CN105524184B - 一种水溶性荔枝多糖的超高压提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种水溶性荔枝多糖的超高压提取方法，包括以下步骤：(1)以荔枝干为原料，将荔枝干去壳，取出果肉，将所获的果肉置于乙醇中40℃～60℃水浴环境下浸泡，过滤去除乙醇，重复浸泡；用乙醇回流3～5h后去除乙醇，再重复回流3～5h，在50℃～60℃下烘干，粉碎得到荔枝果肉干粉；(2)超高压提取：在荔枝果肉干粉中加入蒸馏水，真空封装后放入超高压设备，设定压力为100～500MPa，保压时间为1～60min，提取温度在25℃～80℃，得到的提取液经固液分离、减压浓缩、醇沉和干燥处理，制得水溶性荔枝多糖。本发明实现了在温度相对较低的条件下从荔枝中快速、高效地提取水溶性荔枝多糖。

Description

一种水溶性荔枝多糖的超高压提取方法
技术领域
本发明涉及水溶性荔枝多糖的提取方法，特别涉及一种水溶性荔枝多糖的超高压提取方法。
背景技术
荔枝属于无患子科，其果肉含糖量高，具有较高的营养价值和多种滋补养颜的效果，被视为果中珍品。现代研究表明，荔枝具有抗氧化、延缓衰老、调血脂、降血糖和护肝的作用。水溶性荔枝多糖作为荔枝果肉中重要的活性成分，已有研究表明水溶性荔枝多糖在清除自由基、抗氧化活性、抗衰老以及对酒精肝损伤有一定的保护作用。基于荔枝保健机制研究和精细加工的需要，多糖的提取分离技术研究尤为关键。
目前来看，水溶性荔枝多糖的提取方法主要是传统的水溶醇沉法，该方法不仅耗时、耗能，不能快速高效的从荔枝中提取水溶性荔枝多糖，而且多糖的某些活性可能会因为受热而发生变性，因而需要进一步的改进。近年来应用超声波、微波技术提取多糖的研究十分活跃。由于超声波衰减因素的制约，超声有效作用区域为一环形，受提取容器的影响，可能会产生超声空白区。微波提取本质也是加热提取，而且会存在受热不均的问题。
发明内容
为了克服现有技术的上述缺点与不足，本发明的目的在于提供一种水溶性荔枝多糖的超高压提取方法，在温度相对较低的条件下从荔枝中快速、高效地提取水溶性荔枝多糖。
本发明的目的通过以下技术方案实现：
一种水溶性荔枝多糖的超高压提取方法，包括以下步骤：
(1)荔枝果肉前处理：以荔枝干为原料，将荔枝干去壳，取出果肉，将所获的果肉置于体积浓度为85～100％的乙醇中40℃～60℃水浴环境下浸泡10～12h，过滤去除乙醇，重复浸泡10～12h；用体积浓度为85～100％的乙醇回流3～5h后去除乙醇，再重复回流3～5h，在50℃～60℃下烘干，粉碎得到荔枝果肉干粉；
(2)超高压提取：在步骤(1)得到的荔枝果肉干粉中加入蒸馏水，真空封装后放入超高压设备，设定压力为100～500MPa，保压时间为1～60min，提取温度在25℃～80℃，得到的提取液经固液分离、减压浓缩、醇沉和干燥处理，制得水溶性荔枝多糖。
步骤(1)所述荔枝果肉干粉为过25目筛的荔枝果肉干粉。
步骤(2)中荔枝果肉干粉与蒸馏水的质量比为1:5～1:40。
步骤(2)所述减压浓缩，具体为：
减压浓缩至提取液原体积的1/4～1/8。
步骤(2)所述醇沉，具体为：
加入体积浓度为85％～95％的乙醇，在4℃～10℃的环境中静置过夜，沉淀采用体积浓度为75％～85％的乙醇洗涤。
步骤(2)所述干燥为热风干燥、红外干燥、微波干燥或真空冷冻干燥。
与现有技术相比，本发明具有以下优点和有益效果：
(1)本发明对荔枝果肉进行前处理，克服了现有技术中由于荔枝干果肉十分粘稠，无法使提取溶剂和果肉充分接触，影响提取率的问题。经过本发明前处理的粉末状的果肉干粉可以和提取溶剂充分混合，有利于提高提取效率。
(2)本发明采用超高压提取工艺，在短时间内使细胞内部溶解了有效成分的溶剂以冲破细胞或者渗透的方式转移到细胞外，实现高效提取；另外，超高压作用下会使蛋白质变性，酶失去活性，细胞破裂，生命活动停止。
(3)一般情况下，水被看作是不可压缩的，但在超高压作用下水分子间距变小，密度变大，pH降低。这些会使得有机化合物中的不稳定的化学基团发生变化，化学性质发生改变。高压下电解质电离的氢离子和氢氧根离子浓度的乘积不同，pH也不同。水溶性荔枝多糖是高分子物质，将超高压用于其提取过程，当压力足够大时，所得到的产物的分子大小、结构、理化性质等会由于这种高压环境而发生巨变，这与其它方法获得的产物有本质性的差别，具体表现在多糖结构和性质方面的不同：超高压提取的荔枝多糖的分子量显著大于普通热水浸提法，且超高压提取的荔枝多糖的抗氧化性显著高于普通热水浸提法。这表明超高压提取的荔枝多糖的活性要优于普通热水浸提。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明作进一步地详细说明，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
将桂味荔枝干去壳取核，取出果肉，将所获的果肉置于85％乙醇中40℃水浴环境下浸泡12h，过滤去除乙醇，重复浸泡12h。用98％乙醇回流3h后去除乙醇，再重复回流3h，60℃下烘干，粉碎得到荔枝果肉干粉。取5g荔枝果肉干粉，加入100ml蒸馏水，真空封装后放入超高压设备，设定压力为500MPa，温度为25℃，保压时间为10min。随后将提取液固液分离，浓缩至25ml，加入95％乙醇在4℃冰箱中静置一夜，沉淀经80％乙醇洗涤后，冷冻干燥，制得水溶性荔枝多糖，提取率达到10.02％。
实施例2
将桂味荔枝干去壳取核，取出果肉，将所获的果肉置于95％乙醇中60℃水浴环境下浸泡10h，过滤去除乙醇，重复浸泡10h。用95％乙醇回流5h后去除乙醇，再重复回流5h，50℃下烘干，粉碎得到荔枝果肉干粉。取5g荔枝果肉干粉，加入100ml蒸馏水，真空封装后放入超高压设备，设定压力为300MPa，温度为25℃，保压时间为5min。随后将提取液固液分离，浓缩至25ml，加入95％乙醇在4℃冰箱中静置一夜，沉淀经80％乙醇洗涤后，冷冻干燥，制得水溶性荔枝多糖，提取率为6.29％。
实施例3
将桂味荔枝干去壳取核，取出果肉，将所获的果肉置于98％乙醇中40℃水浴环境下浸泡12h，过滤去除乙醇，重复浸泡12h。用85％乙醇回流3h后去除乙醇，再重复回流3h，60℃下烘干，粉碎并过25目筛得到荔枝果肉干粉。取10g荔枝果肉干粉，加入100ml蒸馏水，真空封装后放入超高压设备，设定压力为300MPa，温度为40℃，保压时间为10min。随后将提取液固液分离，浓缩至25ml，加入95％乙醇置一夜，沉淀80％乙醇洗涤后，冷冻干燥，制得水溶性荔枝多糖，提取率为7.55％。
对比例1
将桂味荔枝干去壳取核，取出果肉，将所获的果肉置于85％乙醇中40℃水浴环境下浸泡12h，过滤去除乙醇，重复浸泡12h。用98％乙醇回流3h后去除乙醇，再重复回流3h，60℃下烘干，粉碎得到荔枝果肉干粉。取5g荔枝果肉干粉，加入100ml蒸馏水，放入温度为85℃水浴锅中水浴4h。随后将提取液固液分离，浓缩至25ml，加入95％乙醇在4℃冰箱中静置一夜，沉淀经80％乙醇洗涤后，冷冻干燥，制得水溶性荔枝多糖，提取率为6.05％。
将实施例1和对比例1中超高压提取和热水浸提的荔枝粗多糖分别进行蛋白酶-Sevag脱蛋白和大孔树脂脱色处理。进行还原力的测定，操作步骤：将所得多糖配成1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mg/ml的2种多糖溶液，依次加入1.0ml磷酸盐缓冲溶液(0.2mol/l)和1.0ml K3Fe(CN)6溶液(1％)，后将混合液于50℃条件下恒温反应20min，急速冷却，接着向混合液中加入1.0ml 10％的TCA溶液，3000r/s离心10min后取2.5ml上清液，再依次加入2.5ml蒸馏水、1.2ml FeCl3(0.1％)。以蒸馏水为参比在700nm波长处测定吸光度，取质量浓度为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05mg/ml的2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚进行同样处理作为阳性对照。结果表明，当两种多糖质量浓度为1mg/ml时，其A700nm值分别为1.866和0.321；当质量浓度达5mg/ml时，其A700nm值分别为2.513和1.025，而且两种方法提取的多糖的还原力(A700nm值)均随多糖质量浓度增加而逐渐增强，超高压提取多糖的还原力均显著高于普通热水浸提。
对比例2
将桂味荔枝干去壳取核，取出果肉，将果肉剪碎后烘干。取5g荔枝果肉，加入100ml蒸馏水，真空封装后放入超高压设备，设定压力为300MPa温度为25℃，保压时间为5min。随后将提取液固液分离，浓缩至25ml，加入95％乙醇在4℃冰箱中静置一夜，沉淀经80％乙醇洗涤后，冷冻干燥，制得水溶性荔枝多糖，提取率为5.91％。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受所述实施例的限制，如干燥还可以为热风干燥、红外干燥或微波干燥，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种水溶性荔枝多糖的超高压提取方法，其特征在于，由以下步骤组成：(1)荔枝果肉前处理：以荔枝干为原料，将荔枝干去壳，取出果肉，将所获的果肉置于体积浓度为85～100％的乙醇中40℃～60℃水浴环境下浸泡10～12h，过滤去除乙醇，重复浸泡10～12h；用体积浓度为85～100％的乙醇回流3～5h后去除乙醇，再重复回流3～5h，在50℃～60℃下烘干，粉碎得到荔枝果肉干粉；
(2)超高压提取：在步骤(1)得到的荔枝果肉干粉中加入蒸馏水，真空封装后放入超高压设备，设定压力为500MPa，保压时间为10min，提取温度在25℃～80℃，得到的提取液经固液分离、减压浓缩、醇沉和干燥处理，制得水溶性荔枝多糖，所述荔枝果肉干粉与蒸馏水的质量比为1:20。
2.根据权利要求1所述的水溶性荔枝多糖的超高压提取方法，其特征在于，步骤(1)所述荔枝果肉干粉为过25目筛的荔枝果肉干粉。
3.根据权利要求1所述的水溶性荔枝多糖的超高压提取方法，其特征在于，步骤(2)所述减压浓缩，具体为：
减压浓缩至提取液原体积的1/4～1/8。
4.根据权利要求1所述的水溶性荔枝多糖的超高压提取方法，其特征在于，步骤(2)所述醇沉，具体为：
加入体积浓度为85％～95％的乙醇，在4℃～10℃的环境中静置过夜，沉淀采用体积浓度为75％～85％的乙醇洗涤。
5.根据权利要求1所述的水溶性荔枝多糖的超高压提取方法，其特征在于，步骤(2)所述干燥为热风干燥、红外干燥、微波干燥或真空冷冻干燥。
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