CN105531286A - 含有针对犬细小病毒2型的抗体的犬健康产品 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种包括针对一种或多种特定的病毒、细菌和/或病原体的抗体用于改善犬健康的组合物,其中所述组合物在犬24小时龄之前或在犬24小时龄直至90日龄之间给药。
Description
本发明涉及一种包括针对一种或多种特定的病毒、细菌和/或病原体的抗体用于改善犬健康的组合物,其中所述组合物在犬24小时龄之前或在犬24小时龄直至90日龄之间给药。
从出生起饲养至断奶(2月龄)的犬中的幼犬死亡率大幅度升高并且被估计为约25%。传染病,尤其败血症和腹泻是幼犬死亡的主要原因。这还对犬生长行为表现有负面影响。
本发明解决这个问题。
本发明的第一方面提供一种组合物,所述组合物含有针对以下一种或多种的抗体;
病毒:
-犬细小病毒2型(Canineparvovirustype2),
-犬疱疹病毒(CanineHerpesvirus),
-犬副流感病毒(Canineparainfluenzavirus)
-犬瘟热病毒(Caninedistempervirus)
-犬冠状病毒(Caninecoronavirus)
-腺病毒1型(Adenovirustype1)
细菌:
-支气管败血波氏杆菌(Bordetellabronchiseptica)
-大肠杆菌(E.coli)
-链球菌(Streptococci)
-葡萄球菌(Staphylococci)
寄生虫:
-等孢球虫(Isospora)
-贾第鞭毛虫(Giardia)
用于改善犬健康,在24小时龄之前、或在24小时龄之后并优选地在24小时龄之后直至70日龄之间或在24小时龄之后直至90日龄之间给药。
本发明提供一种超免疫组合物,所述超免疫组合物含有特异性针对犬病原体的并按早期(在24小时龄之前)或晚期(24小时龄或更晚)或早期和晚期的精确时间表给药的同源(homologousantibody)或异源抗体(hererologousantibody)。
根据本发明第一方面用途的组合物还可以包含水解的碳水化合物和/或油(或脂肪)。水解的碳水化合物可以为组合物提供基质。它也可以是可用作预防幼犬中低血糖的降血糖药。这种作用剂可以辅助避免任何品种,尤其是任何玩赏犬(ToyBreed)中的低血糖(hypoglycaemia)(也称作幼犬猝死症候群(fadingpuppysyndrome))。水解的碳水化合物可以是以下的一种或多种:任何简单糖(simplesugar)、麦芽糖、右旋糖(dextrose)、麦芽糊精或果糖。水解的碳水化合物可以在组合物中按重量计以10%至50%之间、例如15%至50%、20%至40%、25%至35%或5%至35%的量存在。
所述组合物还可以包含油(也可以称作脂肪)。油为抗体提供合适的惰性载体并且适合根据本发明给药至幼犬。油可以是幼犬的有用能量过程。合适的油包括向日葵油、大豆油、菜籽油、橄榄油、棕榈油/干椰子肉和/或猪油。优选地,油是植物油。
所述组合物还可以包括以下成分的任何一种或多种:蛋粉(优选鸡卵粉),其他蛋制品(优选鸡卵产品)、维生素、矿物质、水、初乳或血清。优选地,组合物不包含乳清或类乳清产品。此外或备选地,组合物可以包括以下的一种或多种:
大米蛋白、玉米蛋白、小麦蛋白、动物蛋白、乳蛋白和植物蛋白、动物脂肪和植物脂肪、甜菜渣(beatpulp)、玉米、大豆、鱼油、洋车前草(psyllium)、抗乳血清(lactoserum)、果寡糖(fructo-oligo-saccharide)、来自大豆的卵磷脂、氨基酸(L-精氨酸、DL-蛋氨酸、牛磺酸)、矿物质(Ca、P、Zn、Fe、Mn、Cu、I、Se)、维生素(维生素A、胆碱、维生素D3、维生素E、烟酸、维生素C、泛酸钙、维生素B2、维生素B1、维生素B6、生物素、叶酸、维生素B12、维生素K1)、抗氧化剂。
产品中待包含的抗体的量可以是范围从10mg至200mg超免疫成分(蛋粉作为一个例子)/g产品。
抗体可以根据任何已知的技术并且如萨·范·阮(SaVanNguyen)等人,2006:70:62-64,加拿大兽医研究杂志(TheCanadianjournalofVeterinaryResearch)中讨论那样产生。超免疫蛋粉的量可以用来限定组合物剂量中抗体的量(基于25%IgY浓度)剂量。从0.24g至0.36g超免疫全蛋粉的范围是一个合适的范围。假定IgY为25%,则这对应于0.06g至0.09gIgY/100g犬。IgY在这种生产方法中不具有特异性。
备选地,可以通过针对目标疾病给动物接种疫苗并从血清获得抗体以形成本发明组合物的一部分,产生抗体。
本文的超免疫成分由动物(优选家畜动物)产生,所述动物接受犬接种疫苗计划以在其身体的每种组织(肉、血清)或每种生物产品(乳、蛋)中产生针对犬病原体的抗体。
在犬接种疫苗计划应用于鸡或其他禽后,含有特异性指向针对犬病原体的异种抗体的超免疫溶液可以是蛋。在犬接种疫苗计划应用于相关动物(牛、羊、山羊或其他家畜哺乳动物物种)后,它可以是牛、羊、山羊或其他哺乳动物物种的乳或初乳。它可以是已经接受与上文所述相同的接种疫苗计划的动物的血清或肉。
它是允许产生特异性抗体的产生超免疫溶液的动物的自我接种反应。
根据本发明第一方面用途的组合物优选处于以下形式,所述形式能够对幼犬(包括在其生命的第一天的幼犬)易于给药。因此,组合物的优选形式包括喷雾、液体、摩丝(mousse)或凝胶。还包括宠物食物补充剂(petfoodsupplement),包括撒到液体和/或凝胶和/或食物上的粉末。还包括可以在断奶后给药至动物的常见湿食物或干食物。优选地,产品是液体或凝胶形式,所述形式能够喷入幼犬口腔或易于喂食幼犬。
组合物尤其可以包括针对一种或多种所列病毒和针对大肠杆菌的抗体。组合物可以包含针对犬冠状病毒和/或腺病毒1型的抗体。
根据本发明,包括因疾病的不同地理定位(geolocalisation)和不同作用部位(局部的或全身的)所致的几种不同产品。
根据第一方面,本发明包括一种产品,所述产品可以包括:
针对犬细小病毒2型、犬疱疹病毒、犬副流感病毒、犬瘟热病毒、犬冠状病毒和腺病毒1型中每一个的抗体的组合。产品可以备选地包含两种或更多种抗体的任何组合,如针对以下的抗体
-犬细小病毒2型和犬疱疹病毒
-犬细小病毒2型和犬副流感病毒
-犬细小病毒2型和犬瘟热病毒
-犬细小病毒2型和腺病毒1型
-犬疱疹病毒和犬副流感病毒
-犬疱疹病毒和犬瘟热病毒
-犬疱疹病毒和犬冠状病毒
-犬疱疹病毒和腺病毒1型
-犬副流感病毒和犬瘟热病毒
-犬副流感病毒和犬冠状病毒
-犬副流感病毒和腺病毒1型
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-犬疱疹病毒、犬冠状病毒和腺病毒1型
-犬副流感病毒、犬冠状病毒和腺病毒1型
-犬瘟热病毒、犬冠状病毒和腺病毒1型。
以上组合的任何一个还可以包括以任何组合针对以下一种、两种或三种的抗体:
-支气管败血波氏杆菌
