CN105682664A - 利用岩藻糖基化低聚糖预防或治疗非分泌型母亲诞下或喂养的婴儿的变态反应的组合物，尤其适用于有风险的婴儿或剖腹产婴儿 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及包含至少一种岩藻糖基化低聚糖的组合物，其用于在婴儿或幼儿中预防变态反应和/或治疗变态反应和/或减少变态反应的发生或风险，所述婴儿或幼儿由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母亲诞下或是由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母乳喂养。本发明预测了所述组合物在婴儿配方食品、乳强化剂或儿童食品中的使用。
Description
技术领域
本发明涉及用于预防和/或治疗具有高变态反应风险婴儿亚群的变态反应的组合物。
背景技术
相关领域探讨过采用不同方案来预防和/或治疗高变态反应风险婴儿亚群的变态反应，例如用益生菌或低聚糖(尤其是人乳低聚糖)喂养此类婴儿。所有人乳低聚糖(HMO)是人乳中继乳糖和脂肪之后的第三大固体成分。HMOs通常在还原端含有乳糖，而在非还原端含有碳水化合物芯，该碳水化合物芯通常含岩藻糖或唾液酸。目前已从人乳中分离出大约100种低聚糖并对其进行了表征，然而这些低聚糖只占尚未表征低聚糖总数的极小一部分。建议所有婴儿采用母乳喂养。然而，在一些情况下，由于某些医学原因，母乳喂养不充足或不能实现，或者母亲根本不选择母乳喂养。本领域已针对这些情况研发了婴儿配方食品(Infantformula)。还研发了用特殊成分丰富母乳或婴儿配方食品的营养的强化剂(fortifier)。
本领域应不同要求，使用HMO成分(例如，岩藻糖基化低聚糖、乳糖-N-四糖、乳糖-N-新四糖或唾液酸化低聚糖)研制出了数种组合物。
举例来说，美国儿童医院医学中心(Children’shospitalmedicalcenter)发表的WO2005055944描述了一种药物组合物，其中包含可药用载体和一种分子，该分子在键合到半乳糖基的α-2键、α-3键或α-4键中含岩藻糖基。WO2005055944还描述了该药物组合物中包含的多种分子，例如2’-岩藻糖基乳糖。该申请可用于预防或治疗包括呼吸道感染或肠道感染在内的多种感染，治疗对象范围很广(婴儿、儿童或成人)，所以并不专精。
还有一些文献专门探讨了HMO与益生菌菌株或其他特殊成分的各种关系。
例如，NestecS.A.公司发表的WO2009/077352涉及适用于预防机会性感染的组合物，该组合物中的双歧杆菌属(Bifidobacterium)益生菌与岩藻糖基化低聚糖表现出独特的协同关系。该发明从可预防的多种机会性感染中列举了呼吸道感染。该发明特别针对有免疫缺陷的个体，例如早产婴儿(preterm)和新生儿、大龄儿童，甚至是由于正表现病症或正患疾病(如HIV)或由于接受了现有病症治疗(例如，克罗恩氏病、类风湿性关节炎治疗，或癌症化疗)而导致免疫系统不能充分发挥作用的成人。
NestecS.A.公司发表的WO2009/112361涉及另一种适用于预防机会性感染的组合物，该组合物中的N-乙酰氨基乳糖苷和/或含N-乙酰氨基乳糖苷的低聚糖与乳杆菌属(Lactobacillus)益生菌表现出独特的协同关系。该发明列举了多种病症，例如上呼吸道病原性感染。
雅培(Abbott)发表的WO2012/092154涉及使用HMO来改善婴儿或幼儿和儿童的呼吸道健康状况的方法。然而，该申请列出了很多HMO，还提出了不同HMO的多种组合。该申请声称，该组合物同时包含HMO与类胡萝卜素时，似乎才有效果。
NestecS.A.公司发表的WO2012076321公开了用于治疗一般人群的皮肤病的特效低聚糖。
纽迪希亚(Nutricia)发表的WO2011/136648提出了使用包含HMO(例如2-岩藻糖基化低聚糖)的组合物来制备营养组合物，供Lewis血型为Le(a-/b+)或Le(a-/b-)和/或Le(x-/y+)或Le(x-/y-)的婴儿食用。但是该申请并未提到可用于预防和/或治疗变态反应。
综上所述，之前的研究并未关注与高风险对象的变态反应相关的健康益处。虽然这些高风险对象人数不多，但由于他们更易具有变态反应及相关并发症，所以应被给予更多关注，且相比其他婴儿需要更精心的呵护。
因此，需要专为这些有风险的婴儿或幼儿研发一种可有效预防、减少和/或治疗变态反应的组合物。
还需要开发向对象(尤其是高风险对象)提供这种抗变态反应健康益处的特定方式。由于年幼对象(例如婴儿或幼儿)特别娇弱，不宜接受传统的药物干预，所以提供这种健康益处的方式应当是特别适合这些年幼对象的干预方式。另外，提供这种健康益处的方式还应当不引发副作用和/或不仅方便实施、还能获得有风险婴儿或幼儿的父母或健康护理人员广泛认可。
再者，这种方式的价格对大多数人来说应当公道合理，而且大多数人都负担得起。
综上所述，需要向需求获得健康益处的特定人群(而非范围广泛、人数众多的对象)提供最恰当的促健康物质。
发明内容
发明人能识别具有变态反应表现的更高风险的婴儿。这类婴儿是由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母亲诞下的婴儿，或由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母乳喂养的婴儿。更具体地讲，有风险婴儿是指有额外的风险因素的婴儿，这些风险因素包括：有变态反应家族史、剖腹产和/或有兄弟姐妹。
发明人已发现，包含至少一种岩藻糖基化低聚糖的组合物可用于所述有风险婴儿或幼儿并产生良好的抗变态反应的效果。
因此，本发明提供了包含至少一种岩藻糖基化低聚糖的组合物，用于预防、减少和/或治疗尤其是婴儿或幼儿亚群体的变态反应。
附图说明
图1示出了顺产婴儿群体或剖腹产婴儿群体在出生后前几个月由分泌型母亲的母乳或非分泌型(non-secretor)母亲的母乳喂养后，在2岁和5岁时的变态反应性疾病发病率。
图2示出了顺产婴儿群体或剖腹产婴儿群体在出生后前几个月由分泌型母亲的母乳或非分泌型母亲的母乳喂养后，在2岁和5岁时的湿疹和特应性疾病发病率。
图3分别以两个图示出了婴儿在出生后前几个月摄入的母乳中的2FL含量与两岁之前是否患湿疹(左图)以及特应性疾病(右图)之间的关系。
图4分别以两个图示出了婴儿在出生后前几个月摄入的母乳中的LNT/LNnT比值与两岁之前是否患湿疹(左图)以及特应性疾病(右图)之间的关系。
具体实施方式
定义：
本文使用了下列术语和表述，其含义如下。
术语“婴儿”是指不满1岁的儿童。
术语“幼儿”是指1至3岁的儿童，也称学步儿童。
“剖腹产婴儿或幼儿”是指通过剖腹产术分娩的婴儿。这意味着婴儿不是经阴道分娩的。
“早产婴儿”或“早产儿(premature)”，是指不足月生产的婴儿或幼儿。通常是指胎龄不足36周的活产婴儿。
术语“营养组合物”是指供给对象养分的组合物。一般情况下，营养组合物经胃肠道或不经胃肠道摄入，或者以口服或静脉注射方式摄入，并通常包含脂质或脂肪源与蛋白质源。
术语“低变应原营养组合物”是指不大可能引起变态反应的营养组合物。
术语“合成组合物”是指采用化学和/或生物方法制出的混合物，该混合物的化学性质可能与哺乳动物乳汁中天然存在的混合物相同。
术语“婴儿配方食品”是指专用于供给4至6个月婴儿营养，而且本身可满足这类婴儿的多种营养需求的食品(符合欧盟委员会1991年5月14日颁发的针对婴儿配方食品和较大婴儿配方(follow-oninfantformular)食品的第91/321/EEC号指令中第1.2条的规定)。
术语“1段婴儿配方食品(starterinfantformula)”是指专用于供给不满4个月婴儿营养的食品。
术语“较大婴儿配方食品(follow-oninfantformula)”是指专用于供给4个月以上婴儿营养、并且是这类婴儿逐渐多元化的饮食中的主要流质食物的食品。
术语“婴孩食物(babyfood)”是指专用于供给不满1岁婴儿营养的食品。
术语“婴儿谷物组合物”是指专用于供给不满1岁婴儿营养的食品。
术语“强化剂”是指适宜与母乳或婴儿配方食品混合的液态或固态营养组合物。
术语“离乳期”是指在婴儿饮食中逐步用其他食物替代母乳这一时期。
“母乳”应理解为母亲的初乳或成熟乳。
在本发明中，“有风险婴儿或幼儿”是指具有后述特征的对象：患变态反应的风险(尤其是出现皮肤变态反应的风险)相比正常情况更高(即，比总群体的平均发病风险高)。这种风险可通过婴儿出生后6个月、1年、2年或5年内高发变态反应(例如，变态反应性鼻炎、皮疹、特应性皮炎等)而体现出来。这种风险还包括这类变态反应长期发展的风险，包括3、5、10、15或20岁后发生变态反应的风险。
本发明提到的“有风险”婴儿或幼儿是指至少符合以下标准中的一项的对象：
i)由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母亲诞下，或由至少一种岩
藻糖基化低聚糖不足的母乳喂养
ii)具有至少一个兄弟姐妹
iii)经剖腹产手术诞下
iv)有变态反应家族史
更具体地讲，本发明关系到婴儿，尤其是有风险婴儿，因为这些婴儿符合标准(i)，并可选地符合任何其他风险标准项，例如(ii)、(iii)和/或(iv)。
变态反应家族史：
倘若对象的父母至少一方是变态反应性体质和/或反复出现变态反应，那么就认为该对象有变态反应家族史。应当理解，有变态反应家族史的儿童更容易是变态反应性体质，或更容易变态反应。
变态反应、湿疹、特应性皮炎：
变态反应在任何年龄均可发生，但本发明特别关注的是不满2岁或5岁的对象表现的变态反应的表现。但是，预防变态反应的措施可能有长期效果，也就是说，能够减少对象在满2岁或5岁后的任意年龄的变态反应的发生，甚至使对象在以后不再有变态反应的表现。在一个实施方案中，本发明的组合物用于不满2岁或5岁的对象时，表现出“抗变态反应性”效果。在一个实施方案中，“抗变态反应性”效果看起来是长期的，例如，在对象满10岁、15岁或20岁前一直有效。“抗变态反应性”效果可能涵盖预防变态反应、治疗变态反应、减少变态反应的发生或风险，或这些效果的任意组合。
总的来说，“变态反应”可能引发特殊的免疫表现、炎症表现、呼吸系统表现(例如，哮喘、变态反应性鼻炎)或皮肤表现，这些特殊表现详细记载于本领域的文献中。
特应性皮炎是一种慢性皮肤瘙痒疾病，常见于儿童，但可发生在任何年龄。也将其称为湿疹或特应性湿疹。在幼儿年龄组中，观察到食物变态反应与特应性皮炎关系密切，通常怀疑食物变态反应导致儿童患上特应性皮炎。
特应性皮炎常见于有特应性倾向的人群。“有特应性倾向”是指，这类人可能发展出下列三种密切相关病症中的任一种甚至全部：特应性皮炎、哮喘、花粉热(变态反应性鼻炎)。
特应性皮炎症候的发生过程如下。皮肤敏感人群响应于某些诱因，爆发成片皮疹。这些诱因因人而异。就婴儿或幼儿来说，应注意的常见诱因包括牛奶和婴儿配方食品中其他可能引起变态反应的成分，例如小麦或大豆。特应性皮炎可发展为恶性循环。有些诱因会刺激儿童皮肤，使皮肤变红、发炎。此时皮肤会发痒，儿童便会抓挠皮肤，导致皮炎加重。于是皮肤的保护外层受损，感染区域变得对刺激物更敏感，而且更易变得干燥。若婴儿持续接触最初触发前述不良现象的诱因，皮疹将继续加重，形成恶性循环。
目前尚未确定特应性皮炎的单一病因。特应性皮炎可能表现不止一种症状。相关领域提出了多种理论，来解释这种疾病的基础发病机制。目前正在研究丝聚蛋白基因突变、皮肤细胞(角质细胞)缺陷、免疫系统、皮肤表面微生物(细菌、病毒、酵母)以及许多其他因素的作用。
一般人群或有变态反应风险的人群或变态反应性体质(因此生病)人群都可能受到各种皮肤疾病和皮肤病症的困扰。
因为婴儿、婴孩或幼儿成长迅速，细胞分裂增殖速度快，所以皮肤娇嫩，易患皮肤病；因此这些皮肤疾病和皮肤病症(特别是特应性皮炎)对婴儿、婴孩或幼儿的影响尤其恶劣。无变态反应家族史却有变态反应的婴儿越来越多。
WO20112076321A1(NorbertSprenger/NestecS.A.)描述了使用特别的低聚糖来治疗一般人群的皮肤病和/或特应性皮炎。
“至少一种岩藻糖基化低聚糖不足”：
“至少一种岩藻糖基化低聚糖不足”这一表述，是指婴儿母亲体内只表达很少量的或完全不表达岩藻糖基化低聚糖(或者至少一种岩藻糖基化低聚糖)，所述岩藻糖基化低聚糖更优选地是指包含2’-岩藻糖基-表位的岩藻糖基化低聚糖(也称2-岩藻糖基化低聚糖)，最优选地是指2FL。
一般情况下，如果母亲的初乳或成熟乳中不存在或存在少量所述岩藻糖基化低聚糖，则普遍认为“至少一种岩藻糖基化低聚糖不足”。或者，通过对其他体液执行遗传分析或测定，来判断是否“至少一种岩藻糖基化低聚糖不足”。
在一个实施方案中，所述母乳缺少、几乎没有(depleted)或只含极少量岩藻糖基化低聚糖(或者至少一种岩藻糖基化低聚糖)，所述岩藻糖基化低聚糖尤其是指包含2’-岩藻糖基-表位的岩藻糖基化低聚糖(也称2-岩藻糖基化低聚糖)，例如2FL。这种母乳可能不含(或几乎不含)岩藻糖基化低聚糖，或只含少量岩藻糖基化低聚糖，例如不足正常母乳中岩藻糖基化低聚糖平均含量的50％、40％、35％、30％、25％、20％、15％、10％、5％、3％或2％。
在一个实施方案中，这种母乳或喂给婴儿的这种母乳完全没有至少一种岩藻糖基化低聚糖，所述岩藻糖基化低聚糖优选地是指包含2’-岩藻糖基-表位的岩藻糖基化低聚糖(也称2’-岩藻糖基化低聚糖)，更优选地是指2FL。“完全没有”是指用常规分析方法无法检测到低聚糖。
在一个实施方案中，这种母乳或喂给婴儿的这种母乳几乎没有至少一种岩藻糖基化低聚糖，其中“几乎没有”是指，母乳中所述岩藻糖基化低聚糖(优选地是指包含2’-岩藻糖基-表位的岩藻糖基化低聚糖，更优选地是指2FL)的浓度不足3000mg/L、2000g/L、1000mg/L、500mg/L、300mg/L、100mg/L、50mg/L、10mg/L或1mg/L。
在一个实施方案中，只用母亲的初乳或成熟乳喂哺婴儿或幼儿、除母亲的初乳或成熟乳外还用别的食物喂哺婴儿或幼儿，或者暂时用母亲的初乳或成熟乳喂哺婴儿或幼儿。
在一个实施方案中，将本发明的组合物当作母亲的初乳或成熟乳的补充组合物提供给婴儿或幼儿。在一个实施方案中，例如在婴儿满1个月、2个月或4个月后，在至少一段时间内(例如在至少1、2、4或6个月内)将本发明的组合物当作唯一的或主要的营养组合物提供给婴儿或幼儿。优选的是，婴儿或幼儿至少在其诞生后前两周，前1、2、4或6个月由母亲的初乳和/或成熟乳喂养。在一个实施方案中，在用母乳喂养婴儿或幼儿这一段时期后，再将本发明的组合物提供给婴儿或幼儿；或者在用母乳喂养婴儿或幼儿的这一段时期内将本发明的组合物提供给婴儿或幼儿。
在具体实施方案中，用非分泌型母亲的母乳喂养婴儿或幼儿。众所周知，与特殊糖基转移酶相关的遗传变异会使母乳中的特定益生元成分和聚糖结构改变。分泌型和非分泌型亚群的表型差异的基础源于遗传多态性，这种遗传多态性导致分泌型母亲体内表达有特殊功能的α-1,2-岩藻糖基转移酶(也称岩藻糖基转移酶-2或Fut2)，而非分泌型母亲体内不表达这种功能性α-1,2-岩藻糖基转移酶。因此，该基因中的多种突变导致非分泌型人群的细胞向体液(例如，母乳)中分泌的2’-岩藻糖基聚糖(低聚糖)不足。可采用Lewis血液分型体系来确定某人是分泌型(sec+或sec+)、还是非分泌型(sec-或sec-)，Lewis血液分型体系是技术人员熟知的，可在WO2011136648中找到其详细资料。在本发明的一个实施方案中，母亲是非分泌型母亲。
WO2011136648A1(BerndStahl,NutriciaNV)的公开内容奠定了使用特殊低聚糖供给婴儿营养这一做法的基础，该专利按婴儿本身或其母亲的Lewis血型，筛选受益对象。但该专利并未公开具体的健康效果。
兄弟姐妹：兄弟姐妹可以是婴儿的兄弟姐妹。在一些实施方案中，婴儿具有至少一个比其年长的兄弟姐妹，也就是说，婴儿在出生时至少就有一个兄弟姐妹。兄弟姐妹往往是儿童(包括幼儿)，他/她会与许多人密切接触(例如在学校或幼儿园)，所以很可能把过敏原带回家，也极易感染各种疾病(例如，上呼吸道感染)。
术语“HMO”或“HMOs”是指人乳低聚糖。这些碳水化合物高度耐受酶水解，这表明其表现的重要功能可能不与其热值直接相关。本领域已特别指出，这些碳水化合物在婴儿或幼儿的早期发育(例如，免疫系统成熟)过程中发挥关键作用。在人乳中发现了许多不同种类的HMO。每种低聚糖的结构都以葡萄糖、半乳糖、唾液酸(N-乙酰神经氨酸)、岩藻糖和/或N-乙酰基葡糖胺与这些分子间各式各样的键的组合为基础，因此人乳含有大量种类各不相同的低聚糖，迄今已鉴定出逾130种低聚糖结构。几乎所有低聚糖的还原端都有乳糖分子，且非还原端的末端位置都由唾液酸和/或岩藻糖(如果有的话)占据。HMO可以呈酸性(例如，含带电荷唾液酸的低聚糖)，也可以呈中性(例如，岩藻糖基化低聚糖)。
“HMO前体”是用于生产HMO的关键化合物，例如唾液酸和/或岩藻糖。
“唾液酸化低聚糖”是含带电荷唾液酸的低聚糖，即含唾液酸残基的低聚糖。这种低聚糖呈酸性。例子包括3-SL(3'-唾液酸乳糖)和6-SL(6'-唾液酸乳糖)。
“岩藻糖基化低聚糖”是含岩藻糖残基的低聚糖。这种低聚糖呈中性。例子包括2-FL(2’-岩藻糖基乳糖)(缩写为2FL、2’FL或2’-FL)、3-FL(3-岩藻糖基乳糖)、二岩藻糖基乳糖、乳糖-N-岩藻戊糖(lacto-N-fucopentaose)(例如，乳糖-N-岩藻戊糖I、乳糖-N-岩藻戊糖II、乳糖-N-岩藻戊糖III、乳糖-N-岩藻戊糖V)、乳糖-N-岩藻己糖(lacto-N-fucohexaose)、乳糖-N-二岩藻己糖(lacto-N-difucohexaose)I、岩藻糖基乳糖-N-己糖(fucosyllacto-N-hexaose)、岩藻糖基乳糖-N-新己糖(fucosyllacto-N-neohexaose)、二岩藻糖基乳糖-N-己糖(difucosyllacto-N-hexaose)I、二岩藻糖基乳糖-N-新己糖(difucosyllacto-N-neohexaose)II以及这些物质的任意组合。虽然并不希望受理论约束，但据信，岩藻糖基化低聚糖的岩藻糖基表位可在黏膜表面充当“诱饵(decoy)”。该表位可利用竞争效应来防止和/或限制病原体(病毒或细菌)或病原体所分泌物质(如毒素)引发感染，尤其是避免病原体或病原体所分泌物质与天然配体结合，从而降低感染(特别是上呼吸道感染)风险。
“包含2’-岩藻糖基-表位的岩藻糖基化低聚糖”和“2-岩藻糖基化低聚糖”这两种表述涵盖了一系列同源岩藻糖基化低聚糖，这些同源的岩藻糖基化低聚糖都包含2’-岩藻糖基-表位，因而可推测它们具有某种同源功能。虽然并不希望受理论约束，但据信，这些岩藻糖基化低聚糖的2’-岩藻糖基-表位特别针对与上呼吸道感染相关的病原体(或病原体所分泌物质)。
术语“N-乙酰化低聚糖”涵盖“N-乙酰氨基乳糖苷”和“包含N-乙酰氨基乳糖苷的低聚糖”。这种低聚糖是包含N-乙酰氨基乳糖苷残基的中性低聚糖。合适的例子包括LNT(乳糖-N-四糖)和LNnT(乳糖-N-新四糖)。
术语“益生元”是指有选择地促进有益健康细菌(例如，人体结肠中的双歧杆菌)生长和/或其活性，而对宿主产生有利作用的不能被消化的碳水化合物(GibsonGR,RoberfroidMB.Dietarymodulationofthehumancolonicmicrobiota:introducingtheconceptofprebiotics.JNutr.1995；125:1401-12(GibsonGR、RoberfroidMB.，“用饮食调整人结肠中的微生物菌群：介绍益生元的概念”，《营养学杂志》，1995年，第125卷，第1401-1412页))。
术语“益生菌”是指有益于宿主身心健康的微生物细胞制剂或微生物细胞成分。(SalminenS,OuwehandA.BennoY.etal.“Probiotics:howshouldtheybedefined”TrendsFoodSci.Technol.1999:10107-10(SalminenS、OuwehandA.、BennoY.等人，“为益生菌下定义的方法”，《食品科学与技术趋势》，1999年，第10卷，第107-110页))。微生物细胞一般为细菌或酵母。
术语“cfu”应理解为菌落形成单位。
除非另外指明，否则所有百分比均按重量计。
以下将进一步详细讲述本发明。应当注意，本申请描述的多个方面、特征、实施例和实施方案可以相容和/或可以组合到一起。
另外，在本发明的上下文中，术语“包含”或“包括”不排除其他可能存在的组成要素。本发明(包括本文所述的多个实施方案)提到的组合物可包含下列要素、由或基本上由下列要素组成：本文所述的基本要素和必要限制，以及本文所述的任何其他或可选(或者说视需求来定)的成分、组分或限制。
因此，本发明的首要目的是提供一种包含至少一种岩藻糖基化低聚糖的组合物，该组合物用于(或适用于)预防、减少和/或治疗下列婴儿或幼儿的变态反应：由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的非分泌型母亲诞下的婴儿或幼儿，或由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母乳喂养的婴儿或幼儿。
我们假设，这类受试对象不会接触岩藻糖基化低聚糖(尤其是2-FL)，和/或无法获得需要量的岩藻糖基化低聚糖(尤其是2-FL)。实际上，非分泌型母亲的母乳不能向这类受试对象提供必需量的岩藻糖基化低聚糖。我们还假设，适量的岩藻糖基化低聚糖(尤其是2FL)可向这类受试对象提供变态反应保护。
在一个实施方案中，由非分泌型母亲诞下的婴儿的受试对象，其母亲的母乳中岩藻糖基化低聚糖(尤其是2FL)不足或几乎没有岩藻糖基化低聚糖(尤其是2FL)。在一个实施方案中，受试对象完全没有吃过人乳，或者只在出生后前1周、前2周、前4周、前2个月或4个月由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的乳汁喂养过。在这些情况下，用至少一种岩藻糖基化低聚糖(例如2FL)为受试对象补充营养，会保护受试对象使其不发生变态反应，或减少其变态反应风险。
在一个实施方案中，至少在婴儿或幼儿诞生初期(诞生后前1周或前2周，或前1、2、4或6个月)用岩藻糖基化低聚糖(尤其是2FL)含量低或不含这种低聚糖的婴儿配方食品喂养婴儿或幼儿。
在一个实施方案中，本发明的营养组合物是全营养组合物(满足受试对象大部分或全部营养需求)。在另一个实施方案中，本发明的营养组合物是用来(例如)补充人乳或者婴儿配方食品或较大婴儿配方食品的营养的补充剂或强化剂。
在一个实施方案中，受试对象(婴儿或幼儿)一出生，就给予其本发明的营养组合物。在一个实施方案中，受试对象离乳后(满1、2、3、4、6个月后)，才给予其本发明的营养组合物。可用本发明的营养组合物持续喂养受试对象1、2、4周，1、2、4、6个月，或者一或两年。
应当理解，受试对象一出生或出生后不久就给予其本发明的营养组合物，和/或用本发明的营养组合物持续喂养受试对象至少4或6周，在这些情况下，用本发明的营养组合物进行的营养干预看起来能够更有效提供与变态反应有关的健康益处。实际上，我们假设这种营养干预能够训练婴儿或幼儿的免疫系统，便于更充分地调节其体内的致变态反应途径。
在一个实施方案中，受试对象在出生后前1、2或4周由人乳喂养，或者出生后立即或在满1周、2周或4周后由人乳喂养1、2或4个月。
在本发明的一个实施方案中，每100g营养组合物中的至少一种岩藻糖基化低聚糖或2FL超过0.05g、1g、2g、5g或10g。在一个实施方案中，每100g营养组合物中的至少一种岩藻糖基化低聚糖或2FL介于0.05g与10g之间、0.1g与3g之间、或1g与2g之间。
在一些实施方案中，用非分泌型母亲(sec–母亲)的母乳喂养婴儿或幼儿。
可采用Lewis血液分型体系来确定婴儿或幼儿是分泌型、还是非分泌型。在一个具体实施方案中，婴儿或幼儿为分泌型。这意味着该婴儿或幼儿体内会表达至少一种岩藻糖基化低聚糖(尤其是包含2’-岩藻糖基-表位的至少一种岩藻糖基化低聚糖(也称2-岩藻糖基化低聚糖)，例如2FL)的一些表面抗原表位(或类似表位)。
在一个具体实施方案中，采用Lewis血液分型体系确定婴儿或幼儿为分泌型，但其由非分泌型(sec-)母亲诞下。
在一个具体实施方案中，采用Lewis血液分型体系确定婴儿或幼儿为非分泌型，其由同为非分泌型(sec-)的母亲诞下。
应当理解，将本发明的组合物提供给受试对象(尤其是有变态反应风险的受试对象)时，其效果在统计学上更为显著。
在一个实施方案中，将本发明的组合物用于剖腹产婴儿或幼儿或早产儿。实际上，这类婴儿或幼儿更容易是变态反应性体质，或更容易变态反应。有人认为，这类婴儿或幼儿出生时免疫系统尚未成熟，或未接触阴道菌群，这会影响其免疫耐受发育，使变态反应风险升高。
由图1可清楚看出，由非分泌型母亲剖腹产诞下的婴儿在2岁时的变态反应性疾病发病率较高。
与此类似，由图2可看出，由非分泌型母亲剖腹产诞下的婴儿的特应性疾病和湿疹发病率较高。
在一个实施方案中，将本发明的组合物用于有兄弟姐妹(尤其是出生时就有兄弟姐妹)的婴儿。实际上，这种婴儿更容易发生变态反应，并且发生变态反应的风险更高。
在一个实施方案中，将本发明的组合物用于有变态反应家族史或家族特应性疾病史的受试对象。因为这类受试对象有变态反应家族史或家族特应性疾病史，所以尤其有变态反应风险，从而更能受益于本发明的组合物。
在一些其他实施方案中，婴儿兼有多种导致变态反应的风险，例如经剖腹产诞下并且有变态反应家族史，或者经剖腹产诞下并且具有至少一个兄弟姐妹。
本发明的组合物包含至少一种岩藻糖基化低聚糖。本发明的组合物可能包含一种或多种岩藻糖基化低聚糖。岩藻糖基化低聚糖可选自2’-岩藻糖基乳糖(2-FL或2FL)、3’-岩藻糖基乳糖、二岩藻糖基乳糖、乳糖-N-岩藻戊糖(例如，乳糖-N-岩藻戊糖I、乳糖-N-岩藻戊糖II、乳糖-N-岩藻戊糖III、乳糖-N-岩藻戊糖V)、乳糖-N-岩藻己糖、乳糖-N-二岩藻己糖I、岩藻糖基乳糖-N-己糖、岩藻糖基乳糖-N-新己糖(例如，岩藻糖基乳糖-N-新己糖I、岩藻糖基乳糖-N-新己糖II)、二岩藻糖基乳糖-N-己糖I、二岩藻糖基乳糖-N-新己糖I、二岩藻糖基-乳糖-N-新己糖、二岩藻糖基乳糖-N-新己糖II、岩藻糖基-对-乳糖-N-己糖、三岩藻糖基-对-乳糖-N-己糖I以及这些物质的任意组合。
在一些具体实施方案中，岩藻糖基化低聚糖包含2’-岩藻糖基-表位。这种岩藻糖基化低聚糖可选自(例如)2’-岩藻糖基乳糖、二岩藻糖基乳糖、乳糖-N-岩藻戊糖、乳糖-N-岩藻己糖、乳糖-N-二岩藻己糖、岩藻糖基乳糖-N-己糖、岩藻糖基乳糖-N-新己糖、二岩藻糖基乳糖-N-己糖、二岩藻基-乳糖-N-新己糖、二岩藻糖基乳糖-N-新己糖、岩藻糖基-对-乳糖-N-己糖以及这些物质的任意组合。
乳糖-N-岩藻戊糖的一些例子包括乳糖-N-岩藻戊糖I、乳糖-N-岩藻戊糖II、乳糖-N-岩藻戊糖III、乳糖-N-岩藻戊糖V。
在本发明的一个具体实施方案中，岩藻糖基化低聚糖为2’-岩藻糖基乳糖(2-FL)。
可采用色谱技术或过滤技术从天然来源(例如动物乳汁)中分离出岩藻糖基化低聚糖。或者，也可利用特殊的岩藻糖基转移酶和/或岩藻糖苷酶，采用生物技术手段制得岩藻糖基化低聚糖，其中生物技术手段包括基于酶(重组酶或天然酶)的发酵技术、或微生物发酵技术。在采用生物技术手段的情况下，微生物可表达天然的酶和底物，或者可被工程改造成能够产生相应的底物和酶。可使用单一微生物培养物和/或混合培养物。可以最初具有任意聚合度(DP)的受体底物为起始物，逐步聚合(从DP＝1开始)形成岩藻糖基化低聚糖。或者，可以乳糖和游离岩藻糖为原料，化学合成岩藻糖基化低聚糖。岩藻糖基化低聚糖也可从(例如)日本协和发酵工业株式会社(Kyowa,Hakko,Kogyo)购得。
根据本发明的组合物以干重计每100g可包含0.1g-10g岩藻糖基化低聚糖，例如0.1g-8g、0.1g-4g、0.5g-3g的岩藻糖基化低聚糖。
在具体实施例中，本发明的组合物中的岩藻糖基化低聚糖含量为0.5-10g/L、0.5-5g/L、1-4.5g/L、2-4g/L、或2.5-3.5g/L。可根据婴儿需要调整岩藻糖基化低聚糖的用量。在一些实施例中，本发明的组合物中的岩藻糖基化低聚糖含量可为0.5-2g/L，或0.7-1.8g/L。在另一些实施例中，本发明的组合物中的岩藻糖基化低聚糖(尤其是2FL)含量可能更高，例如5-10g/L，或6-8g/L。
根据本发明的组合物可包含至少另外一种人乳低聚糖和/或其前体。本发明的组合物可能包含一种或数种另外的人乳低聚糖和/或其前体，例如，除前述至少一种岩藻糖基化低聚糖之外还有1、2、3、4、5种，甚至更多种HMO(和/或其前体)。
这些另外的人乳低聚糖和/或其前体可选自N-乙酰化低聚糖、唾液酸化低聚糖、唾液酸、岩藻糖、和这些物质的任意组合。
因此，根据本发明的组合物还可包含N-乙酰化低聚糖。本发明的组合物可能包含一种或多种N-乙酰化低聚糖。
N-乙酰化低聚糖可选自乳糖-N-四糖(LNT)、乳糖-N-新四糖(LNnT)以及这两种物质的组合。
在一些具体实施方案中，N-乙酰化低聚糖为LNT。
在一些具体实施方案中，N-乙酰化低聚糖为LNnT。
在一些具体实施方案中，N-乙酰化低聚糖为LNT与LNnT的混合物。
在一些具体实施方案中，本发明的组合物既包含LNT、又包含LNnT，LNT:LNnT介于5:1和1:2之间，或2:1-1:1，或2:1.2-2:1.6。在一个实施方案中，LNT和LNnT的比值小于8、小于6或小于4。
可采用酶转移法(如美国第5,288,637号专利和WO96/10086中所述)，使用糖基转移酶将供体部分的糖单元转移到受体部分，来化学合成LNT和LNnT。或者，可按Wrodnigg,T.M.；Stutz,A.E.(1999)Angew.Chem.Int.Ed.38:827-828(Wrodnigg,T.M.、Stutz,A.E.，1999年，《德国应用化学》，第38卷，第827-828页)中所述步骤制备LNT和LNnT，具体操作为：将游离的或结合到低聚糖(例如，乳果糖)的酮己糖(例如，果糖)化学转化为N-乙酰己糖胺或包含N-乙酰己糖胺的低聚糖。然后可将用这种方式制得的N-乙酰氨基乳糖苷转移到作为受体部分的乳糖。
根据本发明的组合物以干重计每100g可包含0.1g-5gN-乙酰化低聚糖，或0.1g-3gN-乙酰化低聚糖。
在具体实施例中，该组合物包含的LNnT的量为0.1g/L-4g/L、0.3g/L-3g/L、0.4g/L-2g/L、0.4g/L-1g/L、或0.4g/L-0.9g/L。
在具体实施例中，该组合物包含的LNnT的量为0.1g/L-4g/L、0.2g/L-2g/L、0.3g/L-1.5g/L、0.4g/L-1g/L、或0.4g/L-0.9g/L。
在一些实施方案中，该组合物包含上述浓度的LNT和LNnT。
根据本发明的组合物还可包含唾液酸化低聚糖。可存在一种或多种唾液酸化低聚糖。
唾液酸化低聚糖可选自3’-唾液酸乳糖(3'-sialyllactose)(3-SL)、6'-唾液酸乳糖(6'sialyllactose)(6-SL)以及它们的任意组合。
在本发明的一些实施方案中，该组合物包含3-SL和6-SL。
在一些具体实施方案中，3’-唾液酸乳糖(3-SL)与6’-唾液酸乳糖(6-SL)的比值可在介于5:1和1:10之间、或3:1-1:1、或1:1-1:10的范围内。
在一些具体实施方案中，该组合物中的唾液酸化低聚糖为6’-唾液酸乳糖(6-SL)。
3'-和6'-形式的唾液乳糖可通过色谱技术或过滤技术从天然来源(例如，动物奶)中分离。或者，也可通过利用特异性唾液酸转移酶、唾液酸酶或神经氨酸苷酶的生物技术方法、通过基于酶的发酵技术(重组酶或天然酶)、通过化学合成或微生物发酵技术来产生。在后一种情况下，微生物可表达其天然酶和底物，也可经改造产生相应的底物和酶。可使用单一微生物培养物或混合培养物。唾液酸化低聚糖的形成可由受体底物从任何聚合度(DP)(从DP＝1起)开始进行。或者，唾液乳糖可通过化学合成从乳糖和游离N’-乙酰神经氨酸(唾液酸)中产生。唾液乳糖也可以从例如日本协和发酵工业株式会社(KyowaHakkoKogyo)商购获得。
根据本发明的组合物以干重计每100g可包含0.05g-5g的唾液酸化低聚糖，例如以干重计每100g组合物可包含0.1g-2g或0.1g-3g、或0.2g-1g、或0.3g-3g的唾液酸化低聚糖。
在具体实施例中，该组合物中的唾液酸化低聚糖含量为0.05-5g/L、0.1-4g/L、0.3-2g/L、0.4-1.5g/L、或0.4-1g/L，例如0.5或0.9g/L。
在一些具体实施方案中，该组合物可包含0.8g/L-1.7g/L的唾液酸化低聚糖。
根据本发明的组合物还可任选地包含至少一种人乳低聚糖前体。可存在一种或多种人乳低聚糖前体。
例如，人乳低聚糖前体为唾液酸、岩藻糖或它们的混合物。
在一些具体实施方案中，该组合物包含唾液酸。
根据本发明的组合物以干重计每100g可包含0g-2.3g的人乳低聚糖前体，例如以干重计每100g组合物可包含0g-1.5g、或0g-0.8g的人乳低聚糖前体。
在具体实施例中，该组合物包含0g/L-3g/L的人乳低聚糖前体，或0g/L-2g/L、或0g/L-1g/L、或0g/L-0.7g/L、或0g/L-0.5g/L、或0g/L-0.3g/L、或0g/L-0.2g/L的人乳低聚糖前体。
因此，在一些具体实施方案中，本发明的组合物包含与至少另外一种人乳低聚糖和/或其前体结合的至少一种岩藻糖基化低聚糖，所述人乳低聚糖和/或其前体选自乳糖-N-四糖(LNT)、乳糖-N-新四糖(LNnT)、3’-唾液酸乳糖(3-SL)、6’-唾液酸乳糖(6-SL)、唾液酸以及它们的任意组合。
益生菌：
本发明的组合物还可包含至少一种益生菌(或益生菌菌株)，例如益生菌细菌菌株。
最常用的益生菌微生物主要是下列属的细菌和酵母：乳酸杆菌属物种、链球菌属物种(Streptococcusspp.)、肠球菌属物种(Enterococcusspp.)、双歧杆菌属物种和酵母菌属物种(Saccharomycesspp.)。
在一些具体实施方案中，益生菌为益生菌细菌菌株。在一些具体实施方案中，益生菌尤其是双歧杆菌和/或乳酸杆菌。
合适的益生菌细菌菌株包括可从芬兰ValioOy公司获得的商品名为LGG的鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)ATCC53103、鼠李糖乳杆菌CGMCC1.3724、副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)CNCMI-2116、约氏乳杆菌(Lactobacillusjohnsonii)CNCMI-1225、由新西兰BLIS科技有限公司(BLISTechnologiesLimitedofNewZealand)出售的商品名为KI2的唾液链球菌(Streptococcussalivarius)DSM13084、尤其由丹麦科汉森公司(ChristianHansencompany)出售的商标为Bb12的乳酸双歧杆菌(Bifidobacteriumlactis)CNCM1-3446、由日本森永乳业有限公司(MorinagaMilkIndustryCo.Ltd.)出售的商标为BB536的长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ATCCBAA-999、由丹尼斯克公司(Danisco)出售的商标为Bb-03的短双岐杆菌(Bifidobacteriumbreve)、由森永乳业有限公司(Morinaga)出售的商标为M-16V的短双岐杆菌、由宝洁公司(Procter&GambIeCo.)出售的商标为Bifantis的婴儿双歧杆菌(Bifidobacteriuminfantis)以及由InstitutRosell研究机构(拉曼集团)(InstitutRosell(Lallemand))出售的商标为R0070的短双岐杆菌。
根据本发明的组合物以干重计每1g通常包含10e3-10e12cfu的益生菌菌株，更优选地包含介于10e7和10e12cfu之间、或介于10e8和10e10cfu之间的益生菌菌株。
在一个实施方案中，益生菌是活的。在另一个实施方案中，益生菌是非复制型或灭活的益生菌，或包含非复制型或灭活的益生菌。
除了前述的人乳低聚糖之外，本发明的组合物还可包含至少一种非消化性低聚糖(如，益生元)。这些非消化性低聚糖的量通常介于组合物重量的0.3％和10％之间。
益生元：
益生元通常是不能被消化的，意思是其在胃和小肠中不会被分解和吸收，因此在进入结肠时保持完整，然后在结肠中被有益菌选择性地发酵。益生元的例子包括某些低聚糖，例如低聚果糖(FOS)和低聚半乳糖(GOS)。可使用益生元的组合，例如由BENEO-Orafti公司以商标低聚果糖(以前为)出售的产品中的90％GOS和10％短链低聚果糖，或由BENEO-Orafti公司以商标菊粉(以前为)出售的产品中的90％GOS和10％菊粉。特别优选的益生元组合是70％短链低聚果糖和30％菊粉，该组合是由BENEO-Orafti公司以商标Prebio1出售的产品。
本发明的组合物还可包含至少一种噬菌体(细菌噬菌体)或噬菌体的混合物，优选地，该噬菌体优选地针对致病性链球菌(Streptococci)、嗜血杆菌(Haemophilus)、莫拉氏菌(Moraxella)和葡萄球菌(Staphylococci)。
根据本发明的组合物可以是营养组合物、制剂或食物产品。
根据本发明的组合物可以是例如营养组合物，例如合成营养组合物。该组合物可以是婴儿配方食品、1段婴儿配方食品、较大婴儿配方食品、婴孩食物、婴儿谷物组合物、强化剂(例如，母乳强化剂)或补充剂。优选地，本发明的组合物是专用于不满4个月或不满6个月的婴儿的婴儿配方食品或强化剂或补充剂。
在一些其他实施方案中，本发明的组合物为强化剂。
强化剂可以是母乳强化剂或配方食品强化剂，例如婴儿配方食品强化剂。因此，当给婴儿或幼儿喂养的母乳中至少一种岩藻糖基化低聚糖不足(例如，非分泌型母亲的母乳)时，强化剂是特别有利的实施方案。实际上，在有利的实施方案中，该组合物是专门针对非分泌型母亲或其他母乳中具有低含量的至少一种岩藻糖基化低聚糖(例如，2’-岩藻糖基化低聚糖)的母亲设计的人乳强化剂。
当组合物是一种补充剂时，其可以单位剂量的形式提供。
根据本发明的组合物可用于有变态反应风险的足月婴儿或早产婴儿。
在一个具体实施方案中，本发明的组合物适用于同时还是早产婴儿的有变态反应风险婴儿或幼儿。
在一些实施方案中，根据本发明的组合物可用于离乳期之前和/或期间。
当存在多种低聚糖(即，多种岩藻糖基化低聚糖或一种岩藻糖基化低聚糖与至少另外一种人乳低聚糖和/或其前体并存)时，这些低聚糖可在同一组合物中施用，也可按顺序施用。
本发明的组合物可以是固体(如，粉末)、液体或凝胶状形式。
例如，如果有变态反应风险婴儿是剖腹产婴儿，该组合物可有利地为以液体形式食用的营养组合物。在这种情况下，该组合物可以是营养完全配方食品(例如，婴儿配方食品、1段婴儿配方食品、较大婴儿配方食品)、强化剂(例如，人乳强化剂)。
蛋白质：
在一个实施方案中，本发明的组合物包含蛋白质来源。这种蛋白质来源可提供介于1.6g/100kcal和3g/100kcal之间的蛋白质。在专用于早产儿的一个实施方案中，该量可介于2.4g/100kcal和4g/100kcal之间，或大于3.6g/100kcal。在一个实施方案中，该量可低于2.0g/100kcal，例如低于1.8g/100kcal。
在满足必需氨基酸的最低需求量并且确保理想的生长情况时，蛋白质的种类被认为对本发明不重要。因此，可使用基于乳清、酪蛋白以及它们的混合物的蛋白质来源，也可使用基于大豆的蛋白质来源。就乳清蛋白而言，蛋白质来源可基于酸乳清或甜乳清或它们的混合物，并且可包含任何所需比例的α-乳白蛋白和β-乳球蛋白。
优选地，蛋白质来源主要是乳清(50％以上的蛋白质来源于乳清蛋白)。在一个实施方案中，该组合物的蛋白质为完整蛋白，或大部分(90％以上)为完整蛋白。
所述蛋白质可为完整的或水解的，或为完整蛋白和水解蛋白的混合物。所谓术语“完整的”是指蛋白质的主要部分是完整的，即分子结构未发生改变，例如至少80％的蛋白质未发生改变，例如至少85％的蛋白质未发生改变，优选地，至少90％的蛋白质未发生改变，甚至更优选地，至少95％的蛋白质未发生改变，例如至少98％的蛋白质未发生改变。在一个具体实施方案中，100％的蛋白质未发生改变。
在本发明的上下文中，术语“水解的”是指已水解或分解为其组成氨基酸的蛋白质。
蛋白质可完全或部分水解。例如，对于被认为有发生牛奶变态反应风险的婴儿而言，提供部分水解的蛋白质(水解度介于2％和20％之间)可能是可取的。如果需要水解的蛋白质，则可根据需要并且如本领域已知的那样进行水解过程。例如，可通过在一个或多个步骤中对乳清级分进行酶法水解来制备乳清蛋白水解物。如果用作原料的乳清级分基本上不含乳糖，则发现该蛋白质在水解过程中经受少得多的赖氨酸阻断。这可使赖氨酸阻断程度从总赖氨酸的约15重量％减少至小于赖氨酸的约10重量％，例如赖氨酸的约7重量％，这大大提高了蛋白质来源的营养质量。
在一个优选实施方案中，该组合物中的蛋白质被水解、完全水解或部分水解。蛋白质的水解度(DH)可介于8和40之间，或介于20和60之间，或介于20和80之间，或大于10、20、40、60、8090。应当理解，水解蛋白可对变态反应有多种效果：水解蛋白可能更不容易引起变态反应，因此更不容易引发免疫变态反应。水解蛋白，特别是小分子肽(氨基酸数量少于20、10或5个)可诱导口服耐受性，从而影响受试对象将来的变态反应状况。应当理解，水解蛋白可通过提供双重效应有利地与本发明的岩藻糖基化低聚糖组合，该效果可能是通过在变态反应症状或变态反应状况的建立中以至少两个不同的浓度起效而实现的协同效应。
在本发明的一个实施方案中，至少70％的蛋白质被水解，优选地，至少80％的蛋白质被水解(例如，蛋白质的至少85％被水解)，甚至更优选地，至少90％的蛋白质被水解(例如，至少95％的蛋白质被水解，尤其是至少98％的蛋白质被水解)。在一个具体实施方案中，100％的蛋白质被水解。
在一个实施方案中，水解蛋白是蛋白质的唯一来源(即，100％或至少90％的蛋白质被水解)。
在一个实施方案中，水解蛋白是蛋白质的主要来源(即，至少50％、优选60％的蛋白质被水解)。
在一个具体实施方案中，根据本发明的组合物是低变应原组合物。在另一个具体实施方案中，根据本发明的组合物是低变应原营养组合物。
碳水化合物：
根据本发明的组合物一般包含碳水化合物来源。这在本发明的营养组合物为婴儿配方食品的情况下是特别优选的。在这种情况下，尽管碳水化合物的优选来源之一是乳糖，但可使用婴儿配方食品中常用的任何碳水化合物来源，例如乳糖、蔗糖、麦芽糖糊精、淀粉以及它们的混合物。
脂质：
根据本发明的组合物一般包含脂质来源。这在本发明的营养组合物为婴儿配方食品的情况下是特别相关的。在这种情况下，脂质来源可以是适合用于婴儿配方食品中的任何脂质或脂肪。一些合适的脂肪来源包括棕榈油、高油酸向日葵油和高油酸红花油。也可加入必需脂肪酸亚油酸和α-亚麻酸，以及少量包含大量预先形成的花生四烯酸和二十二碳六烯酸的油，例如鱼油或微生物油。脂肪来源中n-6脂肪酸与n-3脂肪酸的比值可为约5:1至约15:1，例如约8:1至约10:1。
矿物质和维生素：
本发明的组合物还可包含被认为是日常饮食所必需的所有维生素和矿物质，这些维生素和矿物质以营养显著量存在于组合物中。已确定某些维生素和矿物质的最低需求量。矿物质、维生素和任选地存在于本发明组合物中的其他营养物的例子包括维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素E、维生素K、维生素C、维生素D、叶酸、肌糖、烟酸、生物素、泛酸、胆碱、钙、磷、碘、铁、镁、铜、锌、锰、氯、钾、钠、硒、铬、钼、牛磺酸和L-肉碱。矿物质通常以盐的形式加入。特定矿物质和其他维生素的存在和量将根据适用人群而有所不同。
如有必要，本发明的组合物可包含乳化剂和稳定剂，例如大豆、卵磷脂、甘油单酯和甘油二酯的柠檬酸酯等等。
本发明的组合物还可包含可能具有有益效果的其他物质，例如乳铁蛋白、核苷酸、核苷等等。
根据本发明的组合物可通过任何合适的方式制备。现将以举例的方式描述组合物。
例如，可通过将蛋白质来源、碳水化合物来源和脂肪来源以适当的比例混合在一起来制备诸如婴儿配方食品的配方食品。如果使用乳化剂，则可在此时加入。可在此时加入维生素和矿物质，但通常在稍后加入以避免热降解。可先将任何亲脂性维生素和乳化剂等溶解到脂肪来源中，再进行混合。然后可混入水，优选已经过反渗透的水，以形成液体混合物。合适的水温度在约50℃和约80℃之间的范围内，有助于分散成分。可使用市售的液化器来制备液体混合物。
在此阶段，尤其是在最终产物为液体形式的情况下，可加入岩藻糖基化低聚糖(和任选的其他人乳低聚糖和/或其前体)。
如果最终产物为粉末，如果需要，同样也可在此阶段加入这些成分。
然后，例如分两个阶段匀化液体混合物。
然后，可对液体混合物进行热处理以减少细菌载量，例如通过将液体混合物快速加热至约80℃和约150℃之间的范围内的温度并持续约5秒和约5分钟之间的时间。这可通过蒸汽注入、高压灭菌器或热交换器(例如，板式热交换器)来进行。
然后，例如通过急速冷却，将液体混合物冷却至约60℃和约85℃之间的温度。然后再次例如分两个阶段匀化液体混合物，其中第一阶段的压力介于约10MPa和约30MPa之间，第二阶段的压力介于约2MPa和约10MPa之间。然后可将匀化后的混合物进一步冷却，以便添加任何热敏组分，例如维生素和矿物质。此时方便地调节经匀化混合物的pH值和固体含量。
如果最终产物将为粉末，则将该匀化混合物转移至合适的干燥装置中，例如喷雾干燥器或冷冻干燥器，然后将其转化为粉末。该粉末应具有小于约5重量％的含水量。在此阶段可加入岩藻糖基化低聚糖(和任选的其他人乳低聚糖和/或其前体)，方法是将其与益生菌菌株(如果使用)干混，或以晶体的糖浆形式与益生菌菌株混合，然后对混合物进行喷雾干燥或冷冻干燥。
如果优选液体组合物，可对该匀化混合物进行杀菌，然后在无菌条件下将其装入合适的容器中，也可以先将其装入容器中，再进行灭菌。
在另一个实施方案中，本发明的组合物可以是包含岩藻糖基化低聚糖(和任选的其他人乳低聚糖和/或其前体)的补充剂，其含量足以在个体中达到所需效果。
岩藻糖基化低聚糖的日剂量通常为0.1g-4g，N-乙酰化低聚糖的日剂量通常为0.1g-3g，唾液酸化低聚糖的日剂量通常为0.1g-2g。
包含在补充剂中的低聚糖的量将根据该补充剂的施用方式进行选择。例如，如果补充剂一天施用两次，那么每种补充剂可包含0.05g-1.5g的N-乙酰化低聚糖、0.05g-1g的唾液酸化低聚糖以及0.05g-2g的岩藻糖基化低聚糖。
补充剂可以是例如片剂、胶囊剂、锭剂或液体形式。补充剂还可包含保护性亲水胶体(例如，胶类、蛋白质、改性淀粉)、粘合剂、成膜剂、包囊剂/材料、壁/壳材料、基质化合物、包衣、乳化剂、表面活性剂、增溶剂(油、脂肪、蜡、卵磷脂等)、吸附剂、载体、填充剂、共化合物、分散剂、润湿剂、加工助剂(溶剂)、流动剂、掩味剂、增重剂、胶凝剂和凝胶形成剂。补充剂还可包含常规的药物添加剂和佐剂、赋形剂和稀释剂，包括但不限于：水、任何来源的明胶、植物胶、木素磺酸盐、滑石、糖类、淀粉、阿拉伯树胶、植物油、聚亚烷基二醇、风味剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂、缓冲剂、润滑剂、着色剂、润湿剂、填充剂等。
此外，补充剂还可包含适用于口服或非肠道施用的有机或无机载体材料，以及维生素、矿物质痕量元素和根据政府机构(例如，USRDA)推荐的其他微量营养素。
组合物的施用(提供)年龄和持续时间可根据需要而确定。组合物可用于预防和/或治疗URT感染。
组合物可在有变态反应风险婴儿出生后立即提供。本发明的组合物还可在婴儿出生后1周内、或出生后2周内、或出生后3周内、或出生后1个月内、或出生后2个月内、或出生后3个月内、或出生后4个月内、或出生后6个月内、或出生后8个月内、或出生后10个月内、或出生后1年内、或出生后2年内、或甚至更长时间内提供。在一些其他实施方案中，本发明的组合物在出生后几天或几周或几个月提供，尤其在有变态反应风险婴儿是早产儿的情况下，但这并不是必需的。
本发明的组合物可根据需要提供持续数天(1、2、3、4、5、6...)、或持续数周(1、2、3、4、5、6、7、8或甚至更久)、或持续数月(1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或甚至更久)。
本发明的另一个目的是在制备待施用的组合物时使用至少一种岩藻糖基化低聚糖，该组合物用于在婴儿或幼儿中预防变态反应和/或治疗变态反应和/或减少变态反应的发生或风险，所述婴儿或幼儿由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母亲诞下或由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母乳喂养。
本发明还涉及一种用于在婴儿或幼儿中预防变态反应和/或治疗变态反应和/或减少变态反应的发生或风险的方法，所述婴儿或幼儿由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母亲诞下或由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母乳喂养。所述方法包括为所述婴儿或幼儿施用包含至少一种岩藻糖基化低聚糖的组合物。
本说明书中先前所述的不同实施方案、细节和示例也可同样应用于这些用途和方法。
实施例
以下实施例示出了根据本发明所使用的组合物的一些具体实施方案。这些实施例仅出于举例说明目的而给出，不应被理解为是对本发明的限制，因为在不脱离本发明的实质的前提下，可对其作出多种改变。
实施例1
下表1给出了根据本发明的婴儿配方食品的组合物的实施例。该组合物仅以举例的方式给出。
| 营养物质 | 每100kcal | 每L |
| 能量(kcal) | 100 | 670 |
| 蛋白质(g) | 1.83 | 12.3 |
| 脂肪(g) | 5.3 | 35.7 |
| 亚油酸(g) | 0.79 | 5.3 |
| α-亚油酸(mg) | 101 | 675 |
| 乳糖(g) | 11.2 | 74.7 |
| 矿物质(g) | 0.37 | 2.5 |
| 钠(mg) | 23 | 150 |
| 钾(mg) | 89 | 590 |
| 氯(mg) | 64 | 430 |
| 钙(mg) | 62 | 410 |
| 磷(mg) | 31 | 210 |
| 镁(mg) | 7 | 50 |
| 锰(μg) | 8 | 50 |
| 硒(μg) | 2 | 13 |
| 维生素A(μg RE) | 105 | 700 |
| 维生素D(μg) | 1.5 | 10 |
| 维生素E(mg TE) | 0.8 | 5.4 |
| 维生素K1(μg) | 8 | 54 |
| 维生素C(mg) | 10 | 67 |
| 维生素B1(mg) | 0.07 | 0.47 |
| 维生素B2(mg) | 0.15 | 1.0 |
| 烟酸(mg) | 1 | 6.7 |
| 维生素B6(mg) | 0.075 | 0.50 |
| 叶酸(μg) | 9 | 60 |
| 泛酸(mg) | 0.45 | 3 |
| 维生素B12(μg) | 0.3 | 2 |
| 生物素(μg) | 2.2 | 15 |
| 胆碱(mg) | 10 | 67 |
| 铁(mg) | 1.2 | 8 |
| 碘(μg) | 15 | 100 |
| 铜(mg) | 0.06 | 0.4 |
| 锌(mg) | 0.75 | 5 |
| 2FL(g) | 0.45 | 3 |
表1：根据本发明的婴儿配方食品的组合物的实施例
实施例2
对来源于多对母婴的人乳样品中的低聚糖2FL(2’-岩藻糖基乳糖)的量进行分析。所得数据与这些婴儿在0至2岁时的呼吸道感染次数相关。在266名婴儿中，给33名婴儿喂食2FL不足的母乳，给233名婴儿喂食含有2FL的母乳。147名婴儿在出生时没有兄弟姐妹，119名婴儿在出生时有至少一个兄弟姐妹。51名婴儿经剖腹产娩出，215名婴儿经顺产娩出。
简单来说，将母乳样品匀化后用水稀释，稀释比例一般为1/10和1/100。将该稀释样品离心，除去其中的颗粒，采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测器(HPAEC-PAD，ICS3000，戴安公司(Dionex))和CarbopacPA1分析柱对上清液进行分析，以分离单独的低聚糖。利用准确的低聚糖外标曲线进行定量分析。根据与准确低聚糖标准品的共迁移进行峰鉴定。
接着进行统计分析，以找出(i)婴儿群体所食用的母乳类型(含或不含2FL或其他低聚糖)与(ii)在2岁和5岁时变态反应性疾病的发生率之间的可能关联。
图1和图2表明，食用来自sec–(非分泌型)母亲的母乳的剖腹产婴儿发生变态反应性疾病的频率更高，特别是在2岁时的频率更高，特别是发生湿疹和特应性疾病的频率更高。该结果加强了本发明所强调的特别有变态反应风险的这些婴儿有更高需求这一概念。因此，为这些婴儿提供具有补充作用的2-岩藻糖基化低聚糖(例如，2FL)所带来的有益效果在这些婴儿中将更为显著。
图3表明，2FL的含量在来自于不同母亲的不同母乳中差异较大。该图说明了，在出生后前几个月内给婴儿喂养的母乳中的2FL含量与变态反应风险(2岁时发生湿疹和特应性疾病)之间的相关性。这证明了母亲的sec–状况并不是预测变态反应风险的唯一因素，母乳中的岩藻糖基化低聚糖的量也是预测该风险的另一个因素。在出生后前几个月内给婴儿喂养的母乳中的岩藻糖基化低聚糖(例如，2FL)的含量越低，发生变态反应(尤其是特应性疾病，例如特应性皮炎或湿疹)的风险就越高。
图4表明母乳中的其他低聚糖可能影响婴儿的变态反应状况。发生变态反应的婴儿(同图3)所食用的母乳中的LNT/LNnT比值还比那些未发生变态反应的婴儿所食用的母乳高。
因此，包含至少一种岩藻糖基化低聚糖(优选地为2FL)的组合物将能够有效用于在幼儿(尤其是有风险的那些婴儿)中治疗变态反应和/或减少变态反应的发生或风险。
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Claims (20)
1.包含至少一种岩藻糖基化低聚糖的组合物，其用于在婴儿或幼儿中预防变态反应和/或治疗变态反应和/或减少变态反应的发生或风险，所述婴儿或幼儿由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母亲诞下或由至少一种岩藻糖基化低聚糖不足的母乳喂养。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述婴儿或幼儿具有至少一个兄弟姐妹，和/或所述婴儿通过剖腹产诞下和/或所述婴儿或幼儿具有变态反应家族史。
3.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述变态反应在2岁或5岁时或者在2岁或5岁之前开始发生和/或包括湿疹或特应性疾病。
4.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述婴儿或幼儿由非分泌型(non-secretor)母亲的母乳喂养。
5.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述岩藻糖基化低聚糖选自2’-岩藻糖基乳糖、3’-岩藻糖基乳糖、二岩藻糖基乳糖、乳糖-N-岩藻戊糖(lacto-N-fucopentaose)I、乳糖-N-岩藻戊糖II、乳糖-N-岩藻戊糖III、乳糖-N-岩藻戊糖V、乳糖-N-岩藻己糖(lacto-N-fucohexaose)、乳糖-N-二岩藻己糖(lacto-N-difucohexaose)I、岩藻糖基乳糖-N-己糖(fucosyllacto-N-hexaose)、岩藻糖基乳糖-N-新己糖(fucosyllacto-N-neohexaose)I、岩藻糖基乳糖-N-新己糖II、二岩藻糖基乳糖-N-己糖(difucosyllacto-N-hexaose)I、二岩藻糖基乳糖-N-新己糖(difucosyllacto-N-neohexaose)I、二岩藻糖基乳糖-N-新己糖II、岩藻糖基-对-乳糖-N-己糖(fucosyl-para-Lacto-N-hexaose)、和它们的任意组合。
6.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述岩藻糖基化低聚糖包含2’-岩藻糖基-表位。
7.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述岩藻糖基化低聚糖为2’-岩藻糖基乳糖(2FL)。
8.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中以干重计，所述岩藻糖基化低聚糖的量为0.1-10g/100g组合物。
9.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，所述组合物包含至少另外一种人乳低聚糖和/或其前体。
10.根据权利要求9所述的组合物，其中至少一种人乳低聚糖和/或其前体选自N-乙酰化低聚糖、唾液酸化低聚糖、唾液酸、岩藻糖以及它们的任意组合。
11.根据权利要求10所述的组合物，其中所述N-乙酰化低聚糖为乳糖-N-四糖(LNT)、乳糖-N-新四糖(LNnT)以及它们的任意组合。
12.根据权利要求11所述的组合物，所述组合物包含LNT和LNnT，其中所述组合物中的LNT/LNnT比值小于6。
13.根据权利要求10所述的组合物，其中所述唾液酸化低聚糖选自3'-唾液酸乳糖(3’-sialyllactose)(3-SL)、6'-唾液酸乳糖(6’-sialyllactose)(6-SL)以及它们的任意组合。
14.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，所述组合物包含至少另外一种选自以下的人乳低聚糖和/或其前体：乳糖-N-四糖(LNT)、乳糖-N-新四糖(LNnT)、3'-唾液酸乳糖(3-SL)、6'-唾液酸乳糖(6-SL)、唾液酸以及它们的任意组合。
15.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，所述组合物还包含至少一种益生菌，所述益生菌的量为103-1012cfu/g所述组合物(干重)。
16.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物为营养组合物、制剂或食物产品。
17.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物为婴儿配方食品(infantformula)、1段婴儿配方食品(starterinfantformula)、较大婴儿配方食品(follow-oninfantformula)、婴孩(baby)食物、婴儿谷物组合物、强化剂(fortifier)、人乳强化剂或补充剂。
18.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述婴儿是早产的。
19.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含水解的蛋白质作为蛋白质的唯一来源或主要来源。
20.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述婴儿或幼儿为分泌型的。
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