CN105663359A - 一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本申请公开了一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物，按照质量份包括以下组分：地榆2份-4份、黄根1份-3份、驴蹄草1份-3份、丹参1份-3份、陈皮0.5份-2份。本申请还公开了一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物的制备方法。本申请的中药组合物提高了感染沙门氏菌鸡群的成活率、产蛋率、平均蛋重、料蛋比等，具有较好的治疗作用。

Description

一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物及其制备方法

技术领域

本申请属于兽医药剂领域，具体地说，涉及一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物及其制备方法。

背景技术

一直以来，我们国家在兽医临床中主要通过使用抗生素的方式来预防和治疗细菌感染，但随着抗生素的广泛使用，一系列诸如过敏反应、毒性反应、兽药残留和耐药性的问题也日益突出。为了应对此类问题，迫切的需要寻找其他安全、有效的抗菌药物来代替或者减少抗生素的使用，以适应兽医临床的需要。根据国内外的最新研究显示，中药或天然植物提取物可以对病原菌直接发挥杀灭作用或者通过提高机体免疫力来间接地发挥防治疾病的效果。因此加强和深入对于中药抗菌抑菌作用实验的研究具有很大的实用性意义。但是一方面由于大多数中药的单一有效成分仅具有较小的抗菌活性或者不具有抗菌活性，另一方面，单一的中药一般仅具有较窄的抗菌谱。所以马旭荣等提出对单一中药或者单一有效成分的研究难以适应当前复杂多变的疾病的需要，同时考虑到中药方剂的整体观念，因此考虑以整个中药复方制剂为单位来研究其抑菌活性。中药复方制剂因含多种有效成分，具有多方位的综合效用，抗菌谱广，且高效、低毒、不易产生耐药性等特点与优势，日渐受到学者们的重视。

在天气炎热潮湿的夏季，鸡舍低矮，通风换气不好，舍温升高，蛋鸡日常饮水增多，引起腹泻，同时夏季气温高，微生物易于滋生，料槽，水槽清理不及时或者未及时消毒就会导致各种细菌、霉菌的滋生，一般以大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌比较多见，极易引起肠炎导致蛋鸡的产蛋率下降，而且细菌感染还可能直接侵害生殖道，也会导致蛋鸡产蛋率下降。

目前针对绿壳蛋鸡的大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌防治的方法主要是抗生素如庆大霉素、安普霉素、氟苯尼考等，存在的主要问题是耐药性和抗生素残留的问题。而中药复方制剂，如黄连解毒散、白头翁散等，制备成的散剂颗粒大、鹌鹑肠道短，对中药粉末的吸收有限，导致效果不明显；同时，其他复方的成本较高。

发明内容

有鉴于此，本申请所要解决的技术问题是提供了一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物及其制备方法。

为了解决上述技术问题，本申请公开了一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物，按照质量份包括以下组分：地榆2份-4份、黄根1份-4份、驴蹄草1份-3份、丹参1份-3份、陈皮0.5份-2份。

进一步地，该用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物按照质量份包括以下组分：地榆2.5份、黄根2份、驴蹄草2份、丹参2份、陈皮1.5份。

本申请还公开了一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物的制备方法，包括以下步骤：

步骤1、预处理：将地榆、黄根、驴蹄草、丹参、陈皮干燥后粉碎过60目筛；

步骤2、称量：按照质量份称量步骤1预处理后的组分：地榆2份-4份、黄根1份-4份、驴蹄草1份-3份、丹参1份-3份、陈皮0.5份-2份；

步骤3、回流处理：将称量好的各组分回流提取，将滤液合并，放置过夜；

步骤4、将合并后的滤液浓缩至1：1，即相当于每毫升药液含生药1克；加乙醇使滤液的体积浓度达到75％，静止沉淀，取上清液浓缩，回收乙醇至无醇味，用HCl调节pH值到6，用注射用水调整总量，相当于原药材1g/mL，搅匀，灌装；121℃，15min灭菌。

进一步地，步骤3中的回流具体为：将称量好的各组分回流提取2次，第一次15倍量的水，回流提取2小时，第二次10倍量的水，回流提取1小时。

进一步地，步骤4中的HCl的浓度为2mol/L。

与现有技术相比，本申请可以获得包括以下技术效果：

本发明的中药组合物对大肠杆菌抑菌效果最好，其最小抑菌和最小杀菌浓度分别是7.81mg/mL和12.5mg/mL，本发明的中药组合物提高了感染沙门氏菌鸡群的成活率、产蛋率、平均蛋重、料蛋比等，具有较好的治疗作用。

当然，实施本申请的任一产品必不一定需要同时达到以上所述的所有技术效果。

附图说明

此处所说明的附图用来提供对本申请的进一步理解，构成本申请的一部分，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。在附图中：

图1是本申请用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物的制备方法的工艺流程图。

具体实施方式

以下将配合附图及实施例来详细说明本申请的实施方式，藉此对本申请如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。

本发明提供一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物，按照质量份包括以下组分：地榆2份-4份、黄根1份-3份、驴蹄草1份-3份、丹参1份-3份、陈皮0.5份-2份。

本发明还提供一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物的制备方法，如图1所示，包括以下步骤：

步骤1、预处理：将地榆、黄根、驴蹄草、丹参、陈皮干燥后粉碎过60目筛；

步骤2、称量：按照质量份称量步骤1预处理后的组分：地榆2份-4份、黄根1份-4份、驴蹄草1份-3份、丹参1份-3份、陈皮0.5份-2份；

步骤3、将称量好的各组分回流提取2次，第一次15倍量的水，回流提取2小时，第二次10倍量的水，回流提取1小时，将滤液合并，放置过夜；

步骤4、将合并后的滤液浓缩至1：1(即相当于每毫升药液含生药1克)；加乙醇使滤液的体积浓度达到75％，静止沉淀，取上清液浓缩，回收乙醇至无醇味，用2mol/L的HCl调节pH值到6，用注射用水调整总量，相当于原药材1g/mL，搅匀，灌装；121℃，15min灭菌。

制备得到的用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物为棕红色的澄清液体，久置可有微量沉淀，轻摇易散；味甜，微苦。质量要求为无酸败、异臭或其它变质现象，按照卫生部《药品卫生检验方法》检查应符合规定pH值为5.0～7.0，相对密度不低于1.02。

实施例1

取地榆250克、黄根200克、驴蹄草200克、丹参200克、陈皮150克干燥后粉碎过60目筛。其制备方法是分别称取上述中药材料进行回流提取。共提取2次，第一次15倍量的水，回流提取2小时，第二次，10倍量的水，回流提取1小时；并滤过液，放置过夜，滤过，滤液浓缩至1：1，加乙醇使滤液的体积浓度达到75％，静止沉淀，取上清液浓缩，回收乙醇至无醇味，用2mol/L的HCl调节ph值到6，用注射用水调整总量，相当于原药材1g/mL，搅匀，灌装；121℃，15min灭菌。本品为棕红色的澄清液体，久置可有微量沉淀，轻摇易散；味甜，微苦。质量要求为无酸败、异臭或其它变质现象，按照卫生部《药品卫生检验方法》检查应符合规定pH值为5.0～7.0，相对密度不低于1.02。

实施例2

取地榆300克、黄根250克、驴蹄草250克、丹参150克、陈皮100克干燥后粉碎过60目筛。其制备方法是分别称取上述中药材料进行回流提取。共提取2次，第一次15倍量的水，回流提取2小时，第二次，10倍量的水，回流提取1小时；并滤过液，放置过夜，滤过，滤液浓缩至1：1，加乙醇使滤液的体积浓度达到75％，静止沉淀，取上清液浓缩，回收乙醇至无醇味，用2mol/L的HCl调节ph值到6，用注射用水调整总量，相当于原药材1g/mL，搅匀，灌装；121℃，15min灭菌。本品为棕红色的澄清液体，久置可有微量沉淀，轻摇易散；味甜，微苦。质量要求为无酸败、异臭或其它变质现象，按照卫生部《药品卫生检验方法》检查应符合规定pH值为5.0～7.0，相对密度不低于1.02。

实施例3

取地榆200克、黄根400克、驴蹄草100克、丹参200克、陈皮100克干燥后粉碎过60目筛。其制备方法是分别称取上述中药材料进行回流提取。共提取2次，第一次15倍量的水，回流提取2小时，第二次，10倍量的水，回流提取1小时；并滤过液，放置过夜，滤过，滤液浓缩至1：1，加乙醇使滤液的体积浓度达到75％，静止沉淀，取上清液浓缩，回收乙醇至无醇味，用2mol/L的HCl调节ph值到6，用注射用水调整总量，相当于原药材1g/mL，搅匀，灌装；121℃，15min灭菌。本品为棕红色的澄清液体，久置可有微量沉淀，轻摇易散；味甜，微苦。质量要求为无酸败、异臭或其它变质现象，按照卫生部《药品卫生检验方法》检查应符合规定pH值为5.0～7.0，相对密度不低于1.02。

实施例4

取地榆400克、黄根100克、驴蹄草100克、丹参100克、陈皮200克干燥后粉碎过60目筛。其制备方法是分别称取上述中药材料进行回流提取。共提取2次，第一次15倍量的水，回流提取2小时，第二次，10倍量的水，回流提取1小时；并滤过液，放置过夜，滤过，滤液浓缩至1：1，加乙醇使滤液的体积浓度达到75％，静止沉淀，取上清液浓缩，回收乙醇至无醇味，用2mol/L的HCl调节ph值到6，用注射用水调整总量，相当于原药材1g/mL，搅匀，灌装；121℃，15min灭菌。本品为棕红色的澄清液体，久置可有微量沉淀，轻摇易散；味甜，微苦。质量要求为无酸败、异臭或其它变质现象，按照卫生部《药品卫生检验方法》检查应符合规定pH值为5.0～7.0，相对密度不低于1.02。

实施例5

取地榆250克、黄根250克、驴蹄草300克、丹参300克、陈皮50克干燥后粉碎过60目筛。其制备方法是分别称取上述中药材料进行回流提取。共提取2次，第一次15倍量的水，回流提取2小时，第二次，10倍量的水，回流提取1小时；并滤过液，放置过夜，滤过，滤液浓缩至1：1，加乙醇使滤液的体积浓度达到75％，静止沉淀，取上清液浓缩，回收乙醇至无醇味，用2mol/L的HCl调节ph值到6，用注射用水调整总量，相当于原药材1g/mL，搅匀，灌装；121℃，15min灭菌。本品为棕红色的澄清液体，久置可有微量沉淀，轻摇易散；味甜，微苦。质量要求为无酸败、异臭或其它变质现象，按照卫生部《药品卫生检验方法》检查应符合规定pH值为5.0～7.0，相对密度不低于1.02。

对比例1

茵陈蒿散处方(四川荣州动物药业有限公司提供)按照实施例1的方法制备，煎煮浓缩至1g/mL的浓度，然后用低速离心机进行离心，取上清液，保存备用。

对比例2

益母生化散药物(四川荣州动物药业有限公司提供)按照实施例1的方法制备，煎煮浓缩至1g/mL的浓度，然后用低速离心机进行离心，取上清液，保存备用。

对比例3

地榆按照实施例1的方法制备，煎煮浓缩至1g/mL的浓度，然后用低速离心机进行离心，取上清液，保存备用。

下面结合具体的实验数据给出本发明的技术效果：

1材料与方法

1.1材料

1.1.1试验中药

本发明中药组合物、茵陈蒿散、益母生化散(茵陈蒿散、益母生化散药物均由四川荣州动物药业有限公司生产提供)批准文号依次为：(兽药字(2011)220465173、兽药字(2011)220465029、兽药字(2011)220465126、兽药字(2011)220465090)，患沙门氏菌细菌感染的绿壳蛋鸡200只。

1.1.2供试菌株

标准菌株：金黄色葡萄球菌ATCC25923；大肠杆菌ATCC25922；沙门氏菌C79-13，由四川农业大学药学实验室保存提供。

1.1.3试验仪器

超净工作，苏净集团安泰公司；SPX型生化培养箱，宁波东南仪器有限公司；微量移液器，德国Eppendorf公司；试管、培养皿、吸管、烧杯、离心管、钢管、96孔板、注射器、游标卡尺、电子秤。

1.2方法

1.2.1药液的制备

取本发明配方干燥后粉碎过60目筛。其制备方法是分别称取上述中药材料进行回流提取。共提取2次，第一次15倍量的水，回流提取2小时，第二次，10倍量的水，回流提取1小时；并滤过液，放置过夜，滤过，滤液浓缩至1：1，加乙醇使浓度达75％，静止沉淀，取上清液浓缩，回收乙醇至无醇味，用2mol/L的HCl调节ph值到6，用注射用水调整总量，相当于原药材1g/mL，搅匀，灌装；121℃，15min灭菌。本品为棕红色的澄清液体，久置可有微量沉淀，轻摇易散；味甜，微苦。质量要求为无酸败、异臭或其它变质现象，按照卫生部《药品卫生检验方法》检查应符合规定pH值为5.0～7.0，相对密度不低于1.02。工艺路线如图1所示。

1.2.2菌液的制备

将金黄色葡萄球菌ATCC25923等三株标准菌株在营养琼脂平板上分别划线培养，然后挑取单个菌落在MH肉汤中培养12-16h，作为原菌液。

1.2.3培养基的配制

A牛肉膏汤培养基的制备：牛肉膏3g蛋白胨10g氯化钠5g加入蒸馏水至1000mL在65℃的条件下充分溶解过滤。调整pH至7.5在常温下定容至1000mL，120℃下高压灭菌20min，保存备用。B营养琼脂培养基的制备：将琼脂按2％的比例加入到牛肉膏汤培养基中，加热，使其充分溶解，过滤，调整pH至7.6到7.8，120℃下高压灭菌20min备用。C配菌液稀释液：用灭菌生理盐水作1，10，100，1000倍稀释，备用。

1.2.4平皿的制备

加热融化琼脂，在每个培养皿中倒入10mL，待琼脂凝固后，在40℃下保温。将相应的稀释菌液加入60℃的琼脂，快速混匀，一起倒入保温的培养皿中10mL/个，备用。

1.2.5抑菌试验

用管碟法，取高16-17mm，直径约90mm的平板双碟，分别注入加热融化的MH培养基20mL放置在水平台上，待其凝固，用细菌计数法分别将大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，沙门氏菌的标准菌株肉汤稀释至10⁸CFU/mL用无菌棉蘸取稀释好的菌悬液，在管内壁将多余的菌液旋转挤去后分三次均匀的涂在MH培养基表面。每次旋转平板60度，最后缘平板内缘涂抹一周，使细菌均匀分布。将制备好的涂菌平板于室温下放置3-5min。使悬菌液完全吸收，平板表面完全干燥后，摆放好钢管，平行重复两次实验。37℃下培养24h，观察抑菌圈大小。

1.2.6MIC和MBC的测定

采用改良肉汤稀释法：在肉汤稀释法的基础上采用葡萄糖酚红肉汤代替普通肉汤，利用细菌发酵产酸，使酚红由红变黄，使得实验结果更加便现象的观察。无菌操作，取20支试管，分为两组，实验组试管11支，对照组试管9支，用微量加样器分别于20支试管中加入2mLMH肉汤再于每组的第一支试管内加入中药煎液2mL，将其混合均匀后吸取2mL到第二管中，以此类推，得到九个二倍稀释梯度的含药肉汤通过细菌记数法将大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，沙门氏菌的标准菌株培养肉汤稀释到10⁶CFU/mL。取100μL细菌稀释液分别加入试验组的1-10号试管中，使得每管最终的细菌浓度都一样。分别恒温培养，在10号试管肉汤浑浊，11号试管澄清的情况下对比实验组与对照组的试管，以眼观肉汤颜色未产生变化的最低药物浓度为该药物的MIC(目前，一般以MIC＞250mg/mL为不敏感，MIC介于125-250mg/mL为低敏，MIC介于15.63-62.5mg/mL为中敏，MIC小于或等于7.81mg/mL为高敏)然后再将MIC附近浓度的试管菌液接种到培养基上，以生长细菌个数少于五个的最低浓度为MBC。

1.2.7试验结果判定标准

结果判定标准：以MIC＞250mg/ml为不敏感，MIC介于125-250mg/ml为低敏，MIC介于15.63-62.5mg/ml为中敏，MIC小于或等于7.81mg/ml为高敏

1.2.8临床试验

选取200只感染大肠杆菌而产蛋率下降的绿壳蛋鸡，实验组(以实施例1为实验组)和对照组(以对比例3为对照组)分别100只，实验组以每天1ml/只的剂量进行灌胃给药，检测服药后的抑菌效果，同时分别记录每只鸡的产蛋率，畸形蛋数，以及平均蛋重等指标，通过这些指标来评估药效。然后处理数据，分析实施例1中草药组合物的临床抗菌及增加产蛋的效果。同时考察产蛋率和料蛋比，主要通过以上指标的考察，探究反映此药物在兽医临床上的应用前景。

2结果

2.14种中药对标准菌株的抑菌效果

3种中药中实施例1中草药组合物对标准菌株的抑菌效果最好，其余3种对各标准菌株具有不同程度的抑菌效果。(表1、表2、表3)

表1各组药物对大肠杆菌抑菌圈大小及MIC、MBC

由表1可知对于大肠杆菌，实施例1中草药组合物的抑菌圈最大，抑菌效果最好，其余三种药物次之。

表2各组药物对沙门氏菌抑菌圈大小及MIC、MBC

由表2可见，对于沙门氏菌茵陈蒿的抑菌效果较好，相比实施例1中草药组合物，MBC也更小。

表3各组药物对金黄色葡萄球菌抑菌圈大小及MIC、MBC

由表3可知，初步验证，对于金黄色葡萄球菌，实施例1中草药组合物的抑菌圈最大，抑菌效果最好。

2.2临床应用试验结果

由表4可知，在用药4周后，与对照组相比，实验组在生产性能包括产蛋数，产蛋重量，平均蛋重，料蛋比等指标都有了一定的提升。可见实施例1中草药组合物在防治产蛋鸡由感染引起的疾病具有一定的疗效。

表44周内绿壳蛋鸡用药后生产性能情况比较

注：同列不同大写字母差异极显著(P<0.01)，不同小写差异显著(P<0.05)，不标或相同字母差异不显著(P>0.05)

4讨论

4.1本实验应用了管蝶法和肉汤稀释法来测定三味中药方剂的抑菌圈和MIC、MBC，管碟法是国内外常用的抗生素微生物检定法，利用管碟法测定，具有准确、直观、重复性好等优点。

4.2通过以上的试验结果，可见实施例1中草药组合物、对比例1中草药组合物、和对比例2中草药组合物对于大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌都具有一定的抑菌作用，其中实施例1中草药组合物对于这3种菌均具有较好的抗菌作用，根据对于中药最低抑菌浓度的敏感程度指标来判断，表现为高敏和中敏，茵陈蒿对于这三种菌的抑菌能力大致为中敏，但对于沙门氏菌为低敏，同时试验表明对比例2中草药组合物对于金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好，而对于大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌效果一般。冯淑怡等人在对对比例2中草药组合物的提取及抑菌效果研究中发现，对比例2中草药组合物提取物中的总黄酮含量较高，推测对比例2中草药组合物主要是通过破坏细菌细胞的增值，以及调节人体细胞的免疫功能实现了对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。因此可以对对比例2中草药组合物抑制金黄色葡萄球菌做进一步研究，在生产中可以考虑将对比例2中草药组合物应用于对金黄色葡萄球菌感染的预防和治疗中。

4.3在本试验中单味中药地榆作为阳性对照来考量实施例1中草药组合物等三种中药方剂的抑菌抗菌效果，另外从另一个侧面来看，地榆又是实施例1中草药组合物的一味组成中药，通过实验结果的对比，实施例1中草药组合物对大肠杆菌等的抑菌作用都要强于单味地榆的抑菌作用，表明中药间存在联合用药可以增强药效。

4.4由于体外抑菌和体内抑菌存在着生理作用和内环境等差异，因此有些药物往往体外抑菌活性不明显，但是在体内却有着很好的的抗菌抗炎作用，因此在抗菌试验的基础上，筛选了抗菌效果较好的实施例1中草药组合物进一步完成了以绿壳蛋鸡为对象的临床应用性试验，具体结果见表4，可见在用药4周后，生产性能包括产蛋数，产蛋重量，平均蛋重，料蛋比等指标都有了一定的提升。可见实施例1中草药组合物在防治产蛋鸡由感染引起的疾病具有一定的疗效。

4.5大肠杆菌等细菌引起的下痢乃下焦湿热，热重于湿，湿热阻滞大肠，大便不畅的一类症候。湿热熏蒸，消灼津液，故体热口渴，湿热下注大肠，则下痢频繁。湿热阻滞，腑气不通，则腹中作痛。里急是热邪逼迫所致；后重乃湿滞大肠，粘着难下之征。湿热郁蒸，肠腑不通，气血壅滞腐败，化为脓血，故便下带血。实施例1中草药组合物组方上地榆、黄根为君药，地榆性味苦，酸，寒，归肝、大肠经；具有凉血止痢、止血，清热解毒功效。地榆用于吐血、衄血、血痢、崩漏、痈肿、痔漏，体外试验表明地榆对大肠杆菌、宋内痢疾杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、绿脓杆菌、霍乱弧菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌等有抗菌作用；地榆的乙醇浸液，在试管内对大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌有抑制作用。曾发现地榆有抗噬菌体作用，能灭活噬菌体且抑制噬菌体在菌体内繁殖，但并不阻止噬菌体与细菌吸附。而黄根：微苦；凉。凉血止血；利湿退黄；散瘀强筋；研究证明，用稀醇回流提取的黄根制剂，在体外平板法进行抗菌试验时，其抗菌率为72％，仅次于黄连素(80％)和链霉素(90％)，但优于青霉素(55％)。对金黄色葡萄球菌、炭疽杆菌有高度抗菌作用；对乙型链球菌、肺炎链球菌、伤寒杆菌、白喉杆菌及福氏痢疾杆菌有中度抗菌作用。稀醇回流提取黄根制剂对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为1：16，对炭疽杆菌的MIC为1：32，对伤寒杆菌的MIC为1：8。臣药驴蹄草驴蹄草味辛、微苦，凉清热利湿，解毒，用于中暑，尿路感染；外用治烧烫伤，毒蛇咬伤；驴蹄草所含三萜皂甙能使政党大鼠血中胆固醇水平明显下降，总蛋白减少，清蛋白无改变，球蛋白下降，血糖升高；此外，还具有明显的抗炎作用，能明显抑制大鼠甲醛性足跖肿胀，而其甙元之一的刘墩果酸抗炎作用则较弱。佐药丹参：性味味苦，微寒。归经归心、肝经。可以活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈。丹参对心血管系统的影响为改善循环抗凝血和扩展血管以及强心保肝等功效。总丹参酮、原儿茶醛等对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等和其耐药菌株有较强的抑菌作用。使药：陈皮性味味苦、辛，性温。归经归肺、脾经。功效理气健脾，燥湿化痰。陈皮具理气降逆、调中开胃、燥湿化痰之功。主治脾胃气滞湿阻、胸膈满闷、脘腹胀痛、不思饮食、呕吐秽逆、二便不利、肺气阻滞、咳嗽痰多，亦治乳痈初起。经多年研究，现已知陈皮对胃肠道有温和的刺激作用，可促进消化液的分泌，排除肠管内积气，显示了芳香健胃和驱风下气的效用，陈皮煎剂与维生素C、维生素K并用，能增强消炎作用。全方组合便发挥了凉血止痢、清热燥湿、活血去淤和理气健脾的功效。实施例1中草药组合物主要是抑制和杀灭细菌的繁殖，同时抗内毒素，并促进了凝血因子ADP和TXA2的释放，促进凝血反应减轻鸡大肠杆菌引起的血常规指标异常，以及内脏病变。剖检鸡只的脏器病理变化亦验证了这一点。该方可以作为一种预防鸡细菌感染的保健和治疗药物，以减少抗生素的使用，提高鸡肉和鸡蛋的品质。

上述说明示出并描述了本发明的若干优选实施例，但如前所述，应当理解本发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本发明的精神和范围，则都应在本发明所附权利要求的保护范围内。

Claims (5)

1.一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物，其特征在于，按照质量份包括以下组分：地榆2份-4份、黄根1份-4份、驴蹄草1份-3份、丹参1份-3份、陈皮0.5份-2份。

2.根据权利要求1所述的用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物，其特征在于，进一步地，该用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物按照质量份包括以下组分：地榆2.5份、黄根2份、驴蹄草2份、丹参2份、陈皮1.5份。

3.一种用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、预处理：将地榆、黄根、驴蹄草、丹参、陈皮干燥后粉碎过60目筛；

步骤2、称量：按照质量份称量步骤1预处理后的组分：地榆2份-4份、黄根1份-4份、驴蹄草1份-3份、丹参1份-3份、陈皮0.5份-2份；

步骤3、回流处理：将称量好的各组分回流提取，将滤液合并，放置过夜；

步骤4、将合并后的滤液浓缩至1：1，即相当于每毫升药液含生药1克；加乙醇使滤液的体积浓度达到75％，静止沉淀，取上清液浓缩，回收乙醇至无醇味，用HCl调节pH值到6，用注射用水调整总量，相当于原药材1g/mL，搅匀，灌装；121℃，15min灭菌。

4.根据权利要求3所述的用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤3中的回流具体为：将称量好的各组分回流提取2次，第一次15倍量的水，回流提取2小时，第二次10倍量的水，回流提取1小时。

5.根据权利要求3所述的用于绿壳蛋鸡体外抑菌的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤4中的HCl的浓度为2mol/L。