CN105232605A - 一种治疗前列腺肥大的中药组合物及其制备和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗前列腺肥大的中药组合物，属于中药研究领域。本发明的治疗前列腺肥大的中药组合物，其原料为松花粉与蒲公英，松花粉和蒲公英的质量比为3～5：1；制备方法包括1)原料处理；2)浸泡；3)萃取；4)重复萃取；5)冻干。本发明通过混合提取工艺对松花粉及蒲公英进行提取，获得的中药组合物对治疗前列腺肥大具有较好的治疗作用，且效果显著。

Description

一种治疗前列腺肥大的中药组合物及其制备和应用

技术领域

本发明涉及一种中药组合物，尤其涉及一种治疗前列腺肥大的中药组合物，属于中药研究领域。

背景技术

前列腺是男性生殖泌尿系统中最大的附属腺体，位于膀胱下方，形同栗子，其分泌的前列腺液是精液的重要成分。前列腺疾病自古以来就是威胁中老年男性健康的常见疾病之一。近年来，由于生活节奏的加快，饮食习惯以及生活习惯的改变，导致了前列腺发病比例的加大和发病年龄的年轻化，因此前列腺疾病被医学界称为“不是癌症的癌症”。

前列腺肥大又称增生。症状主要表现为两组症状，一类是膀胱刺激症状；另一类是因增生前列腺阻塞尿路产生的梗阻性症状。膀胱刺激症状：尿频、尿急、夜尿增多及急迫性尿失禁。尿频是前列腺增生的早期信号，尤其夜尿次数增多更有临床意义。该病有三个主要特征：前列腺体积增大；膀胱出口阻塞；有排尿困难、尿频、尿急等下尿路症状。前列腺增生肥大是人体在性激素平衡失调等因素作用下，引起后尿道粘膜下的中叶或倒叶的腺体结缔组织及平滑肌组织逐渐增生，而形成多发性球状结节，使尿道、膀胱和肾脏发生一系列功能紊乱的疾病。

目前有多种方法治疗前列腺肥大，主要有手术治疗和药物治疗这两种方法。手术治疗主要是切除增生的前列腺，但其危险性高，且直接影响患者的身体健康和生活质量，一般只有重症晚期的病人采用。治疗前列腺肥大的药物包括：化学药物制剂和天然植物制剂。化学药物制剂主要包括α1-受体阻滞剂、雄激素抑制剂、芳香酶抑制剂、生长因子抑制剂等。虽然化学药物制剂能够达到较好的治疗效果，但是由于前列腺包膜的通透性差，且血液循环弱，难以达到治疗目的，并且许多化学类制剂仅是舒缓症状，治标而不治本，且一般都具有一定的副作用。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种治疗前列腺肥大的中药组合物及其制备和应用。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种治疗前列腺肥大的中药组合物，其原料为松花粉与蒲公英，松花粉和蒲公英的质量比为3～5：1。

本发明第二方面公开了前述中药组合物的制备方法，包括以下步骤：

1)原料处理：采用气流粉碎法对松花粉进行破壁处理20～30分钟，获得破壁松花粉；对蒲公英进行超微粉碎处理，获得蒲公英超微粉；然后将破壁松花粉与蒲公英超微粉按质量比3～5:1混合，获得混合粉料；

2)浸泡：向步骤1)的混合粉料中按料液比1:2～10加水，获得的混合料液浸泡25～60min；

3)萃取：将混合料液补水至料液比为1:20～50，采用亚临界水萃取法进行萃取，萃取条件为：萃取温度125～300℃，萃取压力2～8Mpa，萃取时间10～30min；萃取结束后将萃取液降温至50℃以下，过滤，分离出浸提液；

4)重复萃取：取过滤后剩余的滤渣重复步骤3)的萃取操作2～3次，合并多次萃取的浸提液，获得中药组合物提取液；

5)冻干：对前述中药组合物提取液体依次进行真空浓缩、真空冷冻干燥处理，获得中药组合物。

在上述技术方案的基础上，本发明的制备方法还可以做如下改进。

进一步，步骤1)中所述蒲公英超微粉的粒径范围为100～200目。

本发明方法获得的中药组合物中，总皂甙含量维持在10％～15wt％，总黄酮控制在5％～10wt％。

现有松花粉、蒲公英等中药提取物的方法多是采用传统的超声、蒸煮、回流等方法，整体工艺生产周期较长，品质较难控制。此外，在常见的提取过程中，为了增加有效成分的含量，在工艺中加入有机溶剂等物质或在生产中加入过大孔树脂等工艺，导致提取物的溶剂残留以及树脂残留都较难控制，影响了终端产品的质量。本发明采用亚临界提取工艺，产品的活性成分提取效率增加，周期较短，全程采用水，有机溶剂残留低，满足了现代消费者产品需求。

本发明第三方面公开了一种治疗前列腺肥大的中药制剂，其有效成分为前述中药组合物，所述中药制剂中还包括辅料。

进一步，所述辅料为各种药学上常用的辅料和/或赋形剂，包括(但不限于)糖类(如乳糖、葡萄糖和蔗糖)，淀粉(如玉米淀粉和土豆淀粉)，纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和甲基纤维素)，黄蓍胶粉末，麦芽，明胶，滑石，固体润滑剂(如硬脂酸和硬脂酸镁)，硫酸钙，植物油，如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和可可油，多元醇(如丙二醇、甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇)，海藻酸，乳化剂(如Tween)，润湿剂(如月桂基硫酸钠)，着色剂，调味剂，压片剂、稳定剂，抗氧化剂，防腐剂，无热原水，等渗盐溶液和磷酸盐缓冲液等。辅料可根据需要提高配方的稳定性、活性及生物有效性等，或在口服的情况下产生可接受的口感或气味。

更进一步，所述辅料为微晶纤维素、糊精、淀粉、糖醇中的一种或两种以上的混合。

进一步，所述治疗前列腺肥大的中药制剂的剂型为片剂、胶囊剂、粉剂或颗粒剂。

本发明第四方面公开了前述中药组合物、前述中药制剂在制备前列腺肥大治疗药物中的应用。

进一步，所述中药组合物的给药量为0.5～1g/天。

本发明的有益效果是：本发明通过混合提取工艺对松花粉及蒲公英进行提取，获得的中药组合物对治疗前列腺肥大具有较好的治疗作用，且效果显著。

附图说明

图1：小鼠前列腺组织切片HE染色后显微镜观察图(A.空白对照组B.模型组C.非那雄胺组D.复方组E.松花粉组F.蒲公英组)。

具体实施方式

以下结合附图对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。

实施例1中药组合物的制备

1.原料处理

松花粉进行破壁处理，经气流粉碎破壁处理20分钟，获得破壁后松花粉。将蒲公英药材经过超微高速万能粉碎机方法进行超微粉碎破壁处理，获得粒径为100目的蒲公英超微粉。将破壁松花粉与蒲公英超微粉按照比例5:1进行混合，成混合原料。

2.浸泡

混合后，置于亚临界水萃取的萃取罐中，以水为溶剂，控制料液比例为1:2，浸泡25min，搅拌。

3.萃取

补水使萃取罐中的料液比达到1:50，控制萃取温度125℃，萃取压力为8Mpa，萃取时间为30min，停止加热，待提取液温度降至50℃以下。过滤，得到松花粉、蒲公英混合提取物溶液，放置于存储罐储存。

4.重复萃取

在萃取罐中的剩余原料，依照上述操作，连续浸提2次。收集得到液体放置于存储罐中。

5.冻干

真空浓缩、真空冷冻干燥处理得到提取物粉末，经检测，中药组合物中，总皂苷含量为15％，总黄酮控制在10％。

实施例2中药组合物的制备

1.原料处理

松花粉进行破壁处理，经气流粉碎破壁处理30分钟，获得破壁后松花粉。将蒲公英药材经过超微高速万能粉碎机方法进行超微粉碎破壁处理，获得粒径为200目的蒲公英超微粉。将破壁松花粉与蒲公英超微粉按照比例4:1进行混合，成混合原料。

2.浸泡

混合后，置于亚临界水萃取的萃取罐中，以水为溶剂，控制料液比例为1:10，浸泡40min，搅拌。

3.萃取

补水使萃取罐中的料液比达到1:20，控制萃取温度200℃，萃取压力为5Mpa，萃取时间为15min，停止加热，待提取液温度降至50℃以下。过滤，得到松花粉、蒲公英混合提取物溶液，放置于存储罐储存。

4.重复萃取

在萃取罐中的剩余原料，依照上述操作，连续浸提3次。收集得到液体放置于存储罐中。

5.冻干

真空浓缩、真空冷冻干燥处理得到提取物粉末，经检测，中药组合物中，总皂苷含量为10％，总黄酮控制在8％。

实施例3中药组合物的制备

1.原料处理

松花粉进行破壁处理，经气流粉碎破壁处理25分钟，获得破壁后松花粉。将蒲公英药材经过超微高速万能粉碎机方法进行超微粉碎破壁处理，获得粒径为200目的蒲公英超微粉。将破壁松花粉与蒲公英超微粉按照比例3:1进行混合，成混合原料。

2.浸泡

混合后，置于亚临界水萃取的萃取罐中，以水为溶剂，控制料液比例为1:6，浸泡60min，搅拌。

3.萃取

补水使萃取罐中的料液比达到1:30，控制萃取温度300℃，萃取压力为2Mpa，萃取时间为10min，停止加热，待提取液温度降至50℃以下。过滤，得到松花粉、蒲公英混合提取物溶液，放置于存储罐储存。

4.重复萃取

在萃取罐中的剩余原料，依照上述操作，连续浸提3次。收集得到液体放置于存储罐中。

5.冻干

真空浓缩、真空冷冻干燥处理得到提取物粉末，经检测，中药组合物中，总皂苷含量为13％，总黄酮控制在5％。

实施例4动物实验

1.实验对象及药品

雄性昆明种小鼠，自由饮水饮食，适应性喂养一周。随机分为6组：正常对照组；前列腺肥大模型组；非那雄胺组,给药量为0.8mg/kg·d；复方组、松花粉组、蒲公英组，给药量均为80mg/kg·d；实验周期为8周。

松花粉提取物：采用气流粉碎法对松花粉进行破壁处理25分钟，获得破壁松花粉；加水浸泡30min；补水至料液比为1:30，采用亚临界水萃取法进行萃取，萃取条件为：萃取温度200℃，萃取压力6Mpa，萃取时间20min；萃取结束后将萃取液降温至50℃以下，过滤，获得松花粉提取液；依次进行真空浓缩、真空冷冻干燥处理，获得松花粉提取物。

蒲公英提取物：对蒲公英进行超微粉碎处理，获得粒径为100目的蒲公英超微粉；加水浸泡30min；补水至料液比为1:30，采用亚临界水萃取法进行萃取，萃取条件为：萃取温度200℃，萃取压力6Mpa，萃取时间20min；萃取结束后将萃取液降温至50℃以下，过滤，获得蒲公英提取液；依次进行真空浓缩、真空冷冻干燥处理，获得蒲公英提取物。

实验方法如表1所示。第1-4周：建立模型。空白组每日腹腔注射吐温-80水悬液，其他各组注射丙酸睾酮(5mg/kg)，隔天称重，根据体重随时调节药物浓度。第5-8周：治疗。空白组和模型组灌胃生理盐水，药物组组每日分别灌胃相应的非那雄胺、复方组合物、松花粉提取物、蒲公英提取物。

表1实验分组及设计

2.样品收集与处理

实验结束前禁食8h，摘眼球取血，制备血清-20℃保存待测。剖取前列腺组织和脾脏，称重。前列腺腹叶的一部分制作成组织匀浆用于生化分析。

3.生化分析

按照试剂盒说明书，用ELISA试剂盒(安迪生物科技(上海)有限公司)依次检测血清中的IL-1、IL-6、TNF-α、DHT以及前列腺组织中的PACP，另外检测血清中的NO和NOS。计算前列腺指数、脾脏指数和PI百分抑制率。

4.数据分析

统计学分析采用SPSS19.0软件进行，以t检验进行显著性分析，P<0.05时有显著性差异，P<0.01差异性极显著。所有数据均以表示。

5.实验结果

5.1小鼠体重、前列腺重量、前列腺指数(PI)及脾脏指数(SI)的变化

较空白组而言，模型组小鼠出现明显的尿频、尿不尽等下尿路症状。非那雄胺组小鼠尿道病症得到明显改善。如表2，实验前后，小鼠体重无明显变化。经过4周的丙酸睾酮注射，模型组动物的前列腺重量显著增加(P＜0.01)。经过非那雄胺处理后，前列腺重量显著下降(P＜0.01)。复方组可以明显地(P＜0.01)抑制前列腺重量的增加。

如表2，经过4周的丙酸睾酮注射，模型组动物的前列腺指数、脾脏指数显著增大(P＜0.01)。经过非那雄胺处理后，前列腺指数、脾脏指数显著下降(P＜0.01)，复方组均可以明显地(P＜0.01)降低前列腺指数、脾脏指数的增加，效果优于松花粉组和蒲公英组。

表2各组小鼠体重、前列腺重量以及PI、SI的变化

注：PW：前列腺的重量，BW：体重，PI：前列腺指数，SI：脾脏指数；值表示为平均值±SD，n＝6，统计分析是采用t检验单因素方差分析。*P＜0.05与空白对照组比较，**P＜0.01与空白对照组比较；#P＜0.05与模型组比较，##P＜0.01与模型组比较。

5.2小鼠血清中炎性细胞因子的变化

如表3所示，与空白组相比，模型组动物血清中的三种前炎性细胞因子含量显著升高(P＜0.01)，说明BPH小鼠的前列腺组织中发生了炎症反应。非那雄胺对BPH有显著的治疗作用(P＜0.01)，降低程度最大，细胞因子含量基本恢复到正常水平。复方组小鼠血清炎症细胞因子含量均显著下降(P＜0.01)。几乎可以与药物组相媲美。单独采用松花粉、蒲公英喂养对模型小鼠的三种前炎性细胞因子含量不成显著性差异，其表明复方组效果较单独的松花粉组和蒲公英组更显著。

