CN105732786B

CN105732786B - 水稻基因OsEIN2L及其应用

Info

Publication number: CN105732786B
Application number: CN201610292521.8A
Authority: CN
Inventors: 余四斌; 熊银; 肖雄峰; 袁志阳; 张超普
Original assignee: Huazhong Agricultural University
Current assignee: Huazhong Agricultural University
Priority date: 2016-05-05
Filing date: 2016-05-05
Publication date: 2019-09-10
Anticipated expiration: 2036-05-05
Also published as: CN105732786A

Abstract

本发明公开了水稻基因OsEIN2L及其应用，所述的水稻基因OsEIN2L其序列为SEQ ID NO.1所示，对应的cDNA序列为SEQ ID NO.2所示，编码的蛋白质为SEQ ID NO.3所示。通过抑制水稻中的OsEIN2L基因的表达，可获得中胚轴伸长的水稻品系。同时，申请人针对该基因设计了分子标记引物，CGTATATGCCCTCGTCTCGACT和AAAGCTCGTGCTATGCCCGTGC。该标记可以快速鉴定中胚轴长度的等位基因，辅助培育中胚轴变长的水稻新品系。

Description

水稻基因OsEIN2L及其应用

技术领域

本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及一种水稻基因OsEIN2L，同时还涉及一种水稻基因OsEIN2L的制备方法，还涉及该基因OsEIN2L的用途。

背景技术

水稻是我国和全世界的主要粮食作物，全世界约有22亿人以水稻为食，中国有60％的人口以水稻为食。水稻直播作为一种省时、省工、省力且高效的栽培技术正日益受到重视。但水稻直播由于出苗难、出苗整齐度不一致等问题，制约了直播稻的发展(朱德峰，1997)。中胚轴的伸长为幼苗出土提供了主要的源动力，但目前大多水稻品种由于中胚轴伸长较短，难以适应直播出苗。因此，调节水稻中胚轴长度、改善水稻出苗快速整齐出土的能力，对提高水稻直播技术的应用推广相当重要。

在单子叶植物中，上胚轴是指胚芽鞘到第一片真叶之间的部位，中胚轴是指盾片到胚芽鞘节之间的部分，下胚轴是指盾片以下与胚根连接的部位。水稻作为典型的单子叶植物，其下胚轴基本不伸长，当播种较浅时，其上胚轴和中胚轴都不伸长，种子的出土主要依靠胚芽鞘的伸长而钻出地面，而当播种较深时，水稻主要通过中胚轴的伸长为种子的出土提供源动力，同时将分蘖节提升到适宜的高度。研究表明，水稻的发芽成苗率受覆土深度的影响，覆土越深发芽率越低，而中胚轴长的品种在同一覆土深度下发芽率高于中胚轴短的材料(Lu Qing，2015)，且种子在深覆土的情况下出苗速度快、出苗整齐度一致。目前已有很多学者定位到影响水稻中胚轴伸长的遗传位点，但还没有分离克隆一个控制水稻中胚轴的基因。本发明分离克隆到一个水稻中胚轴伸长的基因OsEIN2L，应用该基因可以提高种子发芽出土能力，增加直播出苗的整齐一致性，有利于水稻种子直播等栽培技术的应用推广。

本发明在国内外未见报道，所在课题组也未公开发表涉及本发明内容的文章，本发明在国内外公众未知。

发明内容

本发明提供了一种水稻基因OsEIN2L，其序列为SEQ ID NO.1所示，对应的cDNA序列为SEQ ID NO.2所示，编码的蛋白质为SEQ ID NO.3所示。

本发明提供了一种水稻基因OsEIN2L的分子标记，利用该标记可以快速地鉴定有利基因型，培育新的水稻品系，该分子标记的引物为：CGTATATGCCCTCGTCTCGACT和AAAGCTCGTGCTATGCCCGTGC。

本发明提供了一种水稻基因OsEIN2L的分子标记引物在水稻育种中的应用，通过该标记引物对水稻品系或种质DNA进行扩增，可快速判定目标基因的存在。

一种水稻基因OsEIN2L在在水稻育种中的应用，该基因可以调控水稻中胚轴的伸长，同时不影响株高、抽穗期以及产量。

为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施：

一种水稻基因OsEIN2L，通过下述方式获得：

1.利用聚合酶链式反应(PCR)从水稻品种日本晴(中国公开品种)的BAC(OSJNBb0024B16)中扩增基因OsEIN2L，基因全长9713碱基对(bp)，其中包含3047bp启动子和6666bp基因全长(包含7个外显子，6个内含子和3‘UTR)，所述的基因的核苷酸序列为SEQ IDNO.I所示；该基因的编码序列(CDS)由3900个碱基组成，其核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示，编码1299个氨基酸，氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示。

一种水稻基因OsEIN2L的分子标记，所述的分子标记的引物为：CGTATATGCCCTCGTCTCGACT和AAAGCTCGTGCTATGCCCGTGC。

一种水稻基因OsEIN2L的分子标记引物在水稻育种中的应用，包括利用该引物对水稻种质DNA进行扩增，快速判定目标基因的存在，辅助选育中胚轴较长的新品系。

一种水稻基因OsEIN2L在水稻育种中的应用，通过干扰中胚轴较短的水稻品种中的OsEIN2L基因的表达，可制备中胚轴伸长的转基因品种。

本发明克服已有技术的不足，将水稻品种日本晴中OsEIN2L基因进行RNAi抑制，中胚轴伸长，将来源日本晴的OsEIN2L的等位基因导入到ZS97B，中胚轴显著变短，同时不影响ZS97B的单株产量。获得OsEIN2L的中花11阳性突变体，中胚轴显著增长。

本发明与其他技术相比，具有以下特点和效果：

1.本发明水稻基因OsEIN2L影响水稻中胚轴伸长，但不影响水稻的抽穗期、株高、一次枝梗、穗长、穗重、结实率和单株产量。

2.本发明开发创造了一个OsEIN2L的基因标记，该标记位于ATG上游968bp，引物序列为CGTATATGCCCTCGTCTCGACT和AAAGCTCGTGCTATGCCCGTGC，对215份水稻核心种质进行PCR扩增，籼稻的扩增片段小于粳稻。

3.本发明培育的品系OsEIN2LNIL^Nip抑制中胚轴的伸长，品系OsEIN2LNIL^ZS97促进水稻中胚轴的伸长。

4.本发明所产生的材料由于转入的遗传片段和基因均来源于水稻，能够直接应用于水稻育种。

附图说明

图1为一种抑制表达载体构建的示意图

将OsEIN2L基因的3‘UTR一段259bp大小片段连接到表达载体pDS1301上形成中间载体，再将同一段3‘UTR片段与中间载体反向连接形成抑制重组载体。

图2为一种抑制表达T0代转基因植株的阳性检测示意图。

胶图第一排为用抑制表达载体上的载体特异性引物PMCG1对T0代单株进行PCR检测的结果，胶图第二排为用抑制表达载体上的载体特异性引物PMCG2对T0代单株进行PCR检测的结果。第1泳道M为marker，编号1-30代表T0代单株。

