CN105193915A - 一种补骨脂提取物及其医药用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种补骨脂提取物及其医药用途，制备方法包括：以重量计，每100份药材包含干燥的补骨脂成熟果实80～90份和干燥的白芍10～20份，混合粉碎；用70％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液；对浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用25％乙醇冲洗8个柱体积除去多糖，再用60％乙醇洗脱10个柱体积，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。补骨脂提取物在糖水消耗、水平、垂直运动及跳台错误次数方面均较模型组有明显改善(P<0.05)，证明该提取物有良好的抗抑郁作用，可以用来制备抗抑郁的药物。

Description

一种补骨脂提取物及其医药用途

技术领域

本发明涉及中药领域，具体涉及一种补骨脂提取物、含有该提取物的药物制剂及医药用途。

背景技术

中药补骨脂为豆科植物补骨脂PsoraleacorylifoliaL.的干燥成熟果实，始载于《雷公炮灸论》，具有补肾助阳、纳气、止泻的功效。历代中医用于肾虚、冷泻、遗滑精、小便频数、腰膝冷痛；外治用于皮肤病、白癜风等。补骨脂临床应用广泛，2010年版《中华人民共和国药典》收录含补骨脂的中成药有20余种。

补骨脂化学化成分的研究最早见于1910年。自1933年从补骨脂中分离得到第一个纯品补骨脂(Psoralen)，至今已分离鉴定了四十余种成分。近年来，又从中分得许多新的香豆素、黄酮及其他成分。目前，国内外学者对其化学成分研究较多，主要成分为香豆素类，黄酮类和单萜类化合物。

(1)香豆素类：有呋喃香豆素如补骨脂素(Psoralen)和异补骨脂素(Isopsoralen)。拟雌内酯类如补骨脂定(Psoralidin)和双轻异补骨脂定(Eorylidin)。

(2)黄酮类化合物，如查尔酮类：补骨脂甲素(Ocrylioflni)和补骨脂乙素(Eorylioflinin)。二氢黄酮类：补骨脂二氢黄酮(Bavaehin)、补骨脂二氢甲醚(Bavaehinin)和异补骨脂二氢黄酮(Isobavaehin)。异黄酮类：补骨脂异黄酮(Eorylin)和补骨脂醇黄酮体化合物。

(3)单萜酚类：补骨脂酚(Bakuehiol)。

(4)其它类成分有豆甾醇、β-谷甾醇葡萄糖苷、三十烷、葡萄糖、棉子糖、对轻基苯甲酸、树酯、结构未定的补骨脂醛、两种葡萄糖苷等三十余种物质。

发明内容

本发明的目的在于提供一种补骨脂提取物，该提取物的制备方法和液相分析方法，含有该提取物的药物制剂及利用该提取物制备抗抑郁的药物的用途。

本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：

一种补骨脂提取物，该提取物由以下方法制备：

(a)以重量计，每100份药材包含干燥的补骨脂成熟果实80～90份和干燥的白芍10～20份，混合粉碎；(b)用乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液；(c)对步骤(b)浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(d)正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用20～30％乙醇冲洗6～8个柱体积除去多糖，再用55～65％乙醇洗脱8～10个柱体积，收集55～65％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。

进一步地，步骤(d)中所述大孔树脂为AB-8型大孔树脂。

进一步地，步骤(b)中所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为65～75％。

进一步地，步骤(b)中所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为70％。

进一步地，步骤(d)为用正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用25％乙醇冲洗8个柱体积除去多糖，再用60％乙醇洗脱10个柱体积，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。

为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同产地、批次药材制备的补骨脂提取物批间差异，所述提取物的液相分析方法为：

色谱柱：AgilentZorbaxSBC18柱(4.6mm×250mm，5μm)；

流动相：A为乙腈，B为0.1％磷酸水溶液；

梯度洗脱程序：0.01～15min，A25％～35％；15～25min，A35％～50％；25～32min，A50％；32～35min，A50％～25％；35～40min，A25％；

流动相流速：1.0mL·min^-1；

检测波长：255nm；

柱温：30℃；

进样量：10μL。

药物制剂，含有治疗有效量的所述补骨脂提取物和药学上可接受的载体。

所述的补骨脂提取物在制备抗抑郁的药物中的应用。

所述的药物制剂在制备抗抑郁的药物中的应用。

本发明提取物用作药物时，可以直接使用，或者以药物制剂的形式使用。

所述药物制剂含有治疗有效量的本发明补骨脂提取物，其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。

所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。

本发明的优点：本发明通过对补骨脂药材进行提取、除杂、富集处理，能得到抗抑郁的提取物；本发明提供的液相分析方法可以用于建立该提取物的指纹图谱，用于控制不同产地、批次药材制备的提取物的批间差异。

附图说明

图1为补骨脂提取物HPLC液相图谱。

具体实施方式

下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

实施例1：补骨脂提取物制备

药材来源：补骨脂和白芍购自安徽亳州中药材市场。

主要试剂：食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司；医药级AB-8大孔树脂购自天津波鸿树脂有限公司；乙腈为HPLC级，购于TEDIA；85％磷酸为HPLC级，购于TEDIA；色谱用纯净水为哇哈哈纯净水。

将8.5kg干燥的补骨脂成熟果实和1.5kg干燥白芍混合粉碎，用70％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(6L)；对浓缩液依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水饱和的正丁醇(6L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大孔树脂(2kg，柱体积1.5L)富集，先用25％乙醇冲洗8个柱体积(12L)，再用60％乙醇洗脱10个柱体积(15L)，收集60％洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得补骨脂提取物浸膏粉约155g。

实施例2：补骨脂提取物②制备(80份补骨脂，20份白芍)

制备方法：将8.0kg干燥的补骨脂成熟果实和2.0kg干燥白芍混合粉碎，用70％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(6L)；对浓缩液依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水饱和的正丁醇(6L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大孔树脂(2kg，柱体积1.5L)富集，先用25％乙醇冲洗8个柱体积(12L)，再用60％乙醇洗脱10个柱体积(15L)，收集60％洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得补骨脂提取物浸膏粉约155g。

实施例3：补骨脂提取物③制备(90份补骨脂，10份白芍)

制备方法：将9.0kg干燥的补骨脂成熟果实和1.0kg干燥白芍混合粉碎，用70％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(6L)；对浓缩液依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水饱和的正丁醇(6L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大孔树脂(2kg，柱体积1.5L)富集，先用25％乙醇冲洗8个柱体积(12L)，再用60％乙醇洗脱10个柱体积(15L)，收集60％洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得补骨脂提取物浸膏粉约155g。

实施例4：补骨脂提取物④制备(75份补骨脂，25份白芍)

制备方法：将7.5kg干燥的补骨脂成熟果实和2.5kg干燥白芍混合粉碎，用70％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(6L)；对浓缩液依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水饱和的正丁醇(6L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大孔树脂(2kg，柱体积1.5L)富集，先用25％乙醇冲洗8个柱体积(12L)，再用60％乙醇洗脱10个柱体积(15L)，收集60％洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得补骨脂提取物浸膏粉约155g。

实施例5：补骨脂提取物⑤制备(95份补骨脂，5份白芍)

制备方法：将9.5kg干燥的补骨脂成熟果实和0.5kg干燥白芍混合粉碎，用70％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(6L)；对浓缩液依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水饱和的正丁醇(6L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大孔树脂(2kg，柱体积1.5L)富集，先用25％乙醇冲洗8个柱体积(12L)，再用60％乙醇洗脱10个柱体积(15L)，收集60％洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得补骨脂提取物浸膏粉约155g。

实施例6：液相色谱分析

供试品溶液配制：取实施例1方法制得的提取物浸膏粉5mg至50mL棕色容量瓶中，加30mL25％乙腈水溶液超声溶解，冷却至室温后，继续加25％乙腈水溶液定容。

分析方法：

高效液相色谱仪：Agilent1100，二元泵；

色谱柱：AgilentZorbaxSBC18柱(4.6mm×250mm，5μm)；

流动相：A为乙腈，B为0.1％磷酸水溶液；

梯度洗脱程序：0.01～15min，A25％～35％；15～25min，A35％～50％；25～32min，A50％；32～35min，A50％～25％；35～40min，A25％；

流动相流速：1.0mL·min^-1；

检测波长：255nm；

柱温：30℃；

进样量：10μL。

对用10批不同产地、批次延胡索制备的提取物进行分析，建立指纹图谱进行匹配，结果1～11号峰在10批样品色谱图中均出现。因此标定11个峰为共有指纹峰，据此建立该提取物的HPLC指纹图谱，结果见图1。

实施例7：补骨脂提取物药理试验

一、材料与仪器

1、动物：SD雄性大鼠，体质量240-260g，由北京维通利华公司提供，合格证号：SCXK(京)2007-0001。所有动物提前1周购入，常规饲养。

2、药物：受试药物补骨脂提取物，制备方法见实施例1～5，依次得到补骨脂提取物①～⑤。阳性药盐酸氟西汀(Fluoxetine，Prozac百忧解)，礼来苏州制药有限公司，批号：A333341。

3、试剂：蔗糖(北京国华化学试剂厂)，去甲肾上腺素(NE)(Serva公司)，多巴胺(DA)(Fluka公司)，肾上腺素(E)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、3,4-二羟苄胺(DHBA)(均为Sigma公司)，二正丁胺(上海化学试剂采购站分装)，B-8离子对试剂(天津化学试剂厂)，甲醇(优级纯，北京化工厂)。

4、器材：烘箱，大鼠固定笼，止血钳，水桶，温度计，1/100秒表，大鼠行为观察敞箱，大鼠跳台反应箱，Waters高效液相色谱仪厂家(美国Waters公司)。

二、方法

1、分组和给药：正常SD大鼠216只，24h禁水不禁食后，给予1％蔗糖水，测定1h内的消耗量。根据蔗糖水消耗量随机分成18个组，每组12只，也就是分为空白组、模型组、阳性药盐酸氟西汀组(2.5mg·kg^-1·d^-1)、补骨脂提取物①～⑤均分别设置高(70mg·kg^-1·d^-1)、中(35mg·kg^-1·d^-1)、低(17.5mg·kg^-1·d^-1)剂量组。造模同时给药，每日1次，连续给药21d。各组均按1.0mL/100g灌胃给药，每周称1次体质量。空白组给予去离子水。

2、造模：参照文献方法，4℃冰水游泳(5min)、45℃热烘(5min)、夹尾(1min)、潮湿饲养(潮湿垫料)、昼夜颠倒(24h)，禁食(24h)，禁水(24h)等刺激随机安排到21d内，每日给予1种刺激，除空白组外其余动物均采取单笼饲养，自由饮食。室温(24±1)℃，相对湿度(60±10)％。

3、行为学观察：

(1)蔗糖水消耗量：每次禁水后，测定每组动物1h内的1％蔗糖水消耗量。

(2)敞箱实验：敞箱高40cm，长和宽均为80cm，无盖，周壁和箱底均为黑色，底面划分为面积相等的25块方格。以动物穿越方格数作为水平活动得分，以直立次数为垂直活动得分(两前肢离地1cm以上)。每只动物进行1次测定，每次3min。

(3)跳台实验：实验装置为1个30cm×30cm×30cm的有机玻璃箱，底面是铜栅，间距为0.8cm，可以通电，电压由1变压器控制。箱子左后角置于1高5cm、直径为8cm的木头平台。将动物放入反应箱内适应环境3min，然后立即通36V交流电，动物受到电击，正常反应是跳上平台以躲避伤害性刺激。多数动物可能会再次或多次跳至铜栅上，受到电击后又迅速跳回平台，如此训练5min，大鼠受到电击的次数为错误次数。24h后重做测验，将大鼠置于平台上，通电并记时，记录5min内的错误次数。

(4)大脑皮质单胺类神经递质含量的测定：各组大鼠在实验第22d跳台实验完成后，动物断头处死，迅速在冰上剥离大脑，取前额皮质，称重后置组织冷冻管中用液氮快速冷冻后，放入-70℃冰箱保存至测定。根据脑组织的重量，加入预冷的0.1mol/L过氯酸(内含0.3mMEDTA二钠和0.5mM亚硫酸钠)，2μg/mLDHBA，超声匀浆，11000r/min离心10min，上清液用于神经递质测定。采用高效液相色谱－电化学检测器系统(HPLC-ECD)进行测定，色谱条件为：色谱柱为4mm×150mm，Nova-pakC₁₈，5μm(大连色谱中心填装)；流动相为50mmol柠檬酸-乙酸钠缓冲液pH3.5(内含1.0mmoLB-8离子对试剂，1.8mmoL二正丁胺，0.3mmoLEDTA二钠，4％甲醇)，流速1.0mL/min，玻璃碳工作电极，检测池电压为+0.75V；3,4-二羟苄胺DHBA为内标物，样品中各主要组分用内标法进行定量。

4、统计学方法

所测定指标均采用表示，使用SPSS13.0软件中的方差分析(ANOVA)进行检验，P<0.05表示差异有显著性意义。

三、结果

1、补骨脂提取物对慢性应激模型大鼠体质量的影响

结果表明，与空白组比，实验第14、21d模型组大鼠体质量显著降低(P<0.01)；与模型组比较，补骨脂提取物①～③中、高剂量组和盐酸氟西汀组大鼠体质量均显著增加(P<0.01)，补骨脂提取物④～⑤低、中、高剂量组与模型组比较均无显著差异，见表1。

表1补骨脂提取物①～⑤对慢性应激模型大鼠体质量的影响(n＝12，g)

注：与模型组同期比较，*P<0.05，**P<0.01；与空白组同期比较，△△P<0.01.

2、补骨脂提取物对慢性应激模型大鼠蔗糖水消耗量的影响

结果表明，与空白组比较，实验第14、21d，模型组大鼠蔗糖水消耗量显著降低(P<0.01)；与模型组相比，补骨脂提取物①～③中、高剂量组和盐酸氟西汀组大鼠蔗糖水消耗量显著增加(P<0.01)，补骨脂提取物④～⑤低、中、高剂量组大鼠蔗糖水消耗量均无明显差异，见表2。

表2补骨脂提取物对慢性应激模型大鼠蔗糖水消耗量的影响(n＝12，mL)

注：与模型组同期比较，*P<0.05，**P<0.01；与空白组同期比较，△△P<0.01。

3、补骨脂提取物对慢性应激抑郁模型大鼠敞箱活动的影响

结果表明，与空白组比较，模型组大鼠水平运动得分、垂直运动得分显著降低(P<0.05)；与模型组比较，补骨脂提取物①～③中、高剂量组和盐酸氟西汀组大鼠水平运动、垂直运动得分显著增加(P<0.05)，补骨脂提取物④～⑤低、中、高剂量组大鼠水平运动、垂直运动得分均无明显差异，见表3。

表3补骨脂提取物对慢性应激抑郁大鼠敞箱活动行为的影响(n＝12)

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；与空白组比较，△P<0.05。

4、补骨脂提取物对慢性应激模型大鼠跳台错误次数的影响

结果表明，与空白组比较，模型组大鼠训练期错误次数和测试期错误次数显著增加(P<0.05)；与模型组比较，补骨脂提取物①～③中、高剂量组及盐酸氟西汀组大鼠训练期错误次数和测试期错误次数显著降低(P<0.05)，补骨脂提取物④～⑤低、中、高剂量组大鼠训练期错误次数和测试期错误次数均无明显差异，见表4。

表4补骨脂提取物对慢性应激抑郁大鼠跳台错误次数的影响(n＝12)

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；与空白组比较，△△P<0.01。

5、补骨脂提取物对慢性应激模型大鼠大脑皮质单胺类神经递质的影响

结果表明，与空白组比较，模型组大鼠皮质单胺类神经递质NE、5-HT含量明显降低(P<0.05)；与模型组比较，补骨脂提取物①～③中、高剂量组和盐酸氟西汀组大鼠脑内单胺类神经递质NE、5-HT含量明显升高(P<0.05)，补骨脂提取物④～⑤低、中、高剂量组大鼠脑内单胺类神经递质NE、5-HT含量均无明显差异，见表5。

表5补骨脂提取物对慢性应激模型大鼠脑内单胺类神经递质的影响(n＝12，ng/g)

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；与空白组比较，△P<0.05。

本实验运用慢性轻度不可预见性应激和孤养两种经典方法，建立大鼠抑郁症模型，经糖水消耗测定、行为学评分，证实该模型基本模拟了抑郁症患者的快感缺乏、兴趣缺失、精神运动迟滞、学习记忆能力下降等抑郁表现。补骨脂提取物①～③在糖水消耗、水平、垂直运动及跳台错误次数方面均较模型组有明显改善(P<0.05)，证明补骨脂提取物①～③有良好的抗抑郁作用。本实验研究中，造模后大鼠体质量增长显著减慢甚至下降，而阳性药及补骨脂提取物①～③可改善其体质量下降。当前国外许多学者对慢性轻度不可预见性应激(CUMS)大鼠模型体质量增长或减少的变化意见不一。在实际生活中抑郁症患者有的厌食、体质量下降，有的贪食、体质量增加，因此两种结论在理论上并不矛盾。在抑郁症的发病机制研究中，脑内单胺类递质，如去甲肾上腺素、5-HT和多巴胺等功能不足，早已得到普遍公认。额叶皮质、杏仁核、海马和下丘脑等4个关键大脑结构的功能与人类情感活动关系密切，本实验研究显示慢性应激大鼠前额皮质内5-HT、NE含量明显降低，补骨脂提取物①～③能提高皮质5-HT、NE的含量(P<0.05)。表明补骨脂提取物①～③对前额皮质的单胺神经递质具有调节作用，是其抗抑郁作用的机制之一。

补骨脂提取物在大鼠慢性应激抑郁症动物模型上表现出的有效性，以及对脑内单胺神经递质的调节作用，与补骨脂和添加物白芍的比例有关，二者比例过高或过低均不能实现抗抑郁的效果。

实施例8：片剂的制备

按实施例1方法先制得提取物，按其与赋形剂重量比为1:8的比例加入赋形剂，制粒压片。

实施例9：口服液的制备

按实施例1方法先制得提取物，按常规口服液制法制成口服液。

实施例10：胶囊剂或颗粒剂的制备

按实施例1方法先制得提取物，按其与赋形剂重量比为1:9的比例加入赋形剂，制成胶囊或颗粒剂。

实施例11：注射液的制备

按实施例1方法制得提取物，加注射用水，精滤，灌封灭菌制成注射液。

实施例12：无菌粉针的制备

按实施例1方法先制得提取物，溶于无菌注射用水中，搅拌使溶，用无菌抽滤漏斗过滤，再无菌精滤，分装于安瓿，低温冷冻干燥后无菌熔封得粉针剂。

上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。

Claims (9)

1.一种补骨脂提取物，其特征在于所述提取物由以下方法制备：(a)以重量计，每100份药材包含干燥的补骨脂成熟果实80～90份和干燥的白芍10～20份，混合粉碎；(b)用乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液；(c)对步骤(b)浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(d)正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用20～30％乙醇冲洗6～8个柱体积除去多糖，再用55～65％乙醇洗脱8～10个柱体积，收集55～65％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。

2.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于：步骤(d)中所述大孔树脂为AB-8型大孔树脂。

3.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于：步骤(b)中所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为65～75％。

4.根据权利要求3所述的提取物，其特征在于：步骤(b)中所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为70％。

5.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于：步骤(d)为用正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用25％乙醇冲洗8个柱体积除去多糖，再用60％乙醇洗脱10个柱体积，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。

6.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于：所述提取物的液相分析方法为：

色谱柱：AgilentZorbaxSBC18柱(4.6mm×250mm，5μm)；

流动相：A为乙腈，B为0.1％磷酸水溶液；

梯度洗脱程序：0.01～15min，A25％～35％；15～25min，A35％～50％；25～32min，A50％；

32～35min，A50％～25％；35～40min，A25％；

流动相流速：1.0mL·min^-1；

检测波长：255nm；

柱温：30℃；

进样量：10μL。

7.药物制剂，其特征在于：含有治疗有效量的权利要求1所述的提取物和药学上可接受的载体。

8.权利要求1所述的提取物在制备抗抑郁的药物中的应用。

9.权利要求7所述的药物制剂在制备抗抑郁的药物中的应用。