-大肠杆菌
-链球菌
-葡萄球菌。
以上任何组合还可以包括针对以下一种或两种的抗体:
-等孢球虫
-贾第鞭毛虫。
产品例子(a):用于早期补充(在生命的24小时之前,全身的)的针对犬细小病毒2型和针对大肠杆菌的抗体。
产品例子(b):针对犬冠状病毒和针对犬细小病毒2型(局部的)的抗体。
产品例子(c):针对瘟热病毒和针对腺病毒1型的抗体。
产品例子(d):针对犬疱疹病毒的抗体(早期补充)(生命的24小时之前)。
关于早期补充(生命的第一天)的例子:
特异性IgY的一半(代表总IgY含量的未知部分)可以含有针对犬细小病毒2型的特异性抗体并且其一半可以含有针对大肠杆菌的特异性抗体。
关于晚期补充(在早期补充后或与早期补充分开)的例子:
特异性IgY的一半(代表总IgY含量的未知部分)可以含有针对犬细小病毒2型的特异性抗体并且其一半可以含有针对犬冠状病毒的特异性抗体。
根据本发明第一方面的组合物可以是其中犬健康是消化免疫力和/或生长和/或应激的情况。
因此,正在给药的组合物的效果是通过改善全身免疫力和消化免疫力而改善犬健康和畜牧学行为表现。
早期给药(在生命的最初的24小时内)特异性抗体的效果是增加全身的免疫力。特异性抗体将被吸收到血流,在单剂量(并且随后可能双倍)后产生即时长效保护。因此,本发明具有根据给药时间的两条正作用途径。早期给药(在24小时之前)允许特异性抗体穿过肠屏障以抵达血液系统。这产生全身的保护性作用,所述全身的保护性作用可以针对至少由接种疫苗计划靶向的病原体,其中将接种疫苗计划施加至通过其自身接种反应产生超免疫溶液的动物。如果在24小时龄之前给予,则本发明第一方面的组合物能够在肠道屏障关闭之前发挥作用,因为超免疫溶液的抗体直接进入血流中。在24小时龄时或24小时龄之后给予,组合物调整并积极调节动物中消化道内应激(如断奶、运输、过度运动等)的结果,包括寄生量、炎症、微生物区系平衡紊乱等。在24小时龄时或24小时龄之后给予,这种效果是消化道内衬(digestiveliner)/口腔中的局部效果。
本发明的组合物可以在24小时之前给药1次或2次。组合物可以在生命的8小时之前给药,包括在生命的8小时之前相隔至少4小时给药2次。这种给药可以使抗体最大限度进入动物的体循环。在24小时龄时或24小时龄之后的给药可以是一天至少1次或更频繁。根据本发明的相同或不同的组合物可以24小时龄之前和24小时龄时或24小时龄之后给药。
生命的第1天之后,推荐标准与对犬乳产品的那些相同,如下文描述:
产品可以如下配制:
根据与适合喷洒的产品相关的4种方案的蛋粉比例:
方案1:使用稀释于无右旋糖的油和/或脂肪中的全蛋粉(wholeeggpowder):
超免疫全蛋粉的比例是产品的5%至30%(基于喷雾中所用的补充剂)。
方案2:使用稀释于含右旋糖的油和/或脂肪中的全蛋粉:
超免疫全蛋粉的比例是产品的5%至30%(基于喷雾中所用的补充剂),所述产品具有10%至30%的右旋糖。
方案3:使用稀释于无右旋糖的油和/或脂肪中的蛋黄粉(yolkeggpowder):
超免疫全蛋粉的比例是产品的1%至20%(基于喷雾中所用的补充剂)。
方案4:使用稀释于含右旋糖的油和/或脂肪中的蛋黄粉:
超免疫全蛋粉的比例是产品的1%至20%(基于喷雾中所用的补充剂),所述产品具有10%至30%的右旋糖。
本发明的第二方面提供了根据本发明第一方面的组合物,而不限于所述用途或给药方案。
因此,本发明的第二方面提供了一种组合物,所述组合物含有针对以下一种或多种的抗体:
病毒:
-犬细小病毒2型,
-犬疱疹病毒,
-犬副流感病毒
-犬瘟热病毒
-犬冠状病毒
-腺病毒1型
细菌:
-支气管败血波氏杆菌
-大肠杆菌
-链球菌
-葡萄球菌
寄生虫:
-等孢球虫
-贾第鞭毛虫。
第一方面的全部优选特征也适用于第二方面。这包括组合物可以包含如根据本发明第一方面所述的水解的碳水化合物和/或油(或脂肪),包括给出的量。
油可以是如上对本发明的第一方面所述那样。另外的其它成分也可以是如上根据本发明的第一方面描述。可以根据上述方法产生抗体。本发明的第二方面的形式是如上文与第一方面相关所描述的。
为了改善犬健康,优选地在犬需要健康改善情况下,包括给药含有针对以下一种或多种的抗体的组合物:
病毒:
-犬细小病毒2型,
-犬疱疹病毒,
-犬副流感病毒
-犬瘟热病毒
-犬冠状病毒
-腺病毒1型
细菌:
-支气管败血波氏杆菌
-大肠杆菌
-链球菌
-葡萄球菌
寄生虫:
-等孢球虫
-贾第鞭毛虫。
优选地,组合物的给药是在24小时龄之前或24小时之后。
本发明第一和第二方面的更优选的特征也适用于第三方面。
特别地,本发明的第三方面涉及根据本发明第一和/或第二方面的组合物。给药可以从24小时之后直至70日龄或从24小时之后直至90日龄。
本发明尤其涉及改善犬健康,尤其出生至断奶(约2月龄)的犬中的幼犬健康。待改善犬健康的犬的健康尤其涉及改善消化免疫力、生长和/或应激。
此外,待改善的健康涉及传染病(包括败血症和腹泻)、寄生虫、炎症和微生物区系平衡紊乱(与肠道健康相关)。特别地,该组合物涉及预防和/或治疗与特定病毒、细菌或寄生虫相关的感染,其中针对所述病毒、细菌或寄生虫产生的抗体存在于组合物中。
参考以下非限制性实施例描述本发明:
实施例
实施例1
介绍:
免疫球蛋白疗法已经数年来在人类医学和兽医学中用于治疗或预防早产儿中的传染病或被动免疫失败的那些疾病。不可否认,正确体重增加(weightgain,WG)反映良好的健康状态。这项研究的目的是评价幼犬中给药免疫球蛋白对体重增加的影响。
材料与方法:
在具有多个品种(300只母犬)的商业养狗场中实施方案。
方案:
评价了两种补充方案:
-早期补充(Earlysupplementation):出生后4小时和8小时,幼犬接受口服补充免疫球蛋白
-晚期补充(Latesupplementation):从第2天直至第60天,幼犬每3天接受口服补充。
幼犬由母初乳/母乳喂食并且随后逐渐断奶。出生时,将它们分配于以下四个组之一中:
-未补充(OO)
-仅早期补充(EO)
-早期及晚期补充(EL)
-仅晚期补充(OL)
工作如下进行:
概念验证:通过犬免疫血清提供补充。
免疫球蛋白补充对全身免疫、消化健康和死亡率的影响:补充犬血清
犬血清采集
给成年犬接种针对瘟热、腺病毒、细小病毒、副流感病毒、博德特氏菌(Bordetella)(一次注射)和针对疱疹病毒1(两次注射,间隔2周)疫苗。在第二次接种疫苗后2周,在颈内静脉的区域外科手术准备后通过颈内静脉插管,采集血液。
对以下动物进行血液采集(用于血清制备):
-体重高于10kg的成年犬
-对于雄性,除体重之外不做限制;
-对于雌性,排除那些动情间期的最后一个月内的、那些怀孕的或那些哺乳期的第一个月内的。
每只动物在血液采集之前称重。将血液采集的量计算为7mL/kg体重。对于不重复的血液采样,霍恩豪斯(Hohenhaus)(2006)和弗雷(Frey)(2009)发现非损害性采集率为17mL/kg,施耐德(Schneider)(1995)采集22mL血液/kg体重。
