CN105388100A - 血液分析装置及诊断辅助方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及血液分析装置，其具备向测定样品照射光的光源部62、用于检测自测定样品中的红细胞发出的自身荧光的荧光检测部63、及用于由荧光检测部63取得检测的关于发自身荧光的红细胞的自身荧光信息的信息处理部3。本发明还涉及利用上述装置的诊断辅助方法，其中信息处理部3基于自身荧光信息，进行关于贫血的判断。

Description

血液分析装置及诊断辅助方法

【技术领域】

本发明涉及用于使用从血液制备的测定样品，辅助关于贫血的诊断的血液分析装置及诊断辅助方法。

【背景技术】

作为小红细胞性贫血的疾病，已知缺铁性贫血(IDA)及地中海贫血。其中缺铁性贫血症被认为占贫血症的约50％。

有对从受试者采集的血液中含的血细胞进行分类，对每种类血细胞数进行计数的血细胞计数装置。在日本早期公开专利申请No.H11-326315中公开，使用作为血细胞计数装置中的基本的测定项目的CBC项目的测定值，鉴别缺铁性贫血和地中海贫血的方法。

但是，缺铁性贫血由于与地中海贫血检查值近似，通过使用CBC项目的测定值的鉴别方法难以升高缺铁性贫血和地中海贫血的鉴别精度。因此，期望进一步升高对于贫血的鉴别精度。

【发明概述】

本发明的范围仅由随附的权利要求定义，不受此发明概述部分的任何影响。

本血液分析装置具备光源部、荧光检测部和信息处理部。光源部向从血液制备的测定样品照射光。荧光检测部检测从照射了光的测定样品中的红细胞发出的自身荧光。信息处理部取得由荧光检测部检测的关于发自身荧光的红细胞的自身荧光信息，基于自身荧光信息，进行关于贫血的判断。

本诊断辅助方法是由信息处理部的贫血的诊断辅助方法。信息处理部由向从血液制备的测定样品照射光时自测定样品中的红细胞发出的自身荧光的检测结果，取得关于发自身荧光的红细胞的自身荧光信息。信息处理部基于自身荧光信息，进行关于贫血的判断。

本缺铁性贫血的诊断辅助方法是向从血液制备的测定样品照射光，检测自照射了光的测定样品中的红细胞发出的自身荧光，取得检测的关于发自身荧光的红细胞的自身荧光信息，基于自身荧光信息，进行关于贫血的判断。

由本发明使高精度进行关于贫血的判断变得可能。

【附图说明】

图1是显示实施方式1中涉及的血液分析装置的构成的模式图。

图2是显示信息处理部的构成的框图。

图3是显示实施方式1中涉及的血液分析装置的动作的流程的流程图。

图4是显示测定样品制备处理的顺序的流程图。

图5是显示实施方式1中的测定数据解析处理的顺序的流程图。

图6A是显示正常待测样品的测定结果的散点图。

图6B是显示自缺铁性贫血的患者采集的血液待测样品的测定结果的散点图。

图6C是显示自α地中海贫血的患者采集的血液待测样品的测定结果的散点图。

图6D是显示自β地中海贫血的患者采集的血液待测样品的测定结果的散点图。

图7是显示与相对于血液待测样品中的MCH和全红细胞数的发自身荧光的红细胞数的比率的关系的图。

图8是显示与相对于缺铁性贫血的各阶段中的MCH和全红细胞数的发自身荧光的红细胞数的比率的关系的图。

图9是显示实施方式1中的分析结果的表示例的图。

图10是显示实施方式2中的测定数据解析处理的顺序的流程图。

图11是显示与缺铁性贫血的阶段和相对于全红细胞数的发自身荧光的红细胞数的比率的关系的坐标图。

图12是显示实施方式2中的分析结果的表示例的图。

图13是显示实施方式3中涉及的血液分析装置的构成的模式图。

图14是显示实施方式3中的信息处理部的动作的流程的流程图。

图15是显示实施方式4中涉及的血液分析装置的构成的模式图。

图16A是显示实施方式1中涉及的血液分析装置的动作的流程的流程图。

图16B是显示实施方式1中涉及的血液分析装置的动作的流程的流程图。

图17是显示第2测定样品制备处理的顺序的流程图。

图18是比较自染色的网织红细胞发出的自身荧光的检测结果和自未染色的网织红细胞发出的自身荧光的检测结果的坐标图。

图19是显示实施方式4中的第2测定数据解析处理的顺序的流程图。

图20是显示第1荧光强度及第1前方散射光强度的2维座标空间中的网织红细胞的检测范围的图。

图21是显示与相对于血液待测样品中的MCH和全网织红细胞数的发自身荧光的网织红细胞数的比率的关系的图。

图22是显示与缺铁性贫血的阶段和相对于全网织红细胞数的发自身荧光的网织红细胞数的比率的关系的坐标图。

图23是显示实施方式4中的分析结果的表示例的图。

图24是显示实施方式5中涉及的血液分析装置的动作的流程的流程图。

图25是显示实施方式5中的测定数据解析处理的顺序的流程图。

图26是显示实施方式5中的分析结果的表示例的图。

【实施方式】

以下参照附图说明本发明的优选的实施方式。

【实施方式1】

在实施方式1中，对于用于检测来自血液待测样品中含的红细胞的自身荧光、进行关于缺铁性贫血及地中海贫血的判断的血液分析装置进行说明。血液分析装置由流式细胞术检测血液中含的每种血细胞，对检测的血细胞进行计数。

<血液分析装置的构成>

参照图1对于血液分析装置的构成进行说明。血液分析装置1具备测定部2和信息处理部3。测定部2提取血液待测样品，从血液待测样品制备测定样品，光学测定测定样品。信息处理部3处理由测定部2的测定得到的测定数据，输出血液待测样品的分析结果。

测定部2具备待测样品吸引部4、样品制备部5、光学检测部6、HGB检测部7、信号处理电路81、微计算机82和通信接口83。

待测样品吸引部4有吸引管，由吸引管吸引试管内收容的血液待测样品。

样品制备部5有反应槽53，与试剂容器51,52连接。试剂容器51收容用于稀释血液待测样品的稀释液。试剂容器52收容溶血剂。由待测样品吸引部4吸引的血液待测样品和稀释液在反应槽53中混合，制备出第1测定样品。第1测定样品用于红细胞的测定。由待测样品吸引部4吸引的血液待测样品、稀释液和溶血剂在反应槽53中混合，制备出第2测定样品。第2测定样品用于血红蛋白浓度的测定。

光学检测部6用于由流式细胞术的红细胞及自身荧光的测定。光学检测部6具备流动池61、光源部62、荧光检测部63和散射光检测部64。试剂容器51中收容的稀释液及由样品制备部5制备的第1测定样品被供给到流动池61。流动池61形成将第1测定样品用作为稀释液的鞘液包裹的流。

光源部62是半导体激光源，向流动池61照射波长405nm的蓝色激光。

荧光检测部63的灵敏度波长范围是400nm以上、1000nm以下。散射光检测部64的灵敏度波长范围是400nm以上、1000nm以下。作为荧光检测部63及散射光检测部64，使用雪崩光电二极管。荧光检测部63及散射光检测部64是，当光照射到流动池61中的第1测定样品的流时，检测自第1测定样品发出的光。荧光检测部63及散射光检测部64输出显示光接收强度的类似物信号。以下，将自荧光检测部63输出的类似物信号称为“荧光信号”，将自散射光检测部64输出的类似物信号称为“前方散射光信号”。

HGB检测部7用于由SLS-血红蛋白法的血红蛋白浓度的测定。在HGB检测部7中，从样品制备部5供给第2测定样品。HGB检测部7向池中收容的第2测定样品照射波长555nm的光，检测由第2测定样品的吸光度。HGB检测部7输出反映吸光度的类似物信号。

信号处理电路81对于荧光检测部63、散射光检测部64、及HGB检测部7输出的类似物信号进行信号处理。信号处理电路81作为特征参数提取荧光信号及前方散射光信号中含的脉冲的峰值。以下，将荧光信号的峰值称为“荧光强度”，将前方散射光信号的峰值称为“前方散射光强度”。信号处理电路81将HGB检测部7的输出信号的强度变换为作为特征参数的血红蛋白浓度。

微计算机82控制待测样品吸引部4、样品制备部5、光学检测部6、HGB检测部7、信号处理电路81、及通信接口83。

通信接口83由通信线缆与信息处理部3连接。测定部2由通信接口83与信息处理部3进行数据通信。通信接口83是，如果进行血液待测样品的测定，则向信息处理部3发送含各特征参数的测定数据。

参照图2，对于信息处理部3的构成进行说明。信息处理部3具备本体300、输入部309和输出部310。本体300有CPU(中央处理器)301、ROM(只读存储器)302、RAM(随机接入存储器)303、硬盘304、读取装置305、输入输出界面306、图像输出界面307和通信接口308。在本实施方式中，作为输出部310使用表示图像的显示器。但是，作为输出部310，也可使用由打印输出到纸等的打印机。

