CN105533136B - 一种新型发酵饲料的制备方法及虫酵素 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种新型发酵饲料的制备方法及虫酵素，所包括以下步骤：粘取蝇蛆代谢产物，然后接种至固体培养基中进行培养，挑取各个菌落转接至液体培养基中，进行扩大培养，得到菌液；以蝇蛆蛋白粉、豆粕、粗饲料作为主要原料，调配发酵底料，并将发酵底料粉碎；将菌液和水混合均匀，喷洒至发酵底料上，混合均匀；将发酵底料运输酵解池内，铺撒均匀后静置发酵；密封包装。利用蝇蛆代谢产物所含有的微生物群来对发酵底料进行处理，由于蝇蛆粉和微生物的同源性，可以深化发酵效果，让发酵产品的各种有益生物活性物质得以更好、更高效地积累。
Description
技术领域
本发明涉及饲料领域，主要涉及一种新型发酵饲料的制备方法及虫酵素。
背景技术
随着养殖业的发展，蛋白质饲料需求缺口越来越大，尤其是优质蛋白质饲料如鱼粉、豆粕等对进口的依赖增强，迫切需要有一些新资源、新技术来解决蛋白质饲料源短缺的问题。使用微生物发酵技术来处理饲料原料，或可以除去植物性蛋白质原料(如豆粕)中的抗营养因子，有效提高植物性蛋白质原料的消化吸收效果，节省蛋白质原料；或改善饲料适口性，提高动物采食量；或在饲料中积累某些有益生物活性物质，提升动物生产性能。总之，微生物发酵技术是以挖掘饲料原料潜力为目的的一项很有前途的生物处理技术。但是目前，对于发酵饲料国家没有统一的国家标准，基本只有企业自订的标准，产品质量、各种参数等参差不齐。具有自动化程度低，专业人员缺乏，对于固体发酵各阶段过程的控制、半成品品质的监控等方面缺失明显，产品质量受外界环境影响较大，不同批次产品不稳定等缺点。而且，一般的企业所使用的微生物是从企业外购买或其它途径获得的普通商业菌株，生产效率不一。培养底料也较为单一，主要是豆粕或棉粕等原料，仅采用单次发酵，发酵效果一般，而且需要烘干操作，有益微生物菌群和有机酸等物质损失较多。
因此，现有技术还有待于改进和发展。
发明内容
鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种新型发酵饲料的制备方法及虫酵素，采用从蝇蛆代谢物中分离出的微生物群发酵底料，旨在解决现有技术中发酵饲料发酵程度浅且质量不稳定的问题。
本发明的技术方案如下：
一种新型发酵饲料的制备方法，其中，所包括以下步骤：
将从蝇蛆代谢产物中分离纯化出的菌种，进行扩培，得到菌液；
以蝇蛆蛋白粉、豆粕、粗饲料作为主要原料，调配发酵底料，并将发酵底料粉碎；
将菌液和水混合均匀，喷洒至发酵底料上，混合均匀；
将发酵底料运输酵解池内，铺撒均匀后静置发酵；
发酵所得产物无需经过干燥和粉碎，直接密封包装仓储。
所述的新型发酵饲料的制备方法，其中，所述发酵底料的配方，按照重量份数计，包括：
虫浆蛋白 25份；
豆粕 195～235份；
粗饲料 200～480份。
所述的新型发酵饲料的制备方法，其中，将发酵底料粉碎至能过10～20目。
所述的新型发酵饲料的制备方法，其中，菌种包括有芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、光合菌、固氮菌。
所述的新型发酵饲料的制备方法，其中，将菌液喷洒至发酵底料时，水分含量控制在35～55％之间，微生物总数达到107cfu/g的水平。
所述的新型发酵饲料的制备方法，其中，静置发酵的过程中，发酵底料的厚度保持在30～70cm，发酵温度保持在25～50℃，发酵时间为72～96小时。
所述的新型发酵饲料的制备方法，其中，静置发酵的过程中，每隔8～12小时翻动一次发酵底料。
所述的新型发酵饲料的制备方法，其中，所述固体培养基和液体培养基是以玉米粉、红糖为主要原料的玉米粉培养基。
所述的新型发酵饲料的制备方法，其中，菌液和水的总质量与发酵底料的质量比为260:740～580:420；菌液和水之间的质量比为150:110～430。
一种虫酵素，其中，所述虫酵素采用如上所述的新型发酵饲料的制备方法制备得到的。
有益效果：本发明的所提供一种新型发酵饲料的制备方法及虫酵素，利用从蝇蛆代谢产物中分离纯化出的微生物群来对发酵底料进行处理，由于蝇蛆粉和微生物的同源性，可以深化发酵效果，让发酵产品的各种有益生物活性物质得以更好、更高效地积累。采用上述方法制备得到的虫酵素，产品粗蛋白≥20％，蛋白质消化率≥95％，益生菌数可达109cfu/g。发酵底料中的抗营养因子去除率≥90％，大豆中的脲酶、胰蛋白酶抑制因子、大豆球蛋白、β－伴球蛋白等基本被降解。产品中生物活性肽含量为2～3％，有机酸含量≥1％。
具体实施方式
本发明提供一种新型发酵饲料的制备方法及虫酵素，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明所提供的一种昆新型发酵饲料的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)从蝇蛆代谢物中分离纯化菌种，并进行保种。
使用无菌接种环粘取少量蝇蛆代谢物至无菌液体培养基中，置于摇床中振荡培养，培养结束后取出；将菌液稀释10倍，用无菌接种环挑取菌液，在无菌固体培养基上进行平板划线，置于培养箱中培养；培养结束后，观察固体培养基上各种微生物的菌落形态，用接种环挑取单菌落至无菌液体培养基中，继续培养；培养结束后进行菌种鉴定，并挑取菌液接种至斜面培养基中4℃保存。所述菌种包括有芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌等。
(2)将从蝇蛆代谢产物中分离纯化出的菌种，接种至进行复壮和扩培，接种比例为1:20，扩培24h后待用。
所述固体培养基和液体培养基是以玉米粉、红糖为主要原料的玉米粉培养基。关于菌种，一般企业发酵使用的微生物只有简单的1～2种菌种，且多为大众型菌种，缺乏特异性；而本发明方案中所使用的微生物群是从蝇蛆代谢产物中分离纯化得到，包括有芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、光合菌、固氮菌等，由于蝇蛆体外消化大部分需要依赖这些菌种，因此它们对抗营养因子和大分子营养物质的降解效率是较高的。另外，也可以将微生物群中所得的菌种进行分离纯化，保存起来，每次使用时再进行复壮和扩大培养。
(3)以蝇蛆蛋白粉、豆粕、粗饲料作为主要原料，调配发酵底料，并将发酵底料粉碎至能过10～20目；
关于所述发酵底料，现有技术中一般发酵饲料的底料是单一原料，主要是豆粕、血粉或粗饲料等；而在本发明方案中，所述发酵底料是复合原料，主要由蝇蛆蛋白粉(广州鑫肽生物蛋白股份有限公司出售的，虫浆蛋白)、豆粕和麸皮等组成，营养相对更均衡。更重要的是，发酵底料中的蝇蛆蛋白粉本身就是一种虫酵后产品，含有大量蝇蛆虫体、微生物、酶系及代谢产物，跟发酵用的菌种具有很高的同源性，发酵协同性更好，微生物的消化吸收繁殖会更旺盛，此过程相当于二次发酵，因此各种有益生物活性物质，包括益生菌、有机酸等的积累会更多。具体的，所述发酵底料的配方，按照重量份数计，包括：
虫浆蛋白 25份；
豆粕 195～235份；
粗饲料 200～480份。
最佳实施方案配方，按照重量份数计，如下：
虫浆蛋白 25份；
豆粕 200份；
粗饲料 400份。
在本发明方案中，所述粗饲料优选为采用麸皮。将上述原料混合粉碎至过10～20目筛，这样可以使得原料的各粒径相近，便于混合均匀。
(4)将菌液和水混合均匀，喷洒至发酵底料上，混合均匀。
将菌液先和水混合均匀，再喷洒至发酵底料上，是为了使菌液能均匀分布在发酵底料的表面。但是，发酵底料中，水分含量需要控制在35～55％之间，并保证发酵底料中的微生物总数可以达到107cfu/g的水平。其中，菌液和水的总质量与发酵底料的质量比为260:740～580:420，最佳比例为375:625。菌液和水之间的质量比为150:110～430，最佳比例为150:225。
(5)将发酵底料运输酵解池内，铺撒均匀后静置发酵。
静置发酵时，可通过传输带将喷洒有菌液的发酵底料输送至酵解池内，铺洒均匀后静置发酵，发酵底料的厚度保持在30～70cm；发酵底料的发酵温度保持在25～50℃，发酵时间为72～96小时；平均8～12小时人工翻动，以达到散热和充氧的作用。
(6)发酵所得产物无需经过干燥和粉碎，直接密封包装仓储。
一般发酵饲料的水分为45～50％，这样较为容易污染霉菌；而本发明方法中，发酵底料发酵结束后，水分保持在小于35％，并立即进入密封包装袋，污染的可能性大大降低。产品不进行烘干操作，大量有益微生物和有机酸物质被保留下来，在动物饲料中使用，有益效果会更明显。
蝇蛆以体外消化为主，主要借助其代谢产物中微生物群和酶系来对营养物质进行降解后吸收，因此这些微生物群对抗营养因子和大分子营养物质的降解效率较高，从蝇蛆代谢产物中分离出这些微生物群后，利用它们来对发酵底料进行处理，发酵效果更好。此外，发酵底料中加入一部分蝇蛆蛋白粉(广州鑫肽生物蛋白股份有限公司出售的，虫浆蛋白)，由于蝇蛆粉和微生物的同源性，可以深化发酵效果，让发酵产品的各种有益生物活性物质得以更好、更高效地积累。
本发明中还提供一种虫酵素，所述虫酵素就是采用上述新型发酵饲料的制备方法制备得到的。采用上述方法制备得到的虫酵素，产品粗蛋白≥20％，蛋白质消化率≥95％，益生菌数可达109cfu/g。发酵底料中的抗营养因子去除率≥90％，大豆中的脲酶、胰蛋白酶抑制因子、大豆球蛋白、β－伴球蛋白等基本被降解。产品中生物活性肽含量为2～3％，有机酸含量≥1％，水分≤35％。
以下通过具体的实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
将从蝇蛆代谢产物中分离纯化出的菌种，接种至进行复壮和扩培，接种比例为1:20，扩培24h后待用。其中，挑取的菌落为芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌等。将25kg虫浆蛋白，235kg豆粕，480kg麸皮混合，并粉碎至过10目筛。将150kg菌液与110kg水混合均匀，均匀喷洒至发酵底料上，水分含量为35％，微生物总数达到107cfu/g的水平。通过传输带将喷洒有菌液的发酵底料输送至酵解池内，铺洒均匀后静置发酵，发酵底料的厚度保持在50cm，发酵温度保持在25～50℃，发酵时间为80小时，平均8～12小时人工翻动。发酵所得产物无需经过干燥和粉碎，直接密封包装仓储。
经过常规方法检测，本实施例中所得的虫酵素，产品粗蛋白≥20％，蛋白质消化率≥95％，益生菌数可达109cfu/g。发酵底料中的抗营养因子去除率≥90％，大豆中的脲酶、胰蛋白酶抑制因子、大豆球蛋白、β－伴球蛋白等基本被降解。产品中生物活性肽含量为2％，有机酸含量≥1％，水分≤35％。
实施例2
将从蝇蛆代谢产物中分离纯化出的菌种，接种至进行复壮和扩培，接种比例为1:20，扩培24h后待用。其中，挑取的菌落为芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌等。将20份虫浆蛋白，200份豆粕，400份麸皮混合，并粉碎至过10目筛。将150份菌液与225份水混合均匀，均匀喷洒至发酵底料上，水分含量为45％(最适宜)，微生物总数达到107cfu/g的水平。通过传输带将喷洒有菌液的发酵底料输送至酵解池内，铺洒均匀后静置发酵，发酵底料的厚度保持在70cm，发酵温度保持在25～50℃，发酵时间为96小时，平均8～12小时人工翻动。发酵所得产物无需经过干燥和粉碎，直接密封包装仓储。
经过常规方法检测，本实施例中所得的虫酵素，产品粗蛋白≥20％，蛋白质消化率≥95％，益生菌数可达109cfu/g。发酵底料中的抗营养因子去除率≥90％，大豆中的脲酶、胰蛋白酶抑制因子、大豆球蛋白、β－伴球蛋白等基本被降解。产品中生物活性肽含量为3％，有机酸含量≥1％，水分≤35％。
实施例3
将从蝇蛆代谢产物中分离纯化出的菌种，接种至进行复壮和扩培，接种比例为1:20，扩培24h后待用。其中，挑取的菌落为芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌等。将25份虫浆蛋白，195份豆粕，200份麸皮混合，并粉碎至过10目筛。将150份菌液与430份水混合均匀，均匀喷洒至发酵底料上，水分含量为55％，微生物总数达到107cfu/g的水平。通过传输带将喷洒有菌液的发酵底料输送至酵解池内，铺洒均匀后静置发酵，发酵底料的厚度保持在30cm，发酵温度保持在25～50℃，发酵时间为72小时，平均8～12小时人工翻动。发酵所得产物无需经过干燥和粉碎，直接密封包装仓储。
经过常规方法检测，本实施例中所得的虫酵素，产品粗蛋白≥20％，蛋白质消化率≥95％，益生菌数可达109cfu/g。发酵底料中的抗营养因子去除率≥90％，大豆中的脲酶、胰蛋白酶抑制因子、大豆球蛋白、β－伴球蛋白等基本被降解。产品中生物活性肽含量为2.5％，有机酸含量≥1％，水分≤35％。
应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (9)
1.一种新型发酵饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将从蝇蛆代谢产物中分离纯化出的菌种，进行扩培，得到菌液；
以蝇蛆蛋白粉、豆粕、粗饲料作为主要原料，调配发酵底料，并将发酵底料粉碎；
将菌液和水混合均匀，喷洒至发酵底料上，混合均匀；
将发酵底料运输酵解池内，铺撒均匀后静置发酵；静置发酵的过程中，发酵底料的厚度保持在30～70cm，发酵温度保持在25～50℃，发酵时间为72～96小时；
发酵所得产物无需经过干燥和粉碎，直接密封包装仓储。
2.根据权利要求1所述的新型发酵饲料的制备方法，其特征在于，所述发酵底料的配方，按照重量份数计，包括：
虫浆蛋白 25份；
豆粕 195～235份；
粗饲料 200～480份。
3.根据权利要求1所述的新型发酵饲料的制备方法，其特征在于，将发酵底料粉碎至能过10～20目。
4.根据权利要求1所述的新型发酵饲料的制备方法，其特征在于，菌种包括有芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、光合菌、固氮菌。
5.根据权利要求1所述的新型发酵饲料的制备方法，其特征在于，将菌液喷洒至发酵底料时，水分含量控制在35～55％之间，微生物总数达到107cfu/g的水平。
6.根据权利要求1所述的新型发酵饲料的制备方法，其特征在于，静置发酵的过程中，每隔8～12小时翻动一次发酵底料。
7.根据权利要求1所述的新型发酵饲料的制备方法，其特征在于，分离纯化、扩配过程中采用固体培养基和液体培养基，固体培养基和液体培养基是以玉米粉、红糖为主要原料的玉米粉培养基。
8.根据权利要求1所述的新型发酵饲料的制备方法，其特征在于，菌液和水的总质量与发酵底料的质量比为260:740～580:420；菌液和水之间的质量比为150:110～430。
9.一种虫酵素，其特征在于，所述虫酵素采用如权利要求1～8任一所述的新型发酵饲料的制备方法制备得到的。
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