CN105738462A - 末梢血中微量元素的检测方法 - Google Patents

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谌贺宽子
向玉珍
唐春燕
李慧源
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Abstract

本发明提供了一种末梢血中微量元素的检测方法，包括以下步骤：（1）清洁并消毒；（2）采集样本；（3）配制样本稀释液；（4）配制检测液；（5）检测微量元素浓度；其中，采集样本时采用专用采集管刮取采集，样本稀释液由含HNO3、曲拉通的储备液稀释得到，并应用电感耦合等离子体质谱仪检测样本中微量元素的浓度。该末梢血中微量元素的检测方法具有样本污染少、检测准确性高、样本保存时间长、所使用仪器精密度高的优点。

Description

末梢血中微量元素的检测方法
技术领域
本发明属于医学检测技术领域，尤其涉及一种末梢血中微量元素的检测方法，具体涉及一种用电感耦合等离子体质谱仪检测末梢血中微量元素的方法。
背景技术
现在医院末梢血的采集是采用毛细吸管虹吸的方法，然后把采集到的末梢血打入含稀释液的子弹头中进行检测，但是毛细吸管中含有较多的污染物，严重影响微量元素的检测结果；并且一般是在采样现场直接把末梢血进行稀释之后送检，导致样本的保存时间很短。另外，检测血液中的微量元素时，人体血液中含有的无机盐、矿物质等物质会对检测产生干扰，需要彻底去除，否则会造成检测结果不准确。
目前检测末梢血中的微量元素，一般是利用石墨炉原子吸收光谱法、钨舟无焰原子吸收光谱法来进行测定，但上述方法均存在准确性差、仪器精密度低、操作复杂等缺点。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种样本污染少、检测准确性高、样本保存时间长、所使用仪器精密度高的末梢血中微量元素的检测方法。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：
一种末梢血中微量元素的检测方法，包括以下步骤：
（1）清洁并消毒：采血部位用水清洁，用酒精消毒；
（2）采集样本：将所述步骤（1）中的采血部位用采血针刺破后，用采集管刮取末梢血样本；
（3）配制样本稀释液：配制HNO3、曲拉通的混合溶液，即得储备液，所述储备液中HNO3和曲拉通的体积浓度相等，所述储备液中HNO3的体积浓度为5%～15%；取所述储备液加水稀释，制得样本稀释液；
（4）配制检测液：分别取所述步骤（2）中采集的末梢血样本和所述步骤（3）中配制的样本稀释液混合，得到检测液；
（5）检测微量元素浓度：用电感耦合等离子体质谱仪检测所述步骤（4）中制得的检测液，根据不同微量元素的标准曲线得到所述末梢血样本中各微量元素的浓度。
进一步地，所述步骤（3）中样本稀释液由所述储备液加水稀释100倍得到。
上述的检测方法中，优选的，所述步骤（1）中用酒精消毒两次。
上述的检测方法中，优选的，所述步骤（2）中采集管的内壁上涂有抗凝剂，所述抗凝剂为肝素抗凝剂。
上述的检测方法中，优选的，所述步骤（2）中采集管的管口上设有斜面刮槽，所述斜面刮槽用于刮取末梢血样本。
上述的检测方法中，优选的，所述末梢血样本的刮取量不小于100μL。
上述的检测方法中，优选的，所述步骤（2）中采血部位用采血针刺破后流出的第一滴血用棉签拭去。
上述的检测方法中，优选的，所述步骤（2）中的采集管在刮取末梢血样本后冷藏，所述冷藏温度为2℃～8℃。
上述的检测方法中，优选的，所述步骤（5）中的标准曲线的建立方法为：配制若干种含末梢血中六种微量元素的标准溶液，所述不同标准溶液中同一种微量元素的标准浓度不同，用电感耦合等离子体质谱仪分别检测所述标准溶液，得到所述微量元素不同浓度时对应的响应值，建立所述微量元素的浓度-响应值标准曲线。
上述的检测方法中，优选的，所述标准溶液配制时用体积浓度为0.1%～0.5%的硝酸溶液定容。
上述的检测方法中，优选的，所述步骤（4）的检测液中末梢血样本与样本稀释液的体积比为1∶15～30。
进一步地，用电感耦合等离子体质谱仪检测所述步骤（4）中制得的检测液时，编辑检测方法，使所述电感耦合等离子体质谱仪可以同时检测末梢血中六种微量元素的浓度。
进一步地，所述末梢血中六种微量元素为镁、铁、铜、锌、铅、钙。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
1、本发明提供的末梢血中微量元素的检测方法中，采血部位采用纯水清洁后再用酒精消毒的方式，使末梢血样本污染率低，微量元素浓度检测准确性高。
2、本发明提供的末梢血中微量元素的检测方法中，采集血液样本时使用刮取式血液采集管并在使用血液样本时才进行稀释，减少了样本采集过程中的污染，提高结果的可靠性；延长了样本的保存时间，便于复查或加做其它检测项目。
3、本发明提供的末梢血中微量元素的检测方法中，样本稀释液中HNO3能够有效地破坏红细胞，曲拉通能够有效地使破碎的细胞成分悬浮起来，从而使检测液混合均匀。
4、本发明提供的末梢血中微量元素的检测方法中，使用电感耦合等离子体质谱仪检测末梢血样本中微量元素的浓度，通过相应检测方法的编辑、相应干扰方程的使用，能够实现同时检测六种微量元素，精密度高，提高了分析速度和检测能力，并能够去除血液中无机盐、矿物质等杂质的干扰，检测结果准确性高。
具体实施方式
以下结合具体优选的实施例对本发明作进一步描述，但并不因此而限制本发明的保护范围。
实施例
一种末梢血中微量元素的检测方法，包括以下步骤：
（1）清洁并消毒：采血部位用纯水清洁，用75%的酒精溶液消毒两次。
（2）采集样本：待上述采血部位自然风干后用采血针刺破，然后立即转动手指，使手指破口处朝下，让血液自行流出，或者用手指在离穿刺点较远处轻轻挤压使血液流出；将流出的第一滴血用洁净的消毒棉签轻轻拭去，随后流出的血液立即用末梢血采集管向下倾斜刮取进入管内，采血量要求不小于100μL，大致是3滴；上述采集管内壁上涂有肝素抗凝剂；采集管的管口上设有斜面刮槽，斜面刮槽用于刮取末梢血样本；将上述采集管在刮取末梢血样本后冷藏，尽量不要让采集管倾斜，冷藏温度为6℃。
（3）配制样本稀释液：用两只量筒分别量取100mLHNO3和100mL曲拉通，再往两只量筒中分别加入100mL去离子水，将上述两只量筒同时放入超声仪，设置超声温度为40℃，超声20min至充分溶解；在1000mL容量瓶中加入500mL去离子水，把上述两只量筒中的溶液分别加入到容量瓶中，再用去离子水定容至刻度，混匀，配制成HNO3、曲拉通的体积浓度分别为10%的储备液，放置在室温下（18℃～30℃）备用，有效期为半年。
吸取上述储备液4mL加入到400mL广口瓶中，加入超纯水定容，充分摇匀，制得样本稀释液，放置在室温下（18℃～30℃）。
（4）配制检测液：取上述步骤（3）中制得的样本稀释液380μL加入到放免管中，然后用加样枪取步骤（2）中采集的末梢血样本20μL加入到上述放免管中，并另取步骤（3）中制得的样本稀释液数次冲洗加样枪，直到枪头上面没有血液残留，所得冲洗液也加入到上述放免管中，震荡摇匀得到检测液。
（5）检测微量元素浓度：用电感耦合等离子体质谱仪检测上述步骤（4）中制得的检测液，编辑相应的检测方法，使电感耦合等离子体质谱仪可以同时检测末梢血中六种微量元素（镁、铁、铜、锌、铅、钙）的浓度；选择相应的干扰方程，如FOODORS干扰方程208：[208]*1+[207]*1+[206]*1，去除血液中无机盐、矿物质等杂质的干扰，把仪器的干扰也控制在一定范围内，根据不同微量元素的标准曲线得到上述末梢血样本中各微量元素的浓度。
另外，本实施例的末梢血中微量元素的检测方法中，标准曲线的建立方法如下：取5个已经校准的100mL容量瓶，配制5种含末梢血中六种微量元素的标准溶液，六种微量元素在每种标准溶液中的浓度如表1所示，定容时使用体积浓度为0.2%的硝酸溶液。不同标准溶液中同一种微量元素的标准浓度不同，用电感耦合等离子体质谱仪分别检测上述标准溶液，得到六种微量元素不同浓度时对应的响应值，建立微量元素的浓度-响应值标准曲线。
表1：标准溶液中六种微量元素的浓度

Claims (10)

1.一种末梢血中微量元素的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）清洁并消毒：采血部位用水清洁，用酒精消毒；
（2）采集样本：将所述步骤（1）中的采血部位用采血针刺破后，用采集管刮取末梢血样本；
（3）配制样本稀释液：配制HNO3、曲拉通的混合溶液，即得储备液，所述储备液中HNO3和曲拉通的体积浓度相等，所述储备液中HNO3的体积浓度为5%～15%；取所述储备液加水稀释，制得样本稀释液；
（4）配制检测液：分别取所述步骤（2）中采集的末梢血样本和所述步骤（3）中配制的样本稀释液混合，得到检测液；
（5）检测微量元素浓度：用电感耦合等离子体质谱仪检测所述步骤（4）中制得的检测液，根据不同微量元素的标准曲线得到所述末梢血样本中各微量元素的浓度。
2.根据权利要求1所述的末梢血中微量元素的检测方法，其特征在于，所述步骤（1）中用酒精消毒两次。
3.根据权利要求1所述的末梢血中微量元素的检测方法，其特征在于，所述步骤（2）中采集管的内壁上涂有抗凝剂，所述抗凝剂为肝素抗凝剂。
4.根据权利要求1或3所述的末梢血中微量元素的检测方法，其特征在于，所述步骤（2）中采集管的管口上设有斜面刮槽，所述斜面刮槽用于刮取末梢血样本。
5.根据权利要求1所述的末梢血中微量元素的检测方法，其特征在于，所述末梢血样本的刮取量不小于100μL。
6.根据权利要求1所述的末梢血中微量元素的检测方法，其特征在于，所述步骤（2）中采血部位用采血针刺破后流出的第一滴血用棉签拭去。
7.根据权利要求1所述的末梢血中微量元素的检测方法，其特征在于，将所述步骤（2）中的采集管在刮取末梢血样本后冷藏，所述冷藏温度为2℃～8℃。
8.根据权利要求1所述的末梢血中微量元素的检测方法，其特征在于，所述步骤（5）中的标准曲线的建立方法为：配制若干种含末梢血中六种微量元素的标准溶液，所述不同标准溶液中同一种微量元素的标准浓度不同，用电感耦合等离子体质谱仪分别检测所述标准溶液，得到所述微量元素不同浓度时对应的响应值，建立所述微量元素的浓度-响应值标准曲线。
9.根据权利要求8所述的末梢血中微量元素的检测方法，其特征在于，所述标准溶液配制时用体积浓度为0.1%～0.5%的硝酸溶液定容。
10.根据权利要求1所述的末梢血中微量元素的检测方法，其特征在于，所述步骤（4）的检测液中末梢血样本与样本稀释液的体积比为1∶15～30。
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