
- 2011-03-01 ES ES11710423.2T patent/ES2487221T3/es active Active
- 2011-03-01 BR BR112012021857-3A patent/BR112012021857B1/pt active IP Right Grant
- 2011-03-01 RS RSP20140416 patent/RS53492B1/en unknown
- 2011-03-01 CH CH01123/12A patent/CH704794B1/de not_active IP Right Cessation
- 2011-03-01 CN CN201610087179.8A patent/CN105859634B/zh active Active
- 2011-03-01 CN CN201610087203.8A patent/CN105726541A/zh active Pending
- 2011-03-01 SI SI201130233T patent/SI2542535T1/sl unknown
- 2011-03-01 CA CA2791327A patent/CA2791327C/en active Active
- 2011-03-01 PL PL11710423T patent/PL2542535T3/pl unknown
- 2011-03-01 NZ NZ601689A patent/NZ601689A/en unknown
- 2011-03-01 EP EP11710423.2A patent/EP2542535B1/de active Active
- 2011-03-01 PT PT117104232T patent/PT2542535E/pt unknown
- 2011-03-01 US US13/582,522 patent/US8772294B2/en active Active
- 2011-03-01 AU AU2011223226A patent/AU2011223226B2/en active Active
- 2011-03-01 KR KR1020127025234A patent/KR101770011B1/ko active IP Right Grant
- 2011-03-01 WO PCT/EP2011/001124 patent/WO2011107295A1/de active Application Filing
- 2011-03-01 RU RU2012141274/04A patent/RU2585677C2/ru active
-
2012
- 2012-08-20 ZA ZA2012/06264A patent/ZA201206264B/en unknown
- 2012-08-29 IL IL221680A patent/IL221680A/en active IP Right Grant
-
2014
- 2014-04-08 US US14/247,626 patent/US9079863B2/en active Active
- 2014-08-04 CY CY20141100589T patent/CY1115585T1/el unknown
- 2014-08-06 HR HRP20140752AT patent/HRP20140752T1/hr unknown
-
2016
- 2016-06-09 JP JP2016115125A patent/JP6206689B2/ja active Active
- 2016-10-24 HK HK16112162.9A patent/HK1223836A1/zh unknown
- 2016-10-24 HK HK16112165.6A patent/HK1223929A1/zh unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5543410A (en) * | 1993-02-19 | 1996-08-06 | L.I.M.A.D. Limited | Pharmacological use of phthaloylhydrazide derivatives; combination and application thereof |
US6489326B1 (en) * | 2000-03-28 | 2002-12-03 | Anatoliy Ivanovich Pavlov | Medicinal preparation and process for manufacturing thereof |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Konstitution und Chemilumineszenz, IV Chemilumineszenz von Diazachinonen Zum Mechanismus der Chemilumineszenz cyclischer Diacylhydrazide;Karl-Dietrich Gundermann et al.,;《Liebigs Ann. Chem.》;19701231;第738卷(第1期);第156页第4段制备例 |
化学发光试剂――鲁米诺、异鲁米诺、光泽精及ABEI的合成;沈建民等;《化学试剂》;19881231(第3期);第178-179段 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN105859634B (zh) | 5-氨基-2,3-二氢-(2,3-二氮杂萘)-1,4-二酮钠盐的晶型 | |
JP6678711B2 (ja) | マルトール第二鉄の結晶形態 | |
US6037357A (en) | N-benzoyl-α-alkylated azatyrosines as anticancer agents | |
US4131678A (en) | Urapidil/furosemide compounds, compositions and use | |
JP2000212087A (ja) | ニトロ―5―デアザフラビン誘導体を有効成分とする放射線増感剤。 | |
JPH0326168B2 (zh) | ||
KR101484086B1 (ko) | 신규한 이모딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 암 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
BR112017008903B1 (pt) | Formas cristalinas de maltol férrico |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 1223929 Country of ref document: HK |
|
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |