CN105343005A - 一种新型中药纳米粒口服吸收增强技术 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种新型中药纳米粒口服吸收增强技术，属于中药制剂及制备工艺领域。本发明系采用溶剂注入-超高压匀质法制备以乳转铁蛋白为载体的纳米粒：将处方量药物溶于适当有机溶剂中，作为油相。按重量比取相应浓度的乳转铁蛋白溶于纯水中并以有机酸调节pH为3～5，37℃水浴保温，作为水相。搅拌条件下，将油相缓慢注入水相中形成粗乳。粗乳经超高压匀质循环数次，减压挥去溶剂，干燥后即得以乳转铁蛋白为载体的纳米粒。该纳米制剂制备工艺简单，条件温和，可显著改善药物的体外溶出及体内吸收状况，是一种新型纳米粒口服吸收增强技术，具有良好的应用潜能。

Description

一种新型中药纳米粒口服吸收增强技术

技术领域

本发明涉及一种新型中药纳米粒口服吸收增强技术，属于中药制剂及制备工艺领域。

背景技术

中药一般来源于天然，其药效组分没有经过ADME设计或化学修饰，普遍具有低溶解度、低渗透性的特点从而导致其口服生物利用度很低，极大制约了中药临床药效的发挥。例如黄酮类成分是中药多成分、多环节、多靶点整合调节作用的重要物质基础，但口服给药后，大量黄酮类成分存在生物利用度低的现象，如水飞蓟素、淫羊藿总黄酮、葛根总黄酮、齐墩果酸等。

采用纳米技术可以提高中药难吸收成分的口服生物利用度，但纳米粒子例如脂质体、固态脂质纳米粒、纳米结构脂质体等口服后主要经Peyer结上的M细胞或胞饮作用转运，在胃肠道中的吸收较为有限。微乳和自微乳给药系统促进口服吸收的作用较好，但是由于中药用量大、给药周期长，微乳中表面活性剂的造成的肠道毒性问题有待解决。

近年来，乳铁蛋白(lactoferrin，LF)因其安全高效的促吸收功能，在新型给药系统中的研究与应用逐渐引起关注。现已证实多种生物的肠道上皮细胞表面均存在大量转铁蛋白受体，能够介导LF通过内吞方式进入体内，同时，LF具有部分对抗胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的降解作用，在胃肠道中稳定性好，可用于改善口服给药吸收情况较差的众多药物。目前载药乳铁蛋白给药系统的研究通常采用化学合成的方式将药物分子与载体材料结合，如将乳铁蛋白巯基化后与聚合物马来酞亚胺-聚乙二醇-聚乳酸一端的马来酰亚胺基相连接，或有研究将乳铁蛋白通过聚乙二醇连接到阳离子高分子聚酰胺-胺为基础的载体上，实现载药，其制备过程复杂，合成高分子材料中残留的引发剂和未聚合的单体，具有较大毒性，可能对人体造成严重后果。因此，无需要化学合成就能将药物与载体相连构新型给药传输系统的制备方法成为研究者关心的问题。

本发明的主要优势在于仅通过超高压力作用即可使转铁蛋白分子结构中富含的二硫键发生交联反应，包裹药物形成载药纳米粒，同时借助于转铁蛋白分子荷电所形成的空间静电排斥力进一步稳定的纳米粒子，该纳米制剂制备工艺简单，条件温和，可显著改善药物的体外溶出及体内吸收状况，是一种新型纳米粒口服吸收增强技术，具有良好的应用潜能。

发明内容

本发明内容提供了一种新型中药纳米粒口服吸收增强技术，其特征在于仅采用溶剂注入-超高压匀质法即可制备以乳转铁蛋白为载体的纳米粒。

本发明所述载药转铁蛋白的纳米粒制备方法如下：将处方量药物溶于适当有机溶剂中，作为油相。按重量比取相应浓度的乳转铁蛋白溶于纯水中并以有机酸调节pH为3～5，37℃水浴保温，作为水相。搅拌条件下，将油相缓慢注入水相中形成粗乳。粗乳经超高压匀质循环数次，减压挥去溶剂，干燥后即得以乳转铁蛋白为载体的纳米粒。

所载药物可包括中药黄酮类药物如水飞蓟素、淫羊藿总黄酮、葛根总黄酮、齐墩果酸等，并以水飞蓟素、齐墩果酸为优选药物。

制备方法中的有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、二氯甲烷、三氯甲烷等。

制备方法中的有机酸包括枸橼酸、琥珀酸、酒石酸、草酸、苹果酸等。

制备方法中的干燥方法包括冷冻干燥、喷雾干燥等。

制备方法中选定乳铁蛋白水溶液的配制浓度范围为0.4～1.2g/ml，乳铁蛋白水溶液的PH值范围为3.0～5.0，乳铁蛋白与药物的质量比范围为1∶1～1∶9。

附图说明

图1齐墩果酸乳铁蛋白纳米粒粒径测定结果

图2齐墩果酸乳铁蛋白纳米粒Zeta电位测定结果

图3齐墩果酸乳铁蛋白纳米粒透射电镜照片

图4原料药、物理混合物及齐墩果酸乳铁蛋白纳米粒溶出结果

具体实施方式

实施例1：齐墩果酸乳铁蛋白纳米粒的制备

精密称取处方量齐墩果酸溶于无水乙醇中，50℃水浴加热使其完全溶解。按重量比1∶6称取适量Lf加水于37℃条件下超声，使之溶解完全，用柠檬酸调节Lf水溶液pH为4.0，搅拌条件下将齐墩果酸注入LF水溶液中形成粗乳。粗乳移置高压均质机中，采用1500bar压力循环3次，后将其转入旋转蒸发器，45℃下旋转蒸发除尽乙醇，过0.45μm微孔滤膜，即得齐墩果酸乳铁蛋白纳米混悬液。将上述混悬液置冷冻干燥机中冷冻干燥48h，即得。

实施例2：齐墩果酸乳铁蛋白纳米粒的制备

精密称取处方量齐墩果酸溶于甲醇中，50℃水浴加热使其完全溶解。按重量比1∶9称取适量Lf加水于37℃条件下超声，使之溶解完全，用柠檬酸调节Lf水溶液pH为5.0，搅拌条件下将齐墩果酸注入LF水溶液中形成粗乳。粗乳移置高压均质机中，采用2500bar压力循环3次，后将其转入旋转蒸发器，45℃下旋转蒸发除尽甲醇，过0.45μm微孔滤膜，即得齐墩果酸乳铁蛋白纳米混悬液。将上述混悬液经喷雾干燥后，即得。

实施例3：水飞蓟素乳铁蛋白纳米粒的制备

精密称取处方量水飞蓟素溶于丙酮中，40℃水浴加热使其完全溶解。按重量比1∶8称取适量Lf加水于37℃条件下超声，使之溶解完全，用酒石酸调节Lf水溶液pH为5.0，搅拌条件下将水飞蓟素注入LF水溶液中形成粗乳。粗乳移置高压均质机中，采用2500bar压力循环3次，后将其转入旋转蒸发器，45℃下旋转蒸发除尽乙醇，过0.45μm微孔滤膜，即得水飞蓟素乳铁蛋白纳米混悬液。将上述混悬液经喷雾干燥后，即得。

试验例1，按照实施例1的方法制备齐墩果酸乳铁蛋白纳米粒，其表征结果如附图1～3。图中可见，齐墩果酸乳铁蛋白纳米粒制剂的粒径约为205nm，PDI为0.148，Zeta电位为26.3mv，纳米粒外观呈类球形结构，具有明显的核壳结构。

试验例2，体外溶出度测定，采用中国药典规定方法(浆法)，以含有1％十二烷基硫酸钠1000ml为溶出介质，转速为每分钟100转，温度37±0.5℃，分别称取齐墩果酸原料药、齐墩果酸/乳铁蛋白物理混合物以及齐墩果酸乳铁蛋白纳米粒制剂(相当于齐墩果酸20mg)，均匀撒布在介质液面上，当粉末接触溶液时开始计时，分别于5、10、20、40、60、90、120min，取样5ml，经0.45μm微孔滤膜过滤，同时补加等量介质，采用高效液相法进行含量测定，计算溶出介质中的药物量，见附图4。

溶出度测定结果显示，在齐墩果酸乳铁蛋白纳米粒在溶出介质中迅速释放，10min溶出度超过90％，20min接近100％；而原料药溶出度较低，10min接近40％，20min时约为68％；两者物理混合物的溶出行为与原料药基本一致未见明显改善。

试验例3，按照实施例2的方法制备水飞蓟素乳铁蛋白纳米粒并与水飞蓟素原料药进行药代动力学比较研究。

试验方案：将12只大鼠随机均分为2组，每组6只。实验前禁食12h，分别取水飞蓟素和水飞蓟素乳铁蛋白纳米粒以30mg/kg剂量(以水飞蓟宾计)灌胃，给药后按0.083、0.167、0.5、1、1.5、2、4、7和10h于大鼠眼眶底静脉丛取血400μL，精密吸取大鼠空白血浆100μL，加内标溶液600μL(含0.5μg/mL的内标溶液)，震荡3min，离心(15000×g)10min，取上清液5μL进样分析。应用DAS2.0软件计算药动学参数，结果见表1。

表1大鼠口服水飞蓟素和水飞蓟素乳铁蛋白纳米粒后的药动学参数

体内药动学研究显示，采用乳铁蛋白对水飞蓟素进行修饰后可显著改善药物的口服生物利用度，c_max及AUC均增高约3倍左右。

Claims (7)

1.本发明内容提供了一种新型中药纳米粒口服吸收增强技术，其特征在于仅采用溶剂注入-超高压匀质法即可制备以乳转铁蛋白为载体的纳米粒。

2.根据权利要求1所述制备方法，将药物溶于适当有机溶剂中，作为油相。按重量比取相应浓度的乳转铁蛋白溶于纯水中并以有机酸调节pH为3～5，37℃水浴保温，作为水相。搅拌条件下，将油相缓慢注入水相中形成粗乳。粗乳经超高压匀质循环数次，减压挥去溶剂，干燥后即得以乳转铁蛋白为载体的纳米粒。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于药物可包括中药黄酮类药物如水飞蓟素、淫羊藿总黄酮、葛根总黄酮、齐墩果酸等，并以水飞蓟素、齐墩果酸为优选药物。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于溶剂包括乙醇、二氯甲烷、甲醇、乙醚等。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于有机酸包括枸橼酸、琥珀酸、酒石酸、草酸、苹果酸等。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于制备方法中的干燥方法包括冷冻干燥、喷雾干燥等。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于制备方法中选定乳铁蛋白水溶液的配制浓度范围为0.4～1.2g/ml，乳铁蛋白水溶液的PH值范围为3.0～5.0，乳铁蛋白与药物的质量比范围为1∶1～1∶9。