CN105622773B - 一种沙枣胶多糖的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种沙枣胶多糖的制备方法,该方法采用将夏天采集的沙枣树胶自然干燥,机械粉碎,并过筛分离杂质,制备树胶水溶液,并加热,保温,离心分离,再加热,搅拌滴加盐酸,再用过氧化氢处理之后加入丙酮得到沉淀物,将沉淀物用丙酮冲洗至过滤得到多糖沉淀物,再将多糖沉淀物进行低温或真空干燥或冷冻干燥,过滤,粉碎,得到白色沙枣胶多糖粉末。该方法提取得到的总多糖的得率达到90%以上,具有很好的水溶型,水溶液具有很好的透光率和高强度的粘度;保留了其多糖的物理化学性质,同时,本发明所述方法在一定程度上解析了新疆传统民间用的护发化妆品秘方沙枣树胶的物质基础提供了科学依据。
Description
技术领域
本发明涉及一种沙枣胶多糖的制备方法。
背景技术:
沙枣(Elaeagnus angustifolia L.)、尖果沙枣(E.oxycarpa Schlecht.)是胡颓子科胡颓子属植物,生长于半干旱、干旱、半荒漠、荒漠地区,是沙漠里的“宝树”。在美国、加拿大、地中海沿岸、伊朗、西亚、印度地区都有分布,我国境内新疆、青海、甘肃、内蒙古西部和宁夏生长面积较大,产量高,河北、河南和东北的部分省份也有分布,据统计,在我国沙枣林总面积约200万亩。沙枣是集多种功能为一体的经济型树种。具有“强壮、镇静、健胃、止泻、利尿”等保健功效。目前广泛应用于食品、药物、造纸、饲料、木材、家具等方面。
沙枣胶是沙枣茎枝胶汁的干燥品,文献记载可治疗骨折,在民间用作护发剂。其主要成分为多糖,多糖是一种天然高分子,广泛存在于植物、微生物(真菌和细菌)、藻类和动物体。是单糖通过糖苷键连接而成的聚合物,也是生命体不可缺少的重要组成部分,在细胞与细胞信息交流、细胞吸附、以及免疫系统分子识别方面扮演着极其重要的作用。关于多糖的研究越来越受到人们的关注,已成为当今研究的“热点”。近年来,从自然资源提取得到的一些多糖已经引起生物化学和药理学领域的极大重视。多糖已成为天然药物及保健品研发中的重要组成部分,国外多数制药公司都有从事糖类药物的研发。研究发现多糖具有抗氧化,抗肿瘤,抗凝血及免疫调节等多种功能。我国也十分重视多糖和糖复合物的研究工作,如国家基金委2011项目指南将扶持和鼓励多糖和糖复合物的研究列入生命科学重点资助方向。随着国内外对多糖研究的不断深入,已建立了一系列多糖提取纯化方法、结构分析方法及生物活性筛选方法,发现了许多具有重要生理活性的多糖。目前关于沙枣胶化学组成的研究仅见一篇报道[1],实验结果显示:沙枣胶含糖酸11.2%,由L-鼠李糖(L-rhamnose)7.47%,L-阿拉伯糖(L-arabinose)53.15%,D-甘露糖(D-mannose)2.00%,D-半乳糖(D-galactose)23.28%和糖醛酸(glycuronic acid)11.12%所组成,可代替阿拉伯胶使用。
随着社会的发展和生活质量的提高,药品消费也逐渐从以化学药品为主向以天然资源为原料的植物药转变,中药在治疗、康复保健和提高人体免疫能力方面有独特的优势,己成为世界医药产业的重要组成部分。
多糖的种类繁多,不同种多糖其提取分离方法各不相同。多糖是极性大分子化合物,大多采用不同温度的水、稀碱溶液或氯化钠水溶液作提取溶剂尽量避免在酸性条件下提取,因为酸性条件能引起多糖中糖昔键的断裂。多糖的提取方法大致分为以下几种。
(1)溶剂提取法
溶剂提取分为水浸提法、水加酶提取法。用水作溶剂来提取多糖,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提。水提取的多糖多是中性多糖。该法所得多糖提取液可直接或离心除去不溶物;或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质,用高浓度乙酵沉淀提纯多糖。
(2)酶法提取
酶法是通过酶反应将原料组织分解,加速有效成分的释放和提取,选择适宜条件将影响提取的杂质分解去除,促进某些极性低的脂溶性成分转化成糖,酶法提取中常用的酶有蛋白酶、纤维素酶、果胶酶等。由于酶具有专一性和选择性的特点,应用时多采用复合酶。同时需要注意的是一组酶之间的协同关系、底物、抑制剂和酶的浓度,酶解设备与工艺参数等也是需要考虑的。由于酶法条件温和、易去除杂质、回收率高和节约能耗等优点,因此酶法提取的应用前景十分广阔。
(3)超声波提取
超声波对媒质能产生独特的机械振动作用和空化作用。当超声波振动时能产生并传递强大的能量,使媒质结构发生变化,促使有效成分进入溶剂中。同时在液体中还会产生空化作用,即在有相当大的破坏应力的作用下,液体内形成空化泡的现象,伴随有强大的冲击波和微声流,从而破坏细胞壁结构,使其在瞬间破裂,植物细胞内的有效成分得以释放、直接进入溶剂并充分混合,从而提高提取率。
(4)微波提取
微波技术应用于提高提取得率主要因为以下两点:热效应和细胞收缩。提取过程中,微波辐射导致植物细胞内的极性物质产生大量热量,使得细胞内的温度迅速上升,液态水汽化产生的压力将细胞膜和细胞壁冲破,形成微小的孔洞,导致细胞内部和细胞壁水分减小,细胞收缩,表面出现裂纹,胞外溶剂容易进入细胞内,溶解并释放胞内多糖,因此应用微波加热提取手段能够显著缩短萃取时间,较大程度地提高多糖的萃取效率。
(5)超临界流体萃取法
在超临界状态下,超临界流体与目标物接触,使其依次把极性、沸点和分子量大小不同的成分萃取出来,当恢复到常压和常温时,溶解在流体中的成分立即以溶于吸收液的液体状态与气态流体分开,从而达到萃取目的。超临界萃取技术萃取能力强,提取效率高,生产周期短,容易发现新的活性成分,极少损失易挥发组分或破坏生理活性物质,没有溶剂残留,产品质量高。
沙枣胶含丰富的多糖,由于其粘性较大,多糖提取的操作不容易实施。目前国内关于沙枣胶提取多糖的工艺路线未见报道。
发明内容
本发明目的在于,提供一种沙枣胶多糖的制备方法,该方法采用将夏天采集的沙枣树胶自然干燥,机械粉碎,并过筛分离杂质,制备树胶水溶液,并加热,保温,离心分离,再加热,搅拌滴加盐酸,再用过氧化氢处理1-3分钟之后加入丙酮得到沉淀物,将沉淀物用丙酮冲洗至过滤得到多糖沉淀物,再将多糖沉淀物进行低温或真空干燥或冷冻干燥,过滤,粉碎,得到白色沙枣胶多糖粉末。该方法提取得到的总多糖的得率达到90%以上,具有很好的水溶型,水溶液具有很好的透光率和高强度的粘度;保留了其多糖的物理化学性质,同时,本发明所述方法在一定程度上解析了新疆传统民间用的护发化妆品秘方沙枣树胶的物质基础提供了科学依据。
本发明所述的一种沙枣胶多糖的制备方法,该方法以沙枣树胶为原料,利用弱酸水溶液提取,丙酮沉淀,冷冻干燥或烘干得到的沙枣树胶多糖白色粉末,具体操作按下列步骤进行:
a、在夏季8-9月份采集沙枣树胶,将收集的沙枣树胶在阴凉处自然晾干,机械粉碎,粉碎时间为60秒-180秒,使用圆形不锈钢网筛过滤100-400目,分离杂物,得到树胶粉末物;
b、将步骤a中得到的树胶粉末物用蒸馏水配置浓度为0.1-5%的树胶溶液;
c、将步骤b中树胶溶液加热,并在保温的状态下以1000-10000 r/min转的速度离心2-6分钟,分离除去机械杂质和有机杂质,得到树胶溶液备用;
d、将步骤c中的树胶溶液加热至温度80℃,并搅拌滴加浓度为8%-10%的盐酸,再用体积浓度为6-15%过氧化氢处理1-3分钟脱色,得到多糖溶液;
e、将步骤d脱色处理的多糖溶液中加入3-6倍体积的丙酮进行沉淀,并离心分离得到多糖沉淀物,将多糖沉淀物用丙酮冲洗3-4次至沉淀表面杂志去掉为至,再将多糖沉淀物进行低温或真空干燥或冷冻干燥,过滤,粉碎,得到白色沙枣胶多糖粉末。
步骤a中机械粉碎采用不锈钢摇螺纹式小型粉碎机。
本发明所述的一种沙枣胶多糖的制备方法,该方法采用10%弱酸协助提取,并离心分离除杂之后由丙酮沉淀干燥得到总多糖,其多糖提取率到达95%,粘度为12.90;提取方法简便,提取得率较高,见多糖粘度测定结果表1:
表1多糖粘度测定结果:
T=25℃
本发明所述的本发明所述的一种沙枣胶多糖的制备方法,其优点是得到多糖得率高,易于放大中试,而其在保留多糖原有的物理和化学性质以及营养成分基础上,通过利用低温或真空或冷冻干燥干技术,避免了传统烘干或减压抽滤而有些化合物失去活性的缺点。
利用新疆分布广泛,价格便宜的新疆少数民族在日常生活中用于固定发型用的传统化妆品为原料,根据其多糖成分的弱酸溶解性质,结合物理化学方法简易,而且易于工业化生产的方法得到沙枣树胶多糖,由于该树胶多糖在水溶液里具有很好的粘度,而且水溶液很透明,因此该多糖粉末可作为人们的日常护肤和保健用品等的组成成分。
附图说明
图1为本发明工艺流程图;
图2为本发明红外(IR)图谱;
图3为本发明紫外(UV)图谱。
具体实施方式
实施例1
a、每年夏季8-9月份采集沙枣树胶,将收集好的100克沙枣树胶,在阴凉处自然晾干之后不锈钢摇螺纹式小型粉碎机粉碎,粉碎时间为60秒,使用圆形不锈钢网筛过滤100目,分离杂物,得到树胶粉末物;
b、将步骤a中得到的树胶粉末物用蒸馏水配置浓度为0.1%的树胶溶液;
c、将步骤b中树胶溶液在电热套上加热溶解树胶,并在保温的状态下以1000r/min转的速度离心2分钟,分离除去机械杂质和有机杂质,得到树胶溶液备用;
d、将步骤c中的树胶溶液加热至温度80℃,并搅拌滴加体积浓度为8%的盐酸,再用体积浓度为8%的过氧化氢处理1-3分钟脱色,得到多糖溶液;
e、将步骤d脱色处理的多糖溶液中加入3倍体积的丙酮进行沉淀,并离心分离得到多糖沉淀物,将多糖沉淀物用丙酮冲洗3次至沉淀表面杂志去掉为至,再将多糖沉淀物进行真空干燥,过滤,粉碎,得到白色沙枣胶多糖粉末,分装即可。
实施例2
a、每年夏季8-9月份采集沙枣树胶,将收集好的100克沙枣树胶,在阴凉处自然晾干之后利用不锈钢摇螺纹式小型粉碎机粉碎,粉碎时间为80秒,使用圆形不锈钢网筛过滤200目,分离杂物,得到树胶粉末物;
b、将步骤a中得到的树胶粉末物用蒸馏水配置浓度为2%的树胶溶液;
c、将步骤b中树胶溶液在电热套上加热溶解树胶,并在保温的状态下以5000r/min转的速度离心3分钟,分离除去机械杂质和有机杂质,得到树胶溶液备用;
d、将步骤c中的树胶溶液加热至温度80℃,并搅拌滴加浓度为8%的盐酸,再用体积浓度为6%过氧化氢处理1-3分钟脱色,得到多糖溶液;
e、将步骤d脱色处理的多糖溶液中加入5倍体积的丙酮进行沉淀,并离心分离得到多糖沉淀物,将多糖沉淀物用丙酮冲洗4次至沉淀表面杂志去掉为至,再将多糖沉淀物进行冷冻干燥(-80℃),过滤,粉碎,得到白色沙枣胶多糖粉末,分装即可。
实施例3
a、每年夏季8-9月份采集沙枣树胶,将收集好的100克沙枣树胶,在阴凉处自然晾干之后利用不锈钢摇螺纹式小型粉碎机粉碎,粉碎时间为100秒,使用圆形不锈钢网筛过滤300目,分离杂物,得到树胶粉末物;
b、将步骤a中得到的树胶粉末物用蒸馏水配置体积浓度为3%的树胶溶液;
c、将步骤b中树胶溶液在电热套上加热溶解树胶,并在保温的状态下以8000r/min转的速度离心6分钟,分离除去机械杂质和有机杂质,得到树胶溶液备用;
d、将步骤c中的树胶溶液加热至温度80℃,并搅拌滴加浓度为10%的盐酸,再用体积浓度为10%过氧化氢处理1-3分钟脱色,得到多糖溶液;
e、将步骤d脱色处理的多糖溶液中加入6倍体积的丙酮进行沉淀,并离心分离得到多糖沉淀物,将多糖沉淀物用丙酮冲洗3次至沉淀表面杂志去掉为至,再将多糖沉淀物进行真空干燥,过滤,粉碎,得到白色沙枣胶多糖粉末,分装即可。
实施例4
a、每年夏季8-9月份采集沙枣树胶,将收集好的100克沙枣树胶,在阴凉处自然晾干之后利用不锈钢摇螺纹式小型粉碎机粉碎,粉碎时间为180秒,使用圆形不锈钢网筛过滤400目,分离杂物,得到树胶粉末物;
b、将步骤a中得到的树胶粉末物用蒸馏水配置浓度为5%的树胶溶液;
c、将步骤b中树胶溶液在电热套上加热溶解树胶,并在保温的状态下以10000r/min转的速度离心6分钟,分离除去机械杂质和有机杂质,得到树胶溶液备用;
d、将步骤c中的树脂溶液加热至温度80℃,并搅拌滴加浓度为10%的盐酸,再用体积浓度为15%过氧化氢处理1-3分钟脱色,得到多糖溶液;
e、将步骤d脱色处理的多糖溶液中加入6倍体积的丙酮进行沉淀,并离心分离得到多糖沉淀物,将多糖沉淀物用丙酮冲洗4次至沉淀表面杂志去掉为至,再将多糖沉淀物进行冷冻干燥(-80℃),过滤,粉碎,得到白色沙枣胶多糖粉末,分装即可。
本发明所述的一种沙枣胶多糖的制备方法,通过该方法得到的样品红外光谱图分析结果显示,样品含有OH基团,其在3447cm处有吸收表明含有OH基团;在1038cm处有吸收表明该多糖含有C-O-H基团,在1630cm处有吸收表明含有C=O基团;这些数据表明提取物是确实属于多糖类化合物的特征,图2。
通过本发明所述方法获得的沙枣树胶多糖经紫外图谱(UV)分析结果证实总多糖不含蛋白质,图3。
Claims (1)
1.一种沙枣胶多糖的制备方法,其特征在于该方法以沙枣树胶为原料,利用弱酸水溶液提取,丙酮沉淀,冷冻干燥或真空干燥得到的沙枣树胶多糖白色粉末,具体操作按下列步骤进行:
a、在夏季8-9月份采集沙枣树胶,将收集的沙枣树胶在阴凉处自然晾干,机械粉碎,粉碎时间为60秒-180秒,使用圆形不锈钢网筛过滤100-400目,分离杂物,得到树胶粉末物;
b、将步骤a中得到的树胶粉末物用蒸馏水配置浓度为0.1-5%的树胶溶液;
c、将步骤b中树胶溶液加热,并在保温的状态下以1000-10000 r/min转的速度离心2-6分钟,分离除去机械杂质和有机杂质,得到树胶溶液备用;
d、将步骤c中的树胶溶液加热至温度80℃,并搅拌滴加浓度为8%-10%的盐酸,再用体积浓度为6-15%过氧化氢处理1-3分钟脱色,得到多糖溶液;
e、将步骤d脱色处理的多糖溶液中加入3-6倍体积的丙酮进行沉淀,并离心分离得到多糖沉淀物,将多糖沉淀物用丙酮冲洗3-4次至沉淀表面杂质去掉为止,再将多糖沉淀物进行真空干燥或冷冻干燥,过滤,粉碎,得到白色沙枣胶多糖粉末。
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