CN105168264A - 粒毛盘菌水溶性黑色素slim404在提高免疫方面的应用 - Google Patents

Abstract

粒毛盘菌水溶性黑色素SLIM404在提高免疫方面的应用，本发明属于医药免疫领域，提供一种水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404，具体涉及该黑色素在提高免疫和制备提高免疫药物方面的应用。该黑色素是粒毛盘菌YM404胞内黑色素，经三氧化硫-吡啶修饰后得到的水溶性粒毛盘菌黑色素；该黑色素具有提高免疫功能的作用，通过促进胸腺器官发育、提高巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数、增强B细胞介导的体液免疫、促进T细胞介导的免疫应答反应、提高体内抗氧化酶系统的活性，清除免疫低下机体内过量的自由基和脂质过氧化物等方面提高免疫的。以该黑色素制成的药物，有多种用药途径，安全无毒，易于制得，适合大规模推广应用。

Description

粒毛盘菌水溶性黑色素SLIM404在提高免疫方面的应用

技术领域

本发明属于医药免疫领域，涉及一种水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404，具体涉及该黑色素在提高免疫和制备提高免疫药物方面的应用。

背景技术

免疫系统是机体对异种、异体及自身物质所产生的反应，发挥免疫功能的组织系统。从结构上可将免疫系统分为免疫器官、免疫因子和免疫细胞，从功能上课将免疫系统分为非特异性免疫和特异性免疫。人体的胚胎发育、疾病发生、衰老等一系列的生命过程与免疫系统有密切的关系，机体对自身的保护作用依赖于这个完善的免疫系统，健康人体需要维持一个合理平衡的免疫系统。

黑色素一般存在于动植物和微生物体内，其可作为一种免疫调节剂，可增强机体体液免疫和细胞免疫反应，具有显著的正向免疫调节作用。研究发现鱿鱼墨黑色素对小鼠机体特异性和非特异性免疫机能具有明显的调节作用，裴氏着色霉黑色素可通过宿主抗体反应激活体液免疫和细胞反应控制着色芽生菌病，构巢曲霉黑色素具有抗炎作用，其可作为一种抗炎新药开发。粒毛盘菌是一种腐生性真菌，其在深层发酵条件下可产生具有抑菌、抗氧化、抗衰老、抗辐射等生物活性的黑色素。粒毛盘菌YM404胞内均一性黑色素分子结构中含有苯并噻唑和吲哚环，不溶于水及常见有机溶剂，硫酸酯化修饰后，其水溶解度为2.06g(30℃)，且具有显著的体外抗氧化活性。目前国内外未见有公开文献提及将粒毛盘菌黑色素作为制备免疫调节药物的应用方面的报道。

发明内容

本发明提供水溶性粒毛盘菌黑色素在提高免疫方面的作用，通过该黑色素制备提高免疫药物的应用，弥补当前研究的空白。

本发明的目的通过以下技术方案实现

本发明提供一种水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404，该黑色素是粒毛盘菌YM404胞内黑色素，经三氧化硫-吡啶修饰后得到的水溶性粒毛盘菌黑色素，具有提高免疫功能的作用。

本发明还提供了上述水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404在提高免疫功能方面的应用，其中：

水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404提高免疫通过促进胸腺器官发育实现。

或者，水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404提高免疫通过提高巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数实现。

或者，水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404提高免疫通过增强B细胞介导的体液免疫实现。

或者，水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404提高免疫通过促进T细胞介导的免疫应答反应实现。

或者，水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404提高免疫通过提高体内抗氧化酶系统的活性，清除免疫低下机体内过量的自由基和脂质过氧化物实现。

本发明还提供了一种药物，该药物包括水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404。

本发明还提供了上述药物在提高免疫功能方面的应用，该药物中水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404质量占药物总质量的35％以上。

有益效果：

本发明通过大量试验，证实粒毛盘菌YM404胞内黑色素经三氧化硫-吡啶修饰后得到的水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404可以通过多种途径达到提高免疫的作用，创造性地提出以该黑色素为基础生产提高免疫药物，该种药物可以以多种形式给药，并且无毒、易得、稳定，是一种优良的提高免疫药物。同时，以粒毛盘菌发酵生产，为大规模生产该黑色素SLIM404及相关产品提供可能，不产生污染，能产生较好的规模效益。

附图说明

图1为非水溶性原粒毛盘菌(Lachnum)YM404胞内黑色素的红外光谱图；

图2为本发明的采用三氧化硫-吡啶对粒毛盘菌(Lachnum)YM404胞内黑色素进行修饰改性后的水溶性黑色素的红外光谱图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明，下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照本领域的公知手段，或按照制造厂商的建议条件。

实施例1

一、粒毛盘菌胞内黑色素(LIM)的制备：

将粒毛盘菌YM404(该菌株编号来源于文献Purification,structureandanti-radiationactivityofmelaninfromLachnumYM404.Internationaljournalofbiologicalmacromolecules,2014,63:170-176.期刊ISSN:0141-8130)接种于100L发酵罐，培养基配方为：酪氨酸浓度为1.0mmol/L，铜离子浓度为1.1mmol/L，蔗糖质量为25.5g/L，酵母膏5.0g/L，蛋白胨5.0g/L，pH8.0，装料系数体积比为0.7，接种量为5％(v/v)，培养温度为27℃，通气量为1.0L/min，搅拌转速为180r/min，发酵时间为12d；将发酵液抽滤，收集菌丝体，60℃烘干，按菌丝体的质量(g)与浓度为1mol/L的氢氧化钠(mL)比为1:100混匀，30℃静置12h，抽滤得浸提液；向上述浸提液加入1mol/LHCl调节pH为1～2，静置12h后将上述悬浮液离心，所得到的沉淀经去离子水洗涤至pH为7后，真空冷冻干燥，即得黑色素粗品；再将该黑色素粗品加入7mol/LHCl后于100℃酸解2h，除去与黑色素结合的蛋白质及碳水化合物。酸解后，抽滤得沉淀，沉淀经双蒸水洗涤至上清液pH值为7时重新溶于1mol/LNH₃·H₂O溶液，旋转蒸发仪蒸去NH₃至溶液pH为中性后，依次经乙酸乙酯、氯仿、无水乙醇萃取，以除去脂类物质，萃取后旋转蒸发除去有机相，水相调pH值为2，以5000r/min离心10min，分离得到的沉淀经去离子水反复洗涤至上清液Cl^–定性检测为阴性后，真空冷冻干燥，即得到粒毛盘菌YM404胞内黑色素(LIM)。

二、水溶性粒毛盘菌黑色素(SLIM404)的制备

将90mL吡啶加入附有冷凝管、温度计的250mL三颈瓶中，用电磁加热搅拌器搅拌，同时缓慢加入三氧化硫-吡啶2-3.0g。加热至90℃，再加入通过上述方法得到的LIM404粉末0.5g，恒温搅拌1h，冷却至室温。反应液用3mol·L-1的NaOH溶液调至中性，静置24h。自来水和蒸馏水分别透析2d，过滤，冷冻干燥，得硫酸酯化黑色素SLIM404。

三、水溶性粒毛盘菌黑色素(SLIM404)的结构验证

取上述粒毛盘菌胞内黑色素LIM404和水溶性黑色素SLIM404各2mg，分别与400mg干燥的KBr混匀、压片，采用FT-IR6700傅立叶变换红外光谱仪进行红外光谱分析，扫描区间为4000-400cm^-1。图1为非水溶性原粒毛盘菌(Lachnum)YM404胞内黑色素的红外光谱图，图2为本发明的采用三氧化硫-吡啶对粒毛盘菌(Lachnum)YM404胞内黑色素进行修饰改性后的水溶性黑色素的红外光谱图。对比分析这两个红外光谱图的结果表明，SLIM404红外光谱在1080cm^-1、820cm^-1处出现了新的吸收峰(图2)，可能分别为-O-SO₃H中S＝O的伸缩振动峰、C-O-S伸缩振动吸收峰，表明硫酸酯化修饰成功。

四、水溶性粒毛盘菌黑色素(SLIM404)的免疫调节作用药理实验：

(1)粒毛盘菌黑色素生理盐水溶液的制备：将上述两种粒毛盘菌黑色素粉末，用质量百分浓度为0.9％的生理盐水分别配制成50mg/mL和200mg/mL的水溶液，采取的给药体积为0.2mL/只，1次/d，连续3周。

