CN105315381A - 一种金线莲多糖提取、初步纯化及其口服液制备方法 - Google Patents

Abstract

以金线莲为原料，采用自然晒干、烘干、热泵脱水等干燥方法制金线莲干品，以热泵脱水的金线莲为原料，热水浸提和超高压辅助提取法提取金线莲多糖，用二次超滤法初步纯化金线莲多糖，以纯化后的金线莲多糖为主料，以蜂蜜、白砂糖和柠檬酸为辅料，研制出清香爽口、营养安全的金线莲多糖口服液。金线莲多糖、白砂糖、蜂蜜及柠檬酸质量分数分别为1.6%、4%、1%和0.07%为最优配方。

Description

一种金线莲多糖提取、初步纯化及其口服液制备方法

技术领域

本发明是一种金线莲多糖提取、初步纯化及其口服液制备方法，属于生物技术领域。

背景技术

金线莲（Anoectochilusroxburghii）又称为金线兰、花叶开唇兰、金丝草，素有“神药”、“金草”、“药王”“乌人参”等美称，是兰科开唇植物花叶属多年生珍稀中草药,主要分布在我国的台湾、四川、广东、广西、贵州、云南等地区。多项研究表明金线莲对糖尿病、高血压、心脏病、肿瘤、急性肝炎、肺炎等有良好的治疗效果。

随着生活水平不断提高，人们更加注重养生，营养保健成了追逐的潮流。市场上保健品种类琳琅满目，然多数保健品安全性和保健功能并无保障。目前，从天然食材提取的具有保健功能的物质，如食用菌多糖、茶多糖及金柑多糖等，深受消费者喜爱。同时，具有保健功能的中草药也受到消费者普遍关注。我国是中草药大国，不仅物种丰富，而且食用历史悠久。但中草药从采摘到食用过程步骤繁琐，阻碍了其快速发展。自从加入WTO以后，我国中草药出口量大幅度增长，但都是以初加工的形式出口，附加值较低，成交额远低于其他国家。因此，开展对中草药深加工的研究，建立安全可靠的中草药加工体系，具有重要意义。

发明内容

本发明提供一种金线莲多糖提取、初步纯化及其口服液制备方法，包括以下步骤：

1）制备金线莲干粉：新鲜金线莲筛选清洗晾干热泵脱水粉碎金线莲粉，取适量金线莲粉置于圆底烧瓶中1∶20比例加入石油醚，60℃回流浸提0.5h，以脱去表面脂肪，1∶20比例加入80%的乙醇，70℃回流1h，除去单糖、低聚糖、色素和多肽小分子物质，同时灭酶活防止酶在提取过程中对多糖的降解离心，残渣用乙醇洗涤3次抽滤，真空干燥金线莲干粉，水分含量<3%；

2）提取金线莲多糖：采用水浸提法或超高压提取法，所述的水浸提法为：金线莲干粉过40筛热水浸提离心上清液滤布过滤蒸发浓缩至原体积的1/5乙醇沉淀，滤布滤出上浮物果胶，作为副产物滤液离心得粗提物定容测定；所述的超高压提取法为：金线干粉→装袋→加入一定比例的超纯水→密封→超高压处理→抽滤→离心，4000r/min，20min→取上清液→70%乙醇醇沉滤液离心得粗提物定容测定；

3）纯化金线莲多糖：金线莲多糖粗提液先透过截留相对分子质量为100ku的超滤膜分级，收集截留液和透过液，透过液再经截留相对分子质量为10ku的超滤膜分级，收集截留液和透过液，分别测两次膜分离得到的截留液和透过液中蛋白质和多糖含量。

选用热泵脱水技术干燥金线莲效果很好，与传统干燥方法相比，热泵脱水技术干燥的金线莲色泽鲜亮，多糖保留率高，对中草药加工方面具有重要意义。、超高压提取金线莲多糖，与传统热水浸提相比较，多糖得率提高到1.66倍，为多糖提取方法体系拓宽了渠道。以二次超滤技术纯化金线莲多糖，纯化效果好，能大批量处理样品，并且步骤简单，耗能少，没有二次污染，为金线莲多糖工厂化生产提供理论依据。目前，金线莲产品品种单一，食用不便。本文研制的金线莲多糖口服液，不仅方便携带贮存，且营养安全，开启了金线莲深加工的闸门，填补国内市场空白，对中草药深加工利用方面有重要意义。

具体实施方式

制备金线莲干粉：新鲜金线莲筛选清洗晾干热泵脱水粉碎金线莲粉，取适量金线莲粉置于圆底烧瓶中1∶20比例加入石油醚，60℃回流浸提0.5h，以脱去表面脂肪，1∶20比例加入80%的乙醇，70℃回流1h，除去单糖、低聚糖、色素和多肽小分子物质，同时灭酶活防止酶在提取过程中对多糖的降解离心，残渣用乙醇洗涤3次抽滤，真空干燥金线莲干粉，水分含量<3%；

不同干燥方法处理的金线莲原材料中多糖含量，得出最终多糖得率：新鲜﹥热泵脱水﹥烘干﹥晒干。干燥时间越长，多糖得率越低。从干燥环境方面考虑，烘干采用是热鼓风处理，晒干是高温暴晒，在这样的环境下，多糖遭到不同程度降解。新鲜金线莲虽然多糖得率最高，但在膜分离纯化过程，损失率也最高，可能在提取多糖的同时，细胞内含量丰富的其它物质如果胶等大分子物质也随着溶出，在膜分离过程造成堵塞，影响多糖的透过，造成多糖损失。新鲜的金线莲虽然多糖含量丰富，但不易长时间保存，容易腐烂变质。

提取金线莲多糖：采用水浸提法或超高压提取法，所述的水浸提法为：金线莲干粉过40筛热水浸提离心上清液滤布过滤蒸发浓缩至原体积的1/5乙醇沉淀，滤布滤出上浮物果胶，作为副产物滤液离心得粗提物定容测定；据二次回归数学模型进行参数最优分析，获得最高多糖提取率所需参数为提取温度81.56℃、提取时间0.93h、液固比30.86:1、多糖得率预测值为7.35%。经分析选提取温度82℃、时间1h料液比30:1为最佳提取工艺，经验证多糖得率为7.33%，接近预测值7.35%；

所述的超高压提取法为：金线干粉→装袋→加入一定比例的超纯水→密封→超高压处理→抽滤→离心，4000r/min，20min→取上清液→70%乙醇醇沉滤液离心得粗提物定容测定；最优工艺参数：提取温度82℃，浸提时间1h，液固比30:1，在此工艺参数下，多糖得率7.35%。超高压提取法，在最优工艺条件下，多糖得率12.19%。

纯化金线莲多糖：金线莲多糖粗提液先透过截留相对分子质量为100ku的超滤膜分级，收集截留液和透过液，透过液再经截留相对分子质量为10ku的超滤膜分级，收集截留液和透过液，分别测两次膜分离得到的截留液和透过液中蛋白质和多糖含量；二次超滤技术表现出良好的分离纯化效果，筛选的技术参数如下：金线莲多糖提取液经100ku超滤膜分离，操作压力0.4Mpa，膜通量稳定时间40min。100ku超滤膜透过液过10ku超滤膜分离，操作压力0.3Mpa，膜通量稳定时间30min。10ku超滤膜的截留液中金线莲多糖，即为要提取的目标物，其中多糖得率为8.75%。

金线莲多糖口服液制备：金线莲粉经按照超高压提取法筛选的最优参数提取金线莲多糖，粗提液先经100ku超滤膜超滤分级，收集透过液，再经过截留相对分子质量为10ku的超滤膜分离，收集截留液，即为纯化后的金线莲多糖溶液，最后冷冻干燥，密封备用。

取金线莲多糖粉，分别向溶液中加入白砂糖、柠檬酸、蜂蜜。通过单因素正交试验，得到金线莲口服液最佳配方为：以质量分数记，金线莲多糖为1.6%，白砂糖为4%，蜂蜜为1%，柠檬酸为0.07%。以此配方得到的金线莲多糖口服液，清香爽口，营养安全。

Claims (6)

1.一种金线莲多糖提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

制备金线莲干粉：新鲜金线莲筛选清洗晾干热泵脱水粉碎金线莲粉，取适量金线莲粉置于圆底烧瓶中1∶20比例加入石油醚，60℃回流浸提0.5h，以脱去表面脂肪，1∶20比例加入80%的乙醇，70℃回流1h，除去单糖、低聚糖、色素和多肽小分子物质，同时灭酶活防止酶在提取过程中对多糖的降解离心，残渣用乙醇洗涤3次抽滤，真空干燥金线莲干粉，水分含量<3%；

提取金线莲多糖：采用水浸提法或超高压提取法，所述的水浸提法为：金线莲干粉过40筛热水浸提离心上清液滤布过滤蒸发浓缩至原体积的1/5乙醇沉淀，滤布滤出上浮物果胶，作为副产物滤液离心得粗提物定容测定；所述的超高压提取法为：金线干粉→装袋→加入一定比例的超纯水→密封→超高压处理→抽滤→离心，4000r/min，20min→取上清液→70%乙醇醇沉滤液离心得粗提物定容测定；

纯化金线莲多糖：金线莲多糖粗提液先透过截留相对分子质量为100ku的超滤膜分级，收集截留液和透过液，透过液再经截留相对分子质量为10ku的超滤膜分级，收集截留液和透过液，分别测两次膜分离得到的截留液和透过液中蛋白质和多糖含量。

2.根据权利要求1所述的金线莲多糖提取方法，其特征在于：所述热泵脱水的脱水温度80℃。

3.根据权利要求1所述的金线莲多糖提取方法，其特征在于：所述的水浸提法的提取温度82℃、提取时间1h，液固比30:1，乙醇浓度70%。

4.根据权利要求1所述的金线莲多糖提取方法，其特征在于：超高压提取法的操作压力300Mpa，液固比1:30，提取时间20min，提取温度50℃。

5.根据权利要求1所述的金线莲多糖提取方法，其特征在于：金线莲多糖提取液经100ku超滤膜分离，操作压力0.4Mpa，膜通量稳定时间40min，100ku超滤膜透过液过10ku超滤膜分离，操作压力0.3Mpa，膜通量稳定时间30min，10ku超滤膜的截留液中金线莲多糖，即为要提取的目标物，其中多糖得率为8.75%。

6.一种利用权利要求1所述的金线莲多糖制备口服液的方法，其特征在于：以质量分数记，金线莲多糖为1.6%，白砂糖为4%，蜂蜜为1%，柠檬酸为0.07%。