CN105832748A - 一种从罗汉果总皂苷中制备罗汉果醇新型衍生物的方法 - Google Patents
一种从罗汉果总皂苷中制备罗汉果醇新型衍生物的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105832748A CN105832748A CN201610296723.XA CN201610296723A CN105832748A CN 105832748 A CN105832748 A CN 105832748A CN 201610296723 A CN201610296723 A CN 201610296723A CN 105832748 A CN105832748 A CN 105832748A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- optional
- alcohol
- acid
- volume ratio
- momordica grosvenori
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/575—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of three or more carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, ergosterol, sitosterol
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/42—Cucurbitaceae (Cucumber family)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
本发明提供了包含有罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)的组合物的合成方法,相比现有的合成罗汉果醇衍生物单体(3)的方法,此合成方法简单、成本较低,而且还能合成新物质罗汉果醇衍生物单体(4),同时在此基础上,本发明还提供了制备罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)的方法,此方法通过简单的柱层析分离技术,可以低成本、高效率和大规模地分离制备罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4),为进一步开发相关的一类新药打下基础。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域,具体涉及罗汉果醇衍生物的合成方法。
背景技术
近年来,世界各国对癌症和其它疾病(包括心脑血管疾病、糖尿病、精神忧郁、老年性痴呆症等)的看法正在发生重大的转变,越来越多的医生和研究人员,正在寻找可预防或延缓这些疾病发生的天然药物。目前,天然、高效、广谱、低毒的用于预防及治疗癌症和其它疾病的临床研究化合物药品,很多为天然药物或来自天然原料的半合成产品,是当前生物医药领域的研发热点。
最新的生物医学研究表明,许多来自天然植物的单体活性成分药物或多组分活性成分药物经人体胃肠道代谢或经肝脏代谢后所产生的各种代谢衍生物,被吸收入血后,才成为人体内真正起药效作用的活性成分,且具有比原形植物活性成分更显著疗效的特性。比如:大鼠口服放射性标记的地奥心血康胶囊24h后,大鼠粪便中出现了2-3个新的衍生物,同时也存在少量未改变的原型药物,进一步的研究表明,这些新出现的衍生物是甾体皂甙糖基选择性水解的一系列去糖基的次生甾体皂苷,说明地奥心血康在肠内菌代谢后真正被吸收入血的是代谢衍生物;人参皂苷是人参(三七)的主要活性成分,目前从人参(三七)中已经分离和鉴定了40多种单体成分(如:Ra、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2、Rf...等),它们经过人体代谢后会产生一些极微量的新型代谢寡单体Rg3、Rh2、C-K、aPPD和aPPT等。大量的研究表明,未经人体代谢的原形人参皂苷对癌细胞没有抑制作用,而这些新产生的极微量的新型代谢寡单体(Rg3、Rh2、Rh1、C-K、aPPT和aPPD)以及转化人参皂苷Rk1和Rk2等对癌细胞却有杀伤作用,其中尤其以原人参二醇aPPD对癌细胞的抑制作用最为显著。
由于上述原因,天然抗肿瘤药物的研发取得了越来越多的关注。无论是抑制或杀伤肿瘤细胞、调整机体免疫功能、改善症状与特征、减轻放化疗毒副作用,还是肿瘤的病后调理,天然抗癌药物具有重要作用。由此,天然植物新疗法将成为继手术、放疗、化疗、生物疗法的第五大治疗方法。
罗汉果是一种名贵药材,属于葫芦科多年生藤本植物,性凉味甘。罗汉果提取物中含非糖甜味的皂苷成分,又称罗汉果总皂苷,根据其中皂苷元连接糖基的数目以及连接位置的不同已经在罗汉果总皂苷中分离鉴定出罗汉果二糖苷、三糖苷、四糖苷、五糖苷、六糖苷等多种皂苷单体,分别命名为罗汉果甜苷II、III、IV、V、VI(MogrosideII、III、IV、V、VI)等,其中罗汉果甜苷V-MogrosideV(1A)(如图1所示)的甜度是蔗糖的256-344倍,罗汉果甜苷IV-MogrosideIV(1B)(如图1所示)的甜度为蔗糖的126倍,其热量为零,具有清热润肺镇咳、润肠通便之功效,对肥胖、便秘、糖尿病等具有防治作用。
罗汉果皂苷Mogrosides是两条由四个以下葡萄糖单位组成的葡萄糖苷侧链以β-糖苷键与皂苷元罗汉果醇Mogrol(2)的C-3、C-24相连,在侧链葡萄糖之间的连接键为β-1,6和β-l,2糖苷键。
许多研究表明,罗汉果皂苷能提高葡萄糖和脂肪的利用,增加胰岛素的敏感性,但罗汉果降血糖作用的有效成分和作用机制并不明确。中科院上海药物研究所胡立宏课题组和沈旭课题组对罗汉果的降血糖作用进行了研究,首先在HepG2细胞中,对罗汉果中含量最高的罗汉果甜苷V(1A)进行测试,发现它对AMPK没有活性;而罗汉果醇Mogrol(2)(如图2所示)及其衍生物3α-羟基-25-脱羟基-24-酮-罗汉果醇(3α-hydroxy-25-dehydroxy-24-oxomogrol)(3)却能够激活AMPK(Chen X.B.,et al;Bioorganic&Medicinal Chemistry 2011,19:5776)。虽然文献报道了罗汉果醇衍生物单体(3)(Chen X.B.,et al;Bioorganic&Medicinal Chemistry 2011,19:5776)的制备,但产率低、分离纯化困难,难以工业化生产,另外该方法无法同时制备罗汉果醇衍生物单体(4);目前也没有任何专利和文献公开报道通过罗汉果提取物同时合成罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)的方法。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供了包含有罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)的组合物的合成方法,在此基础上,本发明还分别提供了罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)的制备方法。
本发明第一方面提供了一种组合物,至少包括如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(3)和如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(4)。
本发明第二方面提供了上述组合物的合成方法,包括:将含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物溶于呈酸性的醇的水溶液中进行加热反应即得。
在一优选例中,所述呈酸性的醇的水溶液的制备方法为:用酸性物质将醇的水溶液调节为酸性。
在一优选例中,所述醇为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、丁醇、乙二醇、丙二醇、丙三醇和聚乙二醇中的至少一种。
在一优选例中,所述醇的水溶液中醇与水的体积比为1:10~10:1。
在一优选例中,所述醇的水溶液中醇与水的体积比为1:3~3:1。
在一优选例中,所述醇的水溶液中醇与水的体积比为1:1。
在一优选例中,所述酸性物质为无机酸或有机酸。
在一优选例中,所述无机酸为盐酸、硫酸和磷酸中的至少一种。
在一优选例中,所述有机酸为甲酸、乙酸、卤代乙酸、乙二酸、丙二酸和柠檬酸中的至少一种。
在一优选例中,所述呈酸性体现为PH值为2.5~3.5。
在一优选例中,所述呈酸性体现为PH值为2.8~3.0。
在一优选例中,当所述含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物中罗汉果总皂苷的重量百分比为70%以上时,所述含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物与呈酸性的醇的水溶液的质量体积比为1:10~1:3。
在一优选例中,所述含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物与呈酸性的醇的水溶液的质量体积比为1:5。
在一优选例中,所述加热反应的条件是:在100~140℃下加热1~3小时。
在一优选例中,所述加热反应的条件是:在120℃下加热2小时。
在一优选例中,所述加热反应后还包括对加热反应得到的反应液用碱性物质进行中和,加热将醇蒸发,得到含组合物的浓缩液。
在一优选例中,用碱性物质进行中和是中和至PH到6.5~7.5。
在一优选例中,用碱性物质进行中和是中和至PH到7.0。
在一优选例中,所述碱性物质为无机碱和/或盐。
在一优选例中,所述无机碱和/或盐为NaOH、KOH和Na2CO3中的至少一种。
在一优选例中,上述组合物的合成方法,还包括对含组合物的浓缩液洗涤后得到咖啡色浸膏的步骤。
在一优选例中,所述对含组合物的浓缩液洗涤后得到咖啡色浸膏的步骤:在含组合物的浓缩液中加入蒸馏水冷却静置,弃去上面水层,得到含组合物的咖啡色浸膏。
在一优选例中,所述浓缩液与蒸馏水的体积比为1:5~1:3。
在一优选例中,上述的组合物的合成方法,还包括对含组合物的咖啡色浸膏进行萃取和浓缩,得到含组合物的浅咖啡色固体。
在一优选例中,所述萃取所采用的萃取溶剂为乙酸乙酯。
在一优选例中,每次萃取的固液比1:6~1:3。
在一优选例中,所述萃取的次数为2~5次,将每次萃取液合并。
在一优选例中,所述萃取的次数为3次。
在一优选例中,第一次萃取所用的萃取溶剂的体积是第二次萃取或第三次萃取所用的萃取溶剂的体积的2倍。
在一优选例中,所述浓缩是:100-120℃下用旋转蒸发仪浓缩,把萃取溶剂完全蒸干。
本发明第三方面提供了一种具有如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(3)的制备方法,包括将含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物溶于呈酸性的醇的水溶液中进行加热反应,然后分离纯化即得。
在一优选例中,包括对权利要求7的含组合物的浅咖啡色固体进行分离和纯化的步骤。
在一优选例中,所述分离为层析分离。
在一优选例中,所述层析分离为硅胶柱层析分离。
在一优选例中,所述硅胶柱层析分离采用的洗脱液为乙腈和水;
在一优选例中,所述乙腈和水的体积比为95:5~20:1;
在一优选例中,对含组合物的浅咖啡色固体进行分离后还要进一步浓缩;
在一优选例中,浓缩后进行层析纯化;
在一优选例中,所述层析纯化为硅胶柱层析纯化;
在一优选例中,所述硅胶柱层析纯化采用的洗脱液为氯仿和乙醇。
在一优选例中,所述氯仿和乙醇的体积比为16:1~8:1。
在一优选例中,所述氯仿和乙醇的体积比为12:1。
本发明第四方面提供了一种具有如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(4)的制备方法,包括将含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物溶于呈酸性的醇/水溶液中进行加热反应,然后分离纯化即得。
在一优选例中,包括对上述含组合物的浅咖啡色固体进行分离和纯化的步骤。
在一优选例中,所述分离为层析分离。
在一优选例中,所述层析分离为硅胶柱层析分离。
在一优选例中,所述硅胶柱层析分离采用的洗脱液为乙腈和水。
在一优选例中,所述乙腈和水的体积比为95:5~20:1。
在一优选例中,对含组合物的浅咖啡色固体进行分离后还要进一步浓缩。
在一优选例中,浓缩后进行层析纯化。
在一优选例中,所述层析纯化为硅胶柱层析纯化。
在一优选例中,所述硅胶柱层析纯化采用的洗脱液为石油醚和乙酸乙酯。
在一优选例中,所述石油醚和乙酸乙酯的体积比为3:2~4:1。
在一优选例中,所述石油醚和乙酸乙酯的体积比为3:1。
本发明使用的术语具有以下定义,除非另有描述:
本文所用的术语“罗汉果醇衍生物单体(3)”意指3α-羟基-25-脱羟基-24-酮-罗汉果醇(3α-hydroxy-25-Dehydroxy-24-oxomogrol);本文所用的术语“新型罗汉果醇衍生物单体(4)”意指3α-羟基-22、24-二烯-24、25-脱羟基-罗汉果醇(3α-hydroxy-22、24-diene-24、25-dehydroxy-mogrol)(4)。
本发明提供了包含有罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)的组合物的合成方法,相比现有的合成罗汉果醇衍生物单体(3)的方法,此合成方法简单、成本较低,而且还能合成新物质罗汉果醇衍生物单体(4),同时在此基础上,本发明还提供了制备罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)的方法,此方法通过简单的柱层析分离技术,可以低成本、高效率和大规模地分离制备罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4),为进一步开发相关的一类新药打下基础。
附图说明
图1为罗汉果甜苷V(1A)、VI(1B)的分子结构示意图。
图2为罗汉果醇Mogrol(2)的分子结构示意图。
图3为罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)形成的组合物的合成方法示意图。
具体实施方式
罗汉果总皂苷在酸性条件下通过糖降解形成中间体罗汉果醇(2),罗汉果醇(2)是一个相对不稳定的中间体化合物,在本发明中不直接进行分离,它在酸性条件下可以通过侧链上的羟基脱水形成衍生物(3)和(4)(如图3所示),和其它多数葫芦科植物中直接提取分离的高氧化葫芦烷类四环三萜化合物不同,罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)均是低氧化的葫芦烷类四环三萜化合物,其特点是C-3和C-11上连接的是-OH,而不是=O,氧化程度大大减低,特别是化合物(4)的侧链含有一个共轭双键,氧化程度比化合物(3)更低,抗氧化性更强。
具体来说,本发明首先提供了一种组合物,至少包括如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(3)
和如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(4)。
本发明还提供了上述组合物的合成方法,包括:将含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物溶于呈酸性的醇的水溶液中进行加热反应即得。
所述的醇为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、丁醇;乙二醇、丙二醇、丙三醇;聚乙二醇中的至少一种。
所述呈酸性的醇的水溶液的制备方法为:用酸性物质将醇的水溶液调节为酸性,优选的,所述醇的水溶液中醇与水的体积比为1:10~10:1;优选为1:3~3:1;,进一步优选为1:1。
优选的,所述酸性物质为无机酸或有机酸;进一步优选的,所述无机酸为盐酸、硫酸和磷酸中的至少一种;所述有机酸为甲酸、乙酸、卤代乙酸、乙二酸、丙二酸和柠檬酸中的至少一种。
优选的,所述呈酸性体现为PH值为2.5~3.5;进一步优选的,所述呈酸性体现为PH值为2.8~3.0。酸性太强会导致副反应太多,酸性太弱反应进行的不彻底,因此其PH必须控制在上述范围内。
优选的,所述含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物中罗汉果总皂苷的重量百分比是70%以上时,在此基础上,所述含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物与呈酸性的醇的水溶液的质量体积比为1:10~1:3;进一步优选的,所述含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物与呈酸性的醇的水溶液的质量体积比为1:5。
优选的,所述加热反应的条件是:在100~140℃下加热1~3小时;进一步优选的,所述加热反应的条件是:在120℃下加热2小时。加热反应如果温度较低,反应慢且进行的不完全。
所述加热反应后还包括对加热反应得到的酸性反应液用碱性物质进行中和,加热将醇蒸发,得到含组合物的浓缩液;中和是为了更有利于后面的分离和纯化。
优选的,用碱性物质进行中和是中和至PH到6.5~7.5;进一步优选的,用碱性物质进行中和是中和至PH到7.0。
优选的,所述碱性物质为无机碱和/或盐;进一步优选的,所述无机碱和/或盐为NaOH、KOH和Na2CO3中的至少一种。
优选的,所述得到含组合物的浓缩液后,还包括对含组合物的浓缩液洗涤后得到咖啡色浸膏的步骤。
所述对含组合物的浓缩液洗涤后得到咖啡色浸膏的步骤为:在含组合物的浓缩液中加入蒸馏水冷却静置,弃去上面水层,得到含组合物的咖啡色浸膏。
优选的,所述浓缩液与蒸馏水的体积比为1:5~1:3。
所述得到含组合物的咖啡色浸膏后,还包括对含组合物的咖啡色浸膏进行萃取和浓缩,得到含组合物的浅咖啡色固体。
优选的,所述萃取是采用的萃取溶剂为乙酸乙酯。
优选的,每次萃取的固液比1:6~1:3。
优选的,所述萃取的次数为2~5,将每次萃取液合并;进一步优选的,所述萃取的次数为3次,第一次萃取所用的萃取溶剂的体积是第二次萃取或第三次萃取所用的萃取溶剂的体积的2倍。
优选的,所述浓缩是在100~120℃下用旋转蒸发仪浓缩,把萃取的溶剂完全蒸干。
本发明还提供了一种具有如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(3)的制备方法,包括将含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物溶于呈酸性的醇/水溶液中进行加热反应,然后分离纯化即得。
优选的,包括对上述含组合物的浅咖啡色固体进行分离和纯化的步骤。
进一步优选的,所述分离为层析分离;进一步优选的,所述分离为硅胶柱层析分离;进一步优选的,所述硅胶柱层析分离采用的洗脱液为乙腈和水;进一步优选的,所述乙腈和水的体积比为95:5~20:1;进一步优选的,对含组合物的浅咖啡色固体进行分离后还要进一步浓缩;进一步优选的,浓缩后进行层析纯化;
优选的,所述层析纯化为硅胶柱层析纯化;进一步优选的,所述硅胶柱层析纯化采用的洗脱液为氯仿和乙醇;进一步优选的,所述氯仿和乙醇的体积比为16:1~8:1;进一步优选的,所述氯仿和乙醇的体积比为12:1。
本发明还提供了一种具有如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(4)的制备方法,包括将含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物溶于呈酸性的醇/水溶液中进行加热反应,然后分离纯化即得。
优选的,包括对上述含组合物的浅咖啡色固体进行分离和纯化的步骤。
进一步优选的,所述分离为层析分离;
进一步优选的,所述分离为硅胶柱层析分离;进一步优选的,所述硅胶柱层析分离采用的洗脱液为乙腈和水;进一步优选的,所述乙腈和水的体积比为95:5~20:1;进一步优选的,对含组合物的浅咖啡色固体进行分离后还要进一步浓缩;进一步优选的,浓缩后进行层析纯化;
优选的,所述层析纯化为硅胶柱层析纯化;,所述硅胶柱层析纯化采用的洗脱液为石油醚和乙酸乙酯;
进一步优选的,所述石油醚和乙酸乙酯的体积比为3:2~4:1;进一步优选的,所述石油醚和乙酸乙酯的体积比为3:1。
除非特殊说明,本发明所用术语具有本发明所属领域中的一般含义。
下面参考具体实施例,对本发明进行说明,需要说明的是,这些实施例仅仅是说明性的,而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件的,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1:从罗汉果总皂苷98%的提取物制备罗汉果醇衍生物单体(3)和(4)
将罗汉果提取物50g(罗汉果总皂苷98%,含55%罗汉果甙V,购买于桂林莱茵生物科技股份有限公司)加入250mL的乙醇的水溶液(乙醇和水的体积比为1:1)(预先用盐酸调节至PH值为3.0),在反应釜中搅拌溶解,然后升温至120℃下加热2小时,冷却至室温25℃后,反应液用1M的NaOH碱液中和至PH值为7,在90-95℃下将乙醇尽量蒸出,剩下的浓缩液加入200mL蒸馏水,充分搅拌后冷却、静置,将上面的水层分离弃去,得到咖啡色浸膏;分别用100mL、50mL、50mL乙酸乙酯萃取咖啡色浸膏3次,合并3次萃取液后,在100-120℃下用旋转蒸发仪浓缩,把乙酸乙酯完全蒸干,即得到含罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)的浅咖啡色固体18.2g;用乙醇将浅咖啡色固体载入硅胶柱,用乙腈:水(体积比20:1)梯度洗脱,按先后顺序收集不同的流出液,浓缩后得到A(6.8g)、B(5.6g)两组分;先收集得到的A(6.8g)组分再用硅胶柱分离(氯仿:乙醇/60:5洗脱),得到罗汉果醇衍生物单体(3)4.1g(HPLC>99%)。ESIMSm/z 503(458+45)[M+HCOO-]-(calcd for C31H51O5);13C-NMR(600MHz,MeOD)δppm:29.1(C-1),31.7(C-2),79.4(C-3),42.8(C-4),144.1(C-5),120.7(C-6),25.2(C-7),44.8(C-8),41.1(C-9),35.4(C-10),77.7(C-11),30.6(C-12),48.3(C-13),49.6(C-14),34.9(C-15),27.5(C-16),50.7(C-17),17.2(C-18),26.6(C-19),41.1(C-20),19.0(C-21),37.8(C-22),40.3(C-23),218.2(C-24),35.4(C-25),18.8(C-26),18.8(C-27),26.4(C-28),19.9(C-29),19.3(C-30);与文献报道的3a-羟基-25-脱羟基-24-羰基-罗汉果醇(3a-hydroxy-25-Dehydroxy-24-oxomogrol)碳谱数据比较,二者基本一致(Chen X.B.,et al;Bioorganic&Medicinal Chemistry2011,19:5776)。
后收集得到的B(5.6g)组分再用硅胶柱分离(石油醚:乙酸乙酯/5:2洗脱),得到罗汉果醇衍生物单体(4)。3.2g(HPLC>99%)。ESIMS m/z 441[M+H]+(calcdfor C30H49O2);13C-NMR(600MHz,MeOD)δppm:23.5(C-1),29.5(C-2),87.8(C-3),44.2(C-4),144.1(C-5),121.8(C-6),25.5(C-7),40.9(C-8),40.8(C-9),51.3(C-10),71.9(C-11),41.5(C-12),48.2(C-13),52.2(C-14),35.3(C-15),24.9(C-16),54.3(C-17),15.2(C-18),18.6(C-19),40.2(C-20),20.3(C-21),137.4(C-22),128.8(C-23),125.4(C-24),143.3(C-25),19.7(C-26),25.7(C-27),21.7(C-28),21.7(C-29),18.6(C-30)。
实施例2:从罗汉果总皂苷95%的提取物制备罗汉果醇衍生物单体(3)和(4)
将罗汉果提取物50g(罗汉果总皂苷95%,含45%罗汉果甙V,从桂林莱茵生物科技股份有限公司购买)加入250mL的甲醇的水溶液(甲醇和水的体积比为3:2)(预先用硫酸调节至PH值为2.8),在反应釜中搅拌溶解,然后升温至120℃下加热2小时,冷却至室温后,反应液用1M的KOH碱液中和至PH值为7,在90-95℃下将甲醇尽量蒸出,剩下的浓缩液加入200mL蒸馏水,充分搅拌后冷却、静置,将上面的水层分离弃去,得到咖啡色浸膏;分别用100mL、50mL、50mL乙酸乙酯萃取咖啡色浸膏3次,合并3次萃取液后,在100-120℃下用旋转蒸发仪浓缩,把乙酸乙酯完全蒸干,即得到含罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)的浅咖啡色固体15.5g;用甲醇将浅咖啡色固体载入硅胶柱,用乙腈:水(19:1)梯度洗脱,按先后顺序收集不同的流出液,浓缩后得到A(6.0g)、B(5.2g)两组分;先收集得到的A(6.0g)组分再用硅胶柱分离(氯仿:乙醇/60:5洗脱),得到罗汉果醇衍生物单体(3)3.9g(HPLC>99%);HPLC、13C-NMR、ESIMS检测结果和实施例1中的化合物(3)一致。后收集得到的B(5.2g)组分再用硅胶柱分离(石油醚:乙酸乙酯/3:1洗脱),得到罗汉果醇衍生物单体(4)。3.0g(HPLC>99%);HPLC、13C-NMR、ESIMS检测结果和实施例1中的罗汉果醇衍生物单体(4)一致。
实施例3:从罗汉果总皂苷90%的提取物制备罗汉果醇衍生物单体(3)和(4)
将罗汉果提取物50g(罗汉果总皂苷90%,含40%罗汉果甙V,从桂林莱茵生物科技股份有限公司购买)加入250mL的正丙醇的水溶液(正丙醇和水的体积比为2:3)(预先用甲酸调节至PH值为3.2,在反应釜中搅拌溶解,然后升温至120℃下加热2小时,冷却至室温后,反应液用1M的NaOH碱液中和至PH值为7,在90-95℃下将正丙醇尽量蒸出,剩下的浓缩液加入200mL蒸馏水,充分搅拌后冷却、静置,将上面的水层分离弃去,得到咖啡色浸膏;分别用100mL、50mL、50mL乙酸乙酯萃取咖啡色浸膏3次,合并3次萃取液后,在100-120℃下用旋转蒸发仪浓缩,把乙酸乙酯完全蒸干,即得到含罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)的浅咖啡色固体14.2g;用甲醇/乙醇将浅咖啡色固体载入硅胶柱,用乙腈:水(20:1)梯度洗脱,按先后顺序收集不同的流出液,浓缩后得到A(5.4g)、B(4.3g)两组分;先收集得到的A(5.4g)组分再用硅胶柱分离(氯仿:乙醇/60:5洗脱),得到罗汉果醇衍生物单体(3)3.5g(HPLC>99%);HPLC、13C-NMR、ESIMS检测结果和实施例1中的化合物(3)一致。后收集得到的B(4.3g)组分再用硅胶柱分离(石油醚:乙酸乙酯/6:4洗脱),得到罗汉果醇衍生物单体(4)2.8g(HPLC>99%);HPLC、13C-NMR、ESIMS检测结果和实施例1中的罗汉果醇衍生物单体(4)一致。
实施例4:从罗汉果总皂苷80%的提取物制备罗汉果醇衍生物单体(3)和(4)
将罗汉果提取物50g(罗汉果总皂苷80%,含20%罗汉果甙V,从桂林莱茵生物科技股份有限公司购买)加入250mL的乙醇的水溶液(乙醇和水的体积比为1:1)(预先用乙二酸调节至PH值为2.6),在反应釜中搅拌溶解,然后升温至120℃下加热2小时,冷却至室温后,反应液用1M的Na2CO3碱液中和至PH值为7,在90-95℃下将乙醇尽量蒸出,剩下的浓缩液加入200mL蒸馏水,充分搅拌后冷却、静置,将上面的水层分离弃去,得到咖啡色浸膏;分别用100mL、50mL、50mL乙酸乙酯萃取咖啡色浸膏3次,合并3次萃取液后,在100-120℃下用旋转蒸发仪浓缩,把乙酸乙酯完全蒸干,即得到含罗汉果醇衍生物单体(3)和罗汉果醇衍生物单体(4)的浅咖啡色固体8.8g;用甲醇/乙醇将浅咖啡色固体载入硅胶柱,用乙腈:水(95:5)梯度洗脱,按先后顺序收集不同的流出液,浓缩后得到A(3.8g)、B(3.0g)两组分;先收集得到的A(3.8g)组分再用硅胶柱分离(氯仿:乙醇/60:5洗脱),得到罗汉果醇衍生物单体(3)2.1g(HPLC>99%);HPLC、13C-NMR、ESIMS检测结果和实施例1中的化合物(3)一致。后收集得到的B(3.0g)组分再用硅胶柱分离(石油醚:乙酸乙酯/4:1洗脱),得到罗汉果醇衍生物单体(4)1.8g(HPLC>99%);HPLC、13C-NMR、ESIMS检测结果和实施例1中的罗汉果醇衍生物单体(4)一致。
实施例5:罗汉果醇衍生物单体(4)抑制细胞增殖实验
实验样品:
测试药物:实施例1制备得到的罗汉果醇衍生物单体(4);
对照药物:紫杉醇(SELLECK;Cat.#S1150);人参皂苷单体Rg3(自上海源叶生物科技有限公司购买,商品货号为B21059)。
实验步骤:
以24种细胞系(包括23种肿瘤细胞系和1种人脐静脉内皮细胞系)为实验用细胞系,取对数生长期细胞(3x 104/mL至2.5x 105/mL),以每孔100μL接种在96孔板内,每个细胞系用一个96孔板;然后,除对照药物紫杉醇以外,以高浓度150μM至低浓度2μM取7个对数递减浓度(每个浓度设两个复孔),分别加入测试药物溶液和对照药物溶液500nL(测试药物溶液或对照药物溶液配制:分别采用测试药物或对照药物溶于0.5%的DMSO溶液)。紫杉醇的加入浓度为由高浓度1μM至低浓度0.0014μM的7个三倍递减浓度。经测试/对照药物溶液作用72小时后,用(Promega;Cat.#G7573)发光细胞活力检测法求出各细胞系中的每种药物的每个浓度对该系细胞的增殖抑制百分率,并绘制量效关系图,最后根据图中曲线测算IC50和最高抑制百分率(Emax),如表1和表2所示。
表1:罗汉果醇衍生物单体(4)以及对照药Rg3抑制细胞增殖活性实验检测结果。
表2:罗汉果醇衍生物单体(4)以及对照药紫杉醇、Rg3抑制细胞增殖有效性实验检测结果。
使用SPSS Statistics软件(提供者:IBM corporation,软件版本:XL fit 21)提供统计学分析。
用假设方差不相等的独立样本检验(independent-sample T-test)来检测药物组与对照组平均值的差异是否呈现统计显著(P<0.05或P<0.01)。
分析结果:
1.本发明罗汉果醇衍生物单体(4)在24个细胞系中的平均IC50与对照药物人参皂苷单体Rg3在24个细胞系中的平均IC50比较时,差异呈现统计显著(P<0.05同时P<0.01)。
2.本发明罗汉果醇衍生物单体(4)在24个细胞系中的平均最高抑制百分率与对照药物紫杉醇以及对照药物人参皂苷单体Rg3在24个细胞系中的平均最高抑制百分率比较时,差异呈现统计显著(P<0.05同时P<0.01)。
结论:
1.本发明罗汉果醇衍生物单体(4)在所有24种所测细胞系中的抑制细胞增殖活性均高于同类对照药物人参皂苷单体Rg3(罗汉果醇衍生物单体(4)的IC50小于人参皂苷单体Rg3的IC50)。
2.在所有被测细胞系中,本发明罗汉果醇衍生物单体(4)在人脐血静脉内皮细胞系HUVEC中具有最高抑制细胞增殖活性(IC50=10.72μM),表现出其强大的抗肿瘤血管生成潜力;罗汉果醇衍生物单体(3)在结直肠腺癌细胞系HCT-8中抑制细胞增殖活性排在其次(IC50=14.83μM)。
3.本发明罗汉果醇衍生物单体(4)对所有24种被测细胞系的最高抑制率(有效性)都非常接近100%;而对照药紫杉醇和人参皂苷单体Rg3在已测的24种细胞系中,均只对2种细胞系有近100%的抑制率。这表明罗汉果醇衍生物单体(4)的有效性明显高于对照药物,且其高抗癌有效性适用于多类癌种。
Claims (9)
1.一种组合物,至少包括如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(3)
和如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(4)。
2.根据权利要求1的组合物的合成方法,其特征在于,包括:将含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物溶于呈酸性的醇的水溶液中进行加热反应即得。
3.根据权利要求2的组合物的合成方法,其特征在于,所述呈酸性的醇的水溶液的制备方法为:用酸性物质将醇的水溶液调节为酸性;
任选的,所述醇为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、丁醇、乙二醇、丙二醇、丙三醇和聚乙二醇中的至少一种。
任选的,所述醇的水溶液中醇与水的体积比为1:10~10:1;
任选的,所述醇的水溶液中醇与水的体积比为1:3~3:1;
任选的,所述醇的水溶液中醇与水的体积比为1:1;
任选的,所述酸性物质为无机酸或有机酸;
任选的,所述无机酸为盐酸、硫酸和磷酸中的至少一种;
任选的,所述有机酸为甲酸、乙酸、卤代乙酸、乙二酸、丙二酸和柠檬酸中的至少一种;
任选的,所述呈酸性体现为PH值为2.5~3.5;
任选的,所述呈酸性体现为PH值为2.8~3.0;
任选的,当所述含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物中罗汉果总皂苷的重量百分比为70%以上时,所述含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物与呈酸性的醇的水溶液的质量体积比为1:10~1:3;
任选的,所述含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物与呈酸性的醇的水溶液的质量体积比为1:5。
4.根据权利要求2的组合物的合成方法,其特征在于,所述加热反应的条件是:在100~140℃下加热1~3小时;
任选的,所述加热反应的条件是:在120℃下加热2小时。
5.根据权利要求2的组合物的合成方法,其特征在于,所述加热反应后还包括对加热反应得到的反应液用碱性物质进行中和,加热将醇蒸发,得到含组合物的浓缩液;
任选的,用碱性物质进行中和是中和至PH到6.5~7.5;
任选的,用碱性物质进行中和是中和至PH到7.0。
任选的,所述碱性物质为无机碱和/或盐;
任选的,所述无机碱和/或盐为NaOH、KOH和Na2CO3中的至少一种。
6.根据权利要求5的组合物的合成方法,其特征在于,还包括对含组合物的浓缩液洗涤后得到咖啡色浸膏的步骤,
任选的,所述对含组合物的浓缩液洗涤后得到咖啡色浸膏的步 骤:在含组合物的浓缩液中加入蒸馏水冷却静置,弃去上面水层,得到含组合物的咖啡色浸膏;
任选的,所述浓缩液与蒸馏水的体积比为1:5~1:3。
7.根据权利要求6的组合物的合成方法,其特征在于,还包括对含组合物的咖啡色浸膏进行萃取和浓缩,得到含组合物的浅咖啡色固体;
任选的,所述萃取所采用的萃取溶剂为乙酸乙酯;
任选的,每次萃取的固液比1:6~1:3;
任选的,所述萃取的次数为2~5次,将每次萃取液合并;
任选的,所述萃取的次数为3次;
任选的,第一次萃取所用的萃取溶剂的体积是第二次萃取或第三次萃取所用的萃取溶剂的体积的2倍;
任选的,所述浓缩是:100-120℃下用旋转蒸发仪浓缩,把萃取溶剂完全蒸干。
8.一种具有如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(3)的制备方法,其特征在于,包括将含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物溶于呈酸性的醇的水溶液中进行加热反应,然后分离纯化即得;
任选的,包括对权利要求7的含组合物的浅咖啡色固体进行分离和纯化的步骤;
任选的,所述分离为层析分离;
任选的,所述层析分离为硅胶柱层析分离;
任选的,所述硅胶柱层析分离采用的洗脱液为乙腈和水;
任选的,所述乙腈和水的体积比为95:5~20:1;
任选的,对含组合物的浅咖啡色固体进行分离后还要进一步浓缩;
任选的,浓缩后进行层析纯化;
任选的,所述层析纯化为硅胶柱层析纯化;
任选的,所述硅胶柱层析纯化采用的洗脱液为氯仿和乙醇;
任选的,所述氯仿和乙醇的体积比为16:1~8:1;
任选的,所述氯仿和乙醇的体积比为12:1。
9.一种具有如下结构
的罗汉果醇衍生物单体(4)的制备方法,其特征在于,包括将含罗汉果总皂苷的罗汉果提取物溶于呈酸性的醇的水溶液中进行加热反应,然后分离纯化即得;
任选的,包括对权利要求7的含组合物的浅咖啡色固体进行分离和纯化的步骤;
任选的,所述分离为层析分离;
任选的,所述层析分离为硅胶柱层析分离;
任选的,所述硅胶柱层析分离采用的洗脱液为乙腈和水;
任选的,所述乙腈和水的体积比为95:5~20:1;
任选的,对含组合物的浅咖啡色固体进行分离后还要进一步浓缩;
任选的,浓缩后进行层析纯化;
任选的,所述层析纯化为硅胶柱层析纯化;
任选的,所述硅胶柱层析纯化采用的洗脱液为石油醚和乙酸乙酯;
任选的,所述石油醚和乙酸乙酯的体积比为3:2~4:1;
任选的,所述石油醚和乙酸乙酯的体积比为3:1。
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610296723.XA CN105832748B (zh) | 2016-05-06 | 2016-05-06 | 一种从罗汉果总皂苷中制备罗汉果醇衍生物的方法 |
PCT/CN2016/089211 WO2017190422A1 (zh) | 2016-05-06 | 2016-07-07 | 一种从罗汉果总皂苷中制备罗汉果醇新型衍生物的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610296723.XA CN105832748B (zh) | 2016-05-06 | 2016-05-06 | 一种从罗汉果总皂苷中制备罗汉果醇衍生物的方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN105832748A true CN105832748A (zh) | 2016-08-10 |
CN105832748B CN105832748B (zh) | 2019-06-07 |
Family
ID=56591669
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610296723.XA Active CN105832748B (zh) | 2016-05-06 | 2016-05-06 | 一种从罗汉果总皂苷中制备罗汉果醇衍生物的方法 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN105832748B (zh) |
WO (1) | WO2017190422A1 (zh) |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106317155A (zh) * | 2016-08-23 | 2017-01-11 | 吉首大学 | 一种还原性葫芦烷型三萜及其制法和用途 |
WO2017190421A1 (zh) * | 2016-05-06 | 2017-11-09 | 深圳以诺生物制药有限公司 | 一种新型罗汉果醇衍生物单体 |
WO2017190420A1 (zh) * | 2016-05-06 | 2017-11-09 | 深圳以诺生物制药有限公司 | 一种罗汉果醇衍生物单体及其组合物的用途 |
CN109134579A (zh) * | 2018-07-23 | 2019-01-04 | 上海交通大学 | 降血糖的低极性罗汉果皂苷群及其制备方法 |
CN110585053A (zh) * | 2019-10-16 | 2019-12-20 | 张传旋 | 用于祛斑、除细纹、黑眼圈和眼袋的复合物及其制备方法 |
CN111349133A (zh) * | 2020-03-27 | 2020-06-30 | 湖南华诚生物资源股份有限公司 | 一种乙酰化罗汉果醇及其制备方法和用途 |
CN111560044A (zh) * | 2020-06-01 | 2020-08-21 | 湖南华诚生物资源股份有限公司 | 一种11-o-罗汉果醇肟醚衍生物及其制备方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003321491A (ja) * | 2002-03-01 | 2003-11-11 | Yakult Honsha Co Ltd | トリテルペン化合物 |
CN101440118A (zh) * | 2008-12-26 | 2009-05-27 | 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 | 从罗汉果根中提取的皂苷类化合物、其制备方法及其用途 |
CN102526073A (zh) * | 2012-01-06 | 2012-07-04 | 复旦大学 | 罗汉果醇h9在制备抗肿瘤药物中的应用 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101033244B (zh) * | 2007-04-05 | 2010-05-19 | 上海交通大学 | 罗汉果醇的提纯制备方法 |
CN105777837A (zh) * | 2016-05-06 | 2016-07-20 | 深圳以诺生物制药有限公司 | 一种新型罗汉果醇衍生物单体 |
CN105963307B (zh) * | 2016-05-06 | 2019-08-09 | 深圳以诺生物制药有限公司 | 一种罗汉果醇衍生物单体及其组合物的用途 |
CN106188205B (zh) * | 2016-05-06 | 2017-08-25 | 深圳以诺生物制药有限公司 | 一种罗汉果醇衍生物单体及其组合物的用途 |
-
2016
- 2016-05-06 CN CN201610296723.XA patent/CN105832748B/zh active Active
- 2016-07-07 WO PCT/CN2016/089211 patent/WO2017190422A1/zh active Application Filing
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003321491A (ja) * | 2002-03-01 | 2003-11-11 | Yakult Honsha Co Ltd | トリテルペン化合物 |
CN101440118A (zh) * | 2008-12-26 | 2009-05-27 | 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 | 从罗汉果根中提取的皂苷类化合物、其制备方法及其用途 |
CN102526073A (zh) * | 2012-01-06 | 2012-07-04 | 复旦大学 | 罗汉果醇h9在制备抗肿瘤药物中的应用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