图3一种抑制表达T0代转基因植株OsEIN2L的相对表达量检测示意图。

图4一种OsEIN2L的突变体阳性鉴定及表达量检测示意图。

胶图第一排为OsEIN2L突变体载体插入到基因组的边界特异性引物P1和P2对突变体T0代单株进行PCR检测的结果，胶图第二排为突变体载体上的特异性引物Pv和基因组边界引物P2对T0代突变体单株进行PCR检测的结果。第1泳道为marker，第2至第19泳道分别是M1-M18，第19泳道WT指野生型中花11，第20泳道CK为空白对照。

图5为一种OsEIN2L的突变体T0代表达量检测示意图。

图6为215份水稻核心种植种质的OsEIN2L的基因标记的琼脂糖跑胶检测示意图。

胶图共8排，每排的首尾泳道M是marker，剩余的泳道的样品与每排胶图下面的核心种质编号一一对应，其中145为ZS97B，146为Nip。

图7为一种OsEIN2L抑制表达转基因植株的T1代阳性家系和阴性家系的中胚轴长度的表现图。

其中R4-10、11、12、15为OsEIN2L相对表达量较低的家系，R4-3和Nip为OsEIN2L相对表达量较高的家系。

图8为一种OsEIN2L的杂合突变体分离出的阳性(+)、阴性(-)以及杂合(H)家系的中胚轴的平均长度比较图。

图9为核心种质按分子标记400IDall进行基因分型后，两类基因型的中胚轴长度比较图。图中A代表用400IDall鉴定后跑胶迁移速率较快的一类种质，B代表用400IDall鉴定后跑胶迁移速率较慢的一类种质。

具体实施方式

本发明通过以下详细的实施例给出。根据以下的描述和这些实施例，本领域技术人员可以确定本发明的基本特征，并且在不偏离本发明精神和范围的情况下，容许对本发明做出各种改变和修改，以使其适用各种用途和条件。

本发明实施例中的引物均由武汉擎科和上海生工合成，序列测序由上海生工完成，BAC抽提，RNA抽提，PCR及试剂配方参照J.萨姆布鲁克等，分子克隆实验指南，第三版，金冬雁等(译)，科学出版社，2002。

实施例1：

基因OsEIN2L的克隆：

挑取水稻品种日本晴(Nip)的BAC(OSJNBb0024B16)，用含1‰氯霉素的LB培养基进行扩繁，抽取BAC质粒，以BAC质粒为模板，分别用引物(引物序列为CATGATTACGAATTCGAGCTACGGATAAAGTATTTGATACTCCC和AACTCATGAAGGAACTATGGTGCAGAATTCATACTCAAAAC)和引物(引物序列为GGATCCCCGGGTACCGAGCTAGTGGAGATTTCAGAAAGCC和CCATAGTTCCTTCATGAGTTCCTCTGAATGCCTTCTGCAGATGTTC由武汉擎科合成)进行聚合酶链式反应(PCR)，PCR程序：94℃：2min，28个循环(94℃：15s，68℃：4min)，将得到的两个PCR产物1比1混合作为模板，再用引物(引物序列为CATGATTACGAATTCGAGCTACGGATAAAGTATTTGATACTCCC和GGATCCCCGGGTACCGAGCTAGTGGAGATTTCAGAAAGCC)进行新一轮PCR，程序为：94℃：2min，25个循环(94℃：15s，68℃：5min30s)，扩增产物测序，得到基因OsEIN2L的核苷酸序列。它由9713个核苷酸组成，所示的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。抽取发芽3d的幼苗RNA，反转录成cDNA，用引物(cggggtaccGGGTTTGATTAGACTGCTTGA和tgctctagaTTGTCCTGCAGATGTCTTGT)进行聚合酶链式反应，PCR产物测序得到OsEIN2L的编码序列(CDS)，由3900个碱基组成，其序列为核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示，利用(http://web.expasy.org/translate/)对编码序列CDS进行氨基酸翻译，获得OsEIN2L的氨基酸序列，编码1299个氨基酸，其氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示。

实施例2：

重组载体的构建和转化农杆菌的建立：

根据图1的技术路线，抽取水稻品种日本晴的DNA，用引物序列(AAAGAGCTCGGATCCCAGCGAGCTTTCTTTTGTTTCT和AAAACTAGTGGTACCCTTTACAATGTTGCTGCTCCAG)进行聚合酶链式反应(PCR)分离得到OsEIN2L的一段259bp的核苷酸片段，序列为SEQ ID No.4所示。PCR程序:94℃预变性5分钟；35个循环(94℃变性30秒；62℃退火30秒；72℃延伸30秒)，72℃延伸7分钟。将目标片段先用BamHI和KpnI酶切，分离回收目标产物，与用BamHI和KpnI酶切过的pDS1301载体(Chu ZH et al.,2006)用T4连接酶连接形成中间载体1，再将目标片段用SacI和SpeI酶切，分离回收后,与用SacI和SpeI酶切过的中间载体1用T4连接酶连接形成抑制表达载体。上述引物由武汉擎科合成，限制性内切酶(BamHI、KpnI、Sac和SpeI)和T4连接酶均购于Takara公司；

将抑制载体转化农杆菌EHA105(Takara公司产品)中，命名为R400。

实施例3：

农杆菌介导的遗传转化：

(1)、诱导：

将成熟的水稻品种(日本晴，中国公开的粳稻品种)种子去壳，然后依次用70％体积比的乙醇处理1分钟，0.15％浓度的氯化汞(HgCl₂)种子表面消毒15分钟；用灭菌水洗种子4-5次；将种子放在粳稻诱导培养基上；将接种后的培养基置于黑暗处培养4周，温度25±1℃。

(2)、继代：

挑选亮黄色、紧实且相对干燥的胚性愈伤，放于粳稻继代培养基上黑暗下培养2-3周，温度25±1℃。

(3)、预培养：

挑选紧实且相对干燥的胚性愈伤，放于粳稻预培养基上黑暗下培养4-5天，温度25±1℃。

(4)、农杆菌培养：

在带有卡那霉素抗性(上海生工公司产品)选择的LA培养基(LA培养基的配制参照J.萨姆布鲁克等，分子克隆实验指南，第三版，金冬雁等(译)，科学出版社，2002)上预培养农杆菌株R400两天，温度28℃；刮取农杆菌至悬浮培养基中悬浮培养，温度28℃。

(5)、侵染：

将预培养的愈伤转移至灭好菌的瓶子内；调节农杆菌R400的悬浮液至OD₆₀₀ 0.8-1.0；将愈伤在农杆菌悬浮液中浸泡30分钟；转移愈伤至灭菌好的滤纸上吸干；然后放置在粳稻共培养基上培养3天，温度19-20℃。

(6)、筛选：

用灭菌水洗涤愈伤8遍；浸泡在含400毫克/L羧苄青霉素(CN)(上海生工公司产品)的灭菌水中30分钟；转移愈伤至灭菌好的滤纸上吸干；转移愈伤至含有250mg/L羧苄青霉素(CN)、50mg/L潮霉素(Hn)(Roche公司产品)粳稻选择培养基上选择培养2-3次，每次2周。

(7)、分化：

将抗性愈伤转移至粳稻分化培养基上，光照下培养，温度26℃。

(8)、生根：

剪掉再生苗分化时产生的根；然后将其转移至生根培养基中光照下培养2-3周，温度26℃。

(9)、移栽：

洗掉再生植株根上的残留培养基，移入钵中盆栽，同时在最初的几天保持水分湿润，待植株存活健壮后移入大田。

实施例4：

抑制日本晴OsEIN2L基因的转基因单株的获得：

由实施例3得到的T0代R400转基因抑制植株共63株，分别命名为R4-1至R4-63，用T0代转基因叶片抽取DNA，用pDS1301载体引物PMCG1(引物序列为CTGCTCCACACATGTCCATT和CCCACCATCTTGTGGAGCTA)和PMCG2(引物序列为GGCTCACCAAACCTTAAACAA和CTGAGCTACACATGCTCAGGTT)进行PCR阳性检测，PCR程序为94℃预变性5分钟；30个循环(94℃变性30秒；55℃退火30秒；72℃延伸40秒)，72℃延伸7分钟，1％的琼脂糖跑胶检测，PMCG1能扩出700bp左右的条带同时PMCG2能扩出400bp左右的条带的单株为阳性单株(图2)。抽提R4-1至R4-30的单株的叶片RNA，反转录成CDNA，并进行实时荧光定量PCR(realtime-PCR)检测OsEIN2L的表达量(图3)，其中R4-10，11，12，15表达量显著性受到抑制，R4-3表达量相对较高，收获R4-1至R4-30的单株自交种。

实施例5：

日本晴OsEIN2L基因抑制表达后中胚轴明显伸长

收获由实施例4得到的表达量显著下降的家系R4-10，R11，R12，R15和表达量相对较高R4-3以及野生型对照Nip的单株种后，黑暗处理发芽7天，测量中胚轴长，统计分析发现R4-10、R11、R12、R15家系的中胚轴显著长于R4-3和野生型Nip。获得水稻基因OsEIN2L抑制表达后中胚轴明显伸长的R4-10、R11、R12和R15家系(图7)。

实施例6：

中花11号OsEIN2L基因阳性突变株的获得

参照已发表文献(Wu Changyin，2003)的方法，利用中花11(中国公开的粳稻品种)为受体，转化增强子捕获(Enhancer trap)载体pFX-E24.2-15R以获得的突变体，种植OsEIN2L的中花11突变体(编号为04Z110H67-NTLB5-2，http://rmd.ncpgr.cn/，该突变体的T-DNA插入在OsEIN2L的ATG上游932bp处)T0代，共16株，命名为M1-M16，提取DNA，利用引物P1和P2(aacatccacagcaccatgaa和gacgacgaaaacaggaaag)和引物P2+Pv(gacgacgaaaacaggaaag和AATCCAGATCCCCCGAATTA)进行聚合酶链式反应(PCR)检测，P1和P2扩出1kb左右带且P2+Pv扩增无带的单株为阴性单株，P1+P2扩增无带且P2+Pv能扩出800bp左右带的单株为阳性单株，P1+P2能扩出1kb左右的带且P2+Pv能扩出800bp左右的带为杂合单株(图4)。其中M1、M7、M8、M10、M11、M13、M14为阴性单株，M2、M3、M6、M9、M16为阳性单株，M4、M12、M15为杂合单株，抽取叶片RNA，并反转录成cDNA，实时荧光定量PCR检测OsEIN2L的表达量(图5)，统计发现阳性表达量显著低于阴性表达量。收获M1-M16的单株自交种。

实施例7：

中花11号OsEIN2L基因突变后中胚轴明显伸长

对实施例6中的M1-M16的单株种暗处理发芽7天测量中胚轴长，统计分析得出：阳性家系中胚轴显著性长于阴性家系，挑选杂合的M4种植成90个单株的分离群体，抽提分离群体的单株DNA，利用利用引物P1和P2(aacatccacagcaccatgaa和gacgacgaaaacaggaaag)和引物P2+Pv(gacgacgaaaacaggaaag和AATCCAGATCCCCCGAATTA)进行聚合酶链式反应(PCR)检测，1％琼脂糖跑胶检测基因型，收获分离群体的单株种子，并进行暗处理发芽，测量中胚轴长，分离出中胚轴显著长于阴性单株的阳性单株(图8)。

实施例8：

水稻基因OsEIN2L分子标记的开发：

提取水稻品种Nip和ZS97B的DNA，对OsEIN2L进行比较测序发现，ZS97B较之Nip的OsEIN2L在启始密码ATG上游-1077和-1310bp处分别有17bp和64bp的碱基缺失，根据该段缺失序列两侧的序列设计左右引物对(引物序列为CGTATATGCCCTCGTCTCGACT和AAAGCTCGTGCTATGCCCGTGC)，进行Nip和ZS97B的PCR扩增，程序为：94℃：5min，35个循环(94℃：30s，56℃：30s，72℃：30s)，72℃：5min，25℃：1min，将PCR产物用1.5％琼脂糖跑胶检测，可以检测到该处碱基缺失的序列差异，迁移速度快的带型为ZS97B基因型，迁移慢的带型为Nip基因型，因此利用该引物可以快速对基因型进行判断，加快水稻育种进程，申请人将开发的标记引物命名为400Idall。

实施例9：

水稻基因OsEIN2L突变体农艺性状的考察

将实施例7的M4分离群体单株收种，考察有效穗数，一次枝梗，每穗实粒数，每穗颖花数，千粒重，单株产量等农艺性状，统计分析阳性单株和阴性对照之间在这些农艺性状上都没有显著差异(表1)，说明水稻基因OsEIN2L在改变中胚轴长度的同时并不影响其他农艺性状。

表1：OsEIN2L不同基因型单株的农艺性状考察

相同a字母代表阴性、阳性以及杂合基因型间没有显著性差异。

实施例10：

水稻基因OsEIN2L近等基因系的创建及农艺性状的考察

以珍汕97B(ZS97B)为母本，日本晴(Nip)为父本杂交一次，再与珍汕97连续回交6次，自交5次，利用175个公开的简单重复序列(SSR)标记鉴定背景基因型和实施例8制备的分子标记引物鉴定目标基因，选择培育仅在第三染色体chr3：28444727-27807603之间含有日本晴染色体片段和OsEIN2L的等位基因，而其他的染色体区段与珍汕97相同的近等基因系，命名为OsEIN2LNIL^Nip和OsEIN2LNIL^ZS97。将OsEIN2LNIL^NIP和OsEIN2LNIL^ZS97一起种植在大田，考察抽穗期，株高，有效穗数，一次枝梗，每穗颖花数，结实率，千粒重，单株产量等表型，显示OsEIN2LNIL^ZS97的颖花数显著性低于OsEIN2LNIL^NIP，其他农艺性状没有显著性差异。

表2：OsEIN2L近等基因系农艺性状考察

相同a字母代表两个基因系间没有显著性差异。

实施例11：

水稻基因OsEIN2L分子标记在水稻育种中的应用：

提取215份水稻种质的DNA，利用400Idall(引物为CGTATATGCCCTCGTCTCGACT和AAAGCTCGTGCTATGCCCGTGC)对这些种质进行PCR扩增，程序同实施例8即为：94℃：5min，35个循环(94℃：30s，56℃：30s，72℃：30s)，72℃：5min，25℃：1min，将PCR产物用1.5％琼脂糖跑胶检测，215份水稻种质的DNA均能利用该引物扩增出条带，将迁移速度快的带型记为A，迁移慢的带型记为B，跑胶显示ZS97B基因型为A，Nip为B，水稻种质可用400IDall分为两类基因型(图6，图9)。对同样的215份水稻种质在黑暗条件下发芽7d，测量中胚轴长度，再将其与用400IDall鉴定后的两类基因型(ZS97B基因型和Nip基因型)进行单因素方差分析，表明两类种质材料的中胚轴长度呈极显著的差异，基因型A种质的中胚轴显著性长于基因型B种质的中胚轴。

SEQUENCE LISTING

<110> 华中农业大学

<120> 水稻基因OsEIN2L及其应用

<130> 水稻基因OsEIN2L及其应用

<160> 6

<170> PatentIn version 3.1

<210> 1

<211> 9712

<212> DNA

<213> 日本晴

<400> 1

acggataaag tatttgatac tccctccgta ctcgtaaagg aagtcgttta ggacaatgtt 60

taagtcaaac cttgggaata taaatcatga ataactctca agttgtttag tttgaaaatg 120

taaaaattat atgaatagat ttgtcttgaa aaatactttc ataaaagtat acatatatca 180

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gatatcctaa acgacttcct ttatgagtat ggagggagta tgtgaatagg catggtggta 300

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accatgaggc tgctatatat ggagctttga ttggcaccta acatggtgaa gcgatcatgt 660

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gtaacaacta gtgttgttgc ttataacacc gtgtcctagc acctagccat caacatcgat 780

attgaccgtt gccacgatct cctcctagtg atgttatcgt gcttcattgt tgacgggtgg 840

ctttgctcag gggcgtcctt aggcccatgc gggctgtgcg accgaacagg gcccccaaat 900

ttcaagggcc ctaaaatatt aagtataccc aatatataat aatattaaat gcttcaattt 960

tagtaaaact aagcccccaa aacaatgcaa aaggtgaatg atccattttc caatttccat 1020

cgtacagtcg tccgtgtcgt cgaagtccca acgccacgtc gcttcgtctc ctctcctcag 1080

ttactaggcc actaggatcc attttaatat ttcgcacggg gacccaattt gtccgggatg 1140

cccctggctt tgctcatgac aaagacacga gtgtgtgtcg tgggcgtggg atgctgccaa 1200

actcacgagg aggaggcacc ataatcctgc gacctagcat gggctgctgc cgactgattt 1260

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acgaactcac aaccccaggt gaacgtggtc aagttgctca acatacacgt gcaaagctac 1380

tttagctcct agaggttttg catgggttta agggtgcctc tcctacgcac gacgacgacg 1440

aaaacaggaa agggtgggtg ggcacgcttt tgcagctgaa ctccccgaga tagagcggtt 1500

tgatggaacc cgagagacaa aggagacaac ggcgtgtgtt tggttaattc ggcagcatct 1560

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gattcggccg cggtcttctt ctggagaata ttatgcttgc tcattttatg ctgtgtttag 1680

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ttaagtctaa ttaatctttc attagcacat atatgttact gtagcactta tgattaatca 1860

tggattaatt aaactcaaaa tattcgtatc gcgattttca tacaaactgt ataattaatt 1920

ttttttaatt tatatttaat gcttatatat gtgtctaaaa tttgatggga attttttgag 1980

aaaaaaagtt tagggaacta aggtgtccct cctttccaaa caccacctaa acaggccttt 2040

acaatctaca aaaaaggcac gggcatagca cgagctttgc ccttttttct cgcgctcgca 2100

catcctctct ttccacagtt ccactaaaaa aatccacttc acctagcagc cgctctcacc 2160

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gatggagctt agagcagggg caacctagat caggggtgtc tccctggggg gttttcatgg 2520

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ggatttcatg gtgttgtgga tgttcaccag ctttggaggg tttgattagg gctgcttggg 2700

tcacaacagg agggctttag ggatctgaat ttggtagtca tttcaggcat gtgatgcttc 2760

ttggggagga tttcatggtg ttgtggatgg atgtccccca ggtttggatg gttagacttc 2820

ttcgatcacc acaagagctt tgaagagacc tgagtggata agcatttgat ccttcttgga 2880

ggtgtttcat ggtgttctag atgttcacca gcttcggagg gtttgattag actgcttgag 2940

ttaacagtgt tcaagggact gaatttgata agcatgtcgg gcatttgatc cagtggtgtg 3000

gattcgtatc catcttttgt tgttataaga tttgctgcca caaaaaatgg aaggtgtgca 3060

cggtatagaa tctctggcta ctggagatgg ttggcatcat ctttcccgta cccttggacc 3120

ggtgctcctg atctcgatgg ggtatattga ccttgggaag tgggtggaaa cgatagatgc 3180

cgggtctcgg tttggctatg atctcgtaat actggtgttg cttttcaact tgtcggccat 3240

tctgtgccag tatctgtcga tgtgtatcgg catggtcact gggaaaaatc ttgcggaggt 3300

accactttgc tgacatctgt cgtcacctac tcacatttct tcagtttagc tcaatgaatg 3360

gctgtacctt tttttcctaa gtggaagtat ttagtgttac tcagatagca tcaaccacat 3420

aaaaaatagt gggggagttc ttcaattttt cctccttttt ttttctttag gggggtggtt 3480

gatatttcat attcgtcatc tatcattttc ttcgagagct gttaactttt gtaacaatat 3540

tacatgaacg gaagatttgc cgcgaggagt acagtccatc aatatgtgtc atccttggta 3600

ttcaggcagg attgtccttg ctaaccgcgg aactaaccat ggtatgttca tacactttag 3660

acaagctttc ctctctcttt tttttttttg ttaattcttt gttctagagt taatttacca 3720

atgttatgca tagttgacct ataggagcat tcactaccag agaattcagg tttttgccag 3780

ctttcaaact tttaatactt ggttatttca gctttcaggc atatcagtcg gattcaacct 3840

ggtctttgaa tatgatgatc ctatcgcagg cttatatttt gctagtgttg tggtcaattt 3900

gctaccttac actatgtctt atctggtaag cttatgattg atctcagaat atctgcagtt 3960

ctgcaccact aagagcaact ctaagacgtt atgcctttac tttattctag ggcaaacgga 4020

tggctgggac attgaatgca tgcgtagcag gctttgcact tctttgtttt gtgcttggtt 4080

tattagtcag tcaaccaaaa attccagttg atatgaatgc aatgttcccc aagttgagtg 4140

gtgaaagtgc ttattccttg atggcgcttc ttggcggaaa tgtaatagcg cacaattttt 4200

atgttcattc atcagttgta caggcaagct ccatttcctt atgctgatgc ttaagtaaat 4260

gctgagatag tggcttttgt tgaacttgta ctccacccat aagttatata tatgagtaaa 4320

tacttcttta acttgtataa ctattctgat cagtccatga attctgagga cagttcatta 4380

cttgccaatt tttggaaaaa tggtagaacc tattttgtcc ctcatttttt aaaaaaattt 4440

cccacacttg gcattatagt ttaaggttgg gctgttcaat ccaggttttg aatggactgt 4500

tcaaaaccgg gcaatgtcaa tcttgctggc catgaagcta atcacataac tgagcctgct 4560

gatttctggt ttgcacaggt tgacttgacc ccaggctgta gtttaaagta accggttttc 4620

ctaagttgtg ttttctaata catgattggt attagttttg aaatctgcaa ggaagctaat 4680

tctggttcat gctaagccat gcaagcataa tcctgcaact ttgtggtgtg ataatagaaa 4740

ctggtgtgtg ggttggcaaa ccagaatcat gcatcctatg ctaagatgtg caagcataat 4800

cctgcaactt tgtagtacat tctttccata ttaagaaaag agtaagaaaa atatgcatag 4860

attgatccaa atgcttgatt tgttcttttg ctcatgaaaa atttcttgca attttctcta 4920

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atagaaagtc aggggatcca atacagtttt ttgtttctga agcttaaact tgtcataaaa 5040

cgtgtaagtc ggttctactg tacctttgac atttgtgctc tccgtgccat gcagttttcg 5100

taaacccaca ccattttcct tttttatttt ttaccttttg ttctatctgc tatgccatgt 5160

ttttgttaat tcagaaatca tttgtgcagg gccaaagaca atctacaact ctttcccttg 5220

gtgctctgtt ccacgatcac ctgttctcaa tattgtttat tttcactggg gttttccttg 5280

tgaattatgt cctgatgggc tcagcagcag ttgaatccaa taatactctg gttacttttc 5340

aagattctgt agatttaatg aaccaggttt ttgcctccag tttgcattct gcttgttttg 5400

agtatgaatt ctgcaccata gttccttcat gagttcctct gaatgccttc tgcagatgtt 5460

catgaatccg atggcaccaa ttgttttttt agtgatcctt atcttttcga gtcatgtcat 5520

ctcattgaca tctattattg gcagccacgc aattttgaag aatttctttg gtgtaaactt 5580

gcctcattct gctcatcatc tgctactaaa ggccgttgcc atggttccta ctatgtacta 5640

tgcaaaggtt gcaggttctg aagggatata tcagttactc attatctgcc cagttatcca 5700

agctatgttc cttccttcat ctgttattcc tgttttccgt gtttcctcat caagagttat 5760

aatgagcaga tataaaatat ctttgtacgt tgaaatattg gccatcctag catttcttct 5820

tttgctgttc acaaatatca tttttgctgc ggaaatcctg tttggtgata gtacctggac 5880

aaacaacttg aaagggaaca ctggaagccc tgttgtactt ccgcatgcca ttgtagttct 5940

aatttcttgt gcatcaatta cttttacgct gttcctggct gtcactccac tgaagtcagc 6000

aagtaatgaa cctgaaactc aggagctatc tgagcactct cagagagaag atccagatac 6060

tacttatcaa agagaagcaa gtaatgaacc tgaaactcag gagctatctg agcactctca 6120

gagagaagat ccagatacta cttatcaaat agaagtaagt aatgaacgtg aaactcagca 6180

gctatctgag cactctcaga tagaagatcc agatactttt tatcatagag aggagctttc 6240

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aacttcaaag catgtccaag aagaagcagg agctagcatg gactatgata ctgaggcttc 6600

ttataatgcg gaagtcagca agtcttctgg aaacaaggca cctccaattt ctgatgaccc 6660

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ctcaagactg cctggtttgg gtcgtgcagc aaggaggcaa ttagcagcga ttcttgatga 6780

gttctgggga catctctttg attatcatgg taagctaacg caagaagcta atgcaggaag 6840

gttcaacttt ctgctaggac catacccgaa agcagttaga agtgataacc aagccatcga 6900

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atgggactca cgtgctaagg aagtctctag tccaggcttt aattttgtgc ttcagatggg 7020

tcgcattgga tcatcaaact ggtctgagag catgcgttta tctaatgctg acatcccaag 7080

gccaactagc accttgtttg aacaaaatac tcagttttat tcaaattata atgtcccatc 7140

ttaccctgac aatcagttct atcaacctgc taccattcat ggctatcacc tggcaacctc 7200

tttgaaaagt atgaatgcaa gtcacagcac gcactccagc atttcactag atccacggcg 7260

acttcctaga tcatctgaat ctgctggttc taactacgca gattctgcaa ggtatgctcg 7320

taaccaagat gtaattggtt cacagggaac cgcttcgcaa aacacaacaa tgagctgttt 7380

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tatgcagtca agtgtgaacc caagtactga atccatttgg gcccagcagc cgtttgaaca 7740

attactcggt gtatcaagag cagagttgaa taagggcgag ggtaacaccg accagagatc 7800

aagtggtgtc accaaacacg atttctctaa caaagaatat gaggtgaaac ttcttcaatc 7860

actcagattt tgcatcatga agctcttgaa actggaagga tcaggatggc tctttgagca 7920

aaatggtggc tgtgatgaaa aattaattga tcaagttgct gtagctgaga gagtttcaca 7980

acataccact gaaaatcagt tatctgctga tctccagctc catagttctg atgaagactt 8040

gcagccactg caaaggaatg ataacaggga tgccaattgc atgagcctac tgcccaagtg 8100

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ccagattctg aacctgtgcc ttgtcgaaag taggccagaa ctttggggca agtatacata 8220

tgttcttaat cgtctccagg tatttttttt tctattgctg tctattttgg gcaaactgca 8280

atatggaggg taacccaggg atgcagatca tcaatggttg cttcctgcat gtagcataca 8340

tactatatag gctattttgg cattgttgtg aattatgctt cctacatata gcatacaaac 8400

tagtactata taggctattt tggtattgtt gtggattacg ataatcttta ttcgtatgat 8460

ggctttaaga tatttcggtt ttttattacc tgtttttgcc taaatcaaat tgacaaagat 8520

atatttcagt aaaaaagaga gagagattga tttcccaata atagtagaag tggatggata 8580

tgggagaacg gcaacagctt gataaccaaa tttgacactc tctctgattt ttcaatggat 8640

tgtgaaaata ctccatatag caatcctatt ttccatagga actttaaaaa taagcactgt 8700

cagcacacat aacaactgca aactaaccat atacttgcta tggtggctgg gaatatttcg 8760

tgatgtatga aagtatgaaa cactgcaata gatggcattc atttatataa atttaaaata 8820

tagttgtttg cagagaactt tgttttgtat gactactatc attttcttcg cctgtagatg 8880

aatcctgcaa cttgtaagtg cattttgtcc tactctgtgc ttttaaccat aagataaacc 8940

ttaatcagaa atcccaacta ctgatttcct tcagaagtgc ataaaaactt gtgagtgggt 9000

tcggttgcat tgagaaattg acttctaatg cgacttgcat gcagcagaac tgcccaaact 9060

tctgccacac tgtttggact tcaagtttgc taattttctt tttcatttac ttgctaggga 9120

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aaagttgcca agcccatctc tggtactttc accactgctg gtatgatctt ggagatgatt 9240

aaagacgtgg aacaagccat ttctagccgc aagggccgaa gcggcacagc agcaggagac 9300

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ctctcgaaca agacatctgc aggacaatag cgtggcagcg agctttcttt tgtttcttgt 9420

ttgtataggg ttcttggggc tgctccacaa agttctgttt ttttgtgctc ctcaaacctt 9480

gggttttttc gatgcacacg atctccagag tgcctgagag cttcttgatc tttggtcatt 9540

tttgcacatg ttgtttatga agtggccaag ggtgaatggt ataccttgtt tattcatctt 9600

atcagcgaga tctcaacagt agatgatatt tgctggagca gcaacattgt aaagttcttt 9660

ttccagatga acattctgaa gtccgctggc ttggctttct gaaatctcca ct 9712

<210> 2

<211> 3900

<212> DNA

<213> 日本晴

<400> 2

atggaaggtg tgcacggtat agaatctctg gctactggag atggttggca tcatctttcc 60

cgtacccttg gaccggtgct cctgatctcg atggggtata ttgaccttgg gaagtgggtg 120

gaaacgatag atgccgggtc tcggtttggc tatgatctcg taatactggt gttgcttttc 180

aacttgtcgg ccattctgtg ccagtatctg tcgatgtgta tcggcatggt cactgggaaa 240

aatcttgcgg agatttgccg cgaggagtac agtccatcaa tatgtgtcat ccttggtatt 300

caggcaggat tgtccttgct aaccgcggaa ctaaccatgc tttcaggcat atcagtcgga 360

ttcaacctgg tctttgaata tgatgatcct atcgcaggct tatattttgc tagtgttgtg 420

gtcaatttgc taccttacac tatgtcttat ctgggcaaac ggatggctgg gacattgaat 480

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aaaattccag ttgatatgaa tgcaatgttc cccaagttga gtggtgaaag tgcttattcc 600

ttgatggcgc ttcttggcgg aaatgtaata gcgcacaatt tttatgttca ttcatcagtt 660

gtacagggcc aaagacaatc tacaactctt tcccttggtg ctctgttcca cgatcacctg 720

ttctcaatat tgtttatttt cactggggtt ttccttgtga attatgtcct gatgggctca 780

gcagcagttg aatccaataa tactctggtt acttttcaag attctgtaga tttaatgaac 840

cagatgttca tgaatccgat ggcaccaatt gtttttttag tgatccttat cttttcgagt 900

catgtcatct cattgacatc tattattggc agccacgcaa ttttgaagaa tttctttggt 960

gtaaacttgc ctcattctgc tcatcatctg ctactaaagg ccgttgccat ggttcctact 1020

atgtactatg caaaggttgc aggttctgaa gggatatatc agttactcat tatctgccca 1080

gttatccaag ctatgttcct tccttcatct gttattcctg ttttccgtgt ttcctcatca 1140

agagttataa tgagcagata taaaatatct ttgtacgttg aaatattggc catcctagca 1200

tttcttcttt tgctgttcac aaatatcatt tttgctgcgg aaatcctgtt tggtgatagt 1260

acctggacaa acaacttgaa agggaacact ggaagccctg ttgtacttcc gcatgccatt 1320

gtagttctaa tttcttgtgc atcaattact tttacgctgt tcctggctgt cactccactg 1380

aagtcagcaa gtaatgaacc tgaaactcag gagctatctg agcactctca gagagaagat 1440

ccagatacta cttatcaaag agaagcaagt aatgaacctg aaactcagga gctatctgag 1500

cactctcaga gagaagatcc agatactact tatcaaatag aagtaagtaa tgaacgtgaa 1560

actcagcagc tatctgagca ctctcagata gaagatccag atacttttta tcatagagag 1620

gagctttctc tggttgaaca gaaagaagat catacgactt ctactattaa tgctattccc 1680

aggatttcat cagaaagtta tcaaacatca gctttggagc ataatgactt tcctgacatc 1740

actgtggagt ctggtcatgg cactcagcag cttactgctt ttgtgccaat tattccggag 1800

gtctcatcgt ctatcaaaca taaggaacca aaatcagtag ttattgacca gacggaacca 1860

gtgccaaagg tttgtactgc cacagtagta gaacataaca ctgctgagaa catcaaaatg 1920

aagagtacaa cttcaaagca tgtccaagaa gaagcaggag ctagcatgga ctatgatact 1980

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gatgacccaa catctcttac tttgagcaag gggagagact ctgatgctgg ttatcgtggc 2100

agtaacctct caagactgcc tggtttgggt cgtgcagcaa ggaggcaatt agcagcgatt 2160

cttgatgagt tctggggaca tctctttgat tatcatggta agctaacgca agaagctaat 2220

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cagaaatcat gggactcacg tgctaaggaa gtctctagtc caggctttaa ttttgtgctt 2400

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gcaacctctt tgaaaagtat gaatgcaagt cacagcacgc actccagcat ttcactagat 2640

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cagagatcaa gtggtgtcac caaacacgat ttctctaaca aagaatatga ggtgaaactt 3240

cttcaatcac tcagattttg catcatgaag ctcttgaaac tggaaggatc aggatggctc 3300

tttgagcaaa atggtggctg tgatgaaaaa ttaattgatc aagttgctgt agctgagaga 3360

gtttcacaac ataccactga aaatcagtta tctgctgatc tccagctcca tagttctgat 3420

gaagacttgc agccactgca aaggaatgat aacagggatg ccaattgcat gagcctactg 3480

cccaagtgtg gagatgattg tgtttggcag gcccccctga ttgtcagttt tggtgtttgg 3540

tgcatccgcc agattctgaa cctgtgcctt gtcgaaagta ggccagaact ttggggcaag 3600

tatacatatg ttcttaatcg tctccaggga atacttgatc ctgcattttc caagcctcag 3660

aaacccatga aaggatgcgt atgccttcaa aaagttgcca agcccatctc tggtactttc 3720

accactgctg gtatgatctt ggagatgatt aaagacgtgg aacaagccat ttctagccgc 3780

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<210> 3

<211> 1299

<212> PRT

<213> 日本晴

<400> 3

Met Glu Gly Val His Gly Ile Glu Ser Leu Ala Thr Gly Asp Gly Trp

1 5 10 15

His His Leu Ser Arg Thr Leu Gly Pro Val Leu Leu Ile Ser Met Gly

20 25 30

Tyr Ile Asp Leu Gly Lys Trp Val Glu Thr Ile Asp Ala Gly Ser Arg

35 40 45

Phe Gly Tyr Asp Leu Val Ile Leu Val Leu Leu Phe Asn Leu Ser Ala

50 55 60

Ile Leu Cys Gln Tyr Leu Ser Met Cys Ile Gly Met Val Thr Gly Lys

65 70 75 80

Asn Leu Ala Glu Ile Cys Arg Glu Glu Tyr Ser Pro Ser Ile Cys Val

85 90 95

Ile Leu Gly Ile Gln Ala Gly Leu Ser Leu Leu Thr Ala Glu Leu Thr

100 105 110

Met Leu Ser Gly Ile Ser Val Gly Phe Asn Leu Val Phe Glu Tyr Asp

115 120 125

Asp Pro Ile Ala Gly Leu Tyr Phe Ala Ser Val Val Val Asn Leu Leu

130 135 140

Pro Tyr Thr Met Ser Tyr Leu Gly Lys Arg Met Ala Gly Thr Leu Asn

145 150 155 160

Ala Cys Val Ala Gly Phe Ala Leu Leu Cys Phe Val Leu Gly Leu Leu

165 170 175

Val Ser Gln Pro Lys Ile Pro Val Asp Met Asn Ala Met Phe Pro Lys

180 185 190

Leu Ser Gly Glu Ser Ala Tyr Ser Leu Met Ala Leu Leu Gly Gly Asn

195 200 205

Val Ile Ala His Asn Phe Tyr Val His Ser Ser Val Val Gln Gly Gln

210 215 220

Arg Gln Ser Thr Thr Leu Ser Leu Gly Ala Leu Phe His Asp His Leu

225 230 235 240

Phe Ser Ile Leu Phe Ile Phe Thr Gly Val Phe Leu Val Asn Tyr Val

245 250 255

Leu Met Gly Ser Ala Ala Val Glu Ser Asn Asn Thr Leu Val Thr Phe

260 265 270

Gln Asp Ser Val Asp Leu Met Asn Gln Met Phe Met Asn Pro Met Ala

275 280 285

Pro Ile Val Phe Leu Val Ile Leu Ile Phe Ser Ser His Val Ile Ser

290 295 300

Leu Thr Ser Ile Ile Gly Ser His Ala Ile Leu Lys Asn Phe Phe Gly

305 310 315 320

Val Asn Leu Pro His Ser Ala His His Leu Leu Leu Lys Ala Val Ala

325 330 335

Met Val Pro Thr Met Tyr Tyr Ala Lys Val Ala Gly Ser Glu Gly Ile

340 345 350

Tyr Gln Leu Leu Ile Ile Cys Pro Val Ile Gln Ala Met Phe Leu Pro

355 360 365

Ser Ser Val Ile Pro Val Phe Arg Val Ser Ser Ser Arg Val Ile Met

370 375 380

Ser Arg Tyr Lys Ile Ser Leu Tyr Val Glu Ile Leu Ala Ile Leu Ala

385 390 395 400

Phe Leu Leu Leu Leu Phe Thr Asn Ile Ile Phe Ala Ala Glu Ile Leu

405 410 415

Phe Gly Asp Ser Thr Trp Thr Asn Asn Leu Lys Gly Asn Thr Gly Ser

420 425 430

Pro Val Val Leu Pro His Ala Ile Val Val Leu Ile Ser Cys Ala Ser

435 440 445

Ile Thr Phe Thr Leu Phe Leu Ala Val Thr Pro Leu Lys Ser Ala Ser

450 455 460

Asn Glu Pro Glu Thr Gln Glu Leu Ser Glu His Ser Gln Arg Glu Asp

465 470 475 480

Pro Asp Thr Thr Tyr Gln Arg Glu Ala Ser Asn Glu Pro Glu Thr Gln

485 490 495

Glu Leu Ser Glu His Ser Gln Arg Glu Asp Pro Asp Thr Thr Tyr Gln

500 505 510

Ile Glu Val Ser Asn Glu Arg Glu Thr Gln Gln Leu Ser Glu His Ser

515 520 525

Gln Ile Glu Asp Pro Asp Thr Phe Tyr His Arg Glu Glu Leu Ser Leu

530 535 540

Val Glu Gln Lys Glu Asp His Thr Thr Ser Thr Ile Asn Ala Ile Pro

545 550 555 560

Arg Ile Ser Ser Glu Ser Tyr Gln Thr Ser Ala Leu Glu His Asn Asp

565 570 575

Phe Pro Asp Ile Thr Val Glu Ser Gly His Gly Thr Gln Gln Leu Thr

580 585 590

Ala Phe Val Pro Ile Ile Pro Glu Val Ser Ser Ser Ile Lys His Lys

595 600 605

Glu Pro Lys Ser Val Val Ile Asp Gln Thr Glu Pro Val Pro Lys Val

610 615 620

Cys Thr Ala Thr Val Val Glu His Asn Thr Ala Glu Asn Ile Lys Met

625 630 635 640

Lys Ser Thr Thr Ser Lys His Val Gln Glu Glu Ala Gly Ala Ser Met

645 650 655

Asp Tyr Asp Thr Glu Ala Ser Tyr Asn Ala Glu Val Ser Lys Ser Ser

660 665 670

Gly Asn Lys Ala Pro Pro Ile Ser Asp Asp Pro Thr Ser Leu Thr Leu

675 680 685

Ser Lys Gly Arg Asp Ser Asp Ala Gly Tyr Arg Gly Ser Asn Leu Ser

690 695 700

Arg Leu Pro Gly Leu Gly Arg Ala Ala Arg Arg Gln Leu Ala Ala Ile

705 710 715 720

Leu Asp Glu Phe Trp Gly His Leu Phe Asp Tyr His Gly Lys Leu Thr

725 730 735

Gln Glu Ala Asn Ala Gly Arg Phe Asn Phe Leu Leu Gly Pro Tyr Pro

740 745 750

Lys Ala Val Arg Ser Asp Asn Gln Ala Ile Glu Ala Ser Arg Ser Pro

755 760 765

Leu Met Arg Asp Ala Ile Arg Gly Ser Ala Thr Ile Gln Lys Ser Trp

770 775 780

Asp Ser Arg Ala Lys Glu Val Ser Ser Pro Gly Phe Asn Phe Val Leu

785 790 795 800

Gln Met Gly Arg Ile Gly Ser Ser Asn Trp Ser Glu Ser Met Arg Leu

805 810 815

Ser Asn Ala Asp Ile Pro Arg Pro Thr Ser Thr Leu Phe Glu Gln Asn

820 825 830

Thr Gln Phe Tyr Ser Asn Tyr Asn Val Pro Ser Tyr Pro Asp Asn Gln

835 840 845

Phe Tyr Gln Pro Ala Thr Ile His Gly Tyr His Leu Ala Thr Ser Leu

850 855 860

Lys Ser Met Asn Ala Ser His Ser Thr His Ser Ser Ile Ser Leu Asp

865 870 875 880

Pro Arg Arg Leu Pro Arg Ser Ser Glu Ser Ala Gly Ser Asn Tyr Ala

885 890 895

Asp Ser Ala Arg Tyr Ala Arg Asn Gln Asp Val Ile Gly Ser Gln Gly

900 905 910

Thr Ala Ser Gln Asn Thr Thr Met Ser Cys Leu Asp Thr Met Thr Val

915 920 925

Glu Arg Ala Phe Tyr Asn Pro Ala Ser Val Asn Glu Ile Glu Gly Val

930 935 940

Gly Ser Ser Ala Tyr Ser Lys Lys Tyr His Ser Ser Pro Asp Ile Ser

945 950 955 960

Ala Leu Ile Ala Ala Ser Arg Asn Tyr Leu Pro Asn Glu Val Asn Leu

965 970 975

Gly Gly Ala Ala Gly Ser Ser Ser Tyr Phe Ser Asn Leu Ala Cys Glu

980 985 990

Arg Ser Gln Tyr Val Asn Leu Gly Ser Ser Ser Thr Ala Gln Phe Ala

995 1000 1005

Leu Ser Lys His Ser Gln Pro Asn Phe His Arg Asp Thr Ser Ser

1010 1015 1020

Met Gln Ser Ser Val Asn Pro Ser Thr Glu Ser Ile Trp Ala Gln

1025 1030 1035

Gln Pro Phe Glu Gln Leu Leu Gly Val Ser Arg Ala Glu Leu Asn

1040 1045 1050

Lys Gly Glu Gly Asn Thr Asp Gln Arg Ser Ser Gly Val Thr Lys

1055 1060 1065

His Asp Phe Ser Asn Lys Glu Tyr Glu Val Lys Leu Leu Gln Ser

1070 1075 1080

Leu Arg Phe Cys Ile Met Lys Leu Leu Lys Leu Glu Gly Ser Gly

1085 1090 1095

Trp Leu Phe Glu Gln Asn Gly Gly Cys Asp Glu Lys Leu Ile Asp

1100 1105 1110

Gln Val Ala Val Ala Glu Arg Val Ser Gln His Thr Thr Glu Asn

1115 1120 1125

Gln Leu Ser Ala Asp Leu Gln Leu His Ser Ser Asp Glu Asp Leu

1130 1135 1140

Gln Pro Leu Gln Arg Asn Asp Asn Arg Asp Ala Asn Cys Met Ser

1145 1150 1155

Leu Leu Pro Lys Cys Gly Asp Asp Cys Val Trp Gln Ala Pro Leu

1160 1165 1170

Ile Val Ser Phe Gly Val Trp Cys Ile Arg Gln Ile Leu Asn Leu

1175 1180 1185

Cys Leu Val Glu Ser Arg Pro Glu Leu Trp Gly Lys Tyr Thr Tyr

1190 1195 1200

Val Leu Asn Arg Leu Gln Gly Ile Leu Asp Pro Ala Phe Ser Lys

1205 1210 1215

Pro Gln Lys Pro Met Lys Gly Cys Val Cys Leu Gln Lys Val Ala

1220 1225 1230

Lys Pro Ile Ser Gly Thr Phe Thr Thr Ala Gly Met Ile Leu Glu

1235 1240 1245

Met Ile Lys Asp Val Glu Gln Ala Ile Ser Ser Arg Lys Gly Arg

1250 1255 1260

Ser Gly Thr Ala Ala Gly Asp Val Ala Phe Pro Lys Gly Lys Glu

1265 1270 1275

Asn Leu Ala Ser Val Leu Lys Arg Tyr Lys Arg Arg Leu Ser Asn

1280 1285 1290

Lys Thr Ser Ala Gly Gln

1295

<210> 4

<211> 259

<212> DNA

<213> 日本晴

<400> 4

cagcgagctt tcttttgttt cttgtttgta tagggttctt ggggctgctc cacaaagttc 60

tgtttttttg tgctcctcaa accttgggtt ttttcgatgc acacgatctc cagagtgcct 120

gagagcttct tgatctttgg tcatttttgc acatgttgtt tatgaagtgg ccaagggtga 180

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<210> 5

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 5

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<210> 6

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 6

aaagctcgtg ctatgcccgt gc 22

Claims

1.编码SEQ ID NO.3所示蛋白的基因在控制水稻中胚轴长度中的应用，所述应用是通过抑制该基因的表达使得水稻中胚轴伸长。