CN105362289B - 一种阴道滞留硼酸制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种阴道滞留硼酸制剂及其制备方法。具体而言，优选的阴道滞留硼酸制剂的主要成分包括：羟苯甲酯、羟苯丙酯、山梨酸钾、壳聚糖、甘油、卡波姆974、聚卡波非、硼酸、和纯化水。这种阴道滞留硼酸制剂的主要性能特征是可以在阴道中滞留和释放作为抑菌成分的硼酸，实验证明应用这种凝胶可以较长时间内在阴道液中达到和维较较高的硼酸浓度。本发明还公开了这种阴道滞留硼酸制剂的制备方法。进一步，试验证明这种阴道滞留硼酸制剂的动力黏度＞100000厘泊，pH值为2至5，保水性能良好，无致敏性，无阴道刺激性，并有抑制细菌和真菌作用。

Description

一种阴道滞留硼酸制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种阴道滞留硼酸抗菌凝胶及其制备方法，属于医药领域。阴道滞留硼酸抗菌凝胶是一种硼酸的新型制剂，由具有生物粘附性的高分子材料形成骨架结构，在阴道液中能滞留和释放作为抑菌成分的硼酸，有抑菌作用，涉及制剂学，分析化学，和微生物学。

背景技术

大约80-95％的阴道炎源于白色念珠菌感染。T.glabrata感染只占阴道炎病因的5％-15％，而且治疗的方法非常有限。所以文献中对T.glabrata阴道炎治疗的报道不多。

但是T.glabrata的发病率在不断地增加，这可能是由于全身口服康唑类药物短期治疗和非处方局部抗真菌治疗的过度使用。

大多数T.glabrata阴道炎的患者都是慢性和棘手的病例。这些阴道真菌多对咪唑和康唑类药物产生抵抗。T.glabrata对药物相对敏感性的降低可能是这些抗真菌剂对T.glabrata进行选择的结果。

硼酸浓度在10和20毫克/毫升之间时可以抑制尿液中几乎所有常见的真菌或细菌。

在体外试验中，4％的硼酸可以抑制2×106/毫升的白色念珠菌的增生。虽然硼酸还没有被广泛研究作为霉菌性阴道炎的治疗手段，有人报道硼酸治疗念珠菌性外阴阴道炎的治愈率＞90％，持续14天硼酸治疗的效果可以与康唑类药物相当。

由于这些原因，有报道采用硼酸作为一线用药对顽固性的T.glabrata阴道炎进行治疗。硼酸治疗的临床显效率可以达到81％，而真菌学根除率可以达到77％。

临床使用过程中，使用600毫克/天，一个疗程2周基本上不会引起不良反应，但是外阴灼烧感在一些病人中较常见。对复发性真菌性阴道炎，可以进行硼酸胶囊每周2次，共1至3个月的治疗。600毫克的胶囊制剂通常是药房临时制备的，因为还没有批准上市的商品化硼酸制剂产品可供临床医生和病人使用。

细菌性阴道炎是全球最常见的阴道感染。虽然厌氧菌的抗菌治疗能有效缓解短期症状，细菌性阴道炎治疗后3个月30％的复发率给病人带来极大的困惑。

有应用抗菌素维持治疗方案的报道，如使用阴道0.75％甲硝唑凝胶每周两次，虽然不能治愈细菌性阴道炎，却可减少细菌性阴道炎的复发。不幸的是，当停止使用这个抑制性维持疗法时，细菌性阴道炎仍会复发。

有人假设，阴道加德纳菌在阴道上皮细胞壁上形成的生物菌膜对甲硝唑的抗菌作用形成了抵抗。应用阴道外用硼酸的抗菌疗法可以促进生物膜去除和提高阴道加德纳菌的清除，同时可以减少其他潜在细菌性病原体的侵入和减少细菌性阴道炎的复发。

在一项研究中，对58名妇女累计共77次反复发作的细菌性阴道炎进行了治疗。累计共60次反复发作的细菌性阴道炎完成了硝基咪唑和硼酸疗法，在4到12周接受了后续评估。在7和12周后评估，硝基咪唑和硼酸疗法的治愈率达88％到92％。在12，16，和28周接受评估，累积治愈率分别为87％，78％和65％。没有观察到硼酸的不良反应。

由于雌激素水平下降，妇女中年以后通常出现萎缩性阴道炎的症状。据估计，10％至40％的绝经后妇女有萎缩性阴道炎症状。妇女的整个生命周期中，阴道上皮受循环雌激素水平的影响而发生变化。在童年，阴道上皮浅薄。到了青春期，由于雌激素的刺激变厚，雌激素刺激产生丰富的糖原，乳酸菌依靠糖原产生乳酸，降低阴道pH值致3.5～4.5，形成天然防御屏障防止阴道及泌尿道感染。提高阴道pH值使阴道易受链球菌，葡萄球菌，和大肠菌群等感染。

绝经后，雌激素(主要是雌二醇)水平大大降低，从大于120微克每毫升减少至约18皮克每毫升。紧接着激素水平下降出现众多细胞学变化，包括结缔组织增生，弹性蛋白破碎，和胶原蛋白的玻璃样变化。这些变化可能会导致肉芽，裂隙，瘀斑，毛细血管扩张和溃疡。绝经后的变化并不限于生殖道，也包括尿道。阴道和尿道的上皮细胞都会因雌激素依赖性在绝经后出现不利变化。

更年期是循环雌激素水平下降的首要原因。因此，它是萎缩性阴道炎的最主要病因。在绝经前妇女中，放射治疗，化学治疗，免疫失调和卵巢切除术等可以抑制卵巢雌激素的产生。在妇女产后哺乳期，受催乳激素的拮抗作用，雌激素水平也会下降。抗雌激素药物的副作用，包括甲羟孕酮，三苯氧胺，那唑，醋酸亮丙瑞林和那法瑞林，也可能成为萎缩性阴道炎的原因。萎缩性阴道炎的严重程度与妇女是否绝经前即缺乏雌激素，性交频率，是否吸烟，有无阴道分娩，是否有过阴道手术等有关。

萎缩性阴道炎的前题通常是雌激素刺激的长期性减少。阴道润滑减少是一个雌激素减少的早期标志。生殖器症状包括皮肤干燥，烧灼感，压迫感，性交疼痛，阴道分泌物减少，白带增多，和瘙痒等。尿路症状包括尿道不适，频率，血尿，尿路感染，排尿困难和压力性尿失禁等。萎缩性阴道炎可合并念珠菌感染，滴虫感染，或细菌性阴道炎。这些感染有可加剧阴道萎缩症状。随着时间的推移，阴道润滑不足往往会导致性功能障碍相关的情绪困扰。

由于缺乏天然雌激素是出现萎缩性阴道炎的首要原因，激素替代治疗是最合乎逻辑的选择。雌激素替代治疗可恢复正常的pH值，稠化阴道上皮，并再生阴道上皮血管。适当的雌激素替代疗法有助于增加浅表细胞数量，减轻现有症状，预防泌尿生殖系统症状的发展。但雌激素治疗的禁忌症包括对雌激素敏感的肿瘤，末期肝衰竭，和与雌激素相关的血栓症。雌激素治疗的不良反应也很突出，包括乳房胀痛，阴道出血风险增加，雌激素依赖性肿瘤风险增加，和子宫内膜癌和增生等。另外，雌激素治疗起效时间可能很长，要完全消除干燥感，24个月的治疗有可能是必要的。即便如此，有些患者(约10-25％)甚至对这种治疗不响应。

因此，对不愿意使用雌激素，对雌激素治疗有禁忌症，或出现雌激素治疗不良反应的萎缩性阴道炎患者需要其他的替代疗法。润滑剂和保湿剂可以帮助保持阴道分泌功能，增加舒适度等作用。通常像KY或Astronglide类的润滑油或保湿剂能短时间有效的缓解萎缩性阴道炎症状，但持续时间只有几分钟。这些润滑剂可能会流得到处都是，滞留效果差，并且在患者首次应用时常感到冰冷不适。

水溶性聚合物被常用作药物传递系统的载体。药物传递系统利用水溶性聚合物的生物粘附属性，可以实现特定位点药物的靶向释放。生物粘附过程主要依赖于生物粘附剂的性质，第一阶段包括生物粘附与膜之间的亲密接触，第二阶段涉及生物粘附对上皮或粘膜组织的渗透。在生理pH下的粘膜网络可以携带负电荷，粘膜上唾液酸和硫酸位点的高电荷密度的存在可显著促进生物粘附。

具有生物粘附性的高分子材料可以用于口腔，眼睛，鼻腔，皮肤，阴道，和肺部等途径的药物传递系统。由于这些高分子材料有粘性，它们被广泛的应用于控释和缓释制剂。以聚卡波菲为例，口服给予大鼠包含氯噻嗪和聚卡波菲的制剂能持续释放氯噻嗪达8小时之久。聚卡波菲凝胶提供了一种胃内滞留系统。这种现象取决于其粘度。有人通过十二指肠插管技术研究了犬类的胃排空速度，发现聚卡波菲的浓度越高，胃排空的滞后时间越长。该结论是，聚卡波非通过其表观粘度增加胃潴留。由于聚卡波菲含有大量羧酸基团，它还具有高度的pH缓冲能力。另外，具有生物粘附性的高分子材料普遍具有遇水溶胀的性质，因此具有高度的吸水和保水功能，可以作为水溶性润滑剂使用。

中国发明专利CN101773516B公布了一种阴道用酸性缓冲凝胶，此发明以聚卡波菲和卡波姆为酸剂，以羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯三者的钠盐为碱剂，以水和甘油为溶剂，组成具有缓冲容量的pH缓冲体系，具有维持阴道pH值作用。中国发明专利CN102266283B公布了一种妇科阴道用酸性缓冲杀菌凝胶，此发明在以酸性缓冲高聚物聚卡波菲、卡波姆等组成的凝胶内混入V80或者单双链复合季铵盐类的其中一种，用于女性阴道炎的治疗。中国发明专利CN102688182A公布了一种阴道pH值缓冲抗菌凝胶，其主要成分包括聚卡波菲、卡波姆、乙二胺四乙酸二钠、壳聚糖、甘油、三乙醇胺、对羟基苯甲酸甲酯和去离子水。发明旨在利用聚卡波菲的弱酸性和壳聚糖的抗菌性治疗阴道炎症。经管以上的专利都用到了聚卡波菲和卡波姆为酸性缓冲体系制成凝胶，它们用到的其他抗菌或抑菌组分各不相同。以上各专利都针对降低阴道pH值和治疗一般性阴道炎提出了相应的解决方案，但他们都没有针对抵抗性阴道炎提出解决方案。

中国发明专利CN101951868B公布了用硼酸单独作为活性药物成分在制备用于治疗和/或预防阴道感染和/或致病性阴道生物被膜的药物中的用途。虽然这个专利用体外实验的方法证明了硼酸对生物被膜的破坏作用，它并没有根本上改变临床上应用硼酸进行细菌性或霉菌性阴道炎的治疗方案。

发明内容

已发表的文献未报道应用具有生物粘附性的高分子材料用于制备硼酸的阴道滞留制剂。也没有人应用阴道滞留硼酸制剂作为抑菌剂。这种阴道滞留硼酸抑菌制剂可以用于霉菌性、细菌性、和滴虫性阴道炎，特别是复发性和抵抗性阴道炎的治疗。同时具有调节阴道pH值和保湿润滑的作用，可以对合并或没有合并细菌或霉菌或滴虫感染的萎缩性阴道炎起到预防和治疗的作用。这项发明旨在取代临床上临时制备使用的硼酸胶囊，为医生和患者提供更可控、更有效、更舒适、更便捷的复发性阴道炎解决方案。

因此，本发明的一个主要目的是通过提供阴道滞留硼酸制剂用以在较长时间内在阴道液中维持较高的硼酸浓度。介于硼酸在浓度10-20毫克/毫升之间可以抑制几乎所有常见细菌或真菌生长，理想状态下阴道滞留硼酸制剂在阴道液中释放的硼酸应达到相近的浓度。这种硼酸释放过程可以由体外实验模拟。

本发明的另一目的是提供一种阴道滞留硼酸制剂用于抑制细菌和霉菌生长，这种抑制作用可以通过体外实验的方法证明。

本发明的另一个目的是提供一种阴道滞留硼酸制剂，可以用于霉菌性、细菌性、和滴虫性阴道炎，特别是复发性和抵抗性阴道炎的治疗。

本发明的另一个目的是提供一种阴道滞留硼酸制剂，具有调节阴道pH值和保湿润滑的作用，可以对合并或没有合并细菌或霉菌或滴虫感染的萎缩性阴道炎起到预防和治疗的作用。

本发明的另一个目的是提供一种阴道滞留硼酸制剂，包括但不限于半固体制剂，如凝胶、乳剂、膏剂、软胶囊、或其他半固体制剂。

本发明的另一个目的是提供一种阴道滞留硼酸制剂，具有均匀连续性的质地，对用户而言，不会有颗粒感和不适感。

本发明的另一个目的是提供一种阴道滞留硼酸制剂，使用安全，没有刺激性，致敏性，和细胞毒性。

本发明的另一个目的是提供一种硼酸缓释制剂的制备工艺，得到有均匀连续性的质地的产品，包括如何放大生产，用于临床研究。

在本发明的另一个目的，是为使用药学上可接受的硼酸，水合物和其它衍生物，为治疗患者提供了一种方法。所述方法包括在有效的给药方案的范围内，给与患者如上所述的阴道滞留硼酸制剂。该病条件一般包括但不限于霉菌性、细菌性、滴虫性、萎缩性阴道炎，宫颈炎，和其他妇科炎症。

其它目的，优点，和本发明的新颖特征将部分阐述于下面的说明。并且本领域技术人员经过阅读研究本发明专利后，可以理解，或者可以通过本发明的实践而得知本发明。

发明详述

一.定义与命名

本文所述的生物粘附是两种材料(其中至少一种是在自然界的生物)在界面力作用下经历一段较长时间后能被保持在一起的状态。生物粘附意味着运载药物的载体系统能与特定的生物表面的结合，这种生物表面可以是上皮组织或粘膜组织的表面上。

本文所述的生物粘附性的高分子材料是可以充当粘合剂的聚合物材料，它可以是从生物单体，例如糖形成的合成胶水，或其他设计为可附着到生物组织上的合成材料。

本文所述的具有生物粘附性的高分子材料包括，但不限于，阿拉伯树胶acaciagum海藻酸alginic acid卡波姆carbomer/carbopol聚卡波菲polycarbophil羟丙基甲基纤维素hydroxypropyl methylcellulose透明质酸钠sodium hyaluronate果胶pectin聚乙烯醇polyvinyl alcohol聚乙烯吡咯烷酮polyvinyl pyrollidone黄蓍tragacanth

本文所述的阴道滞留制剂是指所用的制剂配方可以使得药物滞留于阴道内，缓慢的随时间释放活性物质。这对于阴道内用药十分重要，因为阴道液的分泌常常造成活性物质的快速流失。这样的制剂可以帮助活性成分达到和维持一定的浓度，控制活性成分的释放，从而达到理想的治疗效果。

二、新型配方

在一方面，本发明提供了一种阴道滞留硼酸制剂，其中含有0.1-10％的硼酸和具有生物粘附性的高分子材料，在阴道液中能阴道中滞留和释放作为抑菌成分的硼酸。

在实施方案11-16中，本发明提供了硼酸与具有生物粘附性的高分子材料结合的阴道制剂。

在优选的实施方案中，卡波姆974或聚卡波非可以作为这种阴道制剂的滞留和释放基质。

在实施方案17-18中，本发明提供了硼酸，聚丙烯酸类的高分子材料(卡波姆974和/或聚卡波非)，及壳聚糖结合的阴道制剂。

在优选的实施方案中，这种阴道制剂含有壳聚糖，用于增强抑菌作用。壳聚糖是一种自然的抗菌剂，浓度高于0.01％的壳聚糖会产生过多的颗粒和粗糙感，并影响制剂的均匀度。

在实施方案1-3中，本发明提供了硼酸与聚丙烯酸类的高分子材料(卡波姆974和/或聚卡波非)结合的阴道制剂。

在优选的实施方案中，5％的硼酸用于作为这种制剂的活性成分。这种制剂含有浓度尽量高的硼酸，以增强制剂的抗菌效果。但是，高于5％的硼酸难于溶解于水，造成所形成制剂的颗粒和粗糙感。

在优选的实施方案中，1.5％的聚丙烯酸类的高分子材料用于作为这种制剂的滞留和释放基质。低于0.5％的聚丙烯酸类的高分子材料形成比较稀的凝胶，粘度过低。高于3％的聚丙烯酸类的高分子材料形成比较稠的凝胶，粘度过高。

在优选的实施方案中，这种阴道制剂含有甘油，用于增加保湿和润滑作用。

在优选的实施方案中，这种阴道制剂含有羟苯甲酯、羟苯丙酯、和/或山梨酸钾，用作防腐剂。

在实施方案19-25中，本发明提供了其他阴道半固体和固体制剂，包括乳剂、膏剂、和软胶囊，这些制剂作为硼酸与聚丙烯酸类的高分子材料(卡波姆974和/或聚卡波非)结合的阴道制剂使用。

在实施方案9中，本发明提供了硼酸与聚丙烯酸类的高分子材料(卡波姆974和聚卡波非)结合的阴道凝胶的生产方法。这种硼酸制剂的制备工艺，可以得到有均匀连续性的质地的产品，用于临床研究和产品批量生产上市。

在优选的实施方案中，这种生产方法要求制备时硼酸需先溶于水。

在优选的实施方案中，这种生产方法要求制备时具有生物粘附性的高分子材料需分批加入水溶液，并伴随剧烈搅拌。

在另一方面，本发明提供了对这种阴道滞留硼酸制剂的评价。这种阴道滞留硼酸制剂在阴道液中能滞留和释放作为抑菌成分的硼酸。

在实施方案5-7中，本发明提供了制作模拟阴道液的配方，用猪阴道和控温在37度的冷凝管搭建的人工阴道，和利用阴道凝胶滞留装置得到的硼酸释放特征。

在实施方案4中，本发明提供了用甲基纤维素代替聚丙烯酸类的高分子材料(卡波姆974和聚卡波非)制成的硼酸凝胶对照组，用以对比衡量聚丙烯酸类的高分子材料(卡波姆974和聚卡波非)的滞留和释放硼酸的能力。

在优选的实施方案中，对比配方一、二、三、和四，卡波姆974和聚卡波非同时使用用于制备硼酸阴道凝胶，可以在0-2小时内释放高于10毫克/毫升的硼酸，并在以后维持高于2毫克/毫升的硼酸阴道液浓度。用卡波姆974和/或聚卡波非作为基质配方的硼酸阴道凝胶明显优于用甲基纤维素制成的制剂，表明硼酸在具有生物粘附性的高分子材料的作用下可以常时间的滞留于阴道中，并在滞留期间释放具有抗菌作用的硼酸。

在优选的实施方案中，卡波姆974和聚卡波非的使用浓度分别在0.5％和1％。

三、功效

在一方面，本发明提供了一种阴道滞留硼酸制剂，用以在较长时间内在阴道液中维持较高的硼酸浓度，用于抑制细菌和霉菌生长。

在实施方案8中，本发明提供了体外抑菌实验对配方一的阴道制剂进行了抑菌能力的评价。阴道凝胶明显行抑制和杀灭铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球、大肠埃希菌、和白色念珠菌的作用，表明含硼酸及聚丙烯酸类的高分子材料的阴道制剂可以抑制细菌和霉菌生长。

所述的阴道滞留硼酸制剂可以用于治疗阴道和宫颈疾病，一般包括但不限于霉菌性、细菌性、滴虫性、萎缩性阴道炎，宫颈炎，和其他妇科炎症；可以用于霉菌性、细菌性、和滴虫性阴道炎，特别是复发性和抵抗性阴道炎的治疗。

在另一方面，本发明提供了一种阴道滞留硼酸制剂，具有调节阴道pH值和保湿润滑的作用，可以对合并或没有合并细菌或霉菌或滴虫感染的萎缩性阴道炎起到预防和治疗的作用。

在实施方案10中，本发明提供了对配方一的外观，感官，物理，和化学性质的测试，这种阴道滞留硼酸制剂的pH值在2-5之间，符合阴道的自然生理pH，可以用于调节阴道pH值，恢复阴道对病菌外界侵袭的抵御能力。配方一的感官均匀、细腻，可以对萎缩性阴道炎起到润滑的作用，缓解萎缩性阴道炎的临床症状。配方一的阴道凝胶具有均匀连续性的质地，对用户而言，不会有颗粒感和不适感。

在另一方面，本发明提供了一种阴道滞留硼酸制剂，使用安全，没有刺激性，致敏性，和细胞毒性。

在实施方案10中，本发明提供了对配方一的刺激性，致敏性，和细胞毒性的测试，实验表明配方一的阴道制剂没有没有刺激性，致敏性，和细胞毒性。

在另一方面，本发明提供了一种阴道滞留硼酸制剂，包括使用药学上可接受的硼酸，水合物和其它衍生物，为治疗患者提供了一种方法。所述方法包括在有效的给药方案的范围内，给与患者如上所述的阴道滞留硼酸制剂。该病条件一般包括但不限于霉菌性、细菌性、滴虫性、萎缩性阴道炎，宫颈炎，和其他妇科炎症。

其它目的，优点，和本发明的新颖特征部分阐述于上面的说明。本领域技术人员经过阅读研究本发明专利后，可以理解，或者可以通过本发明的实践而得知本发明。对于其他没有涉及的方面，如果本领域技术人员经过阅读研究本发明专利后可以很容易得知，并应用于没有授权的产品研发，生产，和上市，则构成对本发明的侵权。

附图说明

图1：实验室制备的阴道滞留硼酸凝胶

图2：阴道滞留硼酸凝胶装于阴道适配器中

图3：硼酸凝胶阴道滞留实验示意图

图4：硼酸测定标准曲线

图5：阴道滞留硼酸凝胶硼酸成分在模拟阴道液中的释放

图6：阴道滞留硼酸凝胶的抑菌能力

具体实施方式

下面通过实施例来进一步说明本发明。实施例是为本发明提出说明，而不是为限制本发明。所以，本发明的权利要求范围内，对实施例的简单改进构成专利侵权。

实施例1：

作为配方一，量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅拌边(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸、0.2g羟苯甲酯和0.03g羟苯丙酯溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入0.01g壳聚糖(搅拌15分钟)、加入0.1g山梨酸钾、15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入0.5g卡波姆974和1g聚卡波非，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例2：

作为配方二，量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅拌边(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸、0.2g羟苯甲酯和0.03g羟苯丙酯溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入0.01g壳聚糖(搅拌15分钟)、加入0.1g山梨酸钾、15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g聚卡波非，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例3：

作为配方三，量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅拌边(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸、0.2g羟苯甲酯和0.03g羟苯丙酯溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入0.01g壳聚糖(搅拌15分钟)、加入0.1g山梨酸钾、15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g卡波姆974，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例4：

作为对照组，量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅拌边(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸、0.2g羟苯甲酯和0.03g羟苯丙酯溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入0.01g壳聚糖(搅拌15分钟)、加入0.1g山梨酸钾、15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g甲基纤维素，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例5：

按以下配方制备模拟阴道液，最后调节pH值至4.2：

组成	模拟阴道液(g/L)
		氯化钠	3.51
氢氧化钾	1.40
		氢氧化钙	0.222
小牛血清白蛋白	0.018
		乳酸	2.00
醋酸	1.00
		甘油	0.16
尿素	0.40
		葡萄糖	5.00
pH值	4.2

实施例6：

取猪阴道(从养猪场采购，4度保存)，按图3装置固定在和猪阴道大小匹配的冷凝管(例如，长11厘米，外径5厘米，内径1到2.4厘米)中。在猪阴道的内壁均匀涂膜3克凝胶。在一个烧杯中加入模拟阴道液，用低速水泵以3毫升/小时的速度将37度水浴预热的模拟阴道液传输入装有猪阴道的冷凝管中。与此同时，将阴道液用水泵分流到冷凝管外套中，用以保持37度，模拟人体阴道条件。

按0-10分钟，10-20分钟，20-30分钟，50-60分钟，110-120分钟，230-240分钟，470-480分钟，和950-960分钟的取样时间时间点用小试管收集装有猪阴道的冷凝管中流下的模拟阴道液，每管约0.5毫升。对收集的模拟阴道液稀释后进行硼酸含量测定。

对加卡波姆和聚卡波非的5％硼酸阴道凝胶(配方一)，单加聚卡波非的5％硼酸阴道凝胶(配方二)，单加卡波姆的5％硼酸阴道凝胶(配方三)，和单加甲基纤维素的5％硼酸阴道凝胶(对照组)按上面的方法进行比较分析。

实施例7：

精密称取硼酸502.4mg(99.5％)至100ml容量瓶中，再稀释用于标准曲线的中硼酸的量依次为5μg、10μg、25μg、50μg、250μg，用紫外可见分光光度计测定吸光度。根据吸光度绘制出标准曲线。结果见图4。

取收集的阴道液，稀释至250ml，取1ml，用姜黄素比色法测定硼酸含量。

具体而言，对标准和样品溶液，量取一定量溶液(0至5毫升)于25毫升塑料试管中，加水稀释至5毫升。加硫酸(1+1)溶液1毫升，振荡混匀。然后加乙基己二醇/三氯甲烷(1∶9)溶液5毫升，盖上盖子，振摇约2分钟，静置分层，吸取下层乙基己二醇/三氯甲烷溶液，并通过7cm直径干燥快速滤纸过滤。取1毫升过滤液于50毫升塑料试管中，依次加入0.10％姜黄/冰醋酸(w/v)溶液1毫升，浓硫酸0.5毫升，摇匀，静置30分钟，加无水乙醇25毫升，静置10分钟后，于550nm处用1cm比色皿测定吸光度。

结果见图5和下表。

配方一：

试管编号	1	2	3	4	5	6	7	8
									吸光度	0.3357	0.4306	0.4165	0.4475	0.4464	0.1802	0.1630	0.1140
硼酸(mg)	5.21	6.90	6.65	7.21	7.19	2.43	2.12	1.25

配方二：

试管编号	1	2	3	4	5	6	7	8
									吸光度	0.4361	0.3341	0.2942	0.3301	0.2115	0.1457	0.1405	0.0993
硼酸(mg)	7.00	5.18	4.47	5.11	2.99	1.82	1.72	0.99

配方三：

试管编号	1	2	3	4	5	6	7	8
									吸光度	0.2538	0.2450	0.2408	0.2270	0.2555	0.2067	0.2158	0.2154
硼酸(mg)	3.75	3.59	3.51	3.27	3.78	2.91	3.07	3.06

配方四：

试管编号	1	2	3	4	5	6	7	8
									吸光度	0.1362	0.1547	0.1486	0.1100	0.1099	0.0755	0.0515	0.0550
硼酸(mg)	1.65	1.98	1.87	1.18	1.18	0.56	0.13	0.20

实施例8：

新鲜菌体培养见下表，铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球、大肠埃希菌、白色念珠菌为液体培养物，离心收集菌体，用0.9％无菌氯化钠溶液冲洗并制成每毫升含菌数约为108cfu的菌悬液。用平皿法测定1毫升菌悬液中所含的菌数。

菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2～8℃，可在24小时内使用。

取包装完整的供试品份，分别直接接种4种试验菌。1克供试品中(大约3克)接种菌液的体积为20微升，接菌量为105～106cfu/克。接种菌液，使供试品中的验菌均匀分布，充分混合，然后置20～25℃避光贮存。每次从供试品中取约1克试验

在0，14，和28天，稀释1000倍后用平皿法测定菌数，结果如下表和图6。

实施例9：

以生产8L配方一为例：

1、向乳化锅内加入6640g纯化水，打开称量袋或称量瓶，分别加入400g硼酸、16g羟苯甲酯和2.4g羟苯丙酯，把加热控制面板设置加热到55℃，启动搅拌按钮，搅拌速度50HZ，搅拌60分钟，使其充分溶解。

2、充分溶解后，冷却至40℃以下，打开锅盖加入0.8g壳聚糖，盖上锅盖，启动搅拌按钮，搅拌速度50HZ，搅拌30分钟。

3、打开锅盖分别加入8g山梨酸、1200g甘油，盖上锅盖搅拌速度50HZ，搅5分钟。

4、打开锅盖将40g卡波姆974P NF通过20目筛网均匀筛分到锅内，盖上锅盖，启动搅拌按钮，搅拌速度50HZ，当粉末全部进入水中时，抽真空，压力表显示为-0.08MPa，搅拌120分钟，使卡波姆974P NF充分溶胀。

5、两小时后，，再打开锅盖将80g聚卡波非AA-1通过20目筛网均匀筛分到锅内，盖上锅盖，启动搅拌按钮，搅拌速度50HZ，当粉末全部进入水中时，抽真空，压力表显示为-0.08MPa，搅拌120分钟，使聚卡波非AA-1充分溶胀。

6、搅拌完成后对产品进行灌装，首先用纯化水及75％的医用酒精对凝胶灌装机清洗消毒，应确保料斗及管道内清洁。调整调压阀，压力表显示为0.4MPa，调整计量阀到所需填充量(3g/支)。将运转开关旋转至手动模式。给药器加料口与灌装机出料口对准，用右脚踩脚踏开关，将产品灌入给药器，连续进行灌装。在灌装的时候控制装量。

7、灌装完成后对产品进行封口，贴标签、装小盒盒装大箱。

实施例10：

对生产的凝胶进行了外观和感官，物理性质(动力粘度)，化学性质(pH值)，和安全性质(细胞毒性，迟发型超敏反应，和阴道刺激)项目的评估，结果如下：

实施例11：

量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅边拌(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸，溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g聚卡波非，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例12：

量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅边拌(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸，溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g卡波姆934，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例13：

