CN105477636B - 使用阿维菌素及其衍生物治疗代谢疾病的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及调节法尼醇X受体(FXR)的、用于治疗代谢疾病诸如例如非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的化合物的新用途，所述化合物具体为伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁。

Description

使用阿维菌素及其衍生物治疗代谢疾病的方法

技术背景

核受体是一种配体激活的转录因子。例如，法尼醇X受体(Farnesoid X receptor，FXR)是已知的48种人类核受体中的一员。诸如FXR的核受体在调节新陈代谢、炎症、其他相关的生理和细胞功能中起到重要作用，并且从而能够影响癌症和其他疾病。FXR配体结合域能够组合各种辅激活子聚集(或辅抑制子)来调节靶基因。在体内，胆汁酸是FXR的内源性配体，并且能够在肝脏中维持FXR的激活。FXR涉及许多代谢相关的信号通路，并且被发现能够调节肝脏的再生。

例如，胆汁酸鹅去氧胆酸(也称作鹅去氧胆酸、鹅胆酸、3α,7α-二羟基-5β-胆烷-24-酸和CDCA)能够结合并激活FXR。CDCA也用于治疗胆结石。CDCA能够结合回肠胆汁酸结合蛋白(I-BABP)，胆汁酸转运蛋白和其他蛋白。因为核受体在调节细胞生理中的重要作用，大约13％的现有药物是基于靶向核受体的。

阿维菌素(avermectin)是一系列具有驱虫和杀虫性质的16员大环内酯衍生物。它们是天然产生的化合物，并且作为阿维链霉菌的发酵产物生成。衍生自阿维菌素的化合物包括伊维菌素(ivermectin)、司拉克丁(selamectin)、多拉克丁(doramectin)和阿巴克丁(abamectin)。已有报道表明伊维菌素在无脊椎动物中靶向γ-氨基丁酸(GABA)受体、谷氨酸介导的氯离子通道受体(GluClR)和其他受体。类似地，米尔贝霉素(milbemycin)是一组化学上与阿维菌素有关的大环内酯。它们最初从吸水链霉菌中分离出来。阿维菌素和米尔贝霉素两者都用作抗蠕虫、虱子和跳蚤的抗寄生虫药。

因此，需要治疗FXR介导的疾病的组合物、化合物和系统。

发明概述

本发明涉及与法尼醇X受体(FXR)结合、用于治疗代谢疾病，具体地，用于治疗非酒精性脂肪肝病(NALFD)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的肝病的化合物，诸如阿维菌素类似物，具体为伊维菌素、多拉克丁和阿巴克丁。

在一些实施例中，代谢疾病选自高血糖、胰岛素抗性、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、糖尿病、肥胖症、代谢综合征、代谢失调和相关疾病、法尼醇X受体介导的疾病、肝病(肝脏疾病)、脂肪肝(肝脏脂肪变性)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、脂肪性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝硬化、纤维化、慢性和急性肝衰竭、胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、胆汁阻塞、胆结石、动脉粥样硬化、炎症、癌症及其组合。

在一些实施例中，用于本文中描述的方法的化合物可以配制成药物组合物。本发明的药物组合物可以包括本文中描述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。这样的组合物可以有选择地包括附加的治疗剂。

在一些实施例中，本发明涉及一种治疗患者需要治疗的代谢疾病的方法，该方法包括向所述患者提供治疗上有效剂量的激活法尼醇X受体(FXR)的化合物或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，化合物包括FXR的激动剂或部分激动剂。在本发明的方法中，所述化合物包括阿维菌素类似物。在一些实施例中，阿维菌素类似物包括伊维菌素、多拉克丁或阿巴克丁。在一些实施例中，本发明涉及一种药物组合物，该药物组合物包括有效剂量的本文中描述的化合物(例如，FXR的激动剂或部分激动剂)和药学上可接受的载体。

在一些实施例中，本发明涉及一种在细胞中调控核受体的方法，该方法包括给药包括阿维菌素类似物的组合物，其中所述阿维菌素类似物与核受体的配体结合域结合。

在一些实施例中，核受体包括法尼醇X受体(FXR)。在一些实施例中，FXR的调控影响个体的代谢疾病。

附图说明

图1A-1F示出本发明的化合物的化学结构。

图2A-2G示出喂食高脂肪饲料并且连续14天每天注射一次GW4064(30mg/kg)或阿维菌素类似物(1.3mg/kg)的小鼠(KK-Ay小鼠)的肝脏形态。

图3A-3G示出图2A-2G中示出的肝脏切片的H&E染色。

图4A-4G示出图2A-2G中示出的肝脏切片的油红O染色。

图5A-5G示出喂食高脂肪饲料并且每天注射一次GW4064(30mg/kg)或阿维菌素类似物(1.3mg/kg)的小鼠(KK-Ay小鼠)的数据的曲线图。(A)进食量。(B)体重。(C)肝脏甘油三酯。(D)血清甘油三酯。(E)肝脏/体重比率。(F)血清胆固醇。(G)通过实时PCR的与脂质代谢有关的基因对应的mRNA水平。数值为平均值±SEM。与溶媒组(vehicle)相比，*p<0.05，**p<0.01，并且***p<0.001。

图6A-6D示出本发明的化合物的数据的曲线图。图6A示出通过AlphaScreen检测的各种辅激活子结合基序响应0.5μM阿维菌素类似物或GW4064而与FXR结合。图6B示出通过AlphaScreen检测的本发明的化合物在诱导FXR以聚集SRC1-2辅调控子结合基序中的剂量响应。图6C示出在报告因子检测中,化合物诱导FXR的转录活性的能力。图6D示出在报告因子检测中,化合物在诱导FXR的转录活性中的剂量响应。

图7A-7H示出喂食高脂肪饲料并且连续14天每天注射一次空白溶媒或阿维菌素类似物(1.3mg/kg)的野生型C57BL/6J小鼠(WT)或FXR基因敲除小鼠(KO)的肝脏切片的油红O染色，每组n＝6。

图8A-8D示出图7A-7H中描述的小鼠的数据。图8A示出这些小鼠体内的肝脏甘油三酯水平；图8B示出血清甘油三酯水平；图8C示出血清胆固醇水平；图8D示出进食量。数值为平均值±SEM。与溶媒组相比，*p<0.05，并且***p<0.001。

图9A-9B示出通过AlphaScreen检测阿维菌素类似物诱导FXR以聚集辅抑制子NCoR的能力(图9A)，以及辅抑制子NCoR-2基序响应阿维菌素类似物而向FXR的聚集。数值为三次独立实验的平均值±SEM。

图10示出伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁的一般结构。

图11A-11C示出FXR与伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁结合后的带状结构的3D模型。FXR配体结合域的螺旋3突出显示为绿色，NCoR-2基序为棕红色。阿维菌素类似物由棒状表示法示出，其中碳原子和氧原子分别由蓝色和红色表示。

图12A-12B示出FXR-伊维菌素相互作用的示意图。氢键以从质子供体向受体的箭头表示。

图13A-13B示出FXR-阿维菌素相互作用的示意图。氢键以从质子供体向受体的箭头表示。

图14A-14B示出FXR-多拉克丁相互作用的示意图。氢键以从质子供体向受体的箭头表示。

图15A-15D示出化合物/FXR相互作用的功能关联。图15A-15C示出FXR与化合物之间相互作用的分子决定因素。图15D示出在响应报告因子检测中的化合物时，关键FXR残基的转录活性的突变的差异效应。COS-7细胞与质粒编码的全长野生型(WT)FXR或图中指示的FXR突变体，以及EcRE萤光素酶报告因子共转染。用1mM阿维菌素相应地处理细胞。数值为三次独立实验的平均值±SEM。

图16A-16C示出化合物在血糖上的效果。喂食高脂肪饲料并用阿巴克丁、多拉克丁、伊维菌素或溶媒治疗10天的KKAy小鼠被禁食6小时，同时可以自由饮水。图16B示出葡萄糖耐受性试验(GTT)，腹腔内注射1g/kg的葡萄糖，并且用Accu-Check Performa(RocheApplied Science，德国曼海姆)测量0、30、60、90、120、150和180分钟的血糖。图16C示出胰岛素耐受性试验(ITT)，腹腔内注射1U/kg的重组人胰岛素(Novolin 30R，诺和诺德，丹麦Bagsvaerd)，并且测量胰岛素注射之后0、30、60、90、120和150分钟的血糖。每组n＝6。误差条为SEM。

图17示出WT和KO小鼠在注射阿巴克丁或多拉克丁之后的血清葡萄糖水平。对野生型C57BL/6J小鼠(WT)和FXR基因敲除小鼠(KO)喂食高脂肪饲料并且连续14天每天一次腹腔注射阿维菌素类似物(1.3mg/kg)，每组n＝6。使用葡萄糖氧化酶法(Applygen，中国北京)分析血糖。与溶媒组相比，**p<0.01。

具体实施方式

本发明涉及与核受体例如法尼醇X受体(FXR)结合的化合物。本发明涉及用于治疗代谢疾病，具体地，用于治疗诸如非酒精性脂肪肝病(NALFD)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的肝脏疾病的化合物，诸如阿维菌素类似物，具体为伊维菌素、多拉克丁和阿巴克丁。本文中描述的化合物与FXR结合，其中与FXR的结合激活、调控或调节FXR。

在本文中使用的术语“代谢疾病”指代任何与代谢相关的疾病或失调。例如，代谢疾病包括但不限于高血糖、胰岛素抗性、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、糖尿病、肥胖症、代谢综合征、代谢失调和相关疾病、法尼醇X受体介导的疾病、肝病(肝脏疾病)、脂肪肝(肝脏脂肪变性)、非酒精性脂肪肝病、脂肪性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、肝硬化、纤维化、慢性和急性肝衰竭、胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、胆汁阻塞、胆结石、动脉粥样硬化、炎症、癌症及其组合。

在一些实施例中，用于本文中描述的方法的化合物可以配制成药物组合物。本发明的药物组合物可以包括本文中描述的化合物或其药学上可接受的盐及药学上可接受的载体。这样的组合物可以有选择地包括附加的治疗剂。

在一些实施例中，附加的治疗剂可以包括任意的药理学疗法。例如，药理学疗法可以包括贫血疗法、糖尿病疗法、高血压疗法、胆固醇疗法、神经药理学药物、调控心血管功能的药物、调控炎症、免疫功能、血细胞产生的药物；激素和拮抗剂、影响胃肠功能的药物、微生物性疾病的化学疗法和/或肿瘤病的化学疗法。其他药理学疗法可以包括任意的其他药物或任意药物种类中的生物制剂。例如，其他药物种类可以包括过敏/感冒/耳鼻喉(ENT)疗法、止痛剂、麻醉剂、抗炎药、抗菌剂、哮喘/肺部疗法、心血管疗法、皮肤病疗法、内分泌/代谢疗法、胃肠疗法、癌症疗法、免疫疗法、神经疗法、眼科疗法、精神病疗法或风湿病疗法。

在一些实施例中，与法尼醇X受体结合的化合物为FXR的配体并且调控FXR(例如，FXR的激动剂或部分激动剂)。在一些实施例中，FXR配体是大环内酯。在一些实施例中，大环内酯是阿维菌素衍生物。在一些实施例中，阿维菌素衍生物是伊维菌素、多拉克丁、阿巴克丁和其药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物。在一些实施例中，大环内酯是依立诺克丁(eprinomectin)。在一些实施例中，FXR配体是米尔贝霉素(例如莫昔克丁(moxidectin))。

在一些实施例中，大环内酯是伊维菌素，由式(I)示出：

其中R＝CH₂CH₃(B1a组分)，或R＝CH₃(B1b组分)。

在一些实施例中，大环内酯是阿巴克丁，由式(II)示出：

其中R＝CH₂CH₃(B1a组分)，或R＝CH₃(B1b组分)。

在一些实施例中，大环内酯是多拉克丁，由式(III)示出：

在一些实施例中，本发明使用的化合物包括但不限于WO2014/059797中描述并图示的化合物，其全体通过引用并入本文。

术语“药学上可接受的载体”指代可以与本发明的化合物一起给药于患者，并且不破坏其药理学活性的无毒性的载体。可以用于这些组合物的药学上可接受的载体包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、诸如人血清白蛋白的血清蛋白、诸如磷酸盐的缓冲物质、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、诸如硫酸鱼精蛋白的盐或电解质、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅胶、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素系物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段共聚物、聚乙二醇和羊毛脂。

可以用于本发明的药物组合物中的药学上可接受的载体包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、诸如人血清白蛋白的血清蛋白、诸如磷酸盐的缓冲物质、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、诸如硫酸鱼精蛋白的盐或电解质、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅胶、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素系物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段共聚物、羊毛脂和诸如a-生育酚、琥珀酸聚乙二醇1000的自乳化药物释放系统(SEDDS)，或其他类似的聚合物释放骨架(matrice)。

在只包括本文中描述的化合物作为活性组分的药用组合物中，给药这些组合物的方法可以附加地包括向受试者给药附加的治疗剂或疗法的步骤。这样的疗法包括但不限于贫血疗法、糖尿病疗法、高血压疗法、胆固醇疗法、神经药理学药物、调控心血管功能的药物、调控炎症、免疫功能、血细胞产生的药物；激素和拮抗剂、影响胃肠功能的药物、微生物性疾病的化学疗法和/或肿瘤病的化学疗法。其他药理学疗法可以包括任意的其他药物或任意药物种类中的生物制剂。例如，其他药物种类可以包括过敏/感冒/耳鼻喉(ENT)疗法、止痛剂、麻醉剂、抗炎药、抗菌剂、抗病毒剂、哮喘/肺部疗法、心血管疗法、皮肤病疗法、内分泌/代谢疗法、胃肠疗法、癌症疗法、免疫疗法、神经疗法、眼科疗法、精神病疗法或风湿病疗法。可以与本文中描述的化合物一起给药的药剂或疗法的其他实例包括基质金属蛋白酶抑制剂、脂肪氧合酶抑制剂、细胞因子拮抗剂、免疫抑制剂、细胞因子、生长因子、免疫调控剂、前列腺素或抗血管增生化合物。

本文中使用的术语“治疗上有效剂量”指代在组织、系统、动物、个体或人类中引起研究者、兽医、医师或其他临床医生寻找的生物或药物响应的活性化合物或药物治疗剂的剂量，其包括下列的一种以上：(1)预防疾病；例如，预防可能有疾病、症状、或失调倾向但是尚未经历或表现出疾病的病理或症状的个体的疾病、症状、或失调，(2)抑制疾病；例如，抑制正在经历或表现出疾病、症状、或失调的病理或症状的个体的疾病、症状、或失调(即，控制病理和/或症状的进一步发展)，以及(3)改善疾病；例如，改善正在经历或表现出疾病、症状、或失调的病理或症状的个体的疾病、症状、或失调(即，逆转病理和/或症状)。

本发明的化合物可以在用于控制本文中描述的疾病，以及治疗该疾病或减轻其症状的发展或严重性的传统方式中使用，该疾病包括但不限于代谢疾病。这样的治疗方法，它们的剂量水平和需求可以由本领域普通技术人员从可用的方法和技术中选择。例如，本发明的化合物可以与药学上可接受的佐剂组合，从而以药学上可接受的方式，并且以能有效减轻代谢疾病严重程度的剂量给药于患代谢疾病的患者。

可替代地，本发明的化合物可以在治疗或保护个体免于本文中描述的疾病的组合物和方法中长期使用，该疾病包括但不限于代谢疾病。化合物可以用与在药用组合物中使用这样的化合物的传统方法一致的方式，在这样的组合物中单独地或与本发明的化合物一起使用。例如，本发明的化合物可以与常用于疫苗中的药学上可接受的佐剂组合，并且以预防上有效的剂量给药以长期保护个体免于本文中描述的疾病，该疾病包括但不限于代谢疾病。

本文中使用的术语“组合”(combination)、“组合”(combined)和相关术语指代根据本发明同时或连续给药治疗剂。例如，所述化合物可以以独立的单位剂量形式或者一起以单一单位剂量形式与其他治疗剂同时或连续给药。因此，本发明提供了一种单一单位剂量形式，该单一单位剂量形式包含所述化合物、附加治疗剂和药学上可接受的载体、佐剂或溶媒。当患者或个体同时暴露于两种药剂时，通常认为两种以上的药剂是“组合”(incombination)给药的。在许多实施例中，当患者或个体在特定受试者组织或样本中(例如大脑中、血清中等)同时显示出两种以上药剂的相关水平时，认为两种以上的药剂是“组合”给药的。

当本发明的化合物是与其他药剂以组合疗法给药时，可以将其连续或同时给药于患者。可替代地，根据本发明的药物或预防剂组合物包含伊维菌素或本文中描述的任意其他化合物，和其他治疗剂或预防剂的组合物。通常地给药以治疗特定疾病或症状的附加的治疗剂可以指代为“适合用于治疗疾病或症状的药剂”。

如果在这些组合物中使用了本发明的化合物的药学上可接受的盐，这些盐优选地衍生自无机或有机酸和碱。其中包括如下的酸式盐：乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、双葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡萄糖庚酸盐(glucoheptanoate)、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟乙基磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、三甲基乙酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸酯和十一酸盐。碱式盐包括铵盐、诸如钠盐和钾盐的碱金属盐、诸如钙盐和镁盐的碱土金属盐、诸如二环己基胺盐的有机碱的盐、N-甲基-D-还原葡糖胺、以及诸如精氨酸、赖氨酸的氨基酸的盐等。

在本发明的组合物和方法中使用的化合物还可以通过附加合适的官能性来修饰，以增强选择的生物性质。这样的修饰是本领域已知的，并且包括那些向给定的生物系统(例如，血液、淋巴系统或中枢神经系统)增加生物穿透性、增加口服性、增加溶解度以允许注射给药、改变代谢和/或改变排泄率的修饰。

根据优选的实施例，本发明的组合物配制成药物给药于受试者或病人，例如哺乳动物，优选为人类。这样的药物组合物用于改善、治疗或预防本文中描述的任意疾病，包括但不限于受试者中的代谢疾病。

本发明的药剂经常作为包含活性治疗剂和各种其他药学上可接受的组分的药物组合物来给药。参见《Remington's Pharmaceutical Science》(第15版，Mack出版公司，Easton，宾夕法尼亚州，1980)。优选的形式取决于给药和治疗应用的计划模式。取决于期望的剂型，组合物还可以包括药学上可接受的、无毒性的载体或稀释剂，其定义为常用于配制给药于动物或人的药物组合物的溶媒。稀释剂以不影响组合物的生物活性来选择。这样的稀释剂的实例为蒸馏水、磷酸缓冲生理盐水、林格氏溶液、葡萄糖溶液和汉克(Hank’s)溶液。此外，药物组合物或剂型也可以包括其他的载体、佐剂或无毒性的、非治疗性的、无免疫源性的稳定剂等。

在一些实施例中，本发明提供了包含一种以上治疗上有效剂量的所述化合物的、与一种以上药学上可接受的载体(添加剂)和/或稀释剂剂型在一起的药学上可接受的组合物，从而用于治疗本文中描述的疾病，包括但不限于代谢疾病。尽管所述化合物可以单独给药，但优选的是按照本文中的描述的药物剂型(组合物)给药所述化合物。所述化合物可以用与其他药物类似的方式，以用于人药或兽药的任意便利的方式配制以用于给药。

如详细描述的，本发明的药物组合物可以具体地配制成用于给药的固体或液体形式，包括适用于以下的那些：口服给药，例如，灌服剂(水性或非水性溶液或混悬液)、片剂，如靶向口颊、舌下或全身吸收的那些、大丸剂、粉剂、粒剂、施用于舌的糊剂；胃肠外给药，例如，通过皮下、肌肉、静脉或硬膜外注射的例如无菌溶液或混悬液、或缓释剂型；局部给药，例如，以乳膏，软膏，或控释贴剂或施用于皮肤、肺或口腔的喷剂；阴道内或直肠内给药，例如，作为阴道栓、乳膏或泡沫剂；舌下给药；眼部给药；经皮给药；或鼻腔给药、肺部给药以及向其他粘膜表面给药。

本文中描述的化合物的药学上可接受的盐包括传统的无毒性的盐或化合物的季铵盐，例如来自无毒性的有机或无机酸的盐。例如，这样的传统的无毒性的盐包括衍生自诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸等的无机酸的盐；以及制备自诸如乙酸、丙酸、琥珀酸、羟基乙酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、棕榈酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、异硫羰酸、草酸和羟基乙磺酸等的有机酸的盐。在其他情况中，所述化合物可以包含一种以上的酸性官能团，并且因此能够与药学上可接受的碱形成药学上可接受的盐。这些盐也可以在给药溶媒或剂型生产过程中原位(in situ)制备，或者通过单独地将纯化的化合物以其自由酸形式与合适的诸如药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐的碱、氨、或药学上可接受的有机伯胺、仲胺或叔胺反应来制备。典型的碱金属或碱土金属盐包括锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐和铝盐等。典型的用于形成碱式盐的有机胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺和哌嗪等。参见例如上述的Berge等的文章。

润湿剂、乳化剂和润滑剂，诸如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、释放剂、包衣剂、甜味剂、增味剂和香味剂、防腐剂和抗氧化剂也可以存在于组合物中。

药学上可接受的抗氧化剂的实例包括：水溶性抗氧化剂，诸如抗坏血酸、半胱氨酸盐酸盐、硫酸氢钠、焦亚硫酸钠和亚硫酸钠等；脂溶性抗氧化剂，诸如抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁对甲氧酚(BHA)、二叔丁对甲酚(BHT)、卵磷脂、没食子酸丙酯和α-生育酚等；以及金属螯合剂，诸如柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸和磷酸等。

根据本发明使用的剂型包括适合口服、鼻腔、局部(包括口颊和舌下)、直肠、阴道和/或胃肠外给药的那些。剂型可以便利的以单位剂量形式存在，并且可以由药学领域已知的任何方法制备。可以与载体材料组合以生产单一剂量形式的活性原料的量根据被治疗的受体以及特定给药模式而定。能够与载体材料组合以生产单一剂量形式的活性原料的量通常为产生治疗效果的化合物的量。一般地，该量在活性原料的约1％至约99％的范围内。在一些实施例中，该量在约5％至约70％的范围内，在约10％至约50％的范围内，或者在约20％至约40％的范围内。

在特定实施例中，本文中描述的剂型包含：选自由环糊精、脂质体、胶团形成剂，如胆汁酸、和聚合物载体，如聚酯和聚酸酐所组成的组中的赋形剂；以及本发明的化合物。在特定实施例中，上述剂型使本发明所述的化合物呈现出口服生物可用性。

制备包含所述化合物的剂型或组合物的方法包括使本发明的化合物与载体以及，可选择地，一种以上助剂缔合的步骤。一般的，剂型可以通过将本发明的化合物与液态载体或精细分割的固态载体或两者均一和密切地缔合，并且如果必要的话，然后使产物成型来制备。

药物组合物可以是无菌注射制剂的形式，例如水性或油性无菌注射混悬剂。该混悬剂可以根据本领域已知技术，使用适合的分散或润湿剂(例如Tween 80)和悬浮剂剂型而成。无菌注射制剂也可以是用无毒性的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂的无菌注射溶液或混悬液，例如，1,3-丁二醇的溶液。可以使用的可接受的载体和溶剂包括甘露醇、水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外，无菌的不挥发油传统上也作为溶剂或悬浮介质使用。为此，可以使用任何无刺激性的不挥发油，包括合成单甘酯或双甘酯。诸如油酸及其甘油酯衍生物的脂肪酸可以用于注射剂的制备，同样地，天然的药学上可接受的油，诸如橄榄油或蓖麻油，特别是其聚氧乙烯化的形式，可以用于注射剂的制备。这些油溶液或混悬液液可以包含长链醇稀释剂或分散剂，诸如《Pharmacopeia Helvetica》中描述的那些，或类似的醇。其他常用的表面活性剂，诸如Tweens、Spans，以及常用于药学上可接受的固态、液态或其他剂型的生产的其他乳化剂或生物可用性增强剂，可以用于剂型的目的。

在一些情况下，为了延长药物的效果，理想的是可以减缓从皮下或肌肉注射的药物的吸收。其可以通过使用具有低水溶性的结晶态或无定形态材料的液态混悬液来实现。由此，药物的吸收率取决于其溶解率，溶解率转而取决于晶体尺寸和结晶形态。可替代地，胃肠外给药的药物形式的延迟吸收是通过将药物溶解或悬浮于油溶媒中来实现。

注射用的药性持久的形式通过形成所述化合物在诸如聚乳酸-聚乙醇酸的生物可降解聚合物中的微胶囊骨架而制得。取决于药物与聚合物的比率，以及使用的特定聚合物的性质，能够控制药物释放率。其他生物可降解聚合物的实例包括聚原酸酯和聚酸酐。药性持久的注射剂型也通过在与人体组织相容的脂质体或微乳液中包埋药物来制备。

本发明的药物组合物可以以任意口服可接受的剂型来口服给药，口服可接受的剂型包括但不限于胶囊剂、片剂以及水性混悬剂和溶剂。在口服使用片剂的情况中，常用的载体包括乳糖和玉米淀粉。通常也可以添加诸如硬脂酸镁的润滑剂。用于口服给药的胶囊剂形式，可用的稀释剂包括乳糖的干燥的玉米淀粉。当口服给药水性混悬剂和溶剂以及丙二醇时，活性原料是与乳化剂和悬浮剂组合的。如果期望的话，可以添加特定的甜味剂和/或增味剂和/或着色剂。

本文中描述的适合口服给药的剂型可以是胶囊剂、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(使用增味基质，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄芪胶)、粉剂、颗粒剂、或作为在水性或非水性液体中的溶剂或混悬剂、或作为水包油或油包水的液态乳剂、或作为酏剂或糖浆、或作为糖果锭剂(使用惰性基质，诸如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)和/或作为漱口水等形式，其中分别包含预定量的作为活性成分的本发明的化合物。本文中描述的化合物也可以作为大丸剂、冲服剂或糊剂来给药。

在用于口服给药的固态剂型(胶囊剂、片剂、丸剂、糖衣丸、粉剂和颗粒剂等)中，活性成分与一种以上药学上可接受的载体混合，药学上可接受的载体诸如柠檬酸钠或磷酸氢钙，和/或下列任一：填充剂或增量剂，诸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖和/或硅酸；粘合剂，诸如例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；保湿剂，诸如甘油；崩解剂，诸如琼脂、碳酸钙、土豆或木薯淀粉、藻酸、特定的硅酸盐和碳酸钠；溶液阻滞剂，诸如石蜡；吸收加速剂，诸如季铵化合物；润湿剂，诸如例如鲸蜡醇、单硬脂酸甘油酯和非离子性表面活性剂；吸附剂，诸如高岭土和膨润土；润滑剂，诸如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固态聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和其混合物；以及着色剂。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况中，药物组合物也可以包含缓冲剂。相似类型的固态组合物也可以用作软壳或硬壳明胶胶囊中的填充剂，该胶囊使用诸如乳糖(lactose)或乳糖(milk sugars)以及高分子量聚乙二醇等的赋形剂。

片剂可以可选地与一种以上助剂通过压制或模制制得。压制片剂可以使用粘合剂(例如明胶或羟丙甲纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如羧基乙酸淀粉钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂制备。模制片剂可以在适合的机器中制得，在该机器中粉末状化合物的混合物用惰性液态稀释剂沾湿。如果使用了固态载体，制剂可以是片剂形式、置于硬明胶胶囊中的粉末或小丸形式或者是糖剂或锭剂的形式。固态载体的量可以变化，如从约25至800mg变化，优选地从约25mg至400mg变化。当使用液态载体时，制剂可以是例如糖浆、乳剂、软明胶胶囊、诸如安瓿或非水性液态混悬剂的无菌注射液的形式。当组合物是胶囊剂的形式时，任意常用包囊法是适合的，例如在硬明胶胶囊壳中使用上述载体。

片剂和其他固态剂型，诸如糖衣丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂，可选择地可以用包衣法或包壳法，诸如肠溶衣和药物剂型领域中已知的其他包衣法来计数或制备。可以可选择地或附加地配制，以提供其中的活性成分的缓释或控释，使用例如可变比例的羟丙甲纤维素来提供期望的释放曲线、其他聚合物基质、脂质体和/或微球。可以配制为快速释放，如冻干法。可以通过例如使用细菌保留过滤器过滤来杀菌，或者通过在立即使用前加入能溶于无菌水或其他无菌注射介质的无菌固态组合物形式的杀菌剂来杀菌。这些组合物也可以可选择地包含遮光剂，并且可以是仅在胃肠道特定部分或优先地在胃肠道特定部分，可选择地，以延迟的方式释放活性成分。可以使用的植入型组合物的实例包括聚合物和蜡。如果适当的话，活性成分也可以与一种以上上述赋形剂成为微胶囊形式。

用于本发明的化合物的口服给药的液态剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。除活性成分外，液态剂型可以包含：本领域常用的惰性稀释剂，诸如例如水或其他溶剂；增溶剂和乳化剂，诸如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(具体的，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃甲醇、聚乙二醇和山梨聚糖的脂肪酸酯，以及其混合物。

除惰性稀释剂外，口服组合物也可以包括诸如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、增味剂、着色剂、香味剂和防腐剂的佐剂。

混悬剂除活性成分外，可以包含悬浮剂，例如乙氧基异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和山梨酸酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝(aluminum metahydroxide)、膨润土、琼脂和胶黄芪，以及其混合物。

本发明的药物组合物也可以以用于直肠给药的栓剂形式给药。这些组合物可以通过将本发明的化合物与合适的无刺激性的赋形剂混合来制备，该赋形剂在室温下是固态但在直肠温度下是液态，因此会在直肠内融化从而释放活性组分。这样的材料包括但不限于可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。

当理想的治疗涉及易于局部施用接近的区域或器官时，本发明的药物组合物的局部给药是特别有用的。用于向皮肤的局部施用，药物组合物应该配方配制成包含悬浮或分散于载体的活性组分的适合的软膏。用于本发明的化合物的局部给药的载体包括但不限于矿物油、液态石油、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。可任选地，药物组合物可以配方配制成包含悬浮或分散于载体的活性组分的适合的洗剂或乳膏。适合的载体包括但不限于矿物油、山梨醇酐单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鲸蜡酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基月桂醇、苯甲醇和水。本发明的药物组合物也可以是通过直肠栓剂或者适合的灌肠剂型局部施用于下消化道的剂型。本发明也包括局部给药的皮肤贴剂。

本发明的药物组合物可以通过鼻用气雾剂或吸入剂给药。这样的组合物根据药物制剂领域已知的技术制备，并且可以制备为盐水溶液、使用苄基醇或其他适合的防腐剂、增强生物可用性的吸收促进剂、碳氟化合物和/或其他本领域已知的增溶剂或分散剂。

用于眼部使用的药物组合物可以配制成为在等渗pH调节的无菌盐水中的微悬浮体，或者优选地配制成为在等渗pH调节的无菌盐水中的溶液，包含或不包含诸如苄烷铵氯的防腐剂。可任选地，用于眼部使用的药物组合物可以配制成为诸如矿脂的软膏剂。

皮肤贴剂具有提供向人体控制释放本发明的化合物的附加优点。将化合物溶解或分散于合适的介质，能够制得这样的剂型。吸收增强剂也可以用于增加化合物的经皮流量。通过提供速率控制膜，或者将化合物分散于聚合物基质或凝胶中，能够控制该流量的速率。

可以用于本发明的药物组合物的适合的水性或非水性载体的实例包括：水、乙醇、多元醇(诸如甘油、丙二醇和聚乙二醇等)和其适合的混合物；植物油，诸如橄榄油；以及注射用有机酯，诸如油酸乙酯。可以例如通过使用诸如卵磷脂包衣材料、在分散剂的情况中通过保持需要的粒度、以及通过使用表面活性剂，保持合适的流动性。

这样的组合物也可以包含诸如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂的佐剂。包含一种以上抗菌剂和/或抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸、氯丁醇和苯酚山梨酸等，在一些实施例中是理想的。可替代地或附加地，理想的是在组合物种包括等渗剂，诸如糖类和氯化钠等。此外，注射用药物形式的延长吸收可以通过包括诸如单硬脂酸铝和明胶的延缓吸收的药剂而带来。

在特定实施例中，所述化合物或药物制剂是口服给药的。在其他实施例中，所述化合物或药物制剂是静脉注射给药的。可替代的给药途径包括舌下、肌肉和经皮给药。

当本文中描述的化合物作为药物给药于人和动物时，化合物可以本身供给或作为药物组合物供给，该药物组合物包含例如0.1％至99.5％(更优选地，0.5％至90％)的活性成分与药学上可接受的载体的组合。

本文中描述的制剂可以口服、胃肠外、局部或直肠供给。自然而然地，它们是以适合相关给药途径的形式供给的。例如，它们以片剂或胶囊剂形式、通过注射、吸入、眼用洗剂、软膏、栓剂等给药，通过注射、输液或吸入给药；通过洗剂或软膏局部给药；以及通过栓剂直肠给药。口服给药是优选的。

这样的化合物可以通过任意适合的给药途径给药于人或其他动物以用于治疗，给药途径包括口服给药、通过例如喷剂的鼻腔给药、直肠给药、阴道内给药、胃肠外给药、脑池外给药和通过粉剂、软膏或滴剂的包括口颊和舌下的局部给药。

无论给药途径的选择如何，可以将以适合的水化物形式使用的本文中描述的化合物和/或本发明的药物组合物，通过本领域技术人员已知的传统方法，配制成为药学上可接受的剂型。

本发明的药物组合物中活性成分的实际剂量水平可以变化，从而获得对特定患者实现期望的治疗响应有效的活性成分的量、组合物以及给药模式，而不对患者产生毒性。

本文中描述的实施例针对能够调控FXR的化合物，具体地是用于治疗代谢疾病的伊维菌素或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，第二治疗剂与化合物组合，用于代谢疾病的治疗。

本文中描述的实施例针对能够调控FXR的化合物，具体地是用于治疗代谢疾病的阿巴克丁或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，第二治疗剂与化合物组合，用于代谢疾病的治疗。

本文中描述的实施例针对能够调控FXR的化合物，具体地是用于治疗代谢疾病的多拉克丁或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，第二治疗剂与化合物组合，用于代谢疾病的治疗。

本文中描述的实施例针对能够调控FXR的化合物，诸如例如伊维菌素、阿巴克丁、多拉克丁、其组合物或其药学上可接受的盐，用于治疗包括诸如NALFD和NASH的肝病的代谢疾病。

因此，本发明也提供了一种治疗患者需要治疗的代谢疾病的方法，该方法包括向所述患者提供治疗上有效剂量的能够调控FXR的化合物，诸如例如伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁或其药学上可接受的盐。

一些实施例针对能够调控FXR的化合物在用于代谢疾病的治疗的药物的生产中的应用，该化合物诸如例如伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁或其药学上可接受的盐。

一些实施例针对能够调控FXR的化合物及第二治疗剂在用于代谢疾病的治疗的药物的生产中的应用，该化合物诸如例如伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁或其药学上可接受的盐。

一些实施例针对在包括人的哺乳动物中的代谢疾病的治疗或预防，其包括向所述哺乳动物给药治疗上有效剂量的能够调控FXR的化合物，诸如例如伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁或其药学上可接受的盐。

但在其他实施中，在包括人的哺乳动物中的代谢疾病的治疗或预防，包括向所述哺乳动物给药治疗上有效剂量的能够调控FXR的化合物以及第二治疗剂，该化合物诸如例如伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，该第二治疗剂是过敏/感冒/耳鼻喉(ENT)疗法、止痛剂、麻醉剂、抗炎药、抗菌剂、抗病毒剂、哮喘/肺部疗法、心血管疗法、皮肤病疗法、内分泌/代谢疗法、胃肠疗法、癌症疗法、免疫疗法、神经疗法、眼科疗法、精神病疗法、风湿病疗法或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

两种治疗剂可以同时或连续给药，并且当连续给药时，可以先给药任一种。当同时给药时，可以用同一个或不同的药物组合物给药该组合。

两种治疗剂可以以独立的剂型或单一的组合剂型使用。当组合为同一个剂型时，应该理解的是两种化合物必须是稳定的并且是互相相容的并且与剂型中的其他组分相容的。

一些实施例针对包含有效剂量的能够调控FXR的化合物以及药学上可接受的载体的药物组合物，该化合物诸如例如伊维菌素、阿巴克丁、多拉克丁、其组合物或其药学上可接受的盐。

当单独配制时，能够调控FXR的化合物，诸如例如伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁或其药学上可接受的盐以及第二治疗剂可以用本领域已知的用于该化合物的方式便利地以任意便利的剂型提供。

药物组合物可以在常温常压下通过混合材适合地制备，并且通常适用于口服、胃肠外或直肠给药，并且可以以片剂、胶囊剂、口服液态制剂、粉剂、颗粒剂、锭剂、可复水(reconstitutable)的粉剂、注射用或输液用溶剂或混悬剂或栓剂的形式给药。口服给药的组合物一般是优选的。

用于口服给药的片剂和胶囊剂可以为单位剂量形式，并且可以包含传统的赋形剂，诸如粘合剂、填充剂、压片润滑剂、崩解剂以及可接受的润湿剂。片剂可以根据通常的药物实践中已知的方法包衣。

口服液态制剂可以为例如水性或油性混悬剂、溶剂、乳剂、糖浆剂或酏剂的形式，或者可以为用于在使用前与水或其他适合的溶媒冲调的干燥品的形式。这样的液态制剂可以包含传统的添加剂，诸如悬浮剂、乳化剂、非水性溶媒(其可以包括食用油类)、防腐剂，以及如果期望的话，传统的增味剂或着色剂。

用于胃肠外给药的流体单位剂型使用化合物和无菌溶媒制备。取决于使用的溶媒和浓度，化合物可以悬浮或溶解于溶媒中。在制备溶剂时，可以溶解化合物以用于注射，以及可以在注入合适的药瓶或安瓿前过滤灭菌，并且密封。有利地，诸如局部麻醉剂、防腐剂混合缓冲剂的佐剂溶解于溶媒中。为了增强稳定性，组合物可以在注入药瓶后冷冻，并在真空下除去水。胃肠外悬浮剂用大致相同的方式制备，除了化合物是悬浮于溶媒中而不是溶解于溶媒中，并且不能通过过滤实现灭菌。化合物可以通过在悬浮于无菌溶媒前暴露于环氧乙烷来灭菌。有利地，在组合物中包括表面活性剂或润湿剂以促进化合物的均一分布。

取决于给药方法，组合物可以包含从0.1重量％至99重量％，优选地从10至60重量％的活性材料。

如果期望的话，组合物可以存在于可以包含一个以上包含活性成分的单位剂量形式的包装或分配装置中。例如，该包装可以包含金属或塑料箔，诸如泡罩包装。当化合物要作为两个单独的组合物给药时，例如，其可以以双包装的形式存在。

药物组合物也可以以单一包装中的包含治疗的全部过程的“患者包装”开药给患者，该包装通常为泡罩包装。患者包装具有优于传统处方的优点，在传统处方中，药剂师将患者的药品供应从整体供应中分离出来，其中，患者总是需要用到包括在患者包装中的说明书，该说明书在传统处方中通常是缺失的。说明书的包含已经表现出提高了患者对医生的指示的顺应性。

可以理解的是，通过其中包括了指导患者正确使用组合物的说明书的单一患者包装或每种组合物的患者包装的方式给药组合物是一种理想的附加实施方式。一些实施例针对包含组合物的至少一种活性成分以及包括指导组合物的使用的说明书的患者包装。一些实施例针对包含有联系的为单独给药能够调控FXR的化合物以及第二治疗剂的双包装，该化合物诸如例如伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁。

用于代谢疾病的治疗的本文中描述的化合物，诸如例如伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁的剂量，以通常的方式随着失调的严重性、哺乳动物(例如人)的体重和其他类似因素变化。然而，作为一般的指导，适合的单位剂量可以为0.05至1000mg，更优选为0.05至200mg，例如20至40mg；并且这样的单位剂量优选为每天给药一次，尽管可能需要每天给药多于一次；以及这样的疗法可能延续数周或数月。

与第二治疗剂组合使用的本文中描述的化合物，诸如例如伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁的剂量，可以与其单独使用时相同，或者可以不同。可能的是，每种药物使用的剂量在组合使用时可以低于单独使用时的剂量。

当使用本发明的化合物时的剂量可以在宽范围内变化，并且按照惯例和医生已知的，可以在每个单独的情况中，按照个体的状况做出修改。例如，其取决于将要治疗的疾病的性质和严重性、患者的状况、使用的化合物、或是否进行了急性或慢性病情的治疗或预防、或是否在本发明的化合物之外给药更多的活性化合物。本发明的典型剂量包括但不限于约0.001mg至约5000mg，约0.001mg至约2500mg，约0.001mg至约1000mg，0.001mg至约500mg，0.001mg至约250mg，约0.001mg至100mg，约0.001mg至约50mg，以及约0.001mg至约25mg。一天中可以给药多次剂量，特别是当认为需要相对大的量时，例如2次、3次或4次剂量。取决于个体以及患者的医生或护理者认为适当的，可能需要从本文中描述的剂量向上或向下偏离。

治疗中需要使用的活性成分、或活性盐或其衍生物的量，可以不仅随着选择的特定的盐，也可以随着给药途径、治疗的症状的特性以及患者的年龄和状况而变化，并且最终由监护医生或医师的决断而定。一般地，本领域技术人员理解如何从在模型系统，通常为动物模型中获得的体内数据外推至另一系统，诸如人。在一些实施例中，这些推断可以仅根据动物模型相比与其他模型，诸如哺乳动物，优选为人的体重而得出，然而，更经常地，这些推断并不简单地基于体重，而是合并了多种因素而得出。典型的因素包括类型、年龄、体重、性别、患者的饮食和医疗状况、疾病的严重性、给药途径、药理学的考虑诸如使用的特定化合物的活性、有效性、药物动力学以及毒理学资料、是否使用了药物递送系统、是否进行了急性或慢性病情的治疗或预防、或是否在本发明的化合物之外给药更多的活性化合物以及是否作为药物组合物的一部分。使用本发明的化合物和/或组合物用于治疗疾病病情的给药方案是根据上述的多种因素选择的。由此，使用的实际给药方案可以大范围的变化，并且因此可以从优选的给药方案偏离，并且本领域技术人员可以理解这些常用范围之外的剂量和给药方案可以试验，并且在恰当时可以用于本发明的方法中。

理想的剂量可以便利地存在于单一剂量或作为分割的剂量在恰当的间隔给药，例如，作为每天两个、三个或四个以上的亚剂量。该亚剂量本身可以进一步分割，例如分割为数个独立的松散隔开的给药。特别是当为需要给药相对大的量时，每日的剂量可以分割为多个，例如2次、3次或4次部分给药。取决于个体行为，如果恰当的话，可能需要从指示的每日剂量向上或向下偏移。

实施例

实施例1

由于脂肪在肝脏中异常量的积累而不是由于过量饮酒导致的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，已经成为一种严重的代谢失调。NAFLD的患者有着包括肝细胞中甘油三酯异常积累(脂肪变性)到纤维变性的脂肪性肝炎(非酒精性脂肪性肝炎，NASH)的多种肝脏失调，其可能演化为肝硬化和/或肝细胞性肝癌。肝脏脂肪变性存在于发达国家多达三分之一的成人中，并在年轻人群中愈加流行，直接导致肝脏疾病。例如，NAFLD诱导的肝脏衰竭是肝脏移植的主要指标。此外，NAFLD已经成为心血管疾病导致的死亡、以及2型糖尿病和慢性肾病的发病的有意义的预测因素。这些考量强烈地预示着治疗各阶段NAFLD的必要性。遗憾的是，还没有对于NAFLD的用于有效控制和治疗该代谢失调的特异性治疗干预。

核胆汁酸受体，法尼醇X受体(FXR)在保持胆汁酸、脂质和葡萄糖的内稳态，以及炎症和癌症上起到重要作用。FXR在肝脏、肠、肾脏和肾上腺中高度表达。近来的研究表明FXR功能在NAFLD中的重要性。在一个研究中，在肥胖的啮齿动物和NAFLD患者的肝脏中，FXR的表达被显著地减少了。此外，FXR基因敲除小鼠患有肝脏脂肪变性和高血脂，其能够通过肥胖的啮齿动物中FXR的过度表达或激活来有效地改善。证据是，FXR的直接靶基因AKR1B7的肝脏表达显著地降低了db/db小鼠中肝脏甘油三酯和胆固醇的水平，进一步强调了FXR在调节脂质代谢中的重要性。使用FXR配体的治疗，通过腹膜内(i.p.)注射或口服(p.o.)给药，能够降低肝脏组织中的甘油三酯水平，导致肝脏中脂肪积累的减缓，表明了FXR激动剂在NAFLD中的治疗效果。

天然FXR配体，鹅去氧胆酸(CDCA)用于治疗人的胆固醇结石，并且必须给药至少半年。然而，已经报道CDCA丰富的饮食引起小鼠的肝脏肥大。另外，CDCA的结合亲和性非常低，并且其在哺乳动物中不特异靶向FXR。给药合成的FXR配体GW4064，引起了小鼠的体重增长和脂肪积累，以及对青鳉自由胚胎(medakaeleutheroembryo)的肝胆管的损伤。另外，目前正在开发用于治疗血脂异常、糖尿病、原发性胆汁性肝硬化和NASH的合成FXR激动剂INT-747、PX-102和WAY-362450，但是这些合成分子的安全问题仍然是关注的重点。

阿维菌素是一系列作为土壤放线菌阿维链霉菌的发酵产物生成的16员大环内酯衍生物。由于它们的强有力的驱虫和杀虫性质，合成了阿维菌素的一系列衍生物，包括伊维菌素多拉克丁阿巴克丁和依立诺克丁(或)，它们都作为抗寄生虫药在动物和/或人中广泛使用。另外，有其他两类大环内酯，莫昔克丁其是通过放线菌氰基灰色链霉菌(Streptomycescyanogriseus)产生的大环内酯米尔贝霉素(或)的半合成衍生物。莫昔克丁和米尔贝霉素作为阿维菌素的替代物用于杀死寄生虫。

在本发明中，探索了伊维菌素在治疗代谢失调中的治疗效果和潜在机理。伊维菌素疗法有效地调节了葡萄糖和胆固醇，并且减少了糖尿病小鼠中的脂肪积累。也评估了其他具有抗寄生虫效果的阿维菌素类似物，并且发现其具有与伊维菌素类似的效果。如本文中描述的，结合并激活FXR的阿维菌素类似物降低了小鼠肝脏中的脂肪积累。机理研究展显出，与FXR相互作用的阿维菌素类似物显示了作为部分激动剂的特性，允许了对辅激活子和辅抑制子两者的差异性聚集(differential recruitment)。我们的结果表明，阿维菌素类似物通过FXR信号通路，在NAFLD上具有强有力的治疗效果。

材料和方法

动物、饲料和化合物。

将10周大的KK-Ay小鼠和C57BL/6J同型结合的FXR缺陷(FXR－/－)小鼠保持在环境控制的状况下，并且可以自由进食标准饲料和饮水。经中国厦门大学动物使用和护理机构委员会批准，动物实验在厦门大学实验动物中心的屏障设施内进行。对小鼠喂食包含60％脂肪、20％蛋白质和20％碳水化合物的高脂肪饲料(研究用饲料，D12492)，并每两天测量进食量。对小鼠连续14天每天一次腹膜内(i.p.)注射溶媒(40％2-羟丙基-β-环糊精(HBC)，Sigma)、包含GW4064的溶媒(30mg/kg，Sigma)或化合物(例如，阿维菌素类似物)(1.3mg/kg)(International Laboratory，美国)。在禁食6h后处死小鼠，并且称重小鼠体重和肝脏组织。拍摄肝脏的照片，并用4％多聚甲醛固定各个肝脏的部分。通过苏木精和伊红(H&E)染色以标准流程的石蜡包埋切片来分析肝脏组织学特征。收集并在液氮中冷冻其他组织以便使用，并且收集血清以测量代谢物参数。

油红O染色

在PBS中用4％多聚甲醛固定肝脏组织，用最佳切削温度复合物(OCT)包埋，并且冷冻切片。根据标准流程，用0.3％油红O对冷冻的肝脏切片染色。

葡萄糖耐受性试验和胰岛素耐受性试验

喂食高脂肪饲料并用化合物治疗10天的小鼠被禁食6小时，同时可以自由饮水。对于葡萄糖耐受性试验(GTT)，注射(i.p.)1g/kg的葡萄糖，并且在葡萄糖注射后0、30、60、90、120、150和180分钟用Accu-Check Performa(Roche Applied Science，德国曼海姆)测量血糖。对于胰岛素耐受性试验(ITT)，注射(i.p.)1U/kg的重组人胰岛素(Novolin 30R，诺和诺德，丹麦Bagsvaerd)，并且在胰岛素注射之后0、30、60、90、120和150分钟测量血糖。

血清葡萄糖、甘油三酯和胆固醇水平的定量

在禁食6h后，抽取化合物治疗的小鼠的血清。使用葡萄糖氧化酶法(Applygen，中国北京)分析血糖。分别使用胆固醇检测试剂盒和甘油三酯检测试剂盒(BioassaySystems，美国)分析血清胆固醇和甘油三酯。使用组织甘油三酯检测试剂盒(Applygen，中国北京)分析肝脏甘油三酯。

实时PCR

使用组织RNA试剂盒(Omega Bio-Tek,佐治亚州)分离RNA。通过TAKARA反转录试剂盒获得cDNA第一链。在CFX96^TM实时PCR检测系统(Bio-Rad)上使用SYBR Premix Ex TaqTM(TAKARA)执行实时定量PCR。相关mRNA表达水平以肌动蛋白水平做标准化。

辅因子结合检测

响应于配体的辅因子多肽基序与FXR配体结合域(LBD)结合使用Perkins-Elmer生产的六聚组氨酸检测试剂盒，通过AlphaScreen检测测定。FXR LBD蛋白按照前面的描述纯化。在包含50mM MOPS、50mM NaF、0.05mM CHAPS和0.1mg/mL牛血清白蛋白的缓冲液中，在存在5μg/mL供体和受体小球的情况下，用大约20-40nM受体LBD和20nM生物素化的辅因子多肽进行试验，pH全部调节至7.4。以下列出具有生物素化N末端的多肽：SRC1-2，SPSSHSSLTERHKILHRLLQEGSP；SRC2-3，QEPVSPKKKENALLRYLLDKDDTKD；NCoR-2，GHSFADPASNLGLEDIIRKALMGSF。

瞬时转染检测

在包含10％胎牛血清的DMEM中保持COS-7细胞，并且使用Lipofectamine 2000(Invitrogen)瞬时转染该细胞。使用Quick-Change定点突变试剂盒(Stratagene)创建突变的FXR质粒。在转染的24h之前，覆板24孔板(每孔5×10⁴个细胞)。细胞与编码全长度FXR的质粒和同源的荧光素酶报告因子EcRE-Luc共转染。在转染后5小时加入配体。在24小时之后收集细胞用于荧光素酶检测。荧光素酶活性以作为内部控制的共转染的海肾活性做标准化。

蛋白-配体对接

蛋白-配体对接以与伊维菌素结合的FXR(PDB ID：4WVD)的晶体结构为基础。分离出二聚体结晶结构中的一个单体，并将结晶的配体移除。使用AutoDock Vina软件，用标准参数执行蛋白-配体对接。所有图像使用PyMOL渲染而得。

统计分析

数值表达为平均值±平均值的标准差(SEM)。通过学生t检验计算统计学差异。统计显著性以*p<0.05、**p<0.01或***p<0.001示出。

结果

阿维菌素类似物在减少小鼠的脂质积累中具有不同的功能

抗寄生虫药伊维菌素能够靶向哺乳动物FXR以调节胆固醇和葡萄糖代谢，并且本发明特别地观察了该抗寄生虫FXR配体是否通过调节脂质代谢而在NAFLD上具有治疗效果，以及其他大环内酯类似物在代谢上是否具有类似效果。分别选择自阿维菌素和米尔贝霉素的伊维菌素与阿巴克丁、多拉克丁、依立诺克丁和莫昔克丁一起(图1A-1E)用于研究糖尿病小鼠的生理效应。向10周大的KK-Ay小鼠喂食高脂肪饲料并且每天i.p.注射一次溶媒、GW4064(图1F)和上述化合物。在化合物治疗14天后，肝脏器官在形态学和病理学两者上都显示出不同。显著地是，用伊维菌素、多拉克丁和阿巴克丁治疗的小鼠的肝脏显示出更新鲜的红色组织(图2C-2E)。相对地，用溶媒、依立诺克丁和莫昔克丁治疗的小鼠的肝脏颜色(图2A、2F、2G)为油脂白色，并且用GW4064治疗的小鼠的肝脏显示出少量鲜红色。石蜡包埋的肝脏切片的H&E染色展现出类似的结果，并且解释了上述观察结果(图3A-3G)。从溶媒治疗的KK-Ay小鼠获得的肝脏切片的组织学检查显示出水泡状肝细胞空泡化的广泛存在。GW4064轻微地减少肝脏脂质。然而，伊维菌素、多拉克丁和阿巴克丁治疗几乎完全逆转了糖尿病小鼠中的肝脏脂肪变性，组织脂质积累消失，并且肝脏细胞显示出致密的紧凑结构。相对地，与对照相比(溶媒对照)，用莫昔克丁和依立诺克丁治疗的肝脏中的肝细胞空泡化类似或者更差。

为了进一步确认脂质积累，进行了冷冻肝脏切片的油红O染色(图4A-4G)。溶媒治疗的小鼠的肝脏切片显示出丰富的脂质积累，特别是包含了许多大的脂滴。GW4064治疗减少了脂质积累，然而用伊维菌素、阿巴克丁和多拉克丁治疗的小鼠的肝脏切片显著地减少了脂质积累，其中大的脂滴几乎消失。相对地，用莫昔克丁和依立诺克丁治疗的小鼠的肝脏切片中的脂质积累与溶媒对照类似。通过化学试剂盒检测的肝脏组织中的甘油三酯水平也显示出与肝脏切片结果相同的结果(图5C)。值得注意的是，用伊维菌素、多拉克丁和阿巴克丁治疗的小鼠的体重以及肝脏体重比率显著的低于用溶媒、依立诺克丁和莫昔克丁治疗的小鼠的体重以及肝脏体重比率(图5B和5E)。使用所有化合物的治疗都对进食量没有影响。

高甘油三酯血症和高胆固醇血症与脂肪肝和动脉粥样硬化密切相关。对每种治疗化合物，检验了小鼠的血清甘油三酯和胆固醇水平。结果显示出用伊维菌素、多拉克丁和阿巴克丁的治疗显著地降低了两种水平(即甘油三酯和胆固醇)，但是用依立诺克丁和莫昔克丁的治疗没有降低两种水平(图5D和5F)。肥胖能够诱发血糖升高，导致II型糖尿病和抗胰岛素性。并且，抗胰岛素性能够诱发肝脏脂肪积累，导致NAFLD。与伊维菌素类似，多拉克丁和阿巴克丁的治疗显著地降低了KK-Ay小鼠的血清葡萄糖水平，但是依立诺克丁和莫昔克丁无此效果(图16A)。与溶媒治疗对照相比，注射伊维菌素、多拉克丁和阿巴克丁的KK-Ay小鼠显示出改善的胰岛素敏感性以及葡萄糖耐受性(图16B和图16C)。

甘油三酯积累是由于甘油三酯的合成和清除的不平衡造成的。控制肝脏脂肪生成的一个关键基因是SREBP-1c，其上调可能通过进一步增强下游的脂肪生成基因比如SCD1的表达，暗示肝脏脂肪变性的发生。定量PCR数据展现出伊维菌素、多拉克丁和阿巴克丁的治疗降低了SREBP-1c和SCD1的肝脏mRNA水平，并且也显著地诱导了FXR的直接靶基因AKR1B7的mRNA水平，AKR1B7的过度表达能够降低肝脏甘油三酯水平(图5G)。在降低另外三个FXR直接靶基因CYP8b1的水平的同时，它们也诱导了SHP和BESP的表达。但是，依立诺克丁和莫昔克丁的治疗没有显示出这些调节作用。在KK-Ay小鼠中的基因表达模式进一步解释了通过不同的大环内酯类似物降低脂质积累的潜在分子机理。

数据证明，在检测的阿维菌素类似物中，伊维菌素、多拉克丁和阿巴克丁有效地减少了小鼠肝脏中的脂质积累，表明在阿维菌素类似物中存在不同的性质，造成了它们在调节代谢中的不同能力。

阿维菌素类似物在调节代谢中的能力和它们与FXR的结合能力相关。

为了研究为何各种阿维菌素类似物在小鼠中具有不同功能，检测了这些类似物与FXR的结合亲和性。以配体诱导核受体以聚集辅因子的特性为基础，组氨酸标记的纯化自BL21(DE3)的FXR LBD与包括SRC1-2和SRC2-3的合成生物素标记的辅激活子多肽一起使用以进行AlphaScreen检测。数据显示出，在小鼠肝脏中减低脂质积累的类似物伊维菌素、多拉克丁和阿巴克丁，有力地促进了FXR的辅激活子聚集。相对地，未能在小鼠肝脏中降低脂质积累的依立诺克丁和莫昔克丁，最低程度地诱导了生物素-SRC1-2或生物素-SRC2-3向FXR LBD的聚集(图6A和6B)。配体能够通过结合于它们的配体结合口袋，调节核受体的转录活性。如此，为验证AlphaScreen结果，进行了基于细胞的报告因子检测。同样地，与伊维菌素类似，多拉克丁和阿巴克丁以弱于GW4064的活性显著地激活了FXR在EcRE报告因子上的转录活性(图6C)。依立诺克丁和莫昔克丁没有激活FXR的转录活性(图6C和6D)。也通过AlphaScreen和报告因子检测，以剂量曲线的方式检测了这些类似物对FXR的结合亲和性。多拉克丁和阿巴克丁都具有与伊维菌素类似的结合亲和性，低于GW4064的结合亲和性(图6B和6D)，指示与这些化合物的功能合理相关，出多拉克丁和阿巴克丁是FXR的部分激动剂，但是莫昔克丁和依立诺克丁不是FXR的部分激动剂。数据体现出，能够与FXR结合的阿维菌素类似物在脂质代谢上具有与伊维菌素类似的效果，并具有降低小鼠肝脏中脂肪积累的能力。

阿维菌素类似物降低脂质积累的治疗效果是依赖于FXR的。

为了确定阿维菌素类似物在脂质代谢上的功能是通过直接靶向FXR信号通路，使用喂食高脂肪饲料的野生型小鼠和FXR基因敲除小鼠来研究这些阿维菌素类似物的生理效应的FXR依赖性。如图7A-7H所示，溶媒对照的无FXR小鼠的肝脏切片显示出比溶媒对照的野生型小鼠的更大的脂滴及更大量的脂质积累。与野生型小鼠中的溶媒对照相比，用伊维菌素、阿巴克丁或多拉克丁的治疗显著地降低了脂质的量。在用这些化合物分别治疗的无FXR小鼠中，几乎没有观察到区别，证明了FXR是这些化合物降低小鼠肝脏汇总的脂质积累所必需的。化学试剂盒检测的数据证明这些化合物显著地降低了野生型小鼠中的甘油三酯水平，但是没有降低无FXR小鼠中的甘油三酯水平，即使无FXR小鼠中的甘油三酯水平远高于野生型小鼠中的甘油三酯水平(图8A)。用全部三种化合物的治疗以依赖于FXR的方式降低了小鼠的血清甘油三酯水平(图8B)。与伊维菌素类似，多拉克丁或阿巴克丁的治疗以依赖于FXR的方式降低了血清胆固醇和葡萄糖水平(图8C和17)。这些结果证明，阿维菌素类似物调节包括脂质、胆固醇和葡萄糖代谢的代谢的治疗效果是依赖于核受体FXR的。

来自阿维菌素类似物的FXR配体是能够诱导FXR聚集辅抑制子NCoR-2的部分激动剂

核受体配体的生理和药理作用通过核受体辅调控子的区别聚集(differentialrecruitment)来调控，其转而引起下游核受体靶基因的调控。除了辅激活子向FXR的聚集之外，来自抗寄生虫药阿维菌素类似物的FXR配体展示出一些与传统激动剂不同的特性。伊维菌素诱导FXR以竞争性地聚集辅抑制子多肽NCoR-2与生物素标记的辅激活子多肽SRC1-2。作为传统的全激动剂，GW4064未能诱导NCoR-2向FXR的任何聚集(图9A)。除了向FXR聚集辅激活子之外(图10和11A-11C)，伊维菌素、多拉克丁或阿巴克丁也在AlphaScreen检测中诱导FXR以聚集辅抑制子多肽NCoR-2(图9A和9B)，其证明了除了它们的弱转录活性之外，它们表征为部分激动剂。相对地，依立诺克丁或莫昔克丁未能诱导NCoR-2向FXR的任何聚集，与它们和伊维菌素、多拉克丁和阿巴克丁相比的其他区别一致。

区分阿维菌素类似物与FXR相互作用的结构基础

如图10所示，阿巴克丁和伊维菌素之间的分子结构的唯一区别是在C22-C23分别为双键和单键。多拉克丁在R1基团为环己烷基团，从而区别于阿巴克丁。依立诺克丁在R2基团为乙酰胺基团，从而区别于阿巴克丁。伊维菌素主要通过与亲脂性的氨基酸残基的疏水作用以及与Arg264主链上的羰基氧和Asn283侧链上的酰胺羰基氧相对应的两个氢键相互作用锚接于FXR的配体结合域(LBD)(图12A)。从图11A-11C和13A-13B中的结构对接模型，与伊维菌素的结合比较，阿巴克丁(阿维菌素)在C22-C33的双键不影响其与FXR的结合。多拉克丁在R1的环己烷基团位于配体结合口袋的宽敞的中心，并且它与伊维菌素中的一样也是疏水基团，不影响其与FXR的结合。对于依立诺克丁，尽管依立诺克丁的主要部分在配体结合口袋总匹配良好，但是替代的乙酰胺基团具有几个对其在疏水性配体结合口袋中结合不利的影响。它增加了配体的极性，并且依立诺克丁的乙酰胺基团与Asn293和Arg264的侧链干涉，或者甚至与整个螺旋3和在螺旋1和螺旋2之间的环干涉。它也破坏与主链上的Arg264的酰胺羰基氧的氢键相互作用。关于莫昔克丁，大体积的杂环基团的丢失导致了疏水作用的不足，使其难以在疏水口袋中配合良好。

为了验证口袋残基在大环内酯结合与FXR激活中的作用，使几个与多拉克丁和阿巴克丁的不同基团接触的关键FXR残基产生了突变。检测了这些突变的FXR在使用全长度的FXR和EcRE报告因子的基于细胞的报告因子检测中的响应于化合物的转录活性。如图15A和15D所示，A291W突变体减小了对于阿维菌素的长链杂环基团的FXR口袋的尺寸，从而阻止了这些大体积的阿维菌素配体的结合。如同预期，此突变体完全破坏了FXR通过多拉克丁、阿巴克丁和伊维菌素的转录活性。R331M突变体通过将对应的极性精氨酸的残基置换为非极性的蛋氨酸残基，应该加强疏水作用。因此，此突变体提高了被阿维菌素配体激活的能力(图15B和15D)。对于H447F突变体，具有咪唑基团侧链的组氨酸的对应残基被具有苯环侧链的非极性的苯丙氨酸替换。同样地，此突变体由于疏水作用的巩固，提高了响应于多拉克丁和阿巴克丁的FXR活性(图15C和15D)。

总而言之，诱变分析在不同的阿维菌素和莫昔克丁对FXR的激活上显示了截然不同的结果，突出显示了FXR在识别不同的大环内酯中的结构基础。

讨论

阿维菌素在全球市场中是主要的抗寄生虫药。由于其优秀的效能和巨大的市场需求，基于阿维菌素半合成了一系列类似物。与阿维菌素化学上相关的米尔贝霉素，是一组半衰期比阿维菌素长的大环内酯。这些抗寄生虫药共同具有类似的作用机理，即通过增强谷氨酸盐在无脊椎动物特异的谷氨酸门控氯离子通道的效果，以及与γ-氨基丁酸(GABA)受体结合，阻断寄生虫的神经系统，导致寄生虫死亡。与在线虫的肌肉神经接点和中央腹神经索中的分布不同，GABA受体主要存在于哺乳动物的大脑中。阿维菌素和米尔贝霉素以治疗剂量，在哺乳动物中不能穿过血脑屏障，从而保证了它们在哺乳动物中的使用的安全性。

通过与核受体FXR结合，伊维菌素的治疗降低了糖尿病小鼠中的血清葡萄糖和胆固醇水平。由于阿维菌素类似物具有与伊维菌素接近的结构关系，并且在各种动物物种中具有类似的毒性效应，此发现提出了是否所有的阿维菌素类似物都能够调节代谢的问题。考虑到FXR脂质代谢的决定性作用，研究了伊维菌素在NAFLD上的治疗效果。为了探索伊维菌素作用的机理以及药物干预的更多选择，研究了阿维菌素类似物阿巴克丁、多拉克丁和依立诺克丁，以及源自米尔贝霉素的莫昔克丁。

首先，伊维菌素在肝脏脂质积累上具有显著的有利效果。其次，并非所有选择的大环内酯具有与伊维菌素相比类似的效果。在选择的类似物中，依立诺克丁和莫昔克丁的治疗在患有肥胖和糖尿病的高脂肪饲料KK-Ay小鼠中没有显示任何治疗效果。多拉克丁和阿巴克丁在NAFLD的典型症状上展示出与伊维菌素类似的优秀的效果。他们显著地降低了肥胖和糖尿病小鼠的肝脏中的脂质积累，减小了肝脏体重比率以及降低了体重。它们也降低了血清甘油三酯和胆固醇水平，以及血清葡萄糖水平，并且提高了胰岛素敏感性。更重要地，三种阿维菌素的这些功能依赖于核受体FXR。在FXR缺陷的小鼠中，它们未能显示出对提到的症状的任何改善。体外生物化学方法和基于细胞的体内方法对上述现象给出了明确解释。以伊维菌素类似，多拉克丁和阿巴克丁诱导FXR以聚集辅因子，并且激活FXR转录活性。与FXR结合的伊维菌素的晶体结构、多拉克丁和阿巴克丁在FXR的配体结合口袋中的对接模型以及诱变检测都证明了这些阿维菌素类似物是FXR的配体。相对地，依立诺克丁和莫昔克丁没有诱导包括辅激活子和辅抑制子的任何辅因子向FXR的聚集或者影响FXR的转录活性，表明它们不是FXR的配体。因此，结合于FXR的阿维菌素类似物可以用于治疗NAFLD。

多拉克丁、阿巴克丁和伊维菌素也表现出作为部分FXR激动剂，并且可以为这些抗寄生虫FXR配体的独特性质提供分子机理。首先，通过这些化合物的用于FXR转录活性的能力弱于全激动剂GW4064。第二个原因是与FXR的明显偏低的结合亲和性。最重要的是，关于部分激动剂还有第三个特性，即它们能够诱导辅抑制子NCoR-2的聚集。伊维菌素结合的FXR的晶体结构以及多拉克丁和阿巴克丁在FXR的配体结合口袋中的完美对接显示出松散的AF-2螺旋的现象，解释了通过这些阿维菌素诱导的NCoR-2的聚集。还有其他证据，即部分激动剂促进了辅抑制子的聚集。例如，VDR配体能够促进辅激活子SRC1和辅抑制子SMRT和NCoR两者的聚集。观察到NCoR和SMRT两者与糖皮质激素受体的激动剂和拮抗剂复合体有联系。因此，本发明中的FXR配体阿维菌素被认为是部分激动剂，与传统的全激动剂或拮抗剂不同。

除作为基底通用方法的饮食和体育运动之外，没有实际可用于治疗NAFLD的特异性药物。由此，与肥胖的全球流行以及其与代谢综合征和癌症的强烈关联一起，需要治疗NAFLD的特异性肝脏药物。与诸如PPARg或RXR的核受体的配体相比，已经表征的FXR的配体非常有限。鉴于肝脏中FXR的重要性，有希望找到治疗NAFLD的潜在配体。在本发明中，检测了一系列用于治疗NAFLD的药物。因为阿维菌素类似物在治疗动物和人的寄生虫感染中数十年的使用，已经验证了阿维菌素类似物的安全性。鉴于在代谢上的优秀治疗效果，FXR配体阿维菌素能够提供一类新型的治疗包括NAFLD、NASH、高血脂和糖尿病的代谢综合征的有前途的药物。此外，FXR配体阿维菌素类似物与非FXR配体阿维菌素类似物之间的结构差异，提供了设计靶向核受体FXR的药物的新的见解和策略。

Claims (2)

1.阿维菌素或其药学上可接受的盐在制备治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物中的用途。

2.阿维菌素类似物或其药学上可接受的盐在制备治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物中的用途，所述阿维菌素类似物为伊维菌素或多拉克丁。