通过在室温凝固提取血清并离心。将血清在无菌环境(层流罩超净台(laminarhood))下等分于4mL管中。给药之前进行细菌学分析(厌氧菌和需氧菌培养)。
幼犬的管理(图3)
包括240只或320只幼犬。考虑出生体重,组内分配是随机的,(按照与成年体重成比例的四分位(quartiles)划分)。根据着色的毛项圈,识别幼犬。这项技术已经证明在同一个养犬场对幼犬及其母亲是安全的(无窒息、无摄入,无肢体限制)。每周在采样操作时更新项圈,以跟踪幼犬生长。
从第1天至第4天:称重
从第7天至第63天每周一次:
-称重、临床检查、直肠体温测定(光滑合适端头)
-口服给药15mL血清/kg幼犬(在第1周期间用饲管并且此后用灌食空针(feedingsyringe))
-采集粪便
方法:在自发排便后并通过直肠内的棉拭子采集粪便(一只拭子用于病毒载量;一个只拭子用于微生物区系)
对于:-基于格雷莱(Grellet)的适应于幼犬的皇家犬量表(RoyalCaninscale)(从第28天起)进行粪便评分
-粪便微生物区系
-定量病毒载量(细小病毒/冠状病毒)
-定量寄生虫学载量(等孢球虫、弓首线虫(Toxocara)、贾第鞭毛虫)
-消化健康标志物分析(钙卫蛋白(calprotrectin))
-消化免疫力标志物(总免疫球蛋白A;抗细小病毒和抗冠状病毒抗体)
-血液采集
方法:在维持侧卧或背卧的幼犬中从颈静脉采集血液。通过局部倾倒一些无菌水显露静脉。借助23G针和2mL注射器进行采集。随后确保指压穿刺部位1分钟。仅在检查不存在任何持续性出血后才放开幼犬。每100g体重幼犬采集最大0.7mL血液。可能在无任何扰动情况下采集10%的循环容量,其中循环容量占8%体重:因此最大容是每100g幼犬0.8mL。这种方案已经成功地用在第0天、第2天、第7天及每周一次直至第60天采样的56只幼犬中,无任何由血液采集所致的死亡(查斯坦-梅拉德(Chastant-Maillard)等人,2010),并且成功地用在从第0天至第56天每周采集一次的20只幼犬中(卡塞勒斯(Casseleux),2007)。
对于-总免疫球蛋白测定
-特异性抗体测定(细小病毒、疱疹病毒、冠状病毒)
-瓜氨酸
在实验开始之前已经制备源自超免疫犬的血清并储存在-20℃。从出生起至第56天每周记录每只新生幼犬的品种大小、体重和健康状态。根据血清给药的类型和时间,将幼犬分配至4个不同组:早期组(EO,n=36)、早期和晚期组(EL,n=34)、晚期组(OL,n=41)和对照组(OO,n=38)。来自EO组和EL组的幼犬在生命最初的8小时内2次口服接受血清(1.5ml/100g体重)。来自EL组和OL组的幼犬从第2天至第52天每周2次口服接受血清(3ml/幼犬)。用卡方检验(发病率)和协方差分析(ANCOVA)(体重增加)检验分析数据。
结果
在生命的最初的21天期间,来自早期补充组(EO组和EL组)的幼犬表现出比来自其他组(OL组和OO组)的幼犬显著地更少的疾病临床症状(16%(11/70)对30%(24/79),p=0.045)。在第2天至第28天内,在早期补充的大型品种幼犬中(EO组、EL组均值为786.6g,而OL组、OO组均值为717.9g;p=0.078)和在晚期补充的小型品种幼犬中(EL组、OL组均值为730.4g,而EO组、OO组均值为731.8g)存在较大体重增加的倾向性。图1和图2中显示结果。在第29天至第49天内,与其他幼犬相比,体重增加在晚期补充的大型品种幼犬中明显较大(EL组、OL组为2445.7g,而EO组、OO组为2294.0g;p=0.006)。