量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅边拌(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸，溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g卡波姆940，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例14：

量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅边拌(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸，溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g卡波姆974，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例15：

量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅边拌(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸，溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g聚乙烯吡咯烷酮，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例16：

量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅边拌(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸，溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g黄蓍，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例17：

量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅边拌(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸，溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入0.01g壳聚糖(搅拌15分钟)、15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g聚卡波非，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例18：

量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅边拌(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入0.01g壳聚糖(搅拌15分钟)、加入0.1g山梨酸钾、15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g聚卡波非，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。

实施例19：

量取83ml制备的标准乳液(如市场上可以购买的无香味剂JERGENS乳液)，加热至55℃，边搅拌边(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸溶解(搅拌一小时)，加入0.5g聚卡波非，降温至室温，搅拌至均匀(搅拌时间一个小时)。

实施例20：

量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅拌边(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入0.01g壳聚糖(搅拌15分钟)、加入0.1g山梨酸钾、15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入1.5g聚卡波非，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)。将凝胶灌入粘膜上使用的卫生棉条。

实施例21：

量取20克PEG800，60克PEG4000，加热至80℃溶解，边搅边拌(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸溶解(搅拌一小时)，转移到栓剂模具里，降温到室温，或在冰箱内降温到固化，然后将栓剂取出封装。

实施例22：

量取83ml纯化水，加热至55℃，边搅边拌(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入0.01g壳聚糖(搅拌15分钟)、加入0.1g山梨酸钾、15g甘油溶解(搅拌5分钟)，加入0.5g聚卡波非；取10ml矿物油，加入1.5g虫腊，2g单硬脂酸甘油酯，0.2g对羟基苯甲酸丙酯，加热至55℃，混合两相，搅拌至充分获得乳剂(搅拌时间4个小时)。

实施例23：

量取5g硼酸，加入0.01g壳聚糖，加入1.5g聚卡波非，搅拌均匀(搅拌时间1个小时)，获得粉剂。粉剂可以直接放入阴道使用，或灌入胶囊内使用。

实施例24：

量取5g硼酸，加入0.01g壳聚糖，5g微晶纤维素，10g乳糖，0.5g交叉羧甲基纤维素钠，0.1g硬脂酸镁，加入1.5g聚卡波非，搅拌均匀(搅拌时间1个小时)，然后将混合均匀的粉，用压片机制的片剂使用。

实施例25：

量取30ml PEG400，50ml丙二醇，10ml中链甘油三酯，1ml聚山梨酯，加热至55℃，边搅拌边(转速200-300转/f分钟)加入5g硼酸溶解(搅拌一小时)，降温至室温，加入0.01g壳聚糖(搅拌15分钟)、加入0.1g山梨酸钾，1.5g聚卡波非，搅拌至溶胀充分(搅拌时间4个小时)，将获得的半固体灌入软胶囊后使用。

Claims (9)

1.一种阴道滞留硼酸制剂，其特征在于含有0.1-10％的硼酸和具有生物粘附性的高分子材料，所述具有生物粘附性的高分子材料能在阴道中滞留和释放作为抑菌成分的硼酸，所述具有生物粘附性的高分子材料为聚丙烯酸类的高分子材料卡波姆和聚卡波非。

2.权利要求1所述的阴道滞留硼酸制剂，其特征在于含有壳聚糖，用于增强抑菌作用。

3.权利要求1所述的阴道滞留硼酸制剂，其特征在于含有甘油，用于增加保湿和润滑作用。

4.权利要求1所述的阴道滞留硼酸制剂，其特征在于含有羟苯甲酯、羟苯丙酯、和/或山梨酸钾，用作防腐剂。

5.权利要求1所述的阴道滞留硼酸制剂，其特征在于是半固体或固体制剂。

6.权利要求5所述的阴道滞留硼酸制剂，其特征在于所述半固体或固体制剂是凝胶、乳剂、膏剂、软胶囊、硬胶囊。

7.制备权利要求1所述的阴道滞留硼酸制剂所用的方法，其特征在于制备时硼酸需先溶于水。

8.制备权利要求1所述的阴道滞留硼酸制剂所用的方法，其特征在于制备时具有生物粘附性的高分子材料需分批加入水溶液，并伴随剧烈搅拌。

9.权利要求1所述的阴道滞留硼酸制剂在制备用于治疗阴道疾病的药物中的应用，所述阴道疾病为细菌性或萎缩性阴道炎。