CN103006822B - 西洋参组合物在防治酒精性肝损伤的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种具有防治酒精性肝损伤的中药组合物，该组合物由活性成份和医学上可接受的辅料组成，其中所述的活性成份由西洋参、积雪草、丹参、枳椇子等原料制成。该组合物经药效学实验证明，对酒精所致急、慢性肝损伤都具有很好的防治作用，并能提高机体免疫能力。可制成具有解酒、保肝作用的药物或保健食品。

Description

西洋参组合物在防治酒精性肝损伤的药物中的应用

技术领域

本发明属医药和食品领域，是一种具有防治酒精性肝损伤等相关疾病的天然产物的组合物。 

背景技术

目前酒精的滥用已经成为世界性的危害，它不仅是药源性疾病的病因，也是危害人们生活的重要因素。长期大量饮酒对人体消化、循环、神经等系统有严重危害，尤其对肝脏有直接毒害作用。 

酒精性肝损伤是指由于过量摄入酒精而导致的肝脏损害等一系列病变，可以分为急性酒精性肝损伤和慢性酒精性肝损伤。急性酒精性肝损伤是指由于一次摄入过量酒精而造成肝功能损害，表现为食欲不振、恶心、肝部不适、黄疸等类急性肝炎症状。慢性酒精性肝损伤是由于长期摄入酒精而导致肝纤维化、变性、坏死和免疫功能遭到破坏，常表现为酒精性脂肪肝、酒精性肝炎以及酒精性肝硬化。目前上市的治疗酒精性肝损伤的药物主要有抗氧化剂、抗内毒素药物、糖皮质激素和改善乙醇代谢的药物等。这些药物仅对急性酒精性肝损伤和慢性酒精性肝损伤初期有一定的治疗效果，酒精性肝损伤患者一旦进入中后期，免疫机能快速下降，肝功能受损严重，只有通过肝移植才能显著改善症状和增加生存率。总而言之，现代医学对于治疗急慢性酒精性肝损伤并无一特效良药。因此研究一种可以防治酒精性肝损伤的药物或保健食品有着较大的社会效益和广阔的发展前景。 

本发明就是从天然植物中提取的一种具有防治酒精性肝损伤的中药组合物。该组合物是由有效成分创新组合成天然产物组合物，分别从不同机制入手治疗酒精性肝损伤，多成分多靶点协同作用，达到长短结合，标本兼治的效果， 以期从疗效和安全性上有显著的突破和提高。 

西洋参为五加科植物西洋参Panax quinquefolium L.的干燥根。别名为西洋人参、西参、洋参、花旗参。具有补气养阴、清热生津功效。用于气虚阴亏、内热、咳喘痰血、虚热烦倦、消渴、口燥咽干等症。具有抗疲劳、抗氧化、抗应激、抑制血小板聚集、降低血液凝固性的作用，另外，对糖尿病患者还有调节血糖的作用。《本草求原》记载西洋参具有清肺肾、凉心脾以降火、消暑、解酒的功效。西洋参含有十余种人参皂苷、少量挥发油、糖类、氨基酸、无机元素等。现代研究表明西洋参具有保肝作用，主要表现在以下几个方面：洋参茎叶总皂苷可通过降低血清中丙氨酸转氨酶的活性，使肝糖原含量和谷胱甘肽过氧化酶活性升高、丙二醛含量降低，从而减轻四氯化碳所致的肝损伤；西洋参的有效成分人参皂苷Ro能抗肝炎，对肝损伤有保护作用；西洋参多糖对D-氨基酸半乳糖所致的肝损伤具有明显的保护作用，其作用机制是稳定和加强肝细胞膜、保护肝细胞线粒体及维持肝组织cAMP/cGMP比值的相对稳定。动物实验证实，西洋参总皂苷和其总提取物能降低豚鼠的肝糖原含量，增加肝脏DNA和RNA的含量；西洋参能明显降低乙醇所致的血清谷氨酸转氨酶升高，能够提高乙醇所致血清及肝中谷胱甘肽过氧化物酶活性，抑制过氧化产物丙二醛的生长，从而起到保护肝脏的作用。  

积雪草是伞形科植物积雪草Centella asiatica Linn.的全草，别名有崩大碗、缺碗草、马蹄草、雷公根等。始载于《神农本草经》，列为中品，苦、辛、寒，归肝、脾、肾经，具有清热利湿、解毒消肿的功效。用于湿热黄疸、中暑腹泻、砂淋血淋、痈肿疮毒、跌打损伤等。我国民间常用于治疗感冒、扁桃腺炎、传染性肝炎、痢疾、跌打损伤、疔疮肿毒、流行性脑脊髓膜炎等。《岭南草药志》记载，崩大碗每次约八两至一斤，煎水服，用于治肝脏肿大。《江西民间草药》 记载积雪草一两，冰糖一两，水煎服，用于治湿热黄疸。《广东中药》Ⅱ记载，积雪草具有清暑热、去湿热、治肝肿大等作用。积雪草的有效成分为积雪草总皂苷、积雪草酸、羟基积雪草酸等。近年研究报道积雪草有促进伤口愈合、软化疤痕、抗牛皮癣、抗抑郁、抗乳腺增生、抗肝纤维化、抗癌、治疗水肿、保肝、降血糖等作用。王胜浩等发明专利（公开号：CN100441201C）报道了积雪草总苷具有治疗外伤、手术创伤、烧伤、疤痕疙瘩及硬皮病及抗抑郁和治疗肝肾纤维化作用。国内专利公开了积雪草酸及衍生物有治疗皮肤创伤、抗抑郁、抗阿尔茨海默病以及保肝、保护心脑血管和诱导肿瘤细胞调亡等多种作用（CN1238692、CN1248918、CN1543964及CN1582946）。积雪草酸还有治疗肝纤维化、肺纤维化作用（专利申请号：200610122561.4、200610118041.6）。李洪钟研究表明羟基积雪草苷对小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用。张丽娜研究表明积雪草苷对小鼠脓毒症致急性肝损伤具有明显的保护作用。 

丹参是唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎，具有活血祛瘀、安神宁心、止痛等功效。丹参素、丹参酮是其主要药理成份。现代药理研究表明，丹参是天然的抗氧化剂，具有清除毒性自由基、抑制正常及损伤肝细胞脂质过氧化的作用。丹参素、丹参酮对四氯化碳和D-氨基半乳糖诱导的小鼠急性肝损伤和四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化有保护作用。南京医科大学李菁等的试验证明，丹参素能使正常肝细胞增殖，能清除活性氧自由基，增强肝细胞SOD活力，抑制膜的脂质过氧化反应，减轻肝细胞变性坏死。白求恩医科大学叶红军等人的研究显示，丹参能减轻肝细胞坏死、脂肪变性，促进肝细胞再生，改善肝脾血液循环及减轻其淤血及缺血状态作用均优于辅酶Q10。辽宁中医学院附属医院吴百灵研究表明，丹参可抑制ALT、AST酶活性增高，其作用是因为丹参具有显著的抗脂质过氧化作用。山西医科大学郑晓宾等人的研究证明了 丹参防治实验性肝损伤的途径之一可能是减少了TNF-α的释放，降低了TNF-α的毒性而发挥作用。南京铁道医学院附属医院的刘怡晟等人研究表明，丹参对CCl₄所致肝损伤有明显的保护作用，能明显降低血清ALT、血清和肝匀浆MDA以及肝细胞的钙含量，也能减少血清及肝组织SOD活力的下降，肝组织病理病变明显减轻，同时发现丹参能明显降低血清TNF-α，表明丹参的作用机制是通过减轻肝细胞膜脂质过氧化，保持自由基清除能力，减轻钙超载，同时抑制TNF-α的释放，加速其灭活。 

枳椇子为鼠李科植物枳椇Hovenia dulcis Thunb.的带有肉质果柄的果实或种子。别名拐枣、鸡爪树、鸡脚爪、万字果、万寿果、桔扭子等。具有止渴除烦、清湿热、解酒毒的功效。用于中酒毒、烦渴呕逆、二便不利。枳椇子中含有大量的葡萄糖、有机酸，既能扩充人体的血容量，又能解酒毒，故有醒酒安神的作用。《滇南本草》中记载：枳椇子治一切左瘫右痪，风湿麻木，能解酒毒。在中医上，其种子、木质入药，有清热、利尿、解酒毒之功效。古书中对其解酒毒，有很多趣闻记载。陆玑《疏义》云：“……昔有南人修舍用此木，误落一片入酒瓮中，酒化为水也”。元代《本草衍义补遗》中记有：“一男子年三十余，因饮酒发热，又兼房劳虚乏。乃服补气血之药，加葛根以解酒毒。微汗出，人反懈怠，热如故。此乃气血虚，不禁葛根之散也。必须枳椇子解其毒，遂煎药中加而服之，乃愈”。《本草纲目》中也记有：“枳椇，《本草》只言木能败酒，而丹溪朱氏治酒病往往用其实，其功当亦同也。现代药理研究表明，枳椇子具有加快乙醇代谢的作用；增强乙醇脱氢酶活性；嵇扬等报道枳椇子水提取液能缩短小鼠醒酒时间；从枳椇子中分得的二氢黄酮抑制乙醇诱导的肌松作用；枳椇子水提物可显著抑制乙醇和LPS引起的MDA、TG及 TC升高；枳椇子匀浆液能显著降低血清中MDA含量，并呈明显量效关系；枳椇子匀浆液 能显著增加小鼠肝、脑组织中SOD含量；枳椇子水提取液预先灌胃给药能阻止乙醇所致的小鼠肝脏 MDA升高和GSH下降，并能对抗乙醇所致的胆固醇、甘油三酯增高，提示其对酒精所致小鼠肝脏脂质过氧化具保护作用，有可能延缓和防止乙醇所致的脂肪肝形成；施震研究表明枳椇子具有抗早期肝纤维化作用；嵇扬等研究枳椇子水提取液对肝细胞无明显损害。  

综上所述，西洋参、积雪草、丹参、枳椇子四味药合用以不同的药效物质基础从不同的作用靶点和途径预防和治疗酒精性肝损伤。因此该组合物可用于制备具有防治酒精性肝损伤的药品和保健品。 

发明内容

本发明提供一种具有养阴清热、利湿解毒、通络止痛之功效，用于防治酒精性肝损伤的药物组合物。 

本发明人经过反复试验，优选了西洋参、积雪草、丹参、枳椇子等四种卫生部规定的既是食品又是药品和可用于保健食品的原料进行科学组方，组合物非常安全、无毒副作用。本组合物可用来制备具有防治酒精性肝损伤的药品或保健食品。在选取本发明药品或保健食品的各原料进行组合时，主要考虑到每种原料可以从不同角度防治酒精性肝损伤以及将它们进行组合后所能产生的协同作用。本组合物与目前在欧美、日本畅销的解酒剂具有明显的不同，后者一般均添加止痛剂、兴奋剂、维生素和矿物质等，只能暂时缓解醉酒引起的症状，但对于酒精引起的肝损伤并没有确切的疗效。与目前上市的护肝解酒类保健食品相比较而言，本组合物具有保肝活性更确切、物质基础更清楚的特点，这是本发明的突出贡献。 

本组合物中包含了大量具有抗肝炎、抗肝纤维化、对肝损伤具有保护作用、加快乙醇代谢、增强乙醇脱氢酶活性、降低转氨酶活性、降低血清胆红素含量、 降低血清TC和TG含量、减少肝细胞坏死、清除氧自由基等活性的化学成分，这些成分相互协同、多靶点从酒精性肝损伤的病理机制入手全面调节肝损伤机体，通过降低血液中乙醇浓度、消除酒后体内产生的过量自由基、阻碍过氧化脂质形成，起到对肝损伤的保护作用。 

本组方符合中医理论。《内经》云：“肝苦急，急食甘以缓之。肝欲散，急食辛以散之，用甘补之，酸泻之”。其指出了辛、甘、酸三味与肝病的重要关系。西洋参性凉，甘、微苦。归心、肺、肾经。具有补气养阴、清热生津功效。 

积雪草性寒，苦、辛。归肝、脾、肾经。具有清热利湿、解毒消肿功效。丹参性微寒，味苦。归心、肝经。具有活血祛瘀、安神宁心、止痛等功效。枳椇子性平，味甘、酸。归脾经。具有止渴除烦、清湿热、解酒毒的功效。四药合用，共奏解酒保肝之曲。 

本发明的关键技术在于从天然植物西洋参、积雪草、丹参、枳椇子中提取具有防治酒精性肝损伤作用的活性组分，制备天然产物组合物。 

本发明提供了一种具有防治酒精性肝损伤的中药制成的组合物，该组合物包括西洋参50-200份、积雪草150-500份、丹参100-400份、枳椇子100-300份。优选西洋参50份、积雪草200份、丹参150份、枳椇子150份。也可由以上四味药材经过提取制成的组合物组成，西洋参10-50份、积雪草提取物25-150份、丹参提取物20-100份、枳椇子提取物15-100份。按照上述比例混合组成活性成分与药用辅料制成。 

本发明的另一目的是提供了本组合物的制备方法： 

（1）西洋参粉碎，过80目筛，备用； 

（2）积雪草和枳椇子用8-15倍去离子水提取2-3次，每次1-3 小时，过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎，即得水提取物； 

（3）丹参用8-15倍50％-95％的乙醇溶液提取2-3次，每次1-3 小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎，即得乙醇提取物；（4）将西洋参细粉、丹参乙醇提取物、积雪草和枳椇子水提取物混合后，再与药用辅料一起混合，按常规方法制成口服制剂。 

由于本发明首次公开了由西洋参、积雪草、丹参、枳椇子组成的组合物具有防治酒精性肝损伤的作用，因此，将本组合物单独或与其它活性组份或辅料配合制成药剂，只要是该药剂用于预防和治疗酒精性肝损伤，均属于本发明的保护范围。本发明的组合物在制成任何一种剂型时，均具有预防和治疗酒精性肝损伤的作用。 

由西洋参、积雪草、丹参、枳椇子组成的组合物（简称组合物）通过以下药效学实验证实具有防治酒精性肝损伤作用。 

1. 本组合物对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用 

昆明种小鼠60只按体重随机分为正常组，模型组，组合物低、中、高剂量组（200、400、800mg/kg）和联苯双酯片阳性对照组（60mg/kg）。6组分别灌胃给药，模型组和正常组灌胃等体积蒸馏水。每天灌胃1次，共计14天。末次给药后禁食不禁水12小时，除正常组灌胃等体积蒸馏水外，其它5组动物分别灌胃50%乙醇（12ml/kg），6小时后摘除眼球取血，按试剂盒，测定血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）含量。剖腹取肝，称重，测定肝脏指数；取肝脏组织约0.3g精密称定，剪碎后加入9倍0.9%氯化钠溶液，冰浴中制备肝匀浆，3500r/min离心15min，取上清液，按试剂盒测定肝匀浆中SOD、MDA的含量。试验结果以均数加减标准差表示，统计学处理方法采用组间t检验。结果见表1。 

表 1 组合物对急性酒精性肝损伤小鼠肝脏指数、血清ALT、AST以及肝脏SOD、MDA的影响（X+s，n=10） 

与空白对照组比较：^△p<0.05，^△△p<0.01，^△△△p<0.001；与模型组比较： ^*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。 

由表1可知，给小鼠灌胃酒精可使小鼠肝脏指数显著增加，使小鼠血清ALT、AST显著增加，同时能引起小鼠肝脏MDA含量显著增加、SOD活性显著降低，表明小鼠急性肝损伤模型造模成功。灌胃本组合物可显著降低酒精损伤小鼠的肝脏指数，可使酒精性肝损伤小鼠血清ALT、AST显著降低，量效关系明显。灌胃本组合物能显著降低酒精性肝损伤小鼠肝脏MDA含量，显著升高SOD活性。阳性对照药联苯双酯可使模型小鼠血清ALT、AST显著降低，显著降低小鼠肝脏指数，同时能显著降低模型小鼠肝脏MDA含量、升高SOD活性。 

2.本组合物对大鼠酒精性脂肪肝的改善作用 

大鼠90只，适应环境1周后，按体重随机分为6组，分别为正常对照组，模型组，组合物高、中、低三个剂量组，联苯双酯阳性对照组。每组15只大鼠。正常组用蒸馏水灌胃，进食普通饲料，自由饮水。其余各组用体积分数56%的北京二锅头灌胃，体积分数从30%逐渐升至 56%，梯度为每周升高5%，于第6 

周直接升至 56%，并持续至第8周，同时喂饲高脂饲料（由1.5%胆固醇、0.5%胆盐、10%猪油和 88%基础饲料制成），自由饮水。大鼠造模的同时各组分别给予相应药物灌胃，组合物高、中、低剂量组分别按100、200、400mg/kg灌服本组合物，阳性对照组按30mg/kg灌服联苯双酯片，正常组和模型组灌服蒸馏水， 

1次/d，每次用药体积均按1mL / 100g计算，持续8周。实验8周末，于最后1次给药后禁食12h。各组大鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，低温离心，分离血清，备用。在半自动生化分析仪上测定 TC、TG、AST、ALT 的 含量或活性。取血后迅速剖取肝脏，取适量肝组织用冰生理盐水冲洗，滤纸吸湿后，称取质量约0.3g，加入预冷的生理盐水，冰水中制成 10%匀浆，4℃，4000r/min 离心10min，提取上清液，备用。血清和肝组织 SOD和MDA 的测定：SOD 的检测采用黄嘌呤氧化酶法、MDA 的检测采用硫代巴比妥酸（TBA）比色分析法，严格按试剂盒说明书检测。试验结果以均数加减标准差表示，统计学处理方法采用组间t检验。结果见表2、3。 

表2  组合物对酒精性脂肪肝大鼠血清中TC、TG、ALT、AST的影响（X+s，n=15） 

与空白对照组比较：^△p<0.05，^△△p<0.01，^△△△p<0.001；与模型组比较： ^*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。 

由表2可知，与正常对照组比较，模型组大鼠血清 TC、TG、ALT、AST 的含量异常升高（P＜0.01或P＜0.001），表明大鼠已经形成酒精性脂肪肝。本组合物高、中、低剂量组和阳性对照组均能显著降低酒精性脂肪肝大鼠血清TC和TG的含量（P＜0.01或P＜0.05）；本组合物高、中剂量组能显著降低酒精性脂肪肝大鼠血清ALT和AST的活性，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.001）。表明本组合物对酒精所致脂肪肝有很好的保护作用。 

表3  组合物对酒精性脂肪肝大鼠血清和肝组织中SOD活性和MDA含量的影响（X+s，n=15） 

与空白对照组比较：^△p<0.05，^△△p<0.01，^△△△p<0.001；与模型组比较： ^*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。 

与正常对照组比较，模型组大鼠血清、肝组织中 SOD 活性均较正常组明显降低（P＜0.05）、MDA含量均较正常组升高（P＜0.05或 0.01）。本组合物高、 中两个剂量组动物血清、肝组织中SOD活性均高于模型组对照组；本组合物高、中、低三个剂量组血清、肝组织中MDA含量均低于模型组（P＜0.05或 0.01）。表明本发明组合物对酒精所致脂肪肝有很好的改善作用。 

通过以上药效学实验可知，本发明组合物具有防治酒精性肝损伤和酒精性脂肪肝的作用，并且长期服用没有毒副作用。 

具体实施方式

下面的实施例可进一步说明本发明，但不意味着本发明仅限于此。 

实施例1（胶囊剂）: 

（1）将西洋参100g粉碎，过80目筛，备用； 

（2）积雪草400g、枳椇子300g两味中药用10倍去离子水提取3次，每次2小时，过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎，即得水提取物； 

（3）丹参300g用10倍80％的乙醇溶液提取2次，每次2小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎，即得乙醇提取物；（4）将西洋参细粉、丹参乙醇提取物、积雪草和枳椇子水提取物混合后，加入适量淀粉，混匀，制粒，干燥，整粒，装胶囊，制成1000粒，即得。每次2粒，每日3次。 

实施例2（片剂）: 

（1）将西洋参100g粉碎，过80目筛，备用； 

（2）积雪草400g、枳椇子300g两味中药用10倍去离子水提取3次，每次2小时，过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎，即得水提取物； 

（3）丹参300g用10倍80％的乙醇溶液提取2次，每次2小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎，即得乙醇提取物；（4）将西洋参细粉、丹参乙醇提取物、积雪草和枳椇子水提取物混合后，加入适量淀粉，混匀，制粒，干燥，整粒，压片，制成1000片，即得。每次2片，每日3次。  

Claims (6)

1.一种具有防治酒精性肝损伤的中药组合物，其特征在于它是由下述重量份的原料制成：

西洋参50-200份       积雪草150-500份

丹参100-400份        枳椇子100-300份。

2.根据权利要求1所述的具有防治酒精性肝损伤的中药组合物，其特征在于，它是由下述重量份的原料制成：

西洋参50份        积雪草200份

丹参150份         枳椇子150份。

3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于每种原料均可被其提取物代替，提取物的组成重量比为：

西洋参提取物10-50份     积雪草提取物25-150份

丹参提取物20-100份      枳椇子提取物15-100份。

4.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于：所述中药组合物的制备方法包括以下步骤：

（1）西洋参粉碎，过80目筛，备用；

（2）积雪草和枳椇子用8-15倍去离子水，提取2-3次，每次1-3小时，过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎，即得水提取物；

（3）丹参用8-15倍50％-95％的乙醇溶液，提取2-3次，每次1-3小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎，即得乙醇提取物；

（4）将西洋参细粉、丹参乙醇提取物、积雪草和枳椇子水提取物混合后，再与药用辅料一起混合，按常规方法制成口服制剂。

5.根据权利要求1所述一种具有防治酒精性肝损伤的中药组合物，其特征在于：它是硬胶囊、软胶囊、片剂、颗粒剂、散剂、丸剂、袋泡茶中的一种或多种。

6.根据权利要求1所述的中药组合物在制备对酒精性肝损伤辅助治疗作用的保健品中的应用。