CN105213313A

CN105213313A - 一种地西他滨长循环脂质体冻干制剂及其制备方法

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Publication number: CN105213313A
Application number: CN201510789454.6A
Authority: CN
Inventors: 马玉樊; 陈涛; 王汝涛
Original assignee: XI'AN LIBANGZHAO NEW BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: XI'AN LIBANGZHAO NEW BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd; Xian Libang Zhaoxin Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2015-11-17
Filing date: 2015-11-17
Publication date: 2016-01-06
Anticipated expiration: 2035-11-17
Also published as: CN105213313B

Abstract

本发明公开了一种地西他滨长循环脂质体冻干制剂及其制备方法，所述脂质体由地西他滨、磷脂、长循环膜材、胆固醇，磷酸盐缓冲溶液混合制成，再将所得脂质体与冻干保护剂和复助溶剂混合冻干而成，长循环脂质体避免单核巨噬细胞系统快速吞噬脂质体，延长血循环时间，有利于增加脂质体到达病变部位的相对聚集量，即延长其在血浆中的半衰期，提高药物的生物利用度，所述制剂可用于原发性或继发性骨髓增生异常综合征(MDS)的治疗。并对对血液性恶性癌变及实体瘤具有广谱抗肿瘤活性。

Description

一种地西他滨长循环脂质体冻干制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及生产冻干药物脂质体技术，尤其涉及一种地西他滨长循环脂质体冻干制剂及其制备方法。

背景技术

地西他滨(decitabine)又称5-杂氮-2-脱氧胞苷，为目前已知最强的DNA甲基化特异性抑制剂，阻断DNA甲基化可致基因激活与诱导细胞分化。分别于2006年4月和5月由欧洲EMEA和美国食品药品管理局批准上市，是用于治疗原发性和继发性骨髓增生异常综合征(MDS)的药物。它的作用机制主要是通过磷酸化，然后直接渗入DNA，从而拟制DNA甲基化转移酶，那么，这就可以DNA低甲基化和细胞分化或凋亡来发挥抗肿瘤作用。临床报告显示它对血液性恶性癌变及实体瘤具有广谱抗肿瘤活性。

在临床上，由于地西他滨半衰期短，药物性质不稳定，在高温和溶液条件下极易降解，使得药物疗效降低，并引发产生毒副作用的杂质。

专利CN101361718A将地西他滨均匀分散于有机溶剂叔丁醇、乙醇、甲醇或溶于二甲基亚砜中的至少一种，再与注射用水或溶解了冻干保护剂的注射用水混溶，冻干。此制备过程含有有机溶剂，增加了毒副作用。

专利CN102319222B将地西他滨分散于有机溶剂中，再与pH调节剂、注射用水混合冻干制备地西他滨冻干制剂，虽然本发明控制制剂中有机溶剂残留不超过0.8％，但是本制剂的稳定性不够好。

专利CN101584670B地西他滨冻干粉针剂，该专利使用叔丁醇和注射用水组成的混合溶剂，再过滤冻干制备地西他滨粉针，提高了地西他滨的药物稳定性，但是存在安全性隐患，同时，地西他滨半衰期只有4h，并且生物利用度低。

专利CN101637458A公开了一种地西他滨粉针剂的制备方法，采用低温灌装，最大限度地降低地西他滨的水解，但是并未对pH调节剂的种类和用量进行优化和筛选，产品的稳定性不够好。

专利CN102949352B公开了一种地西他滨冻干粉针剂及其制备方法，该专利采用卵磷脂或/和二硬脂酰磷脂酰胆碱制备地西他滨脂质体，以克服或最大限度的抑制地西他滨的水解，但是此制剂不能达到长循环的效果。

专利CN101966157B一种地西他滨缓释微球及其制备方法，该专利的微球粒径在10μm以下，而血管一般安全的粒径范围在3μm以下，且该专利的冻干体积为最小10ml，对生产来说冻干时间相对较长，生产成本相对较高。

本发明制剂是将地西他滨冻干制剂。该制剂优点是：①脂质体具有天然被动靶向性，因为脂质体进入体内即被巨噬细胞作为异物吞噬而形成天然倾向的富集作用；它还具有细胞亲和性与组织相容性，且本发明制得脂质体粒径较小，90％小于0.22μm，易于吸收，安全性高，即可作为抗肿瘤药物的理想载体。②长循环脂质体在体内阻止血浆蛋白吸附于脂质体表面，阻止其调理化作用，从而避免单核巨噬细胞系统快速吞噬脂质体，延长血循环时间，有利于增加脂质体到达病变部位的相对聚集量，即延长其在血浆中的半衰期，提高药物的生物利用度。③冻干粉，可大大提高药物稳定性，便于运输，同时还可以减少因药物降解产生的杂质带来的毒副作用。该发明制备工艺简单可行，生产成本低，可产生可观经济和社会效益。

长循环脂质体，也称隐形脂质体。脂质体被神经节苷脂、磷脂酰肌醇、聚乙二醇等在脂质体表面高度修饰，交错重接附着在脂质体表面，形成致密的构象云，也称为空间稳定脂质体。他可阻止脂质体不被血液中的调理素识别，降低网状内皮系统的快速吞噬活摄取作用，从而使脂质体清除速率减慢，在血液中驻留时间延长，使药物作用时间延长。

发明内容

本发明的目的之一是延长地西他滨的半衰期，并进一步降低药物的毒副作用。本发明提供的一种长循环脂质体冻干制剂，它可降低网状内皮系统的快速吞噬活摄取作用，使药物在血液中驻留时间延长，即可延长地西他滨的半衰期，同时也大大提高了它的生物利用度。

本发明的另一目的是提供该长循环脂质体制剂的制备方法及其冻干方法。与现有的制备方法相比，本发明所提供的制备方法具有长效、安全性高、工艺简单易行等优点，有利于实现工业化生产。

本发明涉及的技术包括两个步骤：一、地西他滨长循环脂质体的制备技术，即制备的脂质体制剂粒径小、药物包封率高、稳定性好；二、脂质体的冻干技术,即冻干后制剂外观良好、复溶后粒径、药物包封率高和稳定性与冻干之前几乎无差异，且水分较小保证了脂质体的完整性。

综上所述，本发明通过以下技术方案实现：

本发明提供一种地西他滨长循环脂质体冻干制剂，该制剂采用特殊脂质体技术将地西他滨、磷脂、长循环膜材、胆固醇，缓冲盐溶液按一定处方混合，做成脂质体。再将所得脂质体与冻干保护剂和复助溶剂混合，用滤膜过滤除菌，再用特殊冻干工艺冻干而成，加复溶液后再经过稀释溶液稀释便可供静脉注射。其冻干前后粒径范围可以是30-500nm、较好是50-300nm、最好是80-210nm。

所述的地西他滨长循环脂质体冻干制剂，其特征在于，所述的特殊脂质体制备技术是薄膜分散发法和高压挤压法相结合的脂质体制备技术。

本发明所述的长循环脂质体冻干制剂，优选的配方如下

更优选的配方如下

其中所述磷脂选自：磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱(DLPC)、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)和聚乙二醇衍生化磷脂(如：二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000；二软脂酰胆磷脂-聚乙二醇2000等)二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂、磷脂酰酰丝氨酸或磷脂酰甘油中的一种或几种。优选的为：磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰丝氨酸(PS)、氢化大豆卵磷脂(HSPC)，

其中所述长循环膜材选自：神经节苷脂(GMI)、磷脂酰肌醇(PI)、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)。

所述的冻干赋型剂是：甘露醇、山梨酸、乳糖、蔗糖、海藻糖、右旋糖酐、明胶、单糖(如：葡萄糖、果糖等)或者多糖(如：淀粉、纤维素等)、氨基酸类(如甘氨酸、丙氨酸、组氨酸、精氨酸等)或者寡肽中的一种或多种。

所述的助复溶剂，其特征在于，所述的复溶助剂是可以为聚乙二醇-400、聚乙二醇-600、聚乙二醇-1000、聚乙二醇-1500或聚乙二醇-4000的一种或多种。

本发明最优选的配方如下：

本发明进一步提供本发明的长循环脂质体冻干制剂的制备方法，操作步骤如下：

(1)将地西他滨2-20g、磷脂10-150g、长循环膜材1-20g、胆固醇1-75g溶解于有机溶剂中，

(2)减压旋转下除去有机溶剂，使脂质体在器壁上形成薄膜，

(3)加入磷酸盐缓冲液，进行振摇或剪切，其粒径范围1-5um，

(4)再将其用高压均质机挤压，使形成粒径均匀且小于200nm的脂质体，

(5)脂质体和冻干保护剂，复溶助剂混合，过滤，冻干制备成冻干制剂。

其中所述溶剂选自甲醇和氯仿的体积比为(1～9)：(9～1)的混合溶剂，优选为1-4:1-4，更优选的为1-2:1-2，最优选的为1:1；溶剂的用量范围为地西他滨，磷脂，长循环膜材，胆固醇重量之和的0.5-2倍重量；旋转温度不超过30℃，所述的磷脂的相变温度(Tc)高于37℃，所述的磷酸盐缓冲液，其PH值范围为6-8，冻干工艺为，-25℃～-45℃冷冻2～8个小时，在-35℃～-20℃真空一次升华干燥10～30个小时，0℃～40℃解析干燥5～10个小时，所述过滤的滤膜为0.22μm的微孔滤膜。

本发明所述的地西他滨长循环脂质体冻干制剂，其中所述的胆固醇是生物膜中的重要成分之一，它与磷脂相结合，阻止磷脂凝集成晶体结构。它像“缓冲剂”起着调节膜“流动性”的作用。当胆固醇浓度在磷脂双分子层膜所占的摩尔比约为50％时胆固醇可以改变膜流动性。

附图说明

图1-各制剂中的地西他滨在t时间渗漏百分率(release％)

图2-各制剂中的地西他滨在t时间血循环中的残留量(％injecteddose)

图3-地西他滨长循环脂质体的粒度特征。

图4-地西他滨长循脂质体在冰冻、冷冻干燥和复溶重构之后立即的粒度特征。

图5-地西他滨长循脂质体在冰冻、冷冻干燥和复溶重构之后在储存24h后的粒度特征。

图6-地西他滨长循脂质体在冰冻、冷冻干燥和复溶重构之后在储存3天后的粒度特征

具体实施方式

本发明对地西他滨长循环脂质体冻干制剂的制剂配方中各种辅料的用量范围及制备工艺进行了筛选和验证。下面结合实施例对本发明作详细说明，但不仅限于下列实例。

1、地西他滨长循环脂质体制剂的制备实施例

(1)不同配比磷脂制备的地西他滨长循环脂质体制剂

例1.1处方：

制备方法:

(1)秤取处方量的地西他滨、PG、PEG-DSPE、胆固醇，将其溶解于处方量氯仿和甲醇的混合溶剂中，然后旋转蒸发仪在30℃以下减压旋转下除去有机溶剂，使脂质体在器壁上形成薄膜。

(2)加入磷酸盐缓冲液，进行振摇，则可形大多层脂质体，其粒径范围约1-5um。

(3)再将其用高压均质机挤压，压力1000bar,均质4遍，便可得地西他滨长循环脂质体。

例1.2处方：

制备方法:

(1)秤取处方量的地西他滨、PS、PEG-DSPE、胆固醇，将其溶解于处方量氯仿和甲醇的混合溶剂中，然后旋转蒸发仪在30℃以下减压旋转下除去有机溶剂，使脂质体在器壁上形成薄膜。

(3)再将其用高压均质机挤压，压力800bar，均质8遍，便可得地西他滨长循环脂质体。

例1.3处方：

制备方法:

(1)秤取处方量的地西他滨、HSPC、PEG-DSPE、胆固醇，将其溶解于处方量氯仿和甲醇的混合溶剂中，然后旋转蒸发仪在30℃以下减压旋转下除去有机溶剂，使脂质体在器壁上形成薄膜。

(3)再将其用高压均质机挤压，压力1000bar，均质5遍，便可得地西他滨长循环脂质体。

(2)不同配比胆固醇制备的地西他滨长循环脂质体制剂

例2.1处方：

制备方法：

例2.2处方

制备方法:

(3)再将其用高压均质机挤压，压力1000bar，均质3遍，便可得地西他滨长循环脂质体。

例2.3处方

制备方法:

(3)再将其用高压均质机挤压，压力1000bar，均质4遍，便可得地西他滨长循环脂质体。

(3)不同PH值磷酸盐缓冲液制备的地西他滨长循环脂质体制剂

例3.1处方：

制备方法:

(3)再将其用高压均质机挤压，压力700bar，均质8遍，便可得地西他滨长循环脂质体。

例3.2处方：

制备方法:

(1)秤取处方量的地西他滨、PG、PEG-DSPE、胆固醇，将其溶解于处方量氯仿和甲醇的混合溶剂中，然后旋转蒸发仪在30℃以下减压旋转下除去有机溶剂，使脂质在器壁上形成薄膜。

例3.3处方：

制备方法:

(3)再将其用高压均质机挤压，压力800bar，均质6遍，便可得地西他滨长循环脂质体。

2、地西他滨长循环脂质体制剂的质量研究

针对上述实施例，本实验检测了地西他滨长循环脂质体的平均粒径及分布、含量及包封率，详见下表1。

表1地西他滨长循环脂质体的质量研究

实例	平均粒径(nm)	粒径分布(PI)	包封率(％)	地西他滨含量(％)
					1.1	119.8	0.117	97.1	98.6

1.2	123.6	0.121	98.2	99.1
					1.3	112.9	0.115	99.1	99.5
2.1	146.0	0.131	82.6	90.2
					2.2	121.2	0.122	98.2	98.3
2.3	119.1	0.109	99.2	99.0
					3.1	126.3	0.119	95.3	96.8
3.2	118.1	0.116	98.5	98.3
					3.3	125.2	0.120	96.3	98.2

由表1可知：以上9个处方和制备工艺得到的粒径均符合要求，说明上述三种磷脂均能制备出该制剂，但是，由于例2.1使用的磷脂含量较低，所以包封率较低，这说明磷脂含量适当增高可提高药物包封率，但是当达到一定比例时则无明显变化。不同Ph值的磷酸盐缓冲液制备的地西他滨长循环脂质体也符合要求，但PH＝7最好，故优选例2.2作为地西他滨长循环脂质体的制备处方。

3、地西他滨长循环脂质体冻干制剂的制备实施例

由于市售的地西他滨包装为50mg/10ml，冻干体积较大成本较高，所以将上述例2.2处方制得的地西他滨长循环脂质体制剂与冻干保护剂和复溶助剂混合溶解完全，经0.22μm的微孔滤膜过滤除菌；然后将过滤除菌后的半成品进行冻干，本实验对其冻干工艺进行了筛选。

一般冻干工艺流程分为预冻、升华干燥、解吸干燥三部分。本实验采用例2.2处方制备的地西他滨长循环脂质体，对其冻干保护剂和复溶助剂的处方和冻干工艺进行筛选。

(1)地西他滨长循环脂质体冻干制剂的冻干保护剂筛选

用例2.2处方制备的地西他滨长循环脂质体，本发明根据表2筛选了常规的赋形剂及其用量。结果表明：多糖类冻干保护剂对该制剂的低温保护作用较好，多糖类与氨基酸类或甘露醇组合的冻干保护剂对该制剂的成型保护作用更好。处方6蔗糖60g、甘露醇30g为更优选。

表2不同冻干保护剂对地西他滨长循环脂质体的质量影响

综上所述，本制剂优先冻干保护剂及用量为蔗糖60g、精氨酸30g，复溶助剂为聚乙二醇-100010g。

(2)地西他滨长循环脂质体冻干制剂的冻干工艺筛选

根据地西他滨的物理化学性质，及冻干前溶液的共晶温度-20℃，玻璃化转变温度-40℃及崩解温度-18℃检测结果。本实验设计了三种冻干工艺：

工艺1：-45℃冷冻3小时，-25℃真空低温干燥20小时，0℃真空干燥5小时，25℃常温干燥5小时。

工艺2：-45℃冷冻2小时，-20℃真空低温干燥20小时，0℃真空干燥5小时，25℃常温干燥5小时。

工艺3：-45℃冷冻3小时，-20℃冷冻1小时，-45℃冷冻2小时，-25℃真空低温干燥15小时，0℃真空干燥5小时，25℃常温干燥5小时。

冻干工艺筛选结果评价如下表3.

表3冻干工艺筛选结果

工艺1	外形不饱满，萎缩，含水量高
		工艺2	冻型差，有喷瓶现象，含水量高
工艺3	冻型较好，疏松无裂痕，含水量低

由表4可知：工艺1样品萎缩，因为脂质体结构过密，冻干过程中内部水蒸气溢出不完全，冻干结束后样品因潮解萎缩；工艺2样品喷瓶，说明预冻时间短温度不够低，预冻不完全，则易在升华过程中使制品部分液化，在真空减压条件下产生喷瓶；工艺3用反复预冻改善喷瓶、萎缩现象，同时缩短一次升华时间，较好地改善了样品冻型，因此确定工艺3作为本品冻干的工艺条件。

4、地西他滨长循环脂质体冻干制剂的质量研究

(1)地西他滨长循环脂质体冻干制剂的体外、体内半衰期考察

实验动物及药品：昆明种小白鼠，体重20～25g，雌雄不拘。地西他滨长循环脂质体冻干制剂本实验制备。

实验方法：

①地西他滨长循环脂质体冻干制剂的体外血清诱导渗漏实验：取小牛血清3.0ml，分别加入复溶后地西他滨冻干粉制剂及复溶重构后的地西他滨长循环脂质体冻干制剂0.2ml，混匀，37℃恒温，于不同时间间隔取样10μl，稀释，用高效液相色谱法检测样品中地西他滨的含量。

②地西他滨长循环脂质体冻干制的体内血清诱导渗漏实验：昆明种小鼠20只，随机分为2组，每组10只，分别于尾静脉注射5ml·kg^-1复溶后地西他滨冻干粉制剂及复溶重构后的地西他滨长循环脂质体冻干制剂。计时，于不同时间间隔从尾静脉取血10μl，稀释，离心，取上清液测定地西他滨的含量。

实验结果：

①地西他滨长循环脂质体冻干制的血清诱导渗漏对比：

由公式1求出各时间地西他滨冻干粉制剂及地西他滨长循环脂质体冻干制剂中的地西他滨渗漏百分率(release％)，并绘制渗漏百分率与时间曲线(图1)。

Re l e a s e % = \frac{F_{1} - F_{0}}{F_{\infty} - F_{0}} \times 100 %

…………….公式1

式中，F0，F1，F∞分别为体外试验中t＝0和t时，10ul样品中地西他滨的含量值。下图1表示各种制剂的渗透百分率随时间的变化。从图中可以看出，由于长循环脂质体剂型，使地西他滨的渗透显著减慢。

②地西他滨的体内血循环清除对比：

由公式2可以计算各制剂中的地西他滨在t时间血循环中的残留量(％injecteddose)，并绘制残留量与时间曲线(图2)。

…………….公式2

式中F0′，Ft′分别为体内试验中t＝0及t时刻10ul样品中的地西他滨含量值。通过图2中各组样品的结果比较，可以看出地西他滨长循环脂质体冻干制剂比地西他滨冻干粉制剂具有显著的缓释效果；同时，地西他滨长循环脂质体半衰期明显延长，是普通冻干粉制剂的6倍。

(2)地西他滨长循环脂质体冻干制剂的稳定性研究

取上述实施例样品在高温60℃、光照4500Lx条件下放置10天进行影响因素试验考察，结果见表4；在高温40℃、相对湿度75％±5％条件下6个月，进行加速试验考察结果见表5；在温度25℃、相对湿度60％±10％条件下18个月，进行长期试验考察，检测各项质量指标的变化，结果见表6。

表4地西他滨长循环脂质体冻干制剂的影响试验考察(高温60℃、光照4500Lx)

表5地西他滨长循环脂质体冻干制剂的加速试验(高温40℃、相对湿度75％±5％)

表6地西他滨长循环脂质体冻干制剂的长期稳定性(温度25℃、相对湿度60％±10％)

结论：经影响因素10天、加速6个月和长期18个月后，本发明制得的产品质量符合标准要求，而且各项质量指标无明显变化，均符合质量标准，说明了本发明的产品质量稳定性很好。

Claims

1.一种地西他滨长循环脂质体冻干制剂，其特征在于，所述脂质体由地西他滨、磷脂、长循环膜材、胆固醇，磷酸盐缓冲液混合制成，所得脂质体与冻干保护剂和复溶助剂混合，冻干制备而成，粒径范围30-500nm。

2.根据权利要求1所述的长循环脂质体冻干制剂，其特征在于，配方如下

粒径范围50-300nm。

3.根据权利要求1所述的长循环脂质体冻干制剂，其特征在于，配方如下

粒径范围80-210nm。

4.根据权利要求1所述的长循环脂质体冻干制剂，其特征在于，其中所述磷脂选自：磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱(DLPC)、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)和聚乙二醇衍生化磷脂(如：二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000；二软脂酰胆磷脂-聚乙二醇2000等)二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂、磷脂酰酰丝氨酸或磷脂酰甘油中的一种或几种。

5.根据权利要求1所述的长循环脂质体冻干制剂，其特征在于，其中所述磷脂选自：磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰丝氨酸(PS)、氢化大豆卵磷脂(HSPC)；所述长循环膜材选自：神经节苷脂(GMI)、磷脂酰肌醇(PI)、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)。

6.根据权利要求1所述的长循环脂质体冻干制剂，其特征在于，其中所述冻干保护剂选自：甘露醇、山梨酸、乳糖、蔗糖、海藻糖、右旋糖酐、明胶、单糖(如：葡萄糖、果糖等)或者多糖(如：淀粉、纤维素等)、氨基酸类(如甘氨酸、丙氨酸、组氨酸、精氨酸等)或者寡肽中的一种或多种。

7.根据权利要求1所述的长循环脂质体冻干制剂，其特征在于，所述的复溶助剂选自：聚乙二醇-400、聚乙二醇-600、聚乙二醇-1000或聚乙二醇-2000的一种或多种。

8.权利要求1所述的长循环脂质体冻干制剂的制备方法，其特征在于，操作步骤如下：

(2)减压旋转下除去有机溶剂，使脂质体在器壁上形成薄膜，

(3)加入磷酸盐缓冲液，进行振摇或剪切，其粒径范围1-5um，

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，其中所述溶剂选自甲醇和氯仿的(1～9)：(9～1)混合溶剂，溶剂的用量范围为地西他滨，磷脂，长循环膜材，胆固醇重量之和的0.5-2倍重量；旋转温度不超过30℃，所述的磷脂的相变温度(Tc)高于37℃，所述的磷酸盐缓冲液，其PH值范围为6-8，冻干工艺为，-25℃～-45℃冷冻2～8个小时，在-35℃～-20℃真空一次升华干燥10～30个小时，0℃～40℃解析干燥5～10个小时，所述过滤的滤膜为0.22μm的微孔滤膜。

10.根据权利要求1所述的长循环脂质体冻干制剂，其特征在于，配方如下：

制备方法如下：

(1)将地西他滨、磷脂、长循环膜材、胆固醇溶解于有机溶剂中，

(2)减压旋转下除去有机溶剂，使脂质体在器壁上形成薄膜，

(3)加入磷酸盐缓冲液，进行振摇或剪切，其粒径范围1-5um，

(5)脂质体和冻干保护剂，复溶助剂混合，过滤，冻干制备成冻干制剂，其中所述溶剂选自甲醇和氯仿的(1～9)：(9～1)混合溶剂，溶剂的用量范围为地西他滨，磷脂，长循环膜材，胆固醇重量之和的0.5-2倍重量；旋转温度不超过30℃，所述的磷酸盐缓冲液，其PH值范围为6-8，冻干工艺为，-25℃～-45℃冷冻2～8个小时，在-35℃～-20℃真空一次升华干燥10～30个小时，0℃～40℃解析干燥5～10个小时，所述过滤的滤膜为0.22μm的微孔滤膜。