CN105713872A - 间充质干细胞培养试剂盒 - Google Patents

间充质干细胞培养试剂盒 Download PDF

Info

Publication number
CN105713872A
CN105713872A CN201610201894.XA CN201610201894A CN105713872A CN 105713872 A CN105713872 A CN 105713872A CN 201610201894 A CN201610201894 A CN 201610201894A CN 105713872 A CN105713872 A CN 105713872A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cell
mescenchymal stem
stem cell
culture fluid
cell culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201610201894.XA
Other languages
English (en)
Inventor
赵顺英
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201610201894.XA priority Critical patent/CN105713872A/zh
Publication of CN105713872A publication Critical patent/CN105713872A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
    • C12N5/0662—Stem cells
    • C12N5/0663—Bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSC)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
    • C12N5/0662—Stem cells
    • C12N5/0668—Mesenchymal stem cells from other natural sources
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/70—Undefined extracts
    • C12N2500/80—Undefined extracts from animals
    • C12N2500/84—Undefined extracts from animals from mammals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/10—Growth factors
    • C12N2501/115—Basic fibroblast growth factor (bFGF, FGF-2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
    • C12N2501/23—Interleukins [IL]
    • C12N2501/2306—Interleukin-6 (IL-6)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了间充质干细胞培养试剂盒，包括细胞培养液A和细胞培养液B；所述细胞培养液A为含80～120ng/ml细胞因子LIF、80～120ng/ml细胞因子bFGF和20～30μg/mlGranulodiene A的Knockout?DMEM培养基；所述细胞培养液B为胎牛血清。采用本发明提供的细胞培养液将脐带间充质干细胞传代15次后，细胞仍然维持很高的纯度和良好的全能性。采用本发明提供的细胞培养液培养骨髓间充质干细胞，也取得了同样好的效果。这些结果表明，本发明提供的培养试剂盒能够提高间充质干细胞原代细胞传代时间，使间充质干细胞多次传代后依然保持有细胞全能性。

Description

间充质干细胞培养试剂盒
技术领域
本发明属于干细胞培养领域，具体涉及一种间充质干细胞培养试剂盒。
背景技术
间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSC)是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层。MSC最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。如间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。
间充质干细胞包括脐带间充质干细胞和骨髓间充质干细胞。
脐带间充质干细胞是一类具有自我更新、增殖和多向分化潜能的干细胞，具有来源广泛、易于采集、保存和运输、无异体排斥、避免伦理争议等诸多优点。流式细胞仪分析发现脐带间充质干细胞高表达间质细胞标志(CD44、CD105)、整合素受体(CD29、CD49b、CD49c、CD51)、不表达造血系标志(CD34、CD45)白细胞抗原HLA-DR和内皮细胞标志CD31。脐带间充质干细胞在体内外可以分化为骨细胞、软骨细胞、肝细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞以及神经元细胞等。目前人脐带间充质干细胞在组织工程骨、人工血管以及基因治疗等临床应用研究中已逐渐深入，并已显示出广阔的应用前景。目前，对脐带间充质干细胞的分离培养、扩增还没有统一的标准，存在纯度低、原代培养时间长等缺点。各种类型的成纤维成体干细胞扩增一般在2～3天开始进入指数式生长，相差不大，而原代细胞由于组织来源不同，出现细胞克隆时间差异较大，所以，原代细胞传代时间是分离得到目的细胞的关键。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种能够提高间充质干细胞原代细胞传代时间的培养试剂盒，以使间充质干细胞多次传代后依然保持有细胞全能性。
本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
一种间充质干细胞培养试剂盒，包括细胞培养液A和细胞培养液B；
所述细胞培养液A为含80～120ng/ml细胞因子LIF、80～120ng/ml细胞因子bFGF和20～30μg/mlGranulodieneA的Knockout-DMEM培养基；
所述细胞培养液B为胎牛血清。
进一步地，所述细胞培养液A为含100ng/ml细胞因子LIF、100ng/ml细胞因子bFGF和25μg/mlGranulodieneA的Knockout-DMEM培养基。
进一步地，所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞。
进一步地，所述间充质干细胞为骨髓间充质干细胞。
进一步地，所述细胞培养液A和细胞培养液B均为无菌，并各自独立包装。
进一步地，所述的间充质干细胞培养试剂盒还包括细胞洗涤液和细胞消化液；所述细胞洗涤液为生理盐水；所述细胞消化液为CollagenaseII水溶液。
进一步地，所述细胞消化液为浓度为0.2g/100ml的CollagenaseII水溶液。
进一步地，所述生理盐水由氯化钠和水组成，氯化钠的浓度为0.9g/100ml。
进一步地，所述细胞培养液A、细胞培养液B、细胞洗涤液和细胞消化液均为无菌，并各自独立包装。
上述间充质干细胞培养试剂盒在间充质干细胞培养中的应用。
本发明的优点：
本发明提供的培养试剂盒能够提高间充质干细胞原代细胞传代时间，使间充质干细胞多次传代后依然保持有细胞全能性。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
本发明化合物GranulodieneA的制备方法参见文献：SesquiterpenesfromthesaprotrophicfungusGranulobasidiumvellereum(Ellis&Cragin)Jülich,Phytochemistry102(2014)197-204。
实施例1：试剂盒的制备
1、组分的制备
细胞洗涤液的制备：将9gNaCl溶于去离子水并用去离子水定容至1000ml，高压灭菌后置于4℃冰箱内备用。
细胞培养液A的制备：将细胞因子LIF、细胞因子bFGF和化合物GranulodieneA溶于无菌Knockout-DMEM培养基(液体)，细胞因子LIF的浓度为100ng/ml，细胞因子bFGF的浓度为100ng/ml，化合物GranulodieneA的浓度为25μg/ml。置于4℃冰箱内备用。
细胞培养液B为无菌胎牛血清，置于-20℃冰箱内备用。
细胞消化液：将CollagenaseII溶于去离子水使CollagenaseII的浓度为0.2g/100ml，置于4℃冰箱内备用。
2、组分的分装以及试剂盒的制备
用于分离脐带间充质干细胞的试剂盒(1次/盒)由独立包装的如下组分组成：1瓶细胞洗涤液(100ml/瓶)、1瓶细胞培养液A(80ml/瓶)，1瓶细胞培养液B(20ml/瓶)和1瓶细胞消化液(100ml/瓶)。
实施例2：试剂盒的制备，与实施例1对比，仅细胞培养液A中不添加GranulodieneA
1、组分的制备
细胞洗涤液的制备：将9gNaCl溶于去离子水并用去离子水定容至1000ml，高压灭菌后置于4℃冰箱内备用。
细胞培养液A的制备：将细胞因子LIF和细胞因子bFGF溶于无菌Knockout-DMEM培养基(液体)，细胞因子LIF的浓度为100ng/ml，细胞因子bFGF的浓度为100ng/ml。置于4℃冰箱内备用。
细胞培养液B为无菌胎牛血清，置于-20℃冰箱内备用。
细胞消化液：将CollagenaseII溶于去离子水使CollagenaseII的浓度为0.2g/100ml，置于4℃冰箱内备用。
2、组分的分装以及试剂盒的制备
用于分离脐带间充质干细胞的试剂盒(1次/盒)由独立包装的如下组分组成：1瓶细胞洗涤液(100ml/瓶)、1瓶细胞培养液A(80ml/瓶)，1瓶细胞培养液B(20ml/瓶)和1瓶细胞消化液(100ml/瓶)。
实施例3：脐带间充质干细胞的分离与快速扩增培养
分别用实施例1(实验组)和实施例2(对照组)制备的试剂盒进行脐带间充质干细胞的分离与快速扩增培养。
细胞培养液的制备：将细胞培养液A和细胞培养液B按照5:1的体积比混合。
1、无菌收集离体脐带(来源为人)，浸没于含双抗的细胞培养液(含双抗的细胞培养液由细胞培养液、青霉素和链霉素组成，青霉素的浓度为1g/100ml、链霉素的浓度为1g/100ml)中，玻璃容器密封运输至实验室。
2、在生物安全柜中剪取约10cm长的脐带，用细胞洗涤液清洗血污；用解剖刀去除外被羊膜、2条脐静脉和1条脐动脉，得到华尔通氏胶(动静脉之间的胚胎粘液样结缔组织)。
3、将华尔通氏胶剪碎成肉糜状，转移到离心管中，加入20ml细胞消化液，混匀37℃过夜消化(约6小时)；吸取液相、离心(2500rpm，5分钟)，收集沉淀(原代细胞)。
4、用细胞培养液重悬原代细胞，接种于0.2％明胶包被的培养瓶中(每106个细胞接种到1个25cm2培养瓶)，置于37℃、5％CO2培养箱中培养；持续观察细胞贴壁生长情况，细胞多数贴壁后(约24小时)更换为新的细胞培养液，除去未贴壁细胞和杂质，以后每3天半量更换细胞培养液(半量即原细胞培养液体积的一半；也可每4天半量更换细胞培养液)，原代细胞培养7天后细胞密度达到90％。
5、原代细胞培养至细胞密度达到90％后进行第一次传代，之后均在细胞密度达到90％(培养2～3天)时进行传代；继续传代20次(即第一次传代后，又连续传代了19次)。
实施例4：细胞纯度测定
分别取实施例1(实验组)和实施例2(对照组)制备的试剂盒按实施例3方法分离培养传代20次的细胞进行流式细胞仪检测，以验证细胞样本的纯度。
通过流式细胞仪分别检测第20次传代后的细胞样本的表面抗原CD29的图谱，实验组细胞样本的阳性率为95.7％，而对照组细胞样本的阳性率仅为79.4％。结果表明，采用本发明提供的细胞培养液将原代细胞传代20次后，细胞的纯度依然非常高。
实施例5：全能性验证
为证实脐带间充质干细胞的多向分化潜能，本实施例对实施例3中第15次传代后的细胞样本向成骨细胞和脂肪细胞分化的潜能进行鉴定。
1、向成骨细胞分化
将细胞样本以3000cells/cm2接种，然后加入成骨诱导培养基(向Knockout-DMEM培养基中添加地塞米松至100nM、抗坏血酸至50μM、β-甘油磷酸钠至10mM)，于37℃、5％CO2培养箱中培养，大约5～7天后观察。
结果实验组可观察到如下现象：细胞汇合成单层，细胞突起互相连接，并可重叠生长而不发生接触抑制；重叠生长的细胞逐渐形成结节状，随后胶原堆积及钙盐沉积，细胞间出现致密的圆形不透光团块物质，表明细胞样本可以向成骨细胞分化。
对照组未观察到实验组所见现象，说明使用实施例2制备的试剂盒所培养的脐带间充质干细胞传代15代后基本丧失继续分化为成骨细胞的能力。
2、向脂肪细胞分化
将细胞样本以3000cells/cm2接种，然后加入成脂肪诱导培养基(向Knockout-DMEM培养基中添加地塞米松至1μM、甲基-异丁基黄嘌呤至0.5mM、胰岛素至10μg/ml、吲哚美辛至100μM)，持续培养。
结果实验组可见如下现象：第2天细胞汇合成单层；2周后部分细胞形态变圆，胞浆内出现亮圆形脂滴；随着时间延长，圆形细胞逐渐增多。表明细胞样本可向脂肪细胞分化。
对照组未观察到实验组所见现象，说明使用实施例2制备的试剂盒所培养的脐带间充质干细胞传代15代后基本丧失继续分化为脂肪细胞的能力。
以上结果表明，采用本发明提供的细胞培养液将脐带间充质干细胞传代15次后，细胞仍然维持很高的纯度和良好的全能性。
采用本发明提供的细胞培养液培养骨髓间充质干细胞，也取得了同样好的效果。
上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。

Claims (10)

1.一种间充质干细胞培养试剂盒，其特征在于：包括细胞培养液A和细胞培养液B；
所述细胞培养液A为含80～120ng/ml细胞因子LIF、80～120ng/ml细胞因子bFGF和20～30μg/mlGranulodieneA的Knockout-DMEM培养基；
所述细胞培养液B为胎牛血清。
2.根据权利要求1所述的间充质干细胞培养试剂盒，其特征在于：所述细胞培养液A为含100ng/ml细胞因子LIF、100ng/ml细胞因子bFGF和25μg/mlGranulodieneA的Knockout-DMEM培养基。
3.根据权利要求1所述的间充质干细胞培养试剂盒，其特征在于：所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞。
4.根据权利要求1所述的间充质干细胞培养试剂盒，其特征在于：所述间充质干细胞为骨髓间充质干细胞。
5.根据权利要求1所述的间充质干细胞培养试剂盒，其特征在于：所述细胞培养液A和细胞培养液B均为无菌，并各自独立包装。
6.根据权利要求1所述的间充质干细胞培养试剂盒，其特征在于：还包括细胞洗涤液和细胞消化液；所述细胞洗涤液为生理盐水；所述细胞消化液为CollagenaseII水溶液。
7.根据权利要求6所述的间充质干细胞培养试剂盒，其特征在于：所述细胞消化液为浓度为0.2g/100ml的CollagenaseII水溶液。
8.根据权利要求6所述的间充质干细胞培养试剂盒，其特征在于：所述生理盐水由氯化钠和水组成，氯化钠的浓度为0.9g/100ml。
9.根据权利要求6所述的间充质干细胞培养试剂盒，其特征在于：所述细胞培养液A、细胞培养液B、细胞洗涤液和细胞消化液均为无菌，并各自独立包装。
10.权利要求1～9任一所述间充质干细胞培养试剂盒在间充质干细胞培养中的应用。
CN201610201894.XA 2016-03-31 2016-03-31 间充质干细胞培养试剂盒 Withdrawn CN105713872A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610201894.XA CN105713872A (zh) 2016-03-31 2016-03-31 间充质干细胞培养试剂盒

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610201894.XA CN105713872A (zh) 2016-03-31 2016-03-31 间充质干细胞培养试剂盒

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105713872A true CN105713872A (zh) 2016-06-29

Family

ID=56160587

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610201894.XA Withdrawn CN105713872A (zh) 2016-03-31 2016-03-31 间充质干细胞培养试剂盒

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105713872A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106566802A (zh) * 2016-08-31 2017-04-19 山东景源生物科技有限公司 一种脐血间充质干细胞培养试剂盒的制备方法
CN106676064A (zh) * 2017-01-20 2017-05-17 深圳中健生物技术有限公司 一种脐带血间充质干细胞培养液

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102965335A (zh) * 2011-09-01 2013-03-13 北京清美联创干细胞科技有限公司 用于间充质干细胞培养的试剂盒及其应用
CN103087982A (zh) * 2011-10-27 2013-05-08 北京清美联创干细胞科技有限公司 一种快速分离脂肪间充质干细胞的试剂盒及方法
CN105418544A (zh) * 2015-12-29 2016-03-23 吴金凤 一种原鲁烷型倍半萜类化合物及其制备方法和医药用途

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102965335A (zh) * 2011-09-01 2013-03-13 北京清美联创干细胞科技有限公司 用于间充质干细胞培养的试剂盒及其应用
CN103087982A (zh) * 2011-10-27 2013-05-08 北京清美联创干细胞科技有限公司 一种快速分离脂肪间充质干细胞的试剂盒及方法
CN105418544A (zh) * 2015-12-29 2016-03-23 吴金凤 一种原鲁烷型倍半萜类化合物及其制备方法和医药用途

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHRISTINA L. NORD，等: "Sesquiterpenes from the saprotrophic fungus Granulobasidium vellereum (Ellis & Cragin) Jülich", 《PHYTOCHEMISTRY》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106566802A (zh) * 2016-08-31 2017-04-19 山东景源生物科技有限公司 一种脐血间充质干细胞培养试剂盒的制备方法
CN106676064A (zh) * 2017-01-20 2017-05-17 深圳中健生物技术有限公司 一种脐带血间充质干细胞培养液

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Chong et al. Human peripheral blood derived mesenchymal stem cells demonstrate similar characteristics and chondrogenic differentiation potential to bone marrow derived mesenchymal stem cells
Sensebé et al. Good manufacturing practices production of mesenchymal stem/stromal cells
CN109234229B (zh) 从胎盘血管分离间充质干细胞的方法和所用消化酶组合物
Hudson et al. A defined medium and substrate for expansion of human mesenchymal stromal cell progenitors that enriches for osteo-and chondrogenic precursors
CN102965335A (zh) 用于间充质干细胞培养的试剂盒及其应用
CN105238750B (zh) 一种复苏脐带间充质干细胞的方法
CN103146647B (zh) 一种体外培养间充质干细胞的方法
CN105950550A (zh) 一种间充质干细胞无血清培养基、细胞分离培养方法
US20050059152A1 (en) In vitro culture of mesenchymal stem cells (MSC) and a process for the preparation thereof for therapeutic use
CN109706115B (zh) 一种小鼠骨髓间充质干细胞细胞系的构建方法
CN106318906A (zh) 一种大规模培养人脐带间充质干细胞的方法
CN108300690A (zh) 一种脂肪间充质干细胞的分离培养方法和无血清培养基
WO2013146992A1 (ja) 歯髄由来の多能性幹細胞の製造方法
WO2018143378A1 (ja) 歯髄組織由来細胞から歯髄幹細胞を調製する方法
CN104651305A (zh) 一种利用脐带间充质干细胞获取生物活性蛋白的方法
CN103087982A (zh) 一种快速分离脂肪间充质干细胞的试剂盒及方法
CN107083359B (zh) 干细胞培养基及干细胞分离方法
CN109628388B (zh) 用消化酶组合物从胎盘血管分离间充质干细胞
CN105713872A (zh) 间充质干细胞培养试剂盒
CN106591230A (zh) 人脐带间充质干细胞培养液及其培养方法
Gregory et al. Fundamentals of culture and characterization of mesenchymal stem/progenitor cells (MSCs) from bone marrow stroma
Talakoob et al. Capability of cartilage extract to in vitro differentiation of rat mesenchymal stem cells (MSCs) to chondrocyte lineage
CN105779385A (zh) 一种间充质干细胞培养试剂盒
CN105624106A (zh) 一种用于培养间充质干细胞的试剂盒
US11111480B2 (en) Culture media for multipotent stem cells

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB02 Change of applicant information

Address after: 810016 Qinghai University, 251 Ning Ning Road, Chengbei District, Qinghai, Xining

Applicant after: Zhao Shunying

Address before: 211100 Nanjing Medical University, 818 East Tianyuan Road, Jiangning District, Jiangsu, Nanjing

Applicant before: Zhao Shunying

COR Change of bibliographic data
C04 Withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20160629