CPU301执行存储到ROM302的计算机程序及加载到RAM303的计算机程序。RAM303用于读出ROM302及硬盘304中记录的计算机程序。RAM303在执行计算机程序时，也作为CPU301的作业区域被利用。

在硬盘304中安装有用于解析自测定部2给的测定数据，输出分析结果的计算机程序320。

读取装置305是软盘驱动器、CD-ROM驱动器、或者DVD-ROM驱动器等，可阅读出记录在可移动型记录介质321的计算机程序或数据。另外，在可移动型记录介质321中存储有用于使计算机作为信息处理部3发挥功能的计算机程序320。自可移动型记录介质321读出的计算机程序320被安装在硬盘304。

输入部309与输入输出界面306连接。输出部310与图像输出界面307连接。通信接口308与测定部2的通信接口83连接。

<血液分析装置的动作>

参照图3，对于血液分析装置1的动作进行说明。

首先，在步骤S101中，信息处理部3的CPU301经输入部309收到来自使用者的测定实行的指示。一旦收到测定实行的指示，则CPU301，在步骤S102中，向测定部2发送指示测定开始的指示数据。在步骤S103中，测定部2接收指示数据。微计算机82在步骤S104中实行测定样品制备处理，在步骤S105中实行RBC测定处理，在步骤S106中实行HGB测定处理。

参照图4，对于测定样品制备处理进行说明。在步骤S201中，微计算机82控制待测样品吸引部4，从试管吸引指定量血液待测样品，向反应槽53供给5μL的待测样品。接下来，在步骤S202中，微计算机82控制样品制备部5，从试剂容器51向反应槽53供给1020μL的稀释液。

反应槽53由加热器加温至指定温度，在加温的状态下，在步骤S203中进行反应槽53内的混合物的搅拌。由步骤S201～S203的动作，在反应槽53内制备第1测定样品。即，样品制备部5不溶血且不染色而制备第1测定样品。在步骤S204中，为了向光学检测部6供给，自反应槽53导出第1测定样品。

在步骤S205中，微计算机82控制待测样品吸引部4，向反应槽53供给3μL的待测样品。接下来，在步骤S206中，微计算机82控制样品制备部5，从试剂容器51向反应槽53供给997μL的稀释液，从试剂容器52向反应槽53供给500μL的溶血剂。

在步骤S207中，进行反应槽53内的混合物的搅拌。由步骤S205～S207的动作，在反应槽53内制备出第2测定样品。即，样品制备部5不染色而进行溶血，制备第2测定样品。在步骤S208中，为了向HGB检测部7供给，自反应槽53导出第2测定样品。

步骤S208的处理结束，则微计算机82向主程序返回处理。

再参照图3。在RBC测定处理中进行由光学检测部6的第1测定样品的测定。与鞘液一同第1测定样品被供给到流动池61。光源部62向流动池61中的第1测定样品的流照射光。

第1测定样品流过流动池61，则红细胞依次通过流动池61。健康者的红细胞中的蛋壳色素的存在量少，但在缺铁性贫血的患者的红细胞中含较多蛋壳色素。向存在多的蛋壳色素的红细胞照射蓝紫色激光，则释放自身荧光。自身荧光由于是波长600nm以上700nm以下的红色光，所以自各红细胞释放的自身荧光个别地由荧光检测部63检测出。另一方面，即使向几乎不含蛋壳色素的红细胞照射蓝色激光，也几乎不发生自身荧光。从而，荧光检测部63中的光接收水平成为低值，检测不到自身荧光。

每次向红细胞照射光、自红细胞发出散射光。自红细胞发出的散射光由于波长是405nm，所以由散射光检测部64检测。

荧光检测部63及散射光检测部64将根据光接收水平的电信号作为荧光信号及前方散射光信号输出。信号处理电路81从荧光信号提取荧光强度，从前方散射光信号提取前方散射光强度。

指定时间实行RBC测定处理。

在HGB测定处理中进行由HGB检测部7的第2测定样品的测定。向HGB检测部7供给第2测定样品。HGB检测部7向池内的第2测定样品照射波长555nm的光，检测吸光度，向信号处理电路81输出类似物信号。信号处理电路81将HGB检测部7的输出信号变换为血红蛋白浓度。

HGB测定处理之后，在步骤S107中，微计算机82向信息处理部3发送含各特征参数的测定数据，结束处理。

在步骤S108中，一旦信息处理部3接收测定数据，则在步骤S109中，CPU301实行测定数据解析处理，生成血液待测样品的分析结果，将分析结果储存到硬盘304。

参照图5，对于测定数据解析处理进行说明。开始测定数据解析处理，则首先CPU301，在步骤S301中，显示小红细胞性贫血的可能性的第1标志、显示缺铁性贫血的可能性的第2标志、及显示β地中海贫血的可能性的第3标志的各自被设置为初期值的0。第1标志、第2标志、及第3标志设在RAM303的特定的区域。当第1标志被设置为0时，显示小红细胞性贫血的可能性低，当第1标志被设置为1时，显示小红细胞性贫血的可能性高。当第2标志被设置为0时，显示缺铁性贫血的可能性低，当第2标志被设置为1时，显示缺铁性贫血的可能性高。当第3标志被设置为0时，显示β地中海贫血的可能性低，当第3标志被设置为1时，显示β地中海贫血的可能性高。

CPU301在步骤S302中，对红细胞进行计数。血液分析装置1通过向流过鞘流池的测定样品施加电压，捕捉由血细胞通过的电压的变化而测定血细胞的鞘流DC检测法检测红细胞。在测定数据中含红细胞的检测数据。在步骤S302中，CPU301基于红细胞的检测数据，对红细胞进行计数。

也可代替鞘流DC检测法而使用测定数据中含的前方散射光强度对红细胞进行计数。红细胞直径是约7～8μm。前方散射光强度是反映血细胞的大小的特征参数，红细胞的前方散射光强度取特定的范围的值。从而，也可将有红细胞出现的特定范围内的前方散射光强度的粒子作为红细胞，对红细胞进行计数。也可代替前方散射光强度而使用前方散射光的脉宽、脉冲面积来检测红细胞。也可代替前方散射光而检测侧方散射光，使用侧方散射光的脉冲的峰值、脉宽、或者脉冲面积来检测红细胞。

接下来，CPU301在步骤S303中，从红细胞数和血红蛋白浓度算出平均红细胞血染料量(以下称为“MCH”)。MCH由以下的式定义。但是，RGB是红细胞数，HGB是血红蛋白浓度。

【数1】

$MCH\left(pg\right)=\frac{HGB(g/dL)}{RBC(\&times;{10}^4/\mathrm{\&mu;}L)}\&times;1000$

CPU301在步骤S304中，将MCH与指定的阈值进行比较，判断小红细胞性贫血的可能性。MCH反映血液待测样品的血红蛋白量。小红细胞性贫血的待测样品与正常待测样品相比，MCH的值小。即，CPU301在MCH是阈值以下时，判断为小红细胞性贫血的可能性高。另一方面，CPU301在MCH相比阈值更大时，判断为小红细胞性贫血的可能性低。

当MCH是指定值以下时，CPU301在步骤S305中，第1标志被设置为1。在MCH相比指定值更大时，CPU301结束测定数据解析处理，向主程序返回处理。

在步骤S306中，CPU301从被作为红细胞的粒子集团中，将荧光强度是指定的阈值以上的粒子作为发自身荧光的红细胞(以下称为“自身荧光红细胞”)提取，对自身荧光红细胞进行计数。即，CPU301由检测的自身荧光的强度特别指定每种自身荧光红细胞，对自身荧光红细胞进行计数。以下，将自身荧光红细胞的数称为“自身荧光红细胞数”。其中，缺铁性贫血的患者的红细胞所发的自身荧光的值作为与不是缺铁性贫血的被检者的红细胞发的自身荧光比高的值被检测。在本实施方式中，不是缺铁性贫血的被检者的红细胞所发的自身荧光被噪声掩盖而无法检测。在本实施方式中，将检测到阈值以上的荧光强度的红细胞作为自身荧光红细胞，将检测不到阈值以上的荧光强度的红细胞定义为不发自身荧光的红细胞。

CPU301在步骤S307中，将相对于红细胞数的自身荧光红细胞数的比率(以下称为“自身荧光比率”)作为自身荧光信息算出，在步骤S308中，比较自身荧光比率和指定的第1阈值，判断缺铁性贫血的可能性。自身荧光比率是通过个别地检测自各红细胞释放的自身荧光而得到的信息。

在图6A～图6D中，纵轴显示前方散射光强度，横轴显示荧光强度。在图6A～图6D中，在区域400出现的粒子作为红细胞，在区域410出现的粒子作为自身荧光红细胞。如图6A所示，正常待测样品、即，在自健康者采集的血液待测样品的测定结果中，在区域410几乎不出现粒子。即，几乎检测不到作为自身荧光红细胞的粒子。另一方面，如图6B所示，在自缺铁性贫血的患者采集的血液待测样品(以下称为“缺铁性贫血待测样品”)的测定结果中，在区域410出现大量粒子。即，检测出大量作为自身荧光红细胞的粒子。

与缺铁性贫血相同地被分类为小红细胞性贫血的地中海贫血由于与缺铁性贫血症状及CBC项目的检查值等近似，与地中海贫血区别判断缺铁性贫血的可能性在临床上重要。如图6C及图6D所示，在自地中海贫血的患者采集的血液待测样品(以下，称为“地中海贫血待测样品”)的测定结果中，在区域410几乎不出现粒子。即，几乎检测不到作为自身荧光红细胞的粒子。

参照图7。在图7中，纵轴显示自身荧光比率，横轴显示MCH。图7中的各点显示血液待测样品。图7所示的区域420是作为小红细胞性贫血的可能性高的的范围。缺铁性贫血待测样品和地中海贫血待测样品的几乎全部在区域420出现。区域420中的血液待测样品之中，缺铁性贫血待测样品相比地中海贫血待测样品自身荧光比率更大，自身荧光比率成1％以上的小红细胞性贫血的待测样品的几乎全部是缺铁性贫血待测样品。正常待测样品的几乎全部自身荧光比率未达1％。如上所述，得知通过利用自身荧光比率或自身荧光红细胞数的值，可从地中海贫血及正常待测样品区别缺铁性贫血。

参照图8。在图8中，纵轴显示自身荧光比率，横轴显示MCH。图8中的各点显示血液待测样品。在图8中，改变点的种类而显示正常待测样品和缺铁性贫血的阶段1至阶段3的待测样品。其中，对于缺铁性贫血的阶段进行说明。阶段1是轻度的缺铁性贫血。生物化学检查项目的铁蛋白中的检查值相比正常范围更低，生物化学检查项目的CRP、ZnPP、sTfR、TfS以及血细胞计数项目的血红蛋白浓度及MCH中的各检查值在正常范围内时对应于阶段1。阶段2是中度的缺铁性贫血。铁蛋白中的检查值相比正常范围更低，CRP中的检查值是正常范围内，ZnPP、sTfR中的各检查值相比正常范围更高，TfS中的检查值相比正常范围更低，血红蛋白浓度及MCH中的各检查值在正常范围内时对应于阶段2。阶段3是重度的缺铁性贫血。铁蛋白中的检查值相比正常范围更低，CRP中的检查值是正常范围内，ZnPP、sTfR中的各检查值相比正常范围更高，TfS中的检查值相比正常范围更低，血红蛋白浓度、含MCH的CBC项目中的检查值的任何成为正常范围外时对应于阶段3。

在图8中，正常待测样品多分布在自身荧光比率是0.1％以上1％以下，MCH是25以上35以下的范围。阶段1的待测样品分布在与正常待测样品大致相同的区域。阶段2的待测样品多分布在自身荧光比率是1％以上10％以下，MCH是22以上32以下的范围。阶段3的待测样品多分布在自身荧光比率是3％以上100％以下，MCH是15以上30以下的范围。从图8可知，将第1阈值设定为3％以上10％以下左右，则可区别至少阶段3的缺铁性贫血待测样品和正常待测样品。

再参照图7。在地中海贫血待测样品之中，特别是β地中海贫血待测样品的自身荧光比率小。从而，小红细胞性贫血的可能性高的待测样品之中，自身荧光比率小的待测样品可判断为β地中海贫血的可能性高。

再参照图5。当自身荧光比率是第1阈值以上时，CPU301在步骤S309中，第2标志被设置为1，结束测定数据解析处理，向主程序返回处理。当自身荧光比率未达第1阈值时，CPU301在步骤S310中比较自身荧光比率和指定的第2阈值，判断β地中海贫血的可能性。第2阈值是相比第1阈值更小的值。当自身荧光比率是未达第2阈值时，CPU301在步骤S311中，第3标志被设置为1，结束测定数据解析处理，向主程序返回处理。在自身荧光比率是第2阈值以上时，CPU301结束测定数据解析处理，向主程序返回处理。

当自身荧光比率未达第2阈值时，也可判断为包括α地中海贫血及β地中海贫血的地中海贫血的可能性高。在不使用第2阈值，当自身荧光比率未达第1阈值时，也可判断为地中海贫血的可能性高。在将一个座标轴作为自身荧光比率，将另一个座标轴作为MCH的2维座标空间中，规定如图7所示的β地中海贫血的判断区域430，自身荧光比率及MCH进入判断区域430内时也可判断为β地中海贫血的可能性高。

也可作为不进行关于地中海贫血的判断，使用自身荧光比率进行缺铁性贫血的判断的构成。另外，也可作为不进行缺铁性贫血的判断，使用自身荧光比率进行地中海贫血的判断的构成。

在测定数据解析处理中，也求出白细胞数(WBC)、血小板数(PLT)、血细胞容量值(HCT)、平均红细胞容积(MCV)、平均红细胞血染料浓度(MCHC)、嗜中性粒细胞数(NEUT)、淋巴细胞数(LYMPH)、嗜酸性粒细胞数(EO)、单核细胞数(MONO)、网织红细胞数(RET)等。

再参照图3。CPU301在步骤S110中，将分析结果表示在输出部310，结束处理。在分析结果中含，红细胞数、血红蛋白浓度、MCH、自身荧光红细胞数、自身荧光比率的各测定结果和成为诊断的参考的参考信息。当第1标志被设置为1时，在参考信息中含显示小红细胞性贫血的可能性高的信息。当第2标志被设置为1时，在参考信息中含显示缺铁性贫血的可能性高的信息。当第3标志被设置为1时，在参考信息中含显示β地中海贫血的可能性高的信息。

参照图9，对于表示的分析结果进一步进行说明。在输出部310表示分析结果画面500。分析结果画面500有待测样品信息表示区域510、患者信息表示区域520、测定结果表示区域530和参考信息表示区域540。测定结果表示区域530有CBC项目表示区域531和自身荧光项目表示区域532。

在待测样品信息表示区域510表示成为分析结果画面500中表示的分析结果的基础的待测样品的信息。在患者信息表示区域520表示采集待测样品的受试者的信息。

在测定结果表示区域530表示由测定数据解析处理得到的各项目的测定值。在CBC项目表示区域531表示血细胞分析中的基本的的测定项目的测定值。CBC项目表示区域531中表示的测定值含红细胞(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)及MCH的测定值。在自身荧光项目表示区域532表示关于自身荧光的测定项目的测定值。自身荧光项目表示区域532中表示的测定值含自身荧光红细胞数(AF-RBC)及自身荧光比率(AF)的测定值。

在参考信息表示区域540，当由测定数据解析处理得到被认为待测样品的异常等的要向使用者报告的结果时，表示向使用者提供的参考信息。在测定数据解析处理中，当第1标志被设置为1时，在参考信息表示区域540表示作为显示小红细胞性贫血的可能性高的信息的“小红细胞性贫血？”。在测定数据解析处理中，当第2标志被设置为1时，在参考信息表示区域540表示作为显示缺铁性贫血的可能性高的信息的“铁缺乏？”。在测定数据解析处理中，当第3标志被设置为1时，在参考信息表示区域540表示作为显示β地中海贫血的可能性高的信息的“β地中海贫血？”。

用如上所述构成的血液分析装置1得到如以下一样的效果。向红细胞照射蓝色激光，则自蛋壳色素的含有量大的红细胞检测到自身荧光，自蛋壳色素的含有量小的红细胞检测不到自身荧光。自正常待测样品及地中海贫血待测样品的红细胞几乎检测不到自身荧光，自缺铁性贫血待测样品的红细胞检测到自身荧光。从而，通过检测自身荧光，可判断为不是地中海贫血的缺铁性贫血的可能性高。当判断为缺铁性贫血的可能性高时，输出显示缺铁性贫血的可能性高的信息。从而，可向使用者提供作为临床上有用的信息的显示缺铁性贫血的可能性高的信息。

小红细胞性贫血的可能性高的待测样品之中，从红细胞几乎检测不到自身荧光的待测样品是β地中海贫血的可能性高。从而，利用自身荧光比率，可判断β地中海贫血的可能性。当判断为β地中海贫血的可能性高时，输出显示β地中海贫血的可能性高的信息。从而，可向使用者提供显示作为临床上有用的信息的β地中海贫血的可能性高的信息。

血液分析装置1，不仅是缺铁性贫血及β地中海贫血，也进行关于小红细胞性贫血的判断。血液分析装置1输出关于小红细胞性贫血的判断结果和关于缺铁性贫血或β地中海贫血的判断结果，可向使用者提供用于辅助精细的贫血的诊断的信息。

<评价试验>

本发明人制成与实施方式1中涉及的血液分析装置同等的构成的评价装置，实施评价试验。在评价试验中，对于71的正常待测样品、67的缺铁性贫血待测样品、26的α地中海贫血待测样品和30的β地中海贫血待测样品，用评价装置进行测定，进行缺铁性贫血和地中海贫血的鉴别。作为比较对象，对于上述的待测样品，使用Green和King、England&Fraser、Mentzer的各鉴别式，进行缺铁性贫血和地中海贫血的鉴别。对于各鉴别式，请参照专利文献1。

对于在评价装置的鉴别结果和在鉴别式的鉴别结果，进行ROC解析。下表显示ROC解析的结果。

【表1】

鉴别方法	AUC
		评价装置	0.950
Green&King	0.892
		England&Fraser	0.874
Mentzer	0.841

AUC(曲线下面积)显示，与1越近，鉴别性能越高。从ROC解析结果知，与一般提倡的鉴别式比，得到用评价装置的鉴别良好的结果。

【实施方式2】

在实施方式2中，对于用于监测受试者的缺铁性贫血的状态的血液分析装置进行说明。

<血液分析装置的构成>

实施方式2中涉及的血液分析装置的构成与实施方式1中涉及的血液分析装置的构成相同，所以对于相同构成要素赋予相同符号，省略说明。

<血液分析装置的动作>

实施方式2中涉及的血液分析装置的动作，除测定数据解析处理及分析结果的表示之外，与实施方式1中涉及的血液分析装置的动作同样。在实施方式2中，对于测定数据解析处理及分析结果的表示进行说明，对于其他动作省略说明。

参照图10。开始测定数据解析处理，则首先CPU301在步骤S401中，使用由鞘流DC检测法的红细胞的检测数据，对红细胞进行计数。

接下来，CPU301在步骤S402中，从红细胞数和血红蛋白浓度，算出MCH。

CPU301在步骤S403中，从作为红细胞的粒子集团中，将荧光强度在指定的阈值以上的粒子作为自身荧光红细胞提取，对自身荧光红细胞进行计数。

CPU301在步骤S404中，算出自身荧光比率。将步骤S404的处理结束，则CPU301结束测定数据解析处理，向主程序返回处理。

参照图11，对于自身荧光比率的值进行说明。在图11中，横轴显示缺铁性贫血的阶段，纵轴显示自身荧光比率。随着缺铁性贫血的程度变重，自身荧光比率变大，随着缺铁性贫血的程度变轻，自身荧光比率变小。从而，由自身荧光比率的值，可推定缺铁性贫血的程度。

用测定数据解析处理得到的分析结果表示在输出部310。参照图12，对于表示的分析结果进行说明。CPU301，作为分析结果，对于相同的受试者，将多天测定的自身荧光比率以时系列的坐标图表示于输出部310。在图12中，横轴显示日期，纵轴显示自身荧光比率。在图12中显示受缺铁性贫血的治疗的受试者的分析结果。

在示于图12的例中，随时间经过，自身荧光比率变小。示于图12的虚线是关于缺铁性贫血的判断的基准线。使用者在自身荧光比率存在于相比虚线更上方时，可判断为缺铁性贫血的可能性高的，在自身荧光比率存在于相比虚线更下方时，可判断为缺铁性贫血的可能性低。在示于图12的例中，从自身荧光比率位于相比基准线更上方的状态，随时间经过而自身荧光比率减少，缺铁性贫血改善至最终自身荧光比率位于基准线附近。

通过如上所述构成，用实施方式2中涉及的血液分析装置，从相同的受试者继续采集血液待测样品，进行各自的血液待测样品的测定，由此使用者可进行缺铁性贫血的状态的监测。

也可在1台血液分析装置中搭载不仅是使用流式细胞术的缺铁性贫血的状态的监测功能，也如实施方式1中说明，搭载使用流式细胞术进行关于贫血的判断的功能。

【实施方式3】

在实施方式3中，将血液待测样品涂抹到载玻片上的涂抹标本用显微镜放大而摄像，基于血细胞的图像，对于用于检测血细胞的血液分析装置进行说明。

<血液分析装置的构成>

参照图13，对于血液分析装置的构成进行说明。血液分析装置600具备测定部610和信息处理部620。测定部610可摄像涂抹标本中的血细胞，信息处理部620可处理得到的图像而检测血细胞。在测定部610连接有涂抹标本制作装置700。

涂抹标本制作装置700从试管吸引血液待测样品，稀释血液待测样品而制备测定样品，在载玻片滴下测定样品，将测定样品延展铺薄而制作涂抹标本710。涂抹标本制作装置700向测定部610供给制作的涂抹标本710。

测定部610具备光源部611、滤镜部612、载物台613、透镜部614、作为荧光检测部的照相机615、存储器616、通信接口617和微计算机618。

光源部611可照射如白色光一样的多波长光。滤镜部612有多个狭带区滤镜。在狭带区滤镜中包括中心波长是405nm的第1滤镜631和中心波长是640nm的第2滤镜632。滤镜部612选择第1滤镜631及第2滤镜632。使自光源部611照射的光透过选择的狭带区滤镜。

载物台613保持自涂抹标本制作装置700搬送的涂抹标本710。通过狭带区滤镜的光照射到在载物台613保持的涂抹标本710。

透镜部614放大涂抹标本的像。照相机615经由透镜部614接收涂抹标本710的透射光，生成颜色图像。存储器616由照相机615记录生成的图像。

通信接口617经通信线缆与信息处理部620连接。通信接口617可将存储器616中记录的图像发送至信息处理部620。

微计算机618控制光源部611、滤镜部612、载物台613、透镜部614、照相机615、存储器616和通信接口617。

信息处理部620是计算机，具备CPU、ROM、RAM、硬盘、输入部、显示部、通信接口。在硬盘安装有用于由照相机615处理生成的图像的计算机程序。

<血液分析装置的动作>

涂抹标本制作装置700制作涂抹标本710，向测定部2供给。在测定部2中，载物台613保持涂抹标本710。光源部611向涂抹标本710照射光，滤镜部612选择第1滤镜631，其后选择第2滤镜632。来自光源部611的光通过第1滤镜631，则向涂抹标本710照射蓝色光。来自光源部611的光通过第2滤镜632，则向涂抹标本710照射红色光。

代替切换透过多波长光的滤镜的构成，也可设置照射中心波长405nm的光的光源和照射中心波长640nm的光的光源，切换光源而成向涂抹标本710照射光。

照相机615在向涂抹标本710照射蓝色光时和在涂抹标本710照射红色光时各自生成图像。以下，将照射蓝色光时生成的图像称为第1图像，将照射红色光时生成的图像称为第2图像。第1图像及第2图像记录到存储器616，向信息处理部620发送。

参照图14，对于信息处理部620的动作进行说明。信息处理部620在步骤S501中，接收第1图像及第2图像。信息处理部620的CPU在步骤S502中，使用第1图像检测红细胞，对红细胞数进行计数。红细胞吸收蓝色光，白细胞几乎不吸收蓝色光。从而，只要使用第1图像，就可将红细胞与白细胞区别检测。

CPU在步骤S503中，使用第1图像算出红细胞体积，算出血红蛋白浓度。红细胞体积自作为红细胞识别的区域的像素数求出。血红蛋白浓度自红细胞体积和作为红细胞识别的区域中的各像素的浓度求出。

CPU在步骤S504中，算出MCH。在MCH的算出中使用在实施方式1中说明的式。

CPU在步骤S505中，检测自身荧光红细胞，对自身荧光红细胞进行计数。在步骤S505中取得第1图像和第2图像的差分，基于差分检测自身荧光红细胞。

CPU在步骤S506中，求出自身荧光比率，结束处理。

信息处理部620与实施方式1中涉及的血液分析装置1的信息处理部3同样地，基于MCH进行关于小红细胞性贫血的判断，基于自身荧光比率进行关于缺铁性贫血的判断、及关于地中海贫血的判断。向信息处理部620的显示部输出红细胞数、血红蛋白浓度、MCH、自身荧光红细胞数、自身荧光比率的各测定结果，关于小红细胞性贫血的判断结果，及关于缺铁性贫血或地中海贫血的判断结果。

也可不进行关于小红细胞性贫血的判断、关于缺铁性贫血的判断、及关于地中海贫血的判断的全部，不进行关于小红细胞性贫血的判断，作为基于血细胞的图像检测自身荧光红细胞，与实施方式2同样地，将自身荧光比率值以时系列表示，使缺铁性贫血的状态的监测成为可能的构成。也可在1台的血液分析装置中，搭载使用血细胞的图像，进行关于贫血的判断的功能和缺铁性贫血的状态的监测功能。

通过如上所述构成，用实施方式3中涉及的血液分析装置600，可摄像血细胞，使用得到的图像，进行关于贫血的判断。与关于缺铁性贫血的信息一同，输出检测的自身荧光红细胞的图像，则缺铁性贫血的诊断还变得容易，所以可更有效进行诊断的辅助。

【实施方式4】

检测来自血液待测样品中含的网织红细胞的自身荧光，对于用于进行关于缺铁性贫血及地中海贫血的判断的血液分析装置进行说明。以下，将成熟的红细胞称为“红细胞”，与网织红细胞区别开来。

<血液分析装置的构成>

参照图15，对于血液分析装置100的构成进行说明。对于与实施方式1的血液分析装置1同样的构成，赋予相同符号，省略说明。

测定部200具备样品制备部800。样品制备部800有反应槽830，与试剂容器51,52,820连接。试剂容器820收容含特异性地染色网织红细胞的荧光染料的染色试剂。在染色试剂中可使用例如专利第3425830号中公开的试剂、或者Sysmex株式会社制的“FLUOROCELLRET”。

由待测样品吸引部4吸引的血液待测样品和稀释液在反应槽830中混合，制备出第1测定样品。第1测定样品用于红细胞的测定。由待测样品吸引部4吸引的血液待测样品和稀释液和溶血剂在反应槽830中混合，制备出第2测定样品。第2测定样品用于血红蛋白浓度的测定。由待测样品吸引部4吸引的血液待测样品、稀释液和染色试剂在反应槽830中混合，制备出第3测定样品。第3测定样品用于网织红细胞的测定。

光学检测部900用于由流式细胞术的红细胞、网织红细胞及自身荧光的测定。光学检测部900具备流动池910、第1光源部921、第2光源部922、第1荧光检测部931、第2荧光检测部932、第1散射光检测部941和第2散射光检测部942。流动池910的构成与实施方式1中的流动池61的构成相同，所以省略说明。

第1光源部921及第2光源部922的各自是半导体激光源。第1光源部921向流动池910照射波长640nm的红色激光。第2光源部922向流动池910照射波长405nm的蓝色激光。第1光源部921和第2光源部922向流动池910中的上下分离的2个的位置照射光。

第1荧光检测部931的灵敏度波长范围是400nm以上、1000nm以下。作为第1荧光检测部931，使用雪崩光电二极管。在第1荧光检测部931的前方设有第1滤镜933。第1滤镜933不透过波长610nm以上650nm以下的光，透过波长660nm以上的光。

第2荧光检测部932的灵敏度波长范围是400nm以上、1000nm以下。作为第2荧光检测部932，使用雪崩光电二极管。在第2荧光检测部932的前方设有第2滤镜934。第2滤镜934透过波长420nm以上630nm以下及650nm以上的光。从而，第2滤镜934阻断405nm及640nm的激光。

第1散射光检测部941及第2散射光检测部942各自的灵敏度波长范围是400nm以上、1000nm以下。作为第1散射光检测部941及第2散射光检测部942，使用光电二极管。第1散射光检测部941及第2散射光检测部942的各自设置在上下分离的2个位置。

第1光源部921向流动池910中的血细胞照射作为第1光的红色激光，则发生散射光(以下，称为“第1前方散射光”)，第1散射光光接收部941接收第1前方散射光。第2散射光光接收部942由于设在与第1散射光光接收部941不同的位置，不接收由红色激光的第1前方散射光。第2光源部922向流动池910中的血细胞照射作为第2光的蓝色激光，则发生散射光(以下，称为“第2前方散射光”)，第2散射光光接收部942接收第2前方散射光。第1散射光光接收部941由于设在与第2散射光光接收部942不同的位置，不接收由蓝色激光的第2前方散射光。

第1光源部921向流动池910中照射作为第1光的红色激光，则在由试剂容器820内收容的染色试剂染色的网织红细胞通过流动池910中时，发生660nm以上的第1波长的荧光。第1滤镜933透过第1波长的荧光，第1荧光光接收部931接收。第1光向与第2光不同的方向照射，不在第2荧光光接收部932成像。从而，第2荧光光接收部932不接收第1波长的荧光。

第2光源部922向流动池910中照射作为第2光的蓝色激光，则在红细胞或网织红细胞通过流动池910中时，发生630nm附近的第2波长的自身荧光。自身荧光透过第2滤镜934，被第2荧光光接收部932接收。第1荧光光接收部931不接收自身荧光。

第1荧光检测部931、第2荧光检测部932、第1散射光检测部941、及第2散射光检测部942各自输出显示光接收强度的类似物信号。以下，将自第1荧光检测部931输出的类似物信号称为“第1荧光信号”，将自第2荧光检测部932输出的类似物信号称为“第2荧光信号”，将自第1散射光检测部941输出的类似物信号称为“第1前方散射光信号”，将自第2散射光检测部942输出的类似物信号称为“第2前方散射光信号”。

信号处理电路810对于第1荧光检测部931、第2荧光检测部932、第1散射光检测部941、及第2散射光检测部942的各自输出的类似物信号进行信号处理。信号处理电路810将第1荧光信号、第2荧光信号、第1前方散射光信号、及第2前方散射光信号中含的脉冲的峰值作为特征参数提取。以下，将第1荧光信号的峰值称为“第1荧光强度”，将第2荧光信号的峰值称为“第2荧光强度”，将第1前方散射光信号的峰值称为“第1前方散射光强度”，将第2前方散射光信号的峰值称为“第2前方散射光强度”。

<血液分析装置的动作>

参照图16A及图16B，对于血液分析装置100的动作进行说明。步骤S601～S603的处理与实施方式1中的步骤S101～S103的处理相同，所以省略说明。步骤S604的第1测定样品调节处理，除在反应槽830中制备第1测定样品及第2测定样品之外，与实施方式1中的步骤S101的测定样品调节处理相同，所以省略说明。

在步骤S605中的RBC测定处理中，进行由光学检测部900的第1测定样品的测定。将第1测定样品与鞘液一同向流动池910供给。第2光源部922向流动池910中的第1测定样品的流照射光。

在红细胞中含有蛋壳色素时，向红细胞照射蓝色激光，则释放自身荧光。自身荧光由于是波长是630nm附近的红色光，所以个别地由第2荧光检测部932检测自各红细胞释放的自身荧光。另一方面，即使向几乎不含蛋壳色素的红细胞照射蓝色激光，也几乎不发生自身荧光。从而，第2荧光检测部932中的光接收水平成为低值，检测不到自身荧光。

每当光照射到红细胞时，自红细胞发出散射光。自红细胞发出的前方散射光由于是波长是405nm的第2前方散射光，所以由第2散射光检测部942检测。

第2荧光检测部932及第2散射光检测部942将根据光接收水平的电信号作为第2荧光信号及第2前方散射光信号输出。信号处理电路810从第2荧光信号提取第2荧光强度，从第2前方散射光信号提取第2前方散射光强度。

RBC测定处理实行指定时间。

步骤S606～S610的处理与实施方式1中的步骤S106～S110的处理相同，所以省略说明。但是，第2荧光强度与实施方式1中的荧光强度相当，第2前方散射光强度与实施方式1中的前方散射光强度相当。

CPU301在步骤S611中，判断网织红细胞的测定必要与否。在步骤S611中，CPU301判断，第3标志被设置为1与否，即，在测定数据解析处理中，判断为β地中海贫血的可能性高与否。在第3标志被设置为1时，CPU301判断为需要网织红细胞的测定，处理移向步骤S612。在第3标志被设置为0时，CPU301判断为不需进行网织红细胞的测定，结束处理。

CPU301在步骤S612中，向测定部200发送网织红细胞的测定开始的指示数据。在步骤S613中，测定部200接收指示数据。微计算机82在步骤S614中，实行第2测定样品调节处理，在步骤S615中，实行网织红细胞测定处理，在步骤S616中，实行HGB测定处理。

参照图17，对于第2测定样品制备处理进行说明。在步骤S701中，微计算机82控制待测样品吸引部4，从在步骤S201中吸引了血液待测样品的试管再次吸引指定量血液待测样品，向反应槽830供给指定量的待测样品。接下来，在步骤S702中，微计算机82控制样品制备部800，从试剂容器51向反应槽830供给指定量的稀释液，从试剂容器820向反应槽830供给指定量的染色试剂。

反应槽830由加热器加温至指定温度，在加温的状态下，在步骤S703进行反应槽830内的混合物的搅拌。由步骤S701～S703的动作，在反应槽830中制备第3测定样品。第3测定样品中的网织红细胞由染色试剂染色。在步骤S704中，为了向光学检测部900供给，自反应槽830导出第3测定样品。

步骤S704的处理结束，则由步骤S705～S708的处理，样品制备部800制备第2测定样品。步骤S705～S708的处理与实施方式1中的步骤S205～S208的处理相同，所以省略说明。

步骤S708的处理结束，则微计算机82向主程序返回处理。

再参照图16B。在步骤S615的网织红细胞测定处理中进行由光学检测部900的第3测定样品的测定。第3测定样品与鞘液一同被供给到流动池910。第1光源部921及第2光源部922向流动池910中的第3测定样品的流同时照射光。

自第1光源部921向通过流动池910的网织红细胞照射红色激光，则发生第1波长的荧光和红色的第1前方散射光。第1荧光光接收部931接收第1波长的荧光，输出第1荧光信号。第1散射光光接收部941接收第1前方散射光，输出第1前方散射光信号。

通过流动池910的网织红细胞及红细胞中含蛋壳色素，则自第2光源部922照射蓝色激光，则发生第2波长的自身荧光和蓝色的第2前方散射光。第2荧光光接收部932接收自身荧光，输出第2荧光信号。第2散射光光接收部942接收第2前方散射光，输出第2前方散射光信号。通过流动池910的网织红细胞及红细胞中几乎不含蛋壳色素，则即便自第2光源部922照射蓝色激光，也几乎不发生自身荧光，第2荧光光接收部932不检测自身荧光。第2前方散射光与网织红细胞及红细胞中含蛋壳色素时同样地发生，第2散射光光接收部942接收第2前方散射光，输出第2前方散射光信号。

在网织红细胞测定处理中，检测用染色试剂染色的网织红细胞的自身荧光。此时，是否由网织红细胞的染色而自身荧光的检测精度降低成为问题。参照图18，对于网织红细胞的染色给自身荧光的检测的影响进行说明。在图18中，纵轴显示向由染色试剂特异性地染色网织红细胞的待测样品照射蓝色激光时得到的相对于网织红细胞数的发自身荧光的网织红细胞的数的比率(后述的“第2自身荧光比率”)，横轴显示向未染色网织红细胞的待测样品照射蓝色激光时得到的第2自身荧光比率。如图20所示，染色网织红细胞时的第2自身荧光比率与不染色网织红细胞时的第2自身荧光比率有强的相关。如上所述知，几乎见不到随网织红细胞的染色的有无给自身荧光的检测带来的影响。

再参照图16B。步骤S616的HGB测定处理与实施方式1中的HGB测定处理相同，所以省略说明。

HGB测定处理之后，在步骤S617中，微计算机82向信息处理部3发送含各特征参数的测定数据，结束处理。

在步骤S618中，信息处理部3接收测定数据，则在步骤S619中，CPU301实行第2测定数据解析处理，生成血液待测样品的分析结果，将分析结果储存于硬盘304。

参照图19，对于第2测定数据解析处理进行说明。步骤S801～S805的处理与实施方式1中的步骤S301～S305的处理相同，所以省略说明。

在步骤S806中，CPU301基于第1荧光强度和第1前方散射光强度，检测网织红细胞。使用图20对步骤S806的处理进行说明。在将第1荧光强度作为一方的座标轴，将第1前方散射光强度作为另一方的座标轴的2维空间中，标绘测定数据中含的各粒子的信息，则如图20所示。在图20中，在区域950分布着网织红细胞。将区域950的信息作为网织红细胞的检测区域存储到硬盘304。CPU301将区域950中出现的粒子作为网织红细胞检测。

再参照图19。在步骤S807中，CPU301，从作为网织红细胞的粒子集团中，将第2荧光强度在指定的阈值以上的粒子作为发自身荧光的网织红细胞(以下称为“自身荧光网织红细胞”)提取，对自身荧光网织红细胞进行计数，将结果作为自身荧光网织红细胞数。即，CPU301由检测的自身荧光的强度特别指定每种自身荧光网织红细胞，对自身荧光网织红细胞进行计数。具体而言，CPU301在将第2荧光强度作为一方的座标轴，将第2前方散射光强度作为另一方的座标轴的2维空间中，规定第2荧光强度在上述的阈值以上的检测区域，将在此检测区域出现的粒子作为自身荧光网织红细胞检测。其中，作为与不是缺铁性贫血的被检者的网织红细胞发的自身荧光比高的值检测缺铁性贫血的受试者的网织红细胞所发的自身荧光。在本实施方式中，不是缺铁性贫血的被检者的网织红细胞所发的自身荧光被噪声掩盖而无法检测。在本实施方式中，将检测到阈值以上的第2荧光强度的网织红细胞作为自身荧光网织红细胞，将未检测到阈值以上的第2荧光强度的网织红细胞定义为不发自身荧光的网织红细胞。在将第2荧光强度作为一方的座标轴，将第1前方散射光强度作为另一方的座标轴的2维空间中，规定第2荧光强度在上述的阈值以上的检测区域，也可将在此检测区域出现的粒子作为自身荧光网织红细胞检测。此时，可省略第2前方散射光光接收部942。

CPU301在步骤S808中，将相对于网织红细胞数的自身荧光网织红细胞数的比率(以下，称为“第2自身荧光比率”)作为网织红细胞的自身荧光信息算出。CPU301在步骤S809中，比较第2自身荧光比率和指定的第3阈值，判断缺铁性贫血的可能性。第2自身荧光比率是通过个别地检测自各网织红细胞释放的自身荧光而得到的信息。

参照图21。在图21中，纵轴显示第2自身荧光比率，横轴显示MCH。图21中的各点显示血液待测样品。示于图21的区域960是作为小红细胞性贫血的可能性高的范围。缺铁性贫血待测样品和地中海贫血待测样品的几乎全部在区域960出现。在区域960中的血液待测样品之中，缺铁性贫血待测样品相比地中海贫血待测样品，第2自身荧光比率更大。缺铁性贫血待测样品多分布在第2自身荧光比率在30％以上的范围。地中海贫血待测样品多分布在第2自身荧光比率未达30％的范围。正常待测样品也多分布在第2自身荧光比率未达30％的范围。如上所述知，通过利用第2自身荧光比率，可从地中海贫血及正常待测样品区别缺铁性贫血。利用自身荧光网织红细胞数，也可判断缺铁性贫血的可能性。此时，也可从地中海贫血及正常待测样品区别缺铁性贫血。

缺铁性贫血的患者的网织红细胞富含蛋壳色素。网织红细胞在发生后2、3天失去细胞器而成为成熟的红细胞。认为在网织红细胞变化为红细胞的过程中，网织红细胞中的多数蛋壳色素与细胞器一同失去。因此，网织红细胞中含的蛋壳色素的量比红细胞多。

健康者及地中海贫血患者的网织红细胞的蛋壳色素的含有量少。从而，缺铁性贫血的患者的网织红细胞中含的蛋壳色素的量与健康者及地中海贫血患者的网织红细胞比显著地多。从而，通过利用第2自身荧光比率，可以相比利用红细胞的自身荧光比率时更高精度进行缺铁性贫血的可能性的判断。

参照图22。在图22中，纵轴显示第2自身荧光比率，横轴显示MCH。图22中的各点显示血液待测样品。在图22中，改变点的种类而显示正常待测样品和缺铁性贫血的阶段1至阶段3的待测样品。

在图22中，正常待测样品多分布在第2自身荧光比率在10％以上30％以下，MCH在25以上35以下的范围。阶段1的待测样品多分布在第2自身荧光比率在10％以上40％以下，MCH在25以上35以下的范围。即，阶段1的待测样品与正常待测样品分布在大致相同的区域。阶段2的待测样品多分布在第2自身荧光比率在30％以上80％以下，MCH在22以上32以下的范围。阶段3的待测样品多分布在第2自身荧光比率在50％以上100％以下，MCH在15以上30以下的范围。比较图22和图8，对于正常待测样品、各阶段的缺铁性贫血待测样品的任何，都与红细胞的自身荧光比率比，第2自身荧光比率变大。特别是得知，阶段2及3的待测样品中的第2自身荧光比率相比红细胞的自身荧光比率显著更大。

认为多数自缺铁性贫血的患者采集的网织红细胞富含蛋壳色素。另一方面认为，在网织红细胞之时，即使多含蛋壳色素，也在变化为红细胞的过程中失去多数蛋壳色素，有蛋壳色素的含有量少的红细胞。从蛋壳色素的含有量少的红细胞仅发生微弱的自身荧光，无法作为自身荧光红细胞检测到。由于这样的红细胞以一定的比例存在，认为缺铁性贫血的受试者中的第2自身荧光比率相比红细胞的自身荧光比率变得更大。

由于缺铁性贫血的患者的网织红细胞与红细胞比富含蛋壳色素，自网织红细胞发出的自身荧光的光量与自红细胞发出的自身荧光的光量比大。从而，相比红细胞网织红细胞的自身荧光的检测精度更高。因此，第2自身荧光比率相比红细胞的自身荧光比率精度更高。通过使用这样的第2自身荧光比率，可相比红细胞的自身荧光比率更升高关于贫血的判断的精度。

由图22知，如果将第2阈值设定在30％以上50％以下左右，可区别至少阶段3的缺铁性贫血待测样品和正常待测样品。

再参照图19。当第2自身荧光比率是第3阈值以上时，CPU301在步骤S810中，给第2标志设置1，结束第2测定数据解析处理，向主程序返回处理。在第2自身荧光比率未达第3阈值时，CPU301在步骤S811中，比较第2自身荧光比率和指定的第4阈值，判断β地中海贫血的可能性。第4阈值是相比第3阈值更小的值。

再参照图21。β地中海贫血待测样品的第2自身荧光比率相比正常待测样品及α地中海贫血待测样品的第2自身荧光比率更小。具体而言，β地中海贫血待测样品多分布在第2自身荧光比率在20％以下的范围。β地中海贫血的患者的网织红细胞中含的蛋壳色素的量与缺铁性贫血的患者的网织红细胞比显著地少。从而，通过利用第2自身荧光比率，可相比利用红细胞的自身荧光比率时更高精度进行β地中海贫血的可能性的判断。

再参照图19。在第2自身荧光比率未达第4阈值时，CPU301在步骤S812中，给第3标志设置1，结束第2测定数据解析处理，向主程序返回处理。在第2自身荧光比率是第4阈值以上时，CPU301结束第2测定数据解析处理，向主程序返回处理。

在第2自身荧光比率未达第4阈值时，也可判断为含α地中海贫血及β地中海贫血的地中海贫血的可能性高。不使用第4阈值，在第2自身荧光比率未达第3阈值时，也可判断为地中海贫血的可能性高。将一个座标轴作为第2自身荧光比率，将另一个座标轴作为MCH的2维座标空间中，规定如图21所示的β地中海贫血的判断区域970，在第2自身荧光比率及MCH进入判断区域970内时，也可判断为β地中海贫血的可能性高。

也可作为不进行关于地中海贫血的判断，使用第2自身荧光比率进行缺铁性贫血的判断的构成。另外，也可作为不进行缺铁性贫血的判断，使用第2自身荧光比率进行地中海贫血的判断的构成。

再参照图16B。CPU301在步骤S620中，将分析结果表示在输出部310，结束处理。在分析结果中含，红细胞数、血红蛋白浓度、MCH、自身荧光红细胞数、红细胞的自身荧光比率、自身荧光网织红细胞数、第2自身荧光比率的各测定结果和成为诊断的参考的参考信息。当第1标志被设置为1时，在参考信息中含显示小红细胞性贫血的可能性高的信息。当第2标志被设置为1时，在参考信息中含显示缺铁性贫血的可能性高的信息。当第3标志被设置为1时，在参考信息中含显示β地中海贫血的可能性高的信息。

参照图23，对于表示的分析结果进一步进行说明。在输出部310表示分析结果画面980。分析结果画面980有待测样品信息表示区域510、患者信息表示区域520、测定结果表示区域981和参考信息表示区域540。测定结果表示区域981有CBC项目表示区域531和自身荧光项目表示区域982。对于待测样品信息表示区域510、患者信息表示区域520、CBC项目表示区域531、参考信息表示区域540而言，与实施方式1同样，所以省略说明。

在自身荧光项目表示区域982，表示关于自身荧光的测定项目的测定值。自身荧光项目表示区域982中表示的测定值含自身荧光红细胞数(AF-RBC)、红细胞的自身荧光比率(AF)、自身荧光网织红细胞数(AF-RET)、及第2自身荧光比率(AF2)的测定值。

第1测定数据解析处理的结果，当判断为网织红细胞的测定是必要的时，也可不是自动地测定网织红细胞的自身荧光，进行关于贫血的判断的构成。也可作为不事先检测红细胞的自身荧光，检测网织红细胞的自身荧光，进行关于贫血的判断的构成。具体而言，也可作为不实行上述的步骤S602～S611的动作，仅实行步骤S611、S612～619的动作的构成。例如，在预先从疑似贫血的受试者采集的待测样品时，可不检测红细胞的自身荧光，检测网织红细胞的自身荧光，使用网织红细胞的自身荧光信息进行关于贫血的判断。由此，由于不进行红细胞的自身荧光的检测，可直接检测网织红细胞的自身荧光，一边抑制待测样品的消费量，一边高精度地进行关于贫血的判断。在东南亚等的贫血的患者多的地域，这样的构成是特别有用的。另外，测定红细胞的自身荧光，当得到地中海贫血的可能性高的分析结果时，使用者也可手动运行血液分析装置，测定网织红细胞的自身荧光，关于地中海贫血进行详细的判断。

【实施方式5】

在实施方式5中，对于用于监测受试者的缺铁性贫血的状态的血液分析装置进行说明。

<血液分析装置的构成>

实施方式5中涉及的血液分析装置的构成与实施方式4中涉及的血液分析装置的构成相同，所以对于相同构成要素赋予相同符号，省略说明。

<血液分析装置的动作>

实施方式5中涉及的血液分析装置是在实施方式4中涉及的血液分析装置的动作之中，不进行步骤S602～S610的动作。即，血液分析装置不检测红细胞的自身荧光，检测网织红细胞的自身荧光。参照图24，对于血液分析装置100的动作进行说明。

在步骤S951中，信息处理部3的CPU301经输入部309收到来自使用者的测定实行的指示。一旦收到测定实行的指示，则CPU301在步骤S952中，向测定部200发送指示测定开始的指示数据。在步骤S953中，测定部200接收指示数据。微计算机82在步骤S954中，实行测定样品调节处理，在步骤S955中，实行网织红细胞测定处理，在步骤S956中，实行HGB测定处理。步骤S954～S956的处理与实施方式4中的步骤S614～S616的处理相同，所以省略说明。

HGB测定处理之后，在步骤S957中，微计算机82向信息处理部3发送含各特征参数的测定数据，结束处理。

在步骤S958中，信息处理部3接收测定数据，则在步骤S959中，CPU301实行测定数据解析处理，生成血液待测样品的分析结果，将分析结果储存到硬盘304。

参照图25。开始测定数据解析处理，首先CPU301在步骤S971中，使用由鞘流DC检测法的红细胞的检测数据对红细胞进行计数。

接下来，CPU301在步骤S972中，从红细胞数和血红蛋白浓度算出MCH。

CPU301在步骤S973中，基于第1荧光强度和第1前方散射光强度，检测网织红细胞。步骤S973的处理是与实施方式4中的步骤S806同样。

CPU301在步骤S974中，从作为网织红细胞的粒子集团中，将第2荧光强度在指定的阈值以上的粒子作为自身荧光网织红细胞提取，对自身荧光网织红细胞进行计数。

CPU301在步骤S975中，算出第2自身荧光比率。结束步骤S975的处理，CPU301结束测定数据解析处理，向主程序返回处理。

与红细胞的自身荧光比率同样地，随着缺铁性贫血的程度变重，第2自身荧光比率变大，随着缺铁性贫血的程度变轻，第2自身荧光比率变小。从而，由第2自身荧光比率的值，可推定缺铁性贫血的程度。

再参照图24。CPU301在步骤S960中，将分析结果表示在输出部310，结束处理。

参照图26，对于表示的分析结果进行说明。CPU301，作为分析结果，对于相同的受试者，将多天测定的第2自身荧光比率以时系列的坐标图表示于输出部310。在图26中，横轴显示日期，纵轴显示第2自身荧光比率。在图26中显示受缺铁性贫血的治疗的受试者的分析结果。

在示于图26的例中，随时间经过，第2自身荧光比率变小。示于图26的虚线是关于缺铁性贫血的判断的基准线。使用者在第2自身荧光比率存在于相比虚线更上方时，可判断为缺铁性贫血的可能性高，在第2自身荧光比率存在于相比虚线更下方时，可判断为缺铁性贫血的可能性低。在示于图26的例中，从第2自身荧光比率位于相比基准线更上方的状态得知，随时间经过，第2自身荧光比率减少，缺铁性贫血改善至最终第2自身荧光比率位于基准线附近。

红细胞的寿命是约120天。自新的红细胞检测的自身荧光反映关于现在的受试者的贫血的状态，但自旧的红细胞检测的自身荧光反映红细胞诞生当时的受试者的关于贫血的状态。即，红细胞的自身荧光比率反映从现在起约120天之前的受试者的关于贫血的状态。因此，红细胞的自身荧光比率适宜于受试者的缺铁性贫血的长期的的倾向的掌握，但不必然正确地反映现在的受试者的缺铁性贫血的状态。

另一方面，网织红细胞从发生至变成红细胞的期间是2～3天。因此，自网织红细胞检测的自身荧光反映关于现在的受试者的贫血的状态。即，第2自身荧光比率反映现在的受试者的缺铁性贫血的状态。从而，通过将第2自身荧光比率以时系列表示，使用者可更加正确地监测受试者的缺铁性贫血的状态。

在1台的血液分析装置中，不仅是使用流式细胞术的缺铁性贫血的状态的监测功能，也可如实施方式4说明，也搭载使用流式细胞术进行关于贫血的判断的功能。

【其他实施方式】

在实施方式1～5中，对于使用自身荧光比率进行关于贫血的判断的构成进行了描述，但不限于此。由于红细胞的自身荧光与贫血关联，通过利用检测的关于自身荧光红细胞的信息，可进行关于贫血的判断。具体而言，作为自身荧光信息利用自身荧光红细胞数，当发自身荧光的红细胞的数相比指定的第1阈值更多时，也可判断为缺铁性贫血的可能性高。另外，小红细胞性贫血的可能性高，并且，当发自身荧光的红细胞的数相比指定的第2阈值更少时，也可判断为地中海贫血的可能性高。另外，作为自身荧光信息，利用相对于不发自身荧光的红细胞数的发自身荧光的红细胞的比率，相对于不发自身荧光的红细胞数的发自身荧光的红细胞的比率相比指定的第1阈值更高时，也可判断为缺铁性贫血的可能性高。另外，小红细胞性贫血的可能性高，并且，相对于不发自身荧光的红细胞数的发自身荧光的红细胞的比率相比指定的第2阈值更低时，也可判断为地中海贫血的可能性高。另外，作为自身荧光信息，利用自身荧光红细胞的荧光强度的总和，自身荧光红细胞的荧光强度的总和相比指定的第1阈值更大时，也可判断为缺铁性贫血的可能性高。小红细胞性贫血的可能性高，并且，自身荧光红细胞的荧光强度的总和相比指定的第2阈值更小时，也可判断为地中海贫血的可能性高。另外，作为自身荧光信息，自身荧光红细胞的荧光强度的分布、例如，将自身荧光红细胞的荧光强度的出现区域自荧光强度低的区域分为“低”、“中”、“高”，基于在各自的区域出现的自身荧光红细胞的比例，也可进行贫血的可能性的判断。此时，例如在“高”的区域出现的自身荧光红细胞的比例相比指定的第1阈值更高时，也可判断为缺铁性贫血的可能性高。另外，小红细胞性贫血的可能性高，并且，例如在“低”的区域出现的自身荧光红细胞的比例相比指定的第2阈值更高时，可判断为地中海贫血的可能性高。或者，作为关于自身荧光红细胞的荧光强度的分布的信息，利用自身荧光红细胞的荧光强度的最大值，自身荧光红细胞的荧光强度的最大值相比指定的第1阈值更大时，也可判断为缺铁性贫血的可能性高。小红细胞性贫血的可能性高，并且，当自身荧光红细胞的荧光强度的最大值相比指定的第2阈值更小时，也可判断为地中海贫血的可能性高。检测网织红细胞的自身荧光，取得与上述同样的关于自身荧光网织红细胞的信息，也可利用此关于自身荧光网织红细胞的信息进行关于贫血的判断。在其中举的各实施方式中，第1阈值相比第2阈值更大。另外，也可将第1阈值和第2阈值设为相同。

在实施方式1～5中，向测定样品照射中心波长405nm的蓝色光，对于进行自身荧光的检测的构成进行描述，但不限于此。用于自身荧光的检测的蓝色光的波长带区是400nm以上、435nm以下即可。

在实施方式1、2、4、5中，对于荧光检测部有400nm以上、1000nm以下的灵敏度波长带区的构成进行描述，但不限于此。只要是荧光检测部是600nm以上、700nm以下的范围内，也可有上述以外的灵敏度波长带区。

在实施方式1、3、4中，对于利用MCH进行关于小红细胞性贫血的判断的构成进行描述，但不限于此。也可利用MCV或MCHC进行关于小红细胞性贫血的判断。

在实施方式1、3、4中，对于进行关于小红细胞性贫血的判断、关于缺铁性贫血的判断、及关于地中海贫血的判断的构成进行描述，但不限于此。也可作为不进行关于小红细胞性贫血的判断，检测自身荧光红细胞，进行关于缺铁性贫血的判断、及关于地中海贫血的判断的构成。也可作为不进行关于小红细胞性贫血的判断，检测自身荧光网织红细胞，进行关于缺铁性贫血的判断、及关于地中海贫血的判断的构成。

Claims (20)

1.血液分析装置，其具备：

用于向从血液制备的测定样品照射光的光源部，

用于检测自照射了上述光的上述测定样品中的红细胞发出的自身荧光的荧光检测部，

用于取得由上述荧光检测部检测的关于发自身荧光的红细胞的自身荧光信息的信息处理部，

其中上述信息处理部这样构成：基于上述自身荧光信息，进行关于贫血的判断。

2.权利要求1所述的血液分析装置，其中

上述荧光检测部这样构成：个别地检测自上述测定样品中的各红细胞发出的自身荧光，

上述信息处理部这样构成：基于由上述荧光检测部检测的个别的自身荧光，取得上述自身荧光信息。

3.权利要求1所述的血液分析装置，其中上述信息处理部这样构成：基于上述自身荧光信息，进行关于缺铁性贫血的判断。

4.权利要求1所述的血液分析装置，其中上述信息处理部这样构成：基于上述自身荧光信息，进行关于地中海贫血的判断。

5.权利要求3所述的血液分析装置，其中

上述自身荧光信息显示发自身荧光的红细胞的数，

上述信息处理部这样构成：当发自身荧光的红细胞的数相比指定的阈值更多时，判断为缺铁性贫血的可能性高。

6.权利要求3所述的血液分析装置，其中

上述自身荧光信息显示相对于全红细胞数的发自身荧光的红细胞的数的比率，

上述信息处理部这样构成：当相对于全红细胞数的发自身荧光的红细胞的数的比率相比指定的阈值更高时，判断为缺铁性贫血的可能性高。

7.权利要求3所述的血液分析装置，其中

上述自身荧光信息显示相对于不发自身荧光的红细胞的数的发自身荧光的红细胞的数的比率，

上述信息处理部这样构成：当相对于不发自身荧光的红细胞的数的发自身荧光的红细胞的数的比率相比指定的阈值更高时，判断为缺铁性贫血的可能性高。

8.权利要求1所述的血液分析装置，其中上述自身荧光信息显示发自身荧光的红细胞的荧光强度的分布的扩大。

9.权利要求8所述的血液分析装置，其中上述信息处理部这样构成：

将发自身荧光的红细胞分类为至少第1自身荧光红细胞组和相比上述第1自身荧光红细胞组中含的红细胞发更强的自身荧光的第2自身荧光红细胞组，

基于上述第1自身荧光红细胞组中含的红细胞数和上述第2自身荧光红细胞组中含的红细胞数，进行关于贫血的判断。

10.权利要求3所述的血液分析装置，其中

上述自身荧光信息是发自身荧光的红细胞的荧光值的总和，

上述信息处理部这样构成：当发自身荧光的红细胞的荧光值的总和相比指定的阈值更高时，判断为缺铁性贫血的可能性高。

11.权利要求1所述的血液分析装置，其还具备光检测部，所述光检测部用于从照射了上述光的上述测定样品中的红细胞，检测与上述自身荧光不同的波长带区的光，

上述信息处理部这样构成：基于由上述光检测部检测的上述光，对红细胞数进行计数。

12.权利要求1所述的血液分析装置，其中上述信息处理部这样构成：基于上述自身荧光信息和基于从上述受试者采集的血液的血红蛋白浓度及红细胞数得到的信息，进行关于贫血的判断。

13.权利要求1所述的血液分析装置，其还具备输出部，

上述信息处理部这样构成：基于上述自身荧光信息，将关于贫血的信息输出到上述输出部。

14.权利要求1所述的血液分析装置，其还具备用于不溶血且不染色上述血液而制备上述测定样品的样品制备部。

15.权利要求1所述的血液分析装置，其还具备将血液样品和含特异性地染色网织红细胞的荧光染料的染色试剂混合而制备上述测定样品的样品制备部，

上述光源部具备

第1光源部，其用于照射第1光，所述第1光使染色的网织红细胞发第1波长的荧光，和

第2光源部，其用于照射第2光，所述第2光使红细胞发与上述第1波长不同的第2波长的自身荧光，

上述荧光检测部具备

第1荧光检测部，其用于检测自照射了上述第1光的网织红细胞发出的上述第1波长的荧光，和

第2荧光检测部，其用于检测自照射了上述第2光的红细胞发出的上述第2波长的自身荧光，

上述信息处理部这样构成：基于由上述第1荧光检测部检测的上述第1波长的荧光和由上述第2荧光检测部检测的上述第2波长的自身荧光，取得关于发自身荧光的网织红细胞的上述自身荧光信息，基于上述自身荧光信息，进行关于贫血的判断。

16.权利要求15所述的血液分析装置，其中上述自身荧光信息显示相对于全网织红细胞数的发自身荧光的网织红细胞的数的比率。

17.权利要求1所述的血液分析装置，其中

上述光源部这样构成：向上述测定样品照射400nm以上435nm以下的波长带区的光，

上述荧光检测部这样构成：作为上述自身荧光，检测600nm以上700nm以下的波长带区的光。

18.权利要求1所述的血液分析装置，其还具备用于使上述测定样品流过的流动池，

上述光源部这样构成：向流过上述流动池中的上述测定样品照射上述光，

上述荧光检测部这样构成：检测自流过上述流动池中的红细胞发出的上述自身荧光。

19.权利要求1所述的血液分析装置，其还具备用于保持上述测定样品被涂抹到载玻片上的涂抹标本的载物台，

上述光源部这样构成：向在上述载物台保持的上述涂抹标本照射上述光，

上述荧光检测部这样构成：检测自在上述载物台保持的上述涂抹标本中的红细胞发出的上述自身荧光。

20.由信息处理部的贫血的诊断辅助方法，其中

上述信息处理部由向从血液制备的测定样品照射光时自上述测定样品中的红细胞发出的自身荧光的检测结果，取得关于发自身荧光的红细胞的自身荧光信息，

上述信息处理部基于上述自身荧光信息，进行关于贫血的判断。