CN108210651B - 一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物及其制备方法，属于中药技术领域。该用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物15‑40份、当归提取物10‑35份、车前子提取物12‑26份、仙茅提取物5‑8份。本发明还公开了上述天然药物组合物的制备方法，本发明用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物的各组分协同作用增强机体免疫力，控制血糖，改善肾脏微循环，从而达到治疗糖尿病肾病的目的，各组分原料来源广泛，成本低廉，标本兼治，疗效确切。

Description

一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物及其制备方法。
背景技术
糖尿病肾病是由糖尿病引起的一种严重的和危害性较大的慢性并发症。糖尿病肾病主要由糖尿病引起的微血管病变而导致的肾小球硬化，临床特征为蛋白尿、水肿、高血压和渐进性肾功能损害，晚期出现严重的肾功能衰竭，是糖尿病患者的主要死亡原因之一。西医治疗多从饮食控制、强化血糖控制、降压、调整脂代谢等方面着手，或是采用透析、肾移植等治疗手段。目前临床上的一线药物仍以西药为主，西药在降血糖方面确实效果较为显著，但是其药理作用机制较单一，都是以降低患者血糖含量为重点，对并发症显得无能为力，且药物的毒副作用明显，对肝脏的损伤较大。本发明将从天然植物中提取的天然活性物质组合成天然药物组合物，采用多种天然药物联合治疗，针对性较强，具有成本低廉，标本兼治，效果显著的特点。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术中的问题，提供一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物及其制备方法。
本发明提供了一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物15-40份、当归提取物10-35份、车前子提取物12-26份、仙茅提取物5-8份。
较佳地，一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物33份、当归提取物25份、车前子提取物18份、仙茅提取物7份。
较佳地，一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物29份、当归提取物20份、车前子提取物24份、仙茅提取物6份。
较佳地，一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物28份、当归提取物33份、车前子提取物25份、仙茅提取物5份。
本发明还公开了一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物的制备方法，包括以下步骤：
S1、分别制备头花蓼提取物、车前子提取物和仙茅提取物；
将头花蓼全草粉碎，以乙醇水溶液为提取剂进行超声提取，提取液抽滤，收集滤液，残渣重复超声提取2-3次，合并滤液，得到粗提液；80℃减压浓缩后，加入乙醇醇沉，抽滤，沉淀物分别用90％的乙醇和丙酮洗涤，真空干燥后得到头花蓼提取物；
车前子提取物和仙茅提取物的制备方法与头花蓼提取物的制备方法相同，区别在于将头花蓼提取物替换为车前子提取物或仙茅提取物；
S2、制备当归提取物；
将干燥的当归粉碎制成当归粉，将4倍的去离子水加入当归粉中，然后加热至60-70℃，浸提6h，过滤，分别收集滤液一和残渣；往残渣中加入HAc-NaAc缓冲溶液，然后加入相当于滤渣重量1％的果胶酶，置于100℃保温2h，冷却、过滤，收集滤液二；将滤液一和滤液二混合后得当归提取物；
S3、将步骤S1制备得到的头花蓼提取物、车前子提取物和仙茅提取物以及步骤S2制备的当归提取物按照重量份配比混合均匀，得到用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物。
本发明的各原料组分分别具有以下功效与作用：
头花蓼：头花寥全草入药，具清热、凉血、利尿之功能。头花蓼是贵州西北少数民族常用草药，其性热，味苦、涩，有清热利湿、解毒止痛、活血散淤、利尿通淋等独特疗效，用于痢疾、肾盂肾炎、膀胱炎、尿路结石、盆腔炎、前列腺炎、风湿痛、跌扑损伤、疮疡湿疹等疾病的治疗。头花蓼中的木质素类活性成分具有降低血糖的作用。
当归提取物是一种用于补血活血，润肠通便的植物提取物，当归提取物中的当归多糖不仅具有强大的降糖作用，同时还能够有效减少糖尿病并发症的发生。
车前子提取物用于水肿胀满、热淋涩痛、暑湿泄泻、目赤肿痛、痰热咳嗽。，对各种杆菌和葡萄球菌均有抑制作用，同时还有显著的利尿作用和预防肾结石形成作用。
仙茅具有补肾助阳、益精血、强筋骨和行血消肿的作用，仙茅水提物有促进抗体生成并延长其功效，仙茅甙促进巨噬细胞增生并提高其吞噬功能，能增强免疫功能，仙茅乙醇提取物可以有效增加胰脏B细胞增殖从而降低糖的吸收和增强细胞免疫力。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，各原料组分在发挥各自功效的同时产生协同作用。头花蓼清热、凉血、利尿；当归提取物补血活血，车前子提取物消肿利尿，仙茅补肾助阳、行血消肿，共奏补肾益气，利尿通闭之效。其次，头花蓼中的木质素类活性成分具有降低血糖的作用，仙茅乙醇提取物可以有效增加胰脏B细胞增殖，从而降低糖的吸收和增强细胞免疫力。本发明用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物的各组分协同作用，增强机体免疫力，控制血糖，改善肾脏微循环，从而达到治疗糖尿病肾病的目的。各组分原料来源广泛，成本低廉，标本兼治，疗效确切。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本发明提供的一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物33份、当归提取物25份、车前子提取物18份、仙茅提取物7份。
一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物的制备方法包括以下步骤：
S1、分别制备头花蓼提取物、车前子提取物和仙茅提取物；
将头花蓼全草粉碎，以乙醇水溶液为提取剂进行超声提取，提取液抽滤，收集滤液，残渣重复超声提取2次，合并滤液，得到粗提液；80℃减压浓缩后，加入乙醇醇沉，抽滤，沉淀物分别用90％的乙醇和丙酮洗涤，真空干燥后得到头花蓼提取物；
车前子提取物和仙茅提取物的制备方法与头花蓼提取物的制备方法相同，区别在于将头花蓼提取物替换为车前子提取物或仙茅提取物；
S2、制备当归提取物；
将干燥的当归粉碎制成当归粉，将4倍的去离子水加入当归粉中，然后加热至65℃，浸提6h，过滤，分别收集滤液一和残渣；往残渣中加入HAc-NaAc缓冲溶液，然后加入相当于滤渣重量1％的果胶酶，置于100℃保温2h，冷却、过滤，收集滤液二；将滤液一和滤液二混合后得当归提取物；
S3、将步骤S1制备得到的头花蓼提取物33份、车前子提取物18份和仙茅提取物7份以及步骤S2制备的当归提取物25份，按照重量份配比混合均匀，得到用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物。
临床用药量为12g生药/日/人，分早晚两次服用，连续30天为一个疗程。
实施例2
一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物29份、当归提取物20份、车前子提取物24份、仙茅提取物6份。
一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物的制备方法包括以下步骤：
S1、分别制备头花蓼提取物、车前子提取物和仙茅提取物；
将头花蓼全草粉碎，以乙醇水溶液为提取剂进行超声提取，提取液抽滤，收集滤液，残渣重复超声提取2-3次，合并滤液，得到粗提液；80℃减压浓缩后，加入乙醇醇沉，抽滤，沉淀物分别用90％的乙醇和丙酮洗涤，真空干燥后得到头花蓼提取物；
车前子提取物和仙茅提取物的制备方法与头花蓼提取物的制备方法相同，区别在于将头花蓼提取物替换为车前子提取物或仙茅提取物；
S2、制备当归提取物；
将干燥的当归粉碎制成当归粉，将4倍的去离子水加入当归粉中，然后加热至70℃，浸提6h，过滤，分别收集滤液一和残渣；往残渣中加入HAc-NaAc缓冲溶液，然后加入相当于滤渣重量1％的果胶酶，置于100℃保温2h，冷却、过滤，收集滤液二；将滤液一和滤液二混合后得当归提取物；
S3、将步骤S1制备得到的头花蓼提取物29份、车前子提取物24份和仙茅提取物6份以及步骤S2制备的当归提取物20份按照重量份配比混合均匀，得到用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物。
临床用药量为12g生药/日/人，分早晚两次服用，连续30天为一个疗程。
实施例3
一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物18份、当归提取物25份、车前子提取物23份、仙茅提取物8份。
制备方法同实施例1的制备方法，区别在于原料组分的重量份数不同。
临床用药量为12g生药/日/人，分早晚两次服用，连续30天为一个疗程。
实施例4
一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物38份、当归提取物32份、车前子提取物20份、仙茅提取物8份。
制备方法同实施例1的制备方法，区别在于原料组分的重量份数不同。
临床用药量为12g生药/日/人，分早晚两次服用，连续30天为一个疗程。
实施例5
一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物28份、当归提取物33份、车前子提取物25份、仙茅提取物5份。
制备方法同实施例1的制备方法，区别在于原料组分的重量份数不同。
临床用药量为12g生药/日/人，分早晚两次服用，连续30天为一个疗程。
一、动物实验
1、急性毒性实验
购买SD大鼠60只，SPF级，雌雄各半，进行急性毒性实验。大鼠随机分为实验组1-5(每组10只，共计50只)和对照组10只，每组雌雄各半，实验前禁食12小时；将本发明的实施例1-5制备的天然药物组合物汤剂(浓度为6g提取物/mL，最高浓度)灌胃，灌胃容积为5mL/kg(即单次给药剂量为30g提取物/kg)，对照组给予等量生理盐水，一天给药2次，给药间隔时间6小时，给药后连续观察20天，并记录大鼠的的毒性反应及死亡数。
实验结果表明：与对照组比较，实验组1-5给药后大鼠均未见明显差异，实验连续观察20天，大鼠全身状况、饮食、饮水、体重增长均正常。大鼠灌胃本发明天然药物组合物LD50＞30g生药/kg，每日最大给药量为60g生药/kg/日。本发明实施例1-5制备的天然药物组合物临床用药量为12g生药/日/人，连续30天为一个疗程。按体重计：大鼠灌胃本发明的中药制剂的耐受量为临床用量的300倍。因此本发明的中药制剂急性毒性低，临床用药安全。
2、慢性毒性实验
本发明实施例1-5制备的天然药物组合物对大鼠按10.15g、20.86g和33.61g生药/kg连续用药10周(1.0mL/100g体重，每天2次)及停药4周后对大鼠进行观察、检测。
实验结果表明：本发明实施例1-5制备的用于天然药物组合物对大鼠的毛发、行为、大小便、体重、脏器重量、血象、肝肾功能、血糖、血脂等指标均无明显影响。脏器肉眼没有发现异样变化，组织学检查结果表明，用药10周及停药4周后，大鼠各脏器均无明显改变。说明本发明实施例1-5制备的天然药物组合物对大鼠长期用药后毒性小，停药后也没有异样反应，应用安全。
二、本发明的天然药物组合物对糖尿病肾病治疗作用的药效学研究
1、实验方法
购买70只雄性SD大鼠自由喂养，适应2周后，随机分为实验组1-5(每组10只，共计50只)、模型对照组10只以及对照组10只。模型对照组和实验组的大鼠给予高脂饮食4周，随后腹腔注射相对小剂量STZ 30mg/kg，对照组正常饮食4周，随后给予等量柠檬酸缓冲液，实验组1-5和模型对照组大鼠FBG>16.7mmol/L，确定DM模型造模成功。另外，收集尿液检验24h尿蛋白，显示明显升高为DN模型造模成功，称体重。
实验组1-5分别给予等量的天然药物组合物4mg/kg/d，模型对照组和对照组给予等量的去离子水，实验期间所有大鼠自由摄食与饮水，且尽量保持无菌操作。30天后，所有大鼠禁食8h，收集24h尿液，尿液收集后震荡混匀，离心后取上清液，放冰箱保存待测，随后称取体重，并对大鼠进行麻醉，麻醉后进行腹主动脉穿刺采血并测血糖，采血管内血标本静置30min，离心，取血清500ul置于冰箱保存。
2、统计方法应用SPSS17.0统计软件，计量资料采用“均数±标准差
Figure BDA0001624092560000071
”表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差法，组间两两比较方差齐性时用LSD方法分析，方差不齐时用Dunnett’s方法分析，p<0.05认为差异有统计学意义。
3.结果分析
3.1大鼠体重测试结果分析
治疗前，模型对照组及实验组1-5体重较对照组显著下降(均P<0.05)，模型对照组与实验组1-5各组组间体重差异无统计学意义(均P>0.05)；治疗后，各组体重增长有差异，对照组体重增长明显高于模型对照组和实验组1-5(P<0.05)；实验组1-5体重增长明显高于模型对照组(P<0.05)；实验组1-4之间大鼠体重变化无明显差异(P>0.05)，与实验组1-4相比，实验组5体重增长明显(P<0.05)。
表1各组大鼠治疗前后体重变化结果
Figure BDA0001624092560000081
分组 只数 治疗前体重(g) 治疗后体重(g) 增重(g)
实验组1 10 225.15±22.37** 259.15±21.05** 34.00±18.13**
实验组2 10 215.89±21.15* 259.68±18.05* 43.79±17.98*
实验组3 10 221.55±16.72** 245.64±17.46** 24.09±16.54**
实验组4 10 216.24±19.37** 250.41±21.29** 34.17±17.89**
实验组5 10 218.38±21.15* 285.71±19.82* 67.33±15.80*
模型对照组 10 210.55±18.62* 198.34±21.76* -12.21±18.96*
对照组 10 249.02±21.42 351.41±18.54 102.39±17.69
与对照组比较*P<0.05，与模型对照组比较**P<0.01
3.2大鼠血糖测试结果分析
治疗前，与对照组相比，模型对照组和实验组1-5大鼠血糖水平明显上升(P<0.05)，模型对照组和实验组1-5之间大鼠血糖变化不明显(P>0.05)；治疗后各组血糖总体有差异，模型对照组治疗前后血糖变化不明显(P>0.05)，实验组1-5大鼠血糖明显下降(P<0.05)，实验组1-4之间大鼠血糖变化无明显差异(P>0.05)，与实验组1-4相比，实验组5血糖控制效果明显(P<0.05)。
表2各组大鼠治疗前后血糖变化结果
Figure BDA0001624092560000082
Figure BDA0001624092560000083
Figure BDA0001624092560000091
与对照组比较*P<0.01，与模型对照组比较**P<0.05。
3.3大鼠尿蛋白测试结果分析
治疗后，与对照组相比，实验组1-4和模型对照组血BUN均显著升高(P<0.05)；与模型对照组相比，实验组1-5血BUN明显下降(P<0.05)，实验组1-4之间的血BUN无明显差异(P>0.05)，与实验组1-4相比，实验组5的血BUN下降明显(P<0.05)；
治疗后，与对照组相比，实验组1-4和模型对照组SCr均显著升高(P<0.05)；与模型对照组相比，实验组1-5的SCr均明显下降(P<0.05)，实验组1-4之间的SCr无明显差异(P>0.05)，与实验组1-4相比，实验组5的SCr下降明显(P<0.05)；
治疗后，与对照组相比，实验组1-4和模型对照组24h尿蛋白均显著升高(P<0.05)，与模型对照组相比，实验组1-5的24h尿蛋白均明显下降(P<0.05)，实验组1-4之间的24h尿蛋白无明显差异(P>0.05)，与实验组1-4相比，实验组5的24h尿蛋白下降明显(P<0.05)。
表3各组大鼠BUN、SCr、24h尿蛋白结果
Figure BDA0001624092560000092
Figure BDA0001624092560000101
与模型对照组比较**P<0.05，与对照组比较*P<0.05。
由上述实验可以看出，本发明实施例1-5天然药物组合物对应的实验组1-5能够降低糖尿病肾病大鼠病理损害，延缓疾病的进展，且从实验结果可以看出实验组5的治疗效果明显优于实验组1-4，能够显著控制血糖，保护肾脏。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (5)

1.一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其特征在于，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物15-40份、当归提取物10-35份、车前子提取物12-26份、仙茅提取物5-8份；
上述天然药物组合物的制备方法包括以下步骤：
S1、分别制备头花蓼提取物、车前子提取物和仙茅提取物；
将头花蓼全草粉碎，以乙醇水溶液为提取剂进行超声提取，提取液抽滤，收集滤液，残渣重复超声提取2-3次，合并滤液，得到粗提液；80℃减压浓缩后，加入乙醇醇沉，抽滤，沉淀物分别用90％的乙醇和丙酮洗涤，真空干燥后得到头花蓼提取物；
车前子提取物和仙茅提取物的制备方法与头花蓼提取物的制备方法相同，区别在于将头花蓼提取物替换为车前子提取物或仙茅提取物；
S2、制备当归提取物；
将干燥的当归粉碎制成当归粉，将4倍的去离子水加入当归粉中，然后加热至60-70℃，浸提6h，过滤，分别收集滤液一和残渣；往残渣中加入HAc-NaAc缓冲溶液，然后加入相当于滤渣重量1％的果胶酶，置于100℃保温2h，冷却、过滤收集滤液二；将滤液一和滤液二混合后得当归提取物；
S3、将步骤S1制备得到的头花蓼提取物、车前子提取物和仙茅提取物以及步骤S2制备的当归提取物按照重量份配比混合均匀，得到用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物。
2.如权利要求1所述的一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其特征在于，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物33份、当归提取物25份、车前子提取物18份、仙茅提取物7份。
3.如权利要求1所述的一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其特征在于，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物29份、当归提取物20份、车前子提取物24份、仙茅提取物6份。
4.如权利要求1所述的一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其特征在于，其制备原料由以下重量份数的组分组成：头花蓼提取物28份、当归提取物33份、车前子提取物25份、仙茅提取物5份。
5.如权利要求1所述的一种用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，其特征在于：所述步骤S3得到用于治疗糖尿病肾病的天然药物组合物，按照中成药常规技术制成溶液剂、片剂、丸剂、颗粒剂、冲剂或者胶囊。
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