表3小鼠血清中IL-1β、IL-6及TNF-α的含量(n＝6)

*P＜0.05与空白对照组比较，**P＜0.01与空白对照组比较；^#P＜0.05与模型组比较，^##P＜0.01与模型组比较。

5.3小鼠血清中DHT含量、PACP活性的变化

实验结束时，模型组小鼠血清的DHT含量显著升高(P＜0.01)。表4的数据显示非那雄胺(P＜0.01)降低了血清中DHT的含量。与模型组相比，复方组的DHT含量显著降低。如表4所示，与正常小鼠相比，模型组(P＜0.01)小鼠前列腺组织中的PACP活性显著增加，与模型组不同的是，复方组(P＜0.01)发挥了明显的抗作用，非那雄胺是最有效的，但复方几乎可与其相媲美。

表4小鼠血清DHT及前列腺PACP的含量(n＝6)

*P＜0.05与空白对照组比较，**P＜0.01与空白对照组比较；^#P＜0.05与模型组比较，^##P＜0.01与模型组比较。

5.4小鼠血清中NO、NOS的含量变化

表5中，与空白组相比，模型组小鼠血清中的NO含量显著增加(P＜0.01)，两种NOS的活性同样明显的增强。经过3周的治疗，非那雄胺起到了显著的效果(P＜0.01)，与模型组相比，NO含量和NOS活性均显著下降。复方组(P＜0.01)均降低了NO含量，NOS活性也明显降低。

表5各组对小鼠血清中NO及NOS含量的影响(n＝6)

*P＜0.05与空白对照组比较，**P＜0.01与空白对照组比较；^#P＜0.05与模型组比较，^##P＜0.01与模型组比较。

6.组织切片染色实验

6.1实验方法

取小鼠前列腺组织以4％多聚甲醛固定，流水冲洗2个小时，经脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、脱蜡、HE染色、脱水、封片，在400倍观光镜下观察。

6.2结果分析

各组小鼠前列腺组织切片，经HE染色后在显微镜下观察如下图1所示，空白对照组(A)(Normalcontrol)小鼠前列腺组织结构正常，形态正常。模型组(B)，腺泡形状不规则，上皮细胞绒毛状突起到腺泡腔，形成增生结节，。非那雄胺组(C)腺泡结构基本正常和复方组(D)中还有轻微绒毛突起，但组织形态基本恢复到正常。单独的松花粉组(E)和单独的蒲公英组(F)的前列腺增生有一定的改善作用，上皮细胞显示圆柱形/立方形且有绒毛状突起。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种治疗前列腺肥大的中药组合物，其原料为松花粉与蒲公英，松花粉和蒲公英的质量比为3～5：1。

2.权利要求1所述治疗前列腺肥大的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)原料处理：采用气流粉碎法对松花粉进行破壁处理20～30分钟，获得破壁松花粉；对蒲公英进行超微粉碎处理，获得蒲公英超微粉；然后将破壁松花粉与蒲公英超微粉按质量比3～5:1混合，获得混合粉料；

2)浸泡：向步骤1)的混合粉料中按料液比1:2～10加水，获得的混合料液浸泡25～60min；

3)萃取：将混合料液补水至料液比为1:20～50，采用亚临界水萃取法进行萃取，萃取条件为：萃取温度125～300℃，萃取压力2～8Mpa，萃取时间10～30min；萃取结束后将萃取液降温至50℃以下，过滤，分离出浸提液；

4)重复萃取：取过滤后剩余的滤渣重复步骤3)的萃取操作2～3次，合并多次萃取的浸提液，获得中药组合物提取液；

5)冻干：对前述中药组合物提取液体依次进行真空浓缩、真空冷冻干燥处理，获得中药组合物。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述蒲公英超微粉的粒径范围为100～200目。

4.一种治疗非酒精性前列腺肥大的中药制剂，其有效成分为权利要求1所述的中药组合物，所述中药制剂中还包括辅料。

5.根据权利要求4所述的中药制剂，其特征在于，所述辅料为微晶纤维素、糊精、淀粉、糖醇中的一种或两种以上的混合。

6.根据权利要求4所述的中药制剂，其特征在于，所述治疗前列腺肥大的中药制剂的剂型为片剂、胶囊剂、粉剂或颗粒剂。

7.权利要求1所述中药组合物、权利要求4-6任一权利要求所述中药制剂在制备前列腺肥大治疗药物中的应用。