CN105267207A

CN105267207A - 一种药物组合物及其用途

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Publication number: CN105267207A
Application number: CN201410327716.2A
Authority: CN
Inventors: 不公告发明人
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2014-07-10
Filing date: 2014-07-10
Publication date: 2016-01-27

Abstract

本发明涉及一种药物组合物及其用途，具体涉及该组合物在制备预防和治疗脑缺血疾病、治疗和预防痴呆药物中的应用。其中3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮和2-莰醇分别是其消旋体化合物或其光学活性化合物。本发明的药物组合物对脑缺血疾病、治疗和预防痴呆疾病治疗，具有显著增加药效的协同作用。

Description

一种药物组合物及其用途

技术领域

本发明涉及3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮和2-莰醇药物组合物。以及该药物组合物在预防和治疗脑缺血疾病、在治疗和预防痴呆疾病药物中的应用。其中3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮和2-莰醇是其消旋体化合物或其光学活性化合物。

背景技术

脑缺血病具有发病率高、致残率和死亡率大等特点，是危害人类生命健康的常见病和多发病，因此寻找抗缺血性药物引起了国内外学者的广泛关注。

丁苯酞又名芹菜甲素，最初发现于芹菜籽中，其药效学特点涵盖了很多方面作用：1、能改善缺血脑能量代谢；2、明显缩小大鼠局部脑缺血脑梗塞面积，改善神经功能缺失；3、改善局部脑缺血引起的脑水肿；4、对缺血区局部脑血流和软脑膜微循环有明显改善作用；5、能显著改善局部脑缺血引起的记忆障碍。

目前市场上已经有丁苯酞软胶囊、丁苯酞氯化钠注射液等产品上市。适应症为治疗轻、中度急性缺血性脑卒中。

文献报道(王春华等：丁基苯酞在大鼠中代谢产物的研究《药学学报》1997，32(9)：641-646)，丁苯酞在体内主要转化成两种代谢产物3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮和3-(2’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮。

在尿中丁苯酞原形与代谢产物的比值约为9:91，脑组织中原型药与代谢产物的比值约为44:56，但脑中的代谢产物只有3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮。

3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮含有两个手性碳分子，所以3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮有消旋体化合物和光学活性化合物存在形式。

3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮：

(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮：

(3S，3’R)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮：

(3R，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮：

(3R，3’R)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮：

(3S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮：

(3R)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮：

(3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮：

(3’R)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮

2-莰醇是中国传统中药(龙脑)中的主要成分，2-莰醇分为消旋体、右旋异构体、左旋异构体。作为传统常用中药，冰片具有开窍醒神，清热止痛的功效，在中药中常作为“引药”应用。目前2-莰醇消旋体、右旋异构体、左旋异构体分别可以由提取纯化和化学合成得到。

(±)-2-莰醇：

(+)-2-莰醇：

(-)-2-莰醇：

现有技术中未见将3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮和2-莰醇或其各自光学活性化合物作为活性成分同时使用的报道。

发明内容

在进行药物研究时，发明人惊喜的发现，2-莰醇对3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮有良好的增效作用，将3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、2-莰醇两者进行配伍，具有良好的疗效，两者联合使用，疗效远高于单独使用3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮。于是发明人经过大量的创造性劳动，反复推理、验证、改进完成了本发明。

本发明的目的一方面在于提供一种药用组合物，其包括3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、2-莰醇和药学上可接受的载体。

作为本发明进一步的改进，所述3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮是其消旋体化合物或其光学活性化合物。

作为本发明进一步的改进，所述2-莰醇是其消旋体化合物或其光学活性化合物。

本发明的另一个目的在于提供包含制备预防和治疗脑缺血疾病、治疗和预防痴呆疾病药物中的应用。

本发明的有益效果是：3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、2-莰醇两者的配伍，根据药效试验结果，针对脑缺血疾病、治疗和预防痴呆疾病治疗中，两者具有显著增加药效的协同作用。

具体实施方式

为更好地说明本发明，以下将结合动物实验数据以实施例的方式对本发明做进一步的详细说明，给出本发明的实施细节，但是不应被认为是对本发明的限制。

实施例1：对局灶性脑缺血再灌损伤的保护作用

1.1材料与方法

1.1.1实验动物

Sprague-Dawley(SD)大鼠，雄性，清洁级，体重260-290g。

1.1.2方法

1.1.2.1脑缺血模型的制备

采用颈内动脉线栓法制备大脑中动脉阻塞(Middlecerebralarteryocclusion，MCAO)脑缺血再灌注模型。动物用7％水合三氯乙醛(6ml/kg)麻醉后,俯卧位固定于手术台上，消毒皮肤，颈部正中切开，分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉，轻轻剥离迷走神经，结扎并剪断颈外动脉，循颈内动脉向前，结扎翼腭动脉。夹闭颈总动脉近心端，从颈外动脉的结扎线的远端作一切口，插入外径为0.285mm的尼龙线，进过颈总动脉分叉进入颈内动脉，然后徐徐插入至有轻微阻力为止(自分叉处约20mm)，阻断大脑中动脉的所有血供，右侧脑缺血2.Oh后，轻轻拔出尼龙线，恢复血供进行再灌注，缝合皮肤，消毒。

