CN105259272A - 一种测定氟苯尼考光学纯度的方法 - Google Patents
一种测定氟苯尼考光学纯度的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105259272A CN105259272A CN201510783063.3A CN201510783063A CN105259272A CN 105259272 A CN105259272 A CN 105259272A CN 201510783063 A CN201510783063 A CN 201510783063A CN 105259272 A CN105259272 A CN 105259272A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- florfenicol
- mobile phase
- chromatographic column
- methylene chloride
- isopropyl alcohol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
一种测定氟苯尼考光学纯度的方法，采用高效液相色谱法进行检测，其中色谱条件为：色谱柱：以表面键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅胶为固定相色谱柱；流动相：正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝80～90:5～10:5～10；流速：0.8～1.2ml/min；柱温：30～45℃；进样量：0.1～100μl；波长：224nm。本发明的测定氟苯尼考光学纯度的方法专属性强，灵敏度高，重复性良好，可在短时间内判断出氟苯尼考中光学异构体的含量，从而保证了氟苯尼考的药品质量。
Description
技术领域
本发明涉及医药学领域。
背景技术
氟苯尼考(Florfenicol)，化学名：[R-(1R,2S)]-2,2-二氯-N-{氟甲基)-2-羟-2-[4-(甲基磺酰)苯基]乙基}乙酰胺：中文名称：氟洛芬；氟苯尼考；氟甲砜霉素。是一种兽医专用氯霉素类的广谱抗菌药，1990年首次在日本上市，我国目前已通过了该药的审批。本品为白色或类白色结晶性粉末、无臭、味苦；通过抑制肽酰基转移酶活性而产生广谱抑菌作用，抗菌谱广，包括各种革兰氏阳性、阴性菌和支原体等。敏感菌包括牛、猪的嗜血杆菌、痢疾志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌、肺炎球菌、流感杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌、衣原体、钩端螺旋体，立克次氏体等。
氟苯尼考及其光学异构体的结构式如下：
氟苯尼考结构式中有2个手性碳原子，存在4个光学异构体，但是通过控制合成方法可以避免其中的2个光学异构体的产生。因此在实际生产过程中会有2个光学异构体产生，如上式所示。其中的氟苯尼考(1R,2S)具有抗菌活性，但其光学异构体(1S,2R)本身无活性，所以其光学异构体含量的高低直接影响了氟苯尼考的药品质量和疗效。
发明内容
针对上述技术问题，本发明提供一种测定氟苯尼考光学纯度的方法：采用高效液相色谱法进行检测，其中色谱条件为：
色谱柱：以表面键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅胶为固定相色谱柱；
流动相：正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝80～90:5～10:5～10；
流速：0.8～1.2ml/min；
柱温：30～45℃；
进样量：0.1～100μl；
波长：224nm。
所述流动相优选为正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝82～87:7～9:6～9，更优选为正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝85:8:7。
所述进样量优选为10～50μ；更优选为20μl。
所述色谱柱的规格优选为内径4.6mm、长度250mm、粒径5μm。
所述柱温优选为35℃。
所述流速优选为0.9ml/min。
进一步地，本方法还包括系统适用性溶液的制备，所述系统适用性溶液制备方法如下：称取氟苯尼考混旋体9～11mg至20ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度。
更进一步地，本方法还包括供试品溶液的制备，所述供试品溶液制备方法如下：称取氟苯尼考供试品2～22mg至20ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度。
以出峰时间作为定性鉴别试验，在系统适用性保证氟苯尼考峰与光学异构体峰之间的分离度大于1.5的前提下，进行样品测定试验。本发明的测定氟苯尼考光学纯度的方法专属性强，灵敏度高，重复性良好，可在短时间内判断出氟苯尼考中光学异构体的含量，从而保证了氟苯尼考的药品质量。
为了更好地理解和实施，下面结合附图详细说明本发明。
附图说明
图1是本发明的系统适用性图谱；
图2是本发明实施例1的图谱。
具体实施方式
系统适用性实施例
色谱条件：
高效液相色谱仪：岛津LC-2010；
色谱柱：以表面键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅胶为固定相色谱柱，内径4.6mm、长度250mm、粒径5μm；柱温：30℃；
流动相：正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝80:10:10；流速：0.8ml/min；波长：224nm。
称取氟苯尼考混旋体(批号：269150108)10mg至20ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度；精密量取10μl注入液相色谱仪，观察色谱图，如图2所示，氟苯尼考峰与光学异构体峰之间的分离度为6.7，大于1.5，可满足分离要求。
样品测定实施例1
色谱条件：
高效液相色谱仪：岛津LC-2010；
色谱柱：以表面键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅胶为固定相色谱柱；,内径4.6mm、长度250mm、粒径5μm；柱温：30℃；
流动相：正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝80:10:10；流速：0.8ml/min；波长：224nm。
称取氟苯尼考供试品(批号：269150426)20mg至20ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度；精密量取10μl注入液相色谱仪，观察色谱图，如图2所示，以峰面积归一化法计算，光学异构体含量为0.3％。
样品测定实施例2
色谱条件：
高效液相色谱仪：岛津LC-2010；
色谱柱：以表面键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅胶为固定相色谱柱；内径4.6mm、长度250mm、粒径5μm；柱温：35℃；
流动相：正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝90:5:5；流速：1.2ml/min；波长：224nm。
称取氟苯尼考供试品(批号：269150427)10mg至20ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度；精密量取20μl注入液相色谱仪，观察色谱图，以峰面积归一化法计算，光学异构体含量为0.4％。
样品测定实施例3
色谱条件：
高效液相色谱仪：岛津LC-2010；
色谱柱：以表面键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅胶为固定相色谱柱；内径4.6mm、长度250mm、粒径5μm；柱温：45℃；
流动相：正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝82:9:9；流速：0.9ml/min；波长：224nm。
称取氟苯尼考供试品(批号：269150428)5mg至20ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度；精密量取50μl注入液相色谱仪，观察色谱图，以峰面积归一化法计算，光学异构体含量为0.2％。
样品测定实施例4
色谱条件：
高效液相色谱仪：岛津LC-2010；
色谱柱：以表面键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅胶为固定相色谱柱；,内径4.6mm、长度250mm、粒径5μm；柱温：30℃；
流动相：正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝85:8:7；流速：0.8ml/min；波长：224nm。
称取氟苯尼考供试品(批号：269150429)2mg至20ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度；精密量取100μl注入液相色谱仪，观察色谱图，以峰面积归一化法计算，光学异构体含量为0.2％。
样品测定实施例5
色谱条件：
高效液相色谱仪：岛津LC-2010；
色谱柱：以表面键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅胶为固定相色谱柱；,内径4.6mm、长度250mm、粒径5μm；柱温：30℃；
流动相：正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝87:7:6；流速：0.8ml/min；波长：224nm。
称取氟苯尼考供试品(批号：269150430)22mg至20ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度；精密量取10μl注入液相色谱仪，观察色谱图，以峰面积归一化法计算，光学异构体含量为0.3％。
本发明并不局限于上述实施方式，如果对本发明的各种改动或变形不脱离本发明的精神和范围，倘若这些改动和变形属于本发明的权利要求和等同技术范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变形。
Claims (10)
1.一种测定氟苯尼考光学纯度的方法，其特征在于：采用高效液相色谱法进行检测，其中色谱条件为：
色谱柱：以表面键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅胶为固定相色谱柱；
流动相：正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝80～90:5～10:5～10；
流速：0.8～1.2ml/min；
柱温：30～45℃；
进样量：0.1～100μl；
波长：224nm。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述流动相为正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝82～87:7～9:6～9。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述流动相为正己烷:异丙醇:二氯甲烷＝85:8:7。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的方法，其特征在于：所述色谱柱的规格为内径4.6mm、长度150～250mm、粒径3.5～5μm。
5.根据权利要求1～3任意一项所述的方法，其特征在于：所述柱温为35℃。
6.根据权利要求1～3任意一项所述的方法，其特征在于：所述流速为0.9ml/min。
7.根据权利要求1～3任意一项所述的方法，其特征在于：所述进样量为10～50μl。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述进样量为20μl。
9.根据权利要求1～3任意一项所述的方法，其特征在于：所述方法还包括系统适用性溶液的制备，所述系统适用性溶液制备方法如下：称取氟苯尼考混旋体9～11mg至20ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度。
10.根据权利要求1～3任意一项所述的方法，其特征在于：所述方法还包括供试品溶液的制备，所述供试品溶液制备方法如下：称取氟苯尼考供试品2～22mg至20ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510783063.3A CN105259272B (zh) | 2015-11-13 | 2015-11-13 | 一种测定氟苯尼考光学纯度的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510783063.3A CN105259272B (zh) | 2015-11-13 | 2015-11-13 | 一种测定氟苯尼考光学纯度的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105259272A true CN105259272A (zh) | 2016-01-20 |
| CN105259272B CN105259272B (zh) | 2017-07-04 |
Family
ID=55099040
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510783063.3A Expired - Fee Related CN105259272B (zh) | 2015-11-13 | 2015-11-13 | 一种测定氟苯尼考光学纯度的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105259272B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114460193A (zh) * | 2022-01-25 | 2022-05-10 | 杭州海关技术中心 | 超高效合相色谱法分离和测定氟苯尼考对映体的方法 |
| CN114609276A (zh) * | 2022-03-09 | 2022-06-10 | 杭州海关技术中心 | 超高效合相色谱法测定鱼肉中氟苯尼考对映体及其代谢产物的方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008073982A2 (en) * | 2006-12-12 | 2008-06-19 | Anadys Pharmaceuticals, Inc. | 5,6-dihydro-1h-pyridin-2-one compounds |
| CN102827042A (zh) * | 2012-09-17 | 2012-12-19 | 湖北美天生物科技有限公司 | 氟苯尼考的手性合成方法 |
| WO2013026724A1 (en) * | 2011-08-22 | 2013-02-28 | Syngenta Participations Ag | Dihydrofuran derivatives as insecticidal compounds |
| CN103336072A (zh) * | 2013-06-19 | 2013-10-02 | 湖北龙翔药业有限公司 | 一种测定氟苯尼考中手性活性成分含量的方法 |
-
2015
- 2015-11-13 CN CN201510783063.3A patent/CN105259272B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008073982A2 (en) * | 2006-12-12 | 2008-06-19 | Anadys Pharmaceuticals, Inc. | 5,6-dihydro-1h-pyridin-2-one compounds |
| WO2013026724A1 (en) * | 2011-08-22 | 2013-02-28 | Syngenta Participations Ag | Dihydrofuran derivatives as insecticidal compounds |
| CN102827042A (zh) * | 2012-09-17 | 2012-12-19 | 湖北美天生物科技有限公司 | 氟苯尼考的手性合成方法 |
| CN103336072A (zh) * | 2013-06-19 | 2013-10-02 | 湖北龙翔药业有限公司 | 一种测定氟苯尼考中手性活性成分含量的方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| FENG LI等: "An efficient enantioselective synthesis of florfenicol via a vanadium-catalyzed asymmetric epoxidation", 《TETRAHEDRON: ASYMMETRY》 * |
| T. JOSEPH SUNDER RAJ等: "Validated Chiral Liquid Chromatographic Method for the Enantiomeric Separation of Florfenicol", 《JOURNAL OF LIQUID CHROMATOGRAPHY & RELATED TECHNOLOGIES》 * |
| 何红梅等: "氯霉素类药物的高效液相色谱手性分离研究", 《分析化学研究报告》 * |
| 赵梅仙等: "氟苯尼考对映异构体手性拆分及其光学纯度的测定", 《分析测试学报》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114460193A (zh) * | 2022-01-25 | 2022-05-10 | 杭州海关技术中心 | 超高效合相色谱法分离和测定氟苯尼考对映体的方法 |
| CN114609276A (zh) * | 2022-03-09 | 2022-06-10 | 杭州海关技术中心 | 超高效合相色谱法测定鱼肉中氟苯尼考对映体及其代谢产物的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105259272B (zh) | 2017-07-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104965041B (zh) | 一种帕瑞昔布钠异构体的高效液相色谱检测方法 | |
| Borner et al. | Determination of linezolid in human serum and urine by high-performance liquid chromatography | |
| Wang et al. | Direct enantiomeric resolutions of chiral triazole pesticides by high-performance liquid chromatography | |
| CN105259272A (zh) | 一种测定氟苯尼考光学纯度的方法 | |
| Wei et al. | Enantioseparation of lomefloxacin hydrochloride by high-speed counter-current chromatography using sulfated-β-cyclodextrin as a chiral selector | |
| CN103822997A (zh) | 一种利伐沙班中间体的分析检测方法 | |
| CN103487518B (zh) | 注射用盐酸克林霉素杂质的检测方法及含量测定方法 | |
| Ferrone et al. | Meropenem, levofloxacin and linezolid in human plasma of critical care patients: A fast semi-automated micro-extraction by packed sorbent UHPLC-PDA method for their simultaneous determination | |
| Aranyi et al. | High‐performance liquid chromatographic enantioseparation of amino compounds on newly developed cyclofructan‐based chiral stationary phases | |
| Ilisz et al. | Enantioseparations by high-performance liquid chromatography using macrocyclic glycopeptide-based chiral stationary phases: an overview | |
| CN103698436B (zh) | 盐酸普拉克索中对映异构体的检测方法及两者的分离方法 | |
| CN104833737A (zh) | 正相高效液相色谱检测阿瑞匹坦中srs异构体的方法 | |
| Zhang et al. | Synthesis and evaluation of molecularly imprinted polymeric microspheres for chloramphenicol by aqueous suspension polymerization as a high performance liquid chromatography stationary phase | |
| Zhou et al. | Simultaneous determination of ropivacaine, bupivacaine and dexamethasone in biodegradable PLGA microspheres by high performance liquid chromatography | |
| CN104569255B (zh) | 一种用HPLC测定Suvorexant中间体的方法 | |
| CN104515820B (zh) | 一种替加环素中间体的分析检测方法 | |
| CN104833740A (zh) | 利伐沙班中间体的高效液相色谱检测方法 | |
| CN109444294B (zh) | 一种分离利奈唑胺和其手性异构体的高效液相色谱方法 | |
| Tian et al. | Chiral magnetic microspheres purified by centrifugal field flow fractionation and microspheres magnetic chiral chromatography for benzoin racemate separation | |
| CN104122342A (zh) | 一种盐酸舍曲林中间体(±)-Tetralone及其手性色谱拆分方法 | |
| CN103645252B (zh) | 磷酸替米考星中残留溶剂的检测方法 | |
| CN101769902A (zh) | 一种hplc法分析分离盐酸普拉克索光学异构体的方法 | |
| CN103336072A (zh) | 一种测定氟苯尼考中手性活性成分含量的方法 | |
| CN106153756A (zh) | 一种检测依维莫司中雷帕霉素的高效液相色谱法 | |
| CN102680636A (zh) | 一种伊潘立酮原料药及其中间体的质量控制方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Chen Shengwei Inventor after: Zhan Shujuan Inventor after: Wan Biyou Inventor after: Liu Feng Inventor after: Tan Huijuan Inventor before: Tan Huijuan |
|
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20170606 Address after: 530007, No. 1, Guangxi power line equipment factory, 9 West nine road, West Garden Road, Nanning hi tech Zone, the Guangxi Zhuang Autonomous Region Applicant after: Guangxi Da Dao synthetic building material Co., Ltd. Address before: 529100, No. 2, Lane 1, Chengdong Road, Xinhui District, Jiangmen City, Guangdong province 301 Applicant before: Tan Huijuan |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20170704 Termination date: 20171113 |