XU-BING CHEN等: "Potential AMPK activators of cucurbitane triterpenoids from Siraitia grosvenorii Swingle", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY》 * |
林硕等: "罗汉果有效成分提取的研究进展", 《中国食品添加剂》 * |
Cited By (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2017190421A1 (zh) * | 2016-05-06 | 2017-11-09 | 深圳以诺生物制药有限公司 | 一种新型罗汉果醇衍生物单体 |
WO2017190420A1 (zh) * | 2016-05-06 | 2017-11-09 | 深圳以诺生物制药有限公司 | 一种罗汉果醇衍生物单体及其组合物的用途 |
CN106317155A (zh) * | 2016-08-23 | 2017-01-11 | 吉首大学 | 一种还原性葫芦烷型三萜及其制法和用途 |
CN106317155B (zh) * | 2016-08-23 | 2018-11-02 | 吉首大学 | 一种还原性葫芦烷型三萜及其制法和用途 |
CN109134579A (zh) * | 2018-07-23 | 2019-01-04 | 上海交通大学 | 降血糖的低极性罗汉果皂苷群及其制备方法 |
CN110585053A (zh) * | 2019-10-16 | 2019-12-20 | 张传旋 | 用于祛斑、除细纹、黑眼圈和眼袋的复合物及其制备方法 |
CN110585053B (zh) * | 2019-10-16 | 2022-04-29 | 张传旋 | 用于祛斑、除细纹、黑眼圈和眼袋的组合物及其制备方法 |
CN111349133A (zh) * | 2020-03-27 | 2020-06-30 | 湖南华诚生物资源股份有限公司 | 一种乙酰化罗汉果醇及其制备方法和用途 |
CN111560044A (zh) * | 2020-06-01 | 2020-08-21 | 湖南华诚生物资源股份有限公司 | 一种11-o-罗汉果醇肟醚衍生物及其制备方法 |
WO2021244051A1 (zh) * | 2020-06-01 | 2021-12-09 | 湖南华诚生物资源股份有限公司 | 一种11-o-罗汉果醇肟醚衍生物及其制备方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN105832748B (zh) | 2019-06-07 |
WO2017190422A1 (zh) | 2017-11-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN105832748B (zh) | 一种从罗汉果总皂苷中制备罗汉果醇衍生物的方法 | |
Wang et al. | In vitro biotransformation of red ginseng extract by human intestinal microflora: metabolites identification and metabolic profile elucidation using LC–Q-TOF/MS | |
CN101035548A (zh) | 甾体皂苷药物组合物及其制备方法和用途 | |
CN112300242B (zh) | 一种呋甾皂苷类化合物单体的制备方法 | |
CN100584856C (zh) | 一种常春藤皂苷、其制备方法及其制备抗肿瘤药物的用途 | |
CN108822178B (zh) | 低极性稀有人参皂苷Rg5/Rk1和Rh3/Rk2的制备方法 | |
CN104327148A (zh) | 一种具有抗肿瘤活性的化合物、其制备方法及应用 | |
CN100453550C (zh) | 人参皂苷Rb2的制备工艺 | |
CN102178688A (zh) | 一种常春藤皂苷类成分的制备方法及其抗肿瘤的用途 | |
CN105601693B (zh) | 人参皂苷f1的制备及其抗肿瘤作用 | |
CN106866776A (zh) | 新型的甾体皂苷类化合物及其应用 | |
CN106892958B (zh) | 一种环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法和应用 | |
CN113336808B (zh) | 一种从百合中提取分离的糖苷类化合物及其方法和应用 | |
CN102295677B (zh) | 北美盐角草中一种降三萜皂苷及其制备方法和用途 | |
CN105153268B (zh) | 螺甾皂苷类化合物及其应用 | |
CN108676054B (zh) | 一种三萜类化合物及其制备方法和应用 | |
CN103610682A (zh) | 3α-羟基-30-齐墩果-12,20(29)-二烯-28-酸的制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
CN107320639A (zh) | 束花石斛降血糖有效部位、有效成分及其制备方法和应用 | |
CN102146114B (zh) | 一种丹参酮ⅱa的制备方法 | |
CN101456896B (zh) | 一种蒺藜呋甾皂苷化合物及其制备方法 | |
CN110922444A (zh) | 具有抗炎活性的人参二醇型三萜皂苷 | |
WO2019119675A1 (zh) | 甘薯谷甾醇糖苷饱和脂肪酸酯、提取物及其制备方法与应用 | |
CN108558976B (zh) | 低极性稀有人参皂苷δppd和δppt的制备方法 | |
CN103694302B (zh) | 2α,3β-二羟基-30-齐墩果-12,20(29)-二烯-28-酸的制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
CN111303238A (zh) | 甾体皂苷类化合物及其制备方法和医药用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |