CN105218694A - 一种枸杞多糖提取物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种枸杞多糖的提取物及其制备方法,通过清理、干燥、破碎、除杂、提取、脱色、除蛋白、浓缩和纯化的制备方法得到的枸杞多糖具有降血脂、降血糖、保肝、抗肿瘤和抗衰老等功效,同时本发明的枸杞多糖制备方法工艺简单、易于操作、收率较高、品质良好和有利于实现工业化的生产加工。
Description
技术领域
本发明涉及植物提取物领域,具体为一种具有降血脂、降血糖、保肝、抗肿瘤、抗衰老等多种生理功能的枸杞多糖的提取方法。
背景技术
枸杞子(FructoLxcii)始载于《神农本草经》,为枸杞的干燥成熟果实,主要分布于宁夏、甘肃、山西、新疆、青海、陕西、内蒙等地,枸杞子是我国的传统名贵中药材,它在我国的传统医学中具有重要的地位,其药用价值备受历代医家的推崇。明朝李时珍在《本草纲目》中记载“枸杞主五内邪气、热中消渴、久服坚筋骨,轻身不老;补内伤,大劳虚。强阴、利大小肠;补精气不足、易颜色、变白、明目安神、令人长寿”。枸杞具有如此多的生理和药理功能,与其所含的丰富的化学成分有着密切的联系。构祀中的化学成分比较复杂,主要包括蛋白质、氨基酸、微量元素、糖类、脂肪、脂肪酸、萜类、甾醇类、维生素、色素类、生物碱类。
多糖(polysaccharide)又称多聚糖,是由20个以上的单糖以糖昔键相连组成的聚合物。它是组成高分子化合物家族中最丰富多彩的成员。多糖是来自于高等植物、动物细胞膜、微生物的细胞壁中的天然大分子物质,是所有生命有机体的重要组成成分与维持生命所必需的结构材料。人们对糖的认识首先是把它看作食物中的能量来源。对多糖的研究,最早是在20世纪40年代,但其作为广谱免疫促进剂而引起人们的极大重视是在60年代,经过40余年的不断发展,人们对多糖这一类重要生命物质产生了新的认识,使这一学科成为目前生命科学中研究最活跃的领域之一。人们发现糖类在生物体中不仅是作为能量物质或结构材料,更重要的是它参与了生命科学中细胞的各种活动,具有多种多样的生物功能。因此糖的研究逐步活跃起来,其中,一些分子量在几千以上,具有很强生物活性的活性多糖的研究受到日益重视。这些活性多糖的生理活性、化学结构以及构效关系成为多糖研究的前沿阵地,并取得了很大的进展。科学工作者逐渐发现多糖类化合物具有抗肿瘤、抗衰老、抗感染、降血糖血脂、治疗艾滋病等方面的生物活性。近年来,又发现多糖的糖链在控制细胞的分裂和分化,调节细胞的生长和衰老方面起着决定性作用,多糖已逐渐显示出越来越广泛的应用前景。
枸杞多糖是枸杞的主要有效成分,枸杞多糖成为一个研究的热点,国内对枸杞多糖的提取分离、化学分析、药理作用及临床应用等进行了大量的研究,药理与临床研究十分引人瞩目。枸杞多糖(LBP,LyciumBar~barumPolysaccharides)具有广泛的药理学作用,可促进造血、降血脂、保肝及抗癌等作用。临床研究表明,构祀多糖对高血脂兔的血脂有明显影响,能显著降低血清胆固醇(TC)及三酞甘油(TG)的含量,降脂有效率达100.0%,具有良好的降血脂作用研究表明,构祀多糖对正常及糖尿病模型动物均有降血糖作用;实验结果表明,构祀多糖对四氯化碳引起的肝损伤有修复作用,其机制可能是通过阻止内质网的损伤,促进蛋白质合成及解毒作用,恢复肝细胞的功能,并促进肝细胞再生;体外试验提示枸杞多糖能显著的抑制人宫颈瘤Heal细胞和人胃腺癌MGC一8仍细胞的生长和繁殖,抑制癌细胞克隆的形成;枸杞多糖在体内能提高D~半乳糖致衰老小鼠体内GsH~Px和超氧化物歧化酶(SOD)活性,从而可以清除过量的自由基,降低MDA和脂褐素含量,起到延缓衰老的作用。
目前现有技术制备多糖常用的提取方法有:热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法和酶法。这些方法都存在着许多的问题,比如破坏了多糖结构,多糖提取效率低下,提取时间过长,提取的过程复杂等。
发明内容
本发明的目的是提供一种有效成分损失少、品质高、提取成本低的枸杞多糖的提取方法。该方法提取出来的枸杞多糖具有降血脂、降血糖、保肝、抗肿瘤、抗衰老等多种生理功能。
一种枸杞多糖的提取制备方法,其特种在于,枸杞经破碎后,用乙醇回流提取。
一种枸杞多糖提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1、清理:将枸杞筛除泥沙,用清水洗净;
2、干燥:将清洗干净的枸杞在5~25℃下低温干燥10~20h;
3、破碎:将步骤2得到的枸杞进行超微粉碎,得到颗粒粒径范围为10~70μm粉末;
4、除杂:将步骤3得到的粉末置于连续微波反应器中400~650W功率下,用乙醚回流提取10~30min,得到药渣I;药渣I用乙醚回流提取10~30min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂;
5、提取:将得到的药渣III加入10~15倍的水,置于超声回流提取系统中,超声回流提取0.5~2h,超声功率0.5~2KW,提取温度30~50℃,得到滤液I;
6、脱色:在滤液I中加入0.1%活性炭,脱色,得到滤液II;
7、除蛋白:将滤液II用三氯醋酸法得到滤液III;
8、浓缩:将滤液III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的取值范围为(2~8w/g)和(0.02~0.08Mpa),得到枸杞多糖浓缩提取液;
9、纯化:将经过预处理的D101大孔树脂湿法装柱,取上述粗提液于0.2~1.0ml/min的不同流速上样,用80%浓度的乙醇以0.5~1.5ml/min的不同流速洗脱,将洗脱液合并,浓缩,干燥即得纯度较高的多糖提取物。
第一步中,若不仔细清选,掺杂的泥沙枯叶等会影响提取效率。
第二步中,低温下进行干燥,可以保证多糖有效成分的保存。
第三步中,超微粉碎技术可以使粉末粒径小(一般在15μm以下)且分布均匀,球性度及均质度明显改善,松密度及比表面显著提高,植物细胞破壁率高,枸杞中的有效成分(特别是难溶性成分)的溶解和释放加快,有效成分的溶出速率加快。
第五步中,结合了超声与回流提取的优势,提取效率较高。
此外,出于控制成本的考虑,本发明各步骤中的低温干燥、回流、超声、等均是成熟的技术,操作简单,易上手。但与现有技术相比,简化了提取过程却得到了较高的收率和品质很好的产品。
优选的,一种枸杞多糖提取物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1、清理:将枸杞筛除泥沙,用清水洗净;
2、干燥:将清洗干净的枸杞在5℃下低温干燥20h;
3、破碎:将步骤2得到的枸杞进行超微粉碎,得到颗粒粒径范围为10~70μm粉末;
4、除杂:将步骤3得到的粉末置于连续微波反应器中400W功率下,用乙醚回流提取30min,得到药渣I;药渣I用乙醚回流提取30min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂;
5、提取:将得到的药渣III加入10倍的水,置于超声回流提取系统中,超声回流提取2h,超声功率0.5KW,提取温度50℃,得到滤液I;
6、脱色:在滤液I中加入0.1%活性炭,脱色,得到滤液II;
7、除蛋白:将滤液II用三氯醋酸法得到滤液III;
8、浓缩:将滤液III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的取值范围为8w/g和0.08Mpa,得到枸杞多糖浓缩提取液;
9、纯化:将经过预处理的D101大孔树脂湿法装柱,取上述粗提液于0.2ml/min的不同流速上样,用80%浓度的乙醇以0.5ml/min的不同流速洗脱,将洗脱液合并,浓缩,干燥即得纯度较高的多糖提取物。
优选的,一种枸杞多糖提取物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1、清理:将枸杞筛除泥沙,用清水洗净;
2、干燥:将清洗干净的枸杞在10℃下低温干燥15h;
3、破碎:将步骤2得到的枸杞进行超微粉碎,得到颗粒粒径范围为10~70μm粉末;
4、除杂:将步骤3得到的粉末置于连续微波反应器中500W功率下,用乙醚回流提取20min,得到药渣I;药渣I用乙醚回流提取20min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂;
5、提取:将得到的药渣III加入9倍的水,置于超声回流提取系统中,超声回流提取,1.5h,超声功率1KW,提取温度45℃,得到滤液I;
6、脱色:在滤液I中加入0.1%活性炭,脱色,得到滤液II;
7、除蛋白:将滤液II用三氯醋酸法得到滤液III;;
8、浓缩:将滤液III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的取值范围为7w/g和0.07Mpa,得到枸杞多糖浓缩提取液;
9、纯化:将经过预处理的D101大孔树脂湿法装柱,取上述粗提液于0.3ml/min的不同流速上样,用80%浓度的乙醇以0.7ml/min的不同流速洗脱,将洗脱液合并,浓缩,干燥即得纯度较高的多糖提取物。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明,但本发明的保护范围不受具体实施例的任何限制,而是由权利要求加以限定。
实施例1
1、清理:将枸杞10kg筛除泥沙,用清水洗净;
2、干燥:将清洗干净的枸杞在10℃下低温干燥15h;
3、破碎:将步骤2得到的枸杞进行超微粉碎,得到颗粒粒径范围为10~70μm粉末;
4、除杂:将步骤3得到的粉末置于连续微波反应器中500W功率下,用乙醚回流提取20min,得到药渣I;药渣I用乙醚回流提取20min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂;
5、提取:将得到的药渣III加入9倍的水,置于超声回流提取系统中,超声回流提取,1.5h,超声功率1KW,提取温度45℃,得到滤液I;
6、脱色:在滤液I中加入0.1%活性炭,脱色,得到滤液II;
7、除蛋白:将滤液II用三氯醋酸法得到滤液III;
8、浓缩:将滤液III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的取值范围为7w/g和0.07Mpa,得到枸杞多糖浓缩提取液;
9、纯化:将经过预处理的D101大孔树脂湿法装柱,取上述粗提液于0.3ml/min的不同流速上样,用80%浓度的乙醇以0.7ml/min的不同流速洗脱,将洗脱液合并,浓缩,干燥即得纯度较高的多糖提取物。
实施例1所提取的枸杞多糖的提取率为4.10%远高于现有技术的1.30%,因此本发明对于枸杞多糖提取物的的提取有较高的有益效果。
实施例2
1、清理:将枸杞8kg筛除泥沙,用清水洗净;
2、干燥:将清洗干净的枸杞在5℃下低温干燥20h;
3、破碎:将步骤2得到的枸杞进行超微粉碎,得到颗粒粒径范围为10~70μm粉末;
4、除杂:将步骤3得到的粉末置于连续微波反应器中400W功率下,用乙醚回流提取30min,得到药渣I;药渣I用乙醚回流提取30min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂;
5、提取:将得到的药渣III加入10倍的水,置于超声回流提取系统中,超声回流提取2h,超声功率0.5KW,提取温度50℃,得到滤液I;
6、脱色:在滤液I中加入0.1%活性炭,脱色,得到滤液II;
7、除蛋白:将滤液II用三氯醋酸法得到滤液III;
8、浓缩:将滤液III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的取值范围为8w/g和0.08Mpa,得到枸杞多糖浓缩提取液;
9、纯化:将经过预处理的D101大孔树脂湿法装柱,取上述粗提液于0.2ml/min的不同流速上样,用80%浓度的乙醇以0.5ml/min的不同流速洗脱,将洗脱液合并,浓缩,干燥即得纯度较高的多糖提取物。
实施例3
1、清理:将枸杞8kg筛除泥沙,用清水洗净;
2、干燥:将清洗干净的枸杞在15℃下低温干燥18h;
3、破碎:将步骤2得到的枸杞进行超微粉碎,得到颗粒粒径范围为10~70μm粉末;
4、除杂:将步骤3得到的粉末置于连续微波反应器中500W功率下,用乙醚回流提取20min,得到药渣I;药渣I用乙醚回流提取25min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂;
5、提取:将得到的药渣III加入10倍的水,置于超声回流提取系统中,超声回流提取1.5h,超声功率1.2KW,提取温度35℃,得到滤液I;
6、脱色:在滤液I中加入0.1%活性炭,脱色,得到滤液II;
7、除蛋白:将滤液II用三氯醋酸法得到滤液III;
8、浓缩:将滤液III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的取值范围为6w/g和0.06Mpa,得到枸杞多糖浓缩提取液;
9、纯化:将经过预处理的D101大孔树脂湿法装柱,取上述粗提液于0.5ml/min的不同流速上样,用80%浓度的乙醇以0.6ml/min的不同流速洗脱,将洗脱液合并,浓缩,干燥即得纯度较高的多糖提取物。
实施例4
苯酚~硫酸比色法测定不同除蛋白方法下多糖提取率
1苯酚液的制备
取苯酚100g,加0.2g铝片和0.1g碳酸氢钠蒸馏,收集馏分。称取5g,加蒸馏水定容至100mL溶解、混匀并转移至棕色瓶中,置冰箱中备用。
2标准溶液的配制
准确称取105℃烘干至恒重的分析纯葡萄糖100.00mg,用蒸馏水溶解并于100mL容量瓶中定容,得到1mgmL~1的标准溶液,分别移取3mL、5mL、7mL、9mL、10mL,于100mL容量瓶中定容得到30μgmL~1、50μgmL~1、70μgmL~1、90μgmL~1、100μgmL~1的标准糖溶液。
3标准曲线的绘制
取5mL标准糖溶液加入质量分数为5%的苯酚溶液5mL摇匀,迅速加入10mL浓硫酸,摇匀,室温放置10min后,沸水浴20min,迅速冷却至室温,用紫外可见光谱仪进行波长扫描,测得485nm处为最大吸收峰,空白对照以蒸馏水代替糖溶液。得到标准曲线方程。
4不同提取下的的多糖测定结果
待测的枸杞多糖提取物除了除蛋白方法不同,其他步骤外均采用实施例1方法制备得到。如表1所示,本发明选用的除蛋白方法可以大大提高枸杞多糖的提取效率。
表1不同除蛋白方法后得到的总多糖含量的对比
提取方法 | 半透膜法 | 三氟三氯乙烷法 | Sevag法 | 三氯醋酸法(本发明) |
吸光度 | 0.34 | 0.29 | 0.41 | 0.62 |
占生药材含量(%) | 1.30 | 1.31 | 1.69 | 3.93 |
苯酚~硫酸比色法测定不同提取方法下多糖含量
1苯酚液的制备
取苯酚50g,加0.2g铝片和0.1g碳酸氢钠蒸馏,收集馏分。称取5g,加蒸馏水定容至50mL溶解、混匀并转移至棕色瓶中,置冰箱中备用。
2标准溶液的配制
准确称取105℃烘干至恒重的分析纯葡萄糖50.00mg,用蒸馏水溶解并于50mL容量瓶中定容,得到1mgmL~1的标准溶液,分别移取3mL、6mL、8mL、9mL、10mL,于100mL容量瓶中定容得到30μgmL~1、60μgmL~1、80μgmL~1、90μgmL~1、100μgmL~1的标准糖溶液。
3标准曲线的绘制
取10mL标准糖溶液加入质量分数为5%的苯酚溶液10mL摇匀,迅速加入10mL浓硫酸,摇匀,室温放置10min后,沸水浴20min,迅速冷却至室温,用紫外可见光谱仪进行波长扫描,测得485nm处为最大吸收峰,空白对照以蒸馏水代替糖溶液。得到标准曲线方程。
4不同提取方法的多糖测定
待测的枸杞多糖提取物除提取方法不同,其他步骤外均与实施例1制备方法相同。如表2所示,本发明的提取效率远高于现有技术的枸杞多糖的提取效率。
表2不同提取方法得到的总多糖含量的对比
提取方法 | 超声提取 | 回流提取 | 微波提取 | (本发明) |
吸光度 | 0.31 | 0.279 | 0.314 | 0.461 |
占生药材含量(%) | 1.48 | 1.35 | 1.81 | 4.1 |
实施例5枸杞多糖对小鼠NK细胞和白细胞活性的免疫调节作用
NK细胞杀伤活性测定采用LDH释放法,基本步骤为,小鼠脾细胞悬液,用5%小牛血清培养液调细胞浓度至2.0×100/ml。靶细胞采用体外传代的小鼠白血病细胞株YAC—1细胞(5×100/ml),小鼠细胞及靶细胞之比为50∶1,加至96孔圆底板中,离心10min,37℃,5%CO2培养4h,加入预冷的RPMI1640培养液100μl,离心10min,吸100μl上清液转移至另一96孔平底板中,加入LDH底液100μ/孔,5min后加入1mol/LHcL(50μl/孔)终止反应,于自动酶标仪上读取波长490nm的O、D值。
枸杞多糖对正常小鼠外周白细胞的影响正如表3结果表明,枸杞多糖对提高小鼠外周血白细胞数量有一定作用(实验所用的枸杞多糖提取物均采用实施例1方法制备)。
表3枸杞多糖对小鼠外周白细胞的影响
组别 | n | 白细胞(个/mm3) |
生理盐水组 | 20 | 5500±1413 |
多糖低剂量组(0.2ml) | 20 | 6600±1836 |
多糖中剂量组(0.5ml) | 20 | 9124±1968 |
多糖高剂量组(1.0ml) | 20 | 8187±1847 |
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并非用以限定本发明的实质技术内容范围,本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中,任何他人完成的技术实体或方法,若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同,也或是一种等效的变更,均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。
Claims (6)
1.一种枸杞多糖的提取方法,其特征在于,采用枸杞,经破碎后,采用回流法提取。
2.一种枸杞多糖提取物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)清理:将枸杞筛除泥沙,用清水洗净;
2)干燥:将清洗干净的枸杞在5~25℃下低温干燥10~20h;
3)破碎:对步骤2)得到的枸杞进行超微粉碎,得到颗粒粒径范围为10~70μm粉末;
4)除杂:将步骤3)得到的粉末置于连续微波反应器中400~650W功率下,用乙醚回流提取10~30min,得到药渣I;药渣I用乙醚回流提取10~30min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂;
5)提取:将得到的药渣III加入10~15倍的水,置于超声回流提取系统中,超声回流提取0.5~2h,超声功率0.5~2KW,提取温度30~50℃,得到滤液I;
6)脱色:在滤液I中加入0.1%活性炭,脱色,得到滤液II;
7)除蛋白:将滤液II用三氯醋酸法得到滤液III;
8)浓缩:将滤液III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的取值范围为(2~8w/g)和(0.02~0.08Mpa),得到枸杞多糖浓缩提取液;
9)纯化:将经过预处理的D101大孔树脂湿法装柱,取上述粗提液于0.2~1.0ml/min的不同流速上样,用80%浓度的乙醇以0.5~1.5ml/min的不同流速洗脱,将洗脱液合并,浓缩,干燥即得纯度较高的多糖提取物。
3.根据权利要求2所述的枸杞多糖提取物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)清理:将枸杞筛除泥沙,用清水洗净;
2)干燥:将清洗干净的枸杞在5℃下低温干燥20h;
3)破碎:将步骤2)得到的枸杞进行超微粉碎,得到颗粒粒径范围为10~70μm粉末;
4)除杂:将步骤3)得到的粉末置于连续微波反应器中400W功率下,用乙醚回流提取30min,得到药渣I;药渣I用乙醚回流提取10min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂;
5)提取:将得到的药渣III加入10倍的水,置于超声回流提取系统中,超声回流提取2h,超声功率0.5KW,提取温度50℃,得到滤液I;
6)脱色:在滤液I中加入0.1%活性炭,脱色,得到滤液II;
7)除蛋白:将滤液II用三氯醋酸法得到滤液III;
8)浓缩:将滤液III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的取值为2w/g和0.08Mpa,得到枸杞多糖浓缩提取液;
9)纯化:将经过预处理的D101大孔树脂湿法装柱,取上述粗提液于0.2ml/min的不同流速上样,用80%浓度的乙醇以1.5ml/min的不同流速洗脱,将洗脱液合并,浓缩,干燥即得纯度较高的多糖提取物。
4.根据权利要求2所述的枸杞多糖提取物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)清理:将枸杞筛除泥沙,用清水洗净;
2)干燥:将清洗干净的枸杞在21℃下低温干燥14h;
3)破碎:对步骤2)得到的枸杞进行超微粉碎,得到颗粒粒径范围为10~70μm粉末;
4)除杂:将步骤3)得到的粉末置于连续微波反应器中600W功率下,用乙醚回流提取17min,得到药渣I;药渣I用乙醚回流提取22min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂;
5)提取:将得到的药渣III加入14倍的水,置于超声回流提取系统中,超声回流提取1.5h,超声功率1.2KW,提取温度45℃,得到滤液I;
6)脱色:在滤液I中加入0.1%活性炭,脱色,得到滤液II;
7)除蛋白:将滤液II用三氯醋酸法得到滤液III;
8)浓缩:将滤液III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的取值为4w/g和0.06Mpa,得到枸杞多糖浓缩提取液;
9)纯化:将经过预处理的D101大孔树脂湿法装柱,取上述粗提液于0.65ml/min的不同流速上样,用80%浓度的乙醇以0.65ml/min的不同流速洗脱,将洗脱液合并,浓缩,干燥即得纯度较高的多糖提取物。
5.根据权利要求2所述的枸杞多糖提取物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)清理:将枸杞筛除泥沙,用清水洗净;
2)干燥:将清洗干净的枸杞在25℃下低温干燥10h;
3)破碎:对步骤2)得到的枸杞进行超微粉碎,得到颗粒粒径范围为10~70μm粉末;
4)除杂:将步骤3)得到的粉末置于连续微波反应器中650W功率下,用乙醚回流提取10min,得到药渣I;药渣I用乙醚回流提取30min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂;
5)提取:将得到的药渣III加入15倍的水,置于超声回流提取系统中,超声回流提取0.5h,超声功率0.5KW,提取温度50℃,得到滤液I;
6)脱色:在滤液I中加入0.1%活性炭,脱色,得到滤液II;
7)除蛋白:将滤液II用三氯醋酸法得到滤液III;
8)浓缩:将滤液III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的取值为8w/g和0.02Mpa,得到枸杞多糖浓缩提取液;
9)纯化:将经过预处理的D101大孔树脂湿法装柱,取上述粗提液于1.0ml/min的不同流速上样,用80%浓度的乙醇以0.5ml/min的不同流速洗脱,将洗脱液合并,浓缩,干燥即得纯度较高的多糖提取物。
6.一种具有降血脂、降血糖、保肝、抗肿瘤和抗衰老等功效的枸杞多糖提取物,其特征在于,由以下制备步骤制备得到:
1)清理:将枸杞筛除泥沙,用清水洗净;
2)干燥:将清洗干净的枸杞在20℃下低温干燥13h;
3)破碎:对步骤2)得到的枸杞进行超微粉碎,得到颗粒粒径范围为10~70μm粉末;
4)除杂:将步骤3)得到的粉末置于连续微波反应器中420W功率下,用乙醚回流提取16min,得到药渣I;药渣I用乙醚回流提取21min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂;
5)提取:将得到的药渣III加入13倍的水,置于超声回流提取系统中,超声回流提取1.4h,超声功率1.1KW,提取温度44℃,得到滤液I;
6)脱色:在滤液I中加入0.1%活性炭,脱色,得到滤液II;
7)除蛋白:将滤液II用三氯醋酸法得到滤液III;
8)浓缩:将滤液III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的取值范围为3w/g和0.05Mpa,得到枸杞多糖浓缩提取液;
9)纯化:将经过预处理的D101大孔树脂湿法装柱,取上述粗提液于0.6ml/min的不同流速上样,用80%浓度的乙醇以0.6ml/min的不同流速洗脱,将洗脱液合并,浓缩,干燥即得纯度较高的多糖提取物。
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