CN105420371A - 一种多病原及耐药基因检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种多病原及耐药基因检测方法，同时针对34种造成败血症的细菌、7种真菌和5种耐药基因的检测，该方法包括：首先配置PCR反应液，然后进行PCR扩增；所述PCR反应液包括引物、分子探针、DNA聚合酶、20×Buffer、和dNTP，所述PCR扩增包括高温变性、低温复性和72℃延伸。本发明可同时检测导致败血症并威胁生命的34种细菌、7种真菌和5种耐药基因，且不依赖于培养的、病原来源的核酸浓缩，本发明基于多个PCR的病原荧光检测，可在6小时内给出高治疗指导价值的结果。

Description

一种多病原及耐药基因检测方法
技术领域
本发明涉及基因工程技术领域，是一种可靠的快速PCR检测多个病原及耐药的试剂盒。
背景技术
在世界范围内，败血症是导致住院病人死亡最常见的原因之，不适当地抗生素治疗是致病人死亡的独立决定因素。快速的病原鉴定和恰当的抗生素使用是有效治疗的基石，因此，迫切需要优于目前技术的、优越的阳性和阴性预测值的快速诊断方法。PCR检测是快速、敏感地检测细菌和真菌感染以及耐药的方法之一，并在准确性和灵敏度以及速度方面明显优于金标准全血培养方法。
全血中特异检测导致败血症的生物仍然在临床应用方面不能使人满意。目前，对怀疑有系统感染的病人，血液培养是检测其病原的金标准。众所周知，血液培养有一些明显的缺陷，特别是一些在取样前已经过抗生素治疗的情况，存在病原获取量不足，以及出现不能培养的生物等情况。再者，血液培养时，自样品获取到出结果需要3-5天的时间，对需要立即采取有效治疗的病人来说时间太长。
核酸扩增检测可以实现快速的靶病原的鉴定，但由于反应体积极小，迄今为止，这个方法的使用并不理想。
以上背景技术内容的公开仅用于辅助理解本发明的发明构思及技术方案，其并不必然属于本专利申请的现有技术，在没有明确的证据表明上述内容在本专利申请的申请日已经公开的情况下，上述背景技术不应当用于评价本申请的新颖性和创造性。
发明内容
本发明的目的在于提出一种多病原及耐药基因检测方法，以解决上述现有技术存在的病源获取量不足、血液培养所需时间过长以及反应体积过小等的技术问题。
为此，本发明提出一种多病原及耐药基因检测方法，同时针对34种造成败血症的细菌、7种真菌和5种耐药基因的检测，其特征在于：首先配置PCR反应液，然后进行PCR扩增；所述PCR反应液包括引物、分子探针、DNA聚合酶、20×Buffer、和dNTP，所述PCR扩增包括高温变性、低温复性和72℃延伸；
所述34种造成败血症的细菌中革兰氏染色阳性包括产气荚膜梭菌、粪肠球菌、屎肠球菌、金黄葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、人葡萄球菌、腐生性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌链球菌、牛链球菌、停乳链球菌、变异链球菌、肺炎链球菌、酿脓葡萄球菌和血链球菌，其相应的引物中的上游引物的序列分别如SEQIDNO.1～SEQIDNO.15所示，下游引物的序列分别如SEQIDNO.47～SEQIDNO.61所示，其分子探针的序列分别如SEQIDNO.93～SEQIDNO.107所示；革兰氏染色阴性包括鲍氏不动杆菌、脆弱类拟杆菌、洋葱伯克霍尔德菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希氏菌、流感嗜血杆菌、流感嗜血杆菌、产酸克雷伯菌、肺炎克雷伯氏菌、摩根氏菌、脑膜炎奈瑟氏菌、奇异变形杆菌、绿脓杆菌、粘质沙雷菌、嗜麦芽窄食单胞菌、颊普雷沃菌、中间普氏菌和产黑色普雷沃菌，其相应的引物中的上游引物的序列分别如SEQIDNO.16～SEQIDNO.34所示，下游引物的序列分别如SEQIDNO.62～SEQIDNO.80所示，其分子探针的序列分别如SEQIDNO.108～SEQIDNO.126所示；
所述7种真菌分别为：烟曲霉、白色念珠菌、都柏林念珠菌、光滑念珠菌、克鲁斯氏念珠菌、近平滑念珠菌和热带念珠菌，其相应的引物中的上游引物的序列分别如SEQIDNO.35～SEQIDNO.41所示，下游引物的序列分别如SEQIDNO.81～SEQIDNO.87所示，其分子探针的序列分别如SEQIDNO.127～SEQIDNO.133所示；
所述5种耐药基因分别为：甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药mecA、肠球菌万古霉素耐药vanA、肠球菌万古霉素耐药vanB、大肠杆菌β-内酰胺酶blaSHV和大肠杆菌β-内酰胺酶blaCTX-M，其相应的引物中的上游引物的序列分别如SEQIDNO.42～SEQIDNO.46所示，下游引物的序列分别如SEQIDNO.88～SEQIDNO.92所示，其分子探针的序列分别如SEQIDNO.134～SEQIDNO.138所示。
优选地，所述检测方法还包括在PCR反应前对反应混合液进行预读荧光本底，在所述分子探针与PCR产物的结合反应完成后，再次进行反应后荧光数值的读取的步骤。
进一步优选的，所述PCR扩增为不对称扩增，即：下游引物的用量远远大于上游引物，使PCR扩增产物大部分为负链产物；所述分子探针设计成可与所述负链产物进行杂交的正链探针。
再优选的，所述检测方法采用46管反应，每孔检测一个病原及内参照，通过96孔反应板实现整个检测结果的分析。
还优选的，所述检测方法通过对每孔反应前荧光数值与反应后荧光数值的比对计算，判定病原基因的有无。
本发明与现有技术对比的有益效果包括：本发明能够整合不依赖于培养的、病原来源的核酸浓缩，通过基于多个PCR的病原荧光检测，实现PCR在6小时内给出高治疗指导价值的结果。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明。应该强调的是，下述说明仅仅是示例性的，而不是为了限制本发明的范围及其应用。
一种多病原及耐药基因检测方法，同时针对34种造成败血症的细菌、7种真菌和5种耐药基因的检测，该检测方法是：首先配置PCR反应液，然后进行PCR扩增；所述PCR反应液包括引物、分子探针、DNA聚合酶、20×Buffer、和dNTP，所述PCR扩增包括高温变性、低温复性和72℃延伸；
所述34种造成败血症的细菌中革兰氏染色阳性包括：产气荚膜梭菌、粪肠球菌、屎肠球菌、金黄葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、人葡萄球菌、腐生性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌链球菌、牛链球菌、停乳链球菌、变异链球菌、肺炎链球菌、酿脓葡萄球菌、血链球菌和革兰氏染色阴性，革兰氏染色阳性包括鲍氏不动杆菌、脆弱类拟杆菌、洋葱伯克霍尔德菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希氏菌、流感嗜血杆菌、流感嗜血杆菌、产酸克雷伯菌、肺炎克雷伯氏菌、摩根氏菌、脑膜炎奈瑟氏菌、奇异变形杆菌、绿脓杆菌、粘质沙雷菌、嗜麦芽窄食单胞菌、颊普雷沃菌、中间普氏菌和产黑色普雷沃菌；
所述7种真菌分别为：烟曲霉、白色念珠菌、都柏林念珠菌、光滑念珠菌、克鲁斯氏念珠菌、近平滑念珠菌和热带念珠菌；
所述5种耐药基因分别为：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药mecA、万古霉素耐药、万古霉素耐药、β-内酰胺酶和β-内酰胺酶；
所述扩增引物序列如下表一、二所示：
表一
表二
本实施例中，所述检测方法还包括在PCR反应前对反应混合液进行预读荧光本底，在所述分子探针与PCR产物的结合反应完成后，再次进行反应后荧光数值的读取的步骤。
所述PCR扩增优选为不对称扩增，即：下游引物的用量远远大于上游引物，使PCR扩增产物大部分为负链产物；所述分子探针设计成可与所述负链产物进行杂交的正链探针。
本实施例的检测方法优选采用46管反应，每孔检测一个病原及内参照，通过96孔反应板实现整个检测结果的分析。通过对每孔反应前荧光数值与反应后荧光数值的比对计算，判定病原基因的有无。
(a)血样中病原DNA提取
使用德国chemagen公司的细菌DNA提取试剂盒(本领域技术人员了解，并不局限于此)提取DNA，具体操作过程按其说明书进行，同时在血样中加入内参照HGH(HumanGrowthHormon，修饰的人生长激素基因质粒DNA)，内参照自提取到扩增出结果伴随整个流程。
(b)引物设计
从GenBank(NationalCenterforBiotechnologyInformation美国国家生物技术信息中心)中找出本项目拟检测的34种细菌、7种真菌和5种耐药基因序列，用Lasergene(美国DNAStar公司发行的综合性序列工具)软件的MegAlign功能对比序列，设计扩增引物。
(c)PCR扩增
为了使PCR产物更好的与分子探针进行杂交，本项目的基因扩增为不对称扩增，即：下游引物的用量远远大于上游引物，使PCR产物大部分为负链产物；所述分子探针设计成正链探针，就可与负链产物进行杂交。
(d)分子探针设计
在引物的扩增区域内，设计分子探针，应保证分子探针的特异性。病原特异探针与内参照探针采用不同波长发光集团标记，以便读板仪分别读取各自的荧光值。设计的探针如下表三所示：
表三
将各个引物探针分别加入各自的PCR反应液中，最终PCR反应液基本组成如下：
本检测方法所用试剂盒采用96孔反应板，每孔加入一种病原的按上表配制的PCR反应混合液，共46孔反应。将反应液分装好后，用透明封口膜封口。
(e)热循环程序
PCR扩增及熔解曲线分析基本程序设置如下：
96℃预变性15分钟；
95℃变性15秒，56℃复性20秒，72℃延伸20秒，循环40次；
72℃再延伸5分钟；
温度降到35℃，保持10分钟。
(f)PCR反应前读荧光值本底，反应后读荧光值，经过软件自动换算最后得到分型判定。譬如，将反应后荧光数值减掉反应前本底数值，如果增值大于100％则判定为阳性，小于100％则判定为阴性。
本发明可同时检测导致败血症并威胁生命的34种细菌、7种真菌和5种耐药基因，且不依赖于培养的、病原来源的核酸浓缩，本发明基于多个PCR的病原荧光检测，可在6小时内给出高治疗指导价值的结果。
本领域技术人员将认识到，对以上描述做出众多变通是可能的，所以实施例仅是用来描述一个或多个特定实施方式。
尽管已经描述和叙述了被看作本发明的示范实施例，本领域技术人员将会明白，可以对其作出各种改变和替换，而不会脱离本发明的精神。另外，可以做出许多修改以将特定情况适配到本发明的教义，而不会脱离在此描述的本发明中心概念。所以，本发明不受限于在此披露的特定实施例，但本发明可能还包括属于本发明范围的所有实施例及其等同物。

Claims (5)

1.一种多病原及耐药基因检测方法，同时针对34种造成败血症的细菌、7种真菌和5种耐药基因的检测，其特征在于：首先配置PCR反应液，然后进行PCR扩增；所述PCR反应液包括引物、分子探针、DNA聚合酶、20×Buffer、和dNTP，所述PCR扩增包括高温变性、低温复性和72℃延伸；
所述34种造成败血症的细菌中革兰氏染色阳性包括产气荚膜梭菌、粪肠球菌、屎肠球菌、金黄葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、人葡萄球菌、腐生性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌链球菌、牛链球菌、停乳链球菌、变异链球菌、肺炎链球菌、酿脓葡萄球菌和血链球菌，其相应的引物中的上游引物的序列分别如SEQIDNO.1～SEQIDNO.15所示，下游引物的序列分别如SEQIDNO.47～SEQIDNO.61所示，其分子探针的序列分别如SEQIDNO.93～SEQIDNO.107所示；革兰氏染色阴性包括鲍氏不动杆菌、脆弱类拟杆菌、洋葱伯克霍尔德菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希氏菌、流感嗜血杆菌、流感嗜血杆菌、产酸克雷伯菌、肺炎克雷伯氏菌、摩根氏菌、脑膜炎奈瑟氏菌、奇异变形杆菌、绿脓杆菌、粘质沙雷菌、嗜麦芽窄食单胞菌、颊普雷沃菌、中间普氏菌和产黑色普雷沃菌，其相应的引物中的上游引物的序列分别如SEQIDNO.16～SEQIDNO.34所示，下游引物的序列分别如SEQIDNO.62～SEQIDNO.80所示，其分子探针的序列分别如SEQIDNO.108～SEQIDNO.126所示；
所述7种真菌分别为：烟曲霉、白色念珠菌、都柏林念珠菌、光滑念珠菌、克鲁斯氏念珠菌、近平滑念珠菌和热带念珠菌，其相应的引物中的上游引物的序列分别如SEQIDNO.35～SEQIDNO.41所示，下游引物的序列分别如SEQIDNO.81～SEQIDNO.87所示，其分子探针的序列分别如SEQIDNO.127～SEQIDNO.133所示；
所述5种耐药基因分别为：甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药mecA、肠球菌万古霉素耐药vanA、肠球菌万古霉素耐药vanB、大肠杆菌β-内酰胺酶blaSHV和大肠杆菌β-内酰胺酶blaCTX-M，其相应的引物中的上游引物的序列分别如SEQIDNO.42～SEQIDNO.46所示，下游引物的序列分别如SEQIDNO.88～SEQIDNO.92所示，其分子探针的序列分别如SEQIDNO.134～SEQIDNO.138所示。
2.如权利要求1所述的多病原及耐药基因检测方法，其特征在于：还包括在PCR反应前对反应混合液进行预读荧光本底，在所述分子探针与PCR产物的结合反应完成后，再次进行反应后荧光数值的读取的步骤。
3.如权利要求1所述的多病原及耐药基因检测方法，其特征在于：所述PCR扩增为不对称扩增，即：下游引物的用量远远大于上游引物，使PCR扩增产物大部分为负链产物；分子探针设计成可与所述负链产物进行杂交的正链探针。
4.如权利要求1所述的多病原及耐药基因检测方法，其特征在于：所述检测方法采用46管反应，每孔检测一个病原及内参照，通过96孔反应板实现整个检测结果的分析。
5.如权利要求1所述的多病原及耐药基因检测方法，其特征在于：所述检测方法通过对每孔反应前荧光数值与反应后荧光数值的比对计算，判定病原基因的有无。
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Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105950773A (zh) * 2016-07-11 2016-09-21 宁波基内生物技术有限公司 一种检测耐万古霉素肠球菌基因的引物、探针、方法及试剂盒
CN106047899A (zh) * 2016-05-10 2016-10-26 王冬国 新型整合子In1288
CN106591440A (zh) * 2016-12-02 2017-04-26 中国人民解放军第二军医大学第二附属医院 一种用于烟曲霉唑类耐药突变检测的核酸诊断试剂盒及其检测方法
CN108875314A (zh) * 2018-05-30 2018-11-23 朱运峰 一种基于表观遗传学修饰差异的靶基因的检测方法
CN109536626A (zh) * 2018-12-29 2019-03-29 北京卓诚惠生生物科技股份有限公司 用于检测革兰氏阴性菌和/或革兰氏阴性菌耐药性的核酸试剂、试剂盒、系统及方法
CN109762915A (zh) * 2019-02-18 2019-05-17 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种细菌耐药基因的检测方法及其专用试剂盒
CN110964841A (zh) * 2019-12-20 2020-04-07 宁波美康盛德医学检验所有限公司 检测败血病的分子信标探针、试剂盒及其检测方法
CN111269995A (zh) * 2018-12-04 2020-06-12 深圳华大因源医药科技有限公司 用于检测病原体的引物组、试剂盒和检测方法
CN112863601A (zh) * 2021-01-15 2021-05-28 广州微远基因科技有限公司 病原微生物耐药基因归属模型及其建立方法和应用
CN113249507A (zh) * 2021-07-05 2021-08-13 广州赛哲生物科技股份有限公司 一种病原耐药基因的存在及表达情况的共检测方法
CN114015795A (zh) * 2022-01-10 2022-02-08 湖南菲思特精准医疗科技有限公司 一种常见病原菌及耐药基因组的焦磷酸检测试剂盒及其检测方法和应用
CN116287356A (zh) * 2023-05-16 2023-06-23 中国医学科学院北京协和医院 用于多重呼吸道病原菌和耐药基因检测的引物探针组合物、试剂盒
CN116516038A (zh) * 2023-06-28 2023-08-01 圣湘生物科技股份有限公司 血流感染病原体联检并区分的组合物、试剂盒及用途

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN2474542Y (zh) * 1999-12-17 2002-01-30 浙江大学 细菌核糖体核糖核酸体外扩增－基因芯片
CN101501219A (zh) * 2006-07-05 2009-08-05 奥地利研究中心有限公司 病原体的鉴定
WO2014190394A1 (en) * 2013-05-29 2014-12-04 Immunexpress Pty Ltd Microbial markers and uses therefor
CN105121656A (zh) * 2012-11-15 2015-12-02 以色列分子检测有限公司 Pcr反应混合物及使用其的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN2474542Y (zh) * 1999-12-17 2002-01-30 浙江大学 细菌核糖体核糖核酸体外扩增－基因芯片
CN101501219A (zh) * 2006-07-05 2009-08-05 奥地利研究中心有限公司 病原体的鉴定
CN105121656A (zh) * 2012-11-15 2015-12-02 以色列分子检测有限公司 Pcr反应混合物及使用其的方法
WO2014190394A1 (en) * 2013-05-29 2014-12-04 Immunexpress Pty Ltd Microbial markers and uses therefor

Cited By (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106047899A (zh) * 2016-05-10 2016-10-26 王冬国 新型整合子In1288
CN105950773A (zh) * 2016-07-11 2016-09-21 宁波基内生物技术有限公司 一种检测耐万古霉素肠球菌基因的引物、探针、方法及试剂盒
CN106591440A (zh) * 2016-12-02 2017-04-26 中国人民解放军第二军医大学第二附属医院 一种用于烟曲霉唑类耐药突变检测的核酸诊断试剂盒及其检测方法
CN108875314A (zh) * 2018-05-30 2018-11-23 朱运峰 一种基于表观遗传学修饰差异的靶基因的检测方法
CN108875314B (zh) * 2018-05-30 2021-11-09 朱运峰 一种基于表观遗传学修饰差异的靶基因的检测方法
CN111269995B (zh) * 2018-12-04 2023-12-26 深圳华大因源医药科技有限公司 用于检测病原体的引物组、试剂盒和检测方法
CN111269995A (zh) * 2018-12-04 2020-06-12 深圳华大因源医药科技有限公司 用于检测病原体的引物组、试剂盒和检测方法
CN109536626B (zh) * 2018-12-29 2021-09-17 北京卓诚惠生生物科技股份有限公司 用于检测革兰氏阴性菌和/或革兰氏阴性菌耐药性的核酸试剂、试剂盒、系统及方法
CN109536626A (zh) * 2018-12-29 2019-03-29 北京卓诚惠生生物科技股份有限公司 用于检测革兰氏阴性菌和/或革兰氏阴性菌耐药性的核酸试剂、试剂盒、系统及方法
CN109762915A (zh) * 2019-02-18 2019-05-17 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种细菌耐药基因的检测方法及其专用试剂盒
CN109762915B (zh) * 2019-02-18 2022-06-21 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种细菌耐药基因的检测方法及其专用试剂盒
CN110964841A (zh) * 2019-12-20 2020-04-07 宁波美康盛德医学检验所有限公司 检测败血病的分子信标探针、试剂盒及其检测方法
CN112863601A (zh) * 2021-01-15 2021-05-28 广州微远基因科技有限公司 病原微生物耐药基因归属模型及其建立方法和应用
CN113249507A (zh) * 2021-07-05 2021-08-13 广州赛哲生物科技股份有限公司 一种病原耐药基因的存在及表达情况的共检测方法
CN113249507B (zh) * 2021-07-05 2021-12-10 湖南赛哲智造科技有限公司 一种病原耐药基因的存在及表达情况的共检测方法
CN114015795A (zh) * 2022-01-10 2022-02-08 湖南菲思特精准医疗科技有限公司 一种常见病原菌及耐药基因组的焦磷酸检测试剂盒及其检测方法和应用
CN114015795B (zh) * 2022-01-10 2022-04-01 湖南菲思特精准医疗科技有限公司 一种常见病原菌及耐药基因组的焦磷酸检测试剂盒及其检测方法和应用
CN116287356A (zh) * 2023-05-16 2023-06-23 中国医学科学院北京协和医院 用于多重呼吸道病原菌和耐药基因检测的引物探针组合物、试剂盒
CN116516038A (zh) * 2023-06-28 2023-08-01 圣湘生物科技股份有限公司 血流感染病原体联检并区分的组合物、试剂盒及用途
CN116516038B (zh) * 2023-06-28 2023-09-15 圣湘生物科技股份有限公司 血流感染病原体联检并区分的组合物、试剂盒及用途

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