CN105770090A - 一种泌淋脂肪乳注射液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种泌淋脂肪乳注射液，是将头花蓼、车前草、酢浆草、石椒草四味药材经乙醇梯度提取后，过大孔树脂柱，分别提取纯化中药大极性的水溶性活性成分和小极性的脂溶性活性成分，然后通过现代中药制剂的方法，制成脂肪乳注射液。本发明的方法，通过优化中药提取工艺，以达到充分提取、富集、纯化活性成分的目的，是制成的制剂稳定性好，而且药物起效快、生物利用度高、缩短了治疗周期，药物安全性及治疗效果得到了显著的提高。
Description
技术领域：
本发明属于医药技术领域，特别涉及一种泌淋脂肪乳注射液及其制备方法。
背景技术：
泌尿系统感染为临床常见病和多发病，属于中医“淋证”范畴，中医理论认为是“热”泌尿系统感染为临床常见病和多发病，属于中医“淋证”范畴，中医理论认为淋是“热在下焦”。《诸病源侯论》指出：“诸淋者，由肾虚而膀胱热故也。”《丹溪心法》亦强调：“淋有五，皆属于热”。可见本病的主要病因是湿热蕴结下焦，湿浊困阻，下注于膀胱，使膀胱气化不利所致，治宜以清利湿热、通淋为主。为了达到防治目的，许多发明人及药品企业做了大量的研究，也提供了一些治疗的产品，如申请号为CN02134098.6的专利申请就是为治疗此类疾病而开发，另外还有市售的产品如泌淋颗粒、泌淋胶囊、泌淋片等。但是，在后续的研究中，我们发现现有产品存在制备工艺过于简单、剂型较为落后等问题，使得中药提取不充分，制剂杂质较多、起效慢、生物利用度不高、治疗周期较长，直接影响治疗效果及药品的安全性，限制了临床使用的范围；鉴于这些情况，为了更好的发挥民族药的优势，优化生产工艺、选用更加简单有效的剂型；以解决现有技术存在的问题。
发明内容：
本发明针对现有泌淋制剂中存在的不足之处，采用一种高效而又能达到更好的富集纯化效果的制备方法；并最终采用现代中药制剂技术，将纯化得到的中药提取物制成脂肪乳注射液，以进一步提高制剂的疗效及安全性。
具体地，本发明的目的是提供一种泌淋脂肪乳注射液，所述的注射液是由中药头花蓼、车前草、酢浆草、石椒草的提取物和辅料注射用油、乳化剂、等渗调节剂及注射用水制成，按重量份计，其配方为：
头花蓼：450-1800份；车前草：250-900份；酢浆草250-900份；石椒草200-400份，注射用油100-300份；乳化剂15-30g份；等渗调节剂15-25份；
更具体地，一种泌淋复方脂肪乳注射液，按重量份计，其配方优选为：
头花蓼：900份；车前草：450份；酢浆草450份；石椒草300份；注射用油200份；乳化剂25份；等渗调节剂22份；
上述配方中所用的注射用油为大豆油、棉子油、红花油、鱼油、芝麻油、橄榄油、C8～C14的中链脂肪酸甘油三酯或短链脂肪酸甘油三酯中的一种或多种以任何比例混合的混合物，优选大豆油；
所述的乳化剂选自磷脂，磷脂优选卵磷脂，包括蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂和氢化卵磷脂，更优选蛋黄卵磷脂；
所述的等渗调节剂选自甘油、甘露醇、木糖醇、山梨醇或葡萄糖中的一种或多种以任何比例混合的混合物，优选甘油；
本发明的又一个目的是提供上述泌淋脂肪乳注射液的制备方法，包括以下步骤：
(1)将头花蓼、车前草、酢浆草、石椒草四味药材粉碎，过60目筛，加5-7倍量的乙醇回流提取2次，第一次提取液为80％乙醇，第二次提取液40％乙醇，每次回流提取2h，合并提取液，过滤，滤液减压回收除去乙醇，得到粗提取物；粗提取物加入水10-15倍量稀释，保温搅拌30min，温度为60℃，放冷，过滤；
(2)取滤液，上大孔吸附树脂柱，上柱完毕后，加水充分洗脱至溶液澄清，收集上柱及洗脱产生的水溶液，减压浓缩至稠膏，放冷，在搅拌的状态下缓缓加入5-8倍量的60％～80％的乙醇溶液，静置，过滤，收集滤液，并减压干燥至干，得提取物A；
(3)用50％～95％的乙醇洗脱大孔吸附树脂柱，收集洗脱液，并减压浓缩至干，得提取物B；
(4)在氮气保护下，称取注射用油，加热至40-80℃，在高速搅拌下将乳化剂、提取物B加入注射用油中，搅拌均匀作为油相；另将等渗调节剂加入适量的注射用水中，混匀，加入提取物A，充分搅拌溶解后用0.45μm的滤膜过滤作为水相；在高速搅拌下，将油相与水相混合并继续高速搅拌制成初乳，加注射用水至1000ml，混匀后经高压均质乳匀，调节pH至6.0-8.0，混匀后经高压均质机匀化至乳粒合格，即乳粒粒径不得有大于5μm的粒子，1μm以上粒子不多于3％时，进行过滤；
(5)将过滤后的脂肪乳进行灌装、通氮、封口，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后，包装，即得泌淋脂肪乳注射液。
根据上述所述的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)取头花蓼、车前草、酢浆草、石椒草四味药材粉碎，过60目筛，加6倍量的乙醇回流提取2次，第一次提取液为80％乙醇，第二次提取液40％乙醇，每次回流提取2h，合并提取液，过滤，滤液减压回收除去乙醇，得到粗提取物；粗提取物加入水12倍量稀释，保温搅拌30min，温度为60℃，放冷，过滤；
(2)取滤液，上大孔吸附树脂柱，上柱完毕后，加水充分洗脱至溶液澄清，收集上柱及洗脱产生的水溶液，减压浓缩至稠膏，放冷，在搅拌的状态下缓缓加入5-8倍量的乙醇溶液，静置，过滤，收集滤液，并减压干燥至干，得提取物A；
(3)用70％的乙醇洗脱大孔吸附树脂柱，收集洗脱液，并减压浓缩至干，得提取物B；
(4)在氮气保护下，称取注射用油，加热至60℃，在高速搅拌下将乳化剂、提取物B加入注射用油中，搅拌均匀作为油相；另将等渗调节剂加入适量的注射用水中，混匀，加入提取物A，充分搅拌溶解后用0.45μm的滤膜过滤作为水相；在高速搅拌下，将油相与水相混合并继续高速搅拌制成初乳，加注射用水至1000ml，混匀后经高压均质乳匀，调节pH至7.0，混匀后经高压均质机匀化至乳粒合格，即乳粒粒径不得有大于5μm的粒子，1μm以上粒子不多于3％时，进行过滤；
(5)将过滤后的脂肪乳进行灌装、通氮、封口，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后，包装，即得泌淋脂肪乳注射液；
上述制备方法所用大孔树脂柱可以为：HPD-100D大孔树脂柱、AB-8大孔树脂柱、D-1300大孔树脂柱，优选AB-8大孔树脂柱。
本发明通过优化中药提取工艺，四味药材经乙醇梯度提取后，过大孔树脂柱，分别提取纯化中药大极性的水溶性活性成分和小极性脂溶性活性成分，达到充分提取、富集、纯化活性成分的目的，并通过现代中药制剂的方法，制成脂肪乳注射液，不仅制剂稳定性好，而且药物起效快、生物利用度高、缩短了治疗周期，药物安全性及治疗效果得到了显著的提高。
为了进一步对本发明的有益效果，本发明还通过以下实验例进行阐述，旨在说本发明的，绝不限制本发明的的范围。
试验例：药理学研究：
(一)抗炎作用
1、对二甲苯引起小鼠耳肿的影响
实验选用昆明种小鼠，随机分组，每日灌胃给药一次，连续三天。末次给药后30min二甲苯0.03ml滴于小鼠右耳，2小时后处死动物，沿耳廓基线剪下二耳，用7mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳圈，扭力天平称重，每鼠右耳片重量减去左耳片重量即为肿胀度。将给药组与对照组的肿胀度进行统计处理，结果见下表。
表1：对二甲苯引起小鼠耳肿的影响:
| 组别 | 剂量g/kg | 动物数/只 | 肿胀度(mg，X±SD) |
| 生理盐水 | 等体积 | 10 | 8.78±1.45 |
| 本发明注射液 | 4.5 | 10 | 4.71±1.32 |
| 市售泌淋片 | 4.5 | 10 | 5.65±1.44 |
| 市售泌淋胶囊 | 4.5 | 10 | 5.54±1.64 |
由表可见，本发明注射液对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用，并且较市售组的治疗效果更佳。
(二)镇痛作用
1.小鼠热板法
雌性小鼠，随机均分组，每组10只，(预先经过挑选，选择痛反应时间低于30秒者)重复测其正常痛阈值，取两次平均值，作为该鼠给药前痛阈值。灌胃给药30分钟，每次放1只小鼠在55±0.5℃热板上，从小鼠放在热板上至出现舔后足所需时间(秒)作为该鼠的痛阈值。分别于给药后30、60、120、180分钟测小鼠痛阈值，如60秒仍无反应，将小鼠取出，以60秒记。将给药后各组痛阈值与该组给药前痛阈值进行比较，结果见下表。
表2对小鼠镇痛作用(热板法)
由表结果可见，本发明注射液有明显镇痛作用，并且较市售组镇痛效果更佳，在60min时就已经达到了最大痛阈，说明本发明注射液起效快、治疗效果更佳显著。
(三)本发明注射液加速稳定性试验：
将本发明实施例制得的脂肪乳注射液置于温度为32±2℃，湿度为65％℃±5％的恒温箱中进行加速稳定性试验，于1、2、3、6个月未取样检测，按质量标准进行检查，结果如下表3：
表3：本发明注射液加速稳定性试验
上述加速稳定性试验结果表：本发明制得泌淋脂肪乳注射液，加速稳定性试验各项指标均符合要求，说明本发明制得的脂肪乳注射液稳定性好。
具体实施方式：
实施例1：脂肪乳注射液的制备
(1)称取头花蓼450g、车前草250g、酢浆草250g、石椒草200g四味药材粉碎，过60目筛，加6倍量的乙醇回流提取2次，第一次提取液为80％乙醇，第二次提取液40％乙醇，每次回流提取2h，合并提取液，过滤，滤液减压回收除去乙醇，得到粗提取物；粗提取物加入水10倍量稀释，保温搅拌30min，温度为60℃，放冷，过滤；
(2)取滤液，上HPD-100大孔吸附树脂柱，上柱完毕后，加水充分洗脱至溶液澄清，收集上柱及洗脱产生的水溶液，减压浓缩至稠膏，放冷，在搅拌的状态下缓缓加入5倍量的60％的乙醇溶液，静置，过滤，收集滤液，并减压干燥至干，得提取物A；
(3)用50％的乙醇洗脱大孔吸附树脂柱，收集洗脱液，并减压浓缩至干，得提取物B；
(4)在氮气保护下，称取100g注射用红花油，加热至40℃，在高速搅拌下将15g大豆磷脂、提取物B加入注射用油中，搅拌均匀作为油相；另将15g甘油加入400ml注射用水中，混匀，加入提取物A，充分搅拌溶解后用0.45μm的滤膜过滤作为水相；在高速搅拌下，将油相与水相混合并继续高速搅拌制成初乳，加注射用水至1000ml，混匀后经高压均质乳匀，调节pH至6.0，混匀后经高压均质机匀化至乳粒合格，即乳粒粒径不得有大于5μm的粒子、1μm以上粒子不多于3％时，进行过滤；
(5)将过滤后的脂肪乳进行灌装、通氮、封口，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后，包装，每支5ml，即得泌淋脂肪乳注射液。
实施例2：脂肪乳注射液的制备
(1)称取头花蓼900g、车前草450g、酢浆草450g、石椒草300g四味药材粉碎，过60目筛，加7倍量的乙醇回流提取2次，第一次提取液为80％乙醇，第二次提取液40％乙醇，每次回流提取2h，合并提取液，过滤，滤液减压回收除去乙醇，得到粗提取物；粗提取物加入水12倍量稀释，保温搅拌30min，温度为60℃，放冷，过滤；
(2)取滤液，上AB-8大孔吸附树脂柱，上柱完毕后，加水充分洗脱至溶液澄清，收集上柱及洗脱产生的水溶液，减压浓缩至稠膏，放冷，在搅拌的状态下缓缓加入5倍量的70％的乙醇溶液，静置，过滤，收集滤液，并减压干燥至干，得提取物A；
(3)用70％的乙醇洗脱大孔吸附树脂柱，收集洗脱液，并减压浓缩至干，得提取物B；
(4)在氮气保护下，称取200g大豆油，加热至60℃，在高速搅拌下将22g蛋黄磷脂、提取物B加入注射用油中，搅拌均匀作为油相；另将22g山梨醇加入400ml的注射用水中，混匀，加入提取物A，充分搅拌溶解后用0.45μm的滤膜过滤作为水相；在高速搅拌下，将油相与水相混合并继续高速搅拌制成初乳，加注射用水至1000ml，混匀后经高压均质乳匀，调节pH至7.0，混匀后经高压均质机匀化至乳粒合格，即乳粒粒径不得有大于5μm的粒子，1μm以上粒子不多于3％时，进行过滤；
(5)将过滤后的脂肪乳进行灌装、通氮、封口，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后，包装，每支5ml，即得泌淋脂肪乳注射液。
实施例3：脂肪乳注射液的制备
(1)称取头花蓼1800g、车前草900g、酢浆草250、石椒草200g四味药材粉碎，过60目筛，加8倍量的乙醇回流提取2次，第一次提取液为80％乙醇，第二次提取液40％乙醇，每次回流提取2h，合并提取液，过滤，滤液减压回收除去乙醇，得到粗提取物；粗提取物加入水15倍量稀释，保温搅拌30min，温度为60℃，放冷，过滤；
(2)取滤液，上D-1300大孔吸附树脂柱，上柱完毕后，加水充分洗脱至溶液澄清，收集上柱及洗脱产生的水溶液，减压浓缩至稠膏，放冷，在搅拌的状态下缓缓加入5倍量的80％的乙醇溶液，静置，过滤，收集滤液，并减压干燥至干，得提取物A；
(3)用95％的乙醇洗脱大孔吸附树脂柱，收集洗脱液，并减压浓缩至干，得提取物B；
(4)在氮气保护下，称取300g大豆油，加热至80℃，在高速搅拌下将30g氢化卵磷脂、提取物B加入注射用油中，搅拌均匀作为油相；另将25g山梨醇加入400ml的注射用水中，混匀，加入提取物A，充分搅拌溶解后用0.45μm的滤膜过滤作为水相；在高速搅拌下，将油相与水相混合并继续高速搅拌制成初乳，加注射用水至1000ml，混匀后经高压均质乳匀，调节pH至7.0，混匀后经高压均质机匀化至乳粒合格，即乳粒粒径不得有大于5μm的粒子，1μm以上粒子不多于3％时，进行过滤；
(5)将过滤后的脂肪乳进行灌装、通氮、封口，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后，包装，每支5ml，即得泌淋脂肪乳注射液。
Claims (9)
1.一种泌淋脂肪乳注射液，其特征在于：按重量份计，由头花蓼450-1800份、车前草250-900份、酢浆草250-900份、石椒草200-400份、注射用油100-300份、乳化剂15-30g份、等渗调节剂15-25份及注射用水制成。
2.根据权利要求1所述的泌淋脂肪乳注射液，其特征在于：按重量份计，由头花蓼900份、车前草450份、酢浆草450份、石椒草300份、注射用油200份、乳化剂25份、等渗调节剂22份及注射用水制成。
3.根据权利要求1或2所述的泌淋脂肪乳注射液，其特征在于：所用的注射用油可以为：大豆油、棉子油、红花油、鱼油、芝麻油、橄榄油、C8～C14的中链脂肪酸甘油三酯或短链脂肪酸甘油三酯中的一种或多种。
4.根据权利要求1或2所述的泌淋脂肪乳注射液，其特征在于：所述的乳化剂为蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化卵磷脂中一种或多种。
5.根据权利1或2所述的泌淋脂肪乳注射液，其特征在于：所述的等渗调节剂为甘油、甘露醇、木糖醇、山梨醇或葡萄糖中的一种或多种以比例混合的混合物。
6.一种泌淋复方脂肪乳注射液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)取头花蓼、车前草、酢浆草、石椒草四味药材粉碎，过60目筛，加5-7倍量的乙醇回流提取2次，第一次提取液为80％乙醇，第二次提取液40％乙醇，每次回流提取2h，合并提取液，过滤，滤液减压回收除去乙醇，得到粗提取物；粗提取物加入水10-15倍量稀释，保温搅拌30min，温度为60℃，放冷，过滤；
(2)取滤液，上大孔吸附树脂柱，上柱完毕后，加水充分洗脱至溶液澄清，收集上柱及洗脱产生的水溶液，减压浓缩至稠膏，放冷，在搅拌的状态下缓缓加入5-8倍量的乙醇溶液，静置，过滤，收集滤液，并减压干燥至干，得提取物A；
(3)用50％～95％的乙醇洗脱大孔吸附树脂柱，收集洗脱液，并减压浓缩至干，得提取物B；
(4)在氮气保护下，称取注射用油，加热至40-80℃，在高速搅拌下将乳化剂、提取物B加入注射用油中，搅拌均匀作为油相；另将等渗调节剂加入适量的注射用水中，混匀，加入提取物A，充分搅拌溶解后用0.45μm的滤膜过滤作为水相；在高速搅拌下，将油相与水相混合并继续高速搅拌制成初乳，加注射用水至1000ml，混匀后经高压均质乳匀，调节pH至6.0-8.0，混匀后经高压均质机匀化至乳粒合格，即乳粒粒径不得有大于5μm的粒子，1μm以上粒子不多于3％时，进行过滤；
(5)将过滤后的脂肪乳进行灌装、通氮、封口，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后，包装，即得泌淋脂肪乳注射液。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)取头花蓼、车前草、酢浆草、石椒草四味药材粉碎，过60目筛，加6倍量的乙醇回流提取2次，第一次提取液为80％乙醇，第二次提取液40％乙醇，每次回流提取2h，合并提取液，过滤，滤液减压回收除去乙醇，得到粗提取物；粗提取物加入水12倍量稀释，保温搅拌30min，温度为60℃，放冷，过滤；
(2)取滤液，上大孔吸附树脂柱，上柱完毕后，加水充分洗脱至溶液澄清，收集上柱及洗脱产生的水溶液，减压浓缩至稠膏，放冷，在搅拌的状态下缓缓加入5-8倍量的乙醇溶液，静置，过滤，收集滤液，并减压干燥至干，得提取物A；
(3)用70％的乙醇洗脱大孔吸附树脂柱，收集洗脱液，并减压浓缩至干，得提取物B；
(4)在氮气保护下，称取注射用油，加热至60℃，在高速搅拌下将乳化剂、提取物B加入注射用油中，搅拌均匀作为油相；另将等渗调节剂加入适量的注射用水中，混匀，加入提取物A，充分搅拌溶解后用0.45μm的滤膜过滤作为水相；在高速搅拌下，将油相与水相混合并继续高速搅拌制成初乳，加注射用水至1000ml，混匀后经高压均质乳匀，调节pH至7.0，混匀后经高压均质机匀化至乳粒合格，即乳粒粒径不得有大于5μm的粒子，1μm以上粒子不多于3％时，进行过滤；
(5)将过滤后的脂肪乳进行灌装、通氮、封口，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后，包装，即得泌淋脂肪乳注射液。
8.根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于：所用的大孔树脂柱为：HPD-100D大孔树脂柱、AB-8大孔树脂柱、D-1300大孔树脂柱。
9.根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于：所用的大孔树脂柱是AB-8大孔树脂柱。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20160720 |
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |