CN105462690B - 一种艾叶精油及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种艾叶精油，所述艾叶精油的制备包括如下步骤：A）向环己烷中加入乙醇，加热回流，分液收集萃取后环己烷；B）将艾叶粉碎，加入所述萃取后环己烷，浸泡，超声波提取，过滤，收集滤液；C）向所述滤液中加入乙醇，混匀，分液收集含艾叶油的乙醇；D）将所述含艾叶油的乙醇通过硅胶柱，然后用乙醇清洗硅胶柱，再用含乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱硅胶柱，收集洗脱液；E）将所述洗脱液旋转蒸发，经二次冷凝分离，得到艾叶精油。本发明属于生物技术领域，本发明提供的艾叶精油不含常规艾叶挥发油中的蜡质成分，艾叶精油的主要成分为极性较大的物质，具有分子量小，挥发性高，具有天然芳香，不含蜡质成分，易被皮肤吸收等优点。

Description

一种艾叶精油及其制备方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种艾叶精油及其制备方法。
背景技术
作为中医常用药材之一的艾叶，属于多年生菊科草本植物——艾的干燥叶片。传统中医学将艾叶归类为一种祛寒药材，张仲景所著《金匮要略》以及《伤寒论》分别收录用艾入药的柏叶汤和胶艾汤，至今仍被广泛使用。现代药理研究发现：艾叶具有抗肿瘤、抗病毒、抗细菌、止咳、平喘、祛痰、解热以及增强免疫力等作用。传统艾叶入药通常采用艾灸的方式进行，在实际操作过程中，可能会因为操作失误造成患者皮肤或者经络受损，甚至引起火灾，造成安全隐患。
对艾叶进行提取，可以得到艾叶挥发性油。艾叶挥发油的提取方法主要包括：水蒸气蒸馏法、超临界二氧化碳提取法、微波萃取法和石油醚提取法。中国专利申请201210117605.X公开了一种艾叶挥发油，由水浸泡过的艾叶经水蒸气蒸馏收集蒸馏液，静置冷却分层后取上层的油层得到。水蒸气蒸馏法是艾叶挥发油的常用提取方法，但存在提取效率低，难以提取热敏性活性成分，提取得到的艾叶挥发油成分混杂等缺点。
中国专利申请201410450639.X公开了一种艾叶挥发油的提取方法，包括喷洒含纤维素酶的缓冲溶液到艾叶中密封发酵后，用乙醇溶液逆流超声提取得到提取液，再经有机溶剂萃取，干燥，减压浓缩得到。虽然该专利申请公开的提取方法可以增加有效成分的溶出，但存在操作步骤复杂，周期长，提取得到的艾叶挥发油成分混杂等缺点。
发明内容
为解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种艾叶精油，通过环己烷提取、乙醇萃取、过硅胶柱等步骤制备得到。本发明提供的艾叶精油不含常规艾叶挥发油中的蜡质成分，艾叶精油的主要成分为极性较大的物质，具有分子量小，挥发性高，具有天然芳香，不含蜡质成分，在保留活性成分的同时去除了部分有毒成分，易被皮肤吸收等优点。
本发明提供一种艾叶精油，所述艾叶精油的制备包括如下步骤：
A）向环己烷中加入所述环己烷3~5倍重量的醇，加热回流，分液收集萃取后环己烷；
B）将艾叶粉碎，加入所述艾叶2~6倍重量的所述萃取后环己烷，浸泡，超声波提取，过滤，收集滤液；
C）向所述滤液中加入所述滤液1~4倍体积的乙醇，混匀，分液收集含艾叶油的乙醇；
D）将所述含艾叶油的乙醇通过硅胶柱，然后用所述含艾叶油的乙醇2~5倍体积的乙醇清洗硅胶柱，再用含乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱硅胶柱，收集洗脱液；
E）将所述洗脱液旋转蒸发，得到混合蒸汽，混合蒸汽通过一级冷凝器，收集50~70℃的馏出液，将该馏出液通过二级冷凝器，得到15~25℃的冷凝液，冷凝液通过油水分离装置，得到艾叶精油。
通过对环己烷萃取，可以除去环己烷中的醇溶性成分，进而利于终产物的纯度提高；通过加入乙醇清洗硅胶柱，可以除去蜡质等艾叶挥发油成分；通过用含乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱硅胶柱，收集洗脱液，通过旋转蒸发和两级冷凝收集，浓缩得到极性较大的物质，如柠檬烯、α-侧柏酮和α-水芹烯等。本发明中涉及的环己烷为市售环己烷。
优选地，所述步骤A）中，醇为乙醇。
优选地，所述超声波的频率为15~25kHZ。
优选地，所述含乙酸乙酯的环己烷溶液为含20%体积百分含量乙酸乙酯的环己烷溶液。
相应地，本发明还提供艾叶精油的制备方法，包括如下步骤：
A）向环己烷中加入所述环己烷3~5倍重量的醇，加热回流，分液收集萃取后环己烷；
B）将艾叶粉碎，加入所述艾叶2~6倍重量的所述萃取后环己烷，浸泡，超声波提取，过滤，收集滤液；
C）向所述滤液中加入所述滤液1~6倍体积的乙醇，混匀，分液收集含艾叶油的乙醇；
D）将所述含艾叶油的乙醇通过硅胶柱，然后用所述含艾叶油的乙醇2~5倍体积的乙醇清洗硅胶柱，再用含乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱硅胶柱，收集洗脱液；
E）将所述洗脱液旋转蒸发，得到混合蒸汽，混合蒸汽通过一级冷凝器，收集50~70℃的馏出液，将该馏出液通过二级冷凝器，得到15~25℃的冷凝液，冷凝液通过油水分离装置，得到艾叶精油。
优选地，所述步骤A）中，醇为乙醇。
优选地，所述超声波的频率为15~25kHZ。
优选地，所述含乙酸乙酯的环己烷溶液为含20%体积百分含量乙酸乙酯的环己烷溶液。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明提供了一种艾叶精油，通过环己烷提取、乙醇萃取、过硅胶柱等步骤制备得到，该艾叶精油不含常规艾叶挥发油中的蜡质成分，艾叶精油的主要成分为极性较大的物质，具有分子量小，挥发性高，具有天然芳香，不含蜡质成分，在保留活性成分的同时去除了部分有毒成分，易被皮肤吸收等优点。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明做进一步的详细说明。
实施例一 艾叶精油
向5kg环己烷中加入15kg乙醇，90℃水浴加热回流2h，分液收集萃取后环己烷；将0.5kg艾叶粉碎，加入2.5kg所述萃取后环己烷，浸泡48h，20kHZ频率超声波提取1h，过滤，收集滤液；向所述滤液中加入所述滤液2倍体积的乙醇，混匀，分液收集含艾叶油的乙醇；将所述含艾叶油的乙醇以1ml/min的流速通过硅胶柱，然后用所述含艾叶油的乙醇5倍体积的乙醇清洗硅胶柱，再用含20%（v/v）乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱硅胶柱，洗脱3个柱体积后，用气泵排空硅胶柱中的含乙酸乙酯的环己烷溶液，收集洗脱液；将洗脱液旋转蒸发，得到混合蒸汽，混合蒸汽通过一级冷凝器，收集50~60℃的馏出液，将该馏出液通过二级冷凝器，得到15~25℃的冷凝液，冷凝液通过油水分离装置，得到艾叶精油1.04g。
实施例二 艾叶精油
向5kg环己烷中加入25kg乙醇，90℃水浴加热回流2h，分液收集萃取后环己烷；将0.5kg艾叶粉碎，加入1kg所述萃取后环己烷，浸泡72h，15kHZ频率超声波提取3h，过滤，收集滤液；向所述滤液中加入所述滤液4倍体积的乙醇，混匀，分液收集含艾叶油的乙醇；将所述含艾叶油的乙醇以1ml/min的流速通过硅胶柱，然后用所述含艾叶油的乙醇2倍体积的乙醇清洗硅胶柱，再用含20%（v/v）乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱硅胶柱，洗脱3个柱体积后，用气泵排空硅胶柱中的含乙酸乙酯的环己烷溶液，收集洗脱液；将洗脱液旋转蒸发，得到混合蒸汽，混合蒸汽通过一级冷凝器，收集55~65℃的馏出液，将该馏出液通过二级冷凝器，得到15~25℃的冷凝液，冷凝液通过油水分离装置，得到艾叶精油0.96g。
实施例三 艾叶精油
向5kg环己烷中加入20kg乙醇，90℃水浴加热回流2h，分液收集萃取后环己烷；将0.5kg艾叶粉碎，加入2kg所述萃取后环己烷，浸泡48h，25kHZ频率超声波提取2h，过滤，收集滤液；向所述滤液中加入所述滤液6倍体积的乙醇，混匀，分液收集含艾叶油的乙醇；将所述含艾叶油的乙醇以1ml/min的流速通过硅胶柱，然后用所述含艾叶油的乙醇3倍体积的乙醇清洗硅胶柱，再用含20%（v/v）乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱硅胶柱，洗脱3个柱体积后，用气泵排空硅胶柱中的含乙酸乙酯的环己烷溶液，收集洗脱液；将洗脱液旋转蒸发，得到混合蒸汽，混合蒸汽通过一级冷凝器，收集60~70℃的馏出液，将该馏出液通过二级冷凝器，得到15~25℃的冷凝液，冷凝液通过油水分离装置，得到艾叶精油1.02g。
对比例一 艾叶精油
向5kg环己烷中加入15kg乙醇，90℃水浴加热回流2h，分液收集萃取后环己烷；将0.5kg艾叶粉碎，加入2.5kg所述萃取后环己烷，浸泡48h，20kHZ频率超声波提取1h，过滤，收集滤液；向所述滤液中加入所述滤液2倍体积的乙醇，混匀，分液收集含艾叶油的乙醇；将所述含艾叶油的乙醇以1ml/min的流速通过硅胶柱，再用含20%（v/v）乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱硅胶柱，洗脱3个柱体积后，用气泵排空硅胶柱中的含乙酸乙酯的环己烷溶液，收集洗脱液；将洗脱液旋转蒸发，得到混合蒸汽，混合蒸汽通过一级冷凝器，收集50~60℃的馏出液，将该馏出液通过二级冷凝器，得到15~25℃的冷凝液，冷凝液通过油水分离装置，得到艾叶精油1.21g。
试验例一艾叶精油的肝毒性试验
取昆明种小鼠40只，雌雄各半，随机分成实施例一组、实施例二组、对比例一组和对照组4组，每组10只，各组的艾叶精油给药剂量为2g/kg，灌胃1次，实施例一组将实施例一制得的艾叶精油使用花生油稀释后灌胃，实施例二组将实施例二制得的艾叶精油使用花生油稀释后灌胃，对比例一组将对比例一制得的艾叶精油使用花生油稀释后灌胃，对照组仅灌胃花生油。灌胃6h后，摘小鼠眼球取血，离心获得血清，经生化分析仪测定ALT 和AST等指标，脱颈椎处死小鼠后，取肝脏组织进行病理切片观察，结果如表1所示。对实施例一组和实施例二组按5g/kg的剂量连续灌胃4周，未发现小鼠出现肝毒性现象，而对比例一组的小鼠出现肝细胞坏死，炎症细胞浸润，ALT 和AST显著升高，超出了正常范围。
从表1可知，本发明提供的艾叶精油具有较好的安全性能，可用于食品、药品和化妆品等领域；而对比例一制得的艾叶精油具有肝毒性，未经处理无法进行产业化应用。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种艾叶精油，其特征在于：所述艾叶精油的制备包括如下步骤：
A）向环己烷中加入所述环己烷3~5倍重量的乙醇，加热回流，分液收集萃取后环己烷；
B）将艾叶粉碎，加入所述艾叶2~6倍重量的所述萃取后环己烷，浸泡，超声波提取，过滤，收集滤液；
C）向所述滤液中加入所述滤液1~4倍体积的乙醇，混匀，分液收集含艾叶油的乙醇；
D）将所述含艾叶油的乙醇通过硅胶柱，然后用所述含艾叶油的乙醇2~5倍体积的乙醇清洗硅胶柱，再用含乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱硅胶柱，收集洗脱液；
E）将所述洗脱液旋转蒸发，得到混合蒸汽，混合蒸汽通过一级冷凝器，收集50~70℃的馏出液，将该馏出液通过二级冷凝器，得到15~25℃的冷凝液，冷凝液通过油水分离装置，得到艾叶精油。
2.根据权利要求1所述的艾叶精油，其特征在于：所述超声波的频率为15~25kHZ。
3.根据权利要求1所述的艾叶精油，其特征在于：所述含乙酸乙酯的环己烷溶液为含20%体积百分含量乙酸乙酯的环己烷溶液。
4.根据权利要求1所述的艾叶精油的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
A)向环己烷中加入所述环己烷3~5倍重量的乙醇，加热回流，分液收集萃取后环己烷；
B)将艾叶粉碎，加入所述艾叶2~6倍重量的所述萃取后环己烷，浸泡，超声波提取，过滤，收集滤液；
C)向所述滤液中加入所述滤液1~4倍体积的乙醇，混匀，分液收集含艾叶油的乙醇；
D)将所述含艾叶油的乙醇通过硅胶柱，然后用所述含艾叶油的乙醇2~5倍体积的乙醇清洗硅胶柱，再用含乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱硅胶柱，收集洗脱液；
E)将所述洗脱液旋转蒸发，得到混合蒸汽，混合蒸汽通过一级冷凝器，收集50~70℃的馏出液，将该馏出液通过二级冷凝器，得到15~25℃的冷凝液，冷凝液通过油水分离装置，得到艾叶精油。
5.根据权利要求4所述的艾叶精油的制备方法，其特征在于：所述超声波的频率为15~25kHZ。
6.根据权利要求4所述的艾叶精油的制备方法，其特征在于：所述含乙酸乙酯的环己烷溶液为含20%体积百分含量乙酸乙酯的环己烷溶液。
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