CN105622507A

CN105622507A - 一种萘酰亚胺衍生物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN105622507A
Application number: CN201610099059.XA
Authority: CN
Inventors: 王玉霞; 田志勇; 谢松强; 苏雷棚; 王超杰
Original assignee: Henan University
Current assignee: Henan University
Priority date: 2016-02-23
Filing date: 2016-02-23
Publication date: 2016-06-01
Anticipated expiration: 2036-02-23
Also published as: CN105622507B

Abstract

本发明涉及两类萘酰亚胺衍生物及其用途，所述萘酰亚胺衍生物具有式Ⅰ或式Ⅱ结构。本发明提供的萘酰亚胺衍生物对HCT-116（人结肠癌细胞）、HepG2（人肝癌细胞）、K562（人慢性髓原白血病细胞）、SMMC-7721（人肝癌细胞）多种肿瘤细胞增殖均显示出明显的抑制活性，在体内能有效抑制肿瘤的肺转移。

Description

一种萘酰亚胺衍生物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种以多胺及烷烃链修饰氨萘菲特萘环的萘酰亚胺衍生物及其制备方法和应用。

背景技术

萘酰亚胺是一类已被证明具有广阔应用前景的抗癌试剂。许多萘酰亚胺衍生物(如DMP-840，Elinafide，Amonafide)已进入临床Ⅰ、Ⅱ期试验阶段。但大多数由于各种副作用如骨髓抑制、剂量限制等又被放弃。代表药物氨萘菲特(Amonafide)，是一种结合阿糖胞苷在患有急性骨髓性白血病患者身上正在进行临床III期阶段试验的药物。它的毒副作用有骨髓抑制、呕吐、皮疹以及中程度的静脉炎等，而引起这种毒副作用的原因有可能是氨萘菲特在体内易被NAT2酶乙酰化形成N-乙酰化的氨萘菲特。

发明内容

本发明的目的是提供一种以多胺及烷烃链修饰氨萘菲特萘环的萘酰亚胺衍生物及其制备方法和应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是，一种萘酰亚胺衍生物，具有式Ⅰ或式Ⅱ所示结构：

式Ⅰ中k取1或2；式ⅠR₁为多胺链或者烷烃链，式Ⅰ中X取2、3或4；式Ⅱ中R₂为多胺链或者烷烃链，式Ⅱ中X取1、2或3。

所述R1为中的任一种，其中m取1或2，n取1或2。

所述R2为中的任一种，其中m取1或2，n取1或2。

所述式Ⅰ结构萘酰亚胺衍生物的合成方法，包括以下步骤：(1)将氨萘菲特加入到反应容器中，加入无水碳酸钾和乙腈，室温下滴加氯乙酰氯的乙腈溶液或3-氯丙酰氯的乙腈溶液反应，制备得到化合物15；(2)将化合物15加入到乙腈和DMF(二甲基甲酰胺)的混合溶液中，加入R₁-NH₂，制备得到化合物16；(3)化合物16在无水乙醇中与4M盐酸反应，过滤即得式Ⅰ结构的萘酰亚胺衍生物(化合物17)。

所述式Ⅱ结构萘酰亚胺衍生物的合成方法，包括以下步骤：将氨萘菲特加入到反应瓶中，二氯甲烷溶液与三光气及痕量三乙胺回流反应得到化合物18，不用分离直接往反应瓶中加入R₂-NH₂继续回流反应，制得化合物19；将化合物19在无水乙醇中与4M盐酸反应，过滤即得式Ⅱ结构的萘酰亚胺衍生物(化合物20)。

所述萘酰亚胺衍生物在制备抗肿瘤药物方面的应用。

所述萘酰亚胺衍生物在制备抗肿瘤药物先导化合物方面的应用。

部分R₁-NH₂(或Boc酸酐保护)、R₂-NH₂(或Boc酸酐保护)的合成路线如下：

本发明中所用的氨萘菲特可以市购现有产品，也可以按照以下步骤合成：取10mmol(1.98g)1.8-萘二甲酸酐于10mL浓硫酸(98wt％)中，冰浴条件下缓慢滴加由0.66mL浓硝酸(63wt％～68wt％)和30mL浓硫酸(98wt％)配制而成的混酸，滴毕反应2.5h。然后冰箱中冷却12h，抽滤，冷水洗至中性，干燥，冰醋酸结晶，得化合物12；取10mmol(2.43g)化合物12与等摩尔量的N,N-二甲基乙二胺混合，30ml无水乙醇做溶剂，回流搅拌3h，TLC监测，反应完毕减压整除溶剂，二氯甲烷:甲醇＝100:3柱分离纯化得化合物13；10mmol(3.13g)化合物13与15ml浓盐酸、6.8g氯化亚锡混合，于85℃反应2h，抽滤收集固体,二氯甲烷:甲醇＝100:3作洗脱剂快速柱分离纯化,得氨萘菲特(化合物14)。

本发明的萘酰亚胺衍生物的合成路线如下：

本发明产生的有益效果是：将氨萘菲特的3-位氨基保护后在萘酰亚胺母体中引入含有不同氮原子的多胺长链，这样既阻止了体内乙酰转移酶对氨萘菲特环上氨基的乙酰化，又可利用多胺的运载功能将药效团靶向性的带入体内，得到高效低毒的靶向性新药。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，其目的是为更好理解本发明的内容。

实施例1

2-{3-[3-(3-氨基丙基)-氨基丙基]-氨基丙基}-2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮乙酰胺五盐酸盐(17a)的制备:

(1)取5mmol(1.04g)化合物14，无水碳酸钾7.5mmol(1.0g)于50ml乙腈中，室温搅拌下缓慢滴加氯乙酰氯的乙腈溶液5ml(含6mmol氯乙酰氯)，滴毕，室温搅拌过夜，反应结束，减压抽滤，收集固体，乙腈洗涤，干燥得化合物15a；

(2)1mmol化合物15a和1.5mmol(0.2g)无水碳酸钾于15ml干燥乙腈中，加5mlN,N-二甲基甲酰胺于混合溶液中，于45℃搅拌15min后，加入5a1mmol，45℃条件下搅拌，TLC监测，反应毕减压蒸除溶剂，氯仿萃取，饱和食盐水洗涤，收集有机层，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，二氯甲烷:甲醇＝100:5柱分离纯化，得化合物16a；

(3)取1mmol上步所得化合物16a于2ml无水乙醇中，冰浴搅拌下滴加4MHCl乙醇溶液2mL，滴毕，室温搅拌过夜至大量固体出现，过滤，收集固体，用重蒸过的无水乙醇洗涤三次，干燥得化合物17a。产率：78％,:¹HNMR(400MHz,D₂O)δ:8.05(d,J＝7.2Hz,1H,Ar-H)；7.88～7.94(m,3H,Ar-H)；7.55(t,J＝7.8Hz,1H,Ar-H)；4.29(t,J＝6.0Hz,2H,1×CH₂)；4.21(s,2H,1×CH₂)；3.42(t,J＝6.2Hz,2H,1×CH₂)；3.34(t,J＝7.8Hz,2H,1×CH₂)；3.12～3.25(m,8H,4×CH₂)；3.05(t,J＝7.8Hz,2H,1×CH₂)；2.97(s,6H,2×CH₃)；2.22～2.28(m,2H,1×CH₂)；2.09～2.15(m,2H,1×CH₂)；2.01～2.08(m,2H,1×CH₂)；ESI-MIm/z:512.4[M+1-5HCl]⁺.Anal.calcd.ForC₂₅H₄₀Cl₄N₆O₃:C46.73％,H6.68％,N14.13％；found:C46.8％,H6.55％,N14.23％。

实施例2

2-{3-[4-(3-氨基丙基)-氨基丁基]-氨基丙基}-2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮乙酰胺五盐酸盐(17b)的制备：

除第(2)步中用5b代替5a外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率:78％,白色固体:¹HNMR(400MHz,D₂O)δ:8.21(d,J＝7.2Hz,1H,Ar-H)；8.18(s,2H,Ar-H)；8.07(d,J＝7.6Hz,1H,Ar-H)；7.65(t,J＝7.8Hz,1H,Ar-H)；4.38(t,J＝6.2Hz,2H,1×CH₂)；4.20(s,2H,1×CH₂)；3.44(t,J＝6.2Hz,2H,1×CH₂)；3.30(t,J＝8.0Hz,2H,1×CH₂)；3.18(t,J＝8.0Hz,2H,1×CH₂)；3.01～3.12(m,8H,4×CH₂)；2.96(s,6H,2×CH₃)；2.18～2.22(m,2H,1×CH₂)；2.01～2.05(m,2H,1×CH₂)；1.73～1.75(m,2H,1×CH₂).ESI-MIm/z:526.4[M+1-5HCl]⁺.Anal.calcd.forC₂₈H₄₈Cl₅N₇O₃:C47.50％,H6.83％,N13.85％；found:C47.4％,H6.78％,N13.98％。

实施例3

2-{4-[4-(4-氨基丁基)-氨基丁基]-氨基丁基}-2-[2-(二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮乙酰胺五盐酸盐(17c)的制备：

除第(2)步中用5d代替5a外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率:75％,白色固体:¹HNMR(400MHz,D₂O)δ:8.09(d,J＝7.2Hz,1H,Ar-H)；8.0(d,J＝2.0,2H,Ar-H)；7.97(d,J＝2.0Hz,1H,Ar-H)；7.94(d,J＝8.0Hz,1H,Ar-H)；7.58(t,J＝7.8,1H,Ar-H)；4.32(t,J＝6.0Hz,2H,1×CH₂)；4.18(s,2H,1×CH₂)；3.43(t,J＝6.4Hz,2H,1×CH₂)；3.26(t,J＝7.6Hz,2H,1×CH₂)；3.03～3.13(m,8H,4×CH₂)；2.98(s,6H,3×CH₃)；1.79～1.93(m,4H,2×CH₂)；1.70～1.76(m,4H,2×CH₂).ESI-MIm/z:554.4[M+1-5HCl]⁺.Anal.calcd.forC₃₀H₅₂Cl₅N₇O₃:C48.95％,H7.12％,N13.32％；found:C48.89％,H7.23％,N13.28％。

实施例4

2-[3-(4-氨基丁基)-氨基丙基]-2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮乙酰胺四盐酸盐(17d)的制备

除在第(2)步中用3c代替5a，第(3)步中4MHCl乙醇溶液外加入量为1.5mL外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率:79％,白色固体:¹HNMR(400MHz,D₂O)δ:8.10～8.12(dd,J₁＝0.8Hz,J₂＝1.2Hz,1H,Ar-H)；8.00～8.03(dd,J₁＝J₂＝2Hz,2H,Ar-H)；7.96(d,J＝8.0Hz,1H,Ar-H)；7.59(t,J＝7.8Hz,1H,Ar-H)；4.33(t,J＝6.2Hz,2H,1×CH₂)；4.81(s,2H,1×CH₂)；3.44(t,J＝6.2Hz,2H,1×CH₂)；3.26(t,J＝7.6Hz,2H,1×CH₂)；3.12～3.16(m,4H,1×CH₂)；3.06(t,J＝7.8Hz,2H,1×CH₂)；2.99(s,6H,2×CH₃)；2.02～2.10(m,2H,1×CH₂)；1.81～1.91(m,4H,2×CH₂).ESI-MIm/z:469.3[M+1-4HCl]⁺.Anal.calcd.forC₂₅H₄₀Cl₄N₆O₃:C48.87％,H6.56％,N13.68％；found:C48.90％,H6.55％,N13.72％。

实施例5

2-[(3-氨基)-丙基]-2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮-乙酰胺三盐酸盐(17e)的制备：

除在第(2)步中用1a代替5a，第(3)步中4MHCl乙醇溶液加入量为1mL外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率：82％,whitesolide:¹HNMR(400MHz,D₂O)δ：8.06(d,J＝7.2Hz,1H,Ar-H)；7.95(d,J＝2.4Hz,1H,Ar-H)；7.98～7.91(m,2H,Ar-H)；7.56(t,J＝7.8Hz,1H,Ar-H)4.31(t,J＝6.2Hz,2H,1×CH₂)；4.21(s,2H,1×CH₂)；3.43(t,J＝6.4Hz,2H,1×CH₂)；3.34(t,J＝8.0Hz,2H,1×CH₂)；3.16(t,J＝7.8Hz,2H,1×CH₂)；2.99(s,6H,2×CH₃)；2.21～2.26(m,2H,1×CH₂).ESI-MIm/z:398.3[M+1-3HCl]⁺.Anal.calcd.forC₂₁H30Cl₃N₅O₃:C49.76％,H5.97％,N13.82％；found:C50.78％,H6.15％,N11.56％。

实施例6

2-[2-(2-二甲基氨基)-乙基]-2-[2-(二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮乙酰胺三盐酸盐(17f)的制备：

第(2)步中用N,N-二甲基乙二胺代替5a，第(3)步中4MHCl乙醇溶液加入量为0.5mL外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率80％,:¹HNMR(400MHz,D₂O)δ：7.99(d,J＝7.2Hz,1H,Ar-H)；7.76～7.83(m,3H,Ar-H)；7.50(t,J＝7.6Hz,1H,Ar-H)；4.26(t,J＝7.8Hz,4H,2×CH₂)；3.73(s,4H,2×CH₂)；3.42(t,J＝6.2Hz,2H,1×CH₂)；3.04(s,6H,2×CH₃)；3.00(s,6H,2×CH₃).ESI-MIm/z:384.3[M+1-3HCl]⁺.Anal.calcd.forC₂₃H₃₄Cl₃N₅O₃·0.5H₂O:C49.87％,H6.28％,N13.22％；found:C50.01％,H6.60％,N12.99％。

实施例7

2-[3-(3-氨基丙基)-氨基丙基]-2-[(2-二甲基氨基)-丙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮丙酰胺四盐酸盐(17g)的制备：

除第(1)步中用3-氯丙酰氯代替氯乙酰氯，第(2)步中用3a代替5a，第(3)步中4MHCl乙醇溶液加入量为1.5mL外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率:62％:¹HNMR(400MHz,D₂O)δ8.12～8.06(m,1H),7.96(d,J＝6.1Hz,2H),7.92(d,J＝7.9Hz,1H),7.60～7.52(m,1H),4.29(t,J＝6.2Hz,2H),3.41(dt,J＝12.7,6.6Hz,4H),3.24～3.17(m,2H),3.16～3.09(m,4H),3.02(d,J＝7.8Hz,4H),2.96～2.89(m,8H),2.12(d,J＝8.0Hz,2H),2.04～1.99(m,2H).ESI-MIm/z:648.11[M+1-5HCl]⁺

Anal.calcdforC₂₅H₄₁Cl₅N₆O₃:C46.13％,H6.35％,N12.91％；foundC46.10％,H6.37％，N12.93％。

实施例8

2-[3-(4-氨基丁基)-氨基丙基]-2-[(2-二甲基氨基)-丙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮丙酰胺四盐酸盐(17h)的制备：

除第(1)步中用3-氯丙酰氯代替氯乙酰氯，第(2)步中用3c代替5a，第(3)步中4MHCl乙醇溶液加入量为1.5mL外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率:64％:¹HNMR(400MHz,D₂O)δ8.15(d,J＝7.3Hz,1H),7.99(d,J＝7.3Hz,3H),7.64～7.59(m,1H),4.35(t,J＝6.2Hz,2H),3.46(t,J＝6.4Hz,4H),3.22～3.17(m,2H),3.13(d,J＝7.7Hz,4H),3.09～3.04(m,2H),2.98(d,J＝9.4Hz,8H),2.06(t,J＝7.9Hz,2H),1.83～1.80(m,2H).ESI-MIm/z:662.1[M+1-5HCl]⁺Anal.calcdforC₂₆H₄₃Cl₅N₆O₃:C46.96％,H6.52％,N12.64％；foundC46.94％,H6.50％，N12.62％。

实施例9

2-(3-丁基氨基)-2-[(2-二甲基氨基)-丙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮-丙酰胺盐酸盐(17i)的制备：

除第(1)步中用氯丙酰氯代替氯乙酰氯，第(2)步中用1b代替5a，第(3)步中4MHCl乙醇溶液加入量为1mL外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率:56％:¹HNMR(400MHz,D₂O)δ8.10(d,J＝7.3Hz,1H),8.00～7.91(m,3H),7.59～7.54(m,1H),4.30(t,J＝6.2Hz,2H),4.06(d,J＝12.4Hz,2H),3.76(t,J＝12.2Hz,2H),3.52(d,J＝12.7,5.5Hz,2H),3.47～3.38(m,4H),3.31～3.25(m,2H),3.24～3.14(m,4H),2.98～2.92(m,8H),2.25～2.16(m,2H).ESI-MIm/z:569.1[M+1-4HCl]⁺Anal.calcdforC₂₃H₃₅Cl₄N₅O₃:C48.35％,H6.17％,N12.26％；foundC48.33％,H6.19％，N12.24％。

实施例10

2-(3-丙基氨基)-2-[(2-二甲基氨基)-丙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮-丙酰胺盐酸盐(17j)的制备：

除第(1)步中用氯丙酰氯代替氯乙酰氯，第(2)步中用1a代替5a外，第(3)步中4MHCl乙醇溶液加入量为1mL外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率:55％：¹HNMR(400MHz,D₂O)δ8.09(d,J＝7.3Hz,1H),7.95(d,J＝8.2Hz,3H),7.59～7.54(m,1H),4.30(t,J＝6.2Hz,2H),3.42(t,J＝6.6Hz,4H),3.26～3.17(m,4H),2.99～2.93(m,8H),2.86(s,6H),2.22～2.12(m,2H).ESI-MIm/z:541.1[M+1-4HCl]⁺Anal.calcdforC₂₂H₃₂Cl₃N₅O₃:C50.73％,H6.19％,N13.45％；foundC50.74％,H6.20％，N13.37％。

实施例11

2-(3-二甲基氨基)-2-[(2-二甲基氨基)-丙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮-丙酰胺盐酸盐(17k)的制备：

除第(1)步中用3-氯丙酰氯代替氯乙酰氯，第(2)步中用N,N-二甲基丙二胺代替5a外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率:47％:¹HNMR(400MHz,D₂O)δ8.39～7.88(m,1H),7.62(t,J＝7.8Hz,1H),4.35(t,J＝6.1Hz,1H),3.42(t,J＝6.2Hz,1H),3.21～3.07(m,1H),3.06～2.86(m,3H),1.88～1.66(m,1H).ESI-MIm/z:583.1[M+1-4HCl]⁺Anal.calcdforC₂₄H₃₇Cl₄N₅O₃:C49.24％,H6.37％,N11.96％；foundC49.22％,H6.35％，N11.95％。

实施例12

2-(2-二甲基氨基)-2-[(2-二甲基氨基)-丙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮-丙酰胺盐酸盐(17l)的制备：

除第(1)步中用3-氯丙酰氯代替氯乙酰氯，第(2)步中用N,N-二甲基乙二胺代替5a外，第(3)步中4MHCl乙醇溶液加入量为1mL外，，其它合成及提纯方法同实施例1。产率:62％：¹HNMR(400MHz,D₂O)δ8.11～8.07(m,1H),7.98～7.89(m,3H),7.59～7.53(m,1H),4.30(t,J＝6.2Hz,2H),3.42(t,J＝6.6Hz,4H),3.24～3.19(m,2H),3.10～3.05(m,2H),2.95(d,J＝8.6Hz,8H),2.10(t,J＝7.9Hz,2H).ESI-MIm/z:569.1[M+1-4HCl]⁺Anal.calcdforC₂₃H₃₅Cl₄N₅O₃:C48.35％,H6.17％,N12.26％；foundC48.33％,H6.15％，N12.24％。

实施例13

2-[(3-吗啉基)-氨基丙基]-2-[(2-二甲基氨基)-丙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮丙酰胺四盐酸盐(17m)的制备：

除第(1)步中用3-氯丙酰氯代替氯乙酰氯，第(2)步中用10代替5a，第(3)步中4MHCl乙醇溶液加入量为1mL外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率:58％:¹HNMR(400MHz,D₂O)δ8.12～8.06(m,1H),7.96(d,J＝6.1Hz,2H),7.92(d,J＝7.9Hz,1H),7.60～7.52(m,1H),4.29(t,J＝6.2Hz,2H),3.41(t,J＝6.6Hz,4H),3.24～3.17(m,2H),3.16～3.09(m,4H),3.02(d,J＝7.8Hz,4H),2.96～2.89(m,8H),2.12(d,J＝8.0Hz,2H),2.04～1.99(m,2H).ESI-MIm/z:589.2[M+1-3HCl]⁺Anal.calcdforC₂₆H₃₉Cl₃N₅O₄:C52.84％,H6.48％,N11.85％；foundC52.81％,H6.45％，N11.89％。

实施例14

2-丁基-2-[(2-二甲基氨基)-丙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮-丙酰胺盐酸盐(17n)的制备：

除第(1)步中用3-氯丙酰氯代替氯乙酰氯，第(2)步中用正丁胺代替5a外，其它合成及提纯方法同实施例1。产率:54％：¹HNMR(400MHz,D₂O)δ8.25～8.17(m,3H),8.07(d,J＝8.3Hz,1H),7.66～7.61(m,1H),4.37(d,J＝6.1Hz,2H),3.54(s,4H),3.47(t,J＝6.6Hz,2H),3.40(t,J＝6.1Hz,2H),2.97(t,J＝6.6Hz,2H),2.91(s,12H).ESI-MIm/z:504.1[M+1-3HCl]⁺Anal.calcdforC₂₂H₃₁Cl₃N₄O₄:C52.23％,H6.18％,N11.08％；foundC52.21％,H6.15％，N11.06％。

实施例15

1-{2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮基}3-[4-(3-氨基丙氨)丁基]-脲盐酸盐(20a)的制备：

(1a)于100mL圆底烧瓶中加入0.53g(1.785mmol)三光气(BTC)，加入10mL二氯甲烷搅拌使其溶解，在冰浴条件下将溶有0.74g(2.615mmol)化合物14(氨萘菲特)及0.1mL三乙胺的二氯甲烷溶液(40mL)缓慢滴入圆底烧瓶中，30min内滴完，回流4.5h,即得化合物18的二氯甲烷溶液，不分离直接用于下一步反应；(2a)在含有1mmol化合物18的上一步制备的反应液中，直接加入含有1mmol3b的二氯甲烷溶液(5mL)，回流6h。浓缩柱分离纯化得化合物19。化合物19溶于5mL无水乙醇中，冷却至0℃，加入1.5mL4M盐酸乙醇溶液，自然升至室温，搅拌过夜至有大量固体生成，过滤，重蒸无水乙醇洗涤三次，干燥得产品20a。产率:62％,¹HNMR(D₂O,400MHz)δ8.11(d,J＝7.3Hz,1H),7.91(d,J＝7.5Hz,1H),7.83(s,1H),7.69(s,1H),7.59(t,J＝7.9Hz,1H),4.34(s,2H),3.46(t,J＝6.2Hz,2H),3.35(t,J＝6.8Hz,2H),3.21～3.10(m,4H),3.03(d,J＝10.1Hz,8H),2.04～1.93(m,2H),1.86～1.69(m,4H).ESI-MSm/z:455.3[M+1–3HCl]⁺.Anal.calcdforC₂₄H₃₇Cl₃N₆O₃·2H₂O:C48.04％,H6.89％,N14.01％；foundC48.31％,H6.69％,N13.88％。

实施例16

1-{2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮基}3-[3-(3-氨基丙氨)丙基]-脲盐酸盐(20b)的制备：

除第(2a)步中用3a代替3b外，其它合成及提纯方法同实施例15。产率:59％,¹HNMR(D₂O,400MHz)δ8.19(s,1H),8.02(s,2H),7.88(s,1H),7.63(s,1H),4.37(s,2H),3.44(t,J＝5.9Hz,2H),3.32(t,J＝6.7Hz,2H),3.13(dd,J＝13.3,5.8Hz,4H),3.08～3.03(m,2H),2.97(s,6H),2.10～2.01(m,2H),1.99～1.86(m,2H).ESI-MSm/z:441.2[M+1–3HCl]⁺.Anal.calcdforC₂₃H₃₅Cl₃N₆O₃·2.7H₂O:C46.15％,H6.80％,N14.04％；foundC46.35％,H6.99％,N13.75％。

实施例17

1-{2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮基}3-[(4-氨基)-丁基]-脲盐酸盐(20c)的制备：

除第(2a)步中用1b代替3b、4MHCl乙醇溶液加入量为1mL外，其它合成及提纯方法同实施例15。产率:54％,¹HNMR(D₂O,400MHz)δ8.05(d,J＝7.3Hz,1H),7.85(d,J＝8.3Hz,1H),7.73(s,1H),7.59～7.51(m,2H),4.29(t,J＝6.0Hz,2H),3.44(t,J＝6.1Hz,2H),3.25(t,J＝6.8Hz,2H),3.09～3.04(m,2H),3.01(s,6H),1.74(d,J＝7.2Hz,2H),1.64(dd,J＝15.1,6.9Hz,2H).ESI-MSm/z:398.2[M+1–2HCl]⁺.Anal.calcdforC₂₁H₂₉Cl₂N₅O₃·3.5H₂O；C47.28％,H6.80％,N13.13％；foundC47.23％,H7.07％,N12.87％。

实施例18

1-{2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮基}3-[(3-氨基)-丙基]-脲盐酸盐(20d)的制备：

除第(2a)步中用1a代替3b、4MHCl乙醇溶液加入量为1mL外，其它合成及提纯方法同实施例15。产率:58％,¹HNMR(D₂O,400MHz)δ8.12～8.06(m,1H),7.90(t,J＝6.7Hz,1H),7.81(d,J＝7.3Hz,1H),7.66(d,J＝8.2Hz,1H),7.58(td,J＝7.8,3.9Hz,1H),4.33(d,J＝3.1Hz,2H),3.45(t,J＝5.7Hz,2H),3.35(t,J＝6.3Hz,2H),3.14～3.08(m,2H),3.01(s,6H),2.00～1.92(m,2H).ESI-MSm/z:384.2[M+1–2HCl]+.Anal.calcdforC₂₀H₂₇Cl₂N₅O₃·1.05H₂O:C50.54％,H6.17％,N14.74％；foundC50.84％,H6.11％,N14.40％。

实施例19

1-{2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮基}3-{2-[(2-二甲基氨基)-乙基]}-脲盐酸盐(20e)的制备：

除第(2a)步中用N,N-二甲基乙二胺代替3b、4MHCl乙醇溶液加入量为1mL外，其它合成及提纯方法同实施例15。产率:65％,¹HNMR(D₂O,400MHz)δ8.09(s,1H),7.90(s,2H),7.69(s,1H),7.59(s,1H),4.34(s,2H),3.68(t,J＝6.0Hz,2H),3.47(t,J＝6.2Hz,2H),3.40(t,J＝6.0Hz,2H),3.02(t,J＝8.8Hz,12H).ESI-MSm/z:398.2[M+1–2HCl]⁺.Anal.calcdforC₂₁H₂₉Cl₂N₅O_3·3.6H₂O:C47.12％,H6.82％,N13.08％；foundC47.42％,H6.96％,N12.85％。

实施例20

1-{2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮基}3-[3-(3-哌嗪基)丙基]-脲盐酸盐(20f)的制备：

除第(2a)步中用8代替3b、4MHCl乙醇溶液加入量为1.5mL外，其它合成及提纯方法同实施例15。产率:56％,¹HNMR(D₂O,400MHz)δ8.18(d,J＝7.3Hz,1H),8.03～7.96(m,2H),7.84(s,1H),7.64(t,J＝7.8Hz,1H),4.38(t,J＝6.0Hz,2H),3.62(dd,J＝14.0,6.9Hz,8H),3.48(t,J＝6.1Hz,2H),3.38(t,J＝7.5Hz,4H),3.02(s,6H),2.11～2.02(m,2H).ESI-MSm/z:453.2[M+1–3HCl]⁺.Anal.calcdforC₂₄H₃₅Cl₃N₆O_3·8H₂O:C40.83％,H7.28％,N11.90％；foundC40.84％,H7.34％,N11.77％。

实施例21

1-{2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮基}3-[3-(3-吗啉基)丙基]-脲盐酸盐(20g)的制备：

除第(2a)步中用10代替3b、4MHCl乙醇溶液加入量为1mL外，其它合成及提纯方法同实施例15。产率:61％,¹HNMR(D₂O,400MHz)δ8.12(dd,J＝7.3,1.0Hz,1H),7.93(d,J＝7.8Hz,1H),7.89(d,J＝2.2Hz,1H),7.73(d,J＝2.2Hz,1H),7.62～7.56(m,1H),4.34(t,J＝6.1Hz,2H),4.11(d,J＝11.5Hz,2H),3.80(t,J＝12.4Hz,2H),3.56(d,J＝12.6Hz,2H),3.44(t,J＝6.2Hz,2H),3.34(t,J＝6.7Hz,2H),3.30～3.15(m,4H),2.98(s,6H),2.07～1.97(m,2H).ESI-MSm/z:454.2[M+1–2HCl]⁺.Anal.calcdforC₂₄H₃₃Cl₂N₅O₄·3H₂O:C49.66％,H6.77％,N12.06％；foundC49.75％,H6.63％,N12.02％。

实施例22

1-{2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮基}3-环己基脲盐酸盐(20i)的制备：

除第(2a)步中用环己基胺代替3b、4MHCl乙醇溶液加入量为0.5mL外，其它合成及提纯方法同实施例15。产率:63％,¹HNMR(D₂O,400MHz)δ7.99(d,J＝7.4Hz,1H),7.76(d,J＝8.2Hz,1H),7.57(s,1H),7.50(t,J＝7.7Hz,1H),7.31(s,1H),4.24(s,2H),3.43(t,J＝5.9Hz,2H),3.01(s,6H),1.92(s,2H),1.75(s,2H),1.48～1.18(m,6H).ESI-MSm/z:409.2[M+1–HCl]⁺.Anal.calcdforC₂₃H₂₉ClN₄O_3·2.4H₂O:C56.59％,H6.98％,N11.48％；foundC56.58％,H6.81％,N11.17％。

实施例23

1-{2-[(2-二甲基氨基)-乙基]1H-苯并异喹啉-1,3(2H)-二酮基}3-正丁基脲盐酸盐(20i)的制备：

除第(2a)步中用正丁胺代替3b、4MHCl乙醇溶液加入量为0.5mL外，其它合成及提纯方法同实施例15。产率：66％,¹HNMR(D₂O,400MHz)δ7.81(d,J＝7.1Hz,1H),7.55(d,J＝8.3Hz,1H),7.36(t,J＝7.7Hz,1H),7.27(s,1H),6.96(s,1H),4.10(t,J＝5.6Hz,2H),3.37(t,J＝5.9Hz,2H),3.09(t,J＝7.0Hz,2H),3.00(s,6H),1.56～1.48(m,2H),1.44～1.34(m,2H),0.96(t,J＝7.3Hz,3H).ESI-MSm/z:383.2[M+1–HCl]⁺.Anal.calcdforC₂₁H₂₇ClN₄O_3·0.9H₂O:C57.97％,H6.67％,N12.88％；foundC58.11％,H6.39％,N12.57％。

生物活性评价

(1)化合物体外抑制肿瘤细胞生长活性测定：

选择实施例1-23制备的化合物，分别取对数生长期的MDA-MB-231(乳腺癌细胞)、HCT-116(人癌细胞)、HepG2(人肝癌细胞)、K562(人慢性髓原白血病细胞)、SMMC-7721(人肝癌细胞)五种肿瘤细胞株，以每孔5000-8000个细胞埋入96孔板，90μL/孔。培养24h后，加入已知浓度的样品，对每个细胞株，每个浓度都有四个复孔，在37℃，5％CO₂条件下培养48h后，加MTT50μL，继续培养4h后弃上清，每孔加入100μLDSMO，轻轻振荡15min，用酶标仪在570nm波长处测其吸光度A值。按下面的公式计算被测物不同对肿瘤细胞生长的抑制率，实验重复三次，并由统计软件求出IC50值。结果见表1-1。

表1各实施例化合物对各种肿瘤细胞的生长抑制活性

实施例1～14

nd表示未测

(2)化合物对小鼠体内肿瘤肺转移的抑制测定：

取体外对数生长期的小鼠H22肝癌细胞，通过静脉注射向30只昆明小鼠注入H22细胞(5×10⁶个/只)，为确保在给药前所有小鼠的肿瘤平均生长，将其接种肿瘤后培养7天，取接种第7天后的小鼠模型，随机分为3组(每组10只)，分别为生理盐水组、实施例9组、阳性对照(氨萘菲特)组。在第8天通过尾部静脉注射向小鼠分别注射实施例9(5mg/kg)、氨萘菲特(5mg/kg)和生理盐水(10mL/Kg，阴性对照)，并且持续7天。第15天以颈椎脱臼法处死小鼠，用解剖显微镜计数各肺叶的结节数。以下列公式计算肺转移抑制率：抑制率(％)＝(1-治疗组平均肺结节数/阴性对照组平均肺结节数)×100％。实验结果见表2。结果表明实施例9化合物可有效抑制小鼠肿瘤肺转移。

表2实施例11化合物抑制小鼠体内肿瘤肺转移活性

本发明中提供的多胺修饰萘酰亚胺环上3-位氨基的化合物相比对照药物氨萘菲特在体外对多种肿瘤细胞均具有更高的抑制活性和更好的选择性，部分化合物与氨萘菲特活性相当。在体内实验中,实施例9对小鼠体内肿瘤肺转移的抑制能力明显高于对照药物氨萘菲特。因此可以将其应用于制备治疗肿瘤转移的药物。

上述实施例为本发明优选的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明所作的改变均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种萘酰亚胺衍生物，其特征在于，具有式Ⅰ或式Ⅱ所示结构：

式Ⅰ中k取1或2；式Ⅰ中R₁为多胺链或者烷烃链，式Ⅰ中X取2、3或4；式Ⅱ中R₂为多胺链或者烷烃链，式Ⅱ中X取1、2或3。

2.如权利要求1所述的萘酰亚胺衍生物，其特征在于，所述R₁为中的任一种，其中m取1或2，n取1或2。

3.如权利要求1所述的萘酰亚胺衍生物，其特征在于，所述R₂为或中的任一种，其中m取1或2，n取1或2。

4.如权利要求2所述萘酰亚胺衍生物的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将氨萘菲特加入到反应容器中，加入无水碳酸钾和乙腈，室温下滴加氯乙酰氯的乙腈溶液或3-氯丙酰氯的乙腈溶液反应，制备得到化合物15；(2)将化合物15加入到乙腈和DMF的混合溶液中，加入R₁-NH₂或Boc酸酐保护的R₁-NH₂，制备得到化合物16；(3)化合物16在无水乙醇中与4M盐酸反应，过滤即得式Ⅰ结构的萘酰亚胺衍生物；所述化合物15、化合物16的结构式分别为其中k取1或2。

5.如权利要求3所述萘酰亚胺衍生物的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：将氨萘菲特加入到反应瓶中，二氯甲烷溶液与三光气及痕量三乙胺回流反应得到化合物18，不用分离直接往反应瓶中加入R₂-NH₂或Boc酸酐保护的R₂-NH₂继续回流反应，制得化合物19；将化合物19在无水乙醇中与4M盐酸反应，过滤即得式Ⅱ结构的萘酰亚胺衍生物；化合物18的结构式为化合物19的结构式为

6.如权利要求1所述萘酰亚胺衍生物在制备抗肿瘤药物方面的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述萘酰亚胺衍生物在制备抗肿瘤药物先导化合物方面的应用。