CN105518141B - 雄性核不育基因及其突变体在杂交育种上的应用 - Google Patents

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Abstract

提供玉米杂交育种方法，包括不育系繁殖和杂交种子制备，更具体地提供植物FL1基因或其等位基因以及由该基因变异所产生的突变体植株。

Description

雄性核不育基因及其突变体在杂交育种上的应用
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及作物杂交育种方法，包括不育系繁殖和杂交种子制备，更具体地涉及玉米ZmFL1基因或其等位基因以及由该基因变异所产生的突变体植株。
技术背景
玉米是我国主要粮食作物，同时在饲用和生物能源中发挥巨大作用，现已成为我国种植面积最大、总产最多的作物。杂种优势能大幅提高作物产量、抗性和品质，玉米是较早利用杂种优势的作物之一，1924年第一个玉米杂交种诞生。玉米杂种优势利用的主要瓶颈是制种过程中母本去雄。商业育种中主要采用两种方式去雄：人工去雄和机械去雄。但两种去雄方式均存在不足：人工去雄不彻底，容易导致种子纯度下降，同时大幅度地提高成本；机械去雄要求上部叶片稀疏的植株结构和平整且面积较大的地块，但我国玉米品种以紧凑型为主，甘肃等西北制种地难以实现整块连片，因此无法采用机械去雄。同时，玉米杂交种生产中存在着常用育种的亲本遗传基础差异不够大，并因此影响到主要育种目标如高产、稳产、抗逆、早熟等的尽快实现。采用雄性不育制种，既能避免由于母本去雄不彻底导致的种子纯度下降的问题，又能取代机械去雄，降低种子生产成本；采用该技术制种最为重要的是获得不育性状彻底、稳定且容易找到恢复系的雄性不育系。玉米细胞质雄性不育易感染叶斑病且难以获得恢复系，而核雄性不育系能克服叶斑病，易于找到恢复系。因此，加强玉米核雄性不育突变体及其控制基因的研究，对玉米杂交育种和生产具有重大意义。
为了解决目前玉米杂交种育种方法中存在的缺陷，如人工去雄、杂交品种资源的局限性、制种技术复杂、制种成本高等技术瓶颈，人们正在尝试新的杂交育种技术，新型的杂交育种技术充分利用隐性核基因控制的雄性不育基因，构建育性稳定不受环境影响的不育系。主要技术优点包括：第一，省去人工去雄或机械去雄步骤，可以提供更高质量及纯度的种子给种植者；第二，所利用的隐性核不育基因适用于绝大多数品种，使杂种优势资源利用大幅提高，解决杂种优势的资源利用问题；第三，简化通过杂交繁殖不育系的过程。本发明即提供了一种玉米花粉发育基因以及基于该基因突变所产生的雄性不育系，该不育系的育性稳定、不受环境条件影响。该基因以及该基因突变产生的不育系为构建新型杂交育种体系提供了必要的元件。
发明内容
本文提到的所有参考文献都通过引用并入本文。
除非有相反指明，本文所用的所有技术和科学术语都具有与本发明所属领域普通技术人员通常所理解的相同的含义。除非有相反指明，本文所使用的或提到的技术是本领域普通技术人员公知的标准技术。材料、方法和例子仅作阐述用，而非加以限制。
本发明包括一种育性相关基因及其核苷酸和蛋白序列，还包括通过操作该基因在调控植株雄性生育力中的应用。非限制性地举例而言，下文描述的任何方法都可与本发明所提供的相应核苷酸序列一起使用，例如，将所述育性基因的突变体序列引入植株以导致植株雄性不育、使植株内源序列突变、向植株中引入该序列的反义序列、使用发卡形式、或将其与其它核苷酸序列连接起来调控植株的表型，或者是本领域技术人员已知的可用于影响植株的雄性生育力的多种方法中的任一方法。
本发明提供了一个雄性不育恢复基因及该基因的雄性不育突变体材料，及所述基因及其突变体材料在育种中的应用。
在本发明的第一方面，本发明提供了一种育性恢复基因FL1，其核苷酸序列选自下列组的序列之一：
a)具有SEQ ID NO：1或SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；
b)具有SEQ ID NO：6所示的核苷酸序列；
c)具有SEQ ID NO：8所示的核苷酸序列；
d)具有SEQ ID NO：10所示的核苷酸序列；
e)在严格条件下能够与(a)-(d)之任一所述序列的DNA杂交的DNA序列；
f)与(a)-(d)之任一所述序列互补的DNA序列。
其中玉米ZmFL1基因具有如SEQ ID NO:1或2所示的核苷酸序列，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；水稻OsFL1基因具有如SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示；高粱SvFL1基因具有如SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示；拟南芥AtFL1基因具有如SEQ ID NO:10所示的核苷酸序列，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示。
本领域技术人员应该知晓，本发明所述的育性恢复基因FL1还包括与核苷酸序列SEQ IDNO：1、2、6、8或10高度同源，并且具有同样的育性调控功能的高度同源的功能等价体序列。所述高度同源的功能等价体序列包括在严格条件下能够与具有SEQ ID NO：1、2、6、8或10所示的序列的DNA杂交的DNA序列。本文中使用的“严格条件”是公知的，包括诸如在含400mM NaCl、40mM PIPES(pH6.4)和1mM EDTA的杂交液中于60℃杂交12-16小时，然后在65℃下用含0.1SDS、和0.1％SSC的洗涤液洗涤15-60分钟。
功能等价体序列还包括与SEQ ID NO：1、2、6、8或10所示序列有至少90％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性，且具有育性调控功能的DNA序列，可以从任何植物中分离获得。其中，序列同一性的百分比可以通过公知的生物信息学算法来获得，包括Myers和Miller算法(Bioinformatics，4(1)：11-17，1988)、Needleman-Wunsch全局比对法(J.Mol.Biol.，48(3)：443-53，1970)、Smith-Waterman局部比对法(J.Mol.Biol.，147：195-197，1981)、Pearson和Lipman相似性搜索法(PNAS，85(8)：2444-2448，1988)、Karlin和Altschul的算法(Altschul等，J.Mol.Biol.，215(3)：403-410，1990；PNAS，90：5873-5877，1993)。这对于本领域技术人员来说是熟悉的。
在本发明的第二方面，本发明还提供了一种表达盒，所述表达盒含有本发明所公开的育性恢复基因的DNA序列，选自下列组的序列之一：
(a)具有SEQ ID NO：1、2、6、8或10所示的序列；
(b)在严格条件下能够与(a)所述序列的DNA杂交的DNA序列；
(c)与(a)所述序列有至少90％(优选为至少95％)序列同一性，且具有相同功能的DNA序列；和
(d)与(a)-(c)之任一所述序列互补的DNA序列。
在本发明的第三方面，本发明还提供了一种植物雄性不育突变体，所述雄性不育突变体通过突变植物内源的SEQ ID NO：1、2、6、8或10基因，或突变与其高度同源的基因的核苷酸序列，使该植物体丧失雄性育性的过程。所述“突变”包括但不限于以下方法，如用物理或化学的方法所导致的基因突变，化学方法包括用EMS等诱变剂处理所导致的诱变，所述突变还可以是点突变，也可以是DNA缺失或插入突变，也可以是通过RNAi等基因沉默手段或者通过基因定点突变的方法，所述基因定点突变的方法包括但不限于ZFN定点突变方法、TALEN定点突变方法、和/或CRISPR/Cas9等定点突变方法。。
具体地，本发明所提供的玉米雄性不育突变体zmfl1，其含有Mutator插入造成的突变的雄性不育基因，本发明在该玉米育性基因ZmFL1中分别发现了两个Mutator插入造成的该基因突变，均造成玉米的雄性不育表型，其Mutator插入位点分别为chr1:80,964,768(MU1)和chr1:80,963,850(MU3)，并由于Mutator插入造成了基因表达的提前终止，从而无法编码功能蛋白。
在本发明的第四方面，本发明还提供了一种能启动基因表达的启动子pZmFL1，其核苷酸序列如SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5所示。将SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5与报告基因GUS相连，构建载体转化水稻，检测分析转基因植株中的GUS表达活性和表达模式，通过在转基因植株的根、茎、叶和花中都进行GUS染色分析，结果发现pZmFL1启动子驱动GUS基因在植物花药中表达，具体的在花粉发育后期表达。说明本发明所提供的SEQ ID NO:4或5启动子是一个花药特异性表达的启动子。
本发明所提供的植物花药特异表达启动子pZmFL1，含有序列表中SEQ ID NO:4或5所示的核苷酸序列，或包含与SEQ ID NO:4或5中所列核苷酸序列具有90％以上相似性的核苷酸序列，或包含来源于SEQ ID NO:4或5序列上的100个及100以上连续的核苷酸片段，并且可以驱动与该启动子操作性连接的核苷酸序列在植物花药中的表达。含有上述序列的表达载体、转基因细胞系以及宿主菌等均属于本发明的保护范围。扩增本发明所公开的SEQID NO:4或5启动子的任一核苷酸片段的引物对也在本发明的保护范围之内。
本发明所提供的启动子核苷酸序列还可用于从玉米以外的其它植物中分离相应序列，尤其是从其他单子叶植物中进行同源克隆。根据这些相应序列与本文所列启动子序列间的序列同源性，或与本启动子基因的同源性，使用如PCR、杂交等技术来鉴别分离这些相应序列。因此，根据它们与本文所列的SEQ ID NO:4或5启动子序列(或其片段)间的序列相似性而分离的相应片段，也包括在实施方案中。本实施方案的启动子区域可从任何植物中分离，包括但不限于芸苔属、玉米、小麦、高粱、两节荠属、白芥、蓖麻子、芝麻、棉籽、亚麻子、大豆、拟南芥属、菜豆属、花生、苜蓿、燕麦、油菜籽、大麦、燕麦、黑麦(Rye)、粟、蜀黍、小黑麦、单粒小麦、斯佩尔特小麦(Spelt)、双粒小麦、亚麻、格兰马草(Gramma grass)、摩擦禾、假蜀黍、羊茅、多年生麦草、甘蔗、红莓苔子、番木瓜、香蕉、红花、油棕、香瓜、苹果、黄瓜、石斛、剑兰、菊花、百合科、棉花、桉、向日葵、芸苔、甜菜、咖啡、薯蓣、观赏植物和松类等。
本发明所述的“启动子”是指一种DNA调控区域，其通常包含能指导RNA聚合酶II在特定编码序列的合适转录起始位点起始RNA合成的TATA盒。启动子还可包含其它识别序列，这些识别序列通常位于TATA盒的上游或5’端，通常被称为上游启动子元件，起调控转录效率的作用。本领域技术人员应该知晓，虽然已经鉴定了针对本发明公开的启动子区域的核苷酸序列，但是分离和鉴定处于本发明鉴定的特定启动子区域的TATA盒上游区域的其它调控元件也在本发明的范围内。因此，本文公开的启动子区域通常被进一步界定为包含上游调控元件，例如用于调控编码序列的组织表达性和时间表达功能的那些元件、增强子等。以相同的方式，可以鉴定、分离出使得能在目标组织(例如雄性组织)中进行表达的启动子元件，将其与其它核心启动子一起使用，以验证雄性组织优先的表达。核心启动子指起始转录所需的最小限度的序列，例如被称为TATA盒的序列，这是编码蛋白质的基因的启动子通常都具有的。因此，可选地，FL2基因的上游启动子可与其自身的或来自其它来源的核心启动子关联使用。
核心启动子可以是任何一种已知的核心启动子，例如花椰菜花叶病毒35S或19S启动子(美国专利No.5,352,605)、泛素启动子(美国专利No.5,510,474)、IN2核心启动子(美国专利No.5,364,780)或玄参花叶病毒启动子。
所述基因启动子的功能可以通过以下方法进行分析：将启动子序列与报告基因可操作性连接，形成可转化的构建体，再将该构建体转入植株中，在获得转基因后代中，通过观察报告基因在植物各个组织器官中的表达情况来确认其表达特性；或者将上述构建体亚克隆进用于瞬时表达实验的表达载体，通过瞬时表达实验来检测启动子或其调控区的功能
用来测试启动子或调控区域功能的适当表达载体的选择将取决于宿主和将该表达载体引入宿主的方法，这类方法是本领域普通技术人员所熟知的。对于真核生物，在载体中的区域包括控制转录起始和控制加工的区域。这些区域被可操作地连接到报告基因，所述报告基因包括YFP、UidA、GUS基因或荧光素酶。包含位于基因组片段中的推定调控区的表达载体可以被引入完整的组织，例如阶段性花粉，或引入愈伤组织，以进行功能验证。
此外，本发明的启动子pZmFL1可与并非FL1基因的核苷酸序列相连，以表达其它异源核苷酸序列。本发明的启动子核苷酸序列及其片段和变体可与异源核苷酸序列一起组装在一个表达盒中，用于在目的植株中表达，更具体地，在该植株的雄性器官中表达。所述表达盒有合适的限制性酶切位点，用于插入所述启动子和异源核苷酸序列。这些表达盒可用于对任何植株进行遗传操作，以获得想要的相应表型。
本发明所公开的玉米pZmFL1启动子,可用于驱动下列异源核苷酸序列的表达,以使转化的植株获得雄性不育的表型，所述异源核苷酸序列可编码促使碳水化合物降解的酶或修饰酶、淀粉酶、脱支酶和果胶酶，更具体的如a淀粉酶基因、茁长素(auxin),rot B、细胞毒素基因、白喉毒素、DAM甲基化酶、亲和素，或者可选自原核调控系统，还可以是显性的雄性不育基因。
在某些实施方式中，本发明中所提到的可操作地连接在本发明启动子下游的核酸，其中所述的“核酸”可以是操作性连接于本文所公开的启动子之上的结构基因、调节基因、结构基因的反义基因、调节基因的反义基因或者能够干扰内源基因表达的小RNA。
在本发明的第五方面，本发明还提供了一种表达盒，其包含：
(a)本发明第四方面的启动子SEQ ID NO:4或5；和
(b)核酸，其可操作地连接在本发明的启动子SEQ ID NO:4或5下游。
本发明的表达盒在5’-3’的转录方向上包含本发明的启动子SEQ ID NO:4或5、可操作地连接在本发明的启动子SEQ ID NO:4或5的下游的核酸、任选的转录和翻译的终止区(如，转录终止元件或多聚腺苷酸化信号)。本发明的表达盒还可以包括，在细菌中复制所需的复制起点(例如，来自pBR322或P15A ori的ORI区)，土壤杆菌T-DNA转移所需要的元件(例如，T-DNA的左边界和/或右边界)。本发明表达盒可以包含的其他成分包括，增强子、内含子、多克隆位点、操纵基因、阻遏物结合位点、转录因子结合位点等。示例性的增强子包括来自CaMV 35S启动子、章鱼碱合酶基因、稻肌动蛋白I基因、玉米醇脱氢酶基因、玉米矮缩I基因、TMVΩ元件和酵母的启动子的增强子元件。也可以采用病毒前导序列来作为具有增强子效用的远见，如来自烟草花叶病毒(TMV)、玉米褪绿斑点病毒(MCMV)和苜蓿花叶病毒(AMV)的前导序列等。示例性的植物内含子包括来自Adh 1、bronze 1、肌动蛋白1、肌动蛋白2的内含子、以及蔗糖合酶内含子。
本发明中所提到的可操作地连接在本发明的启动子SEQ ID NO:4或5下游的核酸，其中所述的“核酸”可以是操作性连接于本文所公开的启动子之上的结构基因、调节基因、结构基因的反义基因、调节基因的反义基因或者能够干扰内源基因表达的小RNA。
具体地，可以将本发明所提供的育性调控基因SEQ ID NO：1、2、6、8或10构建到启动子SEQ ID NO:4或5的下游，从而驱动该育性调控基因在花药中的特异表达，或是通过RNAi的技术原理，构建由SEQ ID NO:4或5启动的可以沉默SEQ ID NO:1、2、6、8或10基因的DNA载体，从而获得SEQ ID NO:1、2、6、8或10基因的雄性不育突变体。
由上可见，可将上述任何核酸序列操作性连接到本发明中的SEQ ID NO:4或5启动子序列上，并在植物体中进行表达。
本发明的所提供的花药特异表达启动子可用于外源基因在花药中的特异性表达，从而避免该外源基因在植物其他组织中持续表达所带来的不利影响，还可以用于植物花粉生长发育相关基因的功能分析和鉴定；可用于雄性不育系和恢复系的创建；并可应用于花粉败育实验中，从而避免由植物转基因漂移或花粉逃逸所带来的生物安全问题，对植物雄性不育系和恢复系的创造具有重要意义。
在本发明的第六方面，本发明所提供的表达盒可被插入质粒、粘粒、酵母人工染色体、细菌人工染色体或其他适合转化进宿主细胞中的任何载体中。优选的宿主细胞是细菌细胞，尤其是用于克隆或储存多核苷酸、或用于转化植物细胞的细菌细胞，例如大肠杆菌、根瘤土壤杆菌和毛根土壤杆菌。当宿主细胞是植物细胞时，表达盒或载体可被插入被转化的植物细胞的基因组中。插入可以是定位的或随机的插入。优选地，插入通过诸如同源重组来实现。另外，表达盒或载体可保持在染色体外。本发明的表达盒或载体可存在于植物细胞的核、叶绿体、线粒体和/或质体中。优选地，本发明的表达盒或载体被插入植物细胞核的染色体DNA中。
在第七方面，本发明提供了一种植物的生产方法，其包括：
(1)构建本发明第二方面或第五方面所提供的表达盒；
(2)将步骤(1)获得的表达盒导入植物细胞；
(3)再生出转基因植物；和
(4)选择出转基因植物；并且
(5)任选地，增殖步骤(4)获得的植物以获得后代。
本发明的转基因植物使用植物生物技术领域技术人员已知的转化方法制备。任何方法可被用于将重组表达载体转化进植物细胞中，以产生本发明的转基因植物。转化方法可包括直接和间接的转化方法。合适的直接方法包括聚乙二醇诱导的DNA摄入、脂质体介导的转化、使用基因枪导入、电穿孔、以及显微注射，等。在本发明的具体实施方式中，本发明使用了基于土壤杆菌的转化技术(可参见Horsch RB等(1985)Science 225：1229；WhiteFF，Vectors for Gene Transfer in Higher Plants，Transgenic Plants，第1卷，Engineering and Utilization，Academic Press，1993，pp.15-38；Jenes B等.Techniquesfor Gene Transfer，Transgenic Plants，第1卷，Engineering and Utilization，Academic Press，1993，pp.128-143，等)。土壤杆菌菌株(例如根瘤土壤杆菌或毛根土壤杆菌)包含质粒(Ti或Ri质粒)和T-DNA元件，所述质粒和元件在用土壤杆菌转染后被转移至植物，而T-DNA被整合进植物细胞的基因组中。T-DNA可位于Ri-质粒或Ti-质粒上，或独立地包含在所谓的双元载体中。土壤杆菌介导的转化方法描述于例如中。土壤杆菌介导的转化最适合双子叶植物，但是也适合单子叶植物。土壤杆菌对植物的转化描述于例如中。转化可导致瞬时或稳定的转化和表达。尽管本发明的核苷酸序列可被插入落入这些广泛种类中的任何植物和植物细胞中，但是其尤其适用于作物植物细胞。
本发明还包括所公开的FL1基因及其启动子的应用，在某些应用的实施方式中，可以应用本发明所提供的FL1基因或其启动子来实现FL1或其他类似育性相关基因突变所获得的雄性不育系的繁殖和保持。
具体地，上述雄性不育系的繁殖和保持，是指以纯合隐性核雄性不育突变体为转化受体材料，将紧密连锁的3个目标基因转化至该不育突变体受体植株中。所述3个目标基因分别是育性恢复基因、花粉失活基因和筛选标记基因。其中，育性恢复基因可使不育的转化受体育性恢复，花粉失活基因可使含有转化的外源基因的花粉失活，即失去授精能力，筛选基因可以用于转基因种子和非转基因种子的分拣，分拣出的非转基因种子用作不育系生产杂交种，转基因种子用作保持系来源源不断地、稳定地生产不育系。
更具体地，根据本发明的一个实施例，可以以玉米核隐性不育zmfl1/zmfl1突变体为转化受体材料，将紧密连锁的3个目标基因转化至该不育系：其中，育性恢复基因ZmFL1可使转化受体育性恢复；花粉失活基因Zm-PA可使含有外源基因的花粉失活，即失去授精能力；荧光色选基因RFP(r)用于转基因种子和非转基因种子的分拣，分拣出的非转基因种子用作不育系生产杂交种，转基因种子用作保持系来源源不断地稳定地生产不育系。由于该技术利用生物技术生产非转基因产品，解决了玉米杂交制种过程中面临的瓶颈问题。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：本发明提供了一种玉米花粉发育基因以及基于该基因突变所产生的雄性不育系，该不育系的育性稳定、不受环境条件影响，在该基因序列上发现的两个位点的Mutator插入均能造成稳定的雄性不育突变。该基因以及该基因突变产生的不育系为玉米杂交育种提供了资源，也为构建第三代杂交育种体系提供了必要的元件，该基因突变产生的雄性不育系，用来生产杂交种子，对于突破并改良现有的“三系”和“两系”杂交技术有重要意义。
附图说明
图1为野生型单株与zmfl1不育突变体单株的散粉期和成熟期花药比较。
图2为野生型单株和zmfl1不育突变体单株的花药成熟期比较(扫描电镜结果)。
图3为对野生型单株和zmfl1不育突变体单株的花药进行半薄切片分析结果。
图4为用DAPI染色观察野生型单株和zmfl1不育突变体单株的花粉发育过程。
图5为利用透射电镜观察野生型单株和zmfl1不育突变体单株的乌氏体和花粉粒壁发育。
图6为野生型单株和zmfl1不育突变体单株的花粉的单核小孢子期至双核花粉粒期结构分析。
图7为雄性不育突变体基因的图位克隆。
图8为不育突变体候选基因的结构。
图9为pZmFL1启动子驱动GUS在水稻各组织器官中的表达情况，其中A为根；B为茎；
C为叶片；D-I为水稻花各个时期的染色情况。
图10为ZmFL1基因编码的蛋白与水稻、高粱、拟南芥基因组中预测的同源蛋白的序列比对。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1、雄性不育突变体筛选
Mutator是迄今为止在植物中发现的活性最高,诱变能力最强的一类转座子，以其高的正正向突变率、倾向插入基因富含区和低拷贝序列区等独特的遗传特性，使其在玉米功能基因研究以及突变体库构建中发挥重要作用。利用携带Mutator9材料和国内优良自交系综31构建突变体库。将两者杂交获得M1，将M1种植后自交获得M2种子。M1分单穗收获、脱粒，作为一个株系。每个株系的M2种子分出20粒，2009年3月种植于湖南农业大学校园内。种植2行，每行10粒，单粒播种。在1000个株系中发现1个系有3株不育株，9株可育株，姊妹交保种，将该不育系命名为zmfl1。
实施例2、zmfl1雄性不育突变体遗传分析
利用四个玉米自交系分别与实施例1获得的不育单株zmfl1杂交，对四个F1群体在散粉期进行田间育性鉴定，四个F1群体均表现出可育表型；将F1单株自交，分单株收获和播种果穗(F2)，在散粉期对四个F2群体进行田间育性鉴定，四个群体都出现育性分离，且正常株与不育株比例符合孟德尔分离定律3:1分离比(表1)，故可推断其受一对隐性核单基因控制。
表1四个F2群体正常株和不育株分离比例
实施例3、zmfl1雄性不育突变体育性稳定性分析
将实施例1中的zmfl1不育单株与可育单株姊妹交，并将获得的在海南三亚、湖南长沙和北京三个不同生态点分别播种的不育亲本及分离群体，于散粉期考察群体所有单株育性，均可以获得与亲本一致的不育表型，说明该育性基因控制的不育表型不受温度和光照条件的影响。具体的，亲本的姊妹单株杂交不同时间、不同地点植株育性表现见表2，分离群体不同时间不同地点育性表现见表3：
表2亲本姊妹交不同时间、不同地点育性表现
表3分离群体不同时间、不同地点育性表现
实施例4、zmfl1雄性不育突变体生殖器官表型分析
对可育单株和zmfl1不育单株在花药散粉期进行观察发现，野生型单株的花药(图1，A左)能从内外颖中露出、散粉，不育突变体单株的花药(图1，A右)不能从内外颖中露出、散粉；在花药成熟期进行观察发现，野生型单株的花药(图1，B左)饱满、呈黄色，不育突变体单株的花药(图1，B右)萎蔫、较小且呈红褐色；花粉碘-碘化钾染色观察结果表明，野生型单株的花粉为圆形、黑褐色(图1，C)，而不育突变体单株则只有花药壁和小孢子降解后的残余物质，无花粉粒出现(图1，D)。
成熟期野生型单株和zmfl1不育突变体单株的花药内外表面扫描电镜结果显示：野生型单株的花药的外表面致密(图2，A),不育突变体单株的花药外表面光滑(图2，B)；野生型单株的花药内表面排列着大量乌氏体(图2，C),不育突变体单株的花药内表面光滑，无乌氏体存在(图2，D)。
对野生型单株和zmfl1不育突变体单株的花药进行半薄切片分析，结果表明：四分体时期，野生型单株(图3，A)和不育突变体单株(图3，E)花药和四分体基本无差异；单核小孢子期，野生型单株(图3，B)的花药绒毡层细胞质浓缩、颜色加深，而不育突变体单株(图3，F)的绒毡层比四分体时期稍微扩大，颜色没有加深，突变体小孢子形状畸形；单核小孢子后期至二核花粉粒期，野生型单株(图3，C)花药绒毡层几乎降解完全，小孢子液泡化并同时进行核分裂形成二核或三核花粉粒，而不育突变体单株(图3，G)绒毡层比野生型大，降解较少，小孢子液泡化程度较轻，小孢子畸形且开始降解；成熟花粉粒期，野生型单株(图3，D)花药花粉粒填满淀粉和脂质，而不育突变体单株(图3，H)花药内只有小孢子降解后的残余物质。
用DAPI染色观察野生型单株和zmfl1不育突变体单株的花粉发育过程：四分体时期，野生型单株的四分体(图4，A)和不育突变体的四分体(图4，E)无差异；单核小孢子前期，不育突变体单株的小孢子(图4，F)相比于野生型单株的小孢子(图4，B)形状畸形；单核小孢子后期，不育突变体单株的小孢子(图4，G)相比于野生型单株的小孢子(图4，C)已开始降解；二核花粉粒期，不育突变体小孢子(图4，H)相比于野生型小孢子(图4,D)已明显降解。
利用透射电镜观察野生型单株和zmfl1不育突变体单株的乌氏体和花粉粒壁发育：四分体时期，野生型绒毡层内表面乌氏体(图5，A箭头)比zmfl1突变体绒毡层内表面乌氏体(图5，B箭头)稍多，体积稍大；单核小孢子前期，野生型绒毡层内表面乌氏体(图5，C箭头)开始累积孢粉素前体物质累积，而zmfl1突变体绒毡层内表面乌氏体(图5，D箭头)似乎已经降解。
对野生型单株和zmfl1不育突变体单株的花粉的单核小孢子期进行分析，野生型单株的花粉粒外壁形成明显外壁外层、外壁内层和柱状层(图6，A),不育突变体单株形成只有外壁内层以及填充在其上的少许孢粉素物质(图6，B)；单核小孢子后期至双核花粉粒期，野生型单株的花粉粒外壁层加厚(图6，C),不育突变体单株的花粉粒外壁层依然有外壁内层以及填充在其上的孢粉素物质，无明显三层外壁形成(图6，D)。
实施例5、zmfl1雄性不育突变体基因的克隆
以zmfl1不育突变体作母本，与野生型自交系郑58杂交，F1代自交构建F2群体。以玉米散粉期花药是否外露、花药颜色以及是否存在花粉为育性表型鉴定标准，挑取F2群体中不育突变表型单株进行初步定位和精细定位，共筛选得到不育突变表型单株2757株。通过初步定位把目标基因限定在标记S1和S11之间(图7)。
根据B73全基因组物理图谱，获得S1和S11两个标记之间的基因组序列，利用此序列来开发新的SSR标记和STS标记。对不育突变体、郑58以及它们组配的F1进行多态性标记的筛选，最终选择了10对多态性分子标记进行下一步精细定位，它们分别是S、S2、S3、S4、S5、S6、S7、S8、S9和S10(图7)。
针对郑58与不育突变体的F2群体，结合目标基因两侧的交换单株表型，用开发的标记分别对其进行基因型分析，结果发现标记S2、S3、S4、S5和目标基因之间的交换单株分别减少到29株、25株、16株和9株，S10、S9、S8和目标基因之间的交换单株分别减少到14株、13和11株，且两侧交换单株各不相同；S、S6、S7和目标基因之间的交换单株为0。根据交换单株递减规律和三点测验等方法最终把目标基因锁定在S5和S8之间，分别有9个交换单株和11个交换单株。这两个标记界定的实际物理距离约为300Kb(图7)。
