CN105829318A

CN105829318A - 作为mdm2抑制剂的螺吡咯烷

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Publication number: CN105829318A
Application number: CN201580003250.3A
Authority: CN
Inventors: Y·陈; 丁清杰; Y·S·孙
Original assignee: Hudson Biopharma Inc
Current assignee: Hudson Biopharma Inc
Priority date: 2014-08-18
Filing date: 2015-06-26
Publication date: 2016-08-03
Anticipated expiration: 2035-06-26
Also published as: CA2958193C; EP3183255A4; AU2015303959A1; CA2958193A1; US9701685B2; AU2015303959B2; EP3183255A2; CN105829318B; EP3183255B1; WO2016028391A2; WO2016028391A9; US20150322076A1; WO2016028391A3; EP3183255C0; JP6625638B2; ES2959097T3; JP2017525768A

Abstract

描述了用作MDM2/p53相互作用抑制剂的螺吡咯烷(Ⅰ)并提供了用于诸如癌症和视网膜黄斑变性疾病等疾病的治疗的有用试剂。本文中的本发明化合物具有通式(Ⅰ)。进一步描述了药物组合物，其包括一种或多种的本发明化合物、药学上可接受的盐或前体药物和/或药物上可接受的载体或辅料。

Description

作为MDM2抑制剂的螺吡咯烷

本发明涉及螺吡咯烷化合物，所述螺吡咯烷化合物有助于治疗与p53信号通路功能障碍有关联的疾病，例如癌症。

MDM2是肿瘤抑制蛋白p53的负调控蛋白。p53调控细胞周期生长、凋亡、衰老，并起到细胞的基因组完整性的守护者的作用，以响应包括DNA损伤、缺氧和癌基因激活的各种细胞应激。它充当抑制癌症发展的最重要的防御之一。在分子水平上，MDM2和P53形成自主调控反馈控制回路，且MDM2通过1)直接结合p53且抑制它的反式激活p53调控基因的能力；2)介导p53的泛素依赖性降解；3)从核输出p53来负调控p53的功能。p53在细胞里可诱导MDM2基因的表达，且因此诱导所述MDM2蛋白的表达。该反馈回路控制确保在正常细胞里MDM2和p53处于适当的低水平。

然而，在约50％的癌症病例中，p53突变或被清除，其导致自主调控机制的失效。在另外50％的癌症病例中，其中p53保持其野生型形式，MDM2与p53的比例失调(dyregulated)且MDM2蛋白过表达。在后者病例中，MDM2的抑制剂应该促进p53的积累且导致细胞周期停滞和/或凋亡并且可提供癌症治疗医治的有用工具。文献也已表明，MDM2通过保守结合区域像结合p53一样结合E2F且激活细胞周期蛋白A(cyclinA)的E2F依赖性转录(MartinK.,Nature,1995,375,691-694；Strachan,G.D.等,JournalofbiologicalChemistry,2001,456,45677-45685)，暗示MDM2抑制剂也可能具有治疗p53突变细胞的前景。

发明概述

本发明描述了作为MDM2/p53相互作用抑制剂的螺吡咯烷(Ⅰ)的发现且提供了用于与p53信号通路功能障碍有关联的疾病治疗的有用试剂，所述p53信号通路功能障碍包括癌症和年龄相关的视网膜黄斑变性。本文中的本发明化合物具有通式Ⅰ，其中R₁、R₂、R₃、R₄、R₇、A、B和X限定如下。本发明还涉及药物组合物，其包括一种或多种的本发明化合物、药学上可接受的盐或前体药物和药学上可接受的载体或辅料。

本发明进一步涉及一种用于癌症治疗的方法，尤其是白血病、实体瘤和年龄相关的视网膜黄斑变性症的治疗。

发明描述

本发明描述了结构通式Ⅰ的螺吡咯烷衍生物的发现，所述螺吡咯烷衍生物是MDM2抑制剂且用作抗癌剂以及也可用于年龄相关的视网膜黄斑变性症和其他与p53信号通路功能障碍有关联的疾病的治疗。

所述要求保护的化合物具有结构通式Ⅰ

其中A为卤素且独立地选自Cl和F，并且B独立地选自Cl、H和F；R₁为芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基；R₂为氢或为与X、R₃或R₄相连的碳-碳键；R₃和R₄独立地选自H、低级烷基和取代的低级烷基、环烷基、取代的环烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、或者它们一起可形成3、4或5元环或它们其中之一可与R₂形成C-C键；X独立地选自F、CN和其中R₅和R₆独立地选自氢和F；并且R₇为卤素且独立地选自Cl、Br和F。

其中R₃和R₄形成环，在适用于所有式Ⅰ-Ⅳ的实施方案中，它可以为碳环。

其中R₃和R₄中的一个通过键链接回R₂，在适用于所有式Ⅰ-Ⅳ的实施方案中，所述结果可以为碳环，例如3-5元环。

R₁的所选实例包括但不限于以下

其中R独立地选自卤素、羟基、氢、低级烷基、取代的低级烷基、环烷基、取代的环烷基、低级烷氧基、取代的低级烷氧基、氰基、氨基、取代的氨基、磺酰胺基、取代的磺酰胺基、氨基磺酰胺基、取代的氨基磺酰胺基、羟基羰基、低级烷氧基羰基、氨基羰基、取代的氨基羰基、羰基氨基、取代的羰基氨基、脒基、取代的脒基、胍基、取代的胍基、四唑、取代的四唑，并且可独立地取代所述芳基/杂芳基环的任意的单个位置或多个位置并且优选地不超过三个位置；或者，当取代发生在两个相邻位置时，它可形成五或六元杂环；

在式Ⅰ中显著有用的化合物为式Ⅱ的化合物，

其中A、B、R₁、R₂、R₃、R₄和R₇如上所述；并且

R₅和R₆独立地选自氢和F。

在式Ⅰ中显著有用的化合物为式III的化合物：

其中A、B、R₁、R₂、R₃、R₄和R₇如上所述。

在适用于所有式Ⅰ-Ⅳ的实施方案中，R₁为

在适用于所有式Ⅰ-Ⅳ的实施方案中，R为独立地选自卤素、羟基、氢、低级烷基、取代的低级烷基、环烷基、取代的环烷基、低级烷氧基、取代的低级烷氧基、氰基、氨基、取代的氨基、磺酰胺基、取代的磺酰胺基、氨基磺酰基、取代的氨基磺酰基、羟基羰基、低级烷氧基羰基、氨基羰基、取代的氨基羰基、羰基氨基、取代的羰基氨基、脒基、取代的脒基、胍基、取代的胍基、四唑、取代的四唑并且可独立地取代所述芳基/杂芳基环的任意的单个位置或多个位置并且优选地不超过三个位置；或者，当所述取代发生在两个相邻位置时，它可形成五或六元杂环；

与式Ⅰ中的那些化合物高度相似的进一步显著有用的化合物为式Ⅳ的化合物

其中R₁和R₇如上所述；A独立地选自Cl、F和Br；B选自F、H；并且R₃和R₄独立地选自H和甲基。

在适用于所有式Ⅰ-Ⅳ的实施方案中，R₁为

在适用于所有式Ⅰ-Ⅳ的实施方案中，R独立地选自卤素、羟基、氢、低级烷基、取代的低级烷基、环烷基、取代的环烷基、低级烷氧基、取代的低级烷氧基、氰基、氨基、取代的氨基、磺酰胺基、取代的磺酰胺基、氨基磺酰基、取代的氨基磺酰基、羟基羰基、低级烷氧基羰基、氨基羰基、取代的氨基羰基、羰基氨基、取代的羰基氨基、脒基、取代的脒基、胍基、取代的胍基、四唑、取代的四唑并且可独立地取代所述芳基/杂芳基环的任意单个位置或多个位置并且优选地不超过三个位置；或者当所述取代发生在两个相邻位置时，它可形成五或六元杂环。

显著有用的是式Ⅱ的Ⅱ-A组的化合物，其中：R₂为氢；并且R₅和R₆均为H。

进一步显著的是式Ⅱ的Ⅱ-B组的化合物，其中：R₂为氢；并且R₃和R₄均为甲基；并且R₅和R₆均为H。

在适用于所有式Ⅰ-Ⅳ的实施方案中，R独立地选自卤素、羟基、氢、低级烷基、取代的低级烷基、环烷基、取代的环烷基、低级烷氧基、取代的低级烷氧基、氰基、氨基、取代的氨基、磺酰胺基、取代的磺酰胺基、氨基磺酰基、取代的氨基磺酰基、羟基羰基、低级烷氧基羰基、氨基羰基、取代的氨基羰基、羰基氨基、取代的羰基氨基、脒基、取代的脒基、胍基、取代的胍基、四唑、取代的四唑并且可独立地取代所述芳基/杂芳基任意的单个位置或多个位置并且优选地不超过三个位置；或者当所述取代发生在两个相邻位置时，它可形成五或六元杂环。

进一步显著的是式Ⅱ的Ⅱ-C组的化合物，其中：R₂为H；R₃和R₄一起形成3、4或5元脂环，例如环丙基环；并且R₅和R₆均为H。

进一步显著的是式Ⅰ的Ⅰ-A组的化合物，其中：R₂为H；R₃和R₄均为甲基；并且X为CN。

进一步显著的是式Ⅰ的Ⅰ-B组的化合物，其中：R₂和X形成C-C键；并且R₃和R₄独立地选自甲基、低级烷基、取代的低级烷基、烯基和取代的低级烯基，或者它们一起可形成3、4或5元脂环。

进一步显著的化合物包括如下所列的。以下权利要求，除非另有特别命名，涵盖外消旋混合物并且涵盖如上命名的所述异构体和包括外消旋体的组合物，所述外消旋体包括如上命名的异构体。下表中的命名“外消旋”强调特定化合物的外消旋体为可要求保护的主题。命名“手性”强调单个对映体，其可通过不对称合成或可选地通过手性技术(例如手性HPLC，或手性超临界流体色谱)进行外消旋体的分离或通过常规化学方法进行外消旋体的拆分来合成。所述化合物为：

外消旋乙基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-甲基丙-1-烯基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-甲基丙-1-烯基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-甲基丙-1-烯基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

外消旋乙基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

外消旋(4-乙氧羰基-2-甲氧基-苯基)(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

外消旋-4-[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4-吡咯烷]-2’-羰基]氨基-3-甲氧基-苯甲酸

外消旋(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

手性4-[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基-3-甲氧基-苯甲酸

手性(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

手性乙基-4-[[(2’R,3’R,3’S,5’S)-6-氯-3’(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-2,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯

手性4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸

手性(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

外消旋叔丁基(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酸酯

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酸

外消旋甲基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]苯甲酸酯

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]苯甲酸

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-N-[4-(2-羟基乙氧基)苯基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

外消旋甲基5-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]噻吩-2-羧酸酯

外消旋5-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]噻吩-2-羧酸

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(5-氨甲酰基-2-噻吩基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

外消旋甲基5-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]吡啶-2-羧酸酯

外消旋5-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-吡啶-2-羧酸

外消旋甲基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

手性4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸

外消旋甲基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-氟-苯甲酸酯

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-氟-苯甲酸

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-氯-苯甲酸

外消旋甲基-4-[[(2’R,3’R,3’S,5’S)-6-氯-3’(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙基)螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙基)螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙基)螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

手性甲基-4-[[(2’R,3’R,3’S,5’S)-6-氯-3’(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-2,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯

手性4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸

手性(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-苯基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

外消旋4-{[6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(1-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]-5’-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸甲酯

外消旋4-{[6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(1-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]-5’-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸

外消旋-6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(1-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]-5’-羧酸(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-酰胺

手性4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-[[1(氟甲基)环丙基]甲基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸

手性(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-[[1-(氟甲基)环丙基]甲基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺

本发明进一步延伸至药物组合物，其包含有效量的任意一种或多种上述要求保护的化合物，药学可接受的盐或前体药物或药学可接受的载体或辅料。

本发明还涉及一种通过向患者给药有效量的式Ⅰ化合物、其盐或前体药物用于治疗实体瘤、白血病和视网膜黄斑变性症的方法。

在本发明中使用的术语和定义。

卤素意指F、Cl、Br或I。优选的卤素为F和Cl。

低级烷基意指直链或支链的、取代或不取代的、具有1-6个，优选1-4个碳原子的饱和脂肪烃。典型的低级烷基基团包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基等。

IC₅₀意指抑制50％的特定测量活性的特定化合物的浓度。

环烷基是指非芳族的、部分或全部成环的含有3至7个原子的脂肪烃。一些实例为环丙基、环丁基、环戊烷和环己基。

取代的，意指该取代可发生在一个或多个位置，并且除非特指，在每个取代位的所述取代独立地选自所述特定选项。

前体药物是指在生理条件下或通过溶剂分解可转变为任意的所述式Ⅰ化合物的化合物。在给药时，前体药物可为非活性的，但在体内转变为式Ⅰ的活性化合物。

药学上可接受的，意指对于被给药特定化合物的受试者是药学上可接受的。

药学上可接受的盐，意指保留所述式Ⅰ化合物的生物有效性和性质的酸加成盐或碱加成盐。典型的酸加成盐包括从诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸和硝酸等无机酸所衍生的那些，以及从诸如甲酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸、对甲苯磺酸、水杨酸等有机酸所衍生的那些。碱衍生盐的实例包括从铵、钠、钾等所衍生的那些。

杂芳基基团为具有5～10个原子、一个或两个环且含有一个或多个杂原子的芳族基团。

杂原子是指N、O、S、P。

芳基是指带有5～10个原子且由1或2个环组成的芳族基团。芳基基团的实例包括苯基、萘基。

烯基意指直链或支链的、取代或不取代的不饱和脂肪烃，其带有2～6个，优选2～4个碳原子且包含双键。

为了用治疗剂治疗适应症，治疗剂的“有效量”将被临床医生所确认，但其包括对治疗、降低、缓和、减轻、消除或避免状况的一种或多种症状有效的量，所述状况寻求被治疗，或可选地，所述状况寻求被避免，或另外在所述状况或其效果中产生临床上可确认的有利变化。

式Ⅰ化合物和合成

一般来说，本发明的化合物可根据以下方案制备。所述关键中间物1、2和5可如方案Ⅰ和方案Ⅱ的描述而制备。醛胺缩合得到期望的亚胺1和2。所述胺也可以盐的形式(HCl盐或三氟乙酸盐)使用。在这些情况中，碱，例如三乙胺，用于释放所述游离胺。

方案Ⅰ，亚胺1和2的合成

条件：a，叔丁基甲基醚，室温，过夜。

方案Ⅱ，中间物5的合成

条件：c，哌啶或甲醇钠，甲醇，回流

中间物5如方案Ⅱ的描述而制备。吲哚酮3和醛4的缩合在甲醇中用适当的碱的催化而成功进行。我们证实了哌啶和甲醇钠均为有效的催化剂。在哌啶或甲醇钠的催化下制备中间物5的产率良好(方案Ⅱ)。

方案III，式Ⅰ化合物的合成

条件：d，DBU，甲苯，回流。

式Ⅰ化合物可根据以上概述的方案Ⅲ而制备。在DBU的催化下，亚胺1和亲偶极体5在甲苯中缩合以形成螺吡咯烷Ⅰ。所述过程可包含第一步，1,3偶极环化加成，接着为碱催化的异构化(参见，Shu等人，Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256)。描述了亚甲胺叶立德和亲偶极体的所述1,3偶极环化加成的其他出版物实例可从Yuvaraj等人(Tetrahedronlett.,2013,54(8),821-827)、Stanley等人(ChemicalReview,2008,108(8),2887)、Chen等人(J.Am.Chem.Soc.2009,131,13819-13825)、Shreiber等人(J.Am.Chem.Soc.,2003,125,10174-10175)、Antonchick等人(NatureChemistry，2010,2,735-740)、Galliford等人(Angew.Chem.Int.Ed.(2007,46,8747-8758)中找到。

当使用手性醛时，Ⅰ的对映纯的对映体可通过一般化学技术获得。可选地，Ⅰ的外消旋混合物可通过手性HPLC、手性超流体HPLC或通过常见拆分方法获得，所述常见拆分方法例如为通过结晶化使用手性碱或手性酸。期望的异构体也可通过采用手性助剂、手性配体的不对称合成来制备(作为参考，参见Antonchich等人，NatureChemistry，2010,2,735-740)。

可选地，随后式Ⅰ化合物可通过在方案Ⅳ中所述一般程序概述而制备。亚胺2和亲偶极体5的缩合在THF中的LiOH的催化下得到中间物6，其被酸处理得到羧酸7。酸7和R₁NH₂的耦合得到式Ⅰ的化合物。

方案Ⅳ，式Ⅰ的合成

条件：e，LiOH，THF，加热。f，CF₃COOH/DCM(30％)，室温。g，HATU，DCM，R₁NH₂。

治疗的方法，用于治疗的用途

所有所述化合物可被使用，一般来说以有效量来使用，以治疗增殖性病症，例如癌症。该技术中的一种或多种所述化合物的有效量可被配制且通过口服、注射、贴片、喷雾和其他已知技术递送给患者。在本技术中发现的所述化合物也可和其他试剂一起使用以用于联合治疗。不被理论所约束，我们相信本技术中的所述试剂尤其有用，其中所述p53蛋白没有突变为功能失调类型和/或它的信号通路依然运作。取决于任意特定情况，对于拥有平均体重70kg的患者，这里的有效量可不受限地为1mg至1500mg/Kg每天的不同剂量。特定化合物的配制一般意味着一些载体、辅料和其它材料的使用，以使所述剂量更为有效地工作。

这样治疗的受试者可为经受增殖性病症的任意受试动物，例如人类。

实施例

实施例1

(E)-叔丁基2-(3-氰基-3-甲基丁烯基氨基)乙酸酯的制备

分子量：224.3

将甘氨酸叔丁酯(9.29g，0.708mol)和3,3-二甲基-丁醛(75g，0.674mol)在DCM(1400mL)中的混合物于室温下搅拌过夜。浓缩该反应混合物，并且在真空下干燥残留物以得到油状物(150g，产率：98.8％)，该油状物不需进一步纯化而直接用在下一步骤中。¹HNMR(CDCl₃，400MHz)：δ7.77～7.79(t，1H)，4.15(s，2H)，2.56～2.57(d，2H)，1.46(s，9H)，1.44(s，6H)。

实施例2

甲基4-[(2-氨基乙酰基)氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯三氟乙酸盐的制备

向搅拌的2-(叔丁氧基羰基)乙酸(Aldrich，2.32g，13.3mmol)在THF(12mL)中的溶液加入CDI(Aldrich，2.15g，13.2mmol)，并且在室温下搅拌该混合物1小时直至该反应达到TLC确定的终点。然后，加入甲基4-氨基-3-甲氧基苯甲酸酯(Combi-blocks，2.0g，11mmol)并且在60℃下搅拌该混合物48小时。用水将该反应淬灭，并用EtOAc稀释。分离有机层，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤并干燥(Na₂SO₄)所述有机层。去除溶剂，得到油状物。将该油状物溶于DCM(20mL)中并加入三氟乙酸(8mL)。在室温下搅拌该混合物3小时直至反应完全。减压去除溶剂，得到题述化合物的TFA盐。3.94g，95％。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ10.06(s，1H)，8.37(s，br，3H)，8.25～8.28(d，1H，J＝8.4Hz)，7.57～7.64(d，1H，J＝8.7Hz)，7.59(s，1H)，3.96(s，3H)，3.94(S，2H)，3.88(s，3H)，1.33(t，3H，J＝7.2Hz)。

实施例3

乙基4-(2-氨基乙酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸酯盐酸盐的制备

在0℃下向搅拌的乙基4-氨基-3-甲氧基苯甲酸酯(ArkPharm，20g，110.4mmol)在THF(200mL)中的溶液加入三乙胺(Aldrich，16.2mL，115.9mmol)并随后加入2-氯乙酰氯(Aldrich，12.7g，112.7mmol)。在0℃下搅拌该混合物1小时直至该反应达到TLC(DCM)确定的终点。将盐滤出并浓缩滤液以提供固体(30g)。该固体溶于NMP(260mL)中并在0℃下加入氨(28％，260mL)。将该混合物升温至室温并搅拌5小时直至反应完全。减压去除过量的氨并通过共沸蒸馏馏出水。将固体滤出并干燥以得到白色晶体。19g，63％。C₁₂H₁₆N₂O₄(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：252.27，实测值为：252.21。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ10.03(s，1H)，8.31(s，br，3H)，8.23～8.26(d，1H，J＝8.4Hz)，7.57～7.64(d，1H，J＝8.7Hz)，7.57(s，1H)，4.29～4.36(q，2H，7.2Hz)，3.95(s，3H)，3.91(s，2H)，1.33(t，3H，J＝7.2Hz)。

实施例4

(E)-乙基3-甲氧基-4-(2-(4,4,4-三氟-3-甲基丁烯基氨基)乙酰胺基)苯甲酸酯的制备

分子量：374.35

向搅拌的乙基4-(2-氨基乙酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸酯HCl盐(910.5mg，3.0mmol)在MTBE(10mL)中的悬浮液加入三乙胺(363mg，3.6mmol)。在室温下搅拌该混合物30分钟并且加入4,4,4-三氟-3-甲基丁醛(Synquest，420mg，3.0mmol)。在室温下搅拌该新混合物16小时。将固体滤出并用MTBE洗涤。用盐水和水洗涤滤液并用硫酸钠干燥。去除溶剂，得到在放置后固化的浅黄色油状物。1.10g，97.8％。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ9.53(s，br，1H)，8.50～8.6(d，1H，J＝8.7Hz)，7.89(s，1H)，7.50～7.75(d，1H，J＝9.0Hz)，7.59(s，1H)，4.38～4.41(q，2H，7.2Hz)，4.24(s，2H)，3.97(s，3H)，2.84～3.0(m，1H)，2.70～2.84(m，1H)，1.38～1.48(t，1H，J＝7.2Hz)，1.25～1.32(d，3H，J＝6.9Hz)。

实施例5

(E)-乙基3-甲氧基-4-[2-(3-甲基丁-2-烯基氨基)乙酰胺基)苯甲酸酯的制备

分子量：318.37

向乙基4-(2-氨基乙酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸酯盐酸盐(1.50g，5.18mmol)在MTBE(8mL)中的悬浮液加入三乙胺(Aldrich，628mg，6.22mmol)。在室温下搅拌该混合物30分钟。随后加入3-甲基丁-2-烯醛(Aldrich，436mg，5.18mmol)。在室温下搅拌该混合物18小时。将固体滤出并且用水和盐水洗涤滤液。去除溶剂，得到粗品，由庚烷结晶该粗品得到白色粉末。1.56g，95％。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ9.54(s，br，1H)，8.53～8.6(d，1H，J＝8.4Hz)，8.25～8.30(d，1H，J＝9.3Hz)，7.70～7.75(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.5Hz)，7.58(d，1H，J＝1.5Hz)，6.11(d，1H，J＝9.3Hz)，4.30～4.43(q，7.2Hz)，4.30(s，1H)，4.0(s，3H)，1.99(d，6.9Hz)，1.42(t，3H，J＝7.2Hz)。

实施例6

外消旋乙基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-甲基丙-1-烯基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯的制备。

分子量：626.5

将DBU(Aldrich，0.40mmol)、(E)-乙基3-甲氧基-4-(2-(3-甲基丁-2-烯基氨基)乙酰胺基)苯甲酸酯(614mg，2.0mmol)和(E)-3-(3-氯-2-氟苯亚甲基)-6-氯吲哚啉-2-酮(614mg，2mmol)(Shu等人，Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256)在甲苯(20mL)中的溶液于N₂和温和回流下搅拌过夜。冷却该反应混合物并将溶剂减少至约6mL。以滴加方式向该混合物加入1.2mL甲醇并随后加入庚烷(6mL)。在室温下搅拌该混合物30分钟。将固体滤出并在真空下干燥以得到灰白色固体。950mg，76％。C₃₂H₃₀Cl₂FN₃O₅(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：626.15，实测值为：626.22。

实施例7

外消旋4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-甲基丙-1-烯基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：598.45

向搅拌的乙基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-甲基丙-1-烯基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯(860mg，1.37mmol)在THF/H₂O(4:1，5mL)混合物中的溶液加入NaOH溶液(295mg，1.2mL)连同2mL的THF。在60℃下搅拌该混合物直至TLC(30％EtOAc/己烷)确定的反应终点。用50％柠檬酸溶液调整该中间物(media)的PH＝6并用EtOAc(3×10mL)萃取该混合物。减压去除溶剂，得到灰白色固体。810mg，93％。C₃₀H₂₆Cl₂FN₃O₅(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：598.12，实测值为：598.15。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ10.58(s，1H)m10.48(s，1H)，8.37～8.40(d，1H，J＝8.7Hz)，7.74～7.78(d，J＝8.1Hz)，7.5～7.70(m，3H)，7.36～7.42(t，1H，J＝6.9Hz)，7.15～7.21(t，1H，J＝8.4Hz)，6.99～7.03(dd，1H，J1＝8.1Hz，J2＝1.8Hz)，6.63～6.64(d，1H，J＝1.8Hz)，4.97～5.00(d，1H，J＝8.1Hz)，4.60～4.759(m，2H)，4.56～4.60(d，1H，J＝10.2Hz)，3.95(s，3H)，1.60(s，3H)，1.49(s，3H)。

实施例8

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-甲基丙-1-烯基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺的制备

分子量：597.46

向搅拌的4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-甲基丙-1-烯基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸(280mg，0.446mmol)在THF(6mL)中的溶液加入碳二亚胺(Aldrich，145mg，0.892mmol)。在室温下搅拌该混合物1.5小时并加入氨水(30％，4mL)。在室温下搅拌该混合物15分钟。用EtOAc(3×10mL)萃取并减压(reduced)去除溶剂。层析(EtOAc/己烷/甲醇，70:30:3)该残留物以得到灰白色固体。128mg，48％。C₃₀H₂₇Cl₂FN₄O₄(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：597.14，实测值为：597.15。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ10.51(s，1H)，10.48(s，1H)，8.32(d，1H，J＝8.1Hz)，7.95(s，br，1H)，7.75～7.78(d，1H，J＝7.8Hz)，7.59～7.66(m，2H，J＝8.7Hz)，7.50～7.54(d，1H，J＝8.4Hz)，7.37～7.40(t，1H，J＝7.5Hz)，7.32(s，br，1H)，7.16～7.22(t，1H，J＝7.8Hz)，6.99～7.02(d，1H，J＝8.1Hz)，6.65(s，1H)，4.98～5.01(d，1H，J＝8.1Hz)，4.65～4.80(m，2H)，4.56～4.60(d，1H，J＝9.9Hz)，3.95(s，3H)，3.85～3.89(d，1H，J＝10.8Hz)，1.61(s，3H)，1.50(s，3H)。

实施例9a

外消旋乙基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯的制备

分子量：682.49

将DBU(Aldrich，0.40mmol)、(E)-乙基3-甲氧基-4-(2-(4,4,4-三氟-3-甲基丁烯基氨基)乙酰胺基)苯甲酸酯(793.62mg，2.12mmol)和(E)-3-(3-氯-2-氟苯亚甲基)-6-氯吲哚啉-2-酮(614mg，2mmol)(Shu等人，Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256)在甲苯(10mL)中的溶液于N₂和温和回流下搅拌24小时。冷却该反应混合物并将溶剂减少至约6mL。层析(30％EtOAc/己烷)得到三种主要产物。第一异构体容易从洗脱液结晶出来并通过过滤收集(170mg)，但不是期望的立体异构体。第二(191mg)和第三(270mg)非对映异构体证明是期望的异构体。使用本发明的下文中描述的手性醛确定CF₃连接中心的绝对立构中心。然后，将第一异构体和其他异构体合并并溶于甲苯(6mL)中，并用DBU(47mg)回流24小时。层析(30％EtOAc/己烷)得到附加量的异构体二(240mg)和异构体三(160mg)。外消旋乙基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯的总量为：431mg，产率32％。¹HNMR(300MHz，CDCl3)，δ10.67(s，1H)，10.58(s，1H)，8.39～8.42(d，1H，J＝7.8Hz)，7.74～7.77(d，1H，J＝8.4Hz)，7.50～7.70(m，3H)，7.38～7.43(t，1H，J＝6.9Hz)，7.17～7.23(t，7.8Hz)，7.05～7.09(dd，1H，J1＝8.40Hz)，6.71(d，1H，J＝1.8Hz)，4.64～4.70(t，1H，J＝8.7Hz)，4.57～4.60(d，1H，J＝9.6Hz)，4.28～4.35(q，7.2Hz)，4.18(m，1H)，3.96(s，4H)，2.75(m，1H)，1.66～1.73(t，1H，J＝9.9Hz)，1.34(t，3H，J＝7.2Hz)，1.15～1.18(d，3H，J＝6.9Hz)，0.85～0.93(t，1H，J＝13.4Hz)。

实施例9b

乙基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯的制备

分子量：682.49

按照用于制备实施例9a的实验，得到总量为430mg的外消旋乙基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯。C₃₂H₂₉Cl₂F4N₃O₅(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：682.14，实测值为：682.22。¹HNMR(300MHz，CDCl3)。δ10.66(s，1H)，10.59(s，1H)，8.39～8.42(d，1H，J＝7.8Hz)，7.69～7.72(d，1H，J＝7.5Hz)，7.50～7.65(m，3H)，7.38～7.43(t，1H，J＝6.9Hz)，7.17～7.23(t，7.8Hz)，7.05～7.09(dd，1H，J1＝8.40Hz)，6.71(d，1H，J＝1.8Hz)，4.64～4.75(t，1H，J＝8.7Hz)，4.52～4.56(d，1H，J＝9.3Hz)，4.28～4.35(q，7.2Hz)，4.18(m，1H)，3.95(s，3H)，3.85～3.95(m，1H)，2.3～2.4(m，1H)，1.4～1.55(m，2H)，1.30-1.35(t，3H，J＝7.2Hz)，1.20-1.22(d，3H，J＝6.9Hz)。

实施例10

外消旋4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：654.44

将外消旋乙基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯(200mg，0.29mmol)溶于THF(4mL)和NaOH溶液(1mL水中有75mgNaOH)的混合物中。在60℃和氮气下搅拌该新混合物21小时。然后，加入额外的0.5mL水中的25mgNaOH，并且在氮气下加热和搅拌该混合物24小时。加入1NHCl至PH＝5。用EtOAc(3×6mL)萃取该混合物并干燥(Na₂SO₄)。蒸发溶剂，得到灰白色固体。189mg，99％。C₃₀H₂₅Cl₂F₄N₃O₅(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：654.11，实测值为：654.12。¹HNMR(300MHz，CDCl3)。δ10.64(s，1H)，10.61(s，1H)，8.35～8.39(d，1H，J＝8.7Hz)，7.69～7.72(d，1H，J＝8.1Hz)，7.50～7.64(m，3H)，7.38～7.42(t，1H，J＝6.9Hz)，7.16～7.22(t，1H，8.4Hz)，7.04～7.08(dd，1H，J1＝8.1Hz，J2＝1.8Hz)，6.71～6.72(d，1H，J＝1.8Hz)，4.67～4.71(d，1H，9.3Hz)，4.56～4.60(d，1H，J＝9.6Hz)，4.10～4.22(m，1H)，3.95(s，3H)，3.80～4.0(m，1H)，2.30～2.43(m，1H)，1.41～1.52(m，1H)，1.27～1.40(m，1H)，1.20～1.23(d，3H，J＝6.9Hz)。

实施例11

外消旋4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：654.44

通过用于制备4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸的类似方法，通过异构体二的水解制备4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸。C₃₀H₂₅Cl₂F₄N₃O₅(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：654.11，实测值为：654.15。¹HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.64(s，1H)，10.59(s，1H)，8.35～8.39(d，1H，J＝8.7Hz)，7.73～7.77(d，1H，J＝8.4Hz)，7.42～70(m，3H)，7.38～7.44(t，1H，J＝7.2Hz)，7.17～7.22(t，1H，8.1Hz)，7.04～7.08(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.8Hz)，6.70～6.71(d，1H，J＝1.8Hz)，4.65(d，1H，9.3Hz)，4.56～4.60(d，1H，J＝9.3Hz)，4.10～4.22(m，1H)，3.95(s，3H)，3.80～4.0(m，1H)，2.60～2.80(m，1H)，1.70(t，1H，J＝12.3Hz)，1.15～1.18(d，3H，J＝6.9Hz)，0.84～0.90(t，1H，J＝12.3Hz)。

实施例12

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺的制备

分子量：653.45

将4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸(66mg，0.10mmol)溶于THF(3mL)。向搅拌的溶液加入CDI(Aldrich，33mg，0.20mmol)并且在室温下搅拌该混合物1小时。加入氨(30％，2mL)并且在室温下搅拌该新混合物15分钟。用EtOAc(3×10mL)萃取该混合物并浓缩。层析残留物(70％EtOAc/己烷)，得到灰白色固体。58mg，89％。C₃₀H₂₆Cl₂F₄N₄O₄(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：653.13，实测值为：653.19。

¹HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.65(s，1H)，10.63(s，1H)，8.35～8.39(d，1H，J＝8.7Hz)，8.05(s，br，1H)，7.74～7.77(d，1H，J＝8.1Hz)，7.62～7.7.73(m，2H)，7.55～7.58(d，1H，J＝8.1Hz)，7.43～7.49(t，1H，J＝7.8Hz)，7.37(s，br，1H)，7.22～7.28(t，1H，J＝8.4Hz)，7.10～7.14(d，1H，J＝8.4Hz)，6.77(s，1H)，4.71～4.81(m，1H)，4.56～4.59(d，1H，J＝9.6Hz)，4.10～4.25(m，1H)，3.98(s，3H)，3.80～4.0(m，1H)，2.30～2.5(m，1H)，1.46～1.60(m，1H)，1.27～1.46(m，1H)，1.26～1.29(d，3H，J＝6.9Hz)。

实施例13

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺的制备

分子量：653.45

将4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸(66mg，0.10mmol)溶于THF(3mL)。向搅拌的溶液加入CDI(Aldrich，33mg，0.20mmol)并且在室温下搅拌该混合物1小时。加入氨(30％，2mL)并且在室温下搅拌该新混合物15分钟。用EtOAc(3×10mL)萃取该混合物并浓缩。层析残留物(70％EtOAc/己烷)，得到灰白色固体。54mg，83％。C₃₀H₂₆Cl₂F₄N₄O₄(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：653.13，实测值为：653.19。¹HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.57(s，2H)，8.29～8.33(d，1H，J＝7.8Hz)，7.94(s，br，1H)，7.73～7.76(d，1H，J＝8.4Hz)，7.52～7.62(m，2H)，7.50～7.53(d，1H，J＝8.4Hz)，7.37～7.40(t，1H，J＝6.9Hz)，7.31(s，br，1H)，7.22～7.28(t，1H，J＝8.4Hz)，7.10～7.14(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.8Hz)，6.70～6.71(d，1H，J＝1.8Hz)，4.60～4.71(m，1H)，4.54～4.58(d，1H，J＝9.6Hz)，4.10～4.25(m，1H)，3.94(s，3H)，3.80～4.0(m，1H)，2.64～2.73(m，1H)，1.60～1.80(m，1H)，1.17(d，3H，J＝6.9Hz)，0.80～0.95(m，1H)。

实施例14

3-氰基-2,2-二甲基丙基三氟甲磺酸酯的制备

分子量：245.22

将4-羟基-3,3-二甲基丁腈(US2012/220767A1)(2.40g，21.24mmol)溶于DCM(15mL)中，并将该溶液冷却至-78℃。向搅拌的溶液依次加入吡啶(Aldrich，2.1mL，26mmol)和三氟甲磺酸酐(Aldrich，4.28mL，25.5mmol)并且在-78℃下搅拌该混合物1小时。分离有机层并用DCM(2×5mL)萃取该水层。合并该萃取液，并用硫酸钠干燥。去除溶剂，得到橙色油状物。4.59g，88％。¹HNMR(300MHz，CDCl3)δ4.38(s，2H)，2.48(s，2H)，1.23(s，6H)。

实施例15

4-氟-3,3-二甲基丁腈的制备

分子量：115.15

将3-氰基-2,2-二甲基丙基三氟甲磺酸酯(2.49g，10mmol)溶于乙醚(10mL)并将该溶液冷却至0℃。向搅拌的溶液加入四丁基氟化铵(Aldrich，13mL，13mmol，1M的THF溶液)并将该混合物逐渐升温至室温并且搅拌过夜。将该混合物倒入水中并用乙醚萃取。用硫酸钠干燥萃取液并减压(350mmHg，35℃浴温)除去溶剂，得到浅黄色液体。0.97g，84％。¹HNMR(300MHz，CDCl3)δ4.14～4.30(d，1H，J＝47.4Hz)，2.42(s，2H)，1.15(d，6H，J＝1.8Hz)。

实施例16

4-氟-3,3-二甲基丁醛的制备

分子量：118.15

4-氟-3,3-二甲基丁腈(0.72g，6.26mmol)溶于DCM(5mL)并将该溶液冷却至-78℃。向搅拌的溶液加入DCM中的DIBAL(Aldrich，9.4mL，9.4mmol)并在-78℃下搅拌该混合物2小时。在-78℃下用20％AcOH(10mL)淬灭该反应。将该混合物缓慢升温至室温并且加入10mL氯化铵(饱和)并且搅拌该混合物直至形成澄清溶液。分离有机层并用饱和碳酸氢钠洗涤并干燥(Na₂SO₄)。去除溶剂，通过硅胶短垫滤出残留物并用二乙醚洗脱该残留物。去除溶剂，得到无色油状物。0.70g，95％。¹HNMR(300MHz，CDCl3)。δ9.88(s，1H)，4.15～4.42(d，1H，J＝48.3Hz)，2.44～2.24(d，2H，J＝2.7Hz)，1.12(s，6H)。

实施例17

(E)-乙基4-(2-(4-氟-3,3-二甲基丁烯基氨基)乙酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸酯的制备

分子量：352.4

将乙基4-(2-氨基乙酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸酯(758.75mg，2.5mmol)、三乙胺(303mg，3mmol)和4-氟-3,3-二甲基丁醛(295mg，2.5mmol)悬浮于MTBE(Aldrich，7mL)中并且在室温下搅拌该混合物过夜。用水洗涤，并用硫酸钠干燥有机层。减压去除溶剂，得到白色固体。800mg，99％。¹HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.52(s，1H)，8.54～8.58(d，1H，J＝8.4Hz)，7.90(三重峰，1H，J＝5.4Hz)，7.70～7.80(d，1H，J＝8.4Hz)，7.60(s，1H)，4.30～4.50(q，2H，6.9Hz)，4.15～4.33(d，2H，J＝47.7)，4.26(s，2H)，3.98(s，3H)，2.42～2.45(d，2H，J＝5.4Hz)，1.40～1.47(t，3H，J＝6.9Hz)，1.10(d，6H，J＝1.5Hz)。

实施例18

外消旋(4-乙氧羰基-2-甲氧基-苯基)(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-[3-氟-2,2-二甲基-丙基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酸酯的制备

分子量：660.54

将DBU(Aldrich，69.3mmol)、(E)-乙基4-(2-(4-氟-3,3-二甲基丁烯基氨基)乙酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸酯(807mg，2.51mmol)和(E)-3-(3-氯-2-氟苯亚甲基)-6-氯吲哚啉-2-酮(700mg，2.28mmol)(Shu等人，Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256)在甲苯(12mL)中的溶液于N₂和温和回流下搅拌22.5小时。冷却该混合物，加入12mL庚烷和2mL甲醇，在室温下进一步搅拌该新混合物2小时。将固体滤出并用甲苯/庚烷/甲醇(5:5:1，10mL)洗涤并且在真空下干燥，得到灰白色固体。1.12g，74％。该酯直接用于下一步骤中。

实施例19

外消旋4-[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氧基-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：632.48

(4-乙氧羰基-2-甲氧基-苯基)(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-[3-氟-2,2-二甲基-丙基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酸酯(1.12g，1.66mmol)溶于THF和50％NaOH的混合物(5mLTHF，1mL50％NaOH)中并且在70℃下搅拌该混合物6小时。冷却该混合物并加入1mL50％NaOH，并且用乙醚(2×20mL)萃取该新混合物。用4NHCl将水层(含有一些固体)酸化至PH＝4。将固体滤出并在真空炉中于50℃下干燥，得到灰白色固体。996mg，93％。¹HNMR(300MHz，DMSO)。δ10.73(s，1H)，10.53(s，1H)，8.40～8.45(d，1H，J＝8.7Hz)，7.72～7.77(d，1H，J＝7.8Hz)，7.55～7.70(d，1H，J＝8.4Hz)，7.40(t，1H，J＝6.6Hz)，7.20(t，1H，J＝8.1Hz)，7.03～7.07(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.8Hz)，6.71(d，1H，J＝1.8Hz)，4.70(m，1H)，4.50～4.53(d，1H，J＝9Hz)，4.14～4.32(d，2H，J＝47.7Hz)，3.95(s，3H)，3.85～3.95(m，1H)，3.70～3.78(m，1H)，1.35-1.45(dd，1H，J1＝13.8Hz，J2＝9.9Hz)，0.99(s，3H)，0.91(s，3H)，0.84～0.90(d，1H，J＝14Hz)。

实施例20

外消旋(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺的制备

分子量：631.5

向搅拌的4-[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基-3-甲氧基-苯甲酸(65mg，0.10mmol)在THF(3mL)中的溶液加入CDI(Aldrich，34mg，0.20mmol)并且在室温下搅拌该混合物1小时。向搅拌的溶液加入浓氨水(38％，2mL)并在室温下搅拌该新混合物15分钟。用DCM(2×5mL)萃取该混合物。用1NHCl洗涤萃取液并用硫酸钠干燥。去除溶剂，得到灰白色固体。60mg，92％。¹HNMR(300MHz，DMSO)。δ10.65(s，1H)，10.54(s，1H)，8.33～8.40(d，1H，J＝9.0Hz)，7.96(s，1H)，7.72～7.75(d，1H，J＝7.8Hz)，7.725(s，1H)，7.55～7.70(m，3H，J＝8.4Hz)，7.5～7.55(dd，1H，J1＝8.40，J2＝1.5Hz)，7.30～7.44(t，1H，J＝7.2Hz)，7.33(s，br，1H)，7.20(t，1H，J＝8.4Hz)，7.03～7.07(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.8Hz)，6.71(d，1H，J＝2.1Hz)，4.60～4.80(m，1H)，4.49～4.53(d，1H，J＝9.0Hz)，4.14～4.40(d，2H，J＝47.7Hz)，3.95(s，3H)，3.85～3.95(m，1H)，3.70～3.78(m，1H)，1.35～1.45(dd，1H，J1＝13.8Hz，J2＝9.9Hz)，0.99(s，3H)，0.91(s，3H)，0.84～0.90(d，1H，J＝14Hz)。

实施例21

手性4-[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：632.48

将外消旋(4-羰基-2-甲氧基-苯基)(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-[3-氟-2,2-二甲基-丙基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺(466mg，0.74mmol)溶于EtOAc(4mL)中。向搅拌的溶液加入(R)-N,N-二甲基-1-苯基乙胺(Aldrich，110mg，0.74mmol)并在60℃下加热2小时且逐渐冷却至室温，并且搅拌过夜。将固体滤出并干燥，得到期望的盐。227mg。

¹HNMR(300MHz，DMSO)。δ10.71(s，1H)，10.57(s，1H)，8.35～8.45(d，1H，J＝8.4Hz)，7.72-7.77(d，1H，J＝8.1Hz)，7.55～7.70(m，3H)，7.41(t，1H，J＝6.6Hz)，7.15～7.34(m，6H)，7.03～7.07(dd，1H，J1＝8.1Hz，J2＝1.8Hz)，6.72(d，1H，J＝1.8Hz)，4.70(m，1H)，4.50～4.51(d，1H，J＝9Hz)，4.14～4.32(d，2H，J＝47.7Hz)，3.95(s，3H)，3.85～3.95(m，1H)，3.70～3.78(m，1H)，2.12(s，6H)，1.35-1.50(dd，1H，J1＝13.8Hz，J2＝9.9Hz)，1.25～1.32(d，3H)，1.0(s，3H)，0.92(s，3H)，0.60～0.80(d，1H，J＝14Hz)。

将该盐悬浮于EtOAc(8mL)中并加入10mL2NHCl和1mLTHF。在室温下剧烈搅拌该混合物。分离有机层并干燥(Na₂SO₄)。减压去除溶剂，得到白色固体。189mg，％。¹HNMR(300MHz，DMSO)。δ12.80(s，br，1H)，10.73(s，1H)，10.53(s，1H)，8.40～8.45(d，1H，J＝8.7Hz)，7.72～7.77(d，1H，J＝7.8Hz)，7.50～7.75(m，4H)，7.40(t，1H，J＝6.6Hz)，7.20(t，1H，J＝8.1Hz)，7.03～7.07(d，1H，J1＝7.8Hz)，6.71(s，1H)，4.70(m，1H)，4.50～4.53(d，1H，J＝9.3Hz)，4.14～4.32(d，2H，J＝47.8Hz)，3.95(s，3H)，3.85～3.95(m，1H)，3.70～3.78(m，1H)，1.35～1.45(dd，1H，J1＝13.8Hz，J2＝9.9Hz)，0.99(s，3H)，0.91(s，3H)，0.84～0.90(d，1H，J＝14Hz)。

实施例22

手性(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺的制备

分子量：631.5

向搅拌的4-[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基-3-甲氧基-苯甲酸(70mg，0.11mmol)在THF(3mL)中的溶液加入CDI(Aldrich，38mg，0.22mmol)并在室温下搅拌该混合物1小时。向搅拌的溶液加入浓氨水(38％，2mL)并在室温下搅拌该新混合物15分钟。用DCM(2×5mL)萃取该混合物并用1HCl洗涤。用硫酸钠干燥萃取液。去除溶剂，得到灰白色固体。65mg，93％。¹HNMR(300MHz，DMSO)。δ10.65(s，1H)，10.54(s，1H)，8.33～8.40(d，1H，J＝9.0Hz)，7.96(s，1H)，7.72～7.75(d，1H，J＝7.8Hz)，7.725(s，1H)，7.55～7.70(m，3H，J＝8.4Hz)，7.5～7.55(dd，1H，J1＝8.40，J2＝1.5Hz)，7.30～7.44(t，1H，J＝7.2Hz)，7.33(s，br，1H)，7.20(t，1H，J＝8.4Hz)，7.03～7.07(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.8Hz)，6.71(d，1H，J＝2.1Hz)，4.60～4.80(m，1H)，4.49～4.53(d，1H，J＝9.0Hz)，4.14～4.40(d，2H，J＝47.7Hz)，3.95(s，3H)，3.85～3.95(m，1H)，3.70～3.78(m，1H)，1.35～1.45(dd，1H，J1＝13.8Hz，J2＝9.9Hz)，0.99(s，3H)，0.91(s，3H)，0.84～0.90(d，1H，J＝14Hz)。

实施例23

(R)-4,4,4-三氟-3-甲基丁-1-醇的制备

分子量：142.12

(R)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酸(Pigza等人,J.Org.Chem.,2009,74(15),5510-5515,和WO2009/121919，0.35g,2.24mmol)溶于THF(5mL)中并将溶液冷却至-78℃。加入四氢化铝锂(63mg，1.65mmol)并且在-78℃下搅拌该混合物1小时，然后在室温下搅拌该混合物20分钟。冷却该混合物至0℃并且加入水以及随后的4NHCl。用乙醚(3×8mL)萃取，并且用硫酸钠干燥萃取液。去除溶剂，得到油状物。0.23g，72％。

实施例24

(R)-4,4,4-三氟-3-甲基丁醛的制备

分子量：140.1

向搅拌的邻甲基氯苄(oxylylchloride)(2.55g，20.1mmol)在DCM(8mL)中的溶液于-78℃下缓慢加入DMSO(2.09g，26.72mmol)。在-78℃下搅拌该混合物15分钟。加入(R)-4,4,4-三氟-3-甲基丁-1-醇(0.95g，6.68mmol)和2mLDCM，并且在缓慢加入Et₃N(4.06g，40.08mmol)之前于-78℃下搅拌该混合物1小时。将该混合物逐渐升温至室温超过20分钟并加入1NHCl。分离DCM层，用硫酸钠干燥，并通过硅胶柱短垫过滤。去除溶剂(275mmHg/rt)，得到油状物。0.63克，67％。

实施例25

(R,E)-乙基3-甲氧基-4-(2-(4,4,4-三氟-3-甲基丁烯基氨基)乙酰胺基)苯甲酸酯的制备

分子量：374.35

向搅拌的乙基4-(2-氨基乙酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸酯HCl盐(500mg，1.73mmol)在MTBE(10mL)中的悬浮液加入三乙胺(210mg，2.08mmol)。在室温下搅拌该混合物30分钟并且加入(R)-4,4,4-三氟-3-甲基丁醛(340mg，2.42mmol)。在室温下搅拌该新混合物16小时。滤出固体并用MTBE洗涤。用盐水、水洗涤滤液，并用硫酸钠干燥。去除溶剂，得到在放置后固化的浅黄色油状物，0.71g，其直接用于下一步骤中。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ9.53(s，br，1H)，8.50～8.6(d，1H，J＝8.7Hz)，7.89(s，1H)，7.50～7.75(d，1H，J＝9.0Hz)，7.59(s，1H)，4.38～4.41(q，2H，7.2Hz)，4.24(s，2H)，3.97(s，3H)，2.84～3.0(m，1H)，2.70～2.84(m，1H)，1.38～1.48(t，1H，J＝7.2Hz)，1.25～1.32(d，3H，J＝6.9Hz)。

实施例26

手性乙基-4-[[(2’R,3’R,3’S,5’S)-6-氯-3’(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-2,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯的制备

分子量：682.49

向DBU(Aldrich，50mg，0.33mmol)、(R,E)-乙基3-甲氧基-4-(2-(4,4,4-三氟-3-甲基丁烯基氨基)乙酰胺基)苯甲酸酯(648mg，1.73mmol)和(E)-3-(3-氯-2-氟苯亚甲基)-6-氯吲哚啉-2-酮(500mg，1.63mmol)(Shu等人，Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256)在甲苯(10mL)中的溶液于回流和氮气下搅拌24小时。冷却该反应混合物并将该溶剂减少至约6mL。层析(30％EtOAc/己烷)得到两种主要产物。来自该柱的第一组分为该期望异构体的镜像异构体。250mg，23％。¹HNMR(300MHz，DMSO)：δ10.71(s，1H)，10.63(s，1H)，8.40～8.50(d，1H，J＝8.4Hz)，7.07～7.82(d，1H，J＝8.1Hz)，7.59～7.75(m，3H)，7.40～7.59(t，1H，7.2Hz)，7.20～7.30(t，1H，J＝8.1Hz)，7.09～7.13(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.5Hz)，6.77(s，1H)，4.60～4.80(t，1H，J＝9.6Hz)，4.40～4.60(d，1H，J＝9.3Hz)，4.30～4.40(q，2H，J＝7.2Hz)，4.18～4.26(t，1H，J＝9.3Hz)，3.90～4.10(覆盖(covered)，1H)，4.00(s，3H)，2.70～2.90(m，1H)，1.65～1.85(t，1H，J＝11.4Hz)，1.35～1.40(t，3H，J＝6.9Hz)，1.20～1.23(d，3H，J＝6.6Hz)，0.87～1.00(t，1H，J＝11.1Hz)。

来自该柱的第二组分为期望产物。220mg，20％。

¹HNMR(，300MHz，DMSO)：δ10.72(s，1H)，10.65(s，1H)，8.840～8.50(d，1H，J＝8.4Hz)，7.74～7.77(d，1H，J＝8.1Hz)，7.59～7.75(m，3H)，7.40～7.50(t，1H，7.2Hz)，7.20～7.30(t，1H，J＝8.1Hz)，7.09～7.13(d，1H，J＝8.4Hz)，6.77(s，1H)。4.72～4.80(t，1H，J＝9.0Hz)，4.57～4.60(d，1H，J＝9.3Hz)，4.30～4.45(q，2H，J＝6.6Hz)，4.15～4.26(t，1H，J＝9.3Hz)，3.90～4.10(覆盖，1H)，4.00(s，3H)，，2.30～2.50(m，1H)，1.25～1.65(m，重叠(overlapped)，2H)，1.35～1.41(t，3H，J＝7.2Hz)，1.26～1.29(d，3H，J＝6.6Hz)。

实施例27

手性4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：654.44

手性乙基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯(200mg，0.29mmol)溶解于THE(4mL)和氢氧化钠溶液(1mL水中有75mgNaOH)的混合物中。该新混合物在60℃和氮气下搅拌21小时。然后加入额外的在0.5mL水中的25mgNaOH并加热该混合物并在氮气下搅拌24小时。加入1NHCl使PH＝5。干燥该混合物并用EtOAc(3×6mL)萃取并干燥(Na₂SO₄)。蒸发溶剂，得到灰白色固体。189mg，99％。C₃₀H₂₅Cl₂F₄N₃O₅(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：654.11，实测值为：654.12。¹HNMR(300MHz，DMSO)：δ10.64(s，1H)，10.61(s，1H)，8.36～8.40(d，1H，J＝9.0Hz)，7.68～7.71(d，1H，J＝7.8Hz)，7.53～7.65(m，3H)，7.38～7.42(t，1H，6.9Hz)，7.16～7.22(t，1H，J＝8.1Hz)，7.04～7.08(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.5Hz)，6.72(d，1H，J＝1.8Hz)，4.67～4.71(d，1H，J＝9.1Hz)，4.50～4.54(d，1H，J＝9.6Hz)，3.94(s，3H)，3.85～4.0(m，2H)，2.25～2.50(m，1H)，1.40～1.65(m，1H)，1.25～1.40(m，1H)，1.20～1.23(d，3H，J＝6.6Hz)。

实施例28

手性(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺的制备

分子量：653.45

将手性4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸(66mg，0.10mmol)溶解于THF(3mL)。向搅拌的溶液加入CDI(Aldrich，33mg，0.20mmol)并在室温下搅拌该混合物1小时。然后加入氨水(30％，2mL)并在室温下搅拌该新混合物15分钟。用EtOAC(3×10mL)萃取该混合物并浓缩。层析该残留物(70％EtOC/己烷)得到灰白色固体。58mg，89％。C₃₀H₂₆Cl₂F₄N4O₄(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：653.13；实测值为：653.19。¹HNMR(300MHz，DMSO)：δ10.66(s，1H)，10.63(s，1H)，8.36～8.40(d，1H，J＝9.0Hz)，8.01(s，br，1H)，7.74～7.77(d，1H，J＝8.1Hz)，7.53～7.63(m，2H)，7.56～7.59(d，1H，J＝8.1Hz)，7.43～7.49(t，1H，6.9Hz)，7.38(s，br，1H)，7.22～7.28(t，1H，J＝8.1Hz)，7.10～7.14(dd，1H，J1＝8.1Hz，J2＝1.8Hz)，6.78(d，1H，J＝1.8Hz)，4.71～4.78(dd，1H，J1＝9.9Hz，J2＝9.3Hz)，4.50～4.54(d，1H，J＝9.3Hz)，4.14～4.21(t，1H，10.5Hz)，3.99(s，3H)，3.90～4.02(m，1H)，2.35～2.50(m，1H)，1.45～1.60(m，1H)，1.31～1.45(m，1H)，1.26～1.29(d，3H，J＝6.6Hz)。

实施例29

外消旋叔丁基(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酸酯的制备

分子量：532.43

向搅拌的叔丁基2-[(E)-(3-氰基-3-甲基-丁烯基)氨基]乙酸酯(20.2g，0.065mol)在THF(800mL)中的溶液加入LiOH(0.80g，0.033mol)。加热该混合物至40℃直至它变澄清。然后一次性(inoneportion)加入叔丁基2-[(E)-(3-氰基-3-甲基-丁烯基)氨基]乙酸酯(Shu等人,Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256；15.4g，0.069mol)在THF(100mL)中的溶液。在40℃下搅拌该所得混合物过夜并浓缩。通过柱层析纯化该残留物得到期望产物7.3g。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ10.55(s，1H)，7.49～7.52(m，2H)，7.35～7.39(t，1H，J＝7.6Hz)，7.11～7.15(t，1H，J＝7.6Hz)，7.03～7.05(d，1H，J＝6.4Hz)，6.70(s，1H)，4.496(br，1H)，4.25～4.28(d，1H，9.6Hz)，3.88(t，1H)，3.28(s，br，1H)，1.58～1.65(dd，1H，J1＝14Hz，J2＝10.8Hz)，1.35(s，3H)，1.19(s，9H)，1.18(s，3H)，1.06～1.10(d，1H，J＝14Hz)。

实施例30

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酸的制备

分子量：476.33

溶解于30％THF/CH₂Cl₂(70mL)的外消旋叔丁基(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酸酯(25g，0.047mmol)的混合物在室温下搅拌过夜。去除该溶剂并在甲基叔丁基醚中粉碎该残留物。过滤该混合物并干燥滤饼得到20g白色固体，通过层析纯化得到7.6g白色固体。产率，40％。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ10.61(s，1H)，7.56～7.58(d，1H，J＝8.0Hz)，7.49～7.53(t，1H，J＝6.8Hz)，7.37～7.41(t，2H，J＝7.8Hz)，7.13～7.19(t，1H，J＝8.0Hz)，7.07～7.09(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝2.0Hz)，6.72(d，1H，J＝2.0Hz)，4.59～4.62(d，1H，J＝10.0Hz)，4.42～4.45(d，1H，J＝10Hz)，4.00～4.62(d，1H，J＝9.6Hz)，1.68～1.75(q，1H，J1＝14.4Hz，J2＝10Hz)，1.31(s，3H)，1.22(s，3H)，1.09(d，1H，J＝14.4Hz)。

实施例31

外消旋甲基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]苯甲酸酯的制备

分子量：609.47

向(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酸(2.38g，5mmol)在DMF(50mL)中的溶液加入HATU(Aldrich，3.8g，10mmol)、DIPEA(Aldrich2.58g，20mmol)和甲基4-氨基苯甲酸酯(Combi-Blocks，1.2g，8mmol)。在室温下搅拌该混合物过夜并用水淬灭该反应。用EtOAC(2×50mL)萃取该混合物，合并萃取液，用盐水(4×50mL)洗涤，并用Na₂SO₄干燥。去除该溶剂并通过柱层析纯化该残留物得到白色固体。180mg，5.9％。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ10.67(s，1H)，10.43(s，1H)，7.91～7.94(d，2H，J＝8.8Hz)，7.74～7.77(d，2H，J＝8.4Hz)，7.66～7.69(d，1H，J＝7.6Hz)，7.57～7.61(t，1H，J＝6.4Hz)，7.36～7.40(d，1H，J＝6.4Hz)，7.15～7.18(t，1H，J＝8.4Hz)，7.07～7.08(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.6Hz)，6.74(s，1H)，4.72～4.75(t，1H，J＝8.8Hz)，4.57～4.60(d，1H，J＝10.0Hz)，3.98～4.03(t，1H，J＝9.6Hz)，3.82(s，3H)，3.78(m，1H)，1.67～1.74(dd，1H，J1＝14.0Hz，J2＝10.8Hz)，1.34(s，3H)，1.27(s，3H)，1.08～1.12(d，1H，J＝14.0Hz)。

实施例32

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]苯甲酸的制备

分子量：595.45

甲基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]苯甲酸酯(130mg，0.21mmol)和NaOH水溶液(2N，0.60mL)在THF(3mL)中的溶液在80℃下搅拌1小时。冷却该混合物至室温并浓缩。用1NHCl处理该残留物至PH达到3。用乙酸乙酯和THF萃取该混合物。用硫酸钠干燥该萃取物并过滤。浓缩滤液以得到100mg粗品，用EtOAc/PE结晶该粗品以得到80mg灰白色固体。产率，64％。C₃₀H₂₅Cl₂FN₄O₄(M-H)的LC/MSMS(ES+)的计算值为：594.12，实测值为：594。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ10.52(s，1H)，10.32(s，1H)，7.86～7.89(d，2H，J＝8.4Hz)，7.65～7.70(m，3H)，7.54～7.58(t，1H，J＝6.4Hz)，7.33～7.38(t，1H，J＝6.4Hz)，7.12～7.17(d，1H，J＝7.2Hz)，7.03～7.06(d，1H，J＝9.6Hz)，6.68(s，1H)，4.68～4.72(d，1H，J＝9.6Hz)，4.54～4.57(d，1H，J＝8.8Hz)，3.97～4.00(d，1H，J＝9.6Hz)，1.65～1.72(q，1H，J1＝12.0Hz，J2＝9.6Hz)，1.32(s，3H)，1.19(s，3H)，1.06～1.10(q，1H，J＝14.0Hz)。

实施例33

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺的制备

分子量：594.46

向外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酸(1.42g，3mmol)在DMF(50mL)中的溶液于0℃下加入CDI(Aldrich，0.97g，6mmol)，随后加入4-氨基苯甲酰胺(0.41g，3mmol)。在室温下搅拌该混合物并过滤。干燥该滤饼并层析该粗产物以得到灰白色固体。230mg，12.9％。C₃₀H₂₆Cl₂FN₅O₃(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：594.14，实测值为：594.18。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ10.52(s，1H)，10.26(s，1H)，7.81～7.84(m，3H)，7.62～7.69(m，3H)，7.54～7.59(t，1H，J＝7.6Hz)，7.22～7.38(t，1H，J＝7.6Hz)，7.22(s，br，1H)，7.13～7.17(t，1H，J＝7.6Hz)，7.03～7.06(d，1H，J＝7.6Hz)，6.68(s，1H)，4.69(t，1H，J＝8.8Hz)，4.53～4.56(d，1H，J＝9.6Hz)，3.95～4.00(t，1H，J＝9.6Hz)，3.76(br，1H)，1.66～1.72(t，1H，J1＝14Hz，J2＝8.4Hz)，1.32(s，3H)，1.19(s，3H)，1.06～1.10(d，1H，J＝14.0Hz)。

实施例34

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-N-[4-(2-羟基乙氧基)苯基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺的制备

分子量：611.49g

向搅拌的外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酸(3.0g，6.3mmol)在DMF(60mL)中的溶液加入HATU(Aldrich，4.8g，12.6mmol)、DIPEA(Aldrich，3.26g，25.2mmol)和2-(4-氨基苯氧基)乙醇(0.91g，6mmol)。在室温下搅拌该混合物过夜并用水淬灭该反应。用EtOAc(2×50mL)萃取该混合物并用盐水(4×50mL)洗涤该萃取液并用Na₂SO₄干燥。除去溶剂得到粗品，采用层析纯化该粗品以得到白色固体。1.2g，32.7％。C₃₁H₂₉Cl₂FN₄O₄(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：611.15，实测值为：611.30。¹HNMR(DMSO，400MHz)：10.53(s，1H)，9.97(s，1H)，7.66～7.69(d，1H，J＝8.8Hz)，7.59～7.61(t，1H，J＝6.4Hz)，7.49～7.52(d，2H，J＝8.4Hz)，7.35～7.39(t，1H，J＝7.2Hz)，7.14～7.19(t，1H，J＝7.6Hz)，7.05～7.08(d，1H，J＝8.4Hz)，6.88～6.90(d，2H，J＝8.8Hz)，6.70(s，1H)，4.82～4.85(t，1H，J＝5.2Hz)，4.63～4.69(t，1H，J＝9.6Hz)，4.51～4.54(d，1H，J＝9.6Hz)，3.92～4.00(m，3H)，3.66～3.77(m，3H)，1.67～1.74(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝10.4Hz)，1.34(s，3H)，1.22(s，3H)，1.10(d，1H，J＝13.6Hz)。

实施例35

外消旋甲基5-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]噻吩-2-羧酸酯的制备

分子量615.5

向搅拌的外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酸(3.0g，6.3mmol)在DMF(45mL)中的溶液加入HATU(Aldrich，4.47g，11.8mmol)、DIPEA(Aldrich，3.26g，25.2mmol)和2-(4氨基苯氧基)乙醇(0.91g，6mmol)。在室温下搅拌该混合物过夜并用水淬灭该反应。用EtOAc(2×50mL)萃取该混合物并用盐水(4×50mL)洗涤该萃取液，用Na₂SO₄干燥并浓缩。通过层析纯化该残留物以得到白色固体。310mg，8.7％。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ11.33(s，1H)，10.51(s，1H)，7.52～7.63(m，3H)，7.32～7.36(t，1H，J＝7.6Hz)，7.11～7.15(t，1H，J＝8.8Hz)，7.02～7.05(d，1H，J＝8.8Hz)，7.11～7.14(m，1H)，6.76～6.78(d，1H，J＝4Hz)，6.68(s，1H)，4.76～4.81(t，1H，J＝10Hz)，4.54～4.57(d，1H，J＝8.8Hz)，3.93～3.98(t，1H，J＝10.8Hz)，3.73(s，3H)，3.60～3.71(t，1H，J＝10.8Hz)，1.63～1.69(dd，1H，J1＝14.0Hz，J2＝10.0Hz))，1.31(s，3H)，1.19(s，3H)，1.08～1.15(d，1H，J＝14.4Hz)。

实施例36

外消旋5-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]噻吩-2-羧酸的制备

分子量：601.48

将甲基5-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]噻吩-2-羧酸酯(150mg，0.24mmol)和NaOH(2N，0.72mmol)在THF(3mL)和MeOH(1mL)中的溶液在80℃下搅拌1小时。冷却该混合物至室温并浓缩。用1NHCl处理该残留物直至PH达到3。用EtOAc和THF(3:1)萃取该混合物并用Na₂SO₄干燥该萃取液并浓缩。层析该残留物以得到白色固体。70mg，48.5％。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ11.13(s，1H)，7.57～7.64(m，2H)，7.34～7.39(t，1H，J＝6.4z)，7.13～7.18(t，1H，J＝8.4Hz)，7.00～7.06(m，2H)，6.86(s，1H)，6.57～6.59(d，1H，J＝3.2Hz)，4.76～4.80(d，1H，J＝9.2Hz)，4.54～4.57(d，1H，J＝10.4Hz)，3.93～3.97(d，1H，J＝9.6Hz)，1.65～1.72(dd，1H，J1＝14.0Hz，J2＝10.8Hz)，1.33(s，3H)，1.12(s，3H)，1.08～1.12(d，1H，J＝14.0Hz)。

实施例37

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(5-氨甲酰基-2-噻吩基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺的制备

分子量：600.49

向搅拌的5-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]噻吩-2-羧酸(130mg，0.21mmol)在THF(20mL)中的溶液于5℃下加入CDI(Aldrich，169mmol，1.1mmol)。在加入氢氧化铵(28％，300mg)之前在35℃下搅拌该混合物6小时。进一步搅拌该混合物过夜并用EtOAc(10mL)和水处理。分离该有机层并用Na₂SO₄干燥并浓缩。通过层析纯化该残留物以得到白色固体。60mg，46％。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ11.20(s，1H)，10.59(s，1H)，7.76(br，1H)，7.64～7.67(d，1H，J＝8.8Hz)，7.51～7.59(m，2H)，7.37～7.41(t，1H，J＝7.6Hz)，7.15～7.20(t，1H，J＝7.6Hz)，7.07～7.10(d，1H，J＝7.2Hz)，6.72(s，1H)，4.81(m，1H)，4.56～4.59(d，1H，J＝8.4Hz)，3.99(m，1H)，3.70(m，1H)，1.66～1.72(m，1H)，1.34(s，3H)，1.21(s，3H)，1.12～1.16(d，1H，J＝13.6Hz)。

实施例38

外消旋甲基5-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]吡啶-2-羧酸酯的制备

分子量：610.46

向搅拌的外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酸(2.38g，5.9mmol)在DMF(45mL)中的溶液加入HATU(Aldrich，3.80g，10.00mmol)、DIPEA(Aldrich，2.58g，20mmol)和甲基5-氨基-2-吡啶羧酸酯(0.72g，4.8mmol)。在室温下搅拌该混合物过夜并用水淬灭该反应。用EtOAc(2×100mL)萃取该混合物并用盐水(4×100mL)洗涤该萃取物，用Na₂SO₄干燥并浓缩。通过层析纯化该残留物以得到白色固体，200mg，7.0％。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ10.52～10.54(d，1H，J＝3.6Hz)，8.82～8.26(d，1H，J＝2.4Hz)，8.22～8.26(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝2.0Hz)，8.02～8.05(d，1H，J＝8.8Hz)，7.64～7.66(d，1H，J＝8.4Hz)，7.54～7.58(t，1H，J＝6.4Hz)，7.36～7.38(t，1H，J＝7.6Hz)，7.13～7.18(t，1H，J＝7.6Hz)，7.04～7.07(d，1H，J＝8.4Hz)，6.68(s，1H)，4.71～4.77(t，1H，J＝9.6Hz)，4.56～4.59(d，1H，J＝10.0Hz)，3.96～4.02(t，1H，J＝10.8Hz)，3.82(s，3H)，3.75～3.82(m，1H)，1.65～1.72(dd，1H，J1＝14.0Hz，J2＝9.6Hz)，1.31(s，3H)，1.19(s，3H)，1.07～1.11(d，1H，J＝13.6Hz)。

实施例39

外消旋5-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]吡啶-2-羧酸的制备

分子量：596.44

将甲基5-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]吡啶-2-羧酸酯(200mg，0.33mmol)和NaOH(2N，1mL)在THF(4mL)和MeOH(0.70mL)中的溶液于80℃下搅拌1小时。冷却该混合物至室温并加入1NHCl使PH＝3。滤出该固体并干燥并由DCM/MeOH重结晶以得到白色固体。120mg。62％。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ10.52(d，2H)，8.82(d，1H，J＝2.4Hz)，8.22～8.25(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝2.0Hz)，8.02～8.05(d，1H，J＝8.8Hz)，7.64～7.66(d，1H，J＝8.4Hz)，7.54～7.58(t，1H，J＝6.4Hz)，7.34～7.38(t，1H，J＝7.2Hz)，7.06～7.15(t，1H，J＝8.4Hz)，7.04～7.05(d，1H，J＝8.8Hz)，6.68(s，1H)，4.71～4.77(t，1H，J＝9.6Hz)，4.56～4.59(d，1H，J＝10.0Hz)，3.96～4.02(t，1H，J＝10.8Hz)，1.65～1.72(dd，1H，J1＝14.0Hz，J2＝9.6Hz)，1.32(s，3H)，1.18(s，3H)，1.07～1.11(d，1H，J＝13.6Hz)。

实施例40

4-[2-(3-氰基-3,3-二甲基-亚丙基氨基)-乙酰基氨基]-3-甲氧基-苯甲酸甲酯的制备

分子量：331.37

回流4-(2-氨基-乙酰基氨基)-3-甲氧基-苯甲酸甲酯(15.0g，0.047mol)、2,2-二甲基-4-氧代-丁腈(Combi-blocks，4.7g，0.042mol)和Et₃N(14.3g，0.141mol)在DCM(300mL)中的混合物3小时。浓缩该反应混合物并层析(EtOAc/己烷，2:1)该残留物以得到9.5g白色固体(产率：61.0％)。¹HNMR(CDCl₃，400MHz)δ9.43(s，1H)，8.52～8.54(d，1H)，7.92～7.94(q，1H)，7.70～7.73(q，1H)，7.57～7.58(d，1H)，4.30(s，2H)，3.97(s，3H)，3.93(s，3H)，2.63～2.65(d，2H)，1.50(s，6H)。

实施例41

外消旋甲基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯的制备

分子量：639.5

将DBU(Aldrich，0.53g，3.49mmol)、4-[2-(3-氰基-3,3-二甲基-亚丙基氨基)-乙酰基氨基]-3-甲氧基-苯甲酸甲酯(6.0g，18mmol)和(E)-3-(3-氯-2-氟苯亚甲基)-6-氯吲哚啉-2-酮(5.25g，17mmol)(Shu等人，Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256)在甲苯(60mL)中的溶液于温和回流和N₂下搅拌过夜。冷却该混合物至室温并浓缩。层析(DCM/MeOH)该残留物以得到白色固体。2.20g，20％。C₃₂H₂₉Cl₂FN₄O₅(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：639.3。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ10.68(s，1H)，10.54(s，1H)，8.41～8.43(d，1H，J＝8.4Hz)，7.72～7.74(d，1H，J＝8.0Hz)，7.57～7.63(m，3H)，7.37～7.41(t，1H，J＝7.2Hz)，7.16～7.20(t，1H，J＝7.6Hz)，7.03～7.06(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝2.0Hz)，6.69～6.70(d，1H，J＝1.6Hz)，4.71～4.76(t，1H，J＝9.2Hz)，4.56～4.58(d，1H，J＝9.2Hz)，3.90～3.99(m，4H)，3.85(s，3H)，1.68～1.74(dd，1H，J1＝14Hz，J2＝10Hz)，1.45(s，3H)，1.35(s，3H)，1.17～1.24(d，1H，J＝14Hz)。

实施例42

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：625.47

向搅拌的外消旋甲基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯(256mg，0.40mmol)在THF(1.5mL)和MeOH(0.5mL)中的溶液于0℃下加入NaOH(2M，1.2mL)。在80℃下搅拌该混合物1小时，冷却至室温并浓缩。用水稀释该残留物并用1NHCl处理该混合物至PH＝4。滤出出固体并干燥。采用柱层析纯化得到白色固体。215mg，86％。C₃₁H₂₇Cl₂FN₄O₅(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：625.13；实测值为：625.9。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ10.66(s，1H)，10.57(s，1H)，8.38～8.40(d，1H，J＝8.8Hz)，7.72～7.74(d，1H，J＝8.8Hz)，7.57～7.63(m，3H)，7.37～7.41(m，1H)，7.16～7.20(t，1H，J＝8.0Hz)，7.04～7.06(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝2.0Hz)，6.69～6.70(d，1H，J＝2.0Hz)，4.71～4.75(t，1H，J＝9.2Hz)，4.55～4.57(d，1H，J＝9.2Hz)，3.94～3.99(m，5H)，1.67～1.74(dd，1H，J1＝14.0Hz，J2＝10.0Hz)，1.45(s，3H)，1.34(s，3H)，1.16～1.20(d，1H，J＝14.0Hz)。

实施例43

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺的制备

分子量：624.49

向搅拌的外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸(90mg，0.14mmol)在THF(1mL)中的溶液加入CDI(Aldrich，46.7mg，0.28mmol)。在室温下搅拌该混合物1.5小时并加入氨水(28％，190mg，2.80mmol)。在室温下搅拌该混合物过夜并用EtOAc萃取。用1NHCl、盐水和水洗涤该萃取液。用硫酸钠干燥并浓缩。通过层析纯化该残留物以得到固体。80mg，92％。C₃₁H₂₈Cl₂FN₅O₄(M+H)⁺的LC/MSMS(ES+)的计算值为：624.15；实测值为：624.19。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ10.59(s，1H)，10.55(s，1H)，8.32～8.34(d，1H，J＝8.8Hz)，7.93(s，1H)，7.71～7.74(d，1H，J＝8.0Hz)，7.58～7.63(m，2H)，7.50～7.52(d，1H，J＝8.4Hz)，7.37～7.41(t，1H，J＝7.2Hz)，7.29(s，1H)，7.16～7.20(t，1H，J＝8.0Hz)，7.04～7.06(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝2.0Hz)，6.70(s，1H)，4.70～4.72(t，1H，J＝9.2Hz)，4.54～4.56(d，1H，J＝9.6Hz)，3.93～3.98(m，5H)，1.70～1.71(dd，1H，J1＝14.0Hz.J2＝10Hz)，1.45(s，3H)，1.35(s，3H)，1.16～1.24(d，1H，J＝14.0Hz)。

实施例44

手性4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：625.47

通过SFC分离外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸(100mg)以得到所述两种对映异构体。峰1(30mg)，峰2(23mg)。

实施例45

甲基4-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰基]氨基]-3-氟-苯甲酸酯的制备

分子量：326.32

向搅拌的甘氨酸叔丁酯(Aldrich，26.1g，0.15mol)在DMF(400mL)中的溶液加入HATU(Aldrich，85g，0.22mol)、DIPEA(Aldrich，96.3g，0.74mol)和甲基4-氨基-3-氟苯甲酸酯(Combi-blocks，22.gg，01.13mol)。在70℃下搅拌该混合物过夜且然后冷却至室温并分区于EtOAc(2×500mL)和水之间。用盐水洗涤该有机层并用硫酸钠干燥并浓缩。层析(EtOAc/己烷，5:1)该残留物以得到白色固体。18.7g，43％。¹HNMR(CDCl₃，400MHz)：δ8.63(s，1H)，8.40～8.44(t，1H，J＝8.4Hz)，7.79～7.81(t，1H，J＝8.8Hz)，7.71～7.74(dd，1H，J1＝11.6Hz，J2＝1.6Hz)，5.33(s，1H)，3.95～3.97(d，2H，J＝6.4Hz)，3.88(s，3H)，1.46(s，9H)。

实施例46

甲基4-[(2-氨基乙酰基)氨基]-3-氟-苯甲酸酯2,2,2-三氟乙酸盐的制备

向搅拌的甲基4-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰基]氨基]-3-氟-苯甲酸酯(18.7g，0.057mol)在DCM(90mL)中的溶液于0℃下加入TFA(30mL)。在室温下搅拌该混合物过夜并浓缩以得到18.8g灰白色固体。产率，97％。该盐直接用于下一步骤中。

实施例47

甲基4-[[2-[(E)-(3-氰基-3-甲基-丁烯基)氨基]乙酰基]氨基]-3-氟-苯甲酸酯的制备

分子量：319.33

将甲基4-[(2-氨基乙酰基)氨基]-3-氟-苯甲酸酯2,2,2-三氟乙酸盐(18.8g，57mmol)、2.2-二甲基-4-氧代丁腈(Combi-blocks，7.6g，68mmol)和Et₃N(23.1g，0.23mol)在DCM(150mL)中的混合物回流过夜，用水快速洗涤该反应混合物，用硫酸钠干燥并浓缩得到油状物(18g)，该油状物不需要进一步纯化而直接用于下一步骤中。

实施例48

外消旋甲基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-氟-苯甲酸酯的制备

分子量：627.47

将DBU(Aldrich，1.54g，10.1mmol)、4-[2-(3-氰基-3,3-二甲基-亚丙基氨基)-乙酰基氨基]-3-氟-苯甲酸甲酯(17.5g，55mmol)和(E)-3-(3-氯-2-氟苯亚甲基)-6-氯吲哚啉-2-酮(15.2g，49mmol)(Shu等人，Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256)在甲苯(400mL)中的混合物于温和回流和N₂下搅拌过夜。冷却该混合物至室温并浓缩。层析(DCM/MeOH)该残留物以得到白色固体。8.9g，28％。¹HNMR(DMSO，400MHz)δ10.53(s，1H)，10.48(s，1H)，8.40～8.44(t，1H，J＝7.6Hz)，7.77～7.81(m，2H)，7.66～7.68(d，1H，J＝8.0Hz)，7.55～7.59(t，1H，J＝6.8Hz)，7.34～7.38(m，1H)，7.13～7.17(t，1H，J＝8.0Hz)，7.01～7.05(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝2.0Hz)，6.67～6.68(d，1H，J＝2.4Hz)，4.73～4.78(t，1H，J＝9.2Hz)，4.58～4.60(d，1H，J＝9.6Hz)，3.91～3.96(m，1H)，3.82(s，3H)，1.65～1.71(dd，1H，J1＝14Hz，J2＝10.0Hz)，1.35(s，3H)，1.26(s，3H)，1.12(d，1H，J＝14Hz)。

实施例49

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-氟-苯甲酸的制备

分子量：613.44

向搅拌的甲基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-氟-苯甲酸酯(2.5g，4mmol)在THF(60mL)中的溶液加入LiOH(0.38g在20mL水中)。在40℃下搅拌该混合物过夜，冷却至室温并用1NHCl处理至PH等于2。滤过固体并干燥滤饼以得到该粗品(1.7g)，通过柱层析纯化该粗品以得到白色固体。550mg，95％。¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ10.57(s，1H)，10.49(s，1H)，8.40～8.44(t，1H，J＝8.0Hz)，7.78～7.81(m，2H)，7.70～7.72(d，1H，J＝8.0Hz)，7.59～7.62(t，1H，J＝7.2Hz)，7.38～7.41(t，1H，J＝7.2Hz)，7.17～7.20(t，1H，J＝8.0Hz)，7.06～7.09(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝1.6Hz)，6.71(s，1H)，4.77～4.79(d，1H，J＝9.2Hz)，4.60～4.63(d，1H，J＝9.6Hz)，4.04～4.07(d，1H，J＝9.6Hz)，1.68～1.74(dd，1H，J1＝14Hz，J2＝10.0Hz)，1.38(s，3H)，1.29(s，3H)，1.15～1.23(d，1H，J＝14.0Hz).

实施例50

甲基4-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰基]氨基]-3-氯-苯甲酸酯的制备

分子量：342.77

向搅拌的甘氨酸叔丁酯(Aldrich，17.0g，0.096mol)在DMF(350mL)中的溶液加入HATU(Aldrich，65.7g，0.17mol)、DIPEA(Aldrich，62g，0.48mol)和甲基4-氨基-3-氯苯甲酸酯(chlororobenzoate)(Combi-blocks，17g，0.091mol)。在80℃下搅拌该混合物过夜且然后冷却至室温并分区于EtOAc(2×500mL)和水(1000mL)之间。用盐水洗涤该有机层并用硫酸钠干燥并浓缩。层析(EtOAc/己烷，5:1)该残留物以得到白色固体。4.5g，35％。¹HNMR(CDCl₃，400MHz)：δ8.77(s，1H)，8.51～8.53(d，1H，J＝9.2Hz)，8.04(s，1H)，7.91～7.94(d，1H，J＝9.2Hz)，5.22(s，br，1H)，3.96～3.98(d，2H，J＝6.4Hz)，3.88(s，3H)，1.43(s，9H)。

实施例51

向搅拌的甲基4-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰基]氨基]-3-氯-苯甲酸酯(9.5g，0.0277mol)在DCM(50mL)中的溶液于0℃下加入TFA(15mL)。在室温下搅拌该混合物过夜并浓缩以得到9.0g灰白色固体。产率，91％。该盐直接用于下一步骤中。

¹HNMR(DMSO，400MHz)：δ8.47(d，1H，J＝8.4Hz)，7.91(d，1H，J＝1.6Hz)，7.86(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.6Hz)，4.70S，1H)，3.80(s，3H)，3.34(s，2H)。

实施例52

甲基4-[[2-[(E)-(3-氰基-3-甲基-亚丁基)氨基]乙酰基]氨基]-3-氯-苯甲酸酯的制备

分子量：335.79

将甲基4-[(2-氨基乙酰基)氨基]-3-氯-苯甲酸酯2,2,2-三氟乙酸盐(9.0g，25mmol)，2.2-二甲基-4-氧代丁腈(Combi-blocks，3.33g，30mmol)和Et₃N(12.8，130mmol)在DCM(150mL)中的混合物回流过夜。用水快速洗涤该反应混合物，用硫酸钠干燥并浓缩以得到油状物(8.0g)，该油状物直接用于下一个步骤而不需进一步纯化。

实施例53

分子量：643.92

将DBU(Aldrich，0.62g，4mmol)、4-[2-(3-氰基-3,3-二甲基-亚丙基氨基)-乙酰基氨基]-3-氯-苯甲酸甲酯(6.11g，20mmol)和(E)-3-(3-氯-2-氟苯亚甲基)-6-氯吲哚啉-2-酮(6.11g，20mmol)(Shu等人，Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256)在甲苯(120mL)中的溶液于温和回流和N₂下搅拌4.5小时。冷却该混合物至室温并浓缩。用MeOH(120mL)处理该残留物以得到淡黄色固体，该固体由EtOAc/PE重结晶以得到3.4g固体(27％)。¹HNMR(DMSO，400MHz)δ10.77(s，1H)，10.53(s，1H)，8.53～8.55(d，1H，J＝8.8Hz)，8.02～8.03(d，1H，J＝2.0Hz)，7.89～7.91(dd，1H，J1＝8.8Hz，J2＝1.6Hz)，7.68～7.70(d，1H，J＝8.0Hz)，7.56～7.59(t，1H，J＝6.8Hz)，7.34～7.38(t，1H，J＝7.6Hz)，7.14～7.18(t，1H，J＝8.0Hz)，7.02～7.05(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝2.0Hz)，6.66～6.67(d，1H，J＝2.0Hz)，4.76～4.81(t，1H，J＝10Hz)，4.59～4.62(d，1H，J＝10.0Hz)，4.60(t，1H，J＝10.0Hz)，4.04～4.10(m，1H)，3.82(s，3H)，1.68～1.73(dd，1H，J1＝14.4Hz，J2＝10Hz))，1.37(s，3H)，1.28(s，3H)，1.12～1.17(d，1H，J＝14.4Hz)。

实施例54

外消旋4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-氯-苯甲酸的制备

分子量：629.89

向搅拌的甲基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-氯-苯甲酸酯(2.52g，4mmol)在THF(60mL)中的溶液加入LiOH(0.38g在20mL水中)。在40℃下搅拌该混合物过夜，冷却至室温并用1NHCl处理至PH等于2。滤过固体并干燥滤饼以得到粗品(2.1g)，采用柱层析纯化该粗品以得到白色固体。700mg，28％(采用HPLC纯度为95％)。¹HNMR(DMSO，400MHz)δ10.76(s，1H)，10.57(s，1H)，8.52～8.54(d，1H，J＝8.8Hz)，8.02(s，1H)，7.88～7.91(dd，1H，J1＝8.8Hz，J2＝1.6Hz)，7.71～7.73(d，1H，J＝8.0Hz)，7.59～7.63(t，1H，J＝7.2Hz)，7.38～7.41(t，1H，J＝7.2Hz)，7.17～7.21(t，1H，J＝8.0Hz)，7.06～7.08(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝1.6Hz)，6.71(s，1H)，4.81(s，1H)，4.62～4.64(d，1H，J＝9.6Hz)，4.09(m，1H)，3.99～4.00(m，1H)，1.70～1.76(dd，1H，J1＝14.0Hz，J2＝10Hz)，1.41(s，3H)，1.31(s，3H)，1.16～1.26(d，1H，J＝14.0Hz)。

实施例55

4,4,4-三氟-3,3-二甲基丁-1-醇的制备

分子量：156.15

向4,4,4-三氟-3,3-二甲基丁酸(US20100240663；9.8g，58mmol)在THF(150mL)中的溶液于氮气和0℃下以滴加方式加入BH₃(97mL，1M在THF中，97mmol)。然后在室温下搅拌该混合物两小时。当反应达到TLC(DCM/MeOH＝10/1)监测的终点后，在10℃下加入MeOH淬灭该反应。然后浓缩该混合物。用乙酸乙酯和含水Na₂CO₃洗涤该残留物。用无水硫酸钠干燥该乙酸乙酯相并减压浓缩。采用快速层析纯化得到粗品(2.3g)。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ3.72(t，J＝7.6Hz，2H)，1.97(br，1H)，1.75(t，J＝7.6Hz，2H)，1.11(s，6H)。

实施例56

4,4,4-三氟-3,3-二甲基-正丁醛的制备

分子量：154.13

向搅拌的乙二酰氯(2.61g，20.56mmol)在DCM(20mL)中的溶液于-78℃下缓慢加入DMSO(2.14g，27.4mmol)在DCM(5mL)中。在-78℃下搅拌该混合物30分钟。加入在DCM(5mL)中的4,4,4-三氟-3,3-二甲基-丁-1-醇(1.07g，6.85mmol)并在缓慢加入Et₃N(4.16g，41.1mmol)之前于-78℃下搅拌该混合物1小时。逐渐升温该混合物至室温超过20分钟，并加入1NHCl。分离该DCM层并用饱和NaHCO₃和盐水洗涤，用硫酸钠干燥。通过用DCM洗脱的硅胶柱短垫过滤所得溶液。收集的溶液直接用于下一步骤。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ9.81-9.82(t，1H，J＝1.2Hz)，2.54-2.55(d，2H，J＝2.4Hz)，1.29(s，6H)。

实施例57

(E)-甲基3-甲氧基-4-(2-(4,4,4-三氟-3,3-二甲基丁烯基氨基)乙酰胺基)苯甲酸酯的制备

分子量：374.35

向搅拌的甲基4-(2-氨基乙酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸酯HCl盐(500mg，1.82mmol)在MTBE(8mL)中的悬浮液加入三乙胺(220mg，2.18mmol)。在室温下搅拌该混合物30分钟并加入4,4,4-三氟-3,3-二甲基-正丁醛(420mg，2.73mmol)。在室温下搅拌该混合物18小时。过滤该固体并用MTBE洗涤。用水和盐水洗涤该过滤物，用硫酸钠干燥。去除溶剂得到淡黄色固体(0.59g，产率86.8％)，该固体直接用于下一步骤。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ9.42(s，br，1H)，8.52～8.55(d，1H，J＝8.4Hz)，7.82～7.86(t，1H，J＝4.8Hz)，7.73～7.69(dd，1H，J1＝8.1Hz，J2＝1.5Hz)，7.57～7.58(d，1H，J＝1.8Hz)，4.26(s，br，2H)，3.96(s，3H)，3.92(s，3H)，2.57～2.58(d，2H，J＝5.1Hz)，1.26(s，6H)。

实施例58

外消旋甲基-4-[[(2’R,3’R,3’S,5’S)-6-氯-3’(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙基)螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯的制备

分子量：682.49

将DBU(Aldrich，43mg，0.29mmol)、(E)-甲基3-甲氧基-4-(2-(4,4,4-三氟-3,3-二甲基丁烯基氨基)乙酰胺基)苯甲酸酯(590mg，1.58mmol)和(E)-3-(3-氯-2-氟苯亚甲基)-6-氯吲哚啉-2-酮(440mg，1.43mmol)(Shu等人，Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256)在甲苯(8mL)中的溶液于回流和氮气下搅拌18小时。冷却该反应混合物至室温且然后加入2mLMeOH。向所得溶液以滴加方式加入正庚烷(12mL)。额外搅拌该悬浮液2小时且然后过滤。用甲苯/正庚烷/MeOH(5:5:1)洗涤滤饼并干燥得到灰白色固体的产物(0.53g)。浓缩母液。采用快速层析(35％EOAc在己烷中)纯化该残留物以得到0.2g产物。总产率为74.5％。¹HNMR(DMSO，300MHz)：δ10.68(s，1H)，10.53(s，1H)，8.39～8.42(d，1H，J＝8.1Hz)，7.72～7.75(d，1H，J＝7.8Hz)，7.56～7.59(m，3H)，7.35～7.40(t，1H，J＝7.5Hz)，7.14～7.19(t，1H，J＝7.8Hz)，7.02～7.05(d，1H，J＝8.1Hz)，6.69(s，1H)，4.64～4.70(t，1H，J＝8.4Hz)，4.49～4.52(d，1H，J＝9.3Hz)，4.00(s，br，2H)，3.91(s，3H)，3.82(s，3H)，1.57(m，1H)，1.30(s，3H)，1.01(s，3H)，0.97～1.01(d，1H，J＝12.3Hz)。

实施例59

外消旋-4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙基)螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：668.46

向甲基-4-[[(2’R,3’R,3’S,5’S)-6-氯-3’(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙基)螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯(210mg，0.31mmol)在THF(5mL)和水(1mL)中的溶液加入50％NaOH(1.5mL)。在60℃和氮气下搅拌18个小时后，采用真空去除THF。用55％柠檬酸酸化该所得溶液至PH＝6。在室温下搅拌30分钟后，滤过固体，用水洗涤并干燥以得到酸(0.21g，产率100.0％)¹HNMR(DMSO，300MHz)：δ10.74(s，1H)，10.55(s，1H)，8.25～8.27(d，1H，J＝8.1Hz)，7.73～7.75(d，1H，J＝7.8Hz)，7.55～7.62(m，2H)，7.47～7.49(d，1H，J＝8.1Hz)，7.35～7.40(t，1H，7.8Hz)，7.14～7.20(t，1H，J＝8.4Hz)，7.01～7.04(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.5Hz)，6.73～6.74(d，1H，J＝1.5Hz)，4.65(s，br，1H)，4.47～4.50(d，1H，J＝9.6Hz)，3.97(s，br，2H)，3.87(s，3H)，1.57(m，1H)，1.32(s，3H)，1.02(s，3H)，0.97～1.01(d，1H，J＝12.0Hz)。

实施例60

外消旋(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙基)螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺的制备

分子量：667.48

4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸(210mg，0.33mmol)溶解于THF(4mL)。向搅拌的该溶液加入CDI(Aldrich，110mg，0.66mmol)并在室温下搅拌该混合物1小时。加入60mgCDI并额外搅拌该混合物1小时。然后加入氨水(30％，2.5mL)且在室温下搅拌该混合物1小时。用EtOAc(2×10mL)萃取该混合物并用1NHCl、饱和NaHCO₃和盐水洗涤合并的有机相，用硫酸钠干燥。层析(85％EtOAc/己烷)该残留物得到白色固体(0.11g，52.4％)。¹HNMR(DMSO，300MHz)：δ10.61(s，1H)，10.54(s，1H)，8.31～8.34(d，1H，J＝8.4Hz)，7.92(s，br，1H)，7.74～7.76(d，1H，J＝8.1Hz)，7.58～7.63(m，2H)，7.49～7.52(d，1H，J＝8.7Hz)，7.36～7.41(t，1H，8.1Hz)，7.28(s，br，1H)，7.15～7.21(t，1H，J＝7.8Hz)，7.03～7.06(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.5Hz)，6.70(d，1H，J＝1.8Hz)，4.65～4.70(t，1H，J＝8.7Hz)，4.49～4.52(d，1H，J＝9.9Hz)，4.00～4.01(m，2H)，3.91(s，3H)，1.55～1.60(m.1H)1.32(s，3H)，1.03(s，3H)，0.99～1.03(d，1H，J＝13.5Hz)。

实施例61

(S)-4,4,4-三氟-3-甲基-丁-1-醇的制备

分子量：142.12

向(S)-4-苄基-3-((S)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基)恶唑烷-2-酮(JournalofFluorineChemistry,1999,vol.97,#1-2p.91-96.27.1g，86mmol)和MeOH(3.3g，103mmol)在Et₂O(780mL)中的溶液于0℃下加入LiBH₄(2.25g在10mLTHF中)。在0℃下搅拌该混合物1小时然后在室温下搅拌1小时。在反应达到TLC(PE/EA＝2/1)确定的终点之后，在0～10℃下加入NaOH(13.8g在150mL水中)。分离该Et₂O相并用Et₂O(200mL)萃取该水相。浓缩合并的有机相并减压蒸馏该残留物。收集该馏分(74℃-0.096Mpa)以提供液体(10.5g，产率84％)。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ3.60～3.75(m，2H)，2.30～2.39(m，2H)，1.87～1.96(m，1H)，1.44～1.52(m，1H)，1.09(d，J＝7.2Hz，3H)。

实施例62

(S)-4,4,4-三氟-3-甲基正丁醛的制备

分子量：140.1

向搅拌的乙二酰氯(3.64g，28.7mmol)在DCM(20mL)中的溶液于-78℃下缓慢加入在DCM(5mL)中的DMSO(2.99g，38.28mmol)。在-78℃下搅拌该混合物30分钟。加入在DCM(5mL)中的(S)-4,4,4-三氟-3-甲基丁-1-醇(1.36g，9.57mmol)并在缓慢加入Et₃N(5.81g，57.42mmol)之前于-78℃下搅拌该混合物1小时。逐渐升温该混合物至室温超过20分钟。并加入1NHCl。分离该DCM层并用饱和NaHCO₃和盐水洗涤，用硫酸钠干燥。通过用DCM洗脱的硅胶柱短垫过滤所得溶液。收集的溶液直接用于下一步骤。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ9.82(s，1H)，2.54～2.58(t，1H，J＝9.0Hz)，2.21～2.24(d，2H，J＝9.6Hz)，1.21～1.23(d，3H，J＝6.9Hz)。

实施例63

(S,E)-甲基3-甲氧基-4-(2-(4,4,4-三氟-3-甲基丁烯基氨基)乙酰胺基)苯甲酸酯的制备

分子量：360.33

向搅拌的甲基4-(2-氨基乙酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸酯HCl盐(1.75g，6.37mmol)在MTBE(30mL)中的悬浮液加入三乙胺(0.77g，7.64mmol)。在室温下搅拌该混合物30分钟并加入(S)-4,4,4-三氟-3-甲基正丁醛(1.61g，11.5mmol)。在室温下搅拌该混合物16小时。用水和盐水洗涤该反应混合物，用硫酸钠干燥。去除溶剂得到在放置后固化的淡黄色油状物(2.08g，产率90.0％)，该油状物直接用于下一个步骤。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ9.50(s，br，1H)，8.51～8.54(d，1H，J＝8.1Hz)，7.86(s，br，1H)，7.68～7.72(dd，1H，J1＝8.7Hz，J2＝1.8Hz)，7.55～7.56(d，1H，J＝1.8Hz)，4.23(s，br，2H)，3.94(s，3H)，3.91(s，3H)，2.84～2.92(m，1H)，2.74～2.79(m，1H)，2.35～2.45(m，1H)，1.24～1.26(d，3H，J＝6.9Hz)。

实施例64

手性甲基-4-[[(2’R,3’R,3’S,5’S)-6-氯-3’(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-2,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯的制备

分子量：668.46

将DBU(Aldrich，88.0mg，0.58mmol)、(S,E)-甲基3-甲氧基-4-(2-(4,4,4-三氟-3-甲基丁烯基氨基)乙酰胺基)苯甲酸酯(1.15g，3.19mmol)和(E)-3-(3-氯-2-氟苯亚甲基)-6-氯吲哚啉-2-酮(0.89g，2.88mmol)(Shu等人，Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256)在甲苯(10mL)中的溶液于回流和氮气下搅拌18小时。冷却该反应混合物且减少该溶剂至约6mL。层析(40％EtOAc/己烷)得到两种主要产物。来自该柱第一组分为期望的异构体(0.88g，产率45.8％)。₁HNMR(DMSO，300MHz)：δ10.70(s，1H)，10.56(s，1H)，8.38～8.41(d，1H，J＝8.4Hz)，7.61～7.66(m，3H)，7.30～7.38(m，2H)，7.02～7.08(m，2H)6.77(s，1H)，4.80～4.86(t，1H，J＝9.3Hz)，4.41～4.52(q，1H，J＝12.3Hz)，4.31～4.37(t，1H，J＝9.0Hz)，3.99(s，3H)，3.88(s，3H)，3.59～3.67(m，1H)，1.37～1.45(t，1H，J＝11.4Hz)，1.22～1.27(t，1H，J＝6.9Hz)，1.20～1.23(d，3H，J＝7.2Hz)，0.86～0.94(t，1H，J＝11.4Hz)。

来自该柱的第二组分为非期望产物。(0.97g，产率50.5％)。¹HNMR(DMSO，300MHz)：δ10.65(s，1H)，10.56(s，1H)，8.38～8.41(d，1H，J＝8.4Hz)，7.72～7.75(d，1H，J＝8.4Hz)，7.57～7.62(m，3H)，7.37～7.42(t，1H，7.2Hz)，7.16～7.21(t，1H，J＝8.4Hz)，7.04～7.07(d，1H，J＝7.8Hz)，6.69～6.70(d，1H，J＝1.8Hz).4.63～4.69(t，1H，J＝9.3Hz)，4.55～4.58(d，1H，J＝9.6Hz)，4.12～4.19(t，1H，J＝11.7Hz)，4.01(s，br.，1H)，3.95(s，3H)，3.84(s，3H)，1.65～1.72(t，1H，J＝11.1Hz)，1.21～1.24(m，1H)，1.14～1.16(d，3H，J＝6.9Hz)，0.84～0.92(t，1H，J＝12.3Hz)。

实施例65

手性4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：654.44

向溶解于THF(10mL)和水(2mL)的手性甲基4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯(0.68g，1.02mmol)加入50％NaOH(2.5mL)。在60℃和氮气下搅拌18小时后，采用真空去除THF。用55％柠檬酸酸化所得溶液至PH＝6。在室温下搅拌30分钟后，过滤该混合物，并用水洗涤收集的固体并干燥以得到酸(0.67g，产率100.0％)。¹HNMR(DMSO，300MHz)：δ10.58(s，1H)，8.30～8.33(d，1H，J＝8.4Hz)，7.76～7.79(d，1H，J＝8.1Hz)，7.53～7.68(m，3H)，7.40～7.45(t，1H，7.5Hz)，7.19～7.25(t，1H，J＝8.4Hz)，7.06～7.10(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.5Hz)，6.75(d，1H，J＝1.8Hz)，4.66(s，br，1H)，4.57～4.60(d，1H，J＝9.6Hz)，3.89～4.02(m，1H)，3.94(s，3H)，3.63(m，1H)，1.68～1.79(m，1H)，1.23～1.27(m，1H)，1.18～1.20(d，3H，J＝6.6Hz)，0.87～0.95(t，1H，J＝11.4Hz)。

实施例66

手性(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基)螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺的制备

分子量：653.45

手性4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5’-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸(0.21g，0.33mmol)溶解于THF(4mL)。向搅拌的该溶液加入CDI(Aldrich，0.11g，0.66mmol)且在室温下搅拌该混合物1小时。然后加入氨水(30％，2.5mL)且在室温下搅拌该混合物30分钟。用EtOAc(2×10mL)萃取该混合物并用1NHCl、饱和NaHCO₃和盐水洗涤该合并的有机相，用硫酸钠干燥。层析该残留物(85％EtOAc/己烷)得到白色固体(0.11g，51.4％)。¹HNMR(DMSO，300MHz)：δ10.55(s，2H)，8.29～8.31(d，1H，J＝8.1Hz)，7.93(s，br，1H)，7.71～7.75(d，1H，J＝8.4Hz)，7.56～7.58(m，2H)，7.48～7.51(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.5Hz)，7.36～7.41(t，1H，8.4Hz)，7.36(s，br，1H)，7.15～7.21(t，1H，J＝8.1Hz)，7.03～7.06(dd，1H，J1＝8.1Hz，J2＝1.8Hz)，6.69(d，1H，J＝1.8Hz)，4.62～4.64(m，1H)，4.53～4.57(d，1H，J＝9.3Hz)，4.14(s，br，1H)，3.92(s，3H)，2.72(s，br，1H)，1.64～1.71(t，1H，J＝10.5Hz)，1.22(s，br，1H)，1.14～1.16(d，3H，J＝6.9Hz)，0.84～0.91(t，1H，J＝11.4Hz)。

实施例67

5,7-二氧杂-6-硫杂-螺[2.5]辛烷6-氧化物的制备

分子量：148.18

向搅拌的(1-羟甲基-环丙基)-甲醇(Combi-blocks，10.0g，97.9mmol)和三乙胺(22.0g，220mmol)在DCM(120mL)中的溶液于5℃下以滴加超过30分钟的方式加入亚硫酰氯(13.0g，110mmol)。在-5℃下额外搅拌得到的悬浮液2小时且然后用水(100mL)稀释。分离该有机相，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并过滤。减压干燥过滤物得到白色固体的5,7-二氧杂-6-硫杂-螺[2.5]辛烷6-氧化物(13.5g，93％)。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ5.26～5.30(d，2H，J＝11.4Hz)，3.06～3.10(d，2H，J＝11.7Hz)，0.84～0.89(m，2H)，0.49～0.54(m，2H)。

实施例68

(1-羟甲基-环丙基)-乙腈的制备

分子量：111.14

将5,7-二氧杂-6-硫杂-螺[2.5]辛烷6-氧化物(13.6g，92mmol)和细粉氰化钠(6.75g，138mmol)在DMSO(30mL)中的混合物于回流下搅拌18小时。冷却所得溶液至室温，用醚稀释并用水、盐水洗涤。分离该有机相，用硫酸钠干燥并过滤。浓缩过滤物以得到红色油状物的(1-羟甲基-环丙基)-乙腈(8.70g，85％)。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ3.59(s，2H)，2.62(s，2H)，0.66～0.70(m，4H)。

实施例69

甲磺酸1-氰甲基-环丙基甲基酯的制备

分子量：189.23

向搅拌的(1-羟甲基-环丙基)-乙腈(5.1g，45.9mmol)和三乙胺(5.6g，55.1mmol)在DCM(30mL)中的溶液于0℃下以滴加超过30分钟的方式加入甲磺酸(5.8g，50.5mmol)。在0℃下搅拌该混合物2小时且然后用水(50mL)稀释。分离该有机相，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并过滤。减压干燥过滤物以得到甲磺酸1-氰甲基-环丙基甲基酯(7.2g，83％)。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ4.15(s，2H)，3.07(s，3H)，2.58(s，2H)，0.80～0.82(m，4H)。

实施例70

(1-氟甲基-环丙基)-乙腈的制备

分子量：113.13

向搅拌的甲磺酸1-氰甲基-环丙基甲基酯(6.0g，31.7mmol)在THF(10mL)中的溶液于室温下以滴加超过1小时的方式加入四正丁基氟化铵(1N在THF中，46.5mL，46.5mmol)。完成添加后，得到的液体于回流下保留1小时。该混合物逐渐冷却至室温超过20分钟且然后用水(50mL)稀释。分离该有机层并用硫酸钠干燥并通过硅胶柱短垫过滤。去除溶剂(250mmHg/rt)得到油状物的(1-氟甲基-环丙基)-乙腈。该易挥发的包括乙醚的产物直接用于下一步骤而不需进一步蒸发。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ4.43(s，1H)，(s，1H)，2.64(s，2H)，0.80～0.81(m，4H)。

实施例71

(1-氟甲基-环丙基)-乙醛的制备

分子量：116.13

向搅拌的(1-氟甲基-环丙基)-乙腈(500mg，4.42mmol)在DCM(10mL)中的溶液于-78℃下缓慢加入DIBAL(1M在DCM中，4.42mL，4.42mmol)。在-78℃下搅拌该混合物1.5小时。在-78℃下用5％乙酸(20mL)淬灭该反应混合物且然后升温至室温。向得到的悬浮液加入饱和氯化铵(10mL)并用DCM萃取。分离有机层，用饱和碳酸氢钠洗涤，用硫酸钠干燥并通过硅胶柱短垫过滤。去除溶剂(275mmHg/rt)得到无色油状物的(1-氟甲基-环丙基)-乙醛。该易挥发的包括DCM的产物直接用于下一步骤而不需进一步蒸发。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ9.87(s，1H)，4.39(s，1H)，4.23(s，1H)，2.53(s，2H)，0.66～0.75(m，4H)。

实施例72

4-{2-[(1-氟甲基-环丙基亚甲基)-氨基]-乙酰氨基}-3-甲氧基-苯甲酸甲酯的制备

分子量：336.36

向搅拌的乙基4-(2-氨基乙酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸酯HCl盐(500mg，1.82mmol)在MTBE(10mL)中的悬浮液加入三乙胺(221mg，2.18mmol)。在室温下搅拌该混合物30分钟并加入(1-氟甲基-环丙基)-乙醛(318mg，2.73mmol)。在室温下搅拌得到的混合物18小时。过滤该固体并用MTBE洗涤。用盐水、水洗涤该过滤物，并用硫酸钠干燥。去除溶剂得到直接用于下一步骤的灰白色固体0.55g。¹HNMR(CDCl₃，300MHz)：δ9.43(s，1H)，8.50～8.53(d，1H，J＝9.0Hz)，7.87(s，1H)，7.66～7.69(d，1H，J＝9.0Hz)，7.54(s，1H)，4.35(s，1H)，4.19～4.21(m，3H)，3.88～3.93(m，6H)，2.46～2.47(d，1H，J＝4.8Hz)，0.62～0.68(m，4H)。

实施例73

外消旋4-{[6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(1-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]e-5’-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸甲酯的制备

分子量：644.49

将DBU(Aldrich，82mg，0.54mmol)、4-{2-[(1-氟甲基-环丙基亚甲基)-氨基]-乙酰胺基}-3-甲氧基-苯甲酸甲酯(1.00g，2.97mmol)和(E)-3-(3-氯-2-氟苯亚甲基)-6-氯吲哚啉-2-酮(832mg，2.70mmol)(Shu等人，Org.ProcessRes.Dev.2013,17,247-256)在甲苯(16mL)中的溶液于回流和氮气下搅拌19小时。冷却该反应混合物并减少该溶剂至约6mL。层析(30％EtOAc/己烷)得到期望的产物(451mg，26％)。¹HNMR(DMSO-d₆，300MHz)：δ10.70(s，1H)，10.50(s，1H)，8.41～8.43(d，1H，J＝8.4Hz)，7.68～7.71(d，1H，J＝8.1Hz)，7.57～7.61(m，3H)，7.35～7.40(t，1H，7.2Hz)，7.14～7.20(t，1H，J＝8.1Hz)，7.01～7.05(dd，1H，J₁＝8.1Hz，J₂＝1.8Hz)，6.67～6.68(d，1H，1.8Hz)4.66～4.72(t，1H，J＝9.0Hz)，4.38～4.52(m，重叠，2H)，4.22～4.33(q，1H，J₁＝42.9Hz，J₁＝24.0Hz，J₂＝9.6Hz)，3.96(s，3H)，3.88～3.91(覆盖，2H)，3.84(s，3H)，1.41～1.48(dd，1H，J₁＝13.8Hz，J₂＝9.0Hz)，1.05～1.09(d，1H，J＝13.5Hz)，0.33～0.65(m，4H)。

实施例74

外消旋4-{[6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(1-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]e-5’-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：630.47

4-{[6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(1-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]e-5’-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸甲酯(200mg，0.31mmol)溶解于THF(10mL)、水(1mL)和50％氢氧化钠溶液(1.5mL)的混合物中。在60℃和氮气下搅拌该所得溶液1天(d)。用水(1mL)稀释该反应混合物且然后用55％柠檬酸(3mL)酸化至pH6。在于室温下搅拌30分钟后，过滤该混合物，并用水(10mL)洗涤收集的固体并干燥以得到灰白色固体。(160mg，83％)¹HNMR(DMSO-d₆，300MHz)：δ10.68(s，1H)，10.50(s，1H)，8.38～8.41(d，1H，J＝8.7Hz)，7.68～7.71(d，1H，J＝8.1Hz)，7.56～7.62(m，3H)，7.35～7.40(t，1H，7.5Hz)，7.14～7.19(t，1H，J＝7.8Hz)，7.01～7.05(dd，1H，J₁＝7.8Hz，J₂＝1.8Hz)，6.67～6.68(d，1H，J＝1.8Hz)，4.67～4.70(d，1H，J＝9.6Hz)，4.38～4.51(m，重叠，2H)，4.22～4.33(q，1H，J₁＝34.8Hz，J₂＝9.9Hz)3.94(s，3H)，3.88～3.92(m，2H)，1.41～1.49(m，1H)，1.04～1.09(d，1H，J＝14.4Hz)，0.33～0.63(m，4H)。

实施例75

外消旋6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(1-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]-5’-羧酸(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-酰胺的制备

分子量：629.48

4-{[6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(1-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]e-5’-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸(100mg，0.16mmol)溶解于THF(3mL)中。向搅拌的该溶液加入CDI(Aldrich，52mg，0.32mmol)并在室温下搅拌该混合物3小时。加入氢氧化铵溶液(30％，2.5mL)并在室温下搅拌该反应混合物30分钟。用乙酸乙酯和水稀释得到的悬浮液。分离该有机相，用盐水，饱和NH₄Cl洗涤并用硫酸钠干燥。浓缩以得到灰白色固体(90mg，90％)。¹HNMR(DMSO-d₆，300MHz)：δ10.60(s，1H)，10.49(s，1H)，8.32～8.35(d，1H，J＝8.7Hz)，7.92(s，br，1H)，7.68～7.71(d，1H，J＝7.8Hz)，7.58～7.62(m，2H)，7.49～7.52(d，1H，J＝8.4Hz)，7.35～7.40(t，1H，7.5Hz)，7.29(s，br，1H)，7.14～7.19(t，1H，J＝8.1Hz)，7.02～7.04(d，1H，J＝7.8Hz)，6.68(s，1H)，4.65～4.70(t，1H，J1＝9.0Hz)，4.38～4.50(m，重叠，2H)，4.22～4.34(q，1H，J₁＝27.3Hz，J₂＝9.3Hz)，3.94(s，3H)，3.87(m，2H)，1.41～1.49(m，1H)，1.04～1.09(d，1H，J＝13.8Hz)，0.35～0.62(m，4H)。

实施例76

手性4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-[[1-(氟甲基)环丙基]甲基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸的制备

分子量：630.47

将(R)-N,N-二甲基-1-苯基乙胺(0.89g，5.96mmol)和外消旋-4-[[(2’R,3R,3’S,5’S)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-[[2-(氟甲基)环丙基]甲基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸(2.35g，3.73mmol)在乙酸乙酯(40mL)中的混合物于80℃下搅拌1小时。逐渐冷却该混合物至室温超过4小时并在室温下搅拌2天。过滤得到的悬浮液。用冷乙酸乙酯洗涤收集的固体并干燥以得到白色固体的盐(0.74g)。浓缩该母液。该残留物在乙酸乙酯(20mL)中于80℃搅拌1小时，逐渐冷却至40℃超过4小时，并在40℃下搅拌过夜。过滤得到的悬浮液。用冷乙酸乙酯洗涤收集的固体并干燥以得到盐(0.20g)总重量0.96g；产率：32％。4-{[6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(2-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]e-5’-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸。

向4-{[6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(2-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]e-5’-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸二甲基-((R)-1-苯基乙基)胺盐(0.91g，1.17mmol)在乙酸乙酯(40mL)中的悬浮液加入1NHCl溶液(7mL)。搅拌该混合物并去除有机溶剂。滤过固体并干燥以得到白色固体的4-{[6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(2-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]e-5’-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸(0.71g，产率96.0％，99％ee)。¹HNMR(DMSO，300MHz)：δ12.83(br.s，1H)，10.67(s，1H)，10.49(s，1H)，8.40～8.37(d，1H，J＝8.7Hz)，7.71～7.68(d，1H，J＝8.4Hz)，7.62～7.56(m，3H)，7.40～7.35(t，1H，7.5Hz)，7.19～7.16(t，1H，J＝8.1Hz)，7.04～7.01(d，1H，J1＝8.4Hz)，6.67(s，1H)，4.66(d，br，1H)，4.51～4.38(m，重叠，2H)，4.33～4.22(q，1H，J＝9.0Hz)3.94(s，3H)，3.87(m，2H)，1.48～1.40(m，1H)，1.09～1.04(d，1H，J＝14.1Hz)，0.61～0.34(m，4H)。

实施例77

手性(2’R,3R,3’S,5’S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3’-(3-氯-2-氟-苯基)-5’-[[1-(氟甲基)环丙基]甲基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4’-吡咯烷]-2’-羧酰胺的制备

分子量：629.48

将4-{[6-氯-4’-(3-氯-2-氟-苯基)-2’-(2-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3’-吡咯烷]e-5’-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸二甲基-((R)-1-苯基乙基)胺盐(800mg，1.03mmol)溶解于THF(6mL)中。向搅拌的该溶液加入CDI(Aldrich，330mg，2.05mmol)并在室温下搅拌该混合物2小时。然后加入氨水(30％，3.0mL)并在室温下搅拌该混合物0.5小时。用EtOAc(2×10mL)萃取该混合物并用1NHCl、饱和NaHCO₃和盐水洗涤该合并的有机相，用硫酸钠干燥。层析该残留物(EtOAc)得到白色固体(0.64g，产率98.4％，99％ee)。¹HNMR(DMSO，300MHz)：δ10.59(s，1H)，10.47(s，1H)，8.33～8.30(d，1H，J＝8.1Hz)，7.91(s，br，1H)，7.69～7.67(d，1H，J＝7.5Hz)，7.57(m，2H)，7.51～7.48(d，1H，J＝8.1Hz)，7.39～7.34(t，1H，7.5Hz)，7.28(s，br，1H)，7.18～7.13(t，1H，J＝8.4Hz)，7.03～7.01(d，1H，J1＝8.1Hz)，6.66(s，1H)，4.66(s，br，1H)，4.49～4.46(d，1H，J＝9.3Hz)，4.40～4.24(m，2H)，3.92(s，3H)，3.86(s，br，2H)，1.42(m.1H)1.07～1.03(d，1H，J＝14.1Hz)，0.61～0.33(m，4H)。

实施例78

MDM2-p53TR-FRET结合试验

将待测化合物(12.34μM储存在DMSO中)在DMSO中三倍系列稀释并以2μl每孔地加入进384孔聚丙烯板(Matrix)，设三个重复。加入在试验缓冲液(50mMTris-HCl，pH7.4，100mMNaCl，1mMDTT和0.2mg/mlBSA)中的GST标签全长MDM2(22nM，30.8μl/孔)，接着加入5μl每孔的在试验缓冲液中的72nM生物素p53肽(Biotin-Aca-SQETFSDLWKLLPEN-OH)。在室温下孵育该样品30分钟，并加入2.5μl每孔的检测溶液，该检测溶液含有在试验缓冲液(无DTT)中的16nM铕(Eu)标记链霉亲和素(PerkinElmer)和200nM别藻蓝蛋白(APC)标记抗GST抗体(ColumbiaBiosciences)。在室温下孵育该样品40分钟。通过在Envision读取器上读取340nm的激发和615nm和665nm的荧光发射以监测试验信号。用Prism软件(GraphPad)计算IC₅₀值。实施例列表如下。

实施例79

根据以下方案处理所选化合物抑制SW480和SJSA-1的细胞数据。

1.方法：

1)使用的癌细胞系的来源：

2)实验步骤：

将处于对数增长期的细胞接种于96孔板(Corning，3599；180μL/孔；SW480和SJSA-1细胞系均为3000细胞/孔)并在孵育器(Thermo，3111)培养24小时。然后，通过在5％CO₂和37℃下加入20μL/孔的包含不同浓度的待测化合物溶液处理该细胞5天，设3个重复。之后，通过加入10μL/孔的CellCountingKit-8(CCK-8；DojinDo，CK04)溶液，额外处理该细胞4小时。最后，采用酶标仪(microplatereader)spectra-MAX190(MolecularDevices，Sunnyvale，CA)读取450nm处的吸光度。该IC₅₀值由SofeMaxPro，该酶标仪配备的软件确定。该细胞增殖抑制率计算为：增殖抑制(％)＝[1-(A450处理组/A450对照组)]×100％。

2.待测化合物的溶解：

所有待测化合物可以以10^-2M溶解于DMSO中(作为储备溶液)。除参比化合物外，所有化合物在培养介质中被稀释至10^-4M之后良好地溶解。在介质中被稀释至10^-4M后且甚至在60℃下被超声30分钟后，参比化合物处于悬浮状态，只能以33.33μM处于溶液状态。该化合物以3倍系列浓度稀释9次(dilutedat93-foldserialconcentrations)，从起始浓度10μM开始(即，处理该细胞的最高终浓度)。该详细药品稀释方案为：向495μL介质加入5μL储备溶液(10^-2M)，转移125μL所得溶液(100μM)至250μL介质，并重复此步骤至第9次得到的浓度为15.2nM。用移液管将各药品稀释液20μL转移至细胞板。

本文描述的本发明为螺吡咯烷化合物和其制造方法。尽管一些实施方案已在上文讨论，但其他实施方式和应用也在以下权利要求范围之内。尽管本文的本发明已参照特定实施方案进行描述，但应理解为这些实施方案仅仅用作说明本发明的原理和应用。因此，应理解的是，在不偏离本发明以下权利要求所限定的精神和范围的情况下，可以对说明性实施方案作出许多修改，也可以设计其他布置。

在本说明书中引用的出版物和参考文献，包括但不限于专利和专利申请，在全部引用的部分通过引用将它们全部并入文本，如同每个单独的出版物或参考文献特别且单独地指出以引用的方式并入本文。本申请要求优先权的任何专利申请也以如上描述的引用出版物和参考文献的方式而并入本文。

Claims

1.一种结构式I的化合物，

其中A为卤素并且独立地选自Cl和F，并且B独立地选自Cl、H和F；

R₁为芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基；

R2为氢或为与X、R₃或R₄相连的碳-碳键；

R₃和R₄独立地选自H、低级烷基和取代的低级烷基、环烷基、取代的环烷基、烯基、取代的烯基、炔基(alkyn)、取代的炔基，或者它们一起可形成3、4或5元环或它们其中之一可与R₂形成C-C键；

X独立地选自F、CN和其中R₅和R₆独立地选自氢和F；并且

R₇为卤素并且独立地选自Cl、Br和F。

2.如权利要求1所述的化合物，其中

R₂为H；

R₃和R₄均为甲基；并且

X为CN。

3.如权利要求1所述的化合物，其中

R₂与X形成C-C键；并且

R₃和R₄独立地选自甲基、低级烷基、取代的低级烷基、烯基和取代的低级烯基，或者它们一起可形成3、4或5元脂环。

4.如权利要求1所述的化合物，其符合式II：

其中R₅和R₆独立地选自氢和F。

5.如权利要求4所述的化合物，其中

R₂为氢；并且

R₅和R₆均为H。

6.如权利要求4所述的化合物，其中

R₂为氢；

R₃和R₄均为甲基；并且

R₅和R₆均为H。

7.如权利要求4所述的化合物，其中

R₂为H；

R₃和R₄一起形成3、4或5元脂环，例如环丙基环；并且

R₅和R₆均为H。

8.如权利要求1所述的化合物，其符合式III：

9.如权利要求1所述的化合物，其符合式IV：

A独立地选自Cl、F和Br；B选自F、H；并且

R₃和R₄独立地选自H和甲基。

10.如权利要求1至9中任一项所述的化合物，其中R₁为、但不限于下式中的一种：

其中，R独立地选自卤素、羟基、氢、低级烷基、取代的低级烷基、环烷基、取代的环烷基、低级烷氧基、取代的低级烷氧基、氰基、氨基、取代的氨基、磺酰胺基、取代的磺酰胺基、氨基磺酰基、取代的氨基磺酰基、羟基羰基、低级烷氧基羰基、氨基羰基、取代的氨基羰基、羰基氨基、取代的羰基氨基、脒基、取代的脒基、胍基(gunidino)、取代的胍基、四唑、取代的四唑，并且可独立地取代所述芳基/杂芳基环的任意的单个位置或多个位置并且优选地不超过三个位置；或者，当所述取代发生在两个相邻位置时，它可形成五或六元杂环；

任选地，其中R₁为下式中的一种：

并且任选地，其中R1为下式中的一种：

11.如权利要求10所述的化合物，其中R独立地选自卤素、低级烷基、取代的低级烷基、低级烷氧基、取代的低级烷氧基、氰基、氨基磺酰基、取代的氨基磺酰基、羟基羰基、低级烷氧基羰基、氨基羰基、取代的氨基羰基，并且可独立地取代所述芳基/杂芳基环的多个位置；其中R独立地选自卤素、羟基、氢、低级烷基、取代的低级烷基、环烷基、取代的环烷基、低级烷氧基、取代的低级烷氧基、氰基、氨基、取代的氨基、磺酰胺基、取代的磺酰胺基、氨基磺酰基、取代的氨基磺酰基、羟基羰基、低级烷氧基羰基、氨基羰基、取代的氨基羰基、羰基氨基、取代的羰基氨基、脒基、取代的脒基、胍基、取代的胍基、四唑、取代的四唑，并且可独立地取代所述芳基/杂芳基环的任意的单个位置或多个位置并且优选地不超过三个位置；或者，当所述取代发生在两个相邻位置时，它可形成五或六元杂环。

12.如权利要求1所述的化合物，其为：

外消旋乙基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-甲基丙-1-烯基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯；

外消旋4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-甲基丙-1-烯基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸；

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-甲基丙-1-烯基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

外消旋乙基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯；

外消旋4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸；

外消旋4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸；

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

外消旋(4-乙氧羰基-2-甲氧基-苯基)(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

外消旋4-[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基-3-甲氧基-苯甲酸；

外消旋(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

手性4-[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基-3-甲氧基-苯甲酸；

手性(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(3-氟-2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

手性乙基-4-[[(2'R,3'R,3'S,5'S)-6-氯-3'(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-2,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯；

手性4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸；

手性(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2R)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

外消旋叔丁基(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酸酯；

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酸；

外消旋甲基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]苯甲酸酯；

外消旋4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]苯甲酸；

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-N-[4-(2-羟基乙氧基)苯基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

外消旋甲基5-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]噻吩-2-羧酸酯；

外消旋5-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]噻吩-2-羧酸；

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(5-氨甲酰基-2-噻吩基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

外消旋甲基5-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]吡啶-2-羧酸酯；

外消旋5-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]吡啶-2-羧酸；

外消旋甲基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯；

外消旋4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸；

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

手性4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸；

外消旋甲基4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-氟-苯甲酸酯；

外消旋4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-氟-苯甲酸；

外消旋4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-(2-氰基-2-甲基-丙基)-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-氯-苯甲酸；

外消旋甲基-4-[[(2'R,3'R,3'S,5'S)-6-氯-3'(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙基)螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯；

外消旋4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙基)螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸；

外消旋(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙基)螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

手性甲基-4-[[(2'R,3'R,3'S,5'S)-6-氯-3'(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-2,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸酯；

手性4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸；

手性(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-2-氧代-5'-[(2S)-3,3,3-三氟-2-甲基-丙基]螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺；

外消旋4-{[6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(1-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3'-吡咯烷]-5'-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸甲酯；

外消旋4-{[6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(1-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3'-吡咯烷]-5'-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸；

外消旋-6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(1-氟甲基-环丙基甲基)-2-氧代-1,2-二氢-螺[吲哚-3,3'吡咯烷]-5'-羧酸(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-酰胺；

手性4-[[(2'R,3R,3'S,5'S)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-[[1-(氟甲基)环丙基]甲基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羰基]氨基]-3-甲氧基-苯甲酸；或

手性(2'R,3R,3'S,5'S)-N-(4-氨甲酰基-2-甲氧基-苯基)-6-氯-3'-(3-氯-2-氟-苯基)-5'-[[1-(氟甲基)环丙基]甲基]-2-氧代-螺[二氢吲哚-3,4'-吡咯烷]-2'-羧酰胺。

13.一种药物组合物，其包含权利要求1至12中任一项所述的化合物，以及药学上可接受的盐、前体药物和辅料。

14.一种治疗增殖性病症的方法，该方法包括向受试者给药有效量的如权利要求1至13中的一项所述的化合物。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述增殖性病症为癌症。