CN105795283B - 一种冬虫夏草饮品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于食品技术领域，具体涉及一种冬虫夏草饮品及其制备方法。本发明提供的冬虫夏草饮品由冬虫夏草菌种发酵液90‑98%和蜂蜜2‑10%组成，所述冬虫夏草菌种发酵液是采用蝙蝠蛾拟青霉经一级培养、二级培养和发酵培养后得到。经试验证明，本发明制备得到的冬虫夏草饮品的营养成分与天然冬虫夏草的营养成分相似，可以有效的解决冬虫夏草资源紧缺和难以采集的问题。而且本发明提供的冬虫夏草菌种的培养方法具有培养周期短，生产成本低，有利于工业化生产，可以有效的满足市场的需求。
Description
技术领域
本发明属于食品技术领域，具体涉及一种冬虫夏草饮品及其制备方法。
背景技术
冬虫夏草是一种天然存在的稀有生物，也是一种名贵的中药材。它由真菌和昆虫两者组成，存在于中国西北和西南部海拔3000-4000m山区的多草土壤中，其露出土壤表面的部分为真菌子实体，长3-6cm，色黑，形如刀刃，埋在土壤中的为虫体部分，长2.5-4cm，黄色至深棕色。因其形态随季节发生独特的变化，冬季为虫形夏季呈草状，故在我国称之为“冬虫夏草" 。
冬虫夏草中的真菌为寄生菌，如冬虫夏草头孢菌，中国被毛孢，中国拟青霉，蝙蝠蛾拟青霉，蝙蝠蛾蛀霉等。夏季来临时，真菌子囊散发孢子于地上，随雨水进人土壤，与宿主虫体接触，在酶和机械力的共同作用下进入虫体，在来年春天，真菌的子实体从虫体的头部长出，露出地面生长。冬虫夏草寄生菌的宿主是一种昆虫的幼虫，如虫草蝙蝠蛾，生活在高海拔低温地区，这类昆虫通常生活在地表下15-25cm，以食野草（如珠芽蓼、园穗蓼）的地下茎为生。这种昆虫在低于20 ℃时难以生长，因此，每年的11月份至来年的4月份需在地下冬眠，正常情况下在3-4年内经6-8次蜕皮后，经蛹羽化为蛾。
冬虫夏草含有大量的必需氨基酸及蛋白质、虫草素、虫草多醣、甘露糖醇、维生素B1、B2、B12、E及K、稀有矿物质、必需脂肪酸及固醇类多醣体化合物等药效成分，在中医传统上作为滋补药物应用，用于治疗多种顽固疾病和机能失调症状等。冬虫夏草一般在6-7月份从野外采集，阳光下晒干入药。但是，由于冬虫夏草资源稀少，无法满足市场的需求。因此，研究和开发出冬虫夏草的培养方法或冬虫夏草的替代品是目前亟需解决的难题。
中国专利CN102283009B公开了一种用于培养冬虫夏草的培养基、冬虫夏草人工培育方法及冬虫夏草产物，所述培养基由1000重量份水、500-1500重量份的淀粉材料、10-35重量份的椰子水、2重量份的蛋白胨、10-30重量份的大骨汤和10-30重量份的蔗糖组成，其培养方法为：将冬虫夏草接种于上述培养基中培养3个月左右，即得。该培养方法可以大量制的冬虫夏草，满足市场的需求。但是其培养周期长，生产成本高，不利于产业化生产。
中国专利CN1149277C公开了一种制备冬虫夏草球状菌体的方法，所述方法是采用冬虫夏草菌种经平板培养、无菌水洗脱、搅拌制成菌液，经液体培养后制成冬虫夏草球状菌体，所述的液体培养基由花生、玉米、蛋白胨、糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和水组成。制备得到的冬虫夏草球状菌种可以直接应用于药品、饮品、食品和化妆品等领域。
中国专利申请201210147852.4公开了一种冬虫夏草菌种培养方法，所述的方法是：将自然冬虫夏草经分离纯化、试管斜面种、振荡器液体一级种、二级种、小型种子发酵种子罐、生产发酵罐、浓缩、和喷粉干燥，得成品菌粉。该冬虫夏草菌种培养方法可以有效的增加冬虫夏草的产量，降低冬虫夏草的价格，可以有效的减轻广大患者的痛苦。
然而，目前人工培养冬虫夏草菌种的方法制备得到的冬虫夏草菌种发酵产物的有效成分含量较低，培养周期较长，无法满足现代社会的要求。
发明内容
为了解决现有技术中冬虫夏草菌种的培养方法存在的缺陷，本发明的目的在于提供一种培养周期短、发酵产物有效成分含量高、成本低的冬虫夏草饮品及其制备方法，以解决上述缺陷。
本发明提供了一种冬虫夏草饮品的制备方法，所述冬虫夏草饮品由冬虫夏草菌种发酵液2-10%和蜂蜜90-98%组成，所述冬虫夏草饮品的制备方法包括以下步骤：
S1一级种子培养：将蝙蝠蛾拟青霉接种于一级培养基中培养，放置24-26℃的摇床培养箱中培养3-5天，摇床速度为80-100r/min，得一级种子菌液；所述一级培养基主要由以下成分组成：葡萄糖8-18份、活蚕蛹浆20-30份、磷酸二氢钾0.05-0.4份和硫酸镁0.05-0.1份；
S2二级种子培养：将步骤S1得到的一级种子菌液接种于二级培养基中培养，放置24-26℃的摇床培养箱中培养3-5天，摇床速度为80-100r/min，得二级种子菌液；所述二级培养基主要由以下成分组成：土豆粉1-5份、小米粉1-5份、葡萄糖8-18份、活蚕蛹浆3-8份、磷酸二氢钾0.05-0.4份和硫酸镁0.05-0.1份；
S3发酵培养：将步骤S2得到的二级种子菌液接种于发酵罐中培养，温度控制为22-25℃，培养6-8天，搅拌速度为120-160r/min，通气速度为1-2L/h，得冬虫夏草菌种发酵液；所述发酵培养基主要由以下成分组成：土豆粉1-5份、小米粉1-5份、葡萄糖0.5-3份、大豆油0.005-0.03份、蜂蛹浆0.2-2份、植物提取液0.01-0.05份、磷酸二氢钾0.01-0.05份和硫酸镁0.01-0.05份；
S4将步骤S3得到的冬虫夏草菌种发酵液加入蜂蜜中，均质，灌装，经121℃杀菌10-20min，冷却，即得。
进一步地，所述步骤S1中的一级培养基由葡萄糖10份、活蚕蛹浆25份、磷酸二氢钾0.1份和硫酸镁0.075份组成。
进一步地，所述步骤S1中的一级培养基的pH值为6.2-6.8。
进一步地，所述步骤S2中的二级培养基由土豆粉3份、小米粉3份、葡萄糖10份、活蚕蛹浆5份、磷酸二氢钾0.1份和硫酸镁0.075份组成。
进一步地，所述步骤S2中的二级培养基的pH值为3.0-6.5。
进一步地，所述步骤S3中的发酵培养基由土豆粉2份、小米粉2份、葡萄糖1份、大豆油0.01份、蜂蛹浆1份、植物提取液0.04份、磷酸二氢钾0.015份和硫酸镁0.015份组成。
进一步地，所述步骤S3中的发酵培养基的pH值为3.0-6.5。
进一步地，所述步骤S3发酵培养基中的植物提取液由荜茇提取液和天麻提取液按体积比4-6:1-3组成。
进一步地，所述步骤S3发酵培养基中的植物提取液由荜茇提取液和天麻提取液按体积比5:2组成。
另外，本发明还提供了所述的冬虫夏草饮品的制备方法制得的冬虫夏草饮品。
本发明提供的植物提取液中的荜茇提取液的制备方法为：将荜茇洗净干燥，粉碎，加上上述粗粉3-4倍量的水加热回流提取2-3次，每次2-3h，过滤，合并滤液，即得。天麻植物提取液的制备方法为：将天麻洗净，干燥，加入上述天麻药材2-3倍量的水加热回流提取1-2次，每次1-2h，过滤，合并滤液，即得。
本发明采用从冬虫夏草中分离得到的蝙蝠蛾拟青霉种进行培养，所述的蝙蝠蛾拟青霉种为蝙蝠蛾拟青霉Cs-4，于1997年10月21日保藏与中国微生物菌种保藏管理委员会，保藏号为CGMCC NO.0327。经试验发现，该蝙蝠蛾拟青霉发酵得到的发酵产物的营养成分与天然冬虫夏草的营养成分相似，可以代替天然冬虫夏草使用，可以有效的解决冬虫夏草资源紧缺和难以采集的问题。而且本发明提供的冬虫夏草菌种的培养方法具有培养周期短，生产成本低，有利于工业化生产，可以有效的满足市场的需求。
本发明提供的由荜茇提取液和天麻提取液按一定体积比组成的植物提取液和蜂蛹浆可以有效的增强蝙蝠蛾拟青霉的发酵能力，提高发酵产物中有效成分的含量，经试验发现，本发明制备得到的冬虫夏草饮品的腺苷含量大于2.4mg/100ml，甘露醇含量大于15mg/ml，粗多糖含量大于13.9mg/ml，是一种较为理想的天然冬虫夏草的替代饮品。
与现有技术相比，本发明提供的技术方案具有以下优势：
（1）本发明提供的冬虫夏草饮品的制备方法培养周期短，成本低，产量高，有利于工业化生产；
（2）本发明提供的冬虫夏草饮品中腺苷、甘露醇和粗多糖的有效成分含量高，是一种较为理想的天然冬虫夏草的替代饮品。
具体实施方式
以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。
实施例1、一种冬虫夏草饮品
所述冬虫夏草饮品的配方为：
制备方法：
S1一级种子培养：将蝙蝠蛾拟青霉接种于一级培养基中培养，放置24℃的摇床培养箱中培养3天，摇床速度为80r/min，得一级种子菌液；所述一级培养基由葡萄糖8份、活蚕蛹浆20份、磷酸二氢钾0.05份和硫酸镁0.05份组成，pH值为6.2；
S2 二级种子培养：将步骤S1得到的一级种子菌液接种于二级培养基中培养，放置24℃的摇床培养箱中培养3天，摇床速度为80r/min，得二级种子菌液；所述二级培养基由土豆粉2份、小米粉2份、葡萄糖8份、活蚕蛹浆3份、磷酸二氢钾0.05份和硫酸镁0.05份组成，pH值为6.0；
S3发酵培养：将步骤S2得到的二级种子菌液接种于发酵罐中培养，温度控制为22℃，培养6天，搅拌速度为120r/min，通气速度为1L/h，得冬虫夏草菌种发酵液；所述发酵培养基由土豆粉1份、小米粉1份、葡萄糖0.5份、大豆油0.005份、蜂蛹浆0.8份、植物提取液0.01份、磷酸二氢钾0.01份和硫酸镁0.01份组成，所述植物提取液由荜茇提取液和天麻提取液按体积比4:3组成，pH值为6.0；
S4将步骤S3得到的冬虫夏草菌种发酵液加入蜂蜜中，均质，灌装，经121℃杀菌10min，冷却，即得。
实施例2、一种冬虫夏草饮品
所述冬虫夏草饮品的配方为：
制备方法：
S1一级种子培养：将蝙蝠蛾拟青霉接种于一级培养基中培养，放置25℃的摇床培养箱中培养4天，摇床速度为90r/min，得一级种子菌液；所述一级培养基由葡萄糖10份、活蚕蛹浆25份、磷酸二氢钾0.1份和硫酸镁0.075份组成，pH值为6.6；
S2 二级种子培养：将步骤S1得到的一级种子菌液接种于二级培养基中培养，放置25℃的摇床培养箱中培养4天，摇床速度为90r/min，得二级种子菌液；所述二级培养基由土豆粉3份、小米粉3份、葡萄糖10份、活蚕蛹浆5份、磷酸二氢钾0.1份和硫酸镁0.075份组成，pH值为6.2；
S3发酵培养：将步骤S2得到的二级种子菌液接种于发酵罐中培养，温度控制为23℃，培养7天，搅拌速度为150r/min，通气速度为2L/h，得冬虫夏草菌种发酵液；所述发酵培养基由土豆粉2份、小米粉2份、葡萄糖1份、大豆油0.01份、蜂蛹浆1份、植物提取液0.04份、磷酸二氢钾0.015份和硫酸镁0.015份组成，所述植物提取液由荜茇提取液和天麻提取液按体积比5:2组成，pH值为6.2；