对目标基因所在的300kb区间进行基因注释以及候选基因的生物信息学分析，发现该区域内存在六个候选基因(图7)。基因测序发现，在候选基因GRMZM2G434500(Chromosome 1:80,963,525-80,966,109)的第二个外显子chr1:80,964,768处存在Mutator1转座子插入(图8)，且突变表型与基因型相一致，命名为ZmFL1，其基因组DNA序列如SEQ ID NO:1所示；其编码cDNA序列如SEQ ID NO:2所示；其编码的氨基酸序列如SEQ IDNO:3所示。
实施例6、zmfl1雄性不育突变基因的等位突变
从MAIZEGDB申请获得该雄性育性突变基因的等位系，测序发现该等位系在ZmFL1第一个外显子chr1:80,963,850处存在Mutator3序列插入,且表型与基因型相一致。
实施例7、ZmFL1基因的启动子表达载体构建及功能分析
ZmFL1基因的启动子表达载体的构建：通过玉米基因组扩增分别得到两个启动子片段，一个启动子的长度是875bp，其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；一个启动子的长度是2500bp，其核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示。将该两个片段与GUS连接后得到启动子功能鉴定植物表达载体。通过农杆菌介导的方法转化至野生型水稻愈伤组织中，并筛选再生分别得到12和18株转基因水稻植株。通过分析B-半乳糖苷酶的活性分析pZmFL1启动子的表达模式，在转基因的植株的根、茎、叶和花中通过GUS染色分析，发现pZmFL1启动子驱动GUS主要在花药中表达，更具体的在花粉发育的后期表达，其GUS染色结果如图9所示。
实施例8、ZmFL1基因编码的蛋白与水稻、高粱、拟南芥基因组中预测的同源蛋白的序列比对
在NCBI数据库中，利用protein blast工具，对玉米ZmFL1基因编码的蛋白全序列在蛋白数据库中进行查找，得到了水稻、高粱、拟南芥基因组中预测的同源蛋白，将这些蛋白序列进行比对分析，结果显示来自不同植物的同源蛋白都具有非常相似的保守序列，彼此之间同源性很高(图10)，表明该蛋白在植物花的雄性器官发育过程中生物学功能保守，起着非常重要的作用。其中水稻中的同源基因OsFL1的基因组核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示；在高粱中的同源基因SbFL1的基因组核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示；在拟南芥中的同源基因AtFL1的基因组核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示。
实施例9、ZmFL1基因在新一代杂交育种技术中的应用
ZmFL1基因可以用于新一代杂交育种技术，该技术的核心思想是：以玉米核隐性雄性不育突变体为转化受体材料，通过将紧密连锁的3个目标基因转化至不育突变体中，其中，育性恢复基因可使转化受体育性恢复，花粉失活基因可使含有外源基因的花粉失活，即失去授精能力，筛选基因可以用于转基因种子和非转基因种子的分拣，分拣出的非转基因种子即为不育系，而转基因种子用作保持系。通过保持系给不育系授粉杂交，可以在不育系上结实，由此繁殖不育系。而保持系通过自交可以源源不断地得以繁殖。由于该技术利用生物技术生产非转基因产品，解决了玉米杂交制种过程中面临人工或机械去雄问题，省去人工去雄或机械去雄步骤，可以提供更高质量及纯度的种子给种植者，节约劳动成本。
根据以上原理，更具体地，采用玉米ZmFL1基因构建植物表达载体。该表达载体内包含Zm-AA1(花粉失活基因)、ZmFL1(育性恢复基因)和RFP(红色荧光色选基因)三个表达盒。将该表达盒转化玉米zmfl1纯合隐性雄性不育突变体后，获得的植株育性得以恢复，并具有以下特点：ZmFL1育性恢复基因可使转化受体育性恢复，Zm-AA1花粉失活基因可使含有外源基因的花粉失活，即失去授精能力，RFP筛选基因可以用于转基因种子和非转基因种子的分拣，分拣出的非转基因种子即为不育系，而转基因种子用作保持系。由此，建立新一代杂交育种技术体系。
根据以上原理，发明人采用玉米ZmFL1基因构建了表达载体。在构建玉米的植物表达载体之前，发明人首先分别对表达载体内的花粉失活基因Zm-PA、育性恢复基因ZmFL1和筛选基因RFP(r)三个表达盒单独进行了玉米转化，并进一步对各个表达盒的功能进行了验证。结果表明各个表达盒单独转化玉米时，都能够工作良好，达到预期的设计效果。
进一步,发明人通过装配下述DNA元件，构建新一代杂交育种技术的玉米表达载体：
1)以pCAMBIA2300载体为基础；
2)基因表达盒LTP2：RFP(r)-PINII，RFP(r)基因(SEQ ID NO：12)的开放读码框连接于LTP2启动子(SEQ ID NO：13)和PINII终止子(SEQ ID NO：14)之间，重组成RFP(r)的基因表达盒(LTP2：RFP(r)：PINII)；
3)ZmFL1基因表达盒，由目标基因ZmFL1及其启动子和终止子构成，其中ZmFL1基因的启动子序列如SEQ ID NO：5所示，其终止子序列如SEQ ID NO：16所示，ZmFL1基因的从起始密码子到终止密码子的基因组DNA序列如SEQ ID NO：15所示，其核苷酸序列编码的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；
4)基因表达盒PG47：ZM-BT1：ZM-PA：IN2-1，目标基因ZM-PA(其核苷酸序列如SEQID NO：17所示)的开放读码框连接于启动子PG47(其核苷酸序列如SEQ ID NO：18所示)、转运肽ZM-BT1(其核苷酸序列如SEQ ID NO：19所示)的下游，终止子IN2-1(其核苷酸序列如SEQ ID NO：20所示)的上游。
将构建好的上述表达载体进行玉米转化，获得阳性的转基因玉米植株。
转基因玉米植株的花粉育性检测：对上述所得到的单拷贝转基因玉米(含有纯合的zmfl1隐性不育位点)植株进行分析发现，转基因植株和非转基因对照植株之间没有明显的形态差异，但是花粉育性明显不同。对所述转基因植株材料进行花粉可染率检测，同时对野生型玉米进行花粉可染率检测。
采用的方法为：在玉米开花期，从转基因玉米植株、及其野生型对照植株各随机抽取单株，各株取雄穗的一个小穗，再从小穗中取一朵小花，从小花中取1个花药，置于载玻片中央，滴加一滴1％的I2-KI溶液，用镊子和解剖针释放花粉后，盖上盖玻片，在显微镜下观察、计数可染色花粉数和花粉总数，可以着色为深蓝色的为可育花粉，而不能够着色的为败育花粉。分析转基因玉米植株的花粉可染率，结果显示对照植株的可着色的花粉占98％～100％；而多个随机抽取的转基因植株中，正常花粉(可着色)与败育花粉(不能着色)比例接近1:1，表明所构建的转基因株系可以产生等量的携带外源基因的花粉和不携带外源基因的花粉，即转入的上述玉米表达载体可使转基因株系花粉的50％失活。该结果表明本发明所提供的载体能够达到预期的花粉失活功能。
转基因玉米植株的荧光种子与非荧光种子分离分析：对上述所得到的单拷贝转基因玉米植株(含有纯合的zmfl1隐性不育位点)所结T1代果穗的种子进行荧光分离比例调查，结果表明这些种子均显示1:1分离比，即携带外源基因的荧光种子和不携带外源基因的非荧光种子表现为1:1分离，表明本发明所提供的载体各元件作为整体表达良好，可以实现创制和繁殖不育系的目的；其中，ZmFL1基因可以恢复雄性不育突变体受体的育性，Zm-PA基因和RFP基因的表达可以分别实现预期的花粉失活功能和种子筛选标记功能。
SEQUENCE LISTING
<110> 兴旺投资有限公司
<120> 雄性核不育基因及其突变体在杂交育种上的应用
<130>
<150> 201310421770.9
<151> 2013-09-16
<160> 20
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 2585
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays L.)
<400> 1
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ggcctcttct ctccgcagac ggggcagctg ggcacgttgc cgccgaagca gagaacccca 1260
gaggccctgg agcgcgcggc ggaggcgatg cggcggctgg acaggcgggc gttccggggc 1320
ggattcatcc tggagaagat cctgggcccc gtctcctcgg gccacgtcga gctgcggtcc 1380
gccgacccgc gcgcgaaccc ggcggtgacg ttcaactact tccaggagtc ggaggacctg 1440
cagcggtgcg tgcgcggcat ccagacgatc gagcgcgtga tccagtcccg ggccttcgcc 1500
aacttcacct acgccaacgc ttccacggag tccatcttca ccgactccgc caacttcccc 1560
gtcaacctcc tgccgcggca cgtcaacgac tcccggacgc ccgagcagta ctgcagggac 1620
accgtcatga ccatctggca ttaccacggc gggtgccagg tcggcgccgt cgtggacgac 1680
gattaccggg tgttcggcgt gcagcgactg agggtgatcg acagctccac gttcaagtac 1740
tcccccggca ccaacccgca ggccaccgtc atgatgctcg gaaggtatat gggtgtgaaa 1800
attcaggccg agagatggag gaaatga 1827
<210> 3
<211> 608
<212> PRT
<213> 玉米（Zea mays L.）
<400> 3
Met Ala Pro Gly Leu Ala Asn Trp Val Ala Leu Val Leu Thr Val Leu
1 5 10 15
Leu Gly Leu Ser Cys Leu Val Val Ala Leu Ser Glu Asp Gly Leu Cys
20 25 30
Arg Thr Cys His Ala Leu Phe Gly Ile Ser Ala Val Leu Gln Thr Cys
35 40 45
Glu Leu Ala Trp Thr Cys Ala Glu Thr Leu Asp Lys Leu Arg Phe Val
50 55 60
Arg His Ala Gln Asp Ala Pro Leu Val Ser Gln Tyr Asn Tyr Ile Val
65 70 75 80
Ile Gly Gly Gly Thr Ala Gly Cys Pro Leu Ala Ala Thr Leu Ser Glu
85 90 95
His Ser Arg Val Leu Leu Leu Glu Arg Gly Gly Leu Pro Ser Arg Asn
100 105 110
Met Ser Asp Gln Gln His Phe Thr Asp Ala Leu Ala Asp Thr Ser Pro
115 120 125
Ala Ser Pro Ala Gln Arg Phe Val Ser Glu Asp Gly Val Val Asn Ala
130 135 140
Arg Ala Arg Val Leu Gly Gly Gly Ser Cys Leu Asn Ala Gly Phe Tyr
145 150 155 160
Thr Arg Ala Ser Thr Asp Tyr Val Arg Ala Ala Gly Trp Asp Ala Arg
165 170 175
Leu Val Asn Ser Ser Tyr Arg Trp Val Glu Arg Ala Leu Val Phe Arg
180 185 190
Pro Ala Val Pro Pro Trp Gln Ala Ala Leu Arg Asp Ala Leu Leu Glu
195 200 205
Ala Gly Val Thr Pro Asp Asn Gly Phe Thr Phe Asp His Val Thr Gly
210 215 220
Thr Lys Ile Gly Gly Thr Ile Phe Asp Ser Ser Gly Gln Arg His Thr
225 230 235 240
Ala Ala Asp Phe Leu Arg His Ala Arg Pro Arg Gly Leu Thr Val Phe
245 250 255
Leu Tyr Ala Thr Val Ser Arg Ile Leu Phe Arg Gln Gln Glu Gly Val
260 265 270
Pro Tyr Pro Val Ala Tyr Gly Val Val Phe Thr Asp Pro Leu Gly Val
275 280 285
Gln His Arg Val Tyr Leu Arg Asp Gly Ala Lys Asn Glu Val Ile Leu
290 295 300
Ser Ala Gly Thr Leu Gly Ser Pro Gln Leu Leu Met Leu Ser Gly Val
305 310 315 320
Gly Pro Gln Ala His Leu Glu Ala His Gly Val Gln Val Leu Val Asp
325 330 335
Gln Pro Met Val Gly Gln Gly Val Ala Asp Asn Pro Met Asn Ser Val
340 345 350
Phe Ile Pro Ser Pro Val Pro Val Thr Leu Ser Leu Val Gln Val Val
355 360 365
Gly Ile Thr Arg Ser Gly Ser Phe Ile Glu Gly Val Ser Gly Ser Glu
370 375 380
Phe Gly Ile Pro Val Ser Glu Gly Ala Arg Arg Leu Ala Arg Ser Phe
385 390 395 400
Gly Leu Phe Ser Pro Gln Thr Gly Gln Leu Gly Thr Leu Pro Pro Lys
405 410 415
Gln Arg Thr Pro Glu Ala Leu Glu Arg Ala Ala Glu Ala Met Arg Arg
420 425 430
Leu Asp Arg Arg Ala Phe Arg Gly Gly Phe Ile Leu Glu Lys Ile Leu
435 440 445
Gly Pro Val Ser Ser Gly His Val Glu Leu Arg Ser Ala Asp Pro Arg
450 455 460
Ala Asn Pro Ala Val Thr Phe Asn Tyr Phe Gln Glu Ser Glu Asp Leu
465 470 475 480
Gln Arg Cys Val Arg Gly Ile Gln Thr Ile Glu Arg Val Ile Gln Ser
485 490 495
Arg Ala Phe Ala Asn Phe Thr Tyr Ala Asn Ala Ser Thr Glu Ser Ile
500 505 510
Phe Thr Asp Ser Ala Asn Phe Pro Val Asn Leu Leu Pro Arg His Val
515 520 525
Asn Asp Ser Arg Thr Pro Glu Gln Tyr Cys Arg Asp Thr Val Met Thr
530 535 540
Ile Trp His Tyr His Gly Gly Cys Gln Val Gly Ala Val Val Asp Asp
545 550 555 560
Asp Tyr Arg Val Phe Gly Val Gln Arg Leu Arg Val Ile Asp Ser Ser
565 570 575
Thr Phe Lys Tyr Ser Pro Gly Thr Asn Pro Gln Ala Thr Val Met Met
580 585 590
Leu Gly Arg Tyr Met Gly Val Lys Ile Gln Ala Glu Arg Trp Arg Lys
595 600 605
<210> 4
<211> 875
<212> DNA
<213> 玉米（Zea mays L.）
<400> 4
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taatataatt ttgtttaatt attatgcact ttgtaatttt taagtcaata aaaatattgt 120
gttgtgtgat ttctgagtgt tgaaataaat ctgcgtgaat tacttaattt tgaaatataa 180
aagctgatgt ggctataggc tgaggttata gcctcctaca gtttgtgcac tgaaatagct 240
ggaacgagag tggagtcgag aggtgacgtg ggagggggcg agagtgaggc tatccaggat 300
taaggtgcag cctgcaggga tgcaaatcct agataccagg accagaactt cttaacgacc 360
gccggtaaaa tttactcagg ttattctcgt ctaaaaagaa ttaagtagga ttttaacttg 420
tttatgattt aatctcactc aatctgctct aatctacatg gtttgggtat aaaacgaaca 480
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acttttctcc tatctgagca ctgctgctgc tgaaa 875
<210> 5
<211> 2500
<212> DNA
<213> 玉米（Zea mays L.）
<400> 5
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tagcacgatc tgattggtcc acgtggcacc acgtgtgcta gccattgcaa ctagcctttt 120
ttacagtttg gagtccaaaa aattcaaaaa atgcaaaaaa tcacaaaatt catccccaat 180
ccctgtataa atacccctac cgtggtggag ctcattacac agaccatttt atctcatttt 240
ctcttccaaa ctcccctctc ttcacacaat gttgggttgg tccccagatt tgaacacctt 300
cacggatctc ttgcaatccg atgggtcacc tacaaccctt ccgtttgatg agtcttcttt 360
actacatcac cactccgatg tttcagcccc agtcccccat gcactagttc cggctgcgcg 420
tccaccatca tacccttatc cctaccattt ctattaatat ccattgtctt catatggtca 480
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aataggagga agatgaggat gagatcgagg agttcgatta gagttatgta attttatttt 1680
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attgtgttgt gtgatttctg agtgttgaaa taaatctgcg tgaattactt aattttgaaa 1800
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<210> 6
<211> 3041
<212> DNA
<213> 水稻（Oryza sativa）
<400> 6
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tatttgcacc cacttaattt ttactcttct ctagacatag gttcagtatc tgcttgttga 2280
ttatgtaacc ttgaagaagc attgcaaaaa caaagcggaa acttatgtta ccaagggcat 2340
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<212> PRT
<213> 水稻（Oryza sativa）
<400> 7
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1 5 10 15
Ala Ala Ala Val Leu Leu Ser Leu Cys Leu Ala Ala Leu Ser Glu Glu
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Gly Cys Pro Leu Ala Ala Thr Leu Ser Glu His Ser Arg Val Leu Leu
65 70 75 80
Leu Glu Arg Gly Gly Leu Pro Tyr Ala Asn Met Ser Ser Glu Gln His
85 90 95
Phe Thr Asp Ala Leu Ala Asp Thr Ser Pro Ala Ser Pro Ala Gln Arg
100 105 110
Phe Ile Ser Glu Asp Gly Val Val Asn Ala Arg Ala Arg Val Leu Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Cys Leu Asn Ala Gly Phe Tyr Thr Arg Ala Ser Asn Glu
130 135 140
Tyr Val Arg Ala Ser Gly Trp Asp Ala Arg Leu Val Asn Ser Ser Tyr
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Arg Trp Val Glu Arg Ser Leu Val Phe Arg Pro Asp Val Pro Pro Trp
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Gln Ala Ala Leu Arg Asp Ala Leu Leu Glu Val Gly Val Thr Pro Asp
180 185 190
Asn Gly Phe Thr Phe Asp His Val Thr Gly Thr Lys Ile Gly Gly Thr
195 200 205
Ile Phe Asp Asn Ser Gly Gln Arg His Thr Ala Ala Asp Phe Leu Arg
210 215 220
His Ala Arg Pro Arg Gly Leu Thr Val Leu Leu Tyr Ala Thr Val Ser
225 230 235 240
Arg Ile Leu Phe Lys Ser Gln Asp Gly Val Pro Tyr Pro Val Ala Tyr
245 250 255
Gly Val Val Phe Ser Asp Pro Leu Gly Val Gln His Arg Val Tyr Leu
260 265 270
Arg Asp Gly Asp Lys Asn Glu Val Ile Val Ser Ala Gly Thr Leu Gly
275 280 285
Ser Pro Gln Leu Leu Met Leu Ser Gly Val Gly Pro Gln Ala His Leu
290 295 300
Glu Ala His Gly Ile Glu Val Ile Val Asp Gln Pro Met Val Gly Gln
305 310 315 320
Gly Val Ala Asp Asn Pro Met Asn Ser Val Phe Ile Pro Ser Pro Val
325 330 335
Pro Val Glu Leu Ser Leu Val Gln Val Val Gly Ile Thr Arg Ser Gly
340 345 350
Ser Phe Ile Glu Gly Val Ser Gly Ser Glu Phe Gly Met Pro Val Ser
355 360 365
Asp Gly Ala Leu Arg Trp Ala Arg Ser Phe Gly Met Leu Ser Pro Gln
370 375 380
Thr Gly Gln Leu Gly Thr Leu Pro Pro Lys Gln Arg Thr Pro Glu Ala
385 390 395 400
Leu Gln Arg Ala Ala Glu Ala Met Met Arg Leu Asp Arg Arg Ala Phe
405 410 415
Arg Gly Gly Phe Ile Leu Glu Lys Ile Leu Gly Pro Val Ser Ser Gly
420 425 430
His Val Glu Leu Arg Thr Thr Asp Pro Arg Ala Asn Pro Ser Val Thr
435 440 445
Phe Asn Tyr Phe Arg Glu Ala Glu Asp Leu Glu Arg Cys Val His Gly
450 455 460
Ile Glu Thr Ile Glu Arg Val Ile Gln Ser Arg Ala Phe Ser Asn Phe
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Thr Tyr Ala Asn Ala Ser Val Glu Ser Ile Phe Thr Asp Ser Ala Asn
485 490 495
Phe Pro Val Asn Leu Leu Pro Arg His Val Asn Asp Ser Arg Ser Pro
500 505 510
Glu Gln Tyr Cys Met Asp Thr Val Met Thr Ile Trp His Tyr His Gly
515 520 525
Gly Cys His Val Gly Ala Val Val Asp Asp Asp Tyr Arg Val Phe Gly
530 535 540
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Gly Thr Asn Pro Gln Ala Thr Val Met Met Leu Gly Arg Tyr Met Gly
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<211> 1964
<212> DNA
<213> 高粱(Sorghum vulgare)
<400> 8
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gcggcccagg ggcctcaccg tgttcctcta cgctaccgtc tcgaggatcc tcttcaggca 840
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gctggggagc ccgcagctgc tgatgctgag cggcgtcgga ccgcaggcgc acctggaggc 1020
gcacggcatc caggtgctgg tcgaccagcc catggtcggg cagggcgtgg ccgacaaccc 1080
catgaactcg gtgttcatcc cgtcgccggt gcccgtcacg ctctcgctcg tgcaggtcgt 1140
cgggatcacc cggttcggca gcttcatcga gggcgtcagc ggctccgagt tcggcatccc 1200
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actccgccaa cttccccgtc aacctcctgc cgcggcacgt caacgactcc cggacgcccg 1740
agcagtactg cagggacacc gtcatgacca tctggcacta ccacggcgga tgccaggtcg 1800
gcgccgtcgt cgacgacgat taccgggtgt tcggcgtgca gcggctcagg gtgatcgaca 1860
gctccacgtt caagtactcc ccggggacca acccgcaggc caccgtcatg atgctcggaa 1920
ggtatatggg ggtgaaaatt caggcccaga gatggaggaa atga 1964
<210> 9
<211> 582
<212> PRT
<213> 高粱(Sorghum vulgare)
<400> 9
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1 5 10 15
Val Leu Gly Ser Ser Cys Leu Val Ala Leu Ser Glu Asp Glu Pro Leu
20 25 30
Glu Asn Leu Arg Phe Val Arg His Ala Gln Asp Ala Pro Leu Val Ser
35 40 45
Gln Tyr Asn Tyr Ile Val Ile Gly Gly Gly Thr Ala Gly Cys Pro Leu
50 55 60
Ala Ala Thr Leu Ser Glu His Ser Arg Val Leu Leu Leu Glu Arg Gly
65 70 75 80
Gly Leu Pro Tyr Arg Asn Met Ser Asn Gln Gln His Phe Thr Glu Ala
85 90 95
Leu Ala Asp Thr Ser Pro Ala Ser Pro Ala Gln Arg Phe Ile Ser Glu
100 105 110
Asp Gly Val Val Asn Ala Arg Ala Arg Val Leu Gly Gly Gly Ser Cys
115 120 125
Leu Asn Ala Gly Phe Tyr Thr Arg Ala Ser Asn Asp Tyr Val Arg Ala
130 135 140
Ala Gly Trp Asp Thr Arg Leu Val Asn Ser Ser Tyr His Trp Val Glu
145 150 155 160
Arg Ala Leu Val Phe Arg Pro Asp Val Pro Pro Trp Gln Ala Ala Leu
165 170 175
Arg Asp Ala Leu Leu Glu Ala Gly Val Thr Pro Asp Asn Gly Phe Thr
180 185 190
Phe Asp His Val Pro Gly Thr Lys Ile Gly Gly Thr Ile Phe Asp Ser
195 200 205
Ser Gly Gln Arg His Thr Ala Ala Asp Phe Leu Arg His Ala Arg Pro
210 215 220
Arg Gly Leu Thr Val Phe Leu Tyr Ala Thr Val Ser Arg Ile Leu Phe
225 230 235 240
Arg Gln Gln Glu Gly Val Pro Tyr Pro Val Ala Tyr Gly Val Val Phe
245 250 255
Thr Asp Pro Leu Gly Val Gln His Arg Val Tyr Leu Arg Asp Gly Gly
260 265 270
Lys Asn Glu Val Ile Leu Ser Ala Gly Thr Leu Gly Ser Pro Gln Leu
275 280 285
Leu Met Leu Ser Gly Val Gly Pro Gln Ala His Leu Glu Ala His Gly
290 295 300
Ile Gln Val Leu Val Asp Gln Pro Met Val Gly Gln Gly Val Ala Asp
305 310 315 320
Asn Pro Met Asn Ser Val Phe Ile Pro Ser Pro Val Pro Val Thr Leu
325 330 335
Ser Leu Val Gln Val Val Gly Ile Thr Arg Phe Gly Ser Phe Ile Glu
340 345 350
Gly Val Ser Gly Ser Glu Phe Gly Ile Pro Val Ser Asp Gly Ala Arg
355 360 365
Arg Leu Ala Arg Asn Phe Gly Leu Phe Ser Pro Gln Thr Gly Gln Leu
370 375 380
Gly Thr Leu Pro Pro Lys Gln Arg Thr Pro Glu Ala Leu Glu Arg Ala
385 390 395 400
Ala Glu Ala Met Arg Arg Leu Asp Arg Arg Ala Phe Arg Gly Gly Phe
405 410 415
Ile Leu Glu Lys Ile Leu Gly Pro Val Ser Ser Gly His Ile Glu Leu
420 425 430
Arg Ser Ala Asp Pro Arg Ala Asn Pro Ala Val Thr Phe Asn Tyr Phe
435 440 445
Gln Glu Ser Glu Asp Leu Glu Arg Cys Val His Gly Ile Gln Thr Ile
450 455 460
Glu Arg Val Ile Gln Ser Arg Ala Phe Ala Asn Phe Thr Tyr Ala Asn
465 470 475 480
Ala Ser Val Glu Ser Ile Phe Thr Asp Ser Ala Asn Phe Pro Val Asn
485 490 495
Leu Leu Pro Arg His Val Asn Asp Ser Arg Thr Pro Glu Gln Tyr Cys
500 505 510
Arg Asp Thr Val Met Thr Ile Trp His Tyr His Gly Gly Cys Gln Val
515 520 525
Gly Ala Val Val Asp Asp Asp Tyr Arg Val Phe Gly Val Gln Arg Leu
530 535 540
Arg Val Ile Asp Ser Ser Thr Phe Lys Tyr Ser Pro Gly Thr Asn Pro
545 550 555 560
Gln Ala Thr Val Met Met Leu Gly Arg Tyr Met Gly Val Lys Ile Gln
565 570 575
Ala Gln Arg Trp Arg Lys
580
<210> 10
<211> 2870
<212> DNA
<213> 拟南芥（Arabidopsis thaliana）
<400> 10
accataggtc accaaagact ttataaataa cccatacatt atcatataca tataggcata 60
caaagtgaga gaactctact ctagattgtg ctaaactcaa tttgtattaa tgatggatag 120
attttggtca tggagattgt ttgttgctct ctctcttttt ctccattctc caatttgttc 180
ttctgacaaa ggtaatattc atgaactaca actagattct taagtattca tattagtgcg 240
aagttatagt tttacccttt gatcgcagct ccgaactact ccttcatgcg ggacgcgaca 300
ggaagtccta caacgtcgta ctacgactat atcatcatcg gtggtgggac tgccgggtgc 360
cctctagccg caacgctgtc tcaaaacgcc agcgttttgc tgctcgaacg cggtgactca 420
ccgtacaata accccaacat cacgaggctc tcggctttcg gagccgctct ctctgacctg 480
tctgagtcct caccatctca gcgttttgta tcagaagatg gtgtcattaa tgcacgtgct 540
cgggttctcg gtggcggaag cgctctcaac gccggcttct atacacgtgc gggcactaaa 600
tacgttaggt tagtgcatat gtatacagta acactaatac gcatgcatac aatttacatg 660
gaaattaata tattatcgag tcctcattct tactatggtt ggtgagacag taataattgt 720
agacattatt atatgatcaa tcaactaagg tctaaggata acattaaata tatgtataac 780
tatatattat cacacacact taataaaaga gaaaacgatt tttgccgtaa aaataaaaat 840
aaaagagaaa acgatcttat tatacttata tgtagaatag tcatttaatc tgttagggtc 900
gttacatagt acaacataca agatatttct tattgttgat gtttttggtg acttggtgtg 960
tccacgttaa aataaataat ttatacgaat cgaaatgttg ttaggaacat gggttgggac 1020
ggagcgctag cgaacgagtc gtaccagtgg gttgaagcta aggtggcgtt tcagcctccg 1080
atggggcggt ggcaaacggc cgtgagagac ggcttattgg aggctgggat tgtccctaat 1140
aatggtttca cctatgatca tatcaatggc accaaatttg gcggtactat ttttgaccgc 1200
aacggcaata gacacaccgc cgccgatttg ttagagtatg ccgatcctaa gggtattacc 1260
gtccttttgc atgccaccgt ccaccggatc ttgtttcgta ctcgaggtac ttaatgtagc 1320
attgcagaat ataatcatcc aatactcata acgtagtaaa actaaaatat attcaatcat 1380
gctggttaaa caaaaatgtt ggtcctgttt tcacatggtt aaattttttt catcttaata 1440
tggattgaac ctgatatttt gcaaaatcaa tgtctacctt tttttcacta tacatttcat 1500
gtaaattctt gcttaccaca ctttattcta attcattttg ttgccactaa atcagattat 1560
taactaacta tcaaattacc aatataatta ttcacgttta aggtacgacc aagccaatag 1620
ccaacggagt tgtgtaccga gaccggaccg gtcaggctca tagagcttac ctaaaggaag 1680
gcgccttgag tgagatcatc ctatcggccg gaaccctagg gagcccacaa cttcttatgc 1740
taagtggtgt tggcccatcg gctcaattac aggcccaaaa catcacggtg gtgatggacc 1800
agcctcatgt gggtcaaggc atgtatgaca accctatgaa tgccgtgttc gttccttctc 1860
cagtccccgt tgaggtctca ctcattgagg ttgttgggat taccggggaa ggaacatatg 1920
tcgaagccgc cggtggtgaa aattttggcg gaggtggtgg tggttctagt ggatcgtcct 1980
ccactagaga ctactatgca atgttttcac caagggcaac attattagag tcaaattcaa 2040
tgaccaaatt atcatcagcc caaccttttc aaggaggctt ccttttagag aaagtaatgg 2100
gcccattatc aacgggtcat ttagagctca agacccgaaa cccaaaagat aacccgattg 2160
tgactttcaa ctatttccaa catcctgacg acctaaaacg ttgtgttcga ggaatccaaa 2220
ccatagagag agtcgtgcaa tctaaagctt tttcgaggta taagtacgca gatgtgtcat 2280
ttgagtattt acttaacctc acggcgagta ctcctgtcaa tctaaggccg cctcgcagtg 2340
gtcctggagc ctcgttgcct ccatccgcag aggaattttg ccaacataca gttacaacca 2400
tttggcatta ccatggagga tgcgttgtgg gcagagtggt cgatggggat tataaagtta 2460
ttggtatcga ccggcttaga gtcattgata tgtcgaccgt tggttattgt cccgggacaa 2520
atcctcaagc cacggttatg atgcttggca ggtaaaatca atcatatata ttaattatgt 2580
tgatgttttt tgtttttttt tactaaaggc taatgatttt ggcaggtata tgggtgtgaa 2640
gatcttgaga gagagactca ccaagaagta gggttttgaa tcggatcagg ggttttggga 2700
aaacgttata ttaaaaatga aatgaatcaa gatattacta atcgatgtta ttaatagctg 2760
aatatgtatt gttcttggta atttctgttt ggtacttatt attagaccaa actgagatgt 2820
atacggaaat atatgtatag actcattccc aattttcaaa actctgttcc 2870
<210> 11
<211> 572
<212> PRT
<213> 拟南芥（Arabidopsis thaliana）
<400> 11
Met Met Asp Arg Phe Trp Ser Trp Arg Leu Phe Val Ala Leu Ser Leu
1 5 10 15
Phe Leu His Ser Pro Ile Cys Ser Ser Asp Lys Ala Pro Asn Tyr Ser
20 25 30
Phe Met Arg Asp Ala Thr Gly Ser Pro Thr Thr Ser Tyr Tyr Asp Tyr
35 40 45
Ile Ile Ile Gly Gly Gly Thr Ala Gly Cys Pro Leu Ala Ala Thr Leu
50 55 60
Ser Gln Asn Ala Ser Val Leu Leu Leu Glu Arg Gly Asp Ser Pro Tyr
65 70 75 80
Asn Asn Pro Asn Ile Thr Arg Leu Ser Ala Phe Gly Ala Ala Leu Ser
85 90 95
Asp Leu Ser Glu Ser Ser Pro Ser Gln Arg Phe Val Ser Glu Asp Gly
100 105 110
Val Ile Asn Ala Arg Ala Arg Val Leu Gly Gly Gly Ser Ala Leu Asn
115 120 125
Ala Gly Phe Tyr Thr Arg Ala Gly Thr Lys Tyr Val Arg Asn Met Gly
130 135 140
Trp Asp Gly Ala Leu Ala Asn Glu Ser Tyr Gln Trp Val Glu Ala Lys
145 150 155 160
Val Ala Phe Gln Pro Pro Met Gly Arg Trp Gln Thr Ala Val Arg Asp
165 170 175
Gly Leu Leu Glu Ala Gly Ile Val Pro Asn Asn Gly Phe Thr Tyr Asp
180 185 190
His Ile Asn Gly Thr Lys Phe Gly Gly Thr Ile Phe Asp Arg Asn Gly
195 200 205
Asn Arg His Thr Ala Ala Asp Leu Leu Glu Tyr Ala Asp Pro Lys Gly
210 215 220
Ile Thr Val Leu Leu His Ala Thr Val His Arg Ile Leu Phe Arg Thr
225 230 235 240
Arg Gly Thr Thr Lys Pro Ile Ala Asn Gly Val Val Tyr Arg Asp Arg
245 250 255
Thr Gly Gln Ala His Arg Ala Tyr Leu Lys Glu Gly Ala Leu Ser Glu
260 265 270
Ile Ile Leu Ser Ala Gly Thr Leu Gly Ser Pro Gln Leu Leu Met Leu
275 280 285
Ser Gly Val Gly Pro Ser Ala Gln Leu Gln Ala Gln Asn Ile Thr Val
290 295 300
Val Met Asp Gln Pro His Val Gly Gln Gly Met Tyr Asp Asn Pro Met
305 310 315 320
Asn Ala Val Phe Val Pro Ser Pro Val Pro Val Glu Val Ser Leu Ile
325 330 335
Glu Val Val Gly Ile Thr Gly Glu Gly Thr Tyr Val Glu Ala Ala Gly
340 345 350
Gly Glu Asn Phe Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ser Ser Gly Ser Ser Ser
355 360 365
Thr Arg Asp Tyr Tyr Ala Met Phe Ser Pro Arg Ala Thr Leu Leu Glu
370 375 380
Ser Asn Ser Met Thr Lys Leu Ser Ser Ala Gln Pro Phe Gln Gly Gly
385 390 395 400
Phe Leu Leu Glu Lys Val Met Gly Pro Leu Ser Thr Gly His Leu Glu
405 410 415
Leu Lys Thr Arg Asn Pro Lys Asp Asn Pro Ile Val Thr Phe Asn Tyr
420 425 430
Phe Gln His Pro Asp Asp Leu Lys Arg Cys Val Arg Gly Ile Gln Thr
435 440 445
Ile Glu Arg Val Val Gln Ser Lys Ala Phe Ser Arg Tyr Lys Tyr Ala
450 455 460
Asp Val Ser Phe Glu Tyr Leu Leu Asn Leu Thr Ala Ser Thr Pro Val
465 470 475 480
Asn Leu Arg Pro Pro Arg Ser Gly Pro Gly Ala Ser Leu Pro Pro Ser
485 490 495
Ala Glu Glu Phe Cys Gln His Thr Val Thr Thr Ile Trp His Tyr His
500 505 510
Gly Gly Cys Val Val Gly Arg Val Val Asp Gly Asp Tyr Lys Val Ile
515 520 525
Gly Ile Asp Arg Leu Arg Val Ile Asp Met Ser Thr Val Gly Tyr Cys
530 535 540
Pro Gly Thr Asn Pro Gln Ala Thr Val Met Met Leu Gly Arg Tyr Met
545 550 555 560
Gly Val Lys Ile Leu Arg Glu Arg Leu Thr Lys Lys
565 570
<210> 12
<211> 678
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 12
atggcctcct ccgagaacgt gatcaccgag ttcatgcgct tcaaggtgcg catggagggc 60
accgtgaacg gccacgagtt cgagatcgag ggcgagggcg agggccgccc ctacgagggc 120
cacaacaccg tgaagctgaa ggtgaccaag ggcggccccc tgcccttcgc ctgggacatc 180
ctgtcccccc agttccagta cggctccaag gtgtacgtga agcaccccgc cgacatcccc 240
gactacaaga agctgtcctt ccccgagggc ttcaagtggg agcgcgtgat gaacttcgag 300
gacggcggcg tggccaccgt gacccaggac tcctccctgc aggacggctg cttcatctac 360
aaggtgaagt tcatcggcgt gaacttcccc tccgacggcc ccgtgatgca gaagaagacc 420
atgggctggg aggcctccac cgagcgcctg tacccccgcg acggcgtgct gaagggcgag 480
acccacaagg ccctgaagct gaaggacggc ggccactacc tggtggagtt caagtccatc 540
tacatggcca agaagcccgt gcagctgccc ggctactact acgtggacgc caagctggac 600
atcacctccc acaacgagga ctacaccatc gtggagcagt acgagcgcac cgagggccgc 660
caccacctgt tcctgtag 678
<210> 13
<211> 812
<212> DNA
<213> 大麦(hordeum vulgare)
<400> 13
aaccgtctct tcgtgagaat aaccgtggcc taaaaataag ccgatgagga taaataaaat 60
gtggtggtac agtacttcaa gaggtttact catcaagagg atgcttttcc gatgagctct 120
agtagtacat cggacctcac atacctccat tgtggtgaaa tattttgtgc tcatttagtg 180
atgggtaaat tttgtttatg tcactctagg ttttgacatt tcagttttgc cactcttagg 240
ttttgacaaa taatttccat tccgcggcaa aagcaaaaca attttatttt acttttacca 300
ctcttagctt tcacaatgta tcacaaatgc cactctagaa attctgttta tgccacagaa 360
tgtgaaaaaa aacactcact tatttgaagc caaggtgttc atggcatgga aatgtgacat 420
aaagtaacgt tcgtgtataa gaaaaaattg tactcctcgt aacaagagac ggaaacatca 480
tgagacaatc gcgtttggaa ggctttgcat cacctttgga tgatgcgcat gaatggagtc 540
gtctgcttgc tagccttcgc ctaccgccca ctgagtccgg gcggcaacta ccatcggcga 600
acgacccagc tgacctctac cgaccggact tgaatgcgct accttcgtca gcgacgatgg 660
ccgcgtacgc tggcgacgtg cccccgcatg catggcggca catggcgagc tcagaccgtg 720
cgtggctggc tacaaatacg taccccgtga gtgccctagc tagaaactta cacctgcaac 780
tgcgagagcg agcgtgtgag tgtagccgag ta 812
<210> 14
<211> 349
<212> DNA
<213> 马铃薯（Solanum tuberosum）
<400> 14
ttcgaacgcg taggtaccac atggttaacc tagacttgtc catcttctgg attggccaac 60
ttaattaatg tatgaaataa aaggatgcac acatagtgac atgctaatca ctataatgtg 120
ggcatcaaag ttgtgtgtta tgtgtaatta ctagttatct gaataaaaga gaaagagatc 180
atccatattt cttatcctaa atgaatgtca cgtgtcttta taattctttg atgaaccaga 240
tgcatttcat taaccaaatc catatacata taaatattaa tcatatataa ttaatatcaa 300
ttgggttagc aaaacaaatc tagtctaggt gtgttttgcg aatgcggcc 349
<210> 15
<211> 1922
<212> DNA
<213>
玉米（Zea mays）
<400> 15
atggcgcctg ggcttgcgaa ctgggtcgcg ctggttctga ccgtcctcct tggtctctcg 60
tgcctcgtcg tcgcgctctc ggaggatggt ttgtgccgga cttgtcacgc gctctttggt 120
atttctgcag ttctgcaaac gtgtgaattg gcatggacat gtgcagaaac actggacaag 180
ctgcggttcg tgcgccacgc acaggacgcg cccctggtgt cgcagtacaa ctacatcgtg 240
atcggcggcg gcacggcggg gtgcccgctg gcggcgacgc tgtcggagca ctcgcgcgtg 300
ctgctcctgg agcgcggggg cctcccgtcc cgcaacatgt ccgaccagca gcacttcacg 360
gacgcgctgg cggacacgtc cccggcgtcg cccgcgcagc ggttcgtgtc cgaggacggc 420
gtggtgaacg cgcgggcccg ggtgctgggc gggggcagct gcctcaacgc cgggttctac 480
acgcgggcca gcaccgacta cgtgcgcgcc gccggctggg acgcccgcct cgtcaactcg 540
tcctaccgct gggtggagcg cgcgctcgtg ttccgccccg ccgtgccccc gtggcaggcc 600
gcgctccgcg acgcgctgct cgaggccggc gtcacgcccg acaacggctt caccttcgac 660
cacgtcacgg gcaccaagat cgggggcacc atcttcgaca gcagcggcca gcgccacacc 720
gccgccgact tcctccgcca cgcgcgcccc agggggctca ccgtgttcct ctacgctacc 780
gtctccagga tcctcttcag acagcaaggt acgtacgtgc gtgcacggct tccgcatttt 840
tttttcgaca gtgcgggctg gcacgatcgc gctctgaagc ggagaatcgt gcgctgtcga 900
cagagggcgt gccgtacccg gtggcgtacg gtgtggtgtt cacggacccg ctcggggtgc 960
agcaccgggt gtacctccgg gacggcgcca agaacgaggt gatcctgtcg gcggggacgc 1020
tggggagccc gcagctgctg atgctgagcg gcgtcggccc gcaggcgcac ctggaggcgc 1080
acggcgtcca ggtgctggtg gaccagccca tggtcgggca gggcgtggct gacaacccga 1140
tgaactcggt gttcatcccg tcgccggtgc ccgtcacgct gtcgctcgtg caggtcgtcg 1200
ggatcacccg gtccggcagc ttcatcgagg gcgtgagcgg ctccgagttc ggcatccccg 1260
tctccgaggg cgcccgtcgc ctggctcgca gcttcggcct cttctctccg cagacggggc 1320
agctgggcac gttgccgccg aagcagagaa ccccagaggc cctggagcgc gcggcggagg 1380
cgatgcggcg gctggacagg cgggcgttcc ggggcggatt catcctggag aagatcctgg 1440
gccccgtctc ctcgggccac gtcgagctgc ggtccgccga cccgcgcgcg aacccggcgg 1500
tgacgttcaa ctacttccag gagtcggagg acctgcagcg gtgcgtgcgc ggcatccaga 1560
cgatcgagcg cgtgatccag tcccgggcct tcgccaactt cacctacgcc aacgcttcca 1620
cggagtccat cttcaccgac tccgccaact tccccgtcaa cctcctgccg cggcacgtca 1680
acgactcccg gacgcccgag cagtactgca gggacaccgt catgaccatc tggcattacc 1740
acggcgggtg ccaggtcggc gccgtcgtgg acgacgatta ccgggtgttc ggcgtgcagc 1800
gactgagggt gatcgacagc tccacgttca agtactcccc cggcaccaac ccgcaggcca 1860
ccgtcatgat gctcggaagg tatatgggtg tgaaaattca ggccgagaga tggaggaaat 1920
ga 1922
<210> 16
<211> 388
<212> DNA
<213>
玉米（Zea mays）
<400> 16
tcgagatttc aagtttcagc atggtctagg gactaggcct ctagctgtga taatgaatat 60
caatcaacac atctgtaact gggtaactgc tctagcctct agagtaggtt ttatttttct 120
ctagatattt ttttaatctc ctctagacat actcctagct tccgcatgtt gttggttcca 180
tttcaccaca cccctagatg cattgttcag catttcgcgg gaataatgag aattatgctg 240
aaaaggcatg atcgctcctc ctgcctattc tacagaaaat taaataaaga accgccattt 300
catcaaataa accaaaggcc gtgttctgtg gattggaagg gatcgaggaa gattaaatcg 360
tttctattta attttccctt aattttaa 388
<210> 17
<211> 1488
<212> DNA
<213> 玉米（Zea mays）
<400> 17
atggcggcga caatggcagt gacgacgatg gtgacgagga gcaaggagag ctggtcgtca 60
ttgcaggtcc cggcggtggc attcccttgg aagccacgag gtggcaagac cggcggcctc 120
gagttccctc gccgggcgat gttcgccagc gtcggcctca acgtgtgccc gggcgtcccg 180
gcggggcgcg acccgcggga gcccgatccc aaggtcgtcc gggcggcctg cggcctggtc 240
caggcacaag tcctcttcca ggggtttaac tgggagtcgt gcaagcagca gggaggctgg 300
tacaacaggc tcaaggccca ggtcgacgac atcgccaagg ccggcgtcac gcacgtctgg 360
ctgcctccac cctcgcactc cgtctcgcca caaggctaca tgccaggccg cctatacgac 420
ctggacgcgt ccaagtacgg cacggcggcg gagctcaagt ccctgatagc ggcgttccac 480
ggcaggggcg tgcagtgcgt ggcggacatc gtcatcaacc accggtgcgc ggaaaagaag 540
gacgcgcgcg gcgtgtactg catcttcgag ggcgggactc ccgacgaccg cctggactgg 600
ggccccggga tgatctgcag cgacgacacg cagtactcgg acgggacggg gcaccgcgac 660
acgggcgagg ggttcgcggc ggcgcccgac atcgaccacc tcaacccgcg cgtgcagcgg 720
gagctctccg cctggctcaa ctggctcagg tccgacgccg tggggttcga cggctggcgc 780
ctcgacttcg ccaagggcta ctcgccggcc gtcgccagaa tgtacgtgga gagcacgggg 840
ccgccgagct tcgtcgtcgc ggagatatgg aactcgctga gctacagcgg ggacggcaag 900
ccggcgccca accaggacca gtgccggcag gagctgctgg actggacgcg ggccgtcggc 960
gggcccgcca tggcgttcga cttccccacc aagggcctgc tgcaggcggg cgtgcagggg 1020
gagctgtggc ggctgcgcga cagctccggc aacgcggccg gcctgatcgg gtgggcgccc 1080
gagaaggccg tcaccttcgt cgacaaccat gacaccgggt cgacgcagaa gctctggccg 1140
ttcccatccg acaaggtcat gcagggctac gcctacatcc tcacccatcc aggagtcccc 1200
tgcattttct acgaccacat gttcgactgg aacctgaagc aggagatatc cacgctgtct 1260
gccatcaggg cgcggaacgg catccgcgcc gggagcaagc tgcggatcct cgtggcggac 1320
gcggacgcgt acgtggccgt cgtcgacgag aaggtcatgg tgaagatcgg gacaaggtac 1380
ggcgtgagca gcgtggtccc gtcggatttc cacccggcgg cgcacggcaa ggactactgc 1440
gtctgggaga aagcgagcct ccgcgtcccg gcggggcgcc acctctag 1488
<210> 18
<211> 2737
<212> DNA
<213> 玉米（Zea mays）
<400> 18
tgcaccggac actgtctggt ggcataccag acagtccggt gtgccagatc agggcaccct 60
tcggttcctt tgctcctttg cttttgaacc ctaactttga tcgtttattg gtttgtgttg 120
aacctttatg cacctgtgga atatataatc tagaacaaac tagttagtcc aatcatttgt 180
gttgggcatt caaccaccaa aattatttat aggaaaaggt taaaccttat ttccctttca 240
atctccccct ttttggtgat tgatgccaac acaaaccaaa gaaaatatat aagtgcagaa 300
ttgaactagt ttgcataagg taagtgcata ggttacttag aattaaatca atttatactt 360
ttacttgata tgcatggttg ctttctttta ttttaacatt ttggaccaca tttgcaccac 420
ttgttttgtt ttttgcaaat ctttttggaa attctttttc aaagtctttt gcaaatagtc 480
aaaggtatat gaataagatt gtaagaagca ttttcaagat ttgaaatttc tccccctgtt 540
tcaaatgctt ttcctttgac taaacaaaac tccccctgaa taaaattctc ctcttagctt 600
tcaagagggt tttaaataga tatcaattgg aaatatattt agatgctaat tttgaaaata 660
taccaattga aaatcaacat accaatttga aattaaacat accaatttaa aaaatttcaa 720
aaagtggtgg tgcggtcctt ttgctttggg cttaatattt ctcccccttt ggcattaatc 780
gccaaaaacg gagactttgt gagccattta tactttctcc ccattggtaa atgaaatatg 840
agtgaaagat tataccaaat ttggacagtg atgcggagtg acggcgaagg ataaacgata 900
ccgttagagt ggagtggaag ccttgtcttc gccgaagact ccatttccct ttcaatctac 960
gacttagcat agaaatacac ttgaaaacac attagtcgta gccacgaaag agatatgatc 1020
aaaggtatac aaatgagcta tgtgtgtaat gtttcaatca aagtttcgag aatcaagaat 1080
atttagctca ttcctaagtt tgctaaaggt tttatcatct aatggtttgg taaagatatc 1140
gactaattgt tctttggtgc taacataagc aatctcgata tcaccccttt gttggtgatc 1200
cctcaaaaag tgataccgaa tgtctatgtg cttagtgcgg ctgtgttcaa cgggattatc 1260
cgccatgcag atagcactct cattgtcaca taggagaggg actttgctca atttgtagcc 1320
atagtcccta aggttttgcc tcatccaaag taattgcaca caacaatgtc ctgcggcaat 1380
atacttggct tcggcggtag aaagagctat tgagttttgt ttctttgaag tccaagacac 1440
cagggatctc cctagaaact gacaagtccc tgatgtgctc ttcctatcaa ttttacaccc 1500
tgcccaatcg gcatctgaat atcctattaa atcaaaggtg gatcccttgg ggtaccaaag 1560
accaaattta ggagtgtaaa ctaaatatct catgattctt ttcacggccc taaggtgaac 1620
ttccttagga tcggcttgga atcttgcaca catgcatata gaaagcatac tatctggtcg 1680
agatgcacat aaatagagta aagatcctat catcgaccgg tatacctttt ggtctacgga 1740
tttacctccc gtgtcgaggt cgagatgccc attagttccc atgggtgtcc tgatgggctt 1800
ggcatccttc attccaaact tgttgagtat gtcttgaatg tactttgttt ggctgatgaa 1860
ggtgccatct tggagttgct tgacttgaaa tcctagaaaa tatttcaact tccccatcat 1920
agacatctcg aatttcggaa tcatgatcct actaaactct tcacaagtag atttgttagt 1980
agacccaaat ataatatcat caacataaat ttggcataca aacaaaactt ttgaaatggt 2040
tttagtaaag agagtaggat cggctttact gactctgaag ccattagtga taagaaaatc 2100
tcttaggcat tcataccatg ctgttggggc ttgcttgagc ccataaagcg cctttgagag 2160
tttataaaca tggttagggt actcactatc ttcaaagccg agaggttgct caacatagac 2220
ctattcaccc catttgatca cttttttggt ccttcaggat ctaatagtta tgtataattt 2280
agagtctctt gtttaatggc cagatatttc taattaatct aagaatttat gatatttttt 2340
aattttttat catgtctgat gagaattaac ataaaggctc aattgggtcc tgaattaata 2400
atagagtgaa aattaatcca gaggctctat tagaaccttc aattagtaat accaagatat 2460
atataagata gtagagtata gtttaaatgt tggcattgtt cattctttct tttgttattt 2520
aatttatgct ttccacggtg gttagtggtt acttctgaag ggtccaaata atgcatgaag 2580
agtttgagga caagaagtct gccctaaaaa tagcgatgca aaggcatggt gtccaagcca 2640
tacatatagc gcactaattt tatcagcaga acaatggtat ttataggtcc tagtgcccag 2700
gcaacaagag acacgaataa agcatcgatc acgacac 2737
<210> 19
<211> 225
<212> DNA
<213> 玉米（Zea mays）
<400> 19
atggcggcga caatggcagt gacgacgatg gtgacgagga gcaaggagag ctggtcgtca 60
ttgcaggtcc cggcggtggc attcccttgg aagccacgag gtggcaagac cggcggcctc 120
gagttccctc gccgggcgat gttcgccagc gtcggcctca acgtgtgccc gggcgtcccg 180
gcggggcgcg acccgcggga gcccgatccc aaggtcgtcc gggcg 225
<210> 20
<211> 348
<212> DNA
<213> 玉米（Zea mays）
<400> 20
gatctgacaa agcagcatta gtccgttgat cggtggaaga ccactcgtca gtgttgagtt 60
gaatgtttga tcaataaaat acggcaatgc tgtaagggtt gttttttatg ccattgataa 120
tacactgtac tgttcagttg ttgaactcta tttcttagcc atgccaagtg cttttcttat 180
tttgaataac attacagcaa aaagttgaaa gacaaaaaaa aaaacccccg aacagagtgc 240
tttgggtccc aagctacttt agactgtgtt cggcgttccc cctaaatttc tccccctata 300
tctcactcac ttgtcacatc agcgttctct ttcccctata tctccacg 348

Claims (9)

1.一种基因，具有调控植物育性的功能，其特征在于，所述基因的DNA序列如SEQ IDNO：1或SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:15所示。
2.权利要求1所述的基因，其特征在于所述DNA编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。
3.一种表达盒，其特征在于所述表达盒包含权利要求1所述的基因。
4.一种表达载体，其特征在于所述表达载体包含权利要求3所述的表达盒。
5.一种工程菌，其特征在于所述工程菌含有权利要求4所述的表达载体。
6.一种育性调控基因在植物育性调控中的应用，其特征在于，所述育性调控基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO:2所示。
7.权利要求6所述的应用，其中所述的核苷酸编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。
8.权利要求6或7所述的应用，其特征在于，通过突变育性调控基因SEQ ID NO:1获得雄性不育材料，其中所述突变后育性调控基因的核苷酸序列选自下列组的序列之一：
a) 在SEQ ID NO：1的第一个外显子chr1: 80,963,850处存在Mutator3转座子序列插入而形成的序列；
b) 在SEQ ID NO：1的第二个外显子chr1: 80,964,768处存在Mutator1转座子序列插入而形成的序列。
9.权利要求6或7所述的应用，其特征在于用权利要求1所述的基因恢复由相应的SEQID NO:1所示基因突变所导致的雄性不育，使雄性不育突变体恢复成可育，其中所述突变后的核苷酸序列选自下列组的序列之一：
a) 在SEQ ID NO：1的第一个外显子chr1: 80,963,850处存在Mutator3转座子序列插入而形成的序列；
b) 在SEQ ID NO：1的第二个外显子chr1: 80,964,768处存在Mutator1转座子序列插入而形成的序列。
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Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105602952B (zh) * 2012-11-09 2019-11-19 深圳市作物分子设计育种研究院 一种育性基因及其应用
CN105695484B (zh) * 2016-04-26 2019-02-19 中国农业科学院油料作物研究所 甘蓝型油菜温敏型显性细胞核不育基因BnaAtsMs
CN105884874A (zh) * 2016-05-16 2016-08-24 中国科学院遗传与发育生物学研究所 一种与植物雄性育性相关的蛋白及其编码基因与应用
CN105907865B (zh) * 2016-05-16 2019-07-26 中国科学院遗传与发育生物学研究所 一种鉴定玉米雄性育性基因功能的方法
EP3623475A4 (en) * 2017-05-09 2021-02-24 Frontier Laboratories Of Systems Crop Design Co., Ltd. TAMS7 GENE ASSOCIATED WITH WHEAT FERTILITY AND ASSOCIATED APPLICATION PROCESS
CN108949814A (zh) * 2018-07-04 2018-12-07 青岛袁策集团有限公司 一种基于tdr基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108925422A (zh) * 2018-07-27 2018-12-04 西南大学 提高油菜种植纯度的细胞质雄性不育杂交品种配制方法
CN112501178B (zh) * 2020-10-16 2022-10-14 上海师范大学 一种水稻温敏不育突变体tms18及其应用
CN113151540B (zh) * 2021-03-15 2023-08-11 淮阴师范学院 一种水稻核雄性不育基因OsNP1基因型的特异性分子标记及其应用
CN115466319A (zh) * 2021-05-28 2022-12-13 中国农业科学院作物科学研究所 高粱SbMS1蛋白及其编码基因与应用
CN114410653B (zh) * 2022-01-27 2023-06-16 吉林省农业科学院 大豆不育基因突变体、构建方法及在光敏育性调控中的应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6239335B1 (en) * 1999-06-08 2001-05-29 Optimum Quality Grains, L.L.C. Synthetic corn hybrid P89
CN1514017A (zh) * 2003-03-12 2004-07-21 华中农业大学 鉴别玉米细胞质雄性不育材料胞质类型的方法
CN1548539A (zh) * 2003-05-06 2004-11-24 中国科学院植物研究所 获得雄性不育小麦的方法及其专用质粒与功能核苷酸片段

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070169227A1 (en) * 2003-12-16 2007-07-19 Pioneer Hi-Bred International Inc. Dominant Gene Suppression Transgenes and Methods of Using Same
EP2333085A1 (en) * 2003-12-16 2011-06-15 Pioneer Hi-Bred International Inc. Dominant gene suppression transgenes and methods of using same
US7750207B2 (en) * 2004-09-01 2010-07-06 Monsanto Technology Llc Zea mays ribulose bisphosphate carboxylase activase promoter
US7491813B2 (en) * 2005-12-07 2009-02-17 Monsanto Technology Llc Promoter polynucleotides identified from Zea mays for use in plants
CN101532015B (zh) * 2009-03-19 2011-01-12 中国农业大学 一种花药绒毡层和花粉特异性高效启动子及其应用
CN102250947B (zh) * 2011-07-11 2013-12-11 中国农业科学院油料作物研究所 一种植物不育系和恢复系的制备方法和应用
CN102732556B (zh) * 2012-06-29 2013-09-25 上海交通大学 水稻雄性不育株系创制的方法及其用途

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6239335B1 (en) * 1999-06-08 2001-05-29 Optimum Quality Grains, L.L.C. Synthetic corn hybrid P89
CN1514017A (zh) * 2003-03-12 2004-07-21 华中农业大学 鉴别玉米细胞质雄性不育材料胞质类型的方法
CN1548539A (zh) * 2003-05-06 2004-11-24 中国科学院植物研究所 获得雄性不育小麦的方法及其专用质粒与功能核苷酸片段

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BT085971.2;Soderlund,C. et al.;《GenBank》;20120615;第1-3页

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