CN105461697A - 喹唑啉酮类parp-1抑制剂及含有它们的组合物和抗肿瘤用途 - Google Patents

喹唑啉酮类parp-1抑制剂及含有它们的组合物和抗肿瘤用途 Download PDF

Info

Publication number
CN105461697A
CN105461697A CN201510223405.6A CN201510223405A CN105461697A CN 105461697 A CN105461697 A CN 105461697A CN 201510223405 A CN201510223405 A CN 201510223405A CN 105461697 A CN105461697 A CN 105461697A
Authority
CN
China
Prior art keywords
substituted
straight
quinazoline
diketone
luorobenzyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201510223405.6A
Other languages
English (en)
Inventor
徐柏玲
陈晓光
姚海平
季鸣
金晶
周洁
王珂
赵大龙
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Collab Pharma Co ltd
Institute of Materia Medica of CAMS
Original Assignee
Beijing Collab Pharma Co ltd
Institute of Materia Medica of CAMS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Collab Pharma Co ltd, Institute of Materia Medica of CAMS filed Critical Beijing Collab Pharma Co ltd
Priority to CN201510223405.6A priority Critical patent/CN105461697A/zh
Publication of CN105461697A publication Critical patent/CN105461697A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/95—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with hetero atoms directly attached in positions 2 and 4
    • C07D239/96—Two oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一类新的喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮类PARP-1抑制剂、及其制法和药物组合物与用途。具体而言，本发明涉及通式I所示的喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮类衍生物，其可药用盐，及其制备方法，含有一个或多个该类化合物的组合物，和该类化合物在制备、预防和/或治疗肿瘤药物中的用途。

Description

喹唑啉酮类PARP-1抑制剂及含有它们的组合物和抗肿瘤用途
技术领域
本发明涉及式I所示新的1-(芳甲基)-喹唑啉-2，4-二酮类PARP-1抑制剂，生理上可接受的盐，及其制备方法，含有所述化合物的药物组合物，以及所述化合物作为药物，尤其是作为抗肿瘤药物或作为肿瘤药物增敏剂与抗肿瘤药物联合应用。
背景技术
聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly(ADP-Ribose)polymerase，PARP)是真核细胞内广泛存在的一种重要的蛋白修饰酶，对其靶蛋白进行多聚二磷酸腺苷核糖修饰。现已发现包括PARP-1、PARP-2、PARP-3等在内的17种亚型，其中PARP-1比例最大，其相关研究也最为深入，发挥着90％以上的功能，PARP-1的一级结构在真核生物中高度保守(如人和小鼠氨基酸序列具有92％的同源性)(VirágLetal.，Pharmacol.Res.2002，45，375-429；FerrarisDL，JMedChem，2010，53，4561-4584)。已有研究表明：PARP-1是DNA损伤修复通路中重要的功能蛋白之一，抑制PARP-1的活性，是潜在的非常有前景的创制抗肿瘤药物途径之一(AméJCetal.，Bioessays，2004，26，882-893)。
许多化疗药物都是通过损伤DNA达到杀伤肿瘤细胞的目的，肿瘤细胞也会针对不同的化疗药物，启动修复途径，对抗化疗药物，产生耐药性。其中PARP-1的激活就是重要的修复途径之一。因此，抑制PARP-1酶活性，可对抗肿瘤细胞的耐药性，增加化疗药物的敏感性。因此，PARP-1抑制剂与细胞毒化疗药物联合应用，是潜在的肿瘤治疗策略，也是PARP-1抑制剂最开始得到关注的重要原因之一(EllisenLWetal.，CancerCell，2011，19，165-167；TentoriLetal.，PharmacolRes，2005，52，25-33)。
BRCA1和BRCA2在基因同源重组修复双链断裂DNA过程中具有重要作用，对于BRCA缺陷肿瘤细胞，PARP抑制剂可以阻断单链断裂DNA损伤修复，BRCA缺陷又使得双链断裂DNA损伤修复功能丧失，最终导致肿瘤细胞凋亡(DrewYetal.，DrugResistUpdat，2009，12，153-156)。这一机制使得BRCA缺陷肿瘤对PARP1抑制剂更敏感，同时也开拓了“合成致死性”(Syntheticlethality)这一概念，即PARP-1和BRCA1/2二者功能之一缺失是允许的，但二者功能均缺失却是致死的(FarmerHetal.，Nature，2005，434，917-921；BryantHEetal.，Nature，2005，434，913-917)。
目前处于临床试验阶段的PARP抑制剂至少有9种，其中Abbott公司开发的ABT-888在治疗多种肿瘤方面处于II/III期临床阶段；阿斯利康公司开发的AZD2281在治疗乳腺癌和卵巢癌方面目前处于II/III期临床阶段；辉瑞公司开发的AG-014699在治疗乳腺癌、卵巢癌等方面目前正处于II期临床阶段；默克公司开发的MK-4827在用于治疗实体瘤反面目前也处于I/II期临床阶段(CurtinNJetal.，DiscovTodayDisModels，2012，9，e51-e58)。
本专利设计合成了新结构的喹唑啉二酮类PARP-1抑制剂，旨在寻找抗肿瘤活性强、药代性质改善的新型抗肿瘤药物或者是抗肿瘤药物的增敏剂。
发明内容
本发明的首要目的在于提供式I所示的喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮类衍生物及其前体、立体异构体和生理上可接受的盐。
本发明的第二发明目的在于提供式I所示的喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮类衍生物，立体异构体和生理上可接受的盐作为PARP-1抑制剂及其潜在的药物用途。
本发明的第三发明目的在于提供式I所示化合物及其组合物作为抗肿瘤药物的用途。
本发明的第四发明目的在于提供式I所示喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮类化合物的制备方法。
为了完成本发明的目的，本发明采用如下技术方案：
本发明涉及具有通式I的新型化合物：
在式I中，
R1、R2、R3和R4、可以单独取代和/或同时多取代，R1、R2、R3和R4独立的选自氢、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基硫基、C1-6烷氧C1-6烷基、氨基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-6的烯烃、卤素、硝基、氰基；
R5选自氢、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基硫基、C1-4烷氧C1-4烷基、氨基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-4的烯烃、卤素、硝基、氰基；
n选自1、2、3的整数，
A，B，C，D可以单独取代和/或同时多取代，A，B，C，D独立的选自氢、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基硫基、C1-6烷氧C1-6烷基、氨基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-6的烯烃；
X选自O、NRb、S，SO，SO2，C＝O；
当X为NRb时，Rb选自氢，取代或非取代的C1-6直链或支链烷基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基羰基，取代或非取代的C1-6直链或支链烷基酰基；
其中，以上所述的“取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基硫基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氨基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基酰基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基羰基”上的取代基是一个或多个，独立的选自：羟基、巯基、氨基、醛基、羧基、氨基甲酰基、卤素、硝基、氰基；
其中，以上所述的“取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基硫基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氨基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基酰基”上的取代基是一个或多个，独立的选自：羟基、巯基、氨基、醛基、羧基、氨基甲酰基、卤素、硝基、氰基。
本发明优选的化合物及其药用盐，包括但不限定式IA所示的化合物，
在式IA中，
R1、R2、R3和R4、可以单独取代和/或同时多取代，R1、R2、R3和R4独立的选自氢、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基硫基、C1-4烷氧C1-4烷基、氨基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-4的烯烃、卤素、硝基、氰基；
R5选自氢、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基硫基、C1-4烷氧C1-4烷基、氨基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-4的烯烃、卤素、硝基、氰基；
A，B，C，D可以单独取代和/或同时多取代，A，B，C，D独立的选自氢、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基硫基、C1-4烷氧C1-4烷基、氨基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-4的烯烃；
X选自O、NRb、S，SO，SO2，C＝O；
当X为NRb时，Rb选自氢，取代或非取代的C1-4直链或支链烷基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基羰基，取代或非取代的C1-4直链或支链烷基酰基；
其中，以上所述的“取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基硫基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氨基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基酰基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基羰基”上的取代基是一个或多个，独立的选自：羟基、巯基、氨基、醛基、羧基、氨基甲酰基、卤素、硝基、氰基。
所述的取代或非取代的C1-4直链或支链烷基选自三氟甲基，三氟乙基。
为了完成本发明目的，本发明优选的化合物包括但不限定下列化合物
(S)-1-(3-(3-乙基哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮2，2，2-三氟乙酸盐
(R)-1-(3-(3-乙基哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮2，2，2-三氟乙酸盐
1-(3-(吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
1-(3-(硫代吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(S)-2-乙基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
(R)-2-乙基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙酰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
1-(3-(1-氧代硫代吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
1-(3-(1，1-二氧代硫代吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)-5-氟喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)-6-氟喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(3S，5R)-3，5-二甲基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
1-(3-((3S，5R)-3，5-二甲基哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(正丙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(正丙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-乙基-4-甲基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-乙基-4-异丙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-乙基-4-环丙甲酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-乙基-4-乙酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-乙基-4-三氟乙酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-乙基-4-正丙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-乙基-4-乙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-乙基-4-环丙甲基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-乙基-4-丙酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
(R)-1-(3-(3-乙基-4-三氟乙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
1-(3-(4-氧代哌啶-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮。
本发明中优选的：
C1-6烷基包括但不限定于CH3、C2H5、n-C3H7、CH(CH3)2、n-C4H9、CH2CH(CH3)2、正戊烷基、异戊烷基、C6H13；
C1-4烷基包括但不限定于CH3、C2H5、n-C3H7、CH(CH3)2、n-C4H9、CH2CH(CH3)2；
C1-4烷氧基包括但不限定于OCH3、OC2H5、n-OC3H7、OCH(CH3)2、n-OC4H9、OCH2CH(CH3)2；
C1-4烷氨基包括但不限定于NCH3、NC2H5、n-NC3H7、NCH(CH3)2、n-NC4H9、NCH2CH(CH3)2；
-CO-C1-4烷基包括但不限定于-COCH3、-COC2H5、n-COC3H7、-COCH(CH3)2、n-COC4H9、COCH2CH(CH3)2；
-COO-C1-4烷基包括但不限定于COOCH3、COOC2H5、n-COOC3H7、COOCH(CH3)2、n-COOC4H9、COOCH2CH(CH3)2；
-O-CO-C1-4烷基包括但不限定于-O-CO-CH3、-O-CO-C2H5、n--O-CO-C3H7、-O-CO-CH(CH3)2、n--O-CO-C4H9、-O-CO-CH2CH(CH3)2；
根据本发明的第二方面，涉及本发明化合物的制备方法。本发明采用如下方法制备式I所示化合物：包含R1-R4取代的不同喹唑啉二酮与包含R5取代的3-甲氧羰基溴苄在HMDS的作用下分别发生选择性的烷基化反应，经水解后包含R1-R5取代的不同的3-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)苯甲酸再与取代的哌嗪或哌啶进行缩合，得到部分1-苄基喹唑啉二酮类PARP-1抑制剂，这部分化合物可经过进一步的脱保护基、烷基化、酰化、氧化反应得到另一部分1-苄基喹唑啉二酮类衍生物，部分实施例化合物经3-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)苯甲酸甲酯直接氨解得到。
试剂及反应条件：(a)urea，140℃，6h；(b)i)HMDS，conc.H2SO4，toluene，reflux，2h，ii)substitutedmethyl5-(bromomethyl)-2-fluorobenzoate，145℃，3h，iii)MeOH，hexane，70℃，30min；(c)LiOH，MeOH，H2O，THF，55℃，2h；(d)HATU，HOBT，DIEA，DMF，overnight.
根据本发明的第三方面涉及一种药物组合物，所述药物组合物包括作为有效成分的本发明所述的化合物或其可药用盐和药学上的常用载体。
本发明还提供了以本发明化合物作为活性成份的药物组合物，该组合物包括本发明中至少一种化合物和在药学上可接受的载体。所述的药物组合物选自片剂、胶囊、丸剂、注射剂、缓释制剂、控释制剂或各种微粒给药系统。该药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过将本发明化合物与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅剂结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。本发明化合物在其药物组合物中的含量通常为0.1-95重量％。
本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。
给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。
本发明化合物可以制成普通制剂、也制成是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
这些制剂是按照本领域的技术人员所熟知的方法制备的。为制造片剂、胶囊剂、包衣剂所用的辅料是常规用的助剂，例如淀粉，明胶，阿拉伯胶，硅石，聚乙二醇，液体剂型所用的溶剂例如有水，乙醇，丙二醇，植物油类如玉米油，花生油，橄榄油等。含有本发明化合物的制剂中还可有其他助剂，例如表面活性剂，润滑剂，崩解剂，防腐剂，矫味剂，色素等。
为了将本发明化合物制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等；粘合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。
还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。
为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分本发明化合物与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备本发明化合物片剂的各稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备本发明化合物的胶囊剂。
为将本发明化合物制成注射剂，可以用水、乙醇、异丙醇、丙二醇或它们的混合物作溶剂并加入适量本领域常用的增溶剂、助溶剂、pH调剂剂、渗透压调节剂。增溶剂或助溶剂可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羟丙基-β-环糊精等；pH调剂剂可以是磷酸盐、醋酸盐、盐酸、氢氧化钠等；渗透压调节剂可以是氯化钠、甘露醇、葡萄糖、磷酸盐、醋酸盐等。如制备冻干粉针剂，还可加入甘露醇、葡萄糖等作为支撑剂。
此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。
为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。
本发明化合物药物组合物的给药剂量依照所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的个体情况，给药途径和剂型等可以有大范围的变化。一般来讲，本发明化合物的每天的合适剂量范围为0.001-150mg/Kg体重，优选为0.01-100mg/Kg体重。上述剂量可以一个剂量单位或分成几个剂量单位给药，这取决于医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。
本发明的化合物或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用。当本发明的化合物与其它治疗药物存在协同作用时，应根据实际情况调整它的剂量。
根据本发明的第四方面，本发明还涉及本发明所述的化合物或其药用盐在制备预防和\或治疗肿瘤有关的疾病的药物中的应用。所述的肿瘤选自黑色素瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、肝癌、口腔表皮癌、宫颈癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌、膀胱癌、神经胶质瘤。
有益技术效果：
该专利申请喹唑啉酮PARP1抑制剂具有非常强的抑制活性，对PARP1抑制活性达到10-8至10-10M水平。该类化合物体现了非常强的体内抗肿瘤活性，以实施例10为代表，在多种肿瘤动物模型上体现了非常强的抑瘤活性，与临床侯选药物ABT-888或AZD-2281活性相当。值得注意的是，该化合物可透过血脑屏障，因此可用于脑瘤的治疗，并且药效学实验表明，该化合物对替莫唑胺耐药脑瘤有效。该类化合物的另一方面特点是，通过裸鼠体重检测和血液系统指标检测，该化合物具有较小的毒性，对血小板和白细胞的降低作用不显著；并且药代研究表明，肿瘤组织中药物浓度高，可进一步降低化合物的毒副作用。因此，该类化合物是潜在的高活性低毒性抗肿瘤药物。
附图说明
图1.在MX-1细胞中，实施例10对不同化疗药物的增敏作用
图2.在多种肿瘤细胞中，实施例10对TMZ的增敏活性
图3.实施例10对TMZ耐药脑胶质瘤的抗增殖活性
图4.在MX-1乳腺癌裸鼠移植瘤模型中，化合物10对TMZ的增敏作用
图5.在MX-1裸鼠移植瘤实验中，小鼠体重变化
图6.在MX-1裸鼠移植瘤实验中，血液指标变化
图7.在MX-1裸鼠移植瘤模型中，实施例10对CisPt的增敏活性
图8.在MCF-7裸鼠移植瘤模型中，实施例10对TMZ的增敏活性
图9.在U251/TMZ裸鼠移植瘤模型中，实施例10对TMZ的增敏活性
具体实施方式
以下将结合实施例对发明做进一步说明，但并不限制本发明的范围。
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或高分辨质谱(HRMS)来确定的。NMR的测定是用Varianmercury300或者Varianmercury400，测定溶剂为CDCl3、DMSO-d6、acetone-d6、CD3OD，内标为TMS，化学位移是以ppm作为单位给出。m.p.是以℃给出的熔点，温度未加校正。硅胶柱层析一般使用200～300目硅胶为载体。
缩写列表：
TLC：薄层色谱；
CDCl3：氘代氯仿
DMF：N，N-二甲基甲酰胺
min：分钟
h：小时
中间体的制备：
(一)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮的制备
将邻氨基苯甲酸(5g，36.46mmol)和尿素(50g，83.25mmol)加入反应瓶中，升温至150℃反应，7h后，降温至100℃，倒入少量水，减压抽滤，滤渣用少量水、甲醇洗，滤饼用1L热氢氧化钠溶液溶解，0℃下用浓盐酸调整pH至3，减压抽滤，滤饼用少量水洗。得4.5g白色固体，产率76.1％。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：11.26(s，1H)，11.12(s，1H)，7.88(d，J＝8.0Hz，1H)，7.60-7.65(m，1H)，7.14-7.19(m，2H).
m.p.＞250℃。
按照上述一般方法制备下列中间体
(二)5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯的制备
a)2-氟-5-溴甲基苯甲酸甲酯
将2-氟-5甲基苯甲酸甲酯(100mg，0.60mmol)、NBS(112mg，0.63mmol)、AIBN(60mg，0.36mmol)依次加入反应瓶中，加入CCl4(5mL)，Ar气氛下回流3h，原料少量剩余，减压蒸除溶剂，加入无水乙醚(10mL)，减压过滤，滤液旋干，柱层析，得20mg白色固体，产率13.5％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)：7.96-7.99(1H，m)，7.53-7.58(1H，m)，7.10-7.17(1H，m)，4.48(2H，s)，3.94(3H，s).
b)5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯
将喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮(411mg，2.54mmol)加入反应瓶中，加入无水甲苯(6mL)，随后加入HMDS(819mg，5.07mmol，2.5eq)、浓硫酸(4滴，0.1eq)，升温至回流，40min时反应完全，形成澄清溶液，减压旋干溶剂和剩余的HMDS。往反应残渣中加入2-氟-5-溴甲基苯甲酸甲酯(938mg，3.80mmol)，140℃下反应3h。降温至100℃，依次在反应瓶中加入二氧六环(3mL)和甲醇(2mL)，70℃下搅拌30min，降温至0℃，减压过滤得413mg白色固体，产率49.6％。
1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：11.47(brs，1H)，8.02(d，J＝5.7Hz，1H)，7.86(d，J＝4.5Hz，1H)，7.66(t，J＝5.7Hz，1H)，7.58-7.61(m，1H)，7.23-7.34(m，3H)，5.34(s，2H)，3.83(s，3H)；m.p.212-214℃.
按照上述一般方法制备下列中间体
(三)5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸的制备
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯(200mg，0.61mmol)加入反应瓶中，依次加入H2O(2mL)、THF(2mL)和MeOH(4mL)，加入LiOH(82mg，1.94mmol)，升温至55℃反应，55min后停止反应，减压蒸除有机溶剂，冰浴下调pH至2，减压过滤，水洗涤，干燥得176mg固体，产率91.9％。
1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：13.31(s，1H)，11.76(s，1H)，8.02(d，J＝5.7Hz，1H)，7.82(d，J＝4.2Hz，1H)，7.66(t，J＝5.7Hz，1H)，7.55-7.57(m，1H)，7.23-7.31(m，3H)，5.33(s，2H).m.p.＞250℃
按照上述一般方法制备下列中间体
实施例1
(S)-2-乙基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将3-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)苯甲酸(150mg，0.51mmol)、HATU(388mg，1.02mmol)、HOBt(138mg，1.02mmol)和TEA(104mg，1.02mmol)加入反应瓶中，加入约5mL无水DMF使溶解，r.t.下搅拌15min，随后滴加(S)-N-Boc-2-乙基哌嗪(153mg，0.76mmol)的DMF溶液到反应液中，r.t.下搅拌过夜，减压蒸除溶剂，加入约20mLDCM，饱和NaHCO3洗涤(25mL×2)，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析得150mg固体，产率65.8％。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.70-8.73(m，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.56-7.62(m，1H)，7.24-7.35(m，3H)，7.05-7.10(m，2H)，5.32(s，2H)，4.58-4.62(m，1H)，3.84-4.22(m，2H)，2.91-3.57(m，4H)，1.46-1.69(m，2H)，1.45-1.47(m，9H)，0.64-1.27(m，5H)；m.p.67-68℃.
实施例2
(R)-2-乙基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将3-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)苯甲酸(250mg，0.80mmol)、EDC(307mg，1.6mmol)、HOBT(217mg，1.6mmol)和DIEA(162mg，1.60mmol)加入反应瓶中，加入约3mL无水DMF使溶解，r.t.下搅拌15min，随后滴加(R)-N-Boc-2-乙基哌嗪(258mg，1.20mmol)的DMF溶液到反应液中，r.t.下搅拌过夜，将反应液倒入100mL水中，用100mLDCM萃取，有机层依次用1MHCl(100mL)、饱和NaCl(100mL)和水(100mL)洗涤，减压浓缩，硅胶柱层析，得236mg固体，产率58.1％。
1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：11.74(s，1H)，8.02(d，J＝7.5Hz，1H)，7.64(m，1H)，7.22-7.49(m，5H)，5.32(s，2H)，4.35-4.40(m，1H)，3.74-4.04(m，2H)，2.75-3.43(m，4H)，1.38-1.40(m，9H)，0.46-1.30(m，5H)；m.p.72-73℃.
实施例3
1-(3-(吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将3-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)苯甲酸(180mg，0.58mmol)、EDC(223mg，1.16mmol)、HOBT(157mg，1.16mmol)和DIEA(118mg，1.16mmol)加入反应瓶中，加入约3mL无水DMF使溶解，r.t.下搅拌15min，随后滴加吗啉(75mg，0.86mmol)的DMF溶液到反应液中，r.t.下搅拌过夜，将反应液倒入100mL水中，用100mLDCM萃取，有机层依次用1MHCl(100mL)、饱和NaCl(100mL)和水(100mL)洗涤，减压浓缩，硅胶柱层析，得140mg固体，产率63.8％。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：11.72(s，1H)，8.02(d，J＝7.6Hz，1H)，7.64(t，J＝7.6Hz，1H)，7.43-7.45(m，1H)，7.36-7.38(m，1H)，7.23-7.29(m，3H)，5.32(s，2H)，3.61(m，3H)，3.44(m，2H)，3.32(m，1H)，3.14(m，1H)；m.p.108-110℃.
实施例4
1-(3-(硫代吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将3-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)苯甲酸(250mg，0.80mmol)、EDC(307mg，1.6mmol)、HOBT(217mg，1.6mmol)和DIEA(162mg，1.60mmol)加入反应瓶中，加入约3mL无水DMF使溶解，r.t.下搅拌15min，随后滴加硫代吗啉(124mg，1.20mmol)的DMF溶液到反应液中，r.t.下搅拌过夜，将反应液倒入100mL水中，用100mLDCM萃取，有机层依次用1MHCl(100mL)、饱和NaCl(100mL)和水(100mL)洗涤，减压浓缩，柱层析，得190mg固体，产率59.8％。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：11.72(s，1H)，8.02(d，J＝7.6Hz，1H)，7.65(t，J＝6.0Hz，1H)，7.39-7.45(m，2H)，7.23-7.33(m，3H)，5.32(s，2H)，3.84(m，2H)，3.37-3.40(m，2H)，2.65(m，2H)，2.45(m，2H)；m.p.200-202℃.
实施例5
(S)-1-(3-(3-乙基哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮2，2，2-三氟乙酸盐
将(S)-2-乙基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(30mg，0.06mmol)加入反应瓶中，依次加入约2mLDCM，2mLTFA，室温搅拌反应5h，减压蒸除溶剂和TFA，加入少量无水乙醚，减压过滤，滤饼用少量无水乙醚洗涤，干燥得25mg白色粉末状固体，产率81.1％。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：11.72(s，1H)，9.17(brs，1H)，8.92(brs，1H)，8.02(d，J＝7.2Hz，1H)，7.62-7.66(m，1H)，7.48-7.50(m，1H)，7.39(m，1H)，7.20-7.33(m，3H)，5.33(s，2H)，4.35-4.48(m，3H×0.5)，2.75-3.40(m，5.5H)，1.59-1.63(m，1H)，1.34-1.45(m，1H)，0.97(t，J＝7.2Hz，3H×0.5)，0.65(t，J＝6.8Hz，3H×0.5)；m.p.149-151℃.
实施例6
(R)-1-(3-(3-乙基哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮2，2，2-三氟乙酸盐
将(R)-2-乙基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(40mg，0.08mmol)加入反应瓶中，依次加入约2mLDCM，2mLTFA，室温搅拌反应5h，减压蒸除溶剂和TFA，加入少量无水乙醚，减压过滤，滤饼用少量无水乙醚洗涤，干燥得35mg白色粉末状固体，产率85.2％。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：11.74(s，1H)，9.16(brs，1H)，8.91(brs，1H)，8.03(d，J＝7.5Hz，1H)，7.65(m，1H)，7.51(m，1H)，7.40(m，1H)，7.22-7.35(m，3H)，5.33(s，2H)，4.36-4.50(m，3H×0.5)，2.73-3.42(m，5.5H)，1.63(m，1H)，1.36-1.45(m，1H)，0.98(t，J＝7.2Hz，3H×0.5)，0.89(t，J＝6.9Hz，3H×0.2)，0.66(t，J＝6.9Hz，3H×0.3)；m.p.150-152℃.
实施例7
1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙酰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将3-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)苯甲酸(200mg，0.64mmol)、HATU(487mg，1.28mmol)、HOBt(173mg，1.28mmol)和DIEA(166mg，1.28mmol)加入反应瓶中，加入约3ml无水DMF使溶解，r.t.下搅拌15min，随后滴加N-Boc-哌嗪(178mg，0.96mmol)的DMF溶液到反应液中，r.t.下搅拌过夜，减压蒸除溶剂，加入约20mlDCM，饱和NaHCO3洗涤(25ml×2)，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析，得186mg固体，产率60.7％。
1HNMR(300MHz，Acetone-d6)δ(ppm)：10.40(brs，1H)，8.10(d，J＝7.8Hz，1H)，7.65(t，J＝7.2Hz，1H)，7.51(m，1H)，7.44(d，J＝5.1Hz，1H)，7.16-7.33(m，3H)，5.42(s，2H)，3.64(m，2H)，3.15-3.44(m，6H)，1.43(s，9H)；m.p.144-146℃.
b)1-(3-(哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮2，2，2-三氟乙酸盐
将4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(40mg)加入反应瓶中，依次加入约2mlDCM，2mlTFA，室温搅拌反应5h，减压蒸除溶剂和TFA，加入少量无水乙醚，减压过滤，滤饼用少量无水乙醚洗涤，干燥得35mg固体，产率85.1％。
1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：11.74(s，1H)，8.94(brs，2H)，8.03(d，J＝6.6Hz，1H)，7.65(d，J＝7.2Hz，1H)，7.49(m，1H)，7.40-7.49(m，1H)，7.20-7.34(m，3H)，5.32(s，2H)，3.79(m，2H)，3.35(m，2H)，3.10-3.19(m，3H)，2.95(m，2H)；m.p.128-130℃.
c)将1-(3-(哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮2，2，2-三氟乙酸盐(150mg，0.30mmol)溶于约5mL无水DCM中，冰浴下依次逐滴加入三氟乙酸酐(100mg，0.45mmol)的无水DCM溶液和三乙胺(150μL，0.90mmol)，冰浴下继续反应1h，原料消失，用少量水淬灭反应，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析得100mg固体，产率69.2％。
1HNMR(300MHz，Acetone-d6)δ(ppm)：10.42(s，1H)，8.11(d，J＝7.5Hz，1H)，7.63-7.66(m，1H)，7.55(m，1H)，7.47-7.50(m，1H)，7.19-7.33(m，3H)，5.44(s，2H)，3.60-3.82(m，6H)，3.37-3.44(m，2H)；m.p.202-204℃.
实施例8
1-(3-(1-氧代硫代吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
0℃下将含量为60％的m-CPBA(77mg，0.26mmol)加入1-(3-(硫代吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮(100mg，0.25mmol)的丙酮(5mL)溶液中，0℃下继续反应30min，减压蒸除溶剂，柱层析，合并浓缩洗脱液得80mg白色固体，产率76.9％。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：11.73(s，1H)，8.02(d，J＝8.0Hz，1H)，7.65(t，J＝7.6Hz，1H)，7.41-7.47(m，2H)，7.20-7.32(m，3H)，5.26-5.38(m，2H)，4.32-4.36(m，1H)，3.64-3.77(m，2H)，3.25-3.32(m，1H)，2.67-2.97(m，4H)；m.p.186-188℃.
实施例9
1-(3-(1，1-二氧代硫代吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
0℃下将含量为60％的m-CPBA(154mg，0.52mmol)加入1-(3-(硫代吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮(100mg，0.25mmol)的丙酮(5mL)溶液中，0℃下继续反应30min，减压蒸除溶剂，往残渣中加入少量DCM，过滤得80mg白色固体，产率76.9％。
1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：11.75(s，1H)，8.02(d，J＝7.8Hz，1H)，7.65(t，J＝7.2Hz，1H)，7.48-7.51(m，2H)，7.18-7.34(m，3H)，5.32(s，2H)，3.54(m，2H)，3.26-3.32(m，4H)，2.97(m，2H)；m.p.189-191℃.
实施例10
1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)4-(2，2，2-三氟乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
冰浴与N2保护下将N-Boc哌嗪(2g，10.74mmol)加入反应瓶中，加入约100mLDCM使溶解，逐滴加入TEA(1.81mL，13.02mmol)，随后逐滴加入三氟乙酸酐(1.81mL，13.02mmol)，升至室温反应过夜，水洗，硅胶柱层析得2.69g固体，产率88.8％。
b)4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将4-(2，2，2-三氟乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.3g)加入反应瓶中，加入约10mL无水THF使溶解，逐滴加入1M的硼烷的四氢呋喃溶液，升温至回流，2h后停止反应，减压蒸除溶剂，饱和碳酸氢钠洗，直接备用至下一步。
c)1-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪盐酸盐
将4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.2g)加入反应瓶中，加入约8mL2.08MHCl的二氧六环溶液，室温搅拌过夜，过滤，乙醚和EA的混合溶液洗涤固体，得白色固体，直接备用至下一步。
d)1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(134mg，0.43mmol)、EDCI(163mg，0.85mmol)、HOBt(115mg，0.85mmol)和DIEA(140mg，1.08mmol)加入反应瓶中，加入约3mL无水DMF使溶解，r.t.下搅拌15min，随后滴加1-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪盐酸盐(104mg，0.51mmol)的DMF溶液到反应液中，r.t.下搅拌过夜，将反应液倒入100mL水中，用100mLDCM萃取，有机层依次用水(100mL)、饱和NaCl(100mL)和水(100mL)洗涤，减压浓缩，硅胶柱层析得40mg固体，收率20.2％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.80(s，1H)，8.23(dd，J1＝7.5Hz，J2＝1.2Hz，1H)，7.58-7.64(m，1H)，7.24-7.42(m，3H)，7.04-7.11(m，2H)，5.33(s，2H)，3.82(m，2H)，3.34(m，2H)，2.97-3.08(m，2H)，2.75-2.79(m，2H)，2.63(m，2H)；m.p.128-130℃.
实施例11
1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)-5-氟喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((5-氟-2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(85mg，0.24mmol)、EDC(93mg，0.48mmol)、HOBT(65mg，0.48mmol)和DIEA(63mg，0.48mmol)加入反应瓶中，加入约3mL无水DMF使溶解，r.t.下搅拌15min，随后滴加1-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪盐酸盐(74mg，0.36mmol)的DMF溶液到反应液中，r.t.下搅拌过夜，将反应液倒入100mL水中，用100mLDCM萃取，有机层依次用水(100mL)、饱和NaCl(100mL)和水(100mL)洗涤，减压浓缩，硅胶柱层析，得60mg固体，产率48.6％。
1HNMR(400MHz，Acetone-d6)δ(ppm)：10.36(s，1H)，7.63(dd，J1＝14Hz，J2＝7.6Hz，1H)，7.51(m，1H)，7.43(d，J＝6.0Hz，1H)，7.20(t，J＝8.8Hz，1H)，7.13(d，J＝8.4Hz，1H)，6.97(t，J＝9.6Hz，1H)，5.42(s，2H)，3.70(m，2H)，3.28(m，2H)，3.18(q，J＝10Hz，2H)，2.73-2.75(m，2H)，2.61(m，2H)；m.p.203-205℃.
实施例12
1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)-6-氟喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((6-氟-2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(150mg，0.45mmol)、EDC(173mg，0.90mmol)、HOBT(122mg，0.90mmol)和DIEA(117mg，0.90mmol)加入反应瓶中，加入约3mL无水DMF使溶解，r.t.下搅拌15min，随后滴加1-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪盐酸盐(140mg，0.68mmol)的DMF溶液到反应液中，r.t.下搅拌过夜，将反应液倒入100mL水中，用100mLDCM萃取，有机层依次用水(100mL)、饱和NaCl(100mL)和水(100mL)洗涤，减压浓缩，硅胶柱层析，得128mg固体，产率70.5％。
1HNMR(400MHz，Acetone-d6)δ(ppm)：10.55(s，1H)，7.76(d，J＝6.8Hz，1H)，7.36-7.52(m，4H)，7.19(t，J＝8.8Hz，1H)，5.43(s，2H)，5.70(m，2H)，3.28(m，2H)，3.18(q，J＝10Hz，2H)，2.61-2.74(m，4H)；m.p.165-166℃.
实施例13
(3S，5R)-3，5-二甲基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
a)(3S，5R)-3，5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将2，6-二甲基哌嗪溶于约20mL无水DCM，0℃下逐滴加入Boc酸酐的无水DCM溶液，0℃下继续反应1h，水洗，浓缩，硅胶柱层析得702mg黄色油状物，产率74.8％。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：3.88-4.01(m，2H)，2.76-2.78(m，2H)，2.31(m，2H)，1.46(s，9H)，1.06(d，J＝6.4Hz，6H).
b)(3S，5R)-3，5-二甲基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(100mg，0.16mmol)、EDCI(124mg，0.64mmol)、HOBt(88mg，0.64mmol)和TEA(66mg，0.64mmol)加入反应瓶中，加入约2mL无水DMF使溶解，r.t.下搅拌60min，随后滴加(3S，5R)-3，5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(104mg，0.48mmol)的DMF溶液到反应液中，r.t.下搅拌过夜，将反应液倒入100mL水中，用100mLDCM萃取，有机层依次用1MHCl(100mL)、饱和NaCl(100mL)和水(100mL)洗涤，减压浓缩，硅胶柱层析，得59mg固体，收率36.3％。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.85-8.88(m，1H)，8.23(d，J＝8.0Hz，1H)，7.58(t，J＝7.6Hz，1H)，7.24-7.28(m，3H)，7.04-7.10(m，2H)，5.33(s，2H)，4.78(m，1H×0.6)，3.16-3.95(m，5.4H)，1.48(s，9H)，1.02-1.35(m，6H)；m.p.87-89℃.
实施例14
1-(3-((3S，5R)-3，5-二甲基哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(50mg，0.16mmol)、EDCI(62mg，0.32mmol)、HOBT(44mg，0.32mmol)和TEA(33mg，0.32mmol)加入反应瓶中，加入约2ml无水DMF使溶解，r.t.下搅拌60min，随后滴加(2S，6R)-2，6-二甲基哌嗪(28mg，0.24mmol)的DMF溶液到反应液中，r.t.下搅拌过夜，将反应液倒入100mL水中，用100mLDCM萃取，有机层依次用1MHCl(100mL)、饱和NaCl(100mL)和水(100mL)洗涤，减压浓缩，柱层析，得40mg固体，产率61.3％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.23(d，J＝6.4Hz，1H)，7.57-7.63(m，1H)，7.24-7.35(m，3H)，7.04-7.12(m，2H)，5.33(s，2H)，4.59-4.64(m，1H)，3.27-3.32(m，1H)，2.69-2.89(m，3H)，2.36-2.44(m，1H)，1.14(d，J＝6.0Hz，1H)，0.98(d，J＝5.1Hz，1H)；m.p.210-212℃.
实施例15
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(S)-3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(S)-3-甲基-N-BOC-哌嗪(600mg，3.0mmol)加入反应瓶中，加入DCM20mL，冰浴下将三乙胺(0.65mL，4.5mmol)加入反应瓶中，随后逐滴加入三氟乙酸酐(0.5mL，3.6mmol)，冰浴下搅拌反应，3h后停止反应，加入30mLDCM，用饱和NaCl溶液20mL×2洗，无水硫酸镁干燥，柱层析(E∶P＝1∶8)，得到无色油状物800mg，产率90％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：4.69(s，0.5H)，4.32(d，J＝13.6Hz，0.5H)，3.84-4.26(m，2H)，3.74(d，J＝13.6Hz，0.5H)，3.42(dt，J1＝12.0Hz，J2＝3.6Hz，0.5H)，3.08(t，J＝12.0Hz，1.5H)，2.78-3.00(m，1.5H)，1.48(s，9H)，1.33(d，J＝6.8Hz，1.5H)，1.25(d，J＝6.8Hz，1.5H)
b)(S)-3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将化合物(S)-3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(750mg，2.53mmol)加入反应瓶中，加入无水THF10mL，逐滴加入1M的硼烷THF溶液(7.59mL，7.59mmol)，升温至回流反应，2h后停止加热，次日停止反应，浓缩，加入DCM50mL，用饱和NaHCO3溶液20mL×2洗，饱和NaCl溶液20mL×2洗，无水硫酸镁干燥，柱层析(E∶P＝1∶6)，得到无色油状物500mg，产率70％
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：3.70(d，J＝12.8Hz，2H)，3.10-3.20(m，2H)，2.95-3.05(m，1H)，2.70-2.90(m，2H)，2.55-2.70(m，2H)，1.46(s，9H)，1.60(d，J＝6.0Hz，3H)
c)(S)-2-甲基-1-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪盐酸盐
将(S)-3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg，1.06mmol)加入DCM10mL，加入TFA(0.8mL，10.6mmol)，室温搅拌反应，4h后停止反应，浓缩至干，得到黄色油状物328mg，产率100％。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(PPm)：8.92-8.98(m，2H)，3.44-3.52(m，1H)，3.15-3.26(m，3H)，2.92-3.06(m，2H)，2.76-2.92(m，2H)，2.62-2.70(m，1H)，1.07(d，J＝6.4Hz，3H)
d)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(120mg，0.38mmol)，加入10mLDMF，EDCI(146mg，0.76mmol)，HOBt(103mg，0.76mmol)，DIEA(0.33mL，1.9mmol)以及(S)-N-三氟乙基-2-甲基哌嗪三氟乙酸盐(189mg，0.57mmol)化合物，室温搅拌反应，次日停止反应，加水，用MeOH∶DCM＝1∶10的混合液30mL×2萃取，有机层用饱和NaCl溶液20mL洗，无水硫酸镁干燥，柱层析(MeOH∶DCM＝1∶50)得到白色固体150mg，产率82％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：8.81(s，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(t，J＝8.0Hz，1H)，7.25-7.36(m，3H)，7.04-7.10(m，2H)，5.33(s，2H)，4.23(brs，1H)，3.30-3.40(m，2H)，2.60-3.21(m，7H)，1.15(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.96(d，J＝6.0Hz，1.5H)；
实施例16
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将S-1-BOC-3-甲基哌嗪(400mg，2mmol)溶于DCM10mL中，加入Et3N(243mg，2.4mmol)，冰浴条件下滴加入三氟乙酸酐(462mg，2.2mmol)的DCM(5mL)溶液，再缓慢升温至室温反应3h，停止反应，浓缩柱层析(E∶P＝10∶1)得无色油状物500mg，收率84.3％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：4.68(brs，0.5H)，4.30-4.34(m，0.5H)，3.92-4.18(m，3H)，3.72-3.75(m，0.5H)，3.39-3.46(m，0.5H)，2.87-3.08(m，2H)，1.48(s，9H)，1.33(d，J＝6.4Hz，1.5H)，1.25(d，J＝6.4Hz，1.5H).
c)(R)-3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(R)-3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(470mg，1.59mmol)溶于无水10mLTHF中，室温氩气保护下缓慢滴入1M的BH3.THF(5mL，5mmol)，滴加完毕，升温至40℃反应4h，停止反应，向反应液中缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液(5mL)，搅拌30min，浓缩，加入DCM(50mL)，有机相经饱和碳酸氢钠20mL×3、饱和食盐水20mL×2洗，无水硫酸镁干燥，浓缩、柱层析(E∶P＝1∶10)得无色油状液体300mg，收率66.8％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：3.68-3.73(m，2H)，3.12-3.98(m，2H)，2.90-2.98(m，1H)，2.81-2.88(m，1H)，2.55-2.66(m，1H)，1.46(s，9H)，1.06(d，J＝6.4Hz，3H).
c)(R)-2-甲基-1-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪盐酸盐
将(S)-3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(270mg，0.956mmol)溶于DCM(15mL)中，加入TFA(1.5mL，19.9mmol)，室温反应10h，停止反应，将反应液浓缩，再依次加入乙酸乙酯(5mL×2)，氯仿(8mL×2)，减压蒸除溶剂和TFA，得无色油状物268mg，收率100％，直接投下一步。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：8.86(brs，2H)，3.42-3.54(m，1H)，3.16-3.26(m，3H)，2.94-3.04(m，2H)，2.78-2.87(m，2H)，2.64-2.71(m，1H)，1.07(d，J＝6.4Hz，3H).
d)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(150mg，0.488mmol)溶于无水DMF10mL，加入EDCI(187mg，0.976mmol)、HOBT(131mg，0.976mmol)及DIEA(315mg，2.44mmol)，室温搅拌30min，加入(R)-2-甲基-1-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪盐酸盐(270mg，0.976mmol)，室温过夜反应，将反应液浓缩，加入EA(50mL)，有机相经保护碳酸氢钠溶液20mL×3、饱和食盐水20mL×2洗，无水硫酸镁干燥，浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1)得黄色固体180mg，再经氯仿/PE重结晶得微黄色固体150mg，收率64.4％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：9.06(s，1H)，8.24(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(t，J＝8.0Hz，1H)，7.25-7.36(m，3H)，7.05-7.10(m，2H)，5.33(s，2H)，4.23(s，1H)，3.32-3.34(m，2H)，3.11-3.24(m，1H)，2.96-3.07(m，2H)，2.60-2.91(m，3H)，1.15(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.97(d，J＝6.0Hz，1.5H).
实施例17
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(S)-3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(S)-3-甲基-N-BOC-哌嗪(500mg，2.5mmol)加入反应瓶中，加入DCM(20mL)，冰浴下将三乙胺(0.54mL，3.75mmol)加入反应瓶中，随后逐滴加入异丁酰氯(0.31mL，3.0mmol)，冰浴下搅拌反应，2h后停止反应，加入DCM(30mL)，用饱和NaCl溶液20mL×2洗，无水硫酸镁干燥，柱层析(E∶P＝1∶3)，得到无色油状物620mg，产率91.8％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：4.80(brs，0.5H)，4.36-4.46(m，0.5H)，4.05-4.20(m，1H)，3.85-4.00(m，2H)，3.64(d，J＝12.8Hz，0.5H)，3.23(t，J＝12.4Hz，0.5H)，2.70-3.04(m，3.0H)，1.47(s，9H)，1.08-1.28(m，9H)
b)(S)-2-甲基-1-(异丁酰基)哌嗪盐酸盐
将(R)-3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(490mg，1.81mmol)加入DCM(10mL)，加入TFA(1.35mL，18.1mmol)，室温搅拌反应，4h后停止反应，浓缩至干，得到黄色油状物510mg，产率99％。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(PPm)：9.27(s，1H)，8.80(s，1H)，4.30-4.80(m，1.5H)，3.90-4.10(m，0.5H)，3.30-3.40(m，0.5H)，3.18-3.28(m，2.5H)，3.07(brs，1H)，2.73-2.90(m，2H)，1.22(brs，3H)，1.10(d，J＝6.4Hz，3H)
c)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(120mg，0.38mmol)，加入DMF(15mL)，EDCI(146mg，0.76mmol)，HOBt(103mg，0.76mmol)，DIEA(0.33mL，1.9mmol)以及(S)-N-异丁酰基-2-甲基哌嗪三氟乙酸盐(263mg，0.92mmol)，室温搅拌反应，次日停止反应，加水，用乙酸乙酯萃取30mL×2，合并有机层用饱和NaCl溶液15mL×2洗，无水硫酸镁干燥，柱层析(MeOH∶DCM＝1∶60，MeOH∶DCM＝1∶40)得到白色固体130mg，产率73％.
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：9.08(s，1H)，8.24(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(q，J＝8.0Hz，1H)，7.25-.40(m，3H)，7.09(q，J＝7.2Hz，2H)，5.27-5.34(m，2H)，4.20-5.10(m，2H)，3.25-3.80(m，3H)，2.60-3.20(m，3H)，1.10-1.30(m，9H)
实施例18
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(S)-1-BOC-3-甲基哌嗪(300mg，1.5mmol)溶于DCM(15mL)中，加入Et3N(457mg，4.5mmol)，冰浴条件下滴加入异丁酰氯(181mg，3.45mmol)的DCM(5mL)，再缓慢升温至室温反应4h，停止反应，浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝40∶1)得黄色油状物220mg，收率81.5％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：4.80(brs，0.5H)，4.40(brs，0.5H)，4.12(brs，1H)，3.80-4.00(m，2H)，3.58-3.69(m，0.5H)，3.25-3.40(m，0.5H)，2.94-3.07(m，1H)，2.75(brs，2H)，1.47(s，9H)，1.04-1.28(m，9H).
b)(R)-2-甲基-1-(异丁酰基)哌嗪盐酸盐
将(S)-3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg，1.11mmol)溶于DCM(15mL)中，加入TFA(1.5mL，19.9mmol)，室温过夜反应，将反应液浓缩，再依次加入乙酸乙酯(6mL×2)，氯仿(6mL×2)，减压蒸除溶剂和TFA，得黄色油状物295mg，收率99％，直接投下一步。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.25(brs，1H)，8.78(brs，1H)，4.73(brs，0.5H)，4.42(brs，1H)，3.98(brs，0.5H)，3.29-3.45(m，1H)，3.18-3.29(m，2H)，3.07(brs，1H)，2.81-2.99(m，3H)，1.14-1.37(m，3H)，1.01(d，J＝6.4Hz，6H).
c)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(150mg，0.488mmol)溶于无水DMF(10mL)，加入EDCI(187mg，0.976mmol)、HOBT(131mg，0.976mmol)及DIEA(315mg，2.44mmol)，室温搅拌30min，加入(R)-N-异丁酰基-2-甲基哌嗪三氟乙酸盐(260mg，0.976mmol)，反应2d，将反应液浓缩，加入乙酸乙酯(50mL)，有机相经保护碳酸氢钠溶液(15mL×3)、饱和食盐水(20mL×2)洗，无水硫酸镁干燥，浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1，DCM∶MeOH＝50∶1)得微黄色固体110mg，收率48.2％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.97(brs，1H)，8.24(d，J＝8.0Hz，1H)，7.60(q，J＝8.0Hz，1H)，7.28-7.40(m，3H)，7.09(q，J＝8.0Hz，2H)，5.25-5.40(m，2H)，4.28-4.78(m，2H)，3.57-3.81(m，1H)，3.21-3.55(m，2H)，2.85-3.19(m，2H)，2.75(brs，1H)，1.21-1.35(m，3H)，1.15-1.20(m，6H).
实施例19
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(正丙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(S)-3-甲基-4-(正丙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(S)-3-甲基-N-BOC-哌嗪(500mg，2.5mmol)加入反应瓶中，加入乙腈(15mL)，加入DIEA(0.65mL，3.75mmol)，加入溴代正丙烷(0.27mL，3mmol)，升温至50℃反应，30h后停止反应，浓缩至干，柱层析(D∶M＝50∶1)，得到黄色油状物500mg，产率82.6％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：3.78(d，J＝13.2Hz，2H)，3.24(brs，1H)，2.80-3.00(m，2H)，2.69(brs，1H)，2.50(brs，1H)，2.35(brs，2H)，1.50-1.60(m，2H)，1.46(s，9H)，1.09(d，J＝4.8Hz，3H)，0.91(t，J＝7.2Hz，3H)
b)(S)-2-甲基-1-(正丙基)哌嗪盐酸盐
将(S)-2-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(490mg，1.81mmol)加入DCM(10mL)，加入TFA(1.26mL(16.9mmol)，室温搅拌反应，4h后停止反应，浓缩至干，得到黄色油状物430mg，产率99％。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(PPm)：3.67(brs，1H)，3.55(brs，3H)，3.10-3.40(m，4H)，2.99-3.07(m，1H)，1.50-1.70(m，2H)，1.33(t，J＝6.4Hz，3H)，0.91(t，J＝7.6Hz，3H)
c)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(正丙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(120mg，0.38mmol)，加入DMF(15mL)，EDCI(146mg，0.76mmol)，HOBt(103mg，0.76mmol)，DIEA(0.33mL，1.9mmol)以及(S)-N-正丙基-2-甲基哌嗪三氟乙酸盐化(263mg，0.92mmol)，室温搅拌反应，次日停止反应，加水，用DCM∶MeOH＝10∶1的混合液30mL×2，合并有机层用饱和NaCl溶液15mL×2洗，无水硫酸镁干燥，柱层析(MeOH∶DCM＝1∶50，MeOH∶DCM＝1∶30)得到白色固体90mg，产率54.2％.
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：8.99(s，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(t，J＝8.0Hz，1H)，7.24-7.35(m，3H)，7.04-7.11(m，2H)，5.33(s，2H)，4.24(brs，1H)，3.25-3.40(m，2H)，2.80-3.00(m，0.5H)，2.75-2.79(m，0.5H)，2.50-2.70(m，2H)，2.34(brs，3H)，1.48(brs，2H)，1.14(d，J＝6.4Hz，1.5H)，0.86-0.94(m，4.5H)
实施例20
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(正丙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-3-甲基-4-(正丙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(R)-N-BOC-3-甲基哌嗪(300mg，1.5mmol)溶于乙腈(20mL)中，加入DIEA(400mg，3mmol)及溴代正丙烷(215mg，1.73mmol)，40℃反应1d，停止反应，将反
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：3.70-3.83(m，2H)，3.29(brs，1H)，2.65-3.02(m，3H)，2.35-2.65(m，2H)，1.52-1.62(m，2H)，1.46(s，9H)，1.13(m，3H)，0.92(t，J＝7.2Hz，3H).
b)(R)-2-甲基-1-(正丙基)哌嗪盐酸盐
将(R)-3-甲基-4-(正丙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(260mg，1.07mmol)溶于DCM(10mL)中，加入TFA(1.0mL，13.2mmol)，室温过夜反应，将反应液浓缩，再依次加入乙酸乙酯(6mL×2)，氯仿(6mL×2)，减压蒸除溶剂和TFA，得黄色油状物200mg，收率78.1％，直接投下一步。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.42(brs，2H)，3.40-3.60(m，4H)，3.26(brs，3H)，3.00-3.17(m，2H)，1.50-1.78(m，2H)，1.34(d，J＝6.4Hz，3H)，0.93(t，J＝7.2Hz，3H).
c)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(正丙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(150mg，0.488mmol)溶于无水DMF(10mL)，加入EDCI(187mg，0.976mmol)、HOBT(131mg，0.976mmol)及DIEA(315mg，2.44mmol)，室温搅拌30min，加入(R)-2-甲基-1-(正丙基)哌嗪盐酸盐(230mg，0.976mmol)，反应2d，将反应液浓缩，加入DCM(50mL)，有机相经保护碳酸钠溶液(15mL×4)、饱和食盐水(20mL×2)洗，无水硫酸镁干燥，浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1--50∶1--30∶1)得微黄色固体120mg，收率56.1％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：9.20(s，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(t，J＝8.0Hz，1H)，7.25-7.36(m，3H)，7.04-7.10(m，2H)，5.33(s，2H)，4.24(s，1H)，3.31-3.36(m，2H)，2.76-3.06(m，2H)，2.55-2.71(m，2H)，2.27-2.44(m，2H)，1.43-1.48(m，2H)，1.14(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.86-0.94(m，4.5H).
实施例21
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(S)-3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(S)-3-甲基-N-BOC-哌嗪(400mg，2.0mmol)加入反应瓶中，加入乙腈(15mL)，加入DIEA(0.52mL，3.0mmol)，加入1-溴-2-丁烯(0.25mL，2.4mmol)，升温至50℃反应，30h后停止反应，浓缩至干，柱层析(D∶M＝60∶1，D∶M＝50∶1)，得到黄色油状物230mg，产率45.2％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：5.69-5.75(m，1H)，5.50-5.60(m，1H)，3.83(d，J＝12.8Hz，2H)，3.43(brs，1H)，3.33(brs，1H)，3.10-3.20(m，2H)，2.91(d，J＝6.0Hz，1.0H)，2.63(brs，1H)，2.40(brs，1H)，1.72(d，J＝6.4Hz，2.3H)，1.66(d，J＝6.8Hz，0.7H)，1.45(s，9H)，1.15-1.20(m，3H)
b)(S)-2-甲基-1-(2-丁烯基)哌嗪盐酸盐
将(S)-3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(210mg，0.83mmol)加入DCM(10mL)，加入TFA(0.62mL，8.26mmol)，室温搅拌反应，4h后停止反应，浓缩至干，得到黄色油状物220mg，产率99％。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(PPm)：9.51(brs，2H)，6.04-6.09(m，1H)，5.52-5.60(m，1H)，3.85-3.95(m，1H)，3.75-3.80(m，1H)，3.50-3.65(m，4H)，3.10-3.35(m，3H)，1.75(d，J＝6.8Hz，3H)，1.37(d，J＝6.8Hz，3H)
c)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(120mg，0.38mmol)，加入DMF(15mL)，EDCI(146mg，0.76mmol)，HOBt(103mg，0.76mmol)，DIEA(0.33mL，1.9mmol)以及(S)-N-2-丁烯基-2-甲基哌嗪三氟乙酸盐(263mg，0.92mmol)，室温搅拌反应，次日停止反应，加水，用DCM∶MeOH＝10∶1的混合液30mL×2，合并有机层用饱和NaCl溶液15mL×2洗，无水硫酸镁干燥，柱层析(MeOH∶DCM＝1∶50--1∶30)得到白色固体80mg，产率46.7％.
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：9.05-9.20(m，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(t，J＝7.6Hz，1H)，7.24-7.38(m，3H)，7.03-7.11(m，2H)，5.60-5.70(m，1H)，5.49(brs，1H)，5.33(s，2H)，4.26(brs，1H)，3.25-3.40(m，3H)，2.85-3.10(m，3H)，2.75-2.85(m，0.5H)，2.54(brs，0.5H)，2.30-2.40(m，0.5H)，2.21(brs，0.5H)，1.70(t，J＝6.0Hz，2H)，1.65(brs，1H)，1.53(t，J＝6.4Hz，1.5H)，0.96(t，J＝6.4Hz，1.5H)
实施例22
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(R)-N-BOC-3-甲基哌嗪(300mg，1.5mmol)溶于乙腈(10mL)中，加入DIEA(390mg，3mmol)及2-丁烯基溴(233mg，1.73mmol)，50℃反应2d，停止反应，将反应液浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1--50∶1)得白色半固体300mg，收率79％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：5.49-5.66(m，2H)，3.77-3.80(m，2H)，3.35-3.36(m，1H)，3.14-3.17(m，1H)，2.79-2.92(m，3H)，2.43(brs，1H)，2.24(brs，1H)，1.71(d，J＝6.4Hz，3H)，1.46(s，9H)，1.08(d，J＝5.2Hz，3H).
b)(R)-2-甲基-1-(2-丁烯基)哌嗪盐酸盐
将(R)-3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.983mmol)溶于DCM(15mL)中，加入TFA(1.0mL)，室温反应9h，停止反应，将反应液浓缩，再依次加入甲苯(5mL×2)，氯仿(8mL×2)，减压蒸除溶剂和TFA，得黄色油状物260mg，收率100％，直接投下一步。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.53(brs，2H)，6.02-6.11(m，1H)，5.52-5.59(m，1H)，3.74-3.89(m，2H)，3.54-3.57(m，4H)，3.14-3.35(m，3H)，1.73-1.76(m，3H)，1.35-1.39(m，3H).
c)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(150mg，0.488mmol)溶于无水DMF(10mL)，加入EDC(187mg，0.976mmol)、HOBT(131mg，0.976mmol)及DIEA(315mg，2.44mmol)，室温搅拌30min，加入(R)-2-甲基-1-(2-丁烯基)哌嗪盐酸盐(245mg，0.976mmol)，室温过夜反应，将反应液浓缩，加入DCM(50mL)，有机相经保护碳酸氢钠溶液(20mL×3)、饱和食盐水(20mL×2)洗，无水硫酸镁干燥，浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1--40∶1--30∶1)得灰白色固体100mg，收率45.4％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.75(s，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(t，J＝7.2Hz，1H)，7.25-7.33(m，3H)，7.03-7.10(m，2H)，5.59-5.65(m，1H)，5.43-5.52(m，1H)，5.32(s，2H)，4.26(brs，1H)，3.25-3.33(m，3H)，2.74-2.91(m，3H)，2.52(s，1H)，2.18-2.30(m，1H)，1.64-1.72(m，3H)，1.13-1.16(m，1.5H)，0.93-0.96(m，1.5H).
实施例23
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(S)-3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(S)-3-甲基-N-BOC-哌嗪(400mg，2.0mmol)加入反应瓶中，加入乙腈(15mL)，加入DIEA(0.52mL，3.0mmol)，加入溴甲基环丙烷(0.23mL，2.4mmol)，升温至50℃反应，3d后停止反应，浓缩至干，柱层析(D∶M＝50∶1)，得到黄色油状物500mg，产率98.4％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：3.86(d，J＝12.4Hz，2H)，3.28(brs，1H)，3.08(d，J＝10.0Hz，1H)，2.95(brs，1H)，2.74(brs，1H)，2.61(brs，1H)，2.48(brs，1H)，2.32(brs，1H)，1.47(s，9H)，1.12(d，J＝5.6Hz，3H)，0.92(brs，1H)，0.56-0.58(m，2H)，0.15-0.20(m，2H)
b)(S)-2-甲基-1-(环丙甲基)哌嗪盐酸盐
将(S)-3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(390mg，1.53mmol)加入DCM(10mL)，加入TFA(1.14mL，15.3mmol)，室温搅拌反应，4h后停止反应，浓缩至干，得到黄色油状物410mg，产率100％。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δPPm：9.56(brs，2H)，3.86(brs，1H)，3.50-3.65(m，3H)，3.30-3.45(m，2.5H)，3.25-3.45(m，2.5H)，1.32(d，J＝6.4Hz，3H)，1.10-1.11(m，1H)，0.61-0.65(m，2H)，0.40(s，2H)
c)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(150mg，0.48mmol)，加入DMF(15mL)，EDCI(184mg，0.96mmol)，HOBt(130mg，0.96mmol)，DIEA(0.42mL，2.4mmol)以及(S)-N-2-环丙甲基-2-甲基哌嗪三氟乙酸盐(257mg，0.96mmol)，室温搅拌反应，次日停止反应，加水，用DCM∶MeOH＝10∶1的混合液30mL×2，合并有机层用饱和NaCl溶液15mL×2洗，无水硫酸镁干燥，柱层析(MeOH∶DCM＝1∶60--1∶35)得到白色固体165mg，产率76.3％.
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：8.97(s，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(t，J＝8.0Hz，1H)，7.35(t，J＝6.8Hz，1H)，7.24-7.29(m，2H)，7.04-7.11(m，2H)，5.33(s，2H)，4.20-4.40(m，1H)，3.25-3.45(m，2H)，3.13(d，J＝10.0Hz，0.5H)，2.98(brs，0.5H)，2.55-2.70(m，1.5H)，2.30-2.50(m，1.5H)，2.23(brs，1H)，1.14(d，J＝5.2Hz，1.5H)，0.94(d，J＝5.2Hz，1.5H)，0.83-0.90(m，1H)，0.48-0.60(m，2H)，0.12(brs，2H)
实施例24
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(R)-1-BOC-3-甲基哌嗪(300mg，1.5mmol)溶于乙腈(10mL)中，加入DIEA(390mg，3mmol)及环丙基甲基溴(235mg，1.73mmol)，40℃反应2d，停止反应，将反应液浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝40∶1)得白色半固体320mg，收率84.2％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：3.84(d，J＝13.2Hz，2H)，3.18-3.25(m，1H)，3.04(d，J＝11.9Hz，1H)，2.86(brs，1H)，2.67-2.73(m，1H)，2.51(brs，1H)，2.40(brs，1H)，2.19-2.26(m，1H)，1.46(s，9H)，1.08(d，J＝6.4Hz，3H)，0.82-0.91(m，1H)，0.53-0.59(m，2H)，0.12-0.19(m，2H).
b)(R)-2-甲基-1-(环丙甲基)哌嗪盐酸盐
将(R)-3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.118mmol)溶于DCM(15mL)中，加入TFA(1.5mL)，室温反应9h，停止反应，将反应液浓缩，再依次加入乙酸乙酯(5mL×2)，氯仿(8mL×2)，减压蒸除溶剂和TFA，得黄色油状物290mg，收率98％，直接投下一步。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.55(brs，2H)，3.88(brs，1H)，3.59(brs，3H)，3.35(brs，2H)，3.11-3.21(m，3H)，1.35(d，J＝6.8Hz，3H)，1.03-1.08(m，1H)，0.62-0.71(m，2H)，0.37-0.45(m，2H).
c)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(150mg，0.488mmol)溶于无水DMF(10mL)，加入EDCI(187mg，0.976mmol)、HOBT(131mg，0.976mmol)及DIEA(315mg，2.44mmol)，室温搅拌30min，加入(R)-2-甲基-1-(环丙甲基)哌嗪盐酸盐(245mg，0.976mmol)，室温过夜反应，将反应液浓缩，加入EA(50mL)，有机相经保护碳酸氢钠溶液(20mL×3)、饱和食盐水(20mL×2)洗，无水硫酸镁干燥，浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1--40∶1--30∶1-25∶1)得黄色油状物140mg，再经氯仿/PE重结晶得灰白色固体90mg，收率63.6％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：9.04(brs，1H)，8.23(d，J＝8.0Hz，1H)，7.60(t，J＝7.6Hz，1H)，7.33(t，J＝8.0Hz，1H)，7.25-7.31(m，2H)，7.06-7.14(m，2H)，5.33(brs，2H)，4.22-4.39(m，1H)，3.26-3.41(m，2H)，3.08-3.15(m，0.5H)，2.93-3.02(m，1.5H)，2.53-2.70(m，2H)，2.42-2.52(m，0.5H)，2.34(brs，0.5H)，2.18-2.23(m，1H)，1.63(brs，0.5H)，1.13(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.93(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.81-0.87(m，1H)，0.50-0.55(m，2H)，0.10-0.18(m，2H).
实施例25
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(S)-3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(S)-3-甲基-N-BOC-哌嗪(500mg，2.5mmol)加入反应瓶中，加入乙腈(15mL)，加入DIEA(0.65mL，3.75mmol)，加入溴代异丁烷(0.32mL，3mmol)，升温至50℃反应，30h后停止反应，浓缩至干，柱层析(D∶M＝50∶1)，得到黄色油状物150mg，产率23.4％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：3.64(d，J＝12.8Hz，2H)，3.15-3.22(m，1H)，2.85(brs，1H)，2.70-2.76(m，1H)，2.30-2.40(m，2H)，2.05-2.15(m，1H)，1.85-1.95(m，1H)，1.65-1.75(m，1H)，1.46(s，9H)，0.98(d，J＝6.4Hz，3H)，0.88(t，J＝4.4Hz，6H)
b)(S)-2-甲基-1-(异丁基)哌嗪盐酸盐
将(S)-3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150mg，.585mmol)加入DCM(5mL)，加入TFA(0.4mL，5.85mmol)，室温搅拌反应，4h后停止反应，浓缩至干，得到黄色油状物158mg，产率100％。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(PPm)：9.48(s，2H)，3.42-3.85(m，3.5H)，3.30-3.43(m，1.5H)，3.16(brs，3H)，2.85-2.95(m，1H)，2.03(brs，1H)，1.33(d，J＝6.4Hz，3H)，0.96(t，J＝5.6Hz，6H)，
c)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(120mg，0.38mmol)，加入DMF(15mL)，EDCI(146mg，0.76mmol)，HOBt(103mg，0.76mmol)，DIEA(0.33mL，1.9mmol)以及(S)-N-2-异丁基-2-甲基哌嗪三氟乙酸盐(154mg，0.57mmol)室温搅拌反应，次日停止反应，加水，用DCM∶MeOH＝10∶1的混合液30mL×2，合并有机层用饱和NaCl溶液15mL×2洗，无水硫酸镁干燥，柱层析(MeOH∶DCM＝1∶60--1∶40)得到白色固体90mg，产率52.6％.
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：8.82(s，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(t，J＝7.60Hz，1H)，7.33(t，J＝6.4Hz，1H)，7.24-7.30(m，2H)，7.03-7.11(m，2H)，5.33(s，2H)，4.10(d，J＝12.0Hz，1H)，3.39(brs，0.5H)，3.20-3.35(m，2H)，3.11(brs，0.5H)，2.69-2.90(m，1H)，2.72(d，J＝12.0Hz，0.5H)，2.48(brs，0.5H)，2.31-2.40(m，1H)，2.23(brs，0.5H)，2.11(brs，0.5H)，1.94(d，J＝8.4Hz，1H)，1.65-1.75(m，1H)，1.07(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.87-0.89(m，7.5H)
实施例26
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(R)-1-BOC-3-甲基哌嗪(300mg，1.5mmol)溶于乙腈(10mL)中，加入DIEA(390mg，3mmol)及溴代异丁烷(270mg，1.95mmol)，55℃反应2d，停止反应，将反应液浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝40∶1)得黄色油状物200mg，收率52.1％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：3.63(dt，J1＝12.8Hz，3.6Hz，2H)，3.14(t，J＝9.6Hz，1H)，2.84(brs，1H)，2.73(dt，J1＝12.0Hz，4.0Hz，1H)，2.28-2.38(m，2H)，2.09(t，J＝9.2Hz，1H)，1.90(dd，J1＝12.4Hz，J2＝5.6Hz，1H)，1.68-1.75(m，1H)，1.45(s，9H)，0.97(d，J＝6.0Hz，3H)，0.88(t，J＝4.4Hz，6H).
b)(R)-2-甲基-1-(异丁基)哌嗪盐酸盐
将(R)-3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.781mmol)溶于DCM(15mL)中，加入TFA(1.0mL)，室温反应4.5h，停止反应，将反应液浓缩，再依次加入甲苯(5mL×2)，氯仿(8mL×2)，减压蒸除溶剂和TFA，得黄色油状物188mg，收率100％，直接投下一步。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.37(brs，2H)，3.00-3.70(m，7H)，2.87(brs，2H)，2.02(brs，1H)，1.33(s，3H)，0.96(t，J＝5.2Hz，6H).
c)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(150mg，0.488mmol)溶于无水DMF(10mL)，加入HATU(372mg，0.976mmol)、HOBT(131mg，0.976mmol)及DIEA(252mg，1.95mmol)，室温搅拌30min，加入(R)-2-甲基-1-(异丁基)哌嗪盐酸盐(140mg，0.59mmol)，室温过夜反应，将反应液浓缩，加入DCM(50mL)，有机相经保护碳酸氢钠溶液(20mL×3)、饱和食盐水(20mL×2)洗，无水硫酸镁干燥，浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1)得黄色油状物，再经DCM/PE重结晶得灰白色固体120mg，收率54.5％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.74(brs，1H)，8.23(d，J＝8.0Hz，1H)，7.60(t，J＝7.6Hz，1H)，7.33(t，J＝7.6Hz，1H)，7.25-7.31(m，2H)，7.03-7.11(m，2H)，5.33(s，2H)，4.08-4.11(m，1H)，3.05-3.45(m，2.5H)，2.84-2.94(m，1H)，2.70-2.73(m，0.5H)，2.49(brs，0.5H)，2.31-2.40(m，1H)，2.23(brs，0.5H)，2.11(brs，0.5H)，1.92-1.95(m，1H)，1.69-1.75(m，1H)，1.61(s，0.5H).1.07(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.87-0.97(m，7.5H).
实施例27
(S)-1-(3-(3-甲基-4-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(S)-3-甲基-4-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(S)-3-甲基-N-BOC-哌嗪(400mg，2.0mmol)，加入乙腈(15mL)，加入DIEA(0.52mL，3.0mmol)，加入1-溴-3-甲基-2-丁烯(0.28mL，2.4mmol)，升温至50℃反应，20h后停止反应，浓缩至干，柱层析(D∶M＝60∶1--40∶1)，得到黄色油状物320mg，产率59.7％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：5.31(d，J＝6.4Hz，1H)，3.87(d，J＝12.4Hz，2H)，3.44-3.52(m，1H)，3.30-3.42(m，1H)，3.18(brs，1H)，3.08(brs，1H)，2.96(d，J＝11.2Hz，1H)，2.69(brs，1H)，2.42(brs，1H)，1.78(s，3H)，1.69(s，3H)，1.46(s，9H)，1.22(d，J＝5.6Hz，3H)
b)(R)-2-甲基-1-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪盐酸盐
将(R)-3-甲基-4-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(280mg，1.04mmol)加入DCM(10mL)，加入TFA(0.78mL，10.4mmol)，室温搅拌反应，4h后停止反应，浓缩至干，得到黄色油状物290mg，产率99％。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(PPm)：9.55(brs，2H)，5.25(t，J＝7.6Hz，1H)，3.93(brs，1H)，3.74-3.79(m，1H)，3.50-3.75(m，4H)，3.05-3.25(m，3H)，1.78(s，3H)，1.72(s，3H)，1.35(d，J＝6.4Hz，3H)，
c)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(2-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(150mg，0.48mmol)，加入DMF(15mL)，EDCI(184mg，0.96mmol)，HOBt(130mg，0.96mmol)，DIEA(0.42mL，2.4mmol)以及(S)-N-3-甲基-2-丁烯基-3-甲基哌嗪三氟乙酸盐(257mg，0.96mmol)，室温搅拌反应，次日停止反应，加水，用DCM∶MeOH＝10∶1的混合液30mL×2，合并有机层用饱和NaCl溶液15mL×2洗，无水硫酸镁干燥，柱层析(MeOH∶DCM＝1∶60--1∶35)得到白色固体160mg，产率71.7％.
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(PPm)：9.03(s，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(t，J＝8.0Hz，1H)，7.34(t，J＝6.0Hz，1H)，7.24-7.28(m，2H)，7.03-7.11(m，2H)，5.33(s，2H)，5.20-5.28(m，1H)，4.20-4.40(m，1H)，3.20-3.40(m，3H)，2.90-3.00(m，2H)，2.78(d，J＝11.6Hz，1H)，2.53(brs，0.5H)，2.13-2.45(m，1.5H)，1.74(d，J＝7.6Hz，3H)，1.65(d，J＝2.4Hz，3H)，1.15(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.96(d，J＝6.0Hz，1.5H)
实施例28
(R)-1-(3-(3-甲基-4-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-3-甲基-4-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(R)-1-BOC-3-甲基哌嗪(300mg，1.5mmol)溶于乙腈(10mL)中，加入DIEA(390mg，3mmol)及3，3-二甲基烯丙基溴(258mg，1.73mmol)，50℃反应2d，停止反应，将反应液浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1--50∶1)得黄色油状物300mg，收率75％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：5.25(t，J＝7.6Hz，1H)，3.80(d，J＝12.8Hz，2H)，3.37(dd，J＝13.2Hz，5.6Hz，1H)，3.17(t，J＝11.2Hz，1H)，2.95-3.00(m，1H)，2.82-2.88(m，2H)，2.46(brs，1H)，2.22-2.26(m，1H)，1.75(s，3H)，1.66(s，3H)，1.46(s，9H)，1.11(d，J＝6.4Hz，3H).
b)(R)-2-甲基-1-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪盐酸盐
将(R)-3-甲基-4-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(280mg，0.983mmol)溶于DCM(15mL)中，加入TFA(1.0mL)，室温反应9h，停止反应，将反应液浓缩，再依次加入甲苯(5mL×2)，氯仿(8mL×2)，减压蒸除溶剂和TFA，得黄色油状物290mg，收率100％，直接投下一步。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.50(brs，2H)，5.26(t，J＝7.6Hz，1H)，3.94(s，1H)，3.76-3.81(m，1H)，3.50-3.65(m，4H)，3.09-3.32(m，3H)，1.79(s，3H)，1.73(s，3H)，1.36(d，J＝6.4Hz，3H).
c)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(2-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(150mg，0.488mmol)溶于无水DMF(10mL)，加入EDCI(187mg，0.976mmol)、HOBT(131mg，0.976mmol)及DIEA(315mg，2.44mmol)，室温搅拌30min，加入(R)-2-甲基-1-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪盐酸盐(260mg，0.976mmol)，室温过夜反应，将反应液浓缩，加入DCM(50mL)，有机相经保护碳酸氢钠溶液(20mL×3)、饱和食盐水(20mL×2)洗，无水硫酸镁干燥，浓缩、柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1--40∶1--30∶1)得灰白色固体120mg，收率54.5％
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.88-8.94(m，1H)，8.23(d，J＝8.0Hz，1H)，7.60(t，J＝7.2Hz，1H)，7.26-7.34(m，3H)，7.03-7.10(m，2H)，5.32(s，2H)，5.22(s，1H)，4.29(brs，1H)，3.24-3.39(m，3H)，2.78-2.94(m，3H)，2.54(s，1H)，2.19-2.30(m，1H)，1.74(d，J＝7.6Hz，3H)，1.65(d，J＝3.2Hz，3H)，0.97-1.16(m，3H).
实施例29
(R)-1-(3-(3-乙基-4-甲基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-2-乙基-1-(甲基)哌嗪盐酸盐
将(R)-1-Boc-3-乙基哌嗪(1.0g，4.7mmol)、37％甲醛水溶液(0.45g，5.6mmol)以及甲醇(10mL)加入三口烧瓶中，室温搅拌1h，而后控温＜10℃，分批加入硼氢化钠(0.53g，14.1mmol)，加毕，室温搅拌过夜。向反应混合液中滴加纯化水(10mL)淬灭反应，减压浓缩掉甲醇，然后用二氯甲烷(15mL)萃取两次，合并有机相用纯化水(10mL)洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，向残留物中加入氯化氢乙醇溶液(10mL)，室温搅拌过夜，减压浓缩，直接投入下一步。
b)(R)-1-(3-(3-乙基-4-甲基-哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(1.23g，3.9mmol)(R)-2-乙基-1-(甲基)哌嗪盐酸盐(4.7mmol)HBTU(1.78g，4.7mmol)、DMF(10mL)加入三口烧瓶中，滴加DIEA(2.03g，15.7mmol)，滴毕，室温搅拌2h，向体系中加入二氯甲烷(150mL)，然后依次用纯化水(75mL)洗涤、5％柠檬酸水溶液(30mL)洗涤、5％碳酸钠(30mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物经柱层析(DCM∶MeOH＝40∶1)纯化，得270mg目标物，产率16.2％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δPPm：8.96(s，1H)，8.23(d，J＝8.0Hz，1H)，7.60(t，J＝8.0Hz，1H)，7.24-7.35(m，3H)，7.04-7.10(m，2H)，5.33(s，2H)，4.45(d，J＝12.4Hz，1H)，3.34(brs，1.5H)，3.15-3.20(m，0.5H)，2.87-2.96(m，1.5H)，2.73(d，J＝10.4Hz，0.5H)，2.32(s，3H)，2.08(brs，0.5H)，1.62-1.80(m，1H)，1.45-1.60(m，2H)，1.15-1.20(m，1H)，0.99(t，J＝7.6Hz，2H)，0.71(t，J＝7.2Hz，1H)；HRMS(ESI)：m/z，calcd.forC23H26O3N4F[M+H+]：425.1984，found：425.1975
实施例30
(R)-1-(3-(3-乙基-4-异丙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-2-乙基-1-(异丙基)哌嗪盐酸盐
将(R)-1-Boc-3-乙基哌嗪(1.0g，4.7mmol)投入反应瓶中，加入四氢呋喃(10.0ml)，和丙酮(0.55g，9.4mmol)，室温下搅拌1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.50g，11.8mmol)，室温下搅拌1h，反应完毕后，将反应液减压浓缩至干，向残留物中加入10ml氯化氢乙醇溶液，室温搅拌过夜，减压浓缩至干，直接投入下一步。
b)(R)-1-(3-(3-乙基-4-异丙基-哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(1.23g，3.9mmol)(R)-2-乙基-1-(异丙基)哌嗪盐酸盐(4.7mmol)HBTU(1.78g，4.7mmol)、DMF(10mL)加入三口烧瓶中，滴加DIEA(2.03g，15.7mmol)，滴毕，室温搅拌2h，向体系中加入二氯甲烷(150mL)，然后依次用纯化水(75mL)洗涤、5％柠檬酸水溶液(30mL)洗涤、5％碳酸钠(30mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物经柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1)纯化，得190mg目标物，收率10.2％。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δPPm：11.74(s，1H)，9.05-9.20(m，1H)，8.04(d，J＝6.8Hz，1H)，7.60-7.70(m，1H)，7.48-7.58(m，1H)，7.14-7.42(m，4H)，5.20-5.50(m，2H)，4.30-4.60(m，1H)，3.87(brs，0.5H)，2.90-3.60(m，6H)，2.68(brs，0.5H)，1.94(brs，0.5H)，1.69(brs，0.5H)，1.54(brs，1H)，0.90-1.40(m，8H)，0.59(brs，1H)；HRMS(ESI)：m/z，calcd.forC25H30O3N4F[M+H+]：453.2297，found：453.2291
实施例31
(R)-1-(3-(3-乙基-4-环丙甲酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-2-乙基-1-(环丙甲酰基)哌嗪盐酸盐
将(R)-1-Boc-3-乙基哌嗪(1.0g，4.7mmol)、环丙基甲酰氯(0.73g，7.0mmol)、三乙胺(1.43g，14.1mmol)、25mL二氯甲烷加入反应瓶中，室温反应4h，反应完毕后，10mL×2纯化水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，向体系内加入10mL氯化氢乙醇溶液，室温搅拌过夜，减压浓缩至干，直接投入下一步。
b)(R)-1-(3-(3-乙基-4-环丙甲酰基-哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(1.23g，3.9mmol)(R)-2-乙基-1-(异丙基)哌嗪盐酸盐(4.7mmol)HBTU(1.78g，4.7mmol)、DMF(10mL)加入三口烧瓶中，滴加DIEA(2.03g，15.7mmol)，滴毕，室温搅拌2h，向体系中加入二氯甲烷(150mL)，然后依次用纯化水(75mL)洗涤、5％柠檬酸水溶液(30mL)洗涤、5％碳酸钠(30mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物经柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1)纯化，得420mg目标物，收率22.4％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δPPm：9.22(brs，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.58-7.62(m，1H)，7.24-7.37(m，3H)，7.08-7.10(m，2H)，5.27-5.34(m，2H)，4.60-4.80(m，2H)，4.40-4.58(m，1H)，4.27(brs，0.5H)，3.90-4.10(m，0.5H)，3.22-3.50(m，2H)，2.90-3.15(m，2H)，1.30-1.90(m，3H)，1.01(brs，3H)，0.55-0.85(m，3H)；HRMS(ESI)：m/z，calcd.forC26H28O4N4F[M+H+]：479.2089，found：479.2080
实施例32
(R)-1-(3-(3-乙基-4-乙酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-2-乙基-1-(乙酰基)哌嗪盐酸盐
将(R)-1-Boc-3-乙基哌嗪(1.0g，4.7mmol)、乙酰氯(0.55g，7.0mmol)、三乙胺(1.43g，14.1mmol)、25mL二氯甲烷加入反应瓶中，室温反应4h，反应完毕后，10mL×2纯化水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，向残留物加入10mL氯化氢乙醇溶液，室温搅拌过夜，减压浓缩至干，直接投入下一步。
b)(R)-1-(3-(3-乙基-4-乙酰基-哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(1.23g，3.9mmol)(R)-2-乙基-1-(异丙基)哌嗪盐酸盐(4.7mmol)HBTU(1.78g，4.7mmol)、DMF(10mL)加入三口烧瓶中，滴加DIEA(2.03g，15.7mmol)，滴毕，室温搅拌2h，向体系中加入二氯甲烷(150mL)，然后依次用纯化水(75mL)洗涤、5％柠檬酸水溶液(30mL)洗涤、5％碳酸钠(30mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物经柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1)纯化，得310mg目标物，收率17.5％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δPPm：8.97(s，0.4H)，9.92(s，0.6H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.58-7.62(m，1H)，7.26-7.35(m，3H)，7.08-7.12(m，2H)，5.25-5.40(m，2H)，4.55-4.80(m，1.5H)，4.4.-4.52(m，0.5H)，3.85(brs，0.5H)，2.70-3.70(m，4.5H)，2.06-2.16(m，3H)，1.58-1.80(m，1.5H)，1.40-1.55(m，0.5H)，0.90-1.05(m，1.5H)，0.60-0.70(m，1.5H)；HRMS(ESI)：m/z，calcd.forC24H26O4N4F[M+H+]：453.1933，found：453.1925
实施例33
(R)-1-(3-(3-乙基-4-三氟乙酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-2-乙基-1-(三氟乙酰基)哌嗪盐酸盐
将(R)-1-Boc-3-乙基哌嗪(1.0g，4.7mmol)、三氟乙酸酐(1.47g，7.0mmol)、三乙胺(1.43g，14.1mmol)、25mL二氯甲烷加入反应瓶中，室温反应4h，反应完毕后，10mL×2纯化水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，向体系内加入10mL氯化氢乙醇溶液，室温搅拌过夜，减压浓缩至干，直接投入下一步。
b)(R)-1-(3-(3-乙基-4-三氟乙酰基-哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(1.23g，3.9mmol)(R)-2-乙基-1-(异丙基)哌嗪盐酸盐(4.7mmol)HBTU(1.78g，4.7mmol)、DMF(10mL)加入三口烧瓶中，滴加DIEA(2.03g，15.7mmol)，滴毕，室温搅拌2h，向体系中加入二氯甲烷(150mL)，然后依次用纯化水(75mL)洗涤、5％柠檬酸水溶液(30mL)洗涤、5％碳酸钠(30mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物经柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1)纯化，得230mg目标物，收率11.6％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δPPm：9.11(s，1H)，8.24(d，J＝7.6Hz，1H)，7.59～7.63(m，1H)，7.26-7.38(m，3H)，7.05-7.14(m，2H)，5.27-5.41(m，2H)，4.67-4.80(m，1.5H)，4.30-4.50(m，0.5H)，4.01(brs，0.25H)，3.87(d，J＝14.0Hz，0.25H)，3.74(d，J＝12.8Hz，0.5H)，3.55(d，J＝12.4Hz，0.5H)，3.32-3.50(m，1.5H)，3.18(brs，1H)，2.94-3.10(m，1H)，1.80-1.90(m，0.5H)，1.72-1.77(m，1H)，1.24-1.30(m，0.5H)，0.94-1.01(m，2H)，0.68(brs，1H)；HRMS(ESI)：m/z，calcd.forC24H23O4N4F4[M+H+]：507.1650，found：507.1643
实施例34
(R)-1-(3-(3-乙基-4-正丙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-2-乙基-1-(正丙基)哌嗪盐酸盐
将(R)-1-Boc-3-乙基哌嗪(1.0g，4.7mmol)投入反应瓶中，加入四氢呋喃(10.0ml)，和丙醛(0.55g，9.4mmol)，室温下搅拌1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.50g，11.8mmol)，室温下搅拌1h，反应完毕后，将反应液减压浓缩至干，残留物加入10ml氯化氢乙醇溶液，室温搅拌过夜，减压浓缩至干，直接投入下一步。
b)(R)-1-(3-(3-乙基-4-正丙基-哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(1.23g，3.9mmol)(R)-2-乙基-1-(异丙基)哌嗪盐酸盐(4.7mmol)HBTU(1.78g，4.7mmol)、DMF(10mL)加入三口烧瓶中，滴加DIEA(2.03g，15.7mmol)，滴毕，室温搅拌2h，向体系中加入二氯甲烷(150mL)，然后依次用纯化水(75mL)洗涤、5％柠檬酸水溶液(30mL)洗涤、5％碳酸钠(30mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物经柱层析(DCM∶MeOH＝60∶1)纯化，得520mg目标物，收率29.4％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δPPm：8.23(d，J＝8.0Hz，1H)，7.58-7.64(m，1H)，7.23-7.35(m，3H)，7.03-7.10(m，2H)，5.33(s，2H)，4.05(brs，1H)，3.50(brs，0.5H)，3.20-3.45(m，2H)，3.00-3.20(m，1H)，2.88(d，J＝10.8Hz，1H)，2.75(d，J＝11.6Hz，0.5H)，2.55-2.70(m，1H)，2.22-2.45(m，2.5H)，1.60-1.70(m，1H)，1.40-1.56(m，3H)，1.24-1.39(m，1H)，0.98(t，J＝7.2Hz，1.5H)，0.89(t，J＝7.2Hz，2.5H)，0.63(t，J＝7.2Hz，1H)；HRMS(ESI)：m/z，calcd.forC25H30O3N4F[M+H+]：453.2297，found：453.2294
实施例35
(R)-1-(3-(3-乙基-4-乙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-2-乙基-1-(乙基)哌嗪盐酸盐
将(R)-1-Boc-3-乙基哌嗪(1.0g，4.7mmol)投入反应瓶中，加入四氢呋喃(10.0ml)，和40％乙醛溶液(1.04g，9.4mmol)，室温下搅拌1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.50g，11.8mmol)，室温下搅拌1h，反应完毕后，将反应液减压浓缩，残留物加入10ml氯化氢乙醇溶液，室温搅拌过夜，减压浓缩至干，直接投入下一步。
b)(R)-1-(3-(3-乙基-4-乙基-哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(1.23g，3.9mmol)(R)-2-乙基-1-(异丙基)哌嗪盐酸盐(4.7mmol)HBTU(1.78g，4.7mmol)、DMF(10mL)加入三口烧瓶中，滴加DIEA(2.03g，15.7mmol)，滴毕，室温搅拌2h，向体系中加入二氯甲烷(150mL)，然后依次用纯化水(75mL)洗涤、5％柠檬酸水溶液(30mL)洗涤、5％碳酸钠(30mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物经柱层析(DCM∶MeOH＝50∶1)纯化，得110mg目标物，收率6.4％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δPPm：8.66(s，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.58-7.66(m，1H)，7.23-7.35(m，3H)，7.04-7.10(m，2H)，5.33(s，2H)，4.18(brs，1H)，3.47(brs，1H)，3.05-3.15(m，0.5H)，2.91(brs，2H)，2.67(brs，3H)，1.71(brs，1H)，1.61(brs，1H)，1.04(brs，3H)，1.04(brs，2H)，0.68(brs，1H)；HRMS(ESI)：m/z，calcd.forC24H28O3N4F[M+H+]：439.2140，found：439.2138
实施例36
(R)-1-(3-(3-乙基-4-环丙甲基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-2-乙基-1-(环丙甲基)哌嗪盐酸盐
将(R)-1-Boc-3-乙基哌嗪(1.0g，4.7mmol)投入反应瓶中，加入四氢呋喃(10.0ml)，和环丙基甲醛(0.66g，9.4mmol)，室温下搅拌1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.50g，11.8mmol)，室温下搅拌1h，反应完毕后，将反应液减压浓缩，残留物加入10ml氯化氢乙醇溶液，室温搅拌过夜，减压浓缩至干，直接投入下一步。
b)(R)-1-(3-(3-乙基-4-环丙甲基-哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(1.23g，3.9mmol)(R)-2-乙基-1-(异丙基)哌嗪盐酸盐(4.7mmol)HBTU(1.78g，4.7mmol)、DMF(10mL)加入三口烧瓶中，滴加DIEA(2.03g，15.7mmol)，滴毕，室温搅拌2h，向体系中加入二氯甲烷(150mL)，然后依次用纯化水(75mL)洗涤、5％柠檬酸水溶液(30mL)洗涤、5％碳酸钠(30mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物经柱层析(DCM∶MeOH＝40∶1)纯化，得450mg目标物，收率24.8％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：9.29(brs，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60-7.61(m，1H)，7.35(s，1H)，7.24-7.28(m，2H)，7.03-7.10(m，2H)，5.33(s，2H)，4.13(s，1H)，3.44-3.49(m，0.5H)，3.26-3.38(m，2H)，3.06-3.08(m，1H)，2.93-2.96(m，0.5H)，2.58-2.64(m，1H)，2.10-2.53(m，1H)，2.38-2.45(m，1H)，2.24-2.31(m，1H)，1.64-1.67(m，0.5H)，1.43-1.53(m，2H)，1.34-1.35(m，0.5H)，0.98(t，J＝7.2Hz，2H)，0.82-0.84(m，1H)，0.65(t，J＝7.2Hz，1H)，0.52-0.53(m，2H)，0.11(s，2H)；HRMS(ESI)：m/z，calcd.forC26H30O3N4F[M+H+]：465.2297，found：465.2296
实施例37
(R)-1-(3-(3-乙基-4-丙酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-2-乙基-1-(丙酰基)哌嗪盐酸盐
将(R)-1-Boc-3-乙基哌嗪(1.0g，4.7mmol)、丙酰氯(0.73g，7.0mmol)、三乙胺(1.43g，14.1mmol)、25mL二氯甲烷加入反应瓶中，室温反应4h，反应完毕后，10mL×2纯化水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，向残留物中加入10mL氯化氢乙醇溶液，室温搅拌过夜，减压浓缩至干，直接投入下一步。
b)(R)-1-(3-(3-乙基-4-丙酰基-哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(1.23g，3.9mmol)(R)-2-乙基-1-(异丙基)哌嗪盐酸盐(4.7mmol)HBTU(1.78g，4.7mmol)、DMF(10mL)加入三口烧瓶中，滴加DIEA(2.03g，15.7mmol)，滴毕，室温搅拌2h，向体系中加入二氯甲烷(150mL)，然后依次用纯化水(75mL)洗涤、5％柠檬酸水溶液(30mL)洗涤、5％碳酸钠(30mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物经柱层析(DCM∶MeOH＝40∶1)纯化，得390mg目标物，收率21.4％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：9.13-9.18(m，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.57-7.62(m，1H)，7.25-7.37(m，3H)，7.06-7.12(m，2H)，5.34(s，2H)，4.65-4.71(m，1H)，3.89(s，0.5H)，3.70-3.73(m，0.5H)，3.43-3.56(m，0.5H)，3.28-3.40(m，1.5H)，3.00-3.20(m，1H)，2.87-2.93(m，2H)，2.33-2.44(m，2H)，1.42-1.47(m，2H)，1.16-1.18(m，3H)，0.93-0.97(m，2H)，0.61-0.67(m，1H)；HRMS(ESI)：m/z，calcd.forC25H28O4N4F[M+H+]：467.2089，found：467.2081
实施例38
(R)-1-(3-(3-乙基-4-三氟乙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)(R)-2-乙基-1-(三氟乙基基)哌嗪盐酸盐
将(R)-1-Boc-3-乙基哌嗪(1.0g，4.7mmol)、三氟乙酸酐(1.47g，7.0mmol)、三乙胺(1.43g，14.1mmol)、25mL二氯甲烷加入反应瓶中，室温反应4h，反应完毕后，10mL×2纯化水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，向残留物加入四氢呋喃(10mL)，滴加硼烷四氢呋喃溶液(12mL，11.8mmol)，滴毕，升温至回流，搅拌4h。反应液用2mL甲醇淬灭，加入二氯甲烷(30mL)，用纯化水(10mL)洗两次，有机相减压浓缩，向残留物中加入氯化氢乙醇溶液(10mL)，室温搅拌过夜，减压浓缩，直接投入下一步。
b)(R)-1-(3-(3-乙基-4-三氟乙基基-哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(1.23g，3.9mmol)(R)-2-乙基-1-(异丙基)哌嗪盐酸盐(4.7mmol)HBTU(1.78g，4.7mmol)、DMF(10mL)加入三口烧瓶中，滴加DIEA(2.03g，15.7mmol)，滴毕，室温搅拌2h，向体系中加入二氯甲烷(150mL)，然后依次用纯化水(75mL)洗涤、5％柠檬酸水溶液(30mL)洗涤、5％碳酸钠(30mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物经柱层析(DCM∶MeOH＝40∶1)纯化，得260mg目标物，收率13.1％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.65(s，1H)，8.23(d，J＝7.6Hz，1H)，7.58-7.62(m，1H)，7.26-7.34(m，3H)，7.04-7.09(m，2H)，5.32(s，2H)，3.91(brs，1H)，3.64-3.70(m，0.5H)，3.38-3.41(m，0.5H)，3.29(brs，1H)，3.04-3.18(m，3H)，2.89-2.92(m，1H)，2.70-2.74(m，0.5H)，2.55-2.68(m，1H)，2.47(brs，0.5H)，1.48-1.58(m，2H)，1.00(t，J＝7.2Hz，2H)，0.64(t，J＝7.2Hz，1H)；HRMS(ESI)：m/z，calcd.forC24H25O3N4F4[M+H+]：493.1857，found：493.1848
实施例39
1-(3-(4-氧代哌啶-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
a)哌啶-4-酮盐酸盐
将N-Boc-4氧代哌啶加入反应瓶中，加入约5mL2.08MHCl的二氧六环溶液，r.t.搅拌5h，过滤得白色粉末状固体，乙酸乙酯洗，干燥得290mg白色粉末。
b)1-(3-(4-氧代哌啶-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
将5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酸(120mg，0.39mmol)、EDCI(150mg，0.78mmol)、HOBt(106mg，0.78mmol)和DIEA(79mg，0.78mmol)加入反应瓶中，加入约3mL无水DMF使溶解，r.t.下搅拌15min，随后滴加哌啶-4-酮盐酸盐(79mg，0.58mmol)的DMF溶液到反应液中，r.t.下搅拌过夜，将反应液倒入100mL水中，用100mLDCM萃取，有机层依次用1MHCl(100mL)、饱和NaCl(100mL)和水(100mL)洗涤，减压浓缩，DCM洗，得110mg固体，产率78.2％。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：11.72(s，1H)，8.02(d，J＝8.0Hz，1H)，7.65(t，J＝7.6Hz，1H)，7.44-7.49(m，1H)，7.22-7.33(m，3H)，5.33(s，2H)，3.87(m，2H)，3.41-3.45(m，2H)，2.45-2.49(m，2H)，2.22(m，2H).
m.p.124-126℃。
药理实验：
实验例1：化合物对PARP1酶抑制活性评价
实验方法和结果：
采用PAR的双抗ELISA定量法评价化合物对PARP1酶抑制作用。具体实验方法如下：利用50μg/mL组蛋白各孔100μl4℃包被16h的96孔板，0.1％Triton100的PBS和PBS各洗板2次。然后设置空白对照孔、加酶对照孔、阳性化合物对照孔和测定孔，空白对照孔加入35μl测定缓冲液配制的NAD+(5pmol)，10μl纯化缓冲液，5μlShearedDNA(1μg/ml)，加酶对照孔加30μlNAD+(5pmol)，10μlPARP1(0.005Units)，5μlShearedDNA(1μg/ml)，阳性化合物对照孔加入30μlNAD+(5pmol)，5μlABT-888不同浓度稀释液，10μlPARP1(0.005Units)，5ulShearedDNA(1μg/ml)，测定孔加入30μlNAD+(5pmol)，5μl各测定化合物稀释液，10μlPARP1(0.005Units)，5μlShearedDNA(1μg/ml)。总计50μl体积，室温反应1h。利用含0.1％TritonX-100的PBS和PBS各洗板2次。再加入用PBS1∶500稀释的抗PAR的鼠单克隆抗体50μl，室温孵育1h，0.1％TritonX-100的PBS和PBS各洗板2次。然后加入PBS1∶4000稀释的山羊抗鼠IgG50μl，室温孵育30min，0.1％TritonX-100的PBS和PBS各洗板2次。再加入TMB反应液50μl，室温避光反应15min，然后利用含20％浓盐酸的水溶液50μl终止反应。450nm测定吸光度。计算各化合物不同浓度稀释液对PARP1的抑制率％。部分实施例化合物的抑制活性见表1。
表1.本发明部分化合物对PARP1酶抑制活性。
ND，notdeterminded.
实验例2：细胞水平药效学实验
(1)实施例10的抗增殖作用
PARP抑制剂与BRCA1/BRCA2突变若同时作用于肿瘤细胞，可引起肿瘤细胞死亡(尤其是乳腺癌和卵巢癌)，并且不对正常细胞产生影响，PARP抑制剂正是通过这种合成致死的原理发挥其抗肿瘤的作用。此外，研究还发现PARP抑制剂与其他一些基因缺失也存在类似的协同作用。实施例10在BRCA缺陷的肿瘤细胞中，可有效抑制这些细胞的增殖，IC50见表2。实施例10在一些其他基因缺陷的三阴乳腺癌细胞中也可有效的抑制细胞增殖(表3)。
表2.实施例10对BRCA缺陷细胞的抗增殖活性
*Cellsweretreatedwithdifferentchemicalfor72handdetectedbyMTTmethod.
表3.实施例10对三阴乳腺癌的抗增殖活性
*Cellsweretreatedwithdifferentchemicalfor72handdetectedbyMTTmethod.
(2)实施例10对化疗药物的增敏作用
抑制PARP1/2可增强化疗药物和放疗的抗肿瘤作用。实施例10在MX-1乳腺癌细胞中，对替莫唑胺(TMZ)、拓扑替康(TPT)、顺铂(CisP)、阿霉素(ADM)具有显著的增敏作用(图1)。在其他肿瘤细胞中，实施例10对替莫唑胺也有良好的增敏作用(图2)。
在替莫唑胺耐药的脑胶质瘤细胞中，实施例10可克服替莫唑胺耐药，增强替莫唑胺的作用(图3)。
实验例3：动物体内药效学实验
实验方法和结果：
(1)与TMZ联用，对MX-1乳腺癌的抑制作用：采用MX-1裸鼠移植瘤实验，评价了实施例10制备化合物的抗肿瘤活性。方法如下：72只雌性Balb/c裸鼠腋窝皮下注射MX-1移植瘤组织匀浆制备移植瘤模型，造模后6天，移植瘤体积100～300mm3时，随机分组设置对照组、TMZ(替莫唑胺，50mg/kg)、ABT-888(25mg/kg)、TMZ+ABT-888(25mg/kg)、实施例10(25mg/kg)、TMZ+实施例10(12.5mg/kg)和TMZ+实施例10(25mg/kg)组。TMZ连续给药5天，每天一次，ABT-888、实施例10连续给药8天，每天一次。给药过程中，称取小鼠体重和测量瘤体积。给药结束后继续观察，并称取小鼠体重和测量瘤体积。TMZ给药5天，ABT-888、实施例10给药8天后(第12天)瘤体积测量结果显示ABT-888和实施例10与TMZ合用能够显著增敏TMZ对MX-1移植瘤的生长抑制作用(图4)，且第19天瘤重测量结果(表4)提示在停药后，ABT-888和实施例10与TMZ合用仍能够显著增敏TMZ对MX-1移植瘤的生长抑制作用。化合物10与TMZ合用组，在剂量为12.5mg/kg和25mg/kg时，抑瘤率达到了86％和97％，显著高于TMZ单独给药组抑瘤率(67％)。
表4.在MX-1乳腺癌裸鼠移植瘤模型中，化合物10对TMZ的增敏作用
在实验过程中，实施例10单独给药组裸鼠体重未出现明显的下降(体重不变或增加)，且没有出现其他的不良反应(图5)。实施例10单用组，中性粒细胞(A)、白细胞(B)和血小板(C)数量与未给药组相当(图6)，可见，实施例10具有较好的安全性。
(2)与CisPt联用，对MX-1乳腺癌的抑制作用：
采用MX-1裸鼠移植瘤实验，42只雌性Balb/c裸鼠腋窝皮下注射MX-1移植瘤组织匀浆制备移植瘤模型，造模后6天，移植瘤体积100～300mm3时，随机分组设置对照组、CisPt(顺铂，6mg/kg)、Olaparib(25mg/kg)、CisPt+Olaparib(25mg/kg)、实施例10(25mg/kg)、CisPt+实施例10(12.5mg/kg)和CisPt+实施例10(25mg/kg)组。CisPt每周一次，Olaparib、实施例10连续给药8天，每天一次。给药过程中，称取小鼠体重和测量瘤体积。给药结束后继续观察，并称取小鼠体重和测量瘤体积。结果表明，实施例10对顺铂具有增敏作用(图7，表5)。
表5.在MX-1乳腺癌裸鼠移植瘤模型中，化合物10对CisPt的增敏作用
(3)与TMZ联用，对MCF-7乳腺癌的抑制作用：
采用MCF-7裸鼠移植瘤实验，30只雌性Balb/c裸鼠腋窝移植MCF-7瘤块，造模后6天，移植瘤体积100～300mm3时，随机分组设置对照组、TMZ(替莫唑胺，50mg/kg)、实施例10(25mg/kg)、TMZ+实施例10(12.5mg/kg)、TMZ+实施例10(25mg/kg)组和Taxol(24mg/kg)。TMZ连续给药5天，每天一次，实施例10单药给药22天，实施例10联合给药组连续给药14天，每天一次，Taxol每隔3天给药，给药3次。给药过程中，称取小鼠体重和测量瘤体积。给药结束后继续观察，并称取小鼠体重和测量瘤体积。结果显示实施例10单独用药对于MCF-7具有一定的抑瘤效果(图8，表6)。
表6.在MCF-7乳腺癌裸鼠移植瘤模型中，化合物10与TMZ合用的抗增殖活性
(4)与TMZ联用，对U251脑胶质瘤的抑制作用：
采用替莫唑胺耐药的U251/TMZ裸鼠移植瘤实验，54只雌性Balb/c裸鼠腋窝移植U251/TMZ瘤块，造模后6天，移植瘤体积100～300mm3时，随机分组设置对照组、TMZ(替莫唑胺，50mg/kg和75mg/kg)、AZD-2281(50mg/kg)、TMZ+AZD-2281(25mg/kg)、TMZ+AZD-2281(50mg/kg)、实施例10(50mg/kg)、TMZ+实施例10(25mg/kg)和TMZ+实施例10(50mg/kg)组。TMZ连续给药5天，每天一次，AZD-2281、实施例10连续给药7天，每天一次。给药过程中，称取小鼠体重和测量瘤体积。给药结束后继续观察，并称取小鼠体重和测量瘤体积。结果表明，实施例10对于替莫唑胺具有良好的增敏作用，可克服替莫唑胺的耐药(图9，表7)。
表7.在U251/TMZ裸鼠移植瘤模型中，实施例10对TMZ的增敏活性
实验例4：药代动力学实验
(1)大鼠口服和静注实施例10后血浆药代动力学
试验方法：
1.血浆样品标准曲线建立
取实施例10(13mg/mLDMSO)和AZD-2281母液(25mg/mLDMSO)分别用乙腈梯度稀释成浓度为1、2.5、10、50、250、500、1000ng/mL工作液。
空白血浆50μL分别加入内标(普萘洛尔，10μg/mL)50μL和不同浓度实施例10或AZD-2281工作液50μL，混旋后离心(14000rpm×5min)两次，取上清液10μL进行LC/MS/MS分析。
2.大鼠口服和静脉注射实施例10和AZD-2281血浆药代动力学研究
实施例10分别用混合溶剂(PEG400∶水＝5∶1)超声溶解或0.5％CMC配制为2mg/mL用于口服给药。实施例10用混合溶剂(5％DMSO、45％PEG和50％生理盐水)配制成0.2mg/mL溶液用于静脉给药。AZD-2281口服和静脉组药物的配制方法同实施例10。
SD大鼠30只，分为6组，每组5只。口服组给药前禁食12h，自由饮水。试验采用连续取血法。大鼠口服实施例10或AZD-2281(20mg/kg)后5、15、30min、1、2、4、6、8、12、24h自眼眶静脉丛取血；大鼠尾静脉注射实施例10或AZD-2281(1mg/mL)后2、5、15、30min、1、1.5、2、4、6、8、12h自眼眶静脉丛取血，分离血浆50μL冻存。
3.血浆样品处理
血浆样品50μL加入乙腈50μL、内标50μL，混旋后离心(14000rpm×5min)两次，取上清液10μL进行LC/MS/MS分析。
4.LC/MS/MS条件
色谱柱：ZobaxC18(100mm×2.1mm，3.5μm)；柱温：30℃，流动相：乙腈/水(含0.1％甲酸)梯度；流速：0.2mL/min；MRM方式检测m/z465.2→297.0(实施例10)，m/z435→281(AZD-2281)，m/z260.0→183(内标普萘洛尔)。
5.数据分析
应用WinNonlin软件计算血浆药代动力学参数。
实验结果：实施例10的血浆药代动力学特征
评价了实施例10的血浆药代动力学特征，并与AZD-2281进行了比较，如表8所示。(1)大鼠口服实施例10(20mg/kg)，PEG组Cmax明显高于CMC组(362.7ng/mLvs6.7ng/mL)，AUC约为CMC组的4倍。大鼠口服实施例10(20mg/kg)CMC组和PEG组的生物利用度分别为1.2％和4.5％。(2)大鼠口服AZD-2281(20mg/kg)，PEG组Cmax和AUC均约为CMC组2倍。大鼠口服AZD-2281(20mg/kg)CMC组和PEG组的生物利用度分别为3.9％和9.0％。
表8大鼠口服实施例10和AZD(20mg/kg)血浆动力学参数
(2)Beagle犬口服实施例10血浆药代动力学
试验方法：
1.血浆样品标准曲线建立
取实施例10母液(DMSO配制，13mg/mL)分别用乙腈梯度稀释成浓度为1、2.5、10、50、100、250、500、1000ng/mL工作液。
空白血浆50μL分别加入内标(普萘洛尔，10μg/mL)50μL和不同浓度实施例10工作液50μL，混旋后离心(14000rpm×5min)两次，取上清液10μL进行LC/MS/MS分析。
2.犬口服和静脉注射实施例10血浆药代动力学研究
实施例10分别用混合溶剂(DMS0∶PEG400∶水＝1∶4∶5)和混合溶剂(5％DMSO、45％PEG和50％生理盐水)超声溶解后配制成4mg/mL和0.2mg/mL溶液用于口服和静脉给药。
Beagle犬4只口服实施例10(20mg/5mL/kg)后5、15、30min、1、2、4、6、8、24h自眼眶静脉丛取血，清洗一周后下肢静脉注射实施例10(0.4mg/2mL/kg)后2、5、15、30min、1、1.5、2、4、8、12、24h自上肢静脉取血，分离血浆50μL冻存。
3.血浆样品处理
血浆样品50μL加入乙腈50μL、内标50μL，混旋后离心(14000rpm×5min)两次，取上清液10μL进行LC/MS/MS分析。
4.LC/MS/MS条件
色谱柱：ZobaxC18(100mm×2.1mm，3.5μm)；柱温：30℃，流动相：乙腈/水(含0.1％甲酸)梯度；流速：0.2mL/min；MRM方式检测m/z465.2→297.0(实施例10)，m/z260.0→183(内标普萘洛尔)。
5.数据分析
应用WinNonlin软件计算血浆药代动力学参数。
实验结果：实施例10的血浆药代动力学特征
犬口服实施例10(20mg/kg)后15-30min达峰，平均血浆药物峰浓度为3367.01ng/mL，t1/2为2.65h。犬口服实施例10的生物利用度为18.8％，高于大鼠(4.5％)。
表9犬口服和静脉注射实施例10血浆动力学参数
(3)实施例10在荷瘤小鼠血浆、脑和肿瘤组织含量测定
荷瘤(MX-1)裸鼠单次给予实施例10各25mg/kg，组织分布如表10所示，实施例10在肿瘤组织中的浓度较高，约为血浆药物浓度的60％，提示该化合物可能具有较好的安全性及较好的PD/PK相关性。
表10.实施例10的组织分布
实验例5：安全性评价
(1)实施例10急性毒性实验
在昆明小鼠中评价了实施例10单剂量口服和腹腔给药的急性毒性。分别给予小鼠单剂口服5g/kg和腹腔注射500mg/kg，给药后观察8天，观察所有动物的临床体征和死亡率，并且在指定间隔记录体重。小鼠处死后进行解剖，观察脏器。
在口服给予5g/kg1、2、4、12、24小时后小鼠未出现死亡，给药4天和8天后，小鼠未见异常体征，体重未出现下降。处死动物解剖观察脏器，未见异常。
在腹腔注射500m/kg1、2、4、12、24小时后小鼠未出现死亡，给药4天和8天后，小鼠未见异常体征，体重未出现下降。处死动物解剖观察脏器，未见异常，腹腔未见残留化合物。
(2)实施例10致突变实验(Ames)
对实施例10诱导鼠伤寒沙门氏菌受试菌株TA97、TA98、TA100、TA102和TA1535发生回复突变的潜能进行了考察。研究结果表明，实施例10浓度达到最大溶解浓度500μg/平板时，实施例10不会直接或通过代谢活化诱导沙门氏菌发生突变。

Claims (8)

1.如通式I所示化合物及其药用盐
在式I中，
R1、R2、R3和R4、可以单独取代和/或同时多取代，R1、R2、R3和R4独立的选自氢、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基硫基、C1-6烷氧C1-6烷基、氨基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-6的烯烃、卤素、硝基、氰基；
R5选自氢、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基硫基、C1-6烷氧C1-6烷基、氨基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-6的烯烃、卤素、硝基、氰基；
n选自1、2、3的整数，
A，B，C，D可以单独取代和/或同时多取代，A，B，C，D独立的选自氢、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基硫基、C1-6烷氧C1-6烷基、氨基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-6的烯烃；
X选自O、NRb、S，SO，SO2，C＝O；
当X为NRb时，Rb选自氢，取代或非取代的C1-6直链或支链烷基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基羰基，取代或非取代的C1-6直链或支链烷基酰基；
其中，以上所述的“取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基硫基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氨基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基酰基、取代或非取代的C1-6直链或支链烷基氧基羰基”上的取代基是一个或多个，独立的选自：羟基、巯基、氨基、醛基、羧基、氨基甲酰基、卤素、硝基、氰基。
2.根据权利要求1的化合物及其药用盐，其特征在于，所述的化合物如通式LA所示
在式IA中，
R1、R2R3和R4、可以单独取代和/或同时多取代，R1、R2、R3和R4独立的选自氢、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基硫基、C1-4烷氧C1-4烷基、氨基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-4的烯烃、卤素、硝基、氰基；
R5选自氢、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基硫基、C1-4烷氧C1-4烷基、氨基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-4的烯烃、卤素、硝基、氰基；
A，B，C，D可以单独取代和/或同时多取代，A，B，C，D独立的选自氢、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基、羟基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基、巯基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基硫基、C1-4烷氧C1-4烷基、氨基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氨基、其中包括单烷氨基和双烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基酰基、羧基、氨基甲酰基、C2-4的烯烃；
X选自O、NRb、S，SO，SO2，C＝O；
当X为NRb时，Rb选自氢，取代或非取代的C1-4直链或支链烷基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基羰基，取代或非取代的C1-4直链或支链烷基酰基；
其中，以上所述的“取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基硫基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氨基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基酰基、取代或非取代的C1-4直链或支链烷基氧基羰基”上的取代基是一个或多个，独立的选自：羟基、巯基、氨基、醛基、羧基、氨基甲酰基、卤素、硝基、氰基。
3.根据权利要求2的化合物及其药用盐，其特征在于，所述的取代或非取代的C1-4直链或支链烷基选自三氟甲基，三氟乙基。
4.根据权利要求1-3中任一项的化合物及其药用盐，其特征在于，所述的化合物选自如下群组：
1)(S)-1-(3-(3-乙基哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮2，2，2-三氟乙酸盐
2)(R)-1-(3-(3-乙基哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮2，2，2-三氟乙酸盐
3)1-(3-(吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
4)1-(3-(硫代吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
5)(S)-2-乙基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
6)(R)-2-乙基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
7)1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙酰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
8)1-(3-(1-氧代硫代吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
9)1-(3-(1，1-二氧代硫代吗啉-4-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
10)1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
11)1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)-5-氟喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
12)1-(3-(4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)-6-氟喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
13)(3S，5R)-3，5-二甲基-4-(5-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
14)1-(3-((3S，5R)-3，5-二甲基哌嗪-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
15)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
16)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
17)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
18)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁酰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
19)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(正丙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
20)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(正丙基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
21)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
22)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
23)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
24)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(环丙甲基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
25)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
26)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(异丁基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
27)(S)-1-(3-(3-甲基-4-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
28)(R)-1-(3-(3-甲基-4-(3-甲基-2-丁烯基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
29)(R)-1-(3-(3-乙基-4-甲基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
30)(R)-1-(3-(3-乙基-4-异丙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
31)(R)-1-(3-(3-乙基-4-环丙甲酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
32)(R)-1-(3-(3-乙基4-乙酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
33)(R)-1-(3-(3-乙基-4-三氟乙酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
34)(R)-1-(3-(3-乙基-4--正-丙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
35)(R)-1-(3-(3-乙基-4-乙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
36)(R)-1-(3-(3-乙基-4-环丙甲基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
37)(R)-1-(3-(3-乙基-4-丙酰基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
38)(R)-1-(3-(3-乙基-4-三氟乙基哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮
39)1-(3-(4-氧代哌啶-1-甲酰基)-4-氟苄基)喹唑啉-2，4(1H，3H)-二酮。
5.制备权利要求1-4中任一项化合物的方法，其特征在于，包括如下步骤：
R1-R4取代的不同喹唑啉二酮与包含R5取代的3-甲氧羰基溴苄在HMDS的作用下分别发生选择性的烷基化反应，经水解后包含R1-R5取代的不同的3-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)苯甲酸再与哌嗪或哌啶衍生物进行缩合，得到部分1-苄基喹唑啉二酮类PARP-1抑制剂，这部分化合物可经过进一步的脱保护基、烷基化、酰化、氧化反应得到另一部分1-苄基喹唑啉二酮类衍生物，部分化合物经3-((2，4-二氧代-3，4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)甲基)苯甲酸甲酯直接氨解得到；
试剂及反应条件：(a)脲，140℃，6h；(b)i)六甲基二硅基氨基锂，浓硫酸，甲苯，回流，2h，ii)取代的5-(溴甲基)-2-氟苯甲酸甲酯，145℃，3h，iii)甲醇，己烷，70℃，30min；(c)LiOH，MeOH，H2O，THF，55℃，2h；(d)2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)，1-羟基苯并三唑(HOBT)，二异丙基乙胺(DIEA)，DMF，ovemight。
6.一种药物组合物，其特征在于，包括有效剂量的权利要求1-4中任一项的化合物和药效学上可接受的载体。
7.权利要求1-4中任一项的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
8.根据权利要求7的应用，其特征在于，所述的肿瘤选自黑色素瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、肝癌、口腔表皮癌、宫颈癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌、膀胱癌、神经胶质瘤。
CN201510223405.6A 2014-04-29 2015-04-29 喹唑啉酮类parp-1抑制剂及含有它们的组合物和抗肿瘤用途 Pending CN105461697A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510223405.6A CN105461697A (zh) 2014-04-29 2015-04-29 喹唑啉酮类parp-1抑制剂及含有它们的组合物和抗肿瘤用途

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2014101778617 2014-04-29
CN201410177861 2014-04-29
CN201510223405.6A CN105461697A (zh) 2014-04-29 2015-04-29 喹唑啉酮类parp-1抑制剂及含有它们的组合物和抗肿瘤用途

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105461697A true CN105461697A (zh) 2016-04-06

Family

ID=55599912

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510223405.6A Pending CN105461697A (zh) 2014-04-29 2015-04-29 喹唑啉酮类parp-1抑制剂及含有它们的组合物和抗肿瘤用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105461697A (zh)

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017128036A1 (zh) * 2016-01-26 2017-08-03 中国医学科学院药物研究所 喹唑啉酮类parp-1抑制剂及其制备方法、药物组合物和用途
CN108276391A (zh) * 2018-02-24 2018-07-13 中国人民解放军第二军医大学 二氢喹唑啉酮类衍生物及其制备方法与应用
CN108727343A (zh) * 2017-04-21 2018-11-02 中国医学科学院药物研究所 含有3-氨基四氢吡咯的喹唑啉酮类parp-1/2抑制剂及其制备方法、药物组合物和用途
CN109721601A (zh) * 2017-10-27 2019-05-07 中国医学科学院药物研究所 一类四氢咔啉-四氢异喹啉化合物的制备和医药用途
CN110914272A (zh) * 2017-08-24 2020-03-24 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种parp-1抑制剂的晶型及其制备方法
CN111269216A (zh) * 2018-12-05 2020-06-12 中国医学科学院药物研究所 含有哌嗪酮的喹唑啉二酮盐类化合物、其制备方法、药物组合物和用途
CN112375070A (zh) * 2020-06-29 2021-02-19 中国药科大学 含有酞嗪-1(2h)-酮结构的parp抑制剂、其制法及医药用途
CN114206864A (zh) * 2019-05-14 2022-03-18 苏州四体康宸医药科技有限公司 喹唑啉-2.4-二酮衍生物作为parp抑制剂

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017128036A1 (zh) * 2016-01-26 2017-08-03 中国医学科学院药物研究所 喹唑啉酮类parp-1抑制剂及其制备方法、药物组合物和用途
CN108727343A (zh) * 2017-04-21 2018-11-02 中国医学科学院药物研究所 含有3-氨基四氢吡咯的喹唑啉酮类parp-1/2抑制剂及其制备方法、药物组合物和用途
CN110914272A (zh) * 2017-08-24 2020-03-24 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种parp-1抑制剂的晶型及其制备方法
CN109721601A (zh) * 2017-10-27 2019-05-07 中国医学科学院药物研究所 一类四氢咔啉-四氢异喹啉化合物的制备和医药用途
CN109721601B (zh) * 2017-10-27 2022-09-16 中国医学科学院药物研究所 一类四氢咔啉-四氢异喹啉化合物的制备和医药用途
CN108276391A (zh) * 2018-02-24 2018-07-13 中国人民解放军第二军医大学 二氢喹唑啉酮类衍生物及其制备方法与应用
CN111269216A (zh) * 2018-12-05 2020-06-12 中国医学科学院药物研究所 含有哌嗪酮的喹唑啉二酮盐类化合物、其制备方法、药物组合物和用途
CN114206864A (zh) * 2019-05-14 2022-03-18 苏州四体康宸医药科技有限公司 喹唑啉-2.4-二酮衍生物作为parp抑制剂
CN114206864B (zh) * 2019-05-14 2024-05-24 苏州四体康宸医药科技有限公司 喹唑啉-2.4-二酮衍生物作为parp抑制剂
CN112375070A (zh) * 2020-06-29 2021-02-19 中国药科大学 含有酞嗪-1(2h)-酮结构的parp抑制剂、其制法及医药用途
CN112375070B (zh) * 2020-06-29 2023-03-28 中国药科大学 含有酞嗪-1(2h)-酮结构的parp抑制剂、其制法及医药用途

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105461697A (zh) 喹唑啉酮类parp-1抑制剂及含有它们的组合物和抗肿瘤用途
ES2671354T3 (es) Inhibidores de ADN-PK
ES2900061T3 (es) Inhibidores de DNA-PK
CN102485721B (zh) 取代的2,3-二氮杂萘酮化合物及其用途
CN104507933B (zh) 氨基喹唑啉和吡啶并嘧啶衍生物
CN101765597A (zh) 作为磷脂酰肌醇-3-激酶抑制剂的嘧啶衍生物
CN107849022A (zh) 取代的喹唑啉化合物和其使用方法
CN103626752A (zh) 二氢嘧啶类化合物及其在药物中的应用
CN104640852A (zh) Dna-pk抑制剂
CN106573906A (zh) 哌啶‑二酮衍生物
CN104080455A (zh) 某些化学实体、组合物及方法
CN102399220A (zh) 三并环类PI3K和mTOR双重抑制剂
CN101821255A (zh) 作为pi3k抑制剂的2-吗啉-4-基-嘧啶类化合物
CN101124201A (zh) Parp抑制剂
WO2023072188A1 (zh) Kras g12d抑制剂及其在医药上的应用
CN110869369A (zh) 五元并六元氮杂芳环类化合物、其制备方法、药用组合物及其应用
CN110088098B (zh) 喹唑啉酮类parp-1抑制剂及其制备方法、药物组合物和用途
TW201710250A (zh) 經取代之喹喏啉衍生物
KR19990082201A (ko) 에이즈 치료제 또는 예방제
CN114380864A (zh) 一种双氢青蒿素衍生物、制备方法、药物组合物和其在制备抗肿瘤药物中的应用
CN104211661A (zh) 查尔酮类化合物及其制法和药物用途
CN110903310A (zh) 一种硼酸酯类药物及其用途
CN112125914A (zh) 5-取代的小檗胺衍生物，其制备方法和应用
WO2019001307A1 (zh) 一种酰胺类化合物及包含该化合物的组合物及其用途
CN110330493B (zh) Pim激酶抑制剂、其制备方法、应用、药物及药物组合

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20160406