CN105582316A - 一种止血抑菌合成材料及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种止血抑菌合成材料及其制备方法，干燥过后的白及经用蒸馏水热提取、加入中性蛋白酶水解蛋白、过滤、减压浓缩，然后用柱吸附、将洗脱液浓缩，减压浓缩，制得白及水溶性多糖纯品，其多糖含量在99％以上。取精制白及多糖加入水，加入丙烯酸搅拌混合，向其中加入10％过硫酸铵和TEMED，快速混合后室温下放置1～3小时，再加入水冲洗，最后将沉淀放置在真空干燥机中室温下进行缓慢干燥得干燥物至干。

Description

一种止血抑菌合成材料及其制备方法

所属技术领域：

本发明涉及一种止血抑菌合成材料产品，具体涉及到以白及多糖为原料合成止血抑菌材料及其止血抑菌药物中的应用，属于药物应用的技术领域。

背景技术

白及(Bletillastriata)，又名白给、连及草、紫兰根，为兰科白及属多年生草本植物，株高18～60cm。白及主要分布于东亚地区，在我国零星分布于陕西、甘肃、江苏、安徽、浙江、江西、福建、湖北、湖南、广东、广西、四川、重庆、云南和贵州等省(市)。通常生长于海拔100～3200m的常绿阔叶林或针叶林，以路边草丛、岩石缝中较散见。白及地下块茎肥厚、肉质、富粘性，常为3枚(个别种类为5枚或是1枚)，它是白及苗每年新生长的呈扁球形或扁卵圆形的假鳞茎，着生有数量较多的细长根。每枚假鳞茎在发芽季节可长出新芽1个。毗邻假鳞茎相连，串成叉状的地下茎(块根)。白及真正的茎很短，4～6枚狭长形或披针形叶着生基部成鞘并抱茎；叶长8～29cm，宽1.5～4cm。白及花紫红色或粉红色、白色、黄色，供观赏。白及属全球共6种，我国有白及(B.striata)、黄花白及(B.ochracea)、小白及(B.formosana)和华北白及(B.sinensis)分布。

白及假鳞茎是常用中药，止血收敛、消肿生肌功效好。入药内服主治肺结核咯血、支气管扩张咯血、胃溃疡吐血、尿血、便血等症；外用治外伤出血、烧烫伤、手足皲裂等。近年来研究发现，白及假鳞茎中的白及胶是主要药效部位，其主要成分是葡甘聚糖等多糖。白及胶的理化性质与阿拉伯胶、西黄蓍胶类似，但黏性特殊。

古医学著作记载白及“封填破损，痈肿可消。”。现代药理学实验证实，白及胶对受损伤组织有显著保护作用，能够对抗某些药物(如雷公藤)的毒性，因而与毒性药物配伍可降低药物毒副作用。研究表明，白及对胃、十二指肠等粘膜的保护治疗作用，机理是刺激粘膜细胞合成和分泌释放内源性前列腺素(PG)，不仅仅是机械性保护作用，该研究成果为中医药治疗各类溃疡病提供了重要的基础理论依据。显微观察伤口愈合时间，发现白及胶能显著增加创面渗出多核性白细胞、单核性白细胞和纤维细胞的数量，显著加快伤口愈合速度。采用皮肤器官培养法(浮游法)培养SD小鼠皮片，发现白及处理组的角质形成细胞游走比对照组的显著地快而长，培养出皮片的时间与游走长度呈正相关，反映白及胶直接参与受损组织细胞的修复和代谢过程。

白及胶目前广泛用于胃、食道、十二指肠等消化道溃疡，鼻腔、口腔等呼吸道粘膜溃疡，子宫、阴道等妇科疾病的粘膜溃疡，以及皮肤损伤、疮疡、烧烫伤等临床治疗，总有效率在90％以上，有些病例类型的治愈有效率高达100％，而且治愈效果受到年龄大小、病程长短、个体差异及不同职业等因素的影响较小。

白及胶属于分子量较小的天然聚合物，但无抗原性、无致热原性，与动物机体组织较好地相容，并可被缓慢地降解吸收。医药工作者利用白及胶的优良性能来修补破损组织，使某些外科疾病治疗无须手术也能解决。例如，朱志安等将白及胶与经过特殊处理的脱钙骨制成复合性生物颅骨材料，用于修复颅骨缺损，在相容性、可塑性、自由定型性，以及消毒硬化性方面均取得非常满意效果。对某些溃疡穿孔、吻合术后的痰管病例，运用口服白及胶或白及粉治疗，均有较好的填充修复作用。

局部介入治疗技术(化疗)广泛应用于恶性肿瘤临。从病变部位血管内给予高浓度药物栓塞化疗，可使恶性肿瘤明显坏死，患者生存期延长，生存率提高。但化疗常用栓塞剂如明胶、海绵、自体凝血块、不锈钢圈等，都存在着诸多不足，导致化疗的中长期疗效不甚满意。白及胶粘合力强，遇水可缓慢膨胀，降解吸收缓慢，作为化疗栓塞剂用于脏器出血、止血和恶性肿瘤的临床治疗，在不同管径血管中都可达到完全栓塞效果，而且可与各种抗肿瘤药物混合，又不引起全身性药物不良反应，疗效明显优于明胶、海绵栓塞的，是中长期化疗较理想的天然栓塞材料。

研究证明，动物机体内过量的自由基，可引起细胞损伤和死亡，加速皮肤衰老和皱纹产生。芮海云等研究发现，白及中性多糖有明显清除自由基的能力，其清除活性高于维生素E的。白及胶据此可作为延缓肌肤衰老的营养性化妆品原料。

白及胶黏度特性优异，堪比阿拉伯胶、黄耆胶，可作为食品、化妆品领域的增稠剂、悬浮剂、保湿剂和助乳化剂，还可作为良好的赋形剂、散剂、膜剂、凝胶剂的基质材料。白及胶、白及生物碱，以及白及其他活性成分，在抑制肿瘤细胞增生、延缓皮肤衰老，以及增稠、悬浮、保湿、助乳化和赋型等方面具有广泛市场前景。尤其是不同分子量的白及葡甘聚糖，在止血生肌新药开发方面具有极为广阔的市场前景。市场上现有不少与白及相关的止血药物，虽然能达到止血效果，但白及本身无明显的抑菌作用，严重影响了伤口的愈合。目前有关文献集中白及多糖的制备方面较多，特别在白及粗加工和白及多糖精制方面，其产品具有白及粗加工成本低且白及多糖含量不高，或白及多糖含量高且成本高等特点，严重阻碍了白及产业发展。

公开号为CN101002793的中国专利公开了一种白及多糖作为预防和治疗消化性溃疡药物的应用，涉及白及多糖提取物作为预防和治疗消化性溃疡药物的应用。本发明涉及的白及多糖是由天然药物白及块茎，通过离子交换层析与凝胶过滤层析等步骤获得的。动物试验表明，白及多糖分别对无水乙醇和乙酰水杨酸致小鼠胃溃疡有较好的抑制作用和显著的促进愈合作用。可制备成预防和治疗消化性溃疡的药物。

公开号为CN102475900A的中国专利公开了一种白及制成的止血材料及其制作方法，现有技术中的止血材料是用中药兰科植物干品研磨成粉末使用，其缺点杂质多，有效物含量少，止血效果差，本发明用白及多糖溶于水，将白及多糖溶于水，按重量百分比计，制成白及多糖的水溶液浓度是1-3％，在40-60℃冷冻，并在5-15mmHg下进行真空千燥8-0小时，得到海绵状材料；该材料可加工成薄膜，纤维，条，棒或多孔海绵状。在低温和真空干燥下制成，优点是工艺简单，使用方便，止血效果较优，该止血材料广泛应用于医学和生物医学工程。

公开号为CN1424111的中国专利公开了一种用于肝、肾动脉栓塞的白及微球。本发明所述的白及微球的粒径为5μm-200μm。可用作抗癌药物载体，从而可获得一种载药白及多糖微球，白及微球的制备方法包括以下步骤：白及多糖水溶液和动物胶(或植物来源胶)溶于水后，经布氏漏斗趁热减压过滤，加入抗癌药，喷雾干燥，再经交联剂固化，即获得微球。白及多糖在微球中可起骨架作用，能很好地镶嵌于肝、肾动脉末稍，切断肿瘤血供。同时，微球内药物可从白及骨架内缓释至靶部位，减少外周血药浓度，起到双重治疗作用。白及胶具有良好的生物相容性，在体内不致引起排斥反应；再加上由于胶体本身具有生物可降解性及确定的抗癌效果，可以说以白及多糖作为微球的骨架，能起到一举多得的效果。

公开号为CN101195839的中国专利公开了一种白及多糖胶精制工艺，该工艺步骤是将白及粗多糖用热醇洗涤，加水复溶，加入蛋白酶酶解，灭酶，离心，收集上清液，加入乙醇醇沉，再用复合溶液洗涤，过滤，烘干，贮存。该工艺制得的产品纯度高，有良好的溶解性能，拓宽了产品应用范围；该工艺用酶量小，原料易得，成本低，易于工业化生产。

公开号为CN102477102A的中国专利公开了一种白及多糖用于止血材料的方法，现有技术中止血材料是直接用白及块茎研磨成粉使用，其缺点是含杂质多，不能控制有效物含量，使用不方便，本发明是从兰科植物白及块茎干品中加水溶解提取，用乙醇沉淀干燥制成粗粉，其优点是提取方法不复杂，成本低，有效物含量高，杂质少，止血效果好，粗粉经处理后可以制成海绵状材料和止血牙塞等制品，广泛用于医学和生物医学工程。

公开号为CN102453106A的中国专利公开了一种白及多糖的制备方法，制备步骤为：1、白及粗多糖的提取：取白及块茎200g，粉碎，过20目筛，加入其2-4倍质量体积为70-90％的乙醇浸泡4h，沥干乙醇后，再加入原料质量的10-20倍去离子水进行提取，温度60-80℃，搅拌浸提3-4h，过滤分离滤渣，滤液8000r/min离心15min；2、酶法精制白及多糖：白及粗多糖浓度为2-5％，加入木瓜蛋白酶1-12mg/g进行水解，水解体系的pH为5.5-8.5，水解温度为40-60℃，水解时间为30-240min，酶解完成后在水解液中加入3倍体积的95％乙醇，于4℃冰箱静置沉淀5h，过滤。

公开号为CN101906169A的中国专利公开了一种白及多糖制备的工艺组合，基于匀浆化提取结合陶瓷膜微滤浓缩为核心工艺的、以水为溶媒低温制备高纯度白及多糖的工艺组合。经洗净、粉碎、混合、匀浆化、沉降离心、介质过滤、微滤浓缩、醇沉和干燥步骤获得白及多糖。

公开号为CN102670498A的中国专利公开了一种缓释型西罗莫司眼用制剂，以西罗莫司为药效原料，以白及多糖胶作缓释剂，配以适当辅料制作，白及多糖胶用量为：西罗莫司∶白及多糖胶＝1.0∶0.5-5.0。本发明以白及多糖胶作为粘膜粘附性聚合物释药系统，解决了西罗莫司在单纯水溶液中溶解性和稳定性差的问题，又利用白及收敛、止血、清热利湿、消肿生肌的功效，增强西罗莫司的免疫抑制效果和眼组织穿透性。

公开号为CN1709915的中国专利公开了一种用于促进细胞黏附生长的多糖材料及制备方法，取天然药物白及块茎进行多糖组份初步提取，经小分子脂溶性物质去除蛋白，再经离子交换层析、凝胶过滤层析，得纯品提取物白及多糖材料，呈固体粉末状，再灭菌处理等。本发明从天然药物白及中分离、提取得到的白及多糖作为一种多糖，能与细胞外基质成分作用，促进细胞黏附与贴壁生长；同时，白及多糖作为天然药物成分，其交联所得的膜，成型良好，具有很强的韧性，良好的生物相容性和可降解性，是组织工程材料的良好选择。解决了现有技术无法克服的多糖物质具有较强的亲水性及较难的可塑性的缺陷。本发明制备方法简单，易于控制，费用低。

公开号为CN101342188的中国专利公开了一种白及多糖在制备增强造血功能的药物中的应用，所述应用包括：白及多糖在制备增强造血功能的药物中的应用、在制备升高白细胞的药物中的应用、制备升高造血干细胞的药物中的应用、制备升高红细胞和血小板的药物中的应用和制备治疗贫血的药物中的应用。

公开号为CN101249274的中国专利公开了一种促进伤口愈合的白及多糖水凝胶的制备及其应用，水凝胶由醛基化的白及多糖、交联剂与去离子纯水组成，聚合物的质量百分比为3-25％。本发明水凝胶的特点是，具有良好的消炎作用，良好的透气性，良好的保湿作用以及吸收创伤分泌物的功能，在动物模型中显著提高了创伤愈合的速度，作为一种理想的医用外科愈伤药具有广阔的应用前景。

公开号为CN101380281的中国专利公开了一种丹皮酚白及多糖包合物及其制备工艺和应用，该包合物中两种成分的重量百分比例为：白及多糖70％-95％，丹皮酚5％-30％。该包合物可作为化妆品添加剂，加入相关化妆品产品后对皮肤祛斑增白、延缓皮肤衰老、润肤保湿，抗菌消炎等都具有显著作用。

公开号为CN1312297的中国专利公开了一种止血材料BG多糖的提取方法，将干品白及块茎粉碎后过筛；过筛固体溶于去离子水，按重量比过筛固体∶去离子水比为1∶5-6，温度70±5℃，溶出时间2-3小时；离心10-15分钟，得澄清粘稠溶液；絮凝，将离心所得溶液加入溶液体积2倍量的95％乙醇，静置，过滤，50-60℃干燥。其优点是提取方法不复杂，成本低，有效物含量高，杂质少，止血效果好，粗粉经处理后可以制成海绵状材料和止血牙塞等制品，广泛用于医学和生物医学工程。

因此，从现有文献资料表明，利用白及制成止血材料，一种方法是炮制后粉碎直接使用和与药物混合使用，但白及中淀粉易造成患者伤口感染；另一种方法是白及多糖精制后使用，在白及多糖精制过程中由于白及中酚类物质去除，不能有效刺激患者伤口周围皮肤快速愈合。目前需要一种新型止血活肤药物，该药物既能起到止血作用和在抑制病原菌的同时能促进皮肤快速修复，又能便于制备和成本低廉，同时能有效发挥各个成分的保健活性，并且能有效降低中药成份以及配药的毒性。

发明内容

本发明充分利用白及胶自身抑菌的特点，再将其中一些分子串联起来，形成一层薄膜，达到外部止血的效果，同时白及胶的水合性好，达到快速修复机体表面的目地。而且现有的抑菌材料中大部分都含有重金属元素，接触对皮肤有一定程度的损伤。

本发明所提到的白及多糖是从干燥过后的白及经用蒸馏水热提取、加入中性胰蛋白酶水解蛋白、过滤、减压浓缩，然后用柱吸附、将洗脱液浓缩，减压浓缩，制得白及多糖纯品，其多糖含量在98％以上，并将白及多糖应用于止血抑菌材料中。

因此，本发明第一个目的是提供一种止血抑菌合成材料是由各原料成份以以下重量份组成：取精制白及多糖20～45份加入3～10倍重量的水，加入丙烯酸5～10份搅拌混合10～30min后，得混合物；再向其中加入10％过硫酸铵和TEMED，快速混合后室温下放置1～3小时，再加入水冲洗，最后将沉淀放置在真空干燥机中室温下进行缓慢干燥得干燥物至干。

在一个具体实施方案中，其中各原料成分以以下重量份组成：取精制白及多糖20～45份加入3～10倍重量的水，加入丙烯酸5～10份搅拌混合10～30min后，得混合物；再向其中加入10％过硫酸铵和TEMED，快速混合后室温下放置1～3小时，再加入水冲洗，最后将沉淀放置在真空干燥机中室温下进行缓慢干燥得干燥物至干。

在另一个具体实施方案中，其中各原料成分以以下重量份组成：取精制白及多糖20～45份加入3～10倍重量的水，加入丙烯酸5～10份搅拌混合10～30min后，得混合物；再向其中加入10％过硫酸铵和TEMED，快速混合后室温下放置1～3小时，再加入水冲洗，最后将沉淀放置在真空干燥机中室温下进行缓慢干燥得干燥物至干。

上述过硫酸铵的作用是作为催化剂、TEMED的作用是作为激活剂，通过水洗在产品中会去除。

本发明第二个目的是提供一种止血抑菌材料的具体制备方法，并将它用于止血抑菌材料中，步骤包括：

(a)取精制白及多糖20～45份加入3～10倍重量的水，加入丙烯酸5～10份搅拌混合10～30min后，得混合物；

(b)再向混合物中加入10％过硫酸铵和TEMED，快速混合后室温下放置1～3小时，再加入一定量的水搅拌后5000～10000rpm离心，去上清液，重复一次，得沉淀Ⅵ；

(c)将沉淀Ⅵ放置在真空干燥机中室温进行缓慢干燥得干燥物，即为止血抑菌材料。

在一个实施方案中，步骤(b)中所述10％过硫酸铵的体积μL与混合物的体积mL比为20～50：100；TEMED(四甲基乙二胺)的体积μL与混合物的体积mL比为10～50：100；所述加入水的量mL与混合物的体积mL比为20～50：10。

10％过硫酸铵的配制方法为称取10g过硫酸铵，用水溶解后，定容至100ml。

上述止血抑菌材料或白及多糖都可以直接用于各种患者伤口的止血、皮肤愈合等材料中，也可以用于抑制各种病原菌等医用材料中的应用。

本发明第三个目的是提供一种白及多糖的制备方法，并将它用于止血抑菌材料中，步骤包括：

(1)白及多糖提取：粉碎干燥白及，加入淀粉酶水溶液，使淀粉酶终浓度为2U以上，40℃保温处理3～7h，加热至60～80℃进行回流提取90～180min，经0.22um陶瓷膜过滤1次，得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ；

(2)白及多糖纯化：将滤液Ⅰ在50～60℃减压浓缩至一定体积，再加入乙醇至终浓度达到80％以上，醇沉10～20h，进行过滤，得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ，滤液Ⅱ进行浓缩结晶得葡萄糖，向滤渣Ⅱ中加入中性蛋白酶，水解10～40min后，80～90℃保温10min，用0.22μm陶瓷膜过滤1次，得滤液Ⅲ，再将滤液Ⅲ上SEPHADEXG-15柱分离收集洗脱液，并浓缩洗脱液至原有体积的1/15～1/25，再上硅胶柱分离收集白及多糖成分浓缩至干，获得白及多糖。

在一个实施方案中，步骤(1)中所述淀粉酶水溶液的体积(L)与白及重量(kg)比为8～20:1；淀粉酶由津市市新型发酵有限责任公司提供，也可以从市场上购买，淀粉酶使用终浓度为2U以上(其中U是指国际酶活力单位)。

在一个实施方案中，步骤(2)中所述一定体积是指原有体积的1/10～1/20。

在一个实施方案中，步骤(2)中所述中性蛋白酶溶液的体积(L)与滤渣Ⅱ重量(kg)比为1～3:1；南宁东恒华道生物科技有限责任公司提供，也可以从市场上购买，中性蛋白酶使用终浓度为5U以上(U是指国际酶活力单位)。所用淀粉酶只能水解葡萄糖与葡萄糖连接的糖苷键。

在一个实施方案中，步骤(2)中所述过滤：膜孔径为0.22μm的陶瓷膜过滤一次。

在一个实施方案中，步骤(2)中用水作为洗脱液，分别进行洗脱SEPHADEXG-10柱和硅胶柱；用3BV～5BV的水进行洗脱柱子，BV是指柱体积。

技术效果

1、本发明所述的白及多糖水溶性好，易吸收，具有多方面的调理作用，副作用小，有明显抑菌效果、止血效果快。

2、由于淀粉酶只能水解葡萄糖之间形成的糖苷键，利用淀粉酶可对白及中淀粉进行水解，防止淀粉在高温水溶液中转变成糊精，不利于白及多糖快速释放到水相中，也利于后期提取分离，有效地提高白及多糖的产量。

3、该止血抑菌材料比现有材料的止血修复皮肤能力更强，安全性更好。

4、与CN103665400A中介绍方法相比较，本发明材料添加透明质酸，能更利于皮肤吸收，与凝胶并未化学结合，同时减少白及中酚菲类物质的影响，作为美容基材更便宜于添加至其它美容产品应用中。

具体实施方式

下面，本发明将用实施例进行进一步的说明，但是它并不限于这些实施例的任一个或类似实例。

实施例1：白及多糖的制备方法

粉碎干燥白及100kg，加入1100L的淀粉酶水溶液，使淀粉酶的终浓度为3U以上，40℃保温处理6小时，得水解混合液；再加热至70℃进行回流提取150min，经0.22μm陶瓷膜过滤1次，得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ；将滤液Ⅰ在50～60℃减压浓缩至原有体积的1/15，再加入95％乙醇至终浓度达到80％以上，醇沉15h，进行过滤，得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ，滤液Ⅱ进行浓缩结晶得葡萄糖；向滤渣Ⅱ中加入中性胰蛋白酶溶液，使中性蛋白酶的终浓度为5U以上，水解30min后，80～90℃保温10min，用0.22μm陶瓷膜过滤1次，得滤液Ⅲ，再将滤液Ⅲ上SEPHADEXG-15柱分离，用3BV～5BV的水作为洗脱液，收集含多糖成分的洗脱液，并浓缩洗脱液至原有体积的1/20，再上硅胶柱分离，用3BV～5BV的水作为洗脱液，收集白及多糖成分浓缩至干，获得976g白及多糖。经蒽酮—浓硫酸法测定多糖含量为99.88％。

实施例2：止血抑菌材料的制备方法

称取精制白及多糖24克，加入100克的水，加入6克丙烯酸搅拌混合30min后，得混合物100mL左右。再向混合物中加入10％过硫酸铵30μL和TEMED20μL，快速混合后室温下放置2小时，再加入200mL的水搅拌后7000rpm离心，去上清液，重复一次，得沉淀Ⅵ。将沉淀Ⅵ放置在真空干燥机中室温进行缓慢干燥得干燥物，即为白及凝胶27克。

实施例3：止血抑菌材料的制备方法

称取精制白及多糖30克，加入150克的水，加入7克丙烯酸搅拌混合20min后，得混合物150mL左右。再向混合物中加入10％过硫酸铵50μL和TEMED40μL，快速混合后室温下放置2小时，再加入250mL的水搅拌后8000rpm离心，去上清液，重复一次，得沉淀Ⅵ。将沉淀Ⅵ放置在真空干燥机中室温进行缓慢干燥得干燥物，即为白及凝胶35克。

Claims (9)

1.一种止血生肌药物，由各原料成份以以下重量份组成：白及水溶性多糖4～10份、壳聚糖1～3份、乳酸0.4～1.5份、紫珠草提取物1～2份混合后冷冻至干，其中所述紫珠草提取物由紫珠草3～6份、七叶一枝花2～5份、仙鹤草2～5份，其余为90％乙醇水溶液，冷浸提90-180min，经0.22um陶瓷膜过滤1次，将滤液减压浓缩至干。

2.权利要求1的止血生肌药物，其中各原料成份以以下重量份组成：白及水溶性多糖4～8份、壳聚糖1～2份、乳酸0.5～0.7份、紫珠草提取物1～2份混合后冷冻至干，其中所述紫珠草提取物由紫珠草3～5份、七叶一枝花2～4份、仙鹤草2～4份，其余为90％乙醇水溶液，冷浸提90-180min，经0.22um陶瓷膜过滤1次，将滤液减压浓缩至干。

3.权利要求1的止血生肌药物，其中各原料成份以以下重量份组成：白及水溶性多糖5份、壳聚糖1份、乳酸0.6份、紫珠草提取物1份混合后冷冻至干，其中所述紫珠草提取物由紫珠草4份、七叶一枝花3份、仙鹤草3份，其余为90％乙醇水溶液，冷浸提90-180min，经0.22um陶瓷膜过滤1次，将滤液减压浓缩至干。

4.权利要求1-3的白及水溶性多糖的制备方法，其具体步骤包括：

(1)白及水溶性多糖提取：粉碎干燥白及，加入淀粉酶水溶液，使淀粉酶终浓度为2U以上，40℃保温处理3-7小时，加热至60-80℃进行回流提取90-180min，经0.22um陶瓷膜过滤1次，得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ；

(2)白及水溶性多Ⅰ糖纯化：将滤液Ⅰ在50～60℃减压浓缩至一定体积，再加入乙醇至终浓度达到80％以上，醇沉10～20h，进行过滤，得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ，滤液Ⅱ进行浓缩结晶得葡萄糖，向滤渣Ⅱ中加入中性蛋白酶，水解10～40min后，80～90℃保温10min，用0.22μm陶瓷膜过滤1次，得滤液Ⅲ，再将滤液Ⅲ上SEPHADEXG-15柱分离收集洗脱液，并浓缩洗脱液至原有体积的1/15～1/25，再上硅胶柱分离收集白及水溶性多糖成分浓缩至干，获得白及水溶性多糖。

5.权利要求4的方法，步骤(1)中所述淀粉酶水溶液的体积L与白及重量kg比为8-20:1。

6.权利要求4的方法，步骤(2)中所述一定体积是指原有体积的1/10-1/20。

7.权利要求4的方法，步骤(2)中所述中性蛋白酶溶液的体积L与滤渣Ⅱ重量kg比为1-3:1。

8.权利要求4的方法，步骤(2)中用水作为洗脱液，分别进行洗脱SEPHADEXG-10柱和硅胶柱。

9.权利要求1-8的方法，通过上述方法所制备的产品直接用于各种伤口的表面止血材料中，直接用于化妆品中保水材料和除皱方面的应用。