(2)动物：昆明小鼠90只，雄性，体重20±2g，SPF级，随机分为7组。

(3)试剂：超氧化物歧化酶(SOD)测试盒、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-PX)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒，为南京建成生物工程研究所生产的产品；绵羊红细胞、鸡血红细胞、豚鼠血清(规格100mL，上海远慕生物科技有限公司)；环磷酰胺(Cy)(批号20071017，规格200mg×5瓶)，江苏恒瑞制药厂；盐酸左旋咪唑(编号A1420204705，规格25mg*100s)，广东华南药业集团有限公司；RPMI-1640培养基、印度墨汁、Hanks液体、都氏液，美国Hyclone公司；四氮唑盐(MTT)、刀豆蛋白(ConAⅣ)四型，Sigma公司

(4)方法：昆明小鼠，小鼠适应性喂养1周后，分别称重并记录，随机取出10只作正常组，用生理盐水0.2mL/次灌胃，其余开始皮下注射环磷酰胺15mg/kg·bw，连续7d。随机分为模型组、LIM404(50mg·kg^-1)、LIM404(200mg·kg^-1)、SLIM404(50mg·kg^-1)、SLIM404(200mg·kg^-1)、阳性组，模型组和正常组灌胃0.9％的生理盐水，阳性组灌胃左旋咪唑(25mg·kg^-1)，灌胃给药量为0.2mL/只，1次/d，连续给药30d。末次给药后小鼠禁食不禁水12h。测定脾和胸腺指数、碳粒廓清吞噬指数及其它各项指标。

(5)相关指标测定：

1.小鼠体重增长量和免疫器官指数测定

末次给药后第2天，称小鼠体重，然后将小鼠脱颈处死。小鼠取血后处死，取其肝脏、脾脏及胸腺并称重，分别计算脏器指数。脏器指数＝脏器质量/体质量×100。

2.SLIM404对免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能影响

昆明小鼠末次给药后禁食不禁水，12h后分别称重，同时按0.1mL/10g体重的剂量在小鼠尾静脉注射稀释3倍的印度墨汁，1min和10min后，分别从小鼠的眼眶静脉丛取血20μL，用2.0mL的0.01％Na₂CO₃溶液稀释摇匀，以Na₂CO₃溶液作空白对照，在600nm波长处测吸光度值(A₁、A₁₀)。计算碳粒廓清指数K，K＝(logA_1-logA₁₀)/(t_10－t₁)。

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力测定，昆明小鼠末次给药后禁食12h，不禁水，每鼠腹腔注射2％鸡红细胞悬液1mL，30min后脱颈椎处死。经腹腔注入生理盐水2mL，轻揉腹部1min。然后，各吸2mL腹腔洗液，分滴于2片载玻片上，于37℃培养箱温育30min。孵毕，用生理盐水漂洗，吹干，以丙酮：甲醇(v/v,1:1)溶液固定，用4％Giemsa-磷酸缓冲液(v/v)染色，蒸馏水漂洗晾干。油镜下阅片计数，计算吞噬百分率和吞噬指数。

吞噬百分率(％)＝[吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/计数的巨噬细胞数]×100％；

吞噬指数＝被吞噬的鸡红细胞总数/计数的巨噬细胞数。

3.SLIM404对免疫低下小鼠体液免疫功能影响

昆明小鼠于首次灌胃后第26d，每只小鼠腹腔注射0.2mL10％(v/v)SRBC致敏离血清，免疫4d后，第30d末次给药后禁食不禁水12h，分别摘眼球，收集血液，4℃冰箱内放置2h后，3500r/min离心15min，分离血清，按血清:生理盐水＝1:100(v/v)稀释后，测定血清溶血素含量，计算绵羊红细胞半数溶血值(HC50)。

HC50＝(样品的吸收度值/SRBC半数溶血时的吸收度值)×稀释倍数

小鼠抗体生成细胞测定，小鼠被采血后，迅速摘取其脾脏，用冰生理盐水冲洗干净，配制成15mg/mL的脾细胞悬液。在试管中依次加入2％绵羊红细胞悬液和10％豚鼠血清各0.5mL。另设不加补体的空白对照管，于37℃水浴1h，3000r/min离心10min，取其上清液于413nm处测定A_OD。

4.SLIM404对免疫低下小鼠细胞免疫功能的影响

末次给药后禁食不禁水12h，脱颈椎处死昆明小鼠。无菌取脾，制备脾细胞悬液，以RPMI-1640完全培养基调整细胞浓度为5×10⁶个/mL。将脾细胞悬液分2孔加入24孔培养板，每孔lmL。其中，一孔加ConA液(终浓度为2.5ug/mL)，另一孔作为对照，温度为37℃，于5％CO₂培养箱内培养68h，再加入MTT继续培养4h，以酸化异丙醇溶解活细水溶性紫色结晶，570nm处测定A值。淋巴细胞的增殖能力(ΔA)＝A_ConA-A_对照。

同批昆明小鼠，同2.3.3法，免疫4d后，再次给药后用0.2mL10％(v/v)SRBC，于末次给药后，将小鼠禁食不禁水24h后，在同一部位将左后及右后足剪下称重，计算两只后足的重量差

5.小鼠血清、肝、肾和脾组织匀浆中抗氧化物酶活等指标测定

小鼠被迷晕后摘眼球取血，5000r/min离心5min，取血清放于-20℃备用，同时取出小鼠肝、肾、脾组织，分别加0.9％的生理盐水，制备10％的组织匀浆(m/v)，5000rpm离心10min取上清液。室温(25℃)下，按照试剂盒说明书进行操作，测定超氧化物歧化酶(SOD)活力、GSH-PX酶活、丙二醛(MDA)含量。

(6)药理实验结果：

1.SLIM404对小鼠免疫器官指数和体重的影响

与正常对照组相比，注射环磷酰胺的模型对照组小鼠的免疫器官指数显著下降(p<0.01)，饲养过程中小鼠皮毛稀疏、无光泽，小鼠体重明显低于正常组，说明环磷酰胺注射液可造成小鼠的免疫器官萎缩，抑制小鼠体重增加，成功地建立了小鼠的免疫低下模型。

如表1所述，与模型组小鼠相比，各剂量组小鼠毛色光滑，脾、胸腺/体重和体重比值均有不同程度的提高，其中高剂量SLIM404组的脏器指数提高了11.76％和39.8％，具有显著差异(p<0.05)，表明一定剂量的粒毛盘菌黑色素对免疫机能低下模型小鼠的免疫器官重量有促进作用，能有效恢复胸腺器官的发育。

表1.SLIM404对小鼠免疫器官指数和体重的影响

注：^#P<0.05,与模型组相比,^##P<0.01,与模型组相比；^*P<0.05，与正常对照组相比；^**P<0.01,与正常对照组相比.

2.SLIM404对小鼠非特异性免疫影响

与正常组小鼠相比，环磷酰胺模型组小鼠碳廓清指数降低了38.95％。与模型组相比，各剂量药物组均可提小鼠高碳廓清指数，揭示一定剂量的SLIM404能显著促进免疫低下模型小鼠的非特异性吞噬功能。

如表2所示，模型组小鼠腹腔巨噬细胞率和吞噬指数分别为21.33±0.98和0.502±0.03，均极显著低于正常小鼠的水平(p<0.01)，说明模型组小鼠的非特异性免疫功能低下。各给药组均可不同程度地升高环磷酰胺致免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数。

表2.SLIM404对小鼠非特异性免疫影响

注：^#P<0.05,与正常组相比；^##P<0.01,与正常组相比；^*P<0.05，与模型对照组相比；^**P<0.01,与模型对照组相比.

3.SLIM404对小鼠体液免疫的影响

与正常组小鼠相比，环磷酰胺模型组小鼠HC₅₀降低了12.2％，表明小鼠体液免疫机能下降。与模型组相比，高剂量SLIM404组可显著提高小鼠HC₅₀值(p<0.05)。表明粒毛盘菌黑色素具有促进B细胞分裂增殖和分化及分泌绵羊红细胞抗体的作用。

如表3所示，抗体生成细胞由正常值0.67降低至模型组的0.48，表明环磷酰胺模型组小鼠抗体生成细胞含量明显下降，与正常组相比差异极显著(p<0.01)。各剂量SLIM404组均能够不同程度地促进小鼠抗体生成细胞，揭示粒毛盘菌黑色素对小鼠B细胞介导的体液免疫作用具有增强作用。

表3.SLIM404对小鼠体液免疫的影响

注：^#P<0.05,与正常组相比；^##P<0.01,与正常组相比；^*P<0.05，与模型对照组相比；^**P<0.01，与模型对照组相比。

4.SLIM404对小鼠细胞免疫的影响

腹腔注射环磷酰胺后，模型小鼠淋巴细胞转化率为0.054±0.001，均极显著低于正常小鼠的水平(p<0.01)，说明模型组小鼠的淋巴细胞转化率较低。各给药组小鼠淋巴细胞转化率均可不同程度地提高，说明SLIM404可提高免疫低下小鼠的细胞免疫水平。

如表4所述，与模型组小鼠相比，正常组小鼠的足跖重量显著升高(p<0.05)，SLIM404的低、高剂量组足跖增重值分别增加了(％)7.18、42.87，表明SLIM404对T细胞介导的免疫应答反应具有促进作用。

表4.SLIM404对小鼠细胞免疫的影响

注：^#P<0.05,与正常组相比；^##P<0.01,与正常组相比；^*P<0.05,与模型对照组相比；^**P<0.01,与模型对照组相比.

5.SLIM404对小鼠体内各组织内抗氧化酶活性的影响

如表5所示，与正常组小鼠细胞，模型组小鼠血清、肾脏、肝脏组织中SOD和GSH-PX的活性显著降低(p<0.01)，MDA含量显著增加(p<0.01)，表明环磷酰胺致小鼠免疫可抑制小鼠体内抗氧化酶活降低，增加MDA含量。

如表5所述，与模型组小鼠细胞，各剂量给药组小鼠各组织中SOD和GSH-PX酶活均显著增强，MDA含量显著降低(p<0.01)，揭示SLIM404可能通过提高免疫低下模型小鼠机体的抗氧化酶活性，清除自由基含量，恢复机体内氧化-抗氧化内稳态，从而有利于提高机体的免疫力。综上所述，SLIM404可能通过提高小鼠体内抗氧化酶系统的活性，清除免疫低下机体内过量的自由基和脂质过氧化物，从而降低过氧化物对免疫器官等免疫系统的损害，增强小鼠自身抵抗力，这可能是粒毛盘菌黑色素正向调节小鼠免疫力的途径之一。

表5.SLIM404对小鼠SOD、GSH-PX酶活和MDA含量的影响

注：^#P<0.05,与正常组相比；^##P<0.01,与正常组相比；^*P<0.05,与模型对照组相比；^**P<0.01,与模型对照组相比.

以上结果表明SLIM404具有正向免疫调节作用，其可能是因为该真菌黑色素结构中含有抗原决定簇(antigenicdeterminants)，产生免疫原性，诱导抗体反应(Abresponse)；或通过激活旁路补体途径拮抗环磷酰胺的毒力从而保护机体；或通过恢复小鼠机体的抗氧化酶活性，清除自由基含量，增强机体拮抗环磷酰胺所致免疫低下反应，增强小鼠自身免疫功能。

实施例2

粒毛盘菌水溶性黑色素制剂的加工

1、片剂加工

将200-400g的粒毛盘菌黑色素与药用辅料稀释剂200-250g、助流剂20-60g混匀后，与250-500mL乙醇混合均匀制得软材，软材过筛得到湿颗粒，干燥后整粒，最后加入润滑剂5-10g混匀后压片，制成1000片片剂。所述药用辅料稀释剂选用糊精或干淀粉；所述助流剂采用滑石粉或微粉硅胶或微晶纤维素；所述润滑剂采用硬脂酸镁或硬脂酸锌。

本实施例推荐的片剂加工的优选例为：取过80-100目筛的上述粒毛盘菌黑色素500g、稀释剂糊精250g、助流剂滑石粉60g，混合均匀后加500mL乙醇混合均匀制得软材，软材过筛得到湿颗粒，干燥后整粒，最后加入润滑剂硬脂酸镁15g混匀后压片，制成1000片，片重0.8g，黑色素含量0.3g/片。

2、胶囊剂加工

将药用辅料稀释剂200-300g、助流剂50-70g、润湿剂2-6g混匀后与300-600g的上述粒毛盘菌黑色素混合均匀，装1#空心胶囊，制得胶囊剂1000粒。所述药用辅料稀释剂选用糊精或干淀粉；所述助流剂采用滑石粉或微粉硅胶或微晶纤维素；所述润湿剂采用十二烷基硫酸钠或者磺基丁二酸二辛酯。

本实施例推荐的胶囊剂加工优选例为：取稀释剂干淀粉250g，助流剂滑石粉50g，润湿剂十二烷基硫酸钠5g混合均匀与500g上述粒毛盘菌黑色素混合均匀后装1#空心胶囊1000粒，粒重为0.805g，黑色素含量0.5g/粒。

本发明使用粒毛盘菌YM404水溶性黑色素及其作为免疫调节药物的应用，所制备的药物无毒副作用，且制备方法简单经济。

实施例3：

先按如下条件和方式制备获得粒毛盘菌胞内黑色素：将粒毛盘菌YM404接种于100L发酵罐，培养基配方为：酪氨酸浓度为1.2mmol/L，铜离子浓度为1.2mmol/L，蔗糖质量为30g/L，酵母膏5.0g/L，蛋白胨5.0g/L，pH8.0，装料系数体积比为0.7，接种量为7％(体积比)，培养温度为25℃，通气量为1.2L/min，搅拌转速为180r/min，发酵时间为15d；将发酵液抽滤，收集菌丝体，60℃烘干，按菌丝体的质量(g)与浓度为1.5mol/L的氢氧化钠(mL)比为1:150混匀，30℃水浴浸提12h，抽滤得浸提液；用1mol/LHCl调节上述浸提液pH值为2，静置20h，得到黑色素悬浮液；然后将上述黑色素悬浮液离心，弃上清，所得到的沉淀经去离子水洗涤至pH值为7后真空冷冻干燥即得黑色素粗品；黑色素粗品经7mol/LHCl于100℃酸解3h，以除去与黑色素结合的蛋白质及碳水化合物。酸解后，沉淀经双蒸水洗涤至上清液pH值为7时重新溶于1mol/LNH₃·H₂O溶液，旋转蒸发仪蒸去NH₃至溶液pH为中性后，依次经乙酸乙酯、氯仿、无水乙醇萃取，以除去脂类物质，萃取后除去有机相，水相调pH值为2，5000r/min离心15min，沉淀经去离子水反复洗涤至上清液Cl^–定性检测为阴性后，真空冷冻干燥即得粒毛盘菌YM404胞内黑色素。

将90mL吡啶加入附有冷凝管、温度计的250mL三颈瓶中，用电磁加热搅拌器搅拌，同时缓慢加入三氧化硫-吡啶2-3.0g。加热至90℃，再加入通过上述方法得到的LIM404粉末0.5g，恒温搅拌1h，冷却至室温。反应液用3mol·L-1的NaOH溶液调至中性，静置24h。自来水和蒸馏水分别透析2d，过滤，冷冻干燥，得硫酸酯化黑色素SLIM404。

然后将上述水溶性粒毛盘菌黑色素用质量百分浓度为0.9％的生理盐水分别配制成50mg/mL、200mg/mL的水溶液，给药体积为0.2mL/只。

将上述各剂量的水溶性粒毛盘菌黑色素进行小鼠免疫调节作用药理实验，所采用的方式步骤和其他条件均与实施例1中相同，也都得到了与实施例1中类似的结果。

上述实施例的实验说明，粒毛盘菌YM404胞内黑色素经三氧化硫-吡啶修饰后得到的水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404具有显著的免疫调节功能，且无毒副作用，其制备方法简单经济，故可将该水溶性粒毛盘菌黑色素，按药剂学的常规制备方法，将有效量的水溶性粒毛盘菌黑色素与适量的药用辅料混合加工制备成口服片剂或胶囊剂型的免疫调节药物。

可以知道，上述实施例仅为了说明发明原理而采用的示例性实施方式，然而本发明不仅限于此，本领域技术人员在不脱离本发明实质情况下，可以做出各种改进和变更，这些改进和变更也属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404，其特征在于：该黑色素是粒毛盘菌YM404胞内黑色素，经三氧化硫-吡啶修饰后得到的水溶性粒毛盘菌黑色素，具有提高免疫功能的作用。

2.一种如权利要求1所述的水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404在提高免疫功能方面的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404提高免疫通过促进胸腺器官发育实现。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404提高免疫通过提高巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数实现。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404提高免疫通过增强B细胞介导的体液免疫实现。

6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404提高免疫通过促进T细胞介导的免疫应答反应实现。

7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404提高免疫通过提高体内抗氧化酶系统的活性，清除免疫低下机体内过量的自由基和脂质过氧化物实现。

8.一种药物，其特征在于：包括水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404。

9.权利要求8所述的药物在提高免疫功能方面的应用。

10.权利要求9所述的应用，其特征在于：该药物中水溶性粒毛盘菌黑色素SLIM404质量占药物总质量的35%以上。