S4将步骤S3得到的冬虫夏草菌种发酵液加入蜂蜜中，均质，灌装，经121℃杀菌15min，冷却，即得。
实施例3、一种冬虫夏草饮品
所述冬虫夏草饮品的配方为：
制备方法：
S1一级种子培养：蝙蝠蛾拟青霉接种于一级培养基中培养，放置26℃的摇床培养箱中培养5天，摇床速度为100r/min，得一级种子菌液；所述一级培养基由葡萄糖16份、活蚕蛹浆30份、磷酸二氢钾0.02份和硫酸镁0.1份，pH值为6.8；
S2 二级种子培养：将步骤S1得到的一级种子菌液接种于二级培养基中培养，放置26℃的摇床培养箱中培养5天，摇床速度为100r/min，得二级种子菌液；所述二级培养基由土豆粉5份、小米粉5份、葡萄糖18份、活蚕蛹浆8份、磷酸二氢钾0.02份和硫酸镁0.1份组成，pH值为6.5；
S3发酵培养：将步骤S2得到的二级种子菌液接种于发酵罐中培养，温度控制为25℃，培养8天，搅拌速度为160r/min，通气速度为2L/h，得冬虫夏草菌种发酵液；所述发酵培养基由土豆粉4份、小米粉4份、葡萄糖2份、大豆油0.03份、蜂蛹浆2份、植物提取液0.05份、磷酸二氢钾0.02份和硫酸镁0.02份组成，所述植物提取液由荜茇提取液和天麻提取液按体积比6:1组成，pH值为6.5；
S4将步骤S3得到的冬虫夏草菌种发酵液加入蜂蜜中，均质，灌装，经121℃杀菌20min，冷却，即得。
对比例1、一种冬虫夏草饮品
所述冬虫夏草饮品的配方如实施例2。
制备方法的不同：步骤S3中发酵培养基由土豆粉2份、小米粉2份、葡萄糖2份、大豆油0.01份、植物提取液0.04份、磷酸二氢钾0.015份和硫酸镁0.015份组成，其余步骤与实施例2类似。
对比例2、一种冬虫夏草饮品
所述冬虫夏草饮品的配方如实施例2。
制备方法的不同：步骤S3中发酵培养基中的植物提取液为荜茇提取液，其余步骤与实施例2类似。
对比例3、一种冬虫夏草饮品
所述冬虫夏草饮品的配方如实施例2。
制备方法的不同：步骤S3中发酵培养基中的植物提取液为天麻提取液，其余步骤与实施例2类似。
对比例4、一种冬虫夏草饮品
所述冬虫夏草饮品的配方如实施例2。
制备方法的不同：步骤S3中发酵培养基中的植物提取液由荜茇提取液和天麻提取液按体积比1:1组成，其余步骤与实施例2类似。
试验例一、一种冬虫夏草饮品的质量测定试验
1、试验材料：实施例1、实施例2、实施例3、对比例1、对比例2、对比例3和对比例4制备的冬虫夏草饮品。
2、试验方法：
采用高效液相色谱仪（HPLC）法测定实施例1、实施例2、实施例3、对比例1、对比例2、对比例3和对比例4制备的冬虫夏草饮品中的腺苷、甘露醇和粗多糖的含量。其中：天然冬虫夏草的有效成分含量如表1所示。
表1 冬虫夏草的有效成分含量表
3、试验结果：
试验结果如表2所示。
表2 冬虫夏草饮品有效成分含量测定试验
由表2的数据可知，本发明制备得到的冬虫夏草饮品的有效成分与天然冬虫夏草的有效成分基本相似，而且有效成分含量高，腺苷含量大于2.4mg/100ml，甘露醇含量大于15mg/ml，粗多糖含量大于13.9mg/ml，是一种较为理想的天然冬虫夏草的替代饮品。而对比例1-4制备得到的冬虫夏草饮品的有效成分含量均比本发明实施例1-3制备的冬虫夏草饮品的有效成分含量低，说明本发明提供的由植物提取物按一定体积比组成的植物提取液和蜂蛹浆可以有效的增强蝙蝠蛾拟青霉的发酵能力，提高发酵产物的有效成分的含量。
Claims (9)
