CN1056280C

CN1056280C - 龟粉和蛇粉的组合物及其制备方法

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Publication number: CN1056280C
Application number: CN97106310A
Authority: CN
Inventors: 杨洪根
Original assignee: LANGLIFU HEALTH PRODUCTS CO Ltd SUZHOU CITY
Current assignee: LANGLIFU HEALTH PRODUCTS CO Ltd SUZHOU CITY
Priority date: 1997-03-04
Filing date: 1997-03-04
Publication date: 2000-09-13
Anticipated expiration: 2017-03-04
Also published as: CN1165660A

Abstract

本发明涉及一种龟粉和蛇粉的组合物，它包括重量比为10%～40%的龟粉和60%～90%的蛇粉。所述的蛇粉是由乌梢蛇粉和腹蛇粉组成，制备所述的龟蛇组合物的方法是将龟及蛇去除内脏，用蒸气灭菌，然后高温干燥，再将所述的干燥后的龟蛇原料粉碎成80目以下的粉末。本发明具有能增强人的体质，提高人体免疫能力。

Description

龟粉和蛇粉的组合物及其制备方法

本发明涉及一种龟粉和蛇粉的组合物及其制备方法。

现有技术中，PCT/CN 95/00001公开了一种含龟和鳖的组合物及其制备方法和应用，实际生产时，由于鳖的价格极其昂贵，故所制成的混合后的粉末价格很高，尽管它有很高的营养价值，但仍使许多消费者无力购买。

本发明的目的在于提供一种价格低廉且具有较高营养价值的龟粉和蛇粉的组合物及其制备方法。

本发明的技术方案是：一种龟粉和蛇粉的组合物，它包括重量比为10％～40％的龟粉和60％～90％的蛇粉。龟蛇组合物的制备方法是：将龟及蛇去除内脏，用清水漂洗干净，再用100℃的蒸气灭菌2小时，然后在80～100℃的温度下干燥24小时，再将所述的干燥后的龟蛇原料粉碎成80目以下的粉末，按配比混合均匀，填充于胶囊中。

本发明经实验表明具有下列优点：

一.龟蛇粉对免疫功能的调节作用(本实验由南京医科大学营养与食品科学技术研究所进行)：

1.材料与方法：

1.1受试样品：

龟蛇粉由中外合资苏州朗力福保健品有限公司提供，该制剂为胶囊，每粒为04g，成份的重量比为龟20％，蛇80％(其中乌梢蛇50％，蝮蛇30％)。

1.2试验动物：

昆明种小鼠体重20～25g，由江苏省实验动物中心提供。合格证号：苏动(环)95100号和苏动(质)95035号。

1.3剂量分组：

根据龟蛇粉人体摄入量(0.4g×2粒×3次/日/人，相当于40mg/kg体重)，分别按其10倍、20倍、40倍设计三个剂量组及阴性对照组，即400mg/kg、800mg/kg、1600mg/kg及蒸馏水对照组，每日灌胃一次，连续30日。

1.4试验方法：按《保健食品功能学评价程序和检验方法》进行。

1.4.1二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠DTH(耳肿胀法)

1.4.1.1分组及给样：

取体重20～25g的雄性昆明种小鼠，随机分为四组，每组10只以上，分别灌服龟蛇粉低、中、高剂量即400mg/kg、800/kg、1600mg/kg及阴性对照(蒸馏水)，每日一次，连续30日。

1.4.1.2致敏：

每鼠腹部皮肤用硫化钡脱毛，范围约3cm×3cm，用1％DNFB溶液50ul均匀涂抹致敏。

1.4.1.3攻击：

5日后用1％DNFB溶液10ul均匀抹于小鼠右耳(两面)进行攻击。

1.4.1.4测定：

攻击后24小时颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下直径8mm的耳片，称重。

1.4.1.5数据处理：

以左右耳重量之差表示DTH的程度，采用方差分析进行数据统计。

1.4.2血清溶血素测定：

1.4.2.1分组及给样：

取体重20～25g的雌性昆明种小鼠，随机分为四组，每组10只以上，分组及给样方法同前。

1.4.2.2 SRBC及补体制备：

按检验方法进行。

1.4.2.3免疫动物及血清分离：

每鼠腹腔注射2％SRBC悬液0.2ml，4日后摘眼球取血，分离血清。

1.4.2.4溶血反应：

血清250倍稀释后，按检验方法测定样品管及SRBC半数溶血时的光密度值。

1.4.2.5数据处理：

溶血素的量以半数溶血值(HC50)表示，用方差分析进行数据统计。

1.4.3小鼠碳廓清试验

1.4.3.1分组及给样：

取体重20～25g雄性昆明种小鼠，随机分为四组，每组10只以上，分组及给样方法同前。

1.4.3.2测定：

每鼠尾静脉注入四倍稀释的印度墨汁(0.1ml/10g体重)，注入后2分钟及10分钟分别从内眦静脉丛取血20ul，并将其加到2ml的Na2CO3溶液中，用分光光度计在600nm波长处测光密度值。同时将小鼠处死，取肝脏和脾脏称重。

1.4.3.3数据处理：

用校正的吞噬指数a表示小鼠碳廓清能力，用方差分析进行数据统计。

1.4.4脏器/体重比值

1.4.4.1分组及给样：

同小鼠碳廊清试验。

1.4.4.2测定：

末次给样后24小时处死小鼠，称体重，取胸腺、脾脏并称重。1.4.4.3数据处理：用方差分析进行数据统计。2.结果2.1龟蛇粉对DNFB诱导小鼠DTH的影响：表1结果表明，龟蛇粉对DNFB诱导小鼠DTH未产生明显影响。

表1龟蛇粉对DNFB诱导小鼠DTH的影响组别剂量(mg/kg.BW) 动物数(只) 耳壳增重(mg)对照组 0 10 7.8±2.8低剂量组 400 10 10.6±4.9中剂量组 800 10 7.7±3.4高剂量组 1600 10 6.6±4.12.2龟蛇粉对小鼠血清溶血素形成的影响：由表2结果可见，龟蛇粉对小鼠血清溶血素的形成未产生明显影响表2龟蛇粉对小鼠血清溶血素形成的影响组别剂量(mg/kg.BW) 动物数(只) HC50对照组 0 10 32.1±20.4低剂量组 400 11 38.6±36.9中剂量组 800 10 44.2±24.6高剂量组 1600 10 34.7±22.2

2.3龟蛇粉对小鼠碳廊清作用的影响：

表3结果显示龟蛇粉中，高剂量组吞噬指数均高于对照组(P＜0.05)，表明龟蛇粉具有提高小鼠碳廊清的作用。

表3龟蛇粉对小鼠碳廊清作用的影响：组别剂量(mg/kg.BW) 动物数(只) 吞噬指数a对照组 0 10 4.8564±0.6304低剂量组 400 10 5.8114±2.4411中剂量组 800 10 5.9013±1.2447*高剂量组 1600 10 5.7907±0.9939

注：″*″与对照组比较，P＜0.05。

2.4龟蛇粉对免疫器官的影响：

由表4可以看出，龟蛇粉中、高剂量组胸腺/体重比值均高于对照组(P＜0.05)，表明龟蛇粉具有促进胸腺发育的作用。龟蛇粉对脾/体比值无明显影响。

表4龟蛇粉对免疫器官的影响组别剂量(mg/kg.BW) 动物数(只) 胸腺/体重(mg/g) 脾脏/体重(mg/g)对照组 0 10 1.51±0.55 5.64±1.26低剂量组 400 10 1.62±0.87 4.53±2.35中剂量组 800 10 2.85±1.87* 4.99±1.86高剂量组 1600 10 2.34±1.01* 5.02±2.06

注：″*″与对照组比较，P＜0.05。

二.龟蛇粉的搞疲劳作用(本实验由南京医科大学营养与食品科学技术研究所进行)：

3.材料与方法：

3.1受试样品：

龟蛇粉由中外合资苏州朗力福保健品有限公司提供，该制剂为胶囊，每粒为0.4g，成份的重量比为龟20％，蛇80％(其中乌梢蛇50％，蝮蛇30％)。

3.2试验动物：

3.3剂量分组：

3.4试验方法：按《保健食品功能学评价程序和检验方法》进行。

3.4.1负重游泳试验：

3.4.1.1分组及给样：

3.4.1.2测试：

末次给样30min后，每鼠负重5％体重的铅皮，置水温25℃、水深30～40cm的水箱中游泳，记录小鼠自游泳开始至死亡时间，作为小鼠游泳时间(min)。

3.4.1.3数据处理：

用方差分析进行数据统计。

3.4.2血乳酸测定：

3.4.2.1分组及给样：

同前。

3.4.2.2测定：

末次给样30min后负重2％在温度25～30℃的水中游泳60min后停止，安静15min后摘眼采血。取血20微升，按检验方法测定样品管及标准管的光密度，测定波长为560nm。血乳酸含量(mmol/L)＝A测定管/A标准管×4.4

3.4.2.3数据处理：

用方差分析进行数据统计。

3.4.3血清尿素氮测定

3.4.3.1分组及给样：

同前。

3.4.3.2测定：

末次给样30min后在温度25～30℃的水中游泳90min，摘眼球采血，取10微升血清二乙酰-肟法尿素氮试剂盒说明书测定。试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供。

3.4.3.3数据处理：

用方差分析进行数据统计。

3.4.4肝糖原测定

3.4.4.1分组及给样：

同前。

3.4.4.2测定：

末次给样30min后，在温度25～30℃的水中游泳90min，立即处死，取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，精确称取肝脏200mg，加入4ml三氯醋酸，匀浆、离心后取上清液按检验方法(蒽酮法)于620nm波长处测定样品管及标准管的光密度，根据所称取的肝脏重量及标准管光密度计算肝糖原含量。

3.4.4.3数据处理：

用方差分析进行数据统计。

3.4.5血清肌酐测定

3.4.5.1分组及给样

同前。

3.4.5.2测定

末次给样30min后在温度25～30℃的水中游泳90min，摘眼球采血，取200微升血清按血清肌酐测定试剂盒说明书测定。试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供。

3.4.5.3数据处理：

用方差分析进行数据统计。

3.4.6血红蛋白测定：

3.4.6.1分组及给样

同前。

3.4.6.2测定

末次给样30min后在温度25～30℃的水中游泳90min，摘眼球采血，按氰化高铁血红蛋白消化系数法测定血红蛋白含量。

3.4.6.3数据处理：

用方差分析进行数据统计。

结果

4.1龟蛇粉对小鼠运动耐力的影响：

表5结果表明，龟蛇粉中、高剂量组小鼠游泳时间均高于对照组，两者差异有显著性(P＜0.05)，表明龟蛇粉具有增强小鼠运动耐力的作用。

表5龟蛇粉对小鼠游泳时间的影响组别剂量(mg/kg.BW) 动物数(只) 游泳时间(min)对照组 0 10 15.5±23.0低剂量组 400 10 32.6±23.1中剂量组 800 10 36.9±18.8*高剂量组 1600 10 42.4±20.0*

注：″*″与对照组比较，P＜0.05。

4.2龟蛇粉对运动生化指标的影响：

由表6结果可以看出，龟蛇粉各剂量组血乳酸水平均低于对照组(P＜0.05)，中、高剂量组肝糖原含量均高于对照组(p＜0.05)，其余生化指标与对照组相比尚无明显变化。

表 6龟蛇粉对小鼠运动生化指标的影响：组别剂量血乳酸血清尿素氮肝糖原血清肌酐血红蛋白

(mg/kg.BW) (mmol/L) (mmol/L) (mg％) (mmol/L) (g/dl)对照组 0 6.22±1.68 6.87±1.04 39.9±35.5 92.9±52.9 14.0±0.9低剂量组 400 4.60±1.32* 6.86±0.73 44.4±41.5 93.3±34.1 14.4±2.0中剂量组 800 4.00±0.63* 7.63±1.88 90.4±32.9* 78.3±33.7 13.9±1.5高剂量组 1600 4.46±1.02* 7.50±2.07 90.3±30.3* 108.2±26.4 14.3±0.6

注：″*″与对照组比较，P＜0.05。

三.《本草纲目》日：″龟治腰膝酸痛″，入肾经、心经、肝经，性味咸、甘、平，具有滋阴补阳、益肾健骨的功效

实施例：

本实施例的龟粉和蛇粉的组合物，它包括重量比为10％～40％的龟粉和60％～90％的蛇粉。比较好的配方比例是所述的龟粉重量比含量是18％～23％，所述的蛇粉重比含量是77％～82％。所述的蛇粉是由乌梢蛇粉和腹蛇粉组成，所述乌梢蛇粉在蛇粉中所占的重量比为50％～80％，所述腹蛇粉在蛇粉中所占的重量比为20％～50％。所述龟为《本草纲目》中所称的山龟。制备所述的龟蛇组合物的方法是将龟及蛇去除内脏，用清水漂洗干净，再用100℃的蒸气灭菌2小时，然后在80～100℃的温度下干燥24小时，再将所述的干燥后的龟蛇原料粉碎成80目以下的粉末，按配比混合均匀，填充于胶囊中。

Claims

1.一种龟粉和蛇粉的组合物，它包括重量比为10％～40％的龟粉和60％～90％的蛇粉。

2.根据权利要求1所述的龟粉和蛇粉的组合物，其特征在于：所述的龟粉重量比含量是18％～23％，所述的蛇粉重比含量是77％～82％。

3.根据权利要求1所述的龟粉和蛇粉的组合物，其特征在于：所述的蛇粉是由乌梢蛇粉和腹蛇粉组成，所述乌梢蛇粉在蛇粉中所占的重量比为50％～80％，所述腹蛇粉在蛇粉中所占的重量比为20％～50％。

4.根据权利要求1所述的龟粉和蛇粉的组合物，其特征在于：所述龟为山龟。

5.一种制备如权利要求1所述的龟蛇组合物的方法，其特征在于：将龟及蛇去除内脏，用清水漂洗干净，再用100℃的蒸气灭菌2小时，然后在80～100℃的温度下干燥24小时，再将所述的干燥后的龟蛇原料粉碎成80目以下的粉末，按配比混合均匀，填充于胶囊中。