1.1.2.2给药

制备脑缺血模型后，将动物机率均等单盲分配至各实验组。动物于再灌注后立即静脉给药1次，模型组动物给予等体积的生理盐水。脑缺血后24小时评价神经缺陷症状，而后处死动物，取脑，染色，拍照测定脑梗死面积。

1.1.2.3动物分组与给药剂量

表1

1.1.2.4神经缺陷症状评分及脑梗死面积的测定

采用改良Bederson5分制法进行神经缺陷症状评价。采用单盲法评价脑缺血后大鼠的神经缺陷症状，即由试验设计者将动物按组标记，对神经缺陷症状进行评分的试验者不知道动物的分组情况，评分结束后，评分者将各种标记的评分结果呈交设计者，由设计者揭盲，获得各试验组每只动物的评分。

表2

脑梗死程度的测定，动物处死后，断头取脑，去除嗅球、小脑和低位脑干，用生理盐水冲洗大脑表面血迹，吸去表面残留水迹，于-20℃放置20min，取出后立即于视线交叉平面垂直向下作冠状切面，并向后每隔2mm切一片，将脑片置于2％TTC染液中孵育(37℃90min)，正常脑组织染成深红色，缺血脑组织则呈苍白色，用生理盐水冲洗后，迅速将脑片从前向后按顺序排成一排，吸干表面残留水迹，拍照。

照片用图像分析软件处理，根据公式计算左脑相应的体积以及梗死灶体积，求出梗死灶百分比。

梗死体积计算法：

V＝t(A₁+A₂+A₃+............+A_n)

t为切片厚度，A为梗死面积。

％I＝100％×(VC-VL)/VC

％I为梗死体积百分比，VC为对照侧(左脑半球)脑体积，VL为梗死侧(右脑半球)非梗死区域体积。

1.1.2.5统计学分析

定量资料表示为均值±标准差。脑梗死面积和神经缺陷症状评分采用单因素方差分析，Scheffe's检验测定两组间的差异显著性。将差异P<0.05定义为差异显著。

1.2实验结果

1.2.1对神经缺陷症状的影响

神经缺陷症状的程度见表3，与模型组相比，各复方组均能显著改善神经缺陷症状。(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮组、3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮组两单方与模型组比较，虽有改善神经缺陷症状的趋势，但效果不及各复方组；(±)-2-莰醇组、(+)-2-莰醇组、(-)-2-莰醇组三个单方组改善神经缺陷症状不明显。

表3

其中，X±SD，*，与模型组相比，p<0.05。

1.2.2对脑梗塞面积的影响

对脑梗塞面积的影响见表4，与模型组相比，各复方组均能显著减小动物缺血再灌后脑梗塞面积。(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮组、3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮与模型组比较，虽有减小脑梗面积的趋势，但效果不及各复方组；(±)-2-莰醇组、(+)-2-莰醇组、(-)-2-莰醇组未能显著减小动物缺血再灌后脑梗塞面积。

表4

其中，X±SD，*，与模型组相比，p<0.05。

实施例2：对东莨菪碱所致痴呆小鼠学习能力的影响

2.1材料：

药物：

哈伯因(石杉碱甲片)。

氢溴酸东莨菪碱注射液。

健康清洁级ICR小鼠,5-6周龄,18～22g,雌雄各半。

仪器：成都泰盟DT200小鼠跳台仪。

2.2实验方法：

东莨菪碱所致小鼠痴呆模型实验分组和给药剂量

表5

供试品的给予

灌胃给药，每日一次，连续10天，对照组给予相同体积溶剂对照。

观测的指标

小鼠跳台装置为六个长方形反射箱，大小为10cm*10cm*30cm，用黑色塑料板分隔成为6间。底面为不锈钢网栅，网栅间距为0.5cm。每间左后角放置一高和直径4.5cm的橡胶站台。将小鼠面向墙角轻轻放置与站台上，适应环境3min，然后通以32V电流。若动物跳下站台则受电击，其正常反应应该是跳回站台以躲避伤害性刺激，多数动物可能会再次或多次跳至网栅上，受到电击后又迅速跳回站台。本实验末次给药后1小时进行跳台训练，24小时后测试记忆成绩。模型组及各给药组于测试前30分钟腹腔注射东莨菪碱2mg/kg,对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水。将小鼠面向墙角放置于站台上，观察并记录5分钟内小鼠跳下站台而遭受电击的次数和潜伏期。5min内未跳下的小鼠其跳台潜伏期按300s计算。

统计方法

所有数据用均数±标准差表示。采用SPSS软件，对符合正态分布的数据，均数比较用单因素方差分析，若方差齐，两两比较采用最小显著差法，若方差不齐则采用Dunnett’sT3检验行两两比较；如不符合正态分布，则用非参数检验Kruskal—Wallis进行统计分析。

2.3结果

对东莨菪碱所致小鼠痴呆模型的跳台实验的影响如下表所示。

表6

注：与模型对照组比较：*P≤0.05，**P≤0.01；与空白对照组比较：^△P≤0.05，^△△P≤0.01

由表6可见，与空白对照组比，模型组潜伏期明显缩短(P<0.01)，错误次数明显增加(P<0.01)。哈伯因组与模型组比小鼠潜伏期明显延长(P<0.05)，错误次数明显减少(P<0.05)。与模型组相比，各复方组潜伏期均有不同程度的延长，错误次数也明显减少，均具有统计学差异(P<0.01或，P<0.05)。各复方组较(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮组、3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮组潜伏期延长，错误次数减少；(±)-2-莰醇组、(+)-2-莰醇组、(-)-2-莰醇组效果不明显。

实施例3：取(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮100g、(+)-2-莰醇8g，(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、(+)-2-莰醇分别用磺丁基醚-β-环糊精包合。(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、(+)-2-莰醇包合物混合，加入预胶化淀粉50g、低取代羟丙基纤维素50g、交联羧甲基纤维素钠40g，混合均匀，8％PVP水溶液制粒，干燥，制得干颗粒。干颗粒加入低取代羟丙基纤维素50g、硬脂酸镁4g，混合均匀，压制成1000片，即得。

实施例4：取3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮50g、(±)-2-莰醇12g、(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、(±)-2-莰醇分别用磺丁基醚-β-环糊精包合。(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、(±)-2-莰醇包合物混合，加入预胶化淀粉50g、交联羧甲基纤维素钠40g，混合均匀，8％PVP水溶液制粒，干燥，制得干颗粒。干颗粒加入硬脂酸镁4g，混合均匀，灌装成1000粒，即得。

实施例5：取3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮15g、(+)-2-莰醇18g，3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、(+)-2-莰醇缓慢加入1500g聚乙二醇400溶液中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水并至10000ml，分装成1000支，灭菌，即得。

实施例6：取(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮30g、(-)-2-莰醇15g，(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、(-)-2-莰醇分别用磺丁基醚-β-环糊精包合。包合物混合，缓慢加入2000g注射用水中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水并至5000ml，分装成1000支，灭菌，即得。

实施例7：取(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮30g、(-)-2-莰醇20g，(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、(-)-2-莰醇分别用磺丁基醚-β-环糊精包合。包合物混合，缓慢加入2000g注射用水中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水并至10000ml，分装成1000支，冻干，即得。

实施例8：取(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮3.0g、(+)-2-莰醇1.3g，(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、(+)-2-莰醇分别用磺丁基醚-β-环糊精包合。包合物混合，缓慢加入200g注射用水中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水并至10000ml，氯化钠调节PH值，分装成100瓶，灭菌，即得。

实施例9：取(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮10g、(+)-2-莰醇1.0g，(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、(+)-2-莰醇分别用磺丁基醚-β-环糊精包合。包合物混合，缓慢加入200g注射用水中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水并至1000ml，分装成100支，灭菌，即得。

实施例10：取(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮10g、(-)-2-莰醇1.5g，(3S，3’S)-3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、(-)-2-莰醇分别用磺丁基醚-β-环糊精包合。包合物混合，缓慢加入200g注射用水中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水并至1000ml，分装成100支，灭菌，即得。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，本领域的普通技术人员应当理解，对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims

1.一种药物组合物，其特征在于，包括3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮、2-莰醇和药学上可接受的载体。

2.根据权利要求1所述的一种药物组合物，其特征在于，所述3-(3’-羟基丁基)异苯并呋喃-(3H)-酮是其消旋体化合物或其光学活性化合物。

3.根据权利要求1所述的一种药物组合物，其特征在于，所述2-莰醇是其消旋体化合物或其光学活性化合物。

4.如权利要求1-3中任一项所述的一种药物组合物在治疗和预防脑缺血引起的疾病的药物中的应用。

5.如权利要求1-3中任一项所述的一种药物组合物在治疗和预防痴呆疾病的药物中的应用。