1.一种冬虫夏草饮品的制备方法，其特征在于，所述冬虫夏草饮品由冬虫夏草菌种发酵液2-10％和蜂蜜90-98％组成，所述冬虫夏草饮品的制备方法包括以下步骤：
S1一级种子培养：将蝙蝠蛾拟青霉接种于一级培养基中培养，放置24-26℃的摇床培养箱中培养3-5天，摇床速度为80-100r/min，得一级种子菌液；所述一级培养基主要由以下成分组成：葡萄糖8-18份、活蚕蛹浆20-30份、磷酸二氢钾0.05-0.4份和硫酸镁0.05-0.1份；
S2二级种子培养：将步骤S1得到的一级种子菌液接种于二级培养基中培养，放置24-26℃的摇床培养箱中培养3-5天，摇床速度为80-100r/min，得二级种子菌液；所述二级培养基主要由以下成分组成：土豆粉1-5份、小米粉1-5份、葡萄糖8-18份、活蚕蛹浆3-8份、磷酸二氢钾0.05-0.4份和硫酸镁0.05-0.1份；
S3发酵培养：将步骤S2得到的二级种子菌液接种于发酵罐中培养，温度控制为22-25℃，培养6-8天，搅拌速度为120-160r/min，通气速度为1-2L/h，得冬虫夏草菌种发酵液；所述发酵培养基主要由以下成分组成：土豆粉1-5份、小米粉1-5份、葡萄糖0.5-3份、大豆油0.005-0.03份、蜂蛹浆0.2-2份、植物提取液0.01-0.05份、磷酸二氢钾0.01-0.05份和硫酸镁0.01-0.05份；所述植物提取液由荜茇提取液和天麻提取液按体积比4-6:1-3组成；
S4将步骤S3得到的冬虫夏草菌种发酵液加入蜂蜜中，均质，灌装，经121℃杀菌10-20min，冷却，即得。
2.如权利要求1所述的冬虫夏草饮品的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中的一级培养基由葡萄糖10份、活蚕蛹浆25份、磷酸二氢钾0.1份和硫酸镁0.075份组成。
3.如权利要求1所述的冬虫夏草饮品的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中的一级培养基的pH值为6.2-6.8。
4.如权利要求1所述的冬虫夏草饮品的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中的二级培养基由土豆粉3份、小米粉3份、葡萄糖10份、活蚕蛹浆5份、磷酸二氢钾0.1份和硫酸镁0.075份组成。
5.如权利要求1所述的冬虫夏草饮品的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中的二级培养基的pH值为3.0-6.5。
6.如权利要求1所述的冬虫夏草饮品的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中的发酵培养基由土豆粉2份、小米粉2份、葡萄糖1份、大豆油0.01份、蜂蛹浆1份、植物提取液0.04份、磷酸二氢钾0.015份和硫酸镁0.015份组成。
7.如权利要求1所述的冬虫夏草饮品的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中的发酵培养基的pH值为3.0-6.5。
8.如权利要求1所述的冬虫夏草饮品的制备方法，其特征在于，所述步骤S3发酵培养基中的植物提取液由荜茇提取液和天麻提取液按体积比5:2组成。
9.如权利1-8任一所述的冬虫夏草饮品的制备方法制得的冬虫夏草饮品。
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