结论:
在这项研究中,在肠闭合前补充成体血清的幼犬通常更少地表现新生儿期间的任何病状。在早期补充和晚期补充的动物中观察到更好的体重增加直至断奶。这显示免疫球蛋白治疗是幼犬中对抗发病率和用于健康的预防措施。
图1和图2中显示结果。
图1显示对发病率的首要结果。从开始起的显著性结果-步骤1-发病率=一段时间内活幼犬的明显疾病症状。早期补充显著降低发病率。
图2显示对生长的首要结果。从开始起的显著性结果-大型犬生长速率改善。饲养养犬场中的对照组并非安全组(病毒感染和寄生虫感染)。在2月龄之前:生长得最快,幼犬最安全。
图3显示采样方案。
Claims (15)
1.一种组合物,所述组合物含有针对犬细小病毒2型的抗体,所述抗体与针对以下之一的抗体组合:
犬冠状病毒、
大肠杆菌、
犬疱疹病毒,
任选地还与针对以下的抗体组合:
支气管败血波氏杆菌或
贾第鞭毛虫,
或包含针对以下一种或多种的抗体:
犬副流感病毒、
犬瘟热病毒、
腺病毒1型、
链球菌、
葡萄球菌或
等孢球虫,
所述组合物用于改善犬健康,在24小时龄之前或24小时龄之后给药。
2.根据权利要求1所述用途的组合物,所述组合物还包含水解的碳水化合物和/或油。
3.根据权利要求1或权利要求2所述用途的组合物,所述组合物处于喷雾、液体、摩丝或凝胶的形式。
4.根据权利要求1至3任一项所述用途的组合物,其中所述组合物包含针对一种或多种病毒和针对大肠杆菌的抗体。
5.根据权利要求1至4任一项所述用途的组合物,其中所述组合物包含针对犬冠状病毒和/或腺病毒1型的抗体。
6.根据权利要求1至6任一项所述用途的组合物,其中将所述组合物在最初的24小时内至少相隔4小时给药2次。
7.根据权利要求1至4任一项所述用途的组合物,其中犬健康是消化免疫力和/或生长和/或应激。
8.一种组合物,所述组合物含有针对犬细小病毒2型的抗体,所述抗体与针对以下之一的抗体组合:
犬冠状病毒、
大肠杆菌、
犬疱疹病毒,
任选地还与针对以下的抗体组合:
支气管败血波氏杆菌或
贾第鞭毛虫,
或包含针对以下一种或多种的抗体:
犬副流感病毒、
犬瘟热病毒、
腺病毒1型、
链球菌、
葡萄球菌或
等孢球虫。
9.根据权利要求8所述的组合物,所述组合物还包含水解的碳水化合物和/或油。
10.一种改善犬健康的方法,所述方法包括向犬给药一种组合物,所述组合物含有针对犬细小病毒2型的抗体,所述抗体与针对以下之一的抗体组合:
犬冠状病毒、
大肠杆菌、
犬疱疹病毒,
任选地还与针对以下的抗体组合:
支气管败血波氏杆菌或
贾第鞭毛虫,
或包含针对以下一种或多种的抗体:
犬副流感病毒、
犬瘟热病毒、
腺病毒1型、
链球菌、
葡萄球菌或
等孢球虫。
11.根据权利要求10所述的方法,其中所述组合物还包含可水解的碳水化合物和/或油。
12.根据权利要求1或权利要求11所述的方法,其中所述给药在24小时龄之前或24小时龄之后。
13.根据权利要求10至12任一项所述的方法,其中所述犬健康是消化免疫力。
14.根据权利要求10至12任一项所述的方法,其中犬健康是生长。
15.根据权利要求10至12任一项所述的方法,其中犬健康是应激。
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20160427 |
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |