CN105747232A - 一种多糖组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及食品或保健品领域，尤其涉及一种多糖组合物及其应用。本发明将香菇多糖、茯苓多糖、银耳多糖进行复配，所得组合物能够显著提高流感病毒感染小鼠的存活率和生存质量，改善流感病毒感染小鼠的肺炎性病变程度，并可显著改善流感病毒感染小鼠血清中特异性抗体水平，显著降低流感病毒感染小鼠肺部病毒含量以及改善肺部细胞因子IL?2、IL?5水平。与现有疫苗或单一多糖相比，本发明提供的多糖组合物对流感病毒感染小鼠的保护作用更加显著。
Description
技术领域
本发明涉及食品或保健品领域，尤其涉及一种多糖组合物及其应用。
背景技术
季节性流感(简称流感)是由流感病毒引起的一种常见的急性呼吸道传染病，在人群中常年流行，人群普遍具有抵抗力，一般病情较轻，病死率低。老人、儿童或伴有某些基础疾病或体质虚弱者患流感后容易发生严重的并发症，例如肺炎、支气管炎、充血性心力衰竭、肠胃炎、晕厥、出现幻觉等，后果十分严重，有时甚至引起死亡。据世界卫生组织的统计，季节性流感的流行每年都会造成300～500万例严重病例，并导致25～50万人死亡。
2009年初，墨西哥开始出现呼吸道疾病疫情，一种新型人类甲型流感病毒，即甲型H1N1流感病毒，后被证实该病毒是由新型猪源性流感病毒A(H1N1)-(S-OIV)所引起，称为“人感染猪流感”，随着研究的逐步深入及对该疾病的不断认知，世界卫生组织(WHO)将其更名为“甲型H1N1流感”，同时把这一病毒的流行定义为国际性的公共卫生事件。相比于季节性流感病毒，类似于甲型H1N1流感病毒、H7N9流感病毒等爆发型流感病毒具备更大的危害性，可能引起全球性的大恐慌。
多糖(polysaccharide)是由多个单糖分子缩合、失水而成，是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。多糖是一种免疫调节剂，许多天然来源的植物多糖对免疫系统都有调节作用，而人体免疫系统则与抗病毒感染存在密切联系。首先，机体95％以上的病原体感染发生在黏膜或由黏膜入侵而致病，呼吸道黏膜不仅是流感病毒的感染部位，也是宿主防御病毒感染的部位。呼吸道黏膜上含有大量的免疫细胞和免疫分子，在抗病毒免疫防御中起着非常重的作用。其次，机体的免疫细胞，如：巨噬细胞、NK细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞等，以及细胞因子如IFN-γ、TNF-α等均在抗病毒感染中起着重要保护作用。所以，从中草药多糖中筛选具备抗病毒作用的活性物质具备一定的可行性。
现有研究表明，多糖具有显著的免疫调节作用，但是较少报道其抗病毒作用，多糖在抗病毒方面的应用价值亟待进一步的开发。
发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种多糖组合物及其应用；本发明提供的组合物具有良好的抗病毒作用。
本发明提供的多糖组合物，包括香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖；
其中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为(1～3)：(1～3)：(1～3)。
在本发明的实施例中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为(1～3)：(1～2)：(1～2)。
在本发明的实施例中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为(2～3)：1：1。
在本发明的实施例中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为(1～2)：1：1。
在本发明的实施例中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为1：(1～3)：(1～3)。
在一些实施例中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为1：1：1。
在一些实施例中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为1：3：3。
在一些实施例中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为3：1：1。
在一些实施例中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为1：3：1。
在一些实施例中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为1：2：3。
在一些实施例中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为2：1：3。
在一些实施例中，香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为3：2：1。
多糖在植物中的含量非常丰富，其易溶于水，通常采用水提醇沉的方法制备多糖。另外，现有技术中还通过超声波、微波、酶解等手段对植物中的多糖进行辅助提取。
香菇多糖是从香菇子实体中提取的多糖成分，临床与药理研究表明，香菇多糖具有抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用。
茯苓多糖是从多孔菌科真菌茯苓菌核中提取的多糖成分。具有免疫增强活性，可用于抗病毒、抗肿瘤，减轻放、化疗副作用，以及治疗慢性肝炎、 延缓衰老等。
银耳多糖是从银耳的子实体中提取得到的多糖成分，目前，临床上将银耳多糖用于肿瘤化疗或放疗所致的白细胞减少症和其他原因所致的白细胞减少症。此外还可用于治疗慢性支气管炎。
本发明将香菇多糖、茯苓多糖、银耳多糖进行复配，所得组合物能够显著提高流感病毒感染小鼠的存活率和生存质量，改善流感病毒感染小鼠的肺炎性病变程度，并可显著改善流感病毒感染小鼠血清中特异性抗体水平，显著降低流感病毒感染小鼠肺部病毒含量以及改善肺部细胞因子IL-2、IL-5水平。与现有疫苗或单一多糖相比，本发明提供的多糖组合物对流感病毒感染小鼠的保护作用更加显著。
本发明采用的香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖可为自制也可为市场购得，其实施接在本申请的保护范围之内。在本发明中，实验采用的香菇多糖、茯苓多糖、银耳多糖或多糖组合物由无限极(中国)有限公司提供。
本发明提供的多糖组合物在制备提高抗体和/或细胞因子含量的食品、药品和/或保健品中的应用。
T细胞按细胞因子产生的模式和生物学功能，有2种极不相同的亚群，分别称为Th1和Th2。Th1细胞主要分泌IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-β等细胞因子，通过促进细胞毒性T细胞(cytotoxicTcell，Tc)、自然杀伤细胞(naturalkillercell，NK)及巨噬细胞活化和增殖，介导与细胞毒及局部炎症有关的免疫应答，参与细胞免疫及迟发型超敏反应，在抗细胞内微生物感染和细胞免疫所引起的炎症反应中发挥重要作用。Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等细胞因子，其主要功能是刺激B细胞增殖，并产生抗体，参与体液免疫，在抗细胞外微生物或寄生虫感染免疫以及变态反应的发生中有一定作用。所以，IL-2、IL-5等细胞因子在机体抗病毒中发挥重要的保护作用。本发明发现，本发明提供的多糖组合物可以显著改善病毒感染小鼠IL-2、IL-5水平，表明多糖组合物能够通过调节机体T细胞分化水平，从而发挥抗病毒作用。
本发明提供的多糖组合物在制备抗流感病毒的食品、药品和/或保健品中的应用。
流行性感冒是由流感病毒引起的一种急性上呼吸道传染病，可造成急性肺损伤及严重并发症。研究表明，过度免疫应答是引起病理损伤的主要原因 之一。由于病毒感染后肺泡毛细血管充血，肺泡间隔扩大，间质水肿等导致肺脏体积变大，所以肺脏指数常作为评价抗病毒药效的重要指标。本实验发现，使用本发明提供的多糖组合物后，病毒感染小鼠的肺脏表面呈淡红色，无瘀斑、瘀点，无明显实变区，偶见个别肺叶有充血现象，肺脏指数相较于空白组和疫苗组均显著较低，表明多糖组合物具有改善病毒感染引起的肺损伤作用。
在本发明的实施例中，流感病毒为季节性流感病毒或甲型流感病毒。
作为优选，流感病毒为季节性流感病毒病毒(A/PR/8(H1N1))或甲型H1N1流感病毒(Mexican pandemic flu H1N1)。
本发明提供的多糖组合物抗流感病毒的人用剂量为0.1-1g/天，优选0.5-0.8g/天。
本发明还提供了一种抗流感病毒的食品、药品和/或保健品，其中包括本发明提供的多糖组合物。
本发明提供的抗流感病毒的食品中包括本发明提供的多糖组合物和食品上可接受的配料。
本发明提供的抗流感病毒的药品中包括本发明提供的多糖组合物和药学上可接受的辅料。
作为优选，药物为口服制剂。优选的，口服制剂的剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、汤剂、膏剂、露剂、口服液剂、滴丸剂或糖浆剂。
本发明提供的抗流感病毒的保健品中包括本发明提供的多糖组合物和保健品中可接受的辅料。
作为优选，保健品为口服制剂。优选的，口服制剂的剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、汤剂、膏剂、露剂、口服液剂、滴丸剂或糖浆剂。
本发明将香菇多糖、茯苓多糖、银耳多糖进行复配，所得组合物能够显著提高流感病毒感染小鼠的存活率和生存质量，改善流感病毒感染小鼠的肺炎性病变程度，并可显著改善流感病毒感染小鼠血清中特异性抗体水平，显著降低流感病毒感染小鼠肺部病毒含量以及改善肺部细胞因子IL-2、IL-5水平。与现有疫苗或单一多糖相比，本发明提供的多糖组合物对流感病毒感染小鼠的保护作用更加显著。
附图说明
图1 A/PR/8(H1N1)病毒感染后小鼠体重变化；
图2 Mexican pandemic flu H1N1病毒感染后小鼠体重变化。
具体实施方式
本发明提供了一种多糖组合物及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明采用的试剂、药物、动物或仪器皆为普通市售品，皆可于市场购得。
其中，香菇多糖、茯苓多糖、银耳多糖，市场上购买；
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1
香菇多糖10g、茯苓多糖10g、银耳多糖10g，混合制得多糖组合物1。
实施例2
香菇多糖10g、茯苓多糖30g、银耳多糖30g，混合制得多糖组合物2。
实施例3
香菇多糖30g、茯苓多糖10g、银耳多糖10g，混合制得多糖组合物3。
实施例4
香菇多糖10g、茯苓多糖30g、银耳多糖10g，混合制得多糖组合物4。
实施例5
香菇多糖10g、茯苓多糖20g、银耳多糖30g，混合制得多糖组合物5。
实施例6
香菇多糖20g、茯苓多糖10g、银耳多糖30g，混合制得多糖组合物6。
实施例7
香菇多糖30g、茯苓多糖20g、银耳多糖10g，混合制得多糖组合物7。
实验例1
1、实验动物
BALB/c小鼠，雌性，6～8周龄，体重18～22g。由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，许可证号：SCXK(京)2014-0004。饲养于华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，实验动物使用许可证号：HZAUMU2015-0006。
2、主要试剂
流感病毒小鼠肺适应株：A/PR/8(H1N1)，浓度为：104PFU/ml；Mexican pandemicflu H1N1，浓度为：104PFU/ml；
流感病毒疫苗：含104PFU/ml的灭活病毒以及等量混合的MF59佐剂；
流感病毒和疫苗均由华中农业大学农业微生物学国家重点实验室提供；
生理盐水，安徽环球药业股份有限公司。
3、供试样品
将香菇多糖、茯苓多糖、银耳多糖、实施例1～7制得的多糖组合物分别用生理盐水配制成20mg/mL的多糖溶液。灌胃剂量为200mg/kg(按小鼠体重100μl/10g)。
4、实验方法
采用Excel软件的随机数字功能，对BALB/c小鼠进行随机分组，分为空白组，疫苗组，香菇多糖组，茯苓多糖组，银耳多糖组，多糖组合物1(实施例1制得)，多糖组合物2(实施例2制得)、多糖组合物3(实施例3制得)、多糖组合物4(实施例4制得)、多糖组合物5(实施例5制得)、多糖组合物6(实施例6制得)、多糖组合物7(实施例7制得)；每组17只。分别按照下列方法操作：
空白组：生理盐水灌胃30天。
疫苗组：生理盐水灌胃30天，第10、25天，分别肌肉注射100μl流感病毒疫苗。
香菇多糖组，茯苓多糖组，银耳多糖组，多糖组合物1～7组：200mg/kg的多糖灌胃30天，第10、25天，分别肌肉注射100μl流感病毒疫苗(含104PFU/ml的灭活病毒以及等量混合的佐剂)。
第31天(第0天)，每组取3只小鼠，取血，取肺脏。
第32天，各组分别用50μL H1N1流感病毒滴鼻感染。
第33天到第46天(感染后的2周内)，每天称量受试小鼠的体重变化(表1)，观察小鼠的生存状态，统计死亡率(表2)。第46天(感染后的第14天)结束实验。
表1A/PR/8(H1N1)病毒感染后小鼠体重变化(n＝8，)
与疫苗组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；
表2A/PR/8(H1N1)病毒感染后各组小鼠存活率比较(n＝8)
如表1、2所示，空白组小鼠感染A/PR/8(H1N1)病毒后，2天内未出现明显异常症状，第3天开始出现呼吸急促，行动迟缓，毛发无光泽，饮食减少、消瘦等表现，第7日开始出现死亡，2周内共死亡5只。疫苗组小鼠未 出现明显的病态症状，饮食正常，毛色稍欠光泽，体重在起伏中略有下降，第10天小鼠死亡1只。各多糖组小鼠精神良好，行动灵活敏捷，毛发有光泽，呼吸正常，饮食正常，体重自然增长，七组均没有死亡。多糖组合物1对小鼠体重增长的作用效果显著优于疫苗组(P<0.05)。
表3Mexican pandemic flu H1N1病毒感染后小鼠体重变化(n＝8，x±S)
与疫苗组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；
表4Mexican pandemic flu H1N1病毒感染后各组小鼠存活率比较(n＝8)
如表3、4所示，空白组小鼠感染Mexican pandemic flu H1N1病毒后，第2天即开始出现呼吸急促，行动迟缓，毛发无光泽，饮食减少、消瘦等表现，第4日开始出现死亡，2周内共死亡6只。疫苗组小鼠未出现明显的病态症状， 饮食正常，毛色稍欠光泽，体重在起伏中略有下降，第10天小鼠死亡1只，2周内共死亡2只。各多糖组小鼠精神良好，行动灵活敏捷，毛发有光泽，呼吸正常，饮食正常，体重自然增长，其中茯苓多糖组在第13日小鼠死亡1只。其余各组均没有死亡。多糖组合物1、3、7对小鼠体重增长的作用效果显著优于疫苗组(P<0.05)。
实验例2
实验例1的受试小鼠经流感病毒滴鼻感染，
第35天(感染后的第3天)，每组取3只小鼠，取血、肺脏。
第38天(感染后的第6天)，每组取3只小鼠，取血、肺脏。
第46天(感染后的第14天)，称重后处死小鼠，取血、肺脏。
①取血方法：
小鼠经摘眼球取血，让血液自由滴入1.5ml离心管中，4℃静置2小时后3500rpm，10min，离心取血清，分装在200μl的PCR管中，-20℃冻存备用。ELISA法检测其中的抗体滴度(结果如表5、6)。
②取肺脏
小鼠处死前称重，无菌取出肺脏，称重，并冻存。计算肺脏指数(结果如表7、8)，公式为：肺脏指数＝肺重量(mg)/体重(g)。
加入一定量的PBS，用手工或匀浆器将肺组织匀浆充分，稀释计数法检测其中的病毒滴度(表9、10)。
将肺组织匀浆离心20min左右，收集上清液，按照小鼠细胞因子IL-2、IL-5ELISA试剂盒说明书操作，分别检测小鼠肺组织匀浆中细胞因子IL-2、IL-5的含量(表11、12)。
表5A/PR/8(H1N1)病毒感染前后小鼠血清中特异性抗体的变化(n＝3， )
注：与疫苗组比较，*P＜0.05；与香菇多糖组比较，#P＜0.05；与银耳多糖组比较，△P＜0.05；与茯苓多糖组比较，&P＜0.05；
如表5，在A/PR/8(H1N1)病毒感染前，空白组作为阴性对照，血清中不存在特异性抗体，各疫苗免疫组(单纯的疫苗组和多糖组)血清中的特异性抗体水平没有明显差异；病毒感染第3天开始，除空白组外，各组的特异性抗体增加，多糖组合物1组显著(p<0.05)高于单纯的疫苗组，空白组的抗体始终处于较低水平；
在感染后第6，与疫苗组相比，茯苓多糖及7组多糖组合组物均有显著性差异(P＜0.05)；与香菇多糖组、银耳多糖组、茯苓多糖组比较，多糖组合物1、3、6、7有显著性差异(P＜0.05)；
在感染后第14天，与疫苗组相比，茯苓多糖及7组多糖组合组物能够显著提高小鼠血清中特异性抗体含量(P＜0.05)；与香菇多糖组、银耳多糖组比较，7组多糖组合物均对小鼠血清中特异性抗体的提高存在显著性作用(P＜0.05)；与茯苓多糖组比较，给予多糖组合物1、3、7的小鼠血清中特异性抗体均有显著性增高(P＜0.05)；
上述结果提示，多糖组合物在改善A/PR/8(H1N1)病毒感染引起的抗体水平下降方面，功效显著优于单一多糖组，其中多糖组合物1、3、7效果更佳。
表6Mexican pandemic flu H1N1病毒感染前后小鼠血清中特异性抗体的变化(n＝3，)
注：与疫苗组比较，*P＜0.05；与香菇多糖组比较，#P＜0.05；与银耳多糖组比较，△P＜0.05；与茯苓多糖组比较，&P＜0.05；
如表6，在Mexican pandemic flu H1N1病毒感染前，空白组作为阴性对照，血清中不存在特异性抗体，各疫苗免疫组(单纯的疫苗组和多糖组)血清中的特异性抗体水平没有明显差异。病毒感染第3天开始，各组的特异性抗体显著增加，除香菇多糖组外，其余各组均显著高于单纯的疫苗组(P＜0.05)，空白组的抗体始终处于较低水平；与各单一多糖组比较，多糖组合物1、2、5、6抗体水平均显著升高(P＜0.05)；
在感染后第6、14天，与疫苗组相比，各多糖组抗体水平均显著升高(P＜0.05)；与各单一多糖组比较，各多糖组合物抗体水平均显著升高(P＜0.05)；
上述结果提示，各多糖组合物在改善Mexican pandemic flu H1N1病毒感染引起的抗体水平下降方面，功效显著优于单一多糖组。
表7A/PR/8(H1N1)病毒感染前后小鼠肺脏指数变化(n＝3，)
注：与疫苗组比较，*P＜0.05；与香菇多糖组比较，#P＜0.05；与银耳多糖组比较，△P＜0.05；与茯苓多糖组比较，&P＜0.05；
从形态学上观察，空白组感染小鼠，肺脏体积明显增大，整个肺部可见大片实变区，呈现暗红色外观。疫苗组小鼠，肺脏整体呈淡红色，病变程度较空白组明显减轻，可见部分暗红色肺实变病灶。多糖组感染小鼠，肺脏表面呈淡红色，无瘀斑、瘀点，无明显实变区，偶见个别肺叶有充血现象。
肺脏指数结果如表7所示，第3天开始，空白组小鼠肺脏指数显著增加，其他组相对稳定。相对于疫苗组，多糖组合物2、5、6表现出显著改善肺脏指数的作用(P＜0.05)。
感染后第6天，相对于疫苗组，各多糖组均表现出显著改善肺脏指数的作用(P＜0.05)；与香菇多糖组、银耳多糖组比较，各多糖组合物对小鼠肺脏指数的改善作用显著优于香菇多糖、银耳多糖(P＜0.05)；与茯苓多糖比较，多糖组合物1、3、6、7组小鼠肺脏指数显著降低(P＜0.05)；
感染后第14天，相对于疫苗组，各多糖组均表现出显著改善肺脏指数的作用(P＜0.05)；与各单一多糖组比较，7组多糖组合物均可降低小鼠肺脏指数(P＜0.05)；
上述结果提示，不同比例的多糖组合物在改善A/PR/8(H1N1)病毒感染引起的肺部损伤方面，功效均显著优于单一多糖。
表8Mexican pandemic flu H1N1病毒感染前后小鼠肺脏指数变化(n＝3,)
注：与疫苗组比较，*P＜0.05；与香菇多糖组比较，#P＜0.05；与银耳多糖组比较，△P＜0.05；与茯苓多糖组比较，&P＜0.05；
从形态学上观察，空白组感染小鼠，肺脏体积明显增大，整个肺部可见大片实变区，呈现暗红色外观。疫苗组小鼠，肺脏整体呈淡红色，病变程度较空白组明显减轻，可见部分暗红色肺实变病灶。多糖组感染小鼠，肺脏表面呈淡红色，无瘀斑、瘀点，无明显实变区，偶见个别肺叶有充血现象。
肺脏指数结果如表8所示，第3天开始，空白组小鼠肺脏指数显著增加，其他组相对稳定。
第6、14天，相对于疫苗组，各多糖组均表现出显著地降低肺脏指数的作用(P＜0.05)；与各单一多糖组比较，7种比例的多糖组合物组小鼠肺脏指数均显著低于单一多糖组(P＜0.05)；
上述结果提示，不同比例的多糖组合物在改善Mexican pandemic flu H1N1病毒感染引起的肺部损伤方面，功效均显著优于单一多糖。
表9A/PR/8(H1N1)病毒感染后小鼠肺部H1N1病毒含量的变化(n＝3,)
注：与疫苗组比较，*P＜0.05；
从表5中可以看到，A/PR/8(H1N1)病毒感染后第3天开始，空白组小鼠肺部A/PR/8(H1N1)病毒滴度达到很高的水平，而疫苗组及多糖组小鼠肺部的A/PR/8(H1N1)病毒滴度显著低于空白组(P＜0.05)，其中多糖组合物1、3、7组小鼠肺部的A/PR/8(H1N1)病毒滴度低于疫苗组(P＜0.05)；
感染后第6天，各多糖组合物组小鼠肺部A/PR/8(H1N1)病毒含量均显著低于疫苗组(P＜0.05)；与单一多糖组比较，7种多糖组合物均可显著性降 低小鼠肺部A/PR/8(H1N1)病毒含量(P＜0.05)。
感染后第14天，各多糖组小鼠肺部A/PR/8(H1N1)病毒含量均显著低于疫苗组(P＜0.05)；多糖组合物与单一多糖作用无显著性差异。
表10Mexican pandemic flu H1N1病毒感染后小鼠肺部H1N1病毒含量的变化(n＝3，)
注：与疫苗组比较，*P＜0.05；与香菇多糖组比较，#P＜0.05；与银耳多糖组比较，△P＜0.05；与茯苓多糖组比较，&P＜0.05；
从表10中可以看到，Mexican pandemic flu H1N1病毒感染后第3天开始，空白组的Mexican pandemic flu H1N1病毒滴度达到很高的水平，而疫苗组及多糖组Mexicanpandemic flu H1N1病毒滴度显著低于空白组(P＜0.05)，其中多糖组合物1、5组的Mexicanpandemic flu H1N1病毒滴度低于疫苗组(P＜0.05)；与单一多糖组比较，多糖组合物1表现出显著降低病毒滴度的作用(P＜0.05)。
感染后第6天，各多糖组合物组小鼠肺部Mexican pandemic flu H1N1病毒滴度显著低于疫苗组(P＜0.05)；与单一多糖组比较，各多糖组合物组小鼠肺部Mexican pandemicflu H1N1病毒含量均显著降低(P＜0.05)。
感染后第14天，各组肺部Mexican pandemic flu H1N1病毒含量均处于相对正常的水平，各多糖组小鼠Mexican pandemic flu H1N1病毒滴度均显著低于疫苗组(P＜0.05)；
表11A/PR/8(H1N1)病毒感染前后小鼠肺IL-2、IL-5含量的变化(n＝3, )
注：与疫苗组比较，*P＜0.05；与银耳多糖组比较，△P＜0.05；与茯苓多糖组比较，&P＜0.05；
小鼠感染A/PR/8(H1N1)病毒后，肺匀浆细胞因子的水平发生了明显变化，IL-2随着病毒感染时间的延长逐渐升高。由表11可知，在改善肺匀浆IL-2的水平方面，多糖组合物3、7组作用显著优于疫苗组和银耳多糖组(P＜0.05)，表明多糖组合物3、7可通过改善肺匀浆IL-2水平发挥抗病毒作用，并且其作用显著优于单一多糖组。
小鼠感染A/PR/8(H1N1)病毒后，肺部细胞因子IL-5随着病毒感染时间的延长逐渐升高。在病毒感染第3、6天，多糖组合物1、3、7组小鼠肺部 IL-5的水平与疫苗组比较有显著的升高；第14天，香菇多糖组及各多糖组合物组小鼠肺部IL-5水平与疫苗组比较有显著的升高；第6天开始，多糖组合物3、7的效果明显优于茯苓多糖。上述结果提示，香菇多糖、多糖组合物可以通过改善肺匀浆IL-5水平发挥抗病毒作用，其中部分多糖组合物的功效优于单一多糖。
表12Mexican pandemic flu H1N1病毒感染前后小鼠肺IL-2、IL-5含量的变化(n＝3，)
注：与疫苗组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与香菇多糖组比较，#P＜0.05；与茯苓多糖组比较，&P＜0.05；
小鼠感染Mexican pandemic flu H1N1病毒后，肺匀浆细胞因子的水平发生了明显变化，IL-2随着病毒感染时间的延长逐渐升高。由表12可知，在改善肺匀浆IL-2的水平方面，各多糖组的作用均显著优于疫苗组(P＜0.05)； 与香菇多糖组比较，多糖组合物6、7作用均显著优于香菇多糖。提示在改善肺匀浆IL-2水平方面，多糖组合物效果优于单一多糖。
小鼠感染Mexican pandemic flu H1N1病毒后，肺部细胞因子IL-5随着病毒感染时间的延长逐渐升高。在病毒感染第3天，各组均无显著性差异；第6天、第14天，银耳多糖组、多糖组合物6组、多糖组合物7组小鼠肺部IL-5水平与疫苗组比较有显著的升高；与香菇多糖、茯苓多糖比较，多糖组合物6组、多糖组合物7均显著优于香菇多糖、茯苓多糖。提示在改善肺匀浆IL-5水平方面，多糖组合物效果优于单一多糖。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种多糖组合物，其特征在于，包括香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖；
所述香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为(1～3)：(1～3)：(1～3)。
2.根据权利要求1所述的多糖组合物，其特征在于，所述香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为(1～3)：(1～2)：(1～2)。
3.根据权利要求1所述的多糖组合物，其特征在于，所述香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为(2～3)：1：1。
4.根据权利要求1所述的多糖组合物，其特征在于，所述香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为(1～2)：1：1。
5.根据权利要求1所述的多糖组合物，其特征在于，所述香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖的质量比为1：(1～3)：(1～3)。
6.权利要求1～5任一项所述的多糖组合物在制备提高抗体和/或细胞因子含量的食品、药品和/或保健品中的应用。
7.权利要求1～5任一项所述的多糖组合物在制备抗流感病毒的食品、药品和/或保健品中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述流感病毒为季节性流感病毒或甲型流感病毒。
9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述多糖组合物抗流感病毒的人用剂量为0.1-1g/天。
10.一种抗流感病毒的食品、药品和/或保健品，其特征在于，包括权利要求1～5任一项所述